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动物饲料组合物及其用途

阅读:1040发布:2020-08-24

专利汇可以提供动物饲料组合物及其用途专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及包含具有溶菌酶活性的多肽和具有 植酸酶 活性的多肽的动物 饲料 组合物及其用途。,下面是动物饲料组合物及其用途专利的具体信息内容。

1.一种动物饲料或动物饲料添加剂,其包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种
或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
(a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌
界;并且
(b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
2.如权利要求1所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加
剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%。
3.如权利要求1至2中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲
料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%。
4.如权利要求1至3中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动
物饲料添加剂增加动物的胃肠道生物群中的栖粪杆菌属细菌。
5.如权利要求4所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ 
ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少
96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。
6.如权利要求1至5中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活
性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
(a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(c)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、
17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、
42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
(d)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、
17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、
42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
(e)具有溶菌酶活性的(a)或(c)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例
如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
(f)具有溶菌酶活性的(b)或(d)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例
如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至少210个氨基酸。
7.如权利要求1至6中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活
性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
(a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(o)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID 
NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、
12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、
37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
(p)具有植酸酶活性的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)或(o)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少
380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。
8.如权利要求1至7中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活
性的多肽处于颗粒形式,该具有溶菌酶活性的多肽处于颗粒形式,或者该具有植酸酶活性
的多肽和该具有溶菌酶活性的多肽二者均处于颗粒形式。
9.如权利要求1至8中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活
性的多肽是在50至10000FYT/kg动物饲料的水平给予。
10.如权利要求1至9中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶
活性的多肽是在0.1至150ppm酶蛋白/kg动物饲料的水平给予。
11.一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给
予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植酸酶
活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
(a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌
界;
