技术领域
[0001] 本
发明属于
水产养殖技术领域，具体的说，涉及一种以植物蛋白高比例替代鱼粉的丝尾鳠人工配合饲料。
背景技术
[0002] 丝尾鳠被列为“
云南六大名鱼”之首，其价值更是不可估量。早些年，该鱼人工繁殖成功，并在湄公河流域，特别是在云南省广泛养殖，随着人工养殖丝尾鳠技术的逐渐成熟，丝尾鳠养殖规模逐渐扩大，近年来丝尾鳠养殖产量急剧增加。但目前对丝尾鳠的研究甚少，致使其开发和利用受到一定制约。有研究表明，丝尾鳠对
蛋白质的需要量相对较高(439.0--1441.2g kg )，大规模的养殖亟需提供充足的蛋白源饲料，膳食蛋白是水产配合饲料中最主要的成分，也是最昂贵的部分。饲料蛋白源短缺是世界饲料工业面临的严峻挑战之一，同时也严重困扰着我国水产饲料工业的稳步发展。
[0003] 在过去的几十年里，鱼粉作为水产动物最理想的蛋白质来源，随着
水产养殖业的快速发展，对鱼粉的需求不断增加，导致了这种宝贵饲料原料价格的快速上涨，而利用相对廉价的植物蛋白源部分替代鱼粉已经成为研究热点。一些植物蛋白如
豆粕、
发酵豆粕、小麦蛋白粉、玉米蛋白粉、大豆浓缩蛋白等作为鱼粉的替代品，已被广泛用于许多水产养殖动物的饲料中。然而，植物蛋白中因含有一定量的
抗营养因子，对动物消化，生长有一定的负作用。饲料中过多的植物蛋白源替代鱼粉时，会导致鱼类对养分的吸收和利用率较低、生长缓慢、体重减轻、体质下降、免疫
力降低、死亡率升高等问题。而单独使用一种植物蛋白替代鱼粉时，高水平替代都会造成养殖对象生长缓慢、饲料系数升高等一系列问题。
[0004] 因此，如何最大限度地充分开发利用好这些植物蛋白源，尤其是加强植物性原料的利用效率，是水产动物营养学家持续研究和关注的热点问题。
发明内容
[0005] 为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一种以植物蛋白高比例替代鱼粉的丝尾鳠人工配合饲料，通过添加适宜比例的精
氨酸以及复合植物蛋白的配合，降低了植物蛋白对鱼体的负作用，提高了丝尾鳠的生长并改善其肠道健康。为丝尾鳠的健康养殖，以及鱼粉节约型、环境友好型饲料的开发提供理论指导，以弥补
现有技术的不足。
[0006] 为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：
[0007] 所述的以植物蛋白高比例替代鱼粉的丝尾鳠人工配合饲料，其在于以复合植物蛋白替代鱼粉，并在饲料中添加精氨酸。
[0008] 进一步优选的，按重量百分比计，饲料的营养成分包括：
粗蛋白43.761～44.770％，粗脂肪8.835～9.142％，余下为
碳水化合物、粗
纤维、灰分和水分。
[0009] 进一步优选的，按重量百分比计，精氨酸的添加量为0.3-1.5％。
[0010] 进一步优选的，所述复合植物蛋白包括豆粕、发酵豆粕和小麦蛋白粉中的两种或多种。
[0011] 所述的丝尾鳠人工配合饲料，按重量百分比及计，包括鱼粉28～42％、豆粕6～12％、发酵豆粕9～17％、小麦蛋白粉3.7～8％、鱼油4.3～5.2％、卵磷脂1.5％、木薯
淀粉15％、微晶
纤维素1.8～7％、氯化胆
碱1％、α-淀粉6％、
磷酸二氢
钙1％、谷氨酸0.3～1.5％、
复合维生素1％、混合矿物质1％、精氨酸0.3～1.5％。
[0012] 进一步优选的，按重量百分比及计，包括鱼粉28％、豆粕12％、发酵豆粕17％、小麦蛋白粉8％、鱼油5.2％、卵磷脂1.5％、木薯淀粉15％、微晶纤维素1.8％、氯化胆碱1％、α-淀粉6％、磷酸二氢钙1％、谷氨酸0.6％、复合维生素1％、混合矿物质1％、精氨酸0.9％。
[0013] 所述的以植物蛋白高比例替代鱼粉的丝尾鳠人工配合饲料的制备方法，包括以下步骤：
[0014] 预先将配方比例的卵磷脂溶于鱼油，并混匀；
[0015] 2)将除鱼油、卵磷脂外的其他原料预先
粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入卵磷脂与鱼油的混合物充分混匀，加22％的水(按总混合物重量百分比计)并充分混匀；
[0016] 3)将步骤2)混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成大小为1.2-1.8mm左右的饲料颗粒，自然
风干，即得饲料成品。
[0017] 所述以植物蛋白高比例替代鱼粉的丝尾鳠人工配合饲料在提高丝尾鳠生长，抑制或减缓肠道组织结构的损伤中的应用。
[0018] 本发明的有益效果：
[0019] 本发明采用高比例的复合植物蛋白替代鱼粉，并将适量精氨酸添加入丝尾鳠的配合饲料中，对丝尾鳠的生长和饲料利用有明显的促进作用，还可以显著影响全鱼粗蛋白和粗脂肪含量及部分血液生化指标，促进丝尾鳠的蛋白沉积。此外，该饲料还具有改善丝尾鳠的肠道健康等功能。该发明将为丝尾鳠的健康养殖及其饲料开发提供理论指导。
