技术领域
[0001] 本
发明涉及
微生物的应用技术领域，特别是涉及芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02在草莓生产中的应用。
背景技术
[0002] 草莓是蔷薇科多年生的草本
植物，富含营养物质，且口感酸甜，因此受到人们的喜欢。草莓凭借其易繁殖、栽培周期短、收益高等优点，我国各个地方广泛开展草莓种植业，尤其是在山东、河北、新疆等北方地区。近年来，我国草莓的产量已在世界上处于领先地位。种植过程中，为了增加产量，果农大量的使用甚至滥用化学
肥料，虽然实现了短期的经济效益，但从长远来看，不但加剧了
土壤酸化板结和土壤的肥
力下降，而且也造成资源的浪费和环境的破坏，对食品的安全也有很大的隐患。另外，用生物
农药替代
化学农药更加绿色有效，是未来肥料的主要发展方向。因此，研究和开发高效绿色安全的生物制剂和微
生物肥料是目前最有效的绿色生物通道，尤其对于像我们国家这样的农业大国显得愈发重要。
[0003] 芽孢杆菌是一种能够促进植物生长的细菌，提高了植物生长特性，包括植株高度，
幼苗活力，
种子萌发，叶面积，鲜重和干重以及产量和营养成分等。芽孢杆菌的促生机理大致可归为直接促生和间接促生。直接促生是通过合成一些促进植物生长的
激素(如生长素、细胞分裂素、赤霉素、乙烯和脱落酸，等)，将土壤中呈无效态的元素转
化成有效态，进而帮助植物吸收利用该元素，即直接促生作用于植物本身，促进植物的生长发育；间接促生是通过抑制病原体或减缓植物病害对植物生长不利的影响。芽孢杆菌通过调节某些宏量、微量营养素吸收，和调节植物微量营养素的可利用性及摄取量来促进植物生长，从而起生物促生剂的作用；另一方面，芽孢杆菌通过竞争作用、产生抗菌因子、诱导植物产生系统抗性等多种途径达到抑制植物病害作用，从而起
生物防治剂的作用；再者，芽孢杆菌调节植物对胁迫耐性，提高肥料的效率，从而充当
生物防治剂进行病害控制和
生物修复。芽孢杆菌凭借其是在促生肥效、促进植物生长等特点，加强对植物的促生作用效果。因此，开发芽孢杆菌制剂在农业作物上具有良好的应用前景。
发明内容
[0004] 本发明的目的是针对高效益
水果草莓种植过程中化学肥料长期过量施用对环境造成严重的污染，提供芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02在草莓生产中的应用，该应用通过蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01
可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂实现。应用中的菌剂具有促进草莓生长、增加草莓产量和减少常见草莓病害
白粉病的特点，在
温室草莓栽培和露天草莓栽培中对草莓促生增产有显著效果。
[0005] 本发明目的通过以下技术方案实现：
[0006] 芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02在草莓生产中的应用，该菌株包括蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02，皆由山东省科学院生态研究所分离获得并保存。
[0007] 所述蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO.10477，保藏日期2015年1月30日,该菌株已在
申请号为201510081973.7的申请文件中记载；所述菌株巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO.10478，保藏日期2015年1月30日，该菌株已在申请号为201510082296.0的申请文件中记载。
[0008] 进一步的，该应用具体为采用含有蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的微生物菌剂用于草莓的生产中。
[0009] 进一步的，上述微生物菌剂在工厂化草莓育苗中的应用。
[0010] 进一步的，上述的微生物菌剂在草莓温室栽培中的应用。
[0011] 进一步的，上述的微生物菌剂在草莓露天栽培中的应用。
[0012] 上述的微生物菌剂的制备方法为：具体为蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01菌剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02菌剂的制备，由以下步骤进行：
[0013] (1)将超低温
冰箱保存的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02分别划线接种到固体LB培养基上，30℃±1℃避光过夜培养，挑取单菌落接入液体LB培养基中，30℃±1℃条件下培养至对数生长期，OD值为0.6～0.8，种子液浓度不低于1.0×108cfu/mL，获得待接入
发酵培养基使用的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02种子液；
[0014] (2)蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵培养基配方：玉米粉2％，
豆粕粉1％，
酵母粉0.3％，CaCO3 0.5％，MgSO4˙7H2O 0.05％，K2HPO˙3H2O 0.3％，KH2PO4 0.2％，FeSO4˙7H2O 0.0008％(皆为
质量百分比)，余量为水，pH7.0～7.5，该发酵培养基在0.1MPa条件下，连同
发酵罐一起121℃高压灭菌60min，待减压冷却到常压常温条件下备用，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01种子液接种到发酵培养基中，保证发酵培养体系中菌体初始浓度不低于1.0×107cfu/mL，发酵条件为:培养
温度30℃±1℃，转速200r/min，发酵时间为
24～36h，发酵液pH维持在7.0～7.2，溶
氧量不低于20％，保持通气量5.5～6.5m3/小时，罐压保持0.05～0.1KPa，产孢率达到90％时，发酵结束，得到蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵液，此时活菌数量不低8.0×109cfu/mL；
[0015] 巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵培养基配方：玉米粉2％，豆粕粉1％，酵母粉0.3％，CaCl2 0.2％，MgSO4˙7H2O 0.05％，K2HPO˙3H2O 0.3％，KH2PO4 0.2％，FeSO4˙7H2O 0.0008％(皆为质量百分比)，余量为水，pH7.2～7.5，在0.1MPa条件下，连同发酵罐一起121℃高压灭菌60min，待减压冷却到常压常温条件下备用，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02种子液接种到发酵培养基中，保证发酵培养体系中菌体初7