(b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶);并且
(c)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)
和饲料转化率(FCR)。
12.如权利要求11所述的方法,其中该EPEF和/或FCR改善至少1%。
13.如权利要求11至12中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂增加
该动物的胃肠道微生物群中的栖粪杆菌属细菌。
14.如权利要求13所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少
90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少
98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。
15.如权利要求11至14中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽具有针对
产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
16.如权利要求11至15中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽是获得自
或可获得自子囊菌
17.如权利要求11至16中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽选自下组,
该组由以下各项组成:
(a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(c)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、
17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、
42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
(d)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、
17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、
42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
(e)具有溶菌酶活性的(a)或(c)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例
如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
(f)具有溶菌酶活性的(b)或(d)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例
如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至少210个氨基酸。
18.如权利要求11至17中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽选自下组,
该组由以下各项组成:
(a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少
75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或
100%序列一致性;
(o)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID 
NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、
12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、
37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
(p)具有植酸酶活性的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)或(o)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少
380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。
19.一种改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的方法,该方法
包括向该动物给予如权利要求1至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂。
20.如权利要求1至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂用于改善动物中的
欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的用途。
21.如权利要求1至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,用于在治疗产气荚
膜梭菌感染中使用。
22.一种增加动物的胃肠道微生物群中的栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向
该动物给予如权利要求1至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂。

说明书全文

动物饲料组合物及其用途

[0001] 对序列表的引用
[0002] 本申请包括计算机可读形式的序列表,将其通过引用结合在此。
[0003] 发明背景

技术领域

[0004] 本发明涉及包含具有溶菌酶活性的多肽和具有植酸酶活性的多肽的动物饲料组合物及其用途。
[0005] 相关技术说明
[0006] 溶菌酶是一种由许多生物作为对抗细菌的防御性机制而产生的O-糖基解酶。该酶通过裂解肽聚糖的糖苷键来水解细菌的细胞壁;肽聚糖是细菌中的一种重要的结构分
子。在细菌的细胞壁被溶菌酶作用弱化后,由不平衡的渗透压导致细菌细胞溶解。
[0007] 溶菌酶天然存在于许多生物中,例如病毒、植物、昆虫、类、爬行类以及哺乳类。在哺乳类中,已经从鼻腔分泌物、唾液、眼泪、肠内容物、尿和乳中分离到溶菌酶。该酶裂解N-乙酰胞壁酸的1号与N-乙酰-D-葡糖胺的4号碳之间的糖苷键。在体内,这两种碳水化合
物聚合以形成许多微生物的细胞壁多糖。