附图说明
[0020] 图1是采用分段回归分析不同Arg添加水平对丝尾鳠特定生长率(SGR，％/d)的影响图。
[0021] 图2是植物性饲料中补充膳食Arg对丝尾鳠肠道组织结构的影响。
[0022] 图1中，由SGR估算膳食精氨酸添加量为0.8812％，回归方程(y1＝71x+2.388R2＝0.9834,y2＝-90x+3.8067R2＝0.9283)。
[0023] 图2中，饲喂I-VI组饲料的丝尾鳠中肠肠道组织结构图(×放大相应的倍数)。
具体实施方式
[0024] 为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选
实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。
[0025] 实施例1
[0026] 一种丝尾鳠人工配合饲料，按重量百分比及计，包括：鱼粉28％、豆粕12％、发酵豆粕17％、小麦蛋白粉8％、鱼油5.2％、卵磷脂1.5％、木薯淀粉15％、微晶纤维素1.8％、氯化胆碱1％、α-淀粉6％、磷酸二氢钙1％、谷氨酸0.6％、复合维生素1％、混合矿物质1％、精氨酸0.9％。
[0027] 其制备方法如下：
[0028] 1)预先将配方比例的卵磷脂溶于鱼油，并混匀；
[0029] 2)将除鱼油、卵磷脂外的其他原料预先粉碎并过60目筛，按配方准确称取，各种饲料成分按比重从小到大逐级混匀后，加入卵磷脂与鱼油的混合物充分混匀，后加22％的水(按总混合物重量百分比计)并充分混匀；
[0030] 3)将步骤2)混匀后的饲料原料放入自动制粒机中制成大小为1.5mm左右的饲料颗粒，自然风干，即得饲料成品。
[0031] 实施例2
[0032] 一种丝尾鳠人工配合饲料，按重量百分比及计，包括：鱼粉36％、豆粕8％、发酵豆粕11％、小麦蛋白粉4.5％、鱼油5％、卵磷脂1.5％、木薯淀粉15％、微晶纤维素7％、氯化胆碱1％、α-淀粉6％、磷酸二氢钙1％、谷氨酸0.9％、复合维生素1％、混合矿物质1％、精氨酸0.6％。
[0033] 其制备方法同实施例1。
[0034] 实施例3
[0035] 一种丝尾鳠人工配合饲料，按重量百分比及计，包括：鱼粉42％、豆粕6％、发酵豆粕9％、小麦蛋白粉3.7％、鱼油4.3％、卵磷脂1.5％、木薯淀粉15％、微晶纤维素7％、氯化胆碱1％、α-淀粉6％、磷酸二氢钙1％、谷氨酸1.2％、复合维生素1％、混合矿物质1％、精氨酸0.3％。
[0036] 其制备方法同实施例1。
[0037] 饲料效果分析
[0038] 养殖实验在云南农业大学动物科学技术学院水产研究室室内的
循环水养殖系统中进行的。丝尾鳠购自于普洱的昆明增源渔业科技有限公司(中国云南普洱)。450条试验鱼(6.40±0.06g)被随机分入18个养殖缸(100cm×50cm×50cm，长×宽×深)。
[0039] 将实施例1饲料配方用于养殖实验中，并根据精氨酸的不同添加量设计了6个处理组，三个网箱一组被随机分配到六个不同精氨酸水平的饮食处理组。设计精氨酸含量分别为0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5％六个梯度的饲料，实测饲料中精氨酸含量分别为1.806％，2.091％，2.349％，2.654％，2.935％和3.242％，编号为I～VI，饲料配方如表1所示(数值为百分比)。其氨基酸组成如表2所示。在8周的饲养期内，每天人工投饵两次，同时记录好饲料投喂量，称重记录生长情况、观察记录鱼的健康状况及环境变化等，在实验过程中，定时更换水，定期检测水质，试验期间水温26-30.0℃，氨氮<0.20mg/L，亚
硝酸盐<0.01mg/L，溶
氧>
7.0mg/L，pH＝7.4-7.8。记录每日采食量、水温、
摄食及死亡情况，并且标明死亡原因。
[0040] 表1试验饲料配方及营养成分
[0041]
[0042] 注：1美国白鱼粉,美国进口,粗蛋白质含量72.37％、粗脂肪含量11.22％
[0043] 2矿物质预混(mg/kg饲料)：氟化钠，1；碘化
钾，0.4；六水氯化钴，25；五水
硫酸铜，5.0；硫酸亚
铁，40；硫酸锌，25；硫酸锰，30；七水
硫酸镁，600；磷酸二氢钙，1500；
氯化钠，50；
沸石粉，7725
[0044] 3维生素预混(mg/kg饲料)：维生素B1，25；维生素B2，45；维生素B6，20；维生素B12，0.1；维生素K3，10；肌醇，800；泛酸，60；烟酸，200；叶酸，20；