始浓度不低于1.0×10cfu/mL，发酵条件为:培养温度30℃±1℃，转速200r/min，发酵时间为36～48h，发酵液pH维持在7.5～8.0，溶氧量20～22％，保持通气量5.5～6.5m3/小时，罐压保持0.05～0.1KPa，产孢率达到85％时，发酵结束，得到巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵液，此时活菌数量不低于6.0×109cfu/mL；
[0016] (3)将步骤(2)得到的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵液、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵液，分别按照20％(质量体积比)添加
硅藻土或
高岭土，充分混匀，进行
喷雾干燥，分别得到蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的发酵液的粉状预制剂，各预制剂中活菌数量不低于5.0×1010cfu/g。
[0017] 进一步的，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01菌剂具体为蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂，制备方法如下：取90～94份蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01粉状预制剂，1～2份有机硅BD-3077，1～2份羧甲基
纤维素钠，1～2份壳聚糖，2～3份木质素磺酸钠和添加1份甘
氨酸，充分混合，通过气流
粉碎机，混合物粉碎至Φ＝45μm以下，即获取质芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01的可湿性粉剂，可湿性粉剂中活菌
10
数量不低于5.0×10 cfu/g；
[0018] 进一步的，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02菌剂具体为巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂，制备方法如下：取91～94份巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02粉状预制剂，1～2份有机硅BD-3077，1～1.5份羧甲基
纤维素钠，1～1.5份壳聚糖，2～2.5份木质素磺酸钠和添加1～1.5份甘氨酸，充分混合，通过气流粉碎机，混合物粉碎至Φ＝45μm以下，即获取巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的可湿性粉剂，可湿性粉剂中活菌数量不低于4.0×1010cfu/g。
[0019] 进一步的，上述得到的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂在草莓生产中的应用。
[0020] 作为优选，在工厂化草莓育苗中使用时，将巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂以10g/L添加到营养基质中获得栽培基质，即可获得理想效果。
[0021] 作为优选，在草莓温室移栽时，以蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂3kg/亩进行应用，即可获得理想效果。
[0022] 作为优选，在草莓露天栽培中时，以巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂3kg/亩进行应用，即可获得理想效果。
[0023] 本发明的有益效果：
[0024] 本发明提供了蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂的制备方法，且制备方法简单，易操作，且保存方法简单。
[0025] 本应用中的菌剂在草莓生产中促生增产的应用，为生物源肥料的开发提供新的应用思路。
[0026] 本发明的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂能明显促进草莓生长，尤其蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂对工厂化育苗时期的草莓促生效果显著，根冠比有显著增长，分别比空白对照增加30.93％和21.90％；草莓种植直接施用该方法可增产15～25％，该方法结合肥料减施应用在草莓种植施用该方法可增产22～28％；该方法可减少草莓主要病害白粉病的发病率；
[0027] 温室移栽时以蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂2kg/亩结合草莓专用肥减施(专用肥用量减为10％进行应用，效果最佳，产量增加25％，露天移栽时以巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂2kg/亩结合草莓专用肥减施(专用肥用量减为10％进行应用，效果最佳，产量增加28％。
具体实施方式
[0028] 为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明
实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
[0029] 实施例1应用在草莓生产中的芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02的菌剂制备
[0030] 芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02在草莓生产中的应用，应用涉及蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂的制备，由以下步骤进行：
[0031] (1)将超低温冰箱保存的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02分别划线接种到固体LB培养基上，30℃±1℃避光过夜培养，挑取单菌落接入液体LB培养基中，30℃±1℃条件下培养至对数生长期，OD值为0.6～0.8，种子液浓度不低于1.0×108cfu/mL，分别获得待接入发酵培养基使用的种子液；
[0032] (2)蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵培养基配方：玉米粉2％，豆粕粉1％，酵母粉0.3％，CaCO3 0.5％，MgSO4˙7H2O 0.05％，K2HPO˙3H2O 0.3％，KH2PO4 0.2％，FeSO4˙7H2O 0.0008％(皆为质量百分比)，余量为水，pH7.0～7.5，该发酵培养基在0.1MPa条件下，连同发酵罐一起121℃高压灭菌60min，待减压冷却到常压常温条件下备用，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01种子液接种到发酵培养基中，保证发酵培养体系中菌体初始浓度不低于1.0×107cfu/mL，发酵条件为:培养温度30℃±1℃，转速200r/min，发酵时间为
24～36h，发酵液pH维持在7.0～7.2，溶氧量不低于20％，保持通气量5.5～6.5m3/小时，罐压保持0.05～0.1KPa，产孢率达到90％时，发酵结束，得到蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵液，此时活菌数量不低于8.0×109cfu/mL；
[0033] 巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵培养基配方：玉米粉2％，豆粕粉1％，酵母粉0.3％，CaCl2 0.2％，MgSO4˙7H2O 0.05％，K2HPO˙3H2O 0.3％，KH2PO4 0.2％，FeSO4˙7H2O 0.0008％(皆为质量百分比)，余量为水，pH7.2～7.5，在0.1MPa条件下，连同发酵罐一起121℃高压灭菌60min，待减压冷却到常压常温条件下备用，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02种子液接种到发酵培养基中，保证发酵培养体系中菌体初始浓度不低于1.0×107cfu/mL，发酵条件为:培养温度30℃±1℃，转速200r/min，发酵时间为36～48h，发酵液pH维持在7.5～8.0，溶氧量20～22％，保持通气量5.5～6.5m3/小时，罐压保持0.05～0.1KPa，产孢率达到85％时，发酵结束，得到巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵液，此时活菌数量不低于6.0×109cfu/mL；
[0034] (3)将步骤(2)得到的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01发酵液、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵液，分别按照20％(质量体积比)添加
硅藻土或高岭土，充分混匀，进行喷雾干燥，分别得到蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的发酵液的粉状预制剂，各预制剂中活菌数量不低于5.0×1010cfu/g；
[0035] (4)蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01的可湿性粉剂的制备方法为，取90～94份骤(3)获得的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂，1～2份有机硅BD-
3077，1～2份
羧甲基纤维素钠，1～2份壳聚糖，2～3份木质素磺酸钠和添加1份甘氨酸，充分混合，通过气流粉碎机，混合物粉碎至Φ＝45μm以下，即获取质芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01的可湿性粉剂，可湿性粉剂中活菌数量不低于5.0×1010cfu/g；巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的可湿性粉剂的制备方法为，取91～94份骤(3)获得的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02粉状预制剂，1～2份有机硅BD-3077，1～1.5份羧甲基纤维素钠，1～1.5份壳聚糖，2～2.5份木质素磺酸钠和添加1～1.5份甘氨酸，充分混合，通过气流粉碎机，混合物粉碎至Φ＝45μm以下，即获取巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的可湿性粉剂，可湿性粉剂中活菌数量不低于4.0×1010cfu/g。
[0036] 以下实施例2、3、4中所述复合芽孢杆菌菌剂均为实施例1所制得；所述产品的百分含量均为质量/体积百分比。
[0037] 实施例2菌剂在工厂化草莓育苗中的应用
[0038] 芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02的菌剂在工厂化草莓育苗中的应用，由以下步骤进行：
[0039] (1)分别将蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂按10g/L添加到育苗基质中，充分混匀后获得栽培基质Ⅰ(含蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂)和栽培基质Ⅱ(含巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂)，按照常规方法
播种并常规管理星都2号，直接使用育苗基质(该育苗基质的配方：皮德曼公司生产的育苗基质的配方：有机质含量≥45％，
腐殖酸含量≥15％，PH值：5.5-6.8，游离水含量≤20％)充当栽培基质的星都2号栽培组为阴性对照，使用栽培基质中添加
复合肥(过
磷酸钙50kg/亩，氯化
钾50kg/亩)的星都2号栽培组为阳性对照(使用量为150g/m2)，每组处理60株，重复3遍，进入三叶期后观察统计茎叶干重、根系干重和根冠比。试验结果见表1。
[0040] 根冠比＝根系干重(g)/茎叶干重(g)
[0041] 表1菌剂在草莓工厂化育苗中的促生作用
[0042]
[0043] 结果显示，相较空白对照，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的根冠比有显著增长，分别比空白对照增加30.93％和21.90％；另外，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01组对根冠比的促进效果明显优于使用复合肥(过磷酸钙50kg/亩，