[0008] 已经将溶菌酶分类为五种不同的糖苷水解酶(GH)家族(CAZy,www.cazy.org):鸡蛋清溶菌酶(GH22),鹅蛋清溶菌酶(GH23),噬菌体T4溶菌酶(GH24),鞘醇单胞菌鞭毛蛋白
(GH73)以及拟鞘孢属(Chalaropsis)溶菌酶(GH25)。来自家族GH23和GH24的溶菌酶主要从
噬菌体中已知并且近来仅在真菌中得以鉴定。已经发现溶菌酶家族GH25与其他溶菌酶家族
在结构上是不相关的。
[0009] 从鸡蛋清提取的溶菌酶是在商业市场可获得的主要产品,但不裂解例如金黄色葡萄球菌细胞壁中的N,6-O-二乙酰胞壁酸并且因此尤其不能溶解这一重要的人类病原体
(Masschalck B,Deckers D,Michiels CW(2002),“Lytic and nonlytic mechanism of 
inactivation of gram-positive bacteria by lysozyme under atmospheric and high 
hydrostatic pressure[在大气压和高流体压下由溶菌酶灭活革兰氏阳性细菌的溶解
和非溶解机制]”,J Food Prot.[食品保护杂志]65(12):1916-23)。
[0010] 磷是生物体生长的必需元素。在动物饲料中,磷可以在例如谷物和豆类中主要以植酸盐形式存在。然而,单胃动物例如猪、家禽和鱼不能直接吸收植酸盐或植酸。这导致植
酸盐的排泄,致使磷排入家畜生产密集地区的水道中。此外,植酸可与或锌等金属结
合,并且对单胃动物的代谢具有不利影响。为了补偿这些动物的磷酸盐缺乏并确保足够的
生长和健康,将无机磷酸盐添加到动物饲料中。
[0011] 然而,无机磷酸盐的添加是昂贵的并导致对环境的进一步的不利影响。通过在动物饲料中使用植酸酶,植酸盐被水解成动物可利用的底物。这可以导致改善动物性能(例如
改善的FCR或BWG),降低对环境的磷酸盐负荷并降低农民的成本。因此通常将植酸酶添加到
动物(并且尤其是单胃动物,如家禽和猪)的饮食中,并且在本领域中熟知的是这可以导致
改善的动物性能,例如改善的体重增加和/或饲料转化率(Selle&Ravindran,2007,
“Microbial phytase in poultry nutrition[家禽营养中的微生物植酸酶]”,Anim.Feed 
Sci.Tech.[动物饲料科学与技术],135:1-41以及Selle和Ravindran,2008“, Phytate 
degrading enzymes in pig nutrition[猪营养中的植酸盐降解酶]”,Livestock Sci.[畜
牧科学],113:99-122)。然而,在不断增长的世界中,总是有兴趣改善动物的生长性能。

发明内容

[0012] 本发明涉及一种动物饲料或动物饲料添加剂,其包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0013] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0014] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0015] 本发明还涉及一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多
种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0016] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;
[0017] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶);并且
[0018] (c)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)。
[0019] 本发明还涉及改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的方法,该方法包括向该动物给予本发明的动物饲料或动物饲料添加剂;本发明的动物饲料或
动物饲料添加剂用于改善欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的用途;本发明
的动物饲料或动物饲料添加剂,用于在治疗产气荚膜梭菌感染中使用;以及一种增加动物
的胃肠道微生物群中的栖粪杆菌属(Faecalibacterium)细菌群体的方法,该方法包括向该
动物给予本发明的动物饲料或动物饲料添加剂。
[0020] 序列表综述
[0021] SEQ ID NO:1是来自大肠杆菌的AppA植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0022] SEQ ID NO:2是来自大肠杆菌的AppA2植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0023] SEQ ID NO:3是源自大肠杆菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0024] SEQ ID NO:4是源自大肠杆菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0025] SEQ ID NO:5是源自大肠杆菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0026] SEQ ID NO:6是披露为WO 2008/017066的SEQ ID NO:1的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0027] SEQ ID NO:7是披露为WO 2014/164442的SEQ ID NO:3的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0028] SEQ ID NO:8是披露为WO 2014/164442的SEQ ID NO:6的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0029] SEQ ID NO:9是披露为WO 2014/164442的SEQ ID NO:8的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0030] SEQ ID NO:10是来自布雷氏柠檬酸杆菌ATCC 51113的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0031] SEQ ID