生物素，1.20；
醋酸视黄醇，32；
维生素H3，5；α-生育酚，120；
抗坏血酸，2000；乙氧喹，150
[0045] 表2实验饲料的氨基酸组成(％干物质)
[0046]
[0047]
[0048] EAA：必需氨基酸；NEAA：非必须氨基酸
[0049] 养殖试验结束后，对每个试验组所有鱼进行称重，计算鱼的生长和饲料利用率见表3，每个网箱随机选取4尾鱼储存在-20℃
冰箱中用于体成分分析。另外随机从每个重复中选取6尾鱼，测量个体体重、体长，并用于
血液样本的采集，血液利用尾静脉
采血法
抽取，静置离心分离后，取上层血清存于-20℃，用于血清生化及抗氧化测定。采血后的试验鱼进行屠宰，称量肝脏重量和内脏重量，计算肝体指数和脏体指数，同时采集肠道组织样本用于
组织切片观察，尽量剔除小肠外壁脂肪，取出中肠(幽
门盲囊后5cm处)分成小
块(1cm×1cm)固定于Bouin's液中，用于后续切片的制作。
[0050] 表3植物性饲料中添加不同比例的Arg对丝尾鳠生长性能的影响
[0051]
[0052] 注：数据为平均值±标准误(n＝3)；同排数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。
[0053] 由表3的生长指标可以看出，植物性饲料中添加Arg对丝尾鳠的特定生长率、采食量和饲料系数有显著影响。在膳食IV组，出现最佳的特定生长率、采食量和饲料利用率。说明在植物性饲料中添加适宜的Arg能改善丝尾鳠的生长及饲料利用情况。以饲料中所添加的精氨酸含量(百分比)为自变量，丝尾鳠特定生长率为因变量，通过分段回归分析得到，在
基础饲料(I组)中添加0.8812％(干物质)Arg时，丝尾鳠表现出最佳的特定生长率(图1)。说明饲料中添加适量Arg可以提高丝尾鳠的生长性能，在基础日粮基础上以添加0.8812％(干物质)Arg时效果最佳。
[0054] 表4植物性饲料中添加不同比例的Arg对丝尾鳠鱼体近似成分的影响(％湿重)[0055]
[0056] 注：数据为平均值±标准误(n＝3)；同排数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)。
[0057] 由表4的全鱼体成分分析可以得出，Arg对全鱼水分和粗灰分无显著影响，但Arg可显著影响全鱼粗蛋白和粗脂肪含量，适量的添加Arg可提高全鱼粗蛋白含量，且呈现出先升高后降低的趋势，最大值为IV-V组。说明，饲料中添加适量的Arg可以促进蛋白质的沉积和在一定程度上影响脂肪的代谢。
[0058] 表5植物性饲料中添加不同比例的Arg对丝尾鳠血液生化指标的影响
[0059]
[0060] 注：数据为平均值±标准误(n＝3)；同排数据中，无相同小写字母标注者表示相互间差异显著(P<0.05)
[0061] 由表5，丝尾鳠血液生化指标可以看出，日粮精氨酸水平对鱼血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CH)和钙含量有显著影响(P<0.05)，但血清磷、
血浆谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和碱性磷酸酶(AKP)在任意两个日粮处理间均无显著差异。且免疫指标(总蛋白和
白蛋白)不受膳食添加Arg的影响。随着日粮中Arg含量的增加，血清过氧化氢酶明显降低(P<0.05)。同样的，随着精氨酸水平的升高，血清尿素氮(BUN)和血氨(BA)整体呈类似的下降趋势(P<0.05)。
[0062] 由图2可以看出，各实验组丝尾鳠中肠健康状况随着膳食中精氨酸水平的增加，整体来说先变好后变差，具体表现为：各组中肠组织结构未发生显著病变，黏膜皱壁清晰，肠腔至肠壁方向可清晰观察到黏膜层、黏膜下层、肌层以及浆膜层，肠壁肌层厚度均匀。另一方面，I中肠绒毛形态有小量破损，杯状细胞较多。II、III、IV和V组明显优于I组，其中IV组最佳，其中肠绒毛形态完整，整齐伸入肠腔内，无破损、脱落现象，杯状细胞正常。VI组又出现肠道黏膜中杯状细胞开始增多，小部分肠道褶皱有破裂迹象，固有层变宽，肠道黏膜皱壁弯曲伸入肠腔内，皱壁间质宽度略有增加。六组丝尾鳠中肠肠道整体的完整和健康程度评估为IVI。
[0063] 综合，可知植物蛋白高比例替代鱼粉对丝尾鳠生长和肠道健康有一定的负作用，在添加Arg后减缓了这种负作用，特别是饲料中Arg的添加量在0.9％左右时，丝尾鳠的生长、体蛋白沉积及肠道健康都得到了显著提高。该发明将为丝尾鳠的健康养殖及其饲料开发提供理论指导。
[0064] 最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明
权利要求书所限定的范围。
