一种复合酶及其应用
专利汇可以提供一种复合酶及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种复合酶及其应用，属于 生物 技术领域。本发明提供的复合酶包括：按照重量份计，果胶酶5-15份， 葡萄糖 糖苷酶5-15份，甘油2-8份和 水 15-20份，该复合酶还包括 植酸酶 2-6份，乳酸脱氢酶1-4份。本发明提供的复合酶能够显著提高大豆异黄 酮 的提取率，使异黄酮含量明显提高。，下面是一种复合酶及其应用专利的具体信息内容。
1.一种复合酶，其特征在于，所述的复合酶包括：按照重量份计，果胶酶5-15份，葡萄糖糖苷酶5-15份，甘油2-8份和水15-20份。
2.根据权利要求1所述的复合酶，其特征在于，所述的复合酶还包括：按照重量份计，植酸酶2-6份。
3.根据权利要求2所述的复合酶，其特征在于，所述的复合酶还包括：按照重量份计，乳酸脱氢酶1-4份。
4.根据权利要求3所述的复合酶，其特征在于，所述的复合酶包括：按照重量份计，果胶酶6-12份，葡萄糖糖苷酶6-12份，甘油3-6份，植酸酶3-5份，乳酸脱氢酶2-3份和水16-18份。
5.根据权利要求4所述的复合酶，其特征在于，所述的复合酶包括：按照重量份计，果胶酶8份，葡萄糖糖苷酶10份，甘油5份，植酸酶4份，乳酸脱氢酶2份和水15份。
6.根据权利要求1-5任意一项所述的复合酶，其特征在于，所述的复合酶制备步骤如下：将原料粉末按照配方用量混合并搅拌30分钟得所述复合酶。
7.一种权利要求1-5任意一项所述的复合酶在提取大豆中异黄酮的过程中应用，其特征在于：包括以下步骤：
S1：取由大豆制成的20目大豆粉末，加入由甲醇和95%乙醇组成的提取剂，回流提取30分钟，回收甲醇和乙醇至尽，加入去离子水，得到预处理液；
S2：向S1中得到的预处理液中加入复合酶静置酶解，得到酶解液；
S3：将S2中得到的酶解液过滤后，离心，收集上清，浓缩干燥得到异黄酮提取物。
8.根据权利要求7所述的复合酶的应用，其特征在于，所述的步骤S1中的提取剂中甲醇和95%乙醇的体积比为2:8，大豆粉末与提取剂的质量体积比为1:10-1:15；加入去离子水重量是大豆粉末重量的0.15-0.25倍。
9.根据权利要求7所述的复合酶的应用，其特征在于，所述的步骤S2中的复合酶的重量为大豆粉末重量的4-8‰。
10.根据权利要求7所述的复合酶的应用，其特征在于，所述的步骤S2中的酶解温度为
37-45℃，酶解时间为48-72小时。
一种复合酶及其应用
技术领域
背景技术
95%。种植环境、加工方法、遗传因素等对大豆异黄酮的含量和成分有一定影响，表现为不同大豆品种中异黄酮总量及各组分比例的差异。预防心血管疾病：流行病学调查发现，长期摄食大豆制品的人群能延缓动脉硬化发生，减少血总胆固醇浓度，降低心脏病发病率。大豆异黄酮在心血管疾病中的作用机制是多元化的，较成熟的机制有抗氧化作用、受体调节、抑制血管平滑肌细胞增殖、抗血栓生成作用等。大豆异黄酮可抑制酪氨酸激酶而降低血小板内酪氨酸蛋白磷酸化，导致血小板活性降低，使其在血管壁上沉积和聚集减少，防止全身与动脉粥样硬化有关的血栓形成。大豆异黄酮显著抑制大鼠高脂饲料所致的血浆三酰甘油水平升高，而且对进食高脂饲料引起的体内过氧化物水平升高具有显著拮抗作用。主要表现在降低肝脏及心肌中的自由基水平，升高肝脏超氧化物歧化酶和肝脏及心肌中谷胱甘肽过氧化物酶活性，减少血清及肝脏、心肌和主动脉中的总抗氧化产物含量。防治妇女骨质疏松人们正在寻找一种新的治疗骨质疏松的药物，大豆异黄酮是一种极具开发潜力的物质，具有雌激素作用，而没有使用雌激素的副作用。