NO:11是来自吉伦氏柠檬酸杆菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0032] SEQ ID NO:12是来自无丙二酸柠檬酸杆菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0033] SEQ ID NO:13是来自布雷氏柠檬酸杆菌YH-15的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0034] SEQ ID NO:14是来自弗氏柠檬酸杆菌P3-42的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0035] SEQ ID NO:15是来自布丘氏菌属P1-29的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0036] SEQ ID NO:16是来自布丘氏菌属P1-29的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0037] SEQ ID NO:17是披露为WO 2008/097619的SEQ ID NO:1的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0038] SEQ ID NO:18是来自伽瓦尼布丘氏菌DSM18930的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0039] SEQ ID NO:19是来自乡间布丘氏菌DSM18931的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0040] SEQ ID NO:20是来自乡间布丘氏菌DSM18932的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0041] SEQ ID NO:21是来自隔孢伏革菌(Peniophora lycii)CBS号686.96的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0042] SEQ ID NO:22是隔孢伏革菌(Peniophora lycii)CBS号686.96的植酸酶变体的成熟氨基酸序列。
[0043] SEQ ID NO:23是来自蜂房哈夫尼菌的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0044] SEQ ID NO:24是来自哈夫尼菌属LU11047的植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0045] SEQ ID NO:25是披露为WO 2011/048046的SEQ ID NO:18的融合植酸酶的成熟氨基酸序列。
[0046] SEQ ID NO:26是披露为WO 2012/143862的SEQ ID NO:24的融合植酸酶变体的成熟氨基酸序列。
[0047] SEQ ID NO:27是来自如WO 2013/076253中描述的具有N-末端SPIRR的嗜枝顶孢的野生型GH25溶菌酶的成熟氨基酸序列。
[0048] SEQ ID NO:28是来自原鸡的野生型GH22溶菌酶的成熟氨基酸序列(鸡蛋清溶菌酶)。
[0049] SEQ ID NO:29是如在WO 2011/104339中描述的来自烟曲霉的野生型GH25溶菌酶的成熟氨基酸序列。
[0050] SEQ ID NO:30是如在WO 2013/076253中描述的来自嗜碱枝顶孢的野生型GH25溶菌酶的成熟氨基酸序列。
[0051] SEQ ID NO:31是正向引物341F。
[0052] SEQ ID NO:32是反向引物805R。
[0053] SEQ ID NO:33是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_1中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0054] SEQ ID NO:34是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_8中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0055] SEQ ID NO:35是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_45中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0056] SEQ ID NO:36是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_150中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0057] SEQ ID NO:37是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_204中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0058] SEQ ID NO:38是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_259中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0059] SEQ ID NO:39是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_380中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0060] SEQ ID NO:40是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_436中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0061] SEQ ID NO:41是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_462中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0062] SEQ ID NO:42是代表来自体内试验4(实例8)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_752中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0063] SEQ ID NO:43是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_1中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0064] SEQ ID NO:44是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_5中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0065] SEQ ID NO:45是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_193中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0066] SEQ ID NO:46是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_260中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0067] SEQ ID NO:47是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_273中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0068] SEQ ID NO:48是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_315中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0069] SEQ ID NO:49是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_387中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0070] SEQ ID NO:50是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_402中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0071] SEQ ID NO:51是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_415中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0072] SEQ ID NO:52是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_496中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0073] SEQ ID NO:53是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_518中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
[0074] SEQ ID NO:54是代表来自体内试验5(实例9)的被划分为细菌属栖粪杆菌属的OTU_527中的16S rRNA基因的V3-V4区域的序列。
附图说明
[0075] 图1:示出在用25ppm的具有SEQ ID NO:30的溶菌酶处理后鸡消化道内微生物组成变化的主成分分析图,来自体内试验4。
[0076] 图2:示出在用50ppm的具有SEQ ID NO:30的溶菌酶处理后鸡消化道内微生物组成变化的主成分分析图,来自体内试验5。
[0077] 图3:示出在用50ppm的具有SEQ ID NO:28的溶菌酶处理后鸡消化道内微生物组成变化的主成分分析图,来自体内试验5。
[0078] 图4:针对体内试验4(25ppm的SEQ ID NO:30)在(a)OTU/物种水平(b)属水平和(c)目水平下观察到的鸡消化道微生物群组成的变化的箱形图。箱形图是用R编程语言生成的。
[0079] 图5:针对体内试验5(50ppm的SEQ ID NO:30)在(a)OTU/物种水平(b)属水平和(c)目水平下观察到的鸡消化道微生物群组成的变化的箱形图。箱形图是用R编程语言生成的。
[0080] 定义
[0081] 动物:术语“动物”是指除人类以外的任何动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如,动物,如绵羊、山羊、(例如,肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、yank、骆驼、美洲驼和袋鼠。非反刍动物包括单胃动物,包括但不限于猪(包括但不限于仔猪、成长猪、和母猪);家禽,如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉用仔鸡(在此称为肉鸡)、小鸡、下蛋鸡(在此称为蛋鸡));(包括但不限于热血马、冷血马和温血
马),甲壳类动物(包括但不限于河虾和对虾),以及鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮
鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼)。
[0082] 动物饲料:术语“动物饲料”是指适合于、或打算用于由动物摄入的任何化合物、制剂、或混合物。单胃动物的动物饲料通常包括浓缩物连同维生素、矿物质、酶、直接饲养的微生物、氨基酸和/或其他饲料成分(例如在预混物中),而反刍动物的动物饲料通常包括草料(包括粗粮和青贮),并且可以进一步包括浓缩物连同维生素、矿物质、酶、直接饲养的微生
物、氨基酸和/或其他饲料成分(例如在预混物中)。动物饲料添加剂是配制的酶产品,其还
可以包含例如维生素、矿物质、酶、氨基酸、防腐剂和/或抗生素;即预混物。通常在饲料厂将动物饲料添加剂/预混物与浓缩物和/或饲料如植物蛋白、豆类或其他植物材料混合。通常
将动物饲料作为粒化饲料喂给单胃动物。
[0083] 抗微生物活性:在此将术语“抗微生物活性”定义为一种杀死微生物或抑制微生物的生长的活性,这些微生物是例如藻类、古细菌、细菌、真菌和/或原生动物。抗微生物活性可以是例如意在杀死细菌的杀菌的或意在阻止细菌的生长的抑菌的。抗微生物活性可以包
括催化在肽聚糖中的N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-葡糖胺残基之间以及在壳糊精中的N-乙