氯化钾50kg/亩)的阳性对照，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02组对根冠比的促进效果明接近使用复合肥(过磷酸钙50kg/亩，氯化钾
50kg/亩)的阳性对照。这表明蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02能够明显促进草莓根系生长，提高根冠比，从而提高草莓幼苗质量，且蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01促生效果最佳。这表明蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01菌剂在工厂化育苗有很好的促进植物生长的效果。
[0044] (2)三叶期后，将栽培基质I(含蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂)、栽培基质II(含巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂)和阴性对照组的栽培基质进行有效磷和有效钾含量的检测。有效磷检测采用0.5M
碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法和有效钾检测采用NH4OAc浸提-火焰光度计法。上述有效氮、有效磷和有效钾含量的检测方法参考《土壤农化分析与环境监测》(杨剑虹，王成林，代亨林编著，中国大地出版社，2008版)。试验结果见表2。
[0045] 表2菌剂对栽培基质中有效磷和有效钾含量的影响
[0046]处理 有效磷(mg/kg) 有效钾(mg/kg)
栽培基质I(蜡质芽孢杆菌BCJB01) 217.11±2.31 888.22±2.22
栽培基质II(巨大芽孢杆菌BMJBN02) 230.31±2.67 844.09±1.45
空白对照 106.21±3.54 110.32±2.31
[0047] 结果显示，相较空白对照，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的草莓根系土壤中的有效磷和有效钾含量均提升显著，这表明用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02菌剂能够通过提升根系土壤中有效磷和有效钾的含量，促进草莓生长；另外，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理的土壤中有效钾含量提升最高，有助于草莓苗期生长，使得工厂化育苗效果更好。
[0048] 实施例3菌剂在温室草莓中的应用(本发明产品与田间常见化肥对比)
[0049] 芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02的菌剂在温室草莓中的应用，经由以下步骤进行：
[0050] (1)试验对象为实施例2(1)长势一致的高产品种星都2号种苗，试验在山东省济南市孙家村温室进行，试验时间为2018年12月。
[0051] (2)试验共6个处理：温室土壤栽植前应彻底清除
杂草，实施例2(1)中蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理的星都1号幼苗充当种苗，分别设置蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理(可湿性粉剂3.0kg/亩)﹑巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理(可湿性粉剂3.0kg/亩)﹑草莓专用复合肥组(
有机肥5000kg/亩，过磷酸钙50.0kg/亩，氯化钾50.0kg/亩)﹑肥料减施Ⅰ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂2.0kg/亩)﹑肥料减施Ⅱ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂2.0kg/亩)，清水对照。采用撒施均匀后耕翻30-40厘米，土壤熟化，土地平整后按100厘米做畦(畦面宽80厘米，畦沟宽20厘米，畦高15厘米，畦长20米)，每处理0.05亩，3次重复，共18个小区面积0.9亩，各小区留2行保护行。缓苗定植后，田间栽培管理按当地最佳措施进行。试验期间平均温度25℃。在花茎期，每小区采用双对
角线固定5点取样，每点调查30株，记录调查对象的生长情况，是否有草莓白粉病发作及病级(病级调查后将发病病株除去)。待结实
收获后，统计座果率﹑平均粒果重量，统计产量并换算为亩产。上述试验结果见表3和表4。
[0052] 结实率(％)＝(果实数/开花数)×100％
[0053] (3)病害判断指标：参考《草莓病虫害诊断与防治原色图谱》(郝保春编写，金盾出版社，2012年出版)中对草莓主要病害草莓白粉病的病征描述为判断参考。
[0054] (4)草莓专用复合肥田间应用方法参考中华人民共和国行业标准(NY/T5105-2002)中规定的草莓生产技术规程方法和要求。
[0055] 表3菌剂对温室中花茎期草莓生长情况的影响
[0056]
[0057] 由表3可知，与清水对照相比，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的温室草莓田间长势良好，虽有白粉病病株，但发病率远远低于清水对照和专用复合肥处理组；蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理(3.0kg/亩)﹑巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理(3.0kg/亩)的防病效果优于肥料减施Ⅰ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂2.0kg/亩)和肥料减施Ⅱ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂2.0kg/亩)。这说明两种芽孢菌剂具有一定防治草莓白粉病的功能，并且安全性高。
[0058] 表4菌剂对温室草莓生产的作用
[0059]
[0060] 由表4可知，与清水对照相比，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的温室草莓的平均粒果重量和结实率均有提升，且明显优于或/等于专用复合肥处理的草莓；蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理(3.0kg/亩)的结实率优于肥料减施Ⅰ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂2.0kg/亩)，但在平均粒果重量和亩产量方面，略低于肥料减施Ⅰ组；巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理(3.0kg/亩)的结实率优于肥料减施Ⅱ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾
5.0kg/亩，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂2.0kg/亩)，但在平均粒果重量和亩产量方面，略低于肥料减施Ⅱ组；另外，施用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理组和肥料减施Ⅰ组的温室草莓在平均粒果重量，结实率和亩产量方面，均优于施用巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的草莓(巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理组和肥料减施Ⅱ组)。这说明两种芽孢菌剂具有促进草莓生长增产的功能，并且蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01菌剂在促进温室草莓生产中效果优于巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02菌剂。
[0061] 实施例4菌剂在露天草莓中的应用(本发明产品与田间常见化肥对比)
[0062] 芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02的菌剂在露天草莓中的应用，经由以下步骤进行：
[0063] (1)试验对象为实施例2(1)长势一致的高产品种星都2号种苗，试验在山东省济南市孙家村露天草莓地进行，试验时间为2019年3月～2019年6月。
[0064] (2)试验共6个处理：栽植前露天草莓地应彻底清除杂草，深翻土壤30～40cm，实施例2(1)中蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理的星都1号幼苗充当种苗，分别设置蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理(3.0kg/亩)﹑巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理(3.0kg/亩)﹑草莓专用复合肥组(有机肥5000kg/亩，过磷酸钙50.0kg/亩，氯化钾50.0kg/亩)﹑肥料减施Ⅰ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾
5.0kg/亩，蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01可湿性粉剂2.0kg/亩)﹑肥料减施Ⅱ组(有机肥500kg/亩，过磷酸钙5.0kg/亩，氯化钾5.0kg/亩，巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02可湿性粉剂3.0kg/亩)，清水对照。采用撒施均匀后耕翻30～40cm，土壤熟化，土地平整后按100cm做畦(畦面宽80cm，畦沟宽20cm，畦高15cm，畦长20m)，每处理
0.05亩，3次重复，共18个小区面积0.9亩，各小区留2行保护行。移栽时畦上
覆盖地膜进行保温，缓苗定植后，田间栽培管理按当地最佳措施进行。试验期间平均温度25℃。在花茎期，每小区采用双对角线固定5点取样，每点调查30株，记录调查对象的生长情况，是否有草莓白粉病发作及病级(病级调查后将发病病株除去)。待结实收获后，统计座果率﹑平均粒果重量，统计产量并换算为亩产。上述试验结果见表5和表6。
[0065] 结实率(％)＝(果实数/开花数)×100％
[0066] (3)病害判断指标：参考《草莓病虫害诊断与防治原色图谱》(郝保春编写，金盾出版社，2012年出版)中对草莓主要病害草莓白粉病的病征描述为判断参考。
[0067] (4)草莓专用复合肥田间应用方法参考中华人民共和国行业标准(NY/T5105-2002)中规定的草莓生产技术规程方法和要求。
[0068] 表5菌剂对露天草莓生长情况的影响
[0069]
[0070] 由表5可知，与清水对照相比，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的露天草莓田间长势良好，虽有白粉病病株，但发病率远远低于清水对照和专用复合肥处理组；蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理﹑巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理的发病率低于肥料减施Ⅰ组和肥料减施Ⅱ组。这说明两种芽孢菌剂在露天草莓种植中对草莓白粉病具有抑制的功能，并且效果明显。
[0071] 表6菌剂对露天草莓生产的作用
[0072]
[0073] 由表6可知，与清水对照相比，使用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的温室草莓的平均粒果重量和结实率均有提升，且明显优于或/等于专用复合肥处理的草莓；蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01处理的结实率优于肥料减施Ⅰ组，但在亩产量方面，略低于肥料减施Ⅰ组；巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02处理的草莓亩产量低于肥料减施Ⅱ组；另外，施用巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02的草莓在平均粒果重量，结实率和亩产量方面，均优于施用蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus BCJB01的草莓。这说明两种芽孢菌剂具有促进草莓生长增产的功能，并且巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02菌剂在露天草莓生产中效果最佳。
[0074] 尽管通过参考并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的
修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉
本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以
权利要求的保护范围为准。
