技术领域
[0001] 本
发明属于
植物组织培养技术领域,具体涉及一种花叶锦带组织培养的培养基及培养方法。技术背景
[0002] 花叶锦带是属于忍冬科锦带花属的一种植物,是落叶灌木,株丛紧密,喜光,耐寒的植物。植株紧密,单叶对生,椭圆形或卵圆形,叶缘为白色至黄色,花1 4朵组成聚成花序~生于叶腋及枝端,花冠钟形,紫红至淡粉色,花期4 5月,蒴果柱形。花叶锦带春、夏、秋三季~
观叶,初夏赏花。叶黄、绿相间,花初开时呈白色,而后逐渐变为粉红色;可孤植、丛植于庭院、
水景处搭配点缀,也可群植于林缘及草坪、花境处,形成壮观的整体景观。同时,对二
氧化硫、氯化氢有较强的抗性,并能
吸附粉尘,
净化空气。因此,花叶锦带不但是美丽的花灌木,而且也是优良的环境保护植物。花叶锦带扦插苗优质,商品苗
质量低,高杆
园艺造型难,大量繁殖比较难,季节性强。
发明内容
[0003] 本发明所要解决的技术问题在于针对上述
现有技术的不足,提供了一种花叶锦带组织培养的培养基及培养方法。本发明的组培方法易于操作,增殖扩繁比例高,能够大大降低生产成本,实现大量规模化生产,打破季节限制,高杆园艺造型简单。
[0004] 为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:一种花叶锦带组织培养的培养基及培养方法,其特征在于,该花叶锦带组织培养的培养基及培养方法具有以下特征:一种花叶锦带组织培养的培养基,包括
腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基,其中所述腋芽诱导培养基包括MS+6-BA1 2mg/L+2、4-D0.3 0.7mg/L,所述增殖培养基包括MS+~ ~
6-BA1.0 2.0mg/L+IBA0.03 0.07mg/L,所述生根培养基包括1/2MS+IBA0.1 0.5 mg/L。
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[0005] 一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的
叶片,洗去表面杂质,切去伤口
位置,用配制好的氯化汞和吐温的混合溶液消毒6 10分钟后,用无菌水冲洗4~ ~
6次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养5 9天;所述氯化汞和吐温的~
混合溶液中含有0.08% 0.12%的氯化汞,单位为质量分数;
~
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基上7 15天后,腋芽部位开始膨大,出现~
绿色突起,15 25天后芽分生组织,再培养15 25天,小的嫩枝条长到2 3cm,将嫩枝条切下转~ ~ ~
入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无
玻璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:以MS培养基为
基础培养基,将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基上,培养
25 30天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数3 8;
~ ~
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基上,7 15天苗长出根原~
基,13 17根3 4cm长,生根率95% 100%;
~ ~ ~
(5)炼苗:生根培养13 17天后,洗苗移栽,栽种在
泥炭和珍珠岩的混合基质上,用遮阳~
率40% 75%的
遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每20 40分钟~ ~
喷水8 12秒钟,连续5 9天,以后每天早上浇水一次,每次8 12分钟,一直到商品苗出售。
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[0006] 所述腋芽诱导培养基包括MS+6-BA1 2mg/L+2、4-D0.3 0.7mg/L。~ ~
[0007] 所述增殖培养基包括MS+6-BA1.0 2.0mg/L+IBA0.03 0.07mg/L。~ ~
[0008] 所述生根培养基包括1/2MS+IBA0.1 0.5 mg/L。~
[0009] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基中还分别包括
蔗糖25 35g/L、琼~脂粉3 7g/L,培养基pH为5.7 5.9,培养
温度22 26℃,光照2300 2700lx。
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[0010] 与现有技术相比,本发明具有以下优点:本发明的组培方法易于操作,增殖扩繁比例高,能够大大降低生产成本,实现大量规模化生产,打破季节限制,高杆园艺造型简单。
具体实施方式
[0011]
实施例 1一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的叶片,洗去表面杂质,切去伤口位置,用配制好的0.08%氯化汞和吐温的混合溶液消毒10分钟后,用无菌水冲洗4次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养9天;
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基MS+6-BA1mg/L+2,4-D0.5mg/L上 7天后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,15天后芽分生组织,再培养15天,小的嫩枝条长到2~
3cm,将嫩枝条切下转入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无玻璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L上,培养25天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数3;
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基1/2MS+IBA0.1mg/L上,
15天苗长出根原基,17天根3 4cm长,生根率95%;
~
(5)炼苗:生根培养17天后,洗苗移栽,栽种在泥炭和珍珠岩2:1的混合基质上,用遮阳率40%的遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每半个小时喷水10秒钟,连续7天,以后每天早上浇水一次,每次10分钟,一直到商品苗出售。
[0012] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基还包括蔗糖25g/L、琼脂粉3g/L,培养基pH为5.7,培养温度22℃,光照2300lx。
[0013] 实施例2一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的叶片,洗去表面杂质,切去伤口位置,用配制好的0.09%氯化汞和吐温的混合溶液消毒9分钟后,用无菌水冲洗
4次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养8天;
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基MS+6-BA1.25mg/L+2,4-D 0.5mg/L上 9天后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,18天后芽分生组织,再培养18天,小的嫩枝条长到
2 3cm,将嫩枝条切下转入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无玻~
璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:以MS培养基为基础培养基,将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基MS+6-BA1.25mg/L上,培养26天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数5;
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基1/2MS+IBA0.2mg/L上,
13天苗长出根原基,16天根3 4cm长,生根率97%;
~
(5)炼苗:生根培养16天后,洗苗移栽,栽种在泥炭和珍珠岩2:1的混合基质上,用遮阳率45%的遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每半个小时喷水10秒钟,连续7天,以后每天早上浇水一次,每次10分钟,一直到商品苗出售。
[0014] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基还包括蔗糖28g/L、琼脂粉4g/L,培养基pH为5.7,培养温度23℃,光照2400lx。
[0015] 实施例3一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的叶片,洗去表面杂质,切去伤口位置,用配制好的0.1%氯化汞和吐温的混合溶液消毒8分钟后,用无菌水冲洗5次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养7天;
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基MS+6-BA1.5mg/L+2,4-D0.3mg/L上 10天后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,20天后芽分生组织,再培养20天,小的嫩枝条长到
2 3cm,将嫩枝条切下转入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无玻~
璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:以MS培养基为基础培养基,将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基MS+6-BA1.5mg/L上,培养27天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数8;
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基1/2MS+IBA0.3mg/L上,
10天苗长出根原基,15天根3 4cm长,生根率100%;
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(5)炼苗:生根培养15天后,洗苗移栽,栽种在泥炭和珍珠岩2:1的混合基质上,用遮阳率55%的遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每半个小时喷水10秒钟,连续7天,以后每天早上浇水一次,每次10分钟,一直到商品苗出售。
[0016] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基还包括蔗糖30g/L、琼脂粉5g/L,培养基pH为5.8,培养温度24℃,光照2500lx。
[0017] 实施例4一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的叶片,洗去表面杂质,切去伤口位置,用配制好的0.11%氯化汞和吐温的混合溶液消毒7分钟后,用无菌水冲洗
5次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养6天;
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基MS+6-BA2mg/L+2,4-D0.7mg/L上 13天后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,23天后芽分生组织,再培养23天,小的嫩枝条长到2~
3cm,将嫩枝条切下转入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无玻璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:以MS培养基为基础培养基,将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基MS+6-BA1.75mg/L上,培养28天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数6;
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基1/2MS+IBA0.4mg/L上,9天苗长出根原基,14天根3 4cm长,生根率100%;
~
(5)炼苗:生根培养14天后,洗苗移栽,栽种在泥炭和珍珠岩2:1的混合基质上,用遮阳率65%的遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每半个小时喷水10秒钟,连续7天,以后每天早上浇水一次,每次10分钟,一直到商品苗出售。
[0018] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基还包括蔗糖23g/L、琼脂粉6g/L,培养基pH为5.9,培养温度25℃,光照2600lx。
[0019] 实施例5一种花叶锦带组织培养的培养方法,包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得:选取新长出的嫩枝条为外植体,去除外植体的叶片,洗去表面杂质,切去伤口位置,用配制好的0.12%氯化汞和吐温的混合溶液消毒6分钟后,用无菌水冲洗
6次,将消完毒的外植体取小段接种到配制好的培养基上培养5天;
(2)芽的诱导:将外植体接种到腋芽诱导培养基MS+6-BA2mg/L+2,4-D0.3mg/L上 15天后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,25天后芽分生组织,再培养25天,小的嫩枝条长到2~
3cm,将嫩枝条切下转入嫩枝条增殖培养基中进行增殖培养,确保嫩枝条生长迅速且无玻璃化不良现象,在培养基中生长发育良好;
(3)增殖培养:以MS培养基为基础培养基,将诱导的嫩枝条接种到增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L上,培养30天后筛选出无根、侧枝多增殖系数较高的增殖母苗,扩繁增殖系数在
5;
(4)生根培养:将增殖苗分成单株,高矮分开转接到生根培养基1/2MS+IBA0.5mg/L上,
7天苗长出根原基,13天根3 4cm长,生根率99%;
~
(5)炼苗:生根培养13天后,洗苗移栽,栽种在泥炭和珍珠岩2:1的混合基质上,用遮阳率75%的遮阳网遮阳一周,一周后撤去遮阳网,从早上8:00到下午18:00,每半个小时喷水10秒钟,连续7天,以后每天早上浇水一次,每次10分钟,一直到商品苗出售。
[0020] 所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基还包括蔗糖35g/L、琼脂粉7g/L,培养基pH为5.9,培养温度26℃,光照2700lx。
[0021] 以上所述,仅是本发明的较佳实施例,并非对本发明作任何限制。凡是根据本发明实质对以上实施例所作的任何简单
修改、变更以及等效变化,均仍属于本发明技术方案的保护范围内。