一种外周血染色体专用真空采集管及染色体制备方法
专利汇可以提供一种外周血染色体专用真空采集管及染色体制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且一种外周血 染色 体专用 真空 采集管，包括管体和套于管体上部的管帽，管体底部呈圆锥状，管帽顶面设第一穿刺孔和第二穿刺孔，管帽内、管体上方设 橡胶 隔层，橡胶隔层与管帽内顶面之间的空腔为 负压 腔，管帽一侧开设通孔Ⅰ，管体上与管帽通孔Ⅰ对应处开设通孔Ⅱ，当通孔Ⅰ与通孔Ⅱ处于同一方向时，管体内腔与大气连通，所述管体容量为15毫升，管体壁上设置刻度，管帽与管体之间为 螺纹 连接。本 发明 在制备染色体时不需要转管，标本采集、接种培养、细胞 收获 都在同一管，节省成本， 生物 安全 风 险低，操作简单、易于自动化、不易加错样本，且连接更牢固，加样更准确。，下面是一种外周血染色体专用真空采集管及染色体制备方法专利的具体信息内容。
1.一种外周血染色体专用真空采集管，包括管体（1）和套于管体（1）上部的管帽（2），其特征在于：所述管体（1）底部呈圆锥状，所述管帽（2）顶面设第一穿刺孔（3）和第二穿刺孔（4），管帽（2）内、管体（1）上方设橡胶隔层（7），橡胶隔层（7）与管帽（2）内顶面之间的空腔为负压腔（8）。
2.根据权利要求1所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管帽（2）一侧开设通孔Ⅰ（5），管体（1）上与管帽通孔Ⅰ（5）对应处开设通孔Ⅱ（9），当通孔Ⅰ（5）与通孔Ⅱ（9）处于同一方向时，管体（1）内腔与大气连通。
3.根据权利要求2所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管帽（2）与管体（1）之间为螺纹连接。
4.根据权利要求3所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管体（1）容量为15毫升，管体壁上设刻度（6）。
5.一种染色体制备方法，其特征在于：它是使用权利要求4所述的一种外周血染色体专用真空采集管来实现标本采集和培养同管的人类外周血染色体制备方法，具体步骤如下：
一、制备标本采集专用管
（1）取权利要求4所述的一种外周血染色体专用真空采集管1支；
（2）将通孔Ⅰ与通孔Ⅱ扭至同一方向，通过通孔Ⅰ和通孔Ⅱ加入培养液，作为标本采集专用管；
二、标本的采集和培养
（3）采集外周血，通过穿破第一穿刺孔和橡胶隔层加入步骤（2）所准备的专用管管体中，轻摇混匀；
（4）将管放入恒温培养箱中进行培养；
（5）培养终止前通过第二穿刺孔向管中加入秋水仙素，混匀；
（6）继续放入恒温培养箱中进行培养，得到血液和培养液的混合物；
三、收获细胞
（7）将步骤（6）得到的混合物从培养箱中取出，轻摇混匀，离心，弃去上清；
（8）低渗：向管中加入KCL溶液，混匀后进行水浴；
（9）细胞预固定：向管中加入固定液，轻摇混匀，静置后进行离心；
（10）细胞固定：将管取出，弃去上清，加入固定液，静置后进行离心，重复本步骤三次；
四、制片
（11）将管取出，弃去上清，加入适量固定液，混匀成细胞悬液；
（12）将细胞悬液滴于玻片中央；
（13）对玻片进行烘烤，G显带，用于染色体核型分析的染色体标本制备完成。
6.根据权利要求5所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，加入的培养液为5ml，得到的标本采集专用管在不立即使用时，放入－20℃环境下进行保存备用，使用前复溶至室温，再行采集标本。
7.根据权利要求6所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中，将管斜立于37℃恒温培养箱中培养66-72小时，所述步骤（6）中，继续放入37ºC恒温培养箱中培养0.5～
1.5小时。
8.根据权利要求7所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（7）中，在轻摇混匀后，1800r/min离心6～10分钟，所述步骤（8）中，向管中加入5ml已预温至37ºC的0.075mol/L KCL溶液，混匀后，37ºC水浴25～35分钟，所述步骤（9）中，向管中加入0.5ml新鲜固定液，轻摇混匀，静置4～6分钟，1800r/min离心6～10分钟，所述步骤（10）中，加入5ml新鲜固定液，静置5～10分钟，1800r/min离心6～10分钟。