酰-D-葡糖胺残基之间的1,4-β-键的水解。抗微生物活性还可以包括溶菌酶结合在微生物
的表面并抑制其生长。抗微生物作用还可以包括通过抑制或减少细菌毒素并且通过噬菌素
作用使用本发明的溶菌酶作为免疫刺激剂激活细菌自溶素。
[0084] 出于本发明的目的,根据描述于实例4中的抗微生物测定(“抗微生物活性的测定”)测定抗微生物活性。当使用50%米勒-辛顿(Mueller-Hinton)肉汤(pH 6)时,如果有透
明区,则测定抗微生物活性。透明区的直径优选为4mm以上。
[0085] 浓缩物:术语“浓缩物”意指具有高蛋白和能量浓度的饲料,例如鱼粉、糖蜜、低聚糖、高粱种子和谷物(例如来自玉米、燕麦、黑麦、大麦、小麦的整体或由破碎、碾磨等制备的)、油籽滤饼(例如从籽、红花、向日葵、大豆(例如大豆粉)、油菜籽/卡诺拉、花生或落花生)、棕榈仁饼、酵母衍生材料和酒糟(例如湿酒糟(WDS)和具有可溶物的干酒糟(DDGS))。
[0086] 欧洲生产效率因子(EPEF):欧洲生产效率因子是比较动物性能的一种方式。这种单一数字有助于比较农场内部和农场之间的性能,并可用于评估环境、气候和动物管理变
量。EPEF计算为[(存活率(%)×活体重(kg))/(耗竭时的年龄(天)×FCR)]×100,其中存活
率是出栏时存活的动物的百分比,活体重是出栏时动物的平均体重,耗竭年龄是出栏时动
物的年龄,并且FCR是出栏时的饲料转化率。
[0087] 栖粪杆菌属:已知( T,Baldrian P(2013)The Variability of the 16S rRNA Gene in Bacterial Genomes and Its Consequences for Bacterial Community 
Analyses[细菌基因组中16S rRNA基因的可变性及其对于细菌群落分析的后果].PLoS ONE 
8(2):e57923.doi:10.1371/journal.pone.0057923)16SrRNA基因序列一致性在属内变化。
已经表明,一致性均值是95.56,标准偏差是3.68。还发现12.2%的属包含具有低于90%的
16S rRNA基因平均配对相似性的物种。
[0088] 包括的SEQ ID NO:33至42包含来自体内试验4(实例8)的归类为栖粪杆菌属的16S rRNA基因序列,并且包括的SEQ ID NO:43至54包含来自体内试验5(实例9)的归类为栖粪杆
菌属的16S rRNA基因序列,其中16SrRNA基因的V3-4区用于扩增。分类是使用程序“rdp 
classifier”v.2.2进行的。来自体内试验4(实例8)的OTU_1(SEQ ID NO:33)是该试验中最
丰富的栖粪杆菌属。来自体内试验5(实例9)的OTU_1(SEQ ID NO:43)是该试验中最丰富的
栖粪杆菌属。
[0089] 因此,特此将菌株定义为栖粪杆菌属,其中所述菌株的16S rRNA基因的V3-V4区与SEQ ID NO:33至54中的一个或多个具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至
少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。优选地,所述菌株的16S rRNA基因的V3-V4区与SEQ ID NO:33具有至少90%、更优选至少93%、甚至
更优选至少95%、甚至更优选至少96%、甚至更优选至少97%、甚至更优选至少98%、甚至
更优选至少99%、或最优选100%的序列一致性。
[0090] 饲料转化率(FCR):FCR是动物将饲料质量转化为期望输出增加的效率的量度。饲养肉用动物-如猪、家禽和鱼-输出是动物获得的质量。具体来说,FCR是遍及指定的时间段
内,按照饲料摄入量除以体重增加计算的。FCR的改善意指FCR值的降低。FCR改善2%意为
FCR降低2%。
[0091] 草料:如在此定义的术语“草料”还包括粗粮。草料是新鲜的植物物料,例如来自草料植物(禾草)和其他草料植物(海草、发芽谷物和豆类植物)或其任何组合的干草和青贮。草料植物的实例是紫花苜蓿(Alfalfa、lucerne)、百脉根、芸苔属植物(例如,羽衣甘蓝、油菜籽(卡诺拉(canola))、芜菁甘蓝(瑞典芜菁)、萝卜)、三叶草(例如,杂三叶、红三叶、地三叶、白三叶)、禾草(例如,百慕大草、雀麦、伪燕麦草、羊茅、石南草(heath grass)、草地早熟禾、鸭茅(orchard grass)、黑麦草、梯牧草(Timothy-grass))、玉米(玉蜀黍)、小米、大麦、燕麦、黑麦、高粱、大豆和小麦和蔬菜(如甜菜)。草料进一步包括来自谷物产物的作物残余
物(例如玉米秸秆,来自小麦、大麦、燕麦、黑麦和其他谷物的秸秆),来自蔬菜像甜菜缨
(beet top)的残余,来自油籽产物像来自大豆、油菜籽和其他豆类植物的茎和叶子的残余,
以及来自用于动物或人类消耗的谷物精致过程或来自燃料生产或其他行业的部分。
[0092] 片段:术语“片段”意指具有从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基端缺失的一个或多个(例如,若干个)氨基酸的多肽或催化结构域;其中该片段具有溶菌酶或植酸酶活性。
在一个方面,片段包括SEQ ID NO:27的至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180
个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸,并
且具有溶菌酶活性。在另一方面,片段包括SEQ ID NO:29的至少180个氨基酸,例如至少185
个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至
少210个氨基酸,并且具有溶菌酶活性。
[0093] 在另一方面,片段包括在此披露的植酸酶序列(即包括SEQ ID NO:1至26)中的任一个的至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至
少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸,并且具有植酸酶
活性。
[0094] 增加动物的胃肠道微生物群中细菌x的比例:术语“增加动物的胃肠道微生物群中细菌x的比例”意为与对照样品相比,具有特定分类等级(例如目或属)的细菌的数量已经增
加。动物微生物群的样品可以从动物(例如来自肉鸡盲肠或来自猪的结肠或回肠)的消化道
(即胃肠道)取得,并通过检查样品中的16S rRNA基因的序列(读段)来分析。可以基于序列
一致性将16S rRNA基因的读段聚簇在一起,并且可以将每个簇与16S rRNA基因的已知序列