对于雌激素水平低者，大豆异黄酮表现为弱雌激素作用，与成骨细胞内的雌激素受体结合，加强成骨细胞的活性，促进骨基质的产生、分泌和骨矿化过程，可预防骨质疏松症的发生。研究结果表明，人体摄入较高及剂量的大豆异黄酮的大豆蛋白，可体高受试者腰椎骨的骨密度。 大豆异黄酮与糖尿病：胰岛β细胞内抗氧化酶的水平不仅影响这些细胞的抗自由基损伤的能力，而且与胰岛素的释放有关。有文献报道用大豆异黄酮对糖尿病进行干预时，发现它可抑制小肠对糖的吸收，更好地调整体内糖代谢平衡，G、D与D的细菌代谢产物雌马酚，在体外能预防人的由糖诱导的低密度脂蛋白脂质过氧化反应。大豆异黄酮在体外能抑制兔小肠粘膜对糖的吸收。另外，大豆异黄酮具有较弱的雌激素样作用对糖尿病患者的代谢紊乱也有一定的调节功能。 大豆异黄酮与肾病：近年来发现大豆异黄酮对肾病病人的肾功能呈现出一种有益的影响，这种效果与传统上肾病忌食豆制品有一定的冲突，较难解释。很多肾病如肾病综合征可以并发高脂血症，最常见的解释是低白蛋白血症刺激肝脏载脂B代偿性合成增加，继而产生过多LDL，引起高脂血症。许多年前就有肾毒性学说，即血脂增高会促进肾小球病变进行性加重，这一点已得到证实。因此，降低血脂以保护肾功能，是肾病治疗的一个很重要的组成部分，大豆异黄酮降血脂作用可以保护肾脏功能。还有报道大豆异黄酮在体外表现出利尿剂的生物活性，可以抑制Na+K+
2Cl-跨膜转运，保证有足够的血流量，有利尿作用，对于离体的肾脏能松弛肾血管。因此，大豆异黄酮又可以防治肾病。
发明内容
所述的复合酶还包括：按照重量份计，植酸酶2-6份；
所述的复合酶还包括：按照重量份计，乳酸脱氢酶1-4份。
具体实施方式
材料：果胶酶，葡萄糖糖苷酶，植酸酶，乳酸脱氢酶，甘油，水。其中，果胶酶、植酸酶可以由沪酿336-2米曲霉发酵得到，葡萄糖糖苷酶可以由INVSc1酿酒酵母发酵得到，乳酸脱氢酶可以由乳酸菌发酵得到。
复合酶通过以下步骤制备：将原料粉末按照配方用量混合并搅拌30分钟得所述复合酶。
S2：向S1中得到的预处理液中加入复合酶静置酶解，得到酶解液；
S3：将S2中得到的酶解液过滤后，离心，收集上清，浓缩干燥得到异黄酮提取物。
大豆异黄酮标准储备溶液配制:分别精密称取六种大豆异黄酮标准品（大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素）0.0050 g 分别于10 mL 容量瓶中，用70 % 乙醇溶解并定容至刻度线，配成的溶液浓度为500 μg/mL。0 ℃～ 4 ℃冷藏避光保存。
1.50 μg/mL、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL 系列的大豆异黄酮混合标准工作溶液。依次进样10 μL，以大豆异黄酮各单体浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，得出六种大豆异黄酮各单体的回归方程。
50 mL，取4 ～ 5 mL 样液，离心，转速为10000 r/min，离心时间20 min，通过0.22μm 滤膜，HPLC 测定。以大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素等六种大豆异黄酮单体计算，不同方法提取物中大豆异黄酮的含量。
与实施例1相比，复合酶组分中仅缺少植酸酶和乳酸脱氢酶。
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