9.根据权利要求8所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（13）中，将玻片置于
75～80ºC环境下烘烤2.5～3.5小时。
一种外周血染色体专用真空采集管及染色体制备方法
技术领域
背景技术
2．在接种时，混匀后还需要用无菌技术将血液转移到培养瓶或培养管中，操作复杂，难以自动化；
3．接种时的转移血液，使操作者接触到血液的可能性更大，生物安全风险增高；
4．染色体制备过程需转移标本，易存在加错标本的隐患；
5．培养时一般接种到培养管或培养瓶来进行培养，若接种到培养瓶培养，收获时还需转管，无疑增加了材料成本和人工成本，若接种到培养管培养，虽然收获时不用转管，但成本依旧相对较高。
发明内容
（1）取权利要求4所述的一种外周血染色体专用真空采集管1支；
（2）将通孔Ⅰ与通孔Ⅱ扭至同一方向，通过通孔Ⅰ和通孔Ⅱ加入培养液，作为标本采集专用管；
二、标本的采集和培养
（3）采集外周血，通过穿破第一穿刺孔和橡胶隔层加入步骤（2）所准备的专用管管体中，轻摇混匀；
（4）将管放入恒温培养箱中进行培养；
（5）培养终止前通过第二穿刺孔向管中加入秋水仙素，混匀；
（6）继续放入恒温培养箱中进行培养，得到血液和培养液的混合物；
三、收获细胞
（7）将步骤（6）得到的混合物从培养箱中取出，轻摇混匀，离心，弃去上清；
（8）低渗：向管中加入KCL溶液，混匀后进行水浴；
（9）细胞预固定：向管中加入固定液，轻摇混匀，静置后进行离心；
（10）细胞固定：将管取出，弃去上清，加入固定液，静置后进行离心，重复本步骤三次；
四、制片
（11）将管取出，弃去上清，加入适量固定液，混匀成细胞悬液；
（12）将细胞悬液滴于玻片中央；
（13）对玻片进行烘烤，G显带，用于染色体核型分析的染色体标本制备完成。
由于本发明之一种外周血染色体专用真空采集管管体底部呈圆锥状，且把普通5ml试管改为15ml刻度离心管，当作培养管和收获管用，标本采集、接种培养、细胞收获都在同一管，中途不需转管，可节省至少1～2种转管容器，一定程度上节省了材料成本和人工成本。
附图说明
图3：利用本发明之一种染色体制备方法制备出来的染色体样本。
8—负压腔，9—通孔Ⅱ。
具体实施方式
一、制备标本采集专用管
（1）取实施例一所述的一种外周血染色体专用真空采集管1支；
（2）将通孔Ⅰ与通孔Ⅱ扭至同一方向，以无菌技术通过通孔Ⅰ和通孔Ⅱ加入5ml经高压灭菌后的自配培养液，制成采血量为0.5ml的真空管，作为标本采集专用管，若不立即使用，放入－20℃环境下进行保存备用，使用前复溶至室温，再行采集标本；
二、标本的采集和培养
（3）以无菌技术采集0.5ml外周血，通过穿破第一穿刺孔和橡胶隔层加入上述步骤（2）所准备的专用管管体中，轻摇混匀；
（4）将管斜立于37℃恒温培养箱中培养68小时；
（5）培养终止前通过第二穿刺孔向管中加入10μg/ml秋水仙素50ul，混匀；
（6）置于37ºC恒温培养箱中培养0.5小时，得到血液和培养液的混合物；
三、收获细胞
（7）将上述步骤（6）得到的混合物从培养箱中取出，轻摇混匀，1800r/min离心6分钟，弃去上清；
（8）低渗：加入5ml已预温至37ºC的0.075mol/L KCL溶液，混匀，置于37ºC水浴30分钟；
（9）细胞预固定：加入0.5ml的新鲜固定液，轻摇混匀，静置4分钟，1800r/min离心6分钟；
（10）细胞固定：将管取出，弃去上清，加入新鲜固定液5ml，静置5分钟，1800r/min离心6分钟，重复本步骤三次；
四、制片
（11）将管取出，弃去上清，加入适量新鲜固定液，混匀成细胞悬液；
（12）将细胞悬液滴于玻片中央，1滴/片；
（13）将玻片置于75～80ºC烘烤3小时，G显带，用于染色体核型分析的染色体标本制备完成。
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