数据库进行比较以鉴定该簇中的细菌类型。可以将簇在不同的分类水平(、纲、目、科、属或种)合并,以对整个样品中每个分类学水平内的细菌量进行定量分析。
[0095] 通过比较从对照动物到给予本发明溶菌酶的动物的簇,可以确定微生物群的差异。因此,在一个实例中,与对照(即未给予溶菌酶的肉鸡)相比,从给予本发明溶菌酶的肉
鸡取得的微生物群中的栖粪杆菌属细菌的比例从28.4%增加至50.4%(参见表9.5)。因此,
在这个实例中,栖粪杆菌属细菌的比例增加了22%,对应于增加了1.77倍。
[0096] 在另一个实例中,与对照相比,从给予本发明溶菌酶的肉鸡取得的微生物群中的梭菌目细菌的比例从60.1%增加至74.4%(参见表9.7)。因此,在这个实例中,梭菌目细菌
的比例增加了14.4%,对应于增加了1.24倍。
[0097] 分离的:术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质,(2)包括但不限于任何酶、变体、核
酸、蛋白、肽或辅因子的任何物质,该物质至少部分地从与其本质相关的一种或多种或所有
天然存在的成分中去除;(3)相对于天然发现的物质通过人工修饰的任何物质;或(4)通过
相对于与其天然相关的其他组分,增加该物质的量而修饰的任何物质(例如,编码该物质的
基因的多个拷贝;比与编码该物质的基因天然相关联的启动子更强的启动子的使用)。分离
的物质可以存在于发酵液样品中。
[0098] 溶菌酶活性:术语“溶菌酶活性”意指肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰-D-葡糖胺残基之间或壳糊精中N-乙酰-D-葡糖胺残基之间的1,4-β-键的酶促水解,由于渗透压导致
溶菌作用。溶菌酶属于EC 3.2.1.17酶类。通常通过比浊测定来测量溶菌酶活性。该方法是
基于由溶菌酶溶菌作用诱导的藤黄微球菌ATCC 4698悬浮液的浊度变化。在适当的实验条
件下,这些变化与培养基中溶菌酶的量成比例(c.f.联合国粮食及农业组织联合食品添加
剂规格综合纲要的INS 1105(www.fao.org))。出于本发明的目的,根据实例3中描述的浊度
测定法(“溶菌酶活性的测定”)测定溶菌酶活性,并且如果多肽示出针对一种或多种细菌如
藤黄微球菌ATCC 4698和/或不死微小杆菌(DSM14481)的活性,则该多肽具有溶菌酶活性。
在一个方面,本发明的多肽具有SEQ ID NO:27的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少
60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的溶菌酶活性。在一个方面,本发明的多肽具有SEQ ID NO:29的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少
70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的溶菌酶活性。
[0099] 成熟多肽:术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。
[0100] 操作分类单元(OTU):术语“操作分类单元”意指具有一定程度的相似性的序列的簇。在这种情况下,选择97%作为将16S rRNA基因的序列分配给不同OTU的阈值,这意味着
单个OTU内的所有序列具有至少97%的序列同一性。在这个一致性水平上,通常认为(或假
定)每个OTU代表单一的细菌物种。
[0101] 获得自或可获得自:术语“获得自或可获得自”是指多肽可以在来自特定分类等级的生物中发现。在一个实施例中,该多肽获得自或可获得自真菌界,其中术语界是分类等
级。在一个优选的实施例中,该多肽获得自或可获得自子囊菌门,其中术语门是分类等级。
在另一个优选的实施例中,该多肽获得自或可获得自盘菌亚门,其中亚门是分类等级。在另
一个优选的实施例中,该多肽获得自或可获得自散囊菌纲,其中术语纲是分类等级。
[0102] 如果多肽的分类等级未知,则它可以容易地由本领域普通技术人员通过进行多肽的BLASTP检索(使用例如国家生物技术信息中心(NCIB)网站http://
www.ncbi.nlm.nih.gov/)并将其与最接近的同系物进行比较来确定。作为已知多肽的片段
的未知多肽被认为是属于相同的分类物种。包括在多达10个位置中的取代、缺失和/或插入
的未知天然多肽或人工变体被认为来自与已知多肽相同的分类物种。
[0103] 植酸酶活性:术语“植酸酶活性”意指将植酸盐(肌醇六磷酸盐)水解为(1)肌醇和/或(2)它的单-,二-,三-,四-和/或五-磷酸盐和(3)无机磷酸盐。根据ENZYME网站(http://
www.expasy.ch/enzyme/),已知三种不同类型的植酸酶:3-植酸酶(别名1-植酸酶;肌醇六
磷酸3-磷酸水解酶,EC 3.1.3.8)、4-植酸酶(别名6-植酸酶;基于1L编号系统并不是1D编号
系统命名,EC 3.1.3.26),和5-植酸酶(EC 3.1.3.72)。出于本发明的目的,所有三种类型都包括在植酸酶的定义中。
[0104] 出于本发明的目的,植酸酶活性是通过从植酸钠溶液中释放无机磷酸盐来测定,其中一个植酸酶活性单位是在37℃下从在0.25M乙酸钠(pH 5.5)中的0.0051M植酸钠溶液
中每分钟释放1μmol无机磷酸盐所需的酶的量(Engelen,A.J.,等人,1994,“Simple and 
rapid determination of phytase activity[植酸酶活性的简单快速测定]”,J.AOAC 
Int.77:760-764)。活性单位名称的实例是:FYT、FTU和U。植酸酶活性可使用如实例2中所述的测定(“植酸酶活性的测定”)来测定。在一个方面,本发明的多肽具有SEQ ID NO:10的至
少20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的植酸酶活性。
[0105] 粗粮:术语“粗粮”意指具有高水平纤维的干植物物料,例如来自种子和谷物以及作物残余物(例如秸秆、干椰肉(copra)、稻草、谷壳、甜菜废料)的纤维、麸、苞叶。
[0106] 序列一致性:两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性由参数“序列一致性”描述。
[0107] 出于本发明的目的,使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite[EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版或更新版本)的尼德尔程序中所实
施的尼德尔曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:
