试验用小麦白粉病菌培养制备方法
专利汇可以提供试验用小麦白粉病菌培养制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种试验用小麦 白粉病 菌培养制备方法，旨在解决大量试验白粉病菌的培养与收集困难的技术问题。该试验用小麦白粉病菌收集方法包括以下步骤：（1）小麦白粉病菌株的分离纯化；（2）小麦白粉病菌株的扩繁；（3）小麦白粉病菌的收集。本发明的方法采用活体方式，小麦白粉菌可继续在小麦麦苗上定殖生长，菌株具有生长优势；收集菌株时无需通过人工剪苗离体培养，简便、省时、省 力 ；且收集到的小麦白粉病菌的菌量大。，下面是试验用小麦白粉病菌培养制备方法专利的具体信息内容。
1.一种试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）小麦白粉病菌株的分离纯化
I. 无菌条件下，将野外采集或试验室保藏的小麦白粉病菌样转接到无菌麦苗上，置于温度17～19℃、光照12000～18000LX、湿度50～60%条件下培养4～5天；
II. 待小麦叶面上可见侵染点但尚未长出分生孢子时，剪下含有单个分生孢子堆的叶段，置于含苯骈咪唑的水琼脂培养基上，于温度17～19℃、光照12000～18000LX，湿度50～
60%条件下培养4～5天；
III. 将单孢子堆的分生孢子接种到无菌麦苗上，得纯化菌株；
（2）小麦白粉病菌株的扩繁
将所述纯化菌株转至新鲜的无菌管苗上进行扩繁，置17～19℃的光照条件下培养10～
12天，再次转接扩繁；
（3）小麦白粉病菌的收集
a. 种植盆苗：取种植盆，压实盆中营养土，在盆中央种植小麦种子，得盆苗，出苗后在盆上加罩玻璃筒，所述玻璃筒上端罩有隔离纱布；
b. 待盆苗长至一叶一心期时，倒扣玻璃筒，去掉麦苗根部浮土；将所述步骤（2）中扩繁的白粉菌株转接到盆苗中，置17～19℃光照条件下培养10～12天；
c. 当麦苗上产生大量分生孢子时，去掉玻璃筒上端的隔离纱布，倒扣玻璃筒于纸上，敲打玻璃筒使麦苗上的小麦白粉病菌分生孢子粉抖落；
d. 移开玻璃筒收集孢子，干燥3～4天，冷冻保存。
2.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，将小麦白粉病菌样转接至一叶一心期无菌麦苗上。
3.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，所述水琼脂培养基含浓度为60 mg/L的苯骈咪唑和4.5g/L的琼脂粉。
4.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的a中，待麦苗刚长出时，倒扣盆苗，去掉麦苗上的浮土。
5.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的c中，所述纸为硫酸纸或称量纸。
6.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的c中，所述抖落时用纱布扫除落在玻璃筒以外的土。
7.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的d中，所述干燥采用变色硅胶干燥剂。
8.根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的d中，所述冷冻的温度控制为-40～-20℃
根据权利要求1所述的试验用小麦白粉病菌培养制备方法，其特征在于，在所述步骤（3）的d中，收集过孢子的盆苗用纱布罩好玻璃筒，4～5天后进行孢子的二次收集。
试验用小麦白粉病菌培养制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
（1）小麦白粉病菌株的分离纯化
I. 无菌条件下，将野外采集或试验室保藏的小麦白粉病菌样转接到无菌麦苗上，置于温度17～19℃（最适宜温度为18℃）、光照12000～18000LX、湿度50～60%条件下培养4～5天；
II. 待小麦叶面上可见侵染点但尚未长出分生孢子时，剪下含有单个分生孢子堆的叶段，置于含苯骈咪唑的水琼脂培养基上，于温度17～19℃（优选18℃）、光照12000～
18000LX，湿度50～60%条件下培养4～5天；
III. 将单孢子堆的分生孢子接种到无菌麦苗上，得纯化菌株；
（2）小麦白粉病菌株的扩繁
将所述纯化菌株转至新鲜的无菌管苗上进行扩繁，置17～19℃（优选18℃）光照条件下培养10～12天，再次转接扩繁；
（3）小麦白粉病菌的收集
a. 种植盆苗：取种植盆，压实盆中营养土，在盆中央种植小麦种子，得盆苗，出苗后在盆上加罩玻璃筒，所述玻璃筒上端罩有隔离纱布；
b. 待盆苗长至一叶一心期时，倒扣玻璃筒，去掉麦苗根部浮土；将所述步骤（2）中扩繁的白粉菌株转接到盆苗中，置17～19℃（优选18℃）光照条件下培养10～12天；
c. 当麦苗上产生大量分生孢子时，去掉玻璃筒上端的隔离纱布，倒扣玻璃筒于纸上，敲打玻璃筒使麦苗上的小麦白粉病菌分生孢子粉抖落；
d. 移开玻璃筒收集孢子，干燥3～4天，冷冻保存。
具体实施方式
（2）将田间采集到的携带小麦白粉菌的小麦叶片采用抖落孢子的方法转接到长在大玻璃管中的麦苗上，玻璃管上罩4层纱布以隔离杂菌，于温度18℃、光照12000～18000LX、湿度
50～60%条件下生长5天；
（3）待小麦叶面上可见侵染点但尚未长出分生孢子时，剪下含有单个分生孢子堆的叶段，放在含有60 mg/L苯骈咪唑的0.45%的水琼脂培养基上，置于于温度17℃、光照12000～
18000LX、湿度50～60%的光照培养箱中培养4～5天；
其中，水琼脂培养基的具体制作方法为：称取4.5g琼脂粉，加入到1000ml蒸馏水中，微波炉中加热至完全沸腾，冷却至30～40℃时加入 6 ml 配制好的0.1% 苯骈咪唑，充分混匀后倒入培养皿中；
（4）将单孢子堆的分生孢子接种到无菌苗上，重复步骤（3），获得纯化菌株；
（5）将其转至新鲜的无菌管苗上进行扩繁，置于18℃光照培养箱中培养10～12天，得管苗扩繁菌。
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