443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性。使用的参数是缺口开放罚分10、缺口
扩展罚分0.5以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。尼德尔标注的“最长的一
致性”的输出(使用–非简化选项获得)被用作百分比一致性,并且计算如下:
[0108] (一致的残基×100)/(比对长度–比对中的空位总数)
[0109] 基本上纯的多肽:术语“基本上纯的多肽”意指这样一种制剂,该制剂包含与其天然关联或重组关联的按重量计至多10%、至多8%、至多6%、至多5%、至多4%、至多3%、至多2%、至多1%、以及至多0.5%的其他多肽材料。优选地,该多肽按存在于制剂中的总多肽材料的重量计是至少92%纯的,例如至少94%纯的、至少95%纯的、至少96%纯的、至少
97%纯的、至少98%纯的、至少99%纯的、至少99.5%纯的、以及100%纯的。本发明的多肽优选处于基本上纯的形式。这可以例如通过熟知的重组方法或通过经典纯化方法制备该多
肽来实现。
[0110] 变体:术语“变体”意指在一个或多个(例如若干个)位置包含改变(即,一个或多个(若干个)氨基酸残基的取代、插入和/或缺失)的具有溶菌酶或植酸酶活性的多肽。取代意
指用不同氨基酸置换占据某一位置的氨基酸;缺失意指去除占据某一位置的氨基酸;并且
插入意指邻近于并且紧跟着占据该位置的氨基酸之后添加1、2、或3个氨基酸。
[0111] 在一个方面,根据本发明的植酸酶变体可以包括从1至5;从1至10;从1至15;从1至20;从1至25;从1至30;从1至35;从1至40;从1至45;或从1至50,即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、
11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个改变,并且具有亲本植酸酶例如SEQ ID NO:10的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的植酸酶活性。在另一个方面,根据本发明的溶菌酶变体可以包括
从1至5;从1至10;从1至15;从1至20;从1至25;从1至30;从1至35;从1至40;从1至45;或从1至50,即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、
27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个改变,并且具有亲本溶菌酶例如SEQ ID NO:27的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少
60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的溶菌酶活性。

具体实施方式

[0112] 包括具有溶菌酶活性的多肽和具有植酸酶活性的多肽的动物饲料或动物饲料添加剂
[0113] 已经出人意料地发现,与仅包含植酸酶的动物饲料相比,用来自糖基水解酶家族25的溶菌酶(GH25溶菌酶)补充包含植酸酶的动物饲料在动物中提供了额外的性能益处。这
是出人意料的,因为任何GH25溶菌酶的改善的动物性能先前从未被证实过,并且这种益处
是附加在通过在饮食中添加植酸酶获得的性能益处上。使用动物饲料中使用的所有测试的
可商购的植酸酶,例如来自柠檬酸杆菌属、大肠杆菌、布丘氏菌属和隔孢伏革菌属的
EC3.1.3.26植酸酶,这种效果是明显的。
[0114] 此外已经发现,通过给予本发明的溶菌酶,动物如肉鸡的胃肠道的微生物群显著改变。在两个体内肉鸡试验中,取得来自肉鸡盲肠的样品用于微生物群落(微生物群系)分
析,并且出人意料地发现:
[0115] (a)用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)处理导致鸡消化道中栖粪杆菌属细菌物种的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联,并且该细菌物种与物
种普氏栖粪杆菌具有96%的一致性;
[0116] (b)用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)处理导致鸡消化道中栖粪杆菌属细菌的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联;
[0117] (c)用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)处理导致鸡消化道中梭菌目细菌的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联;
[0118] (d)用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)处理导致鸡消化道中拟杆菌目细菌的比例更低,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联。
[0119] 用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)处理鸡,导致在鸡消化道环境中栖粪杆菌属内的细菌水平更高。最接近的已知物种是普氏栖粪杆菌,它是属于厚壁菌门的专性厌杆状产丁
酸盐微生物(Duncan等人2002,Int J Syst Evol Microbiol[国际系统与进化微生物学杂
志]52(Pt 6):2141–2146)。它在若干种动物物种的粪便中是丰富的(Haenen D,等人“A 
diet high in resistant starch modulates microbiota composition,SCFA 
concentrations,and gene expression in pig intestine[含高含量抗性淀粉的饮食调
节猪肠内的微生物群组成、SCFA浓度和基因表达]”,J Nutr.[营养学杂志]2013;143:274–
283.;Lund M,Bjerrum L,Pedersen K.“Quantification of Faecalibacterium 
prausnitzii-and Subdoligranulum variabile-like bacteria in the cecum of 
chickens by real-time PCR[通过实时PCR对鸡盲肠中的普氏栖粪杆菌样细菌和
Subdoligranulum variabile样细菌的定量]”,Poult Sci.[家禽科学]2010;89:1217–
1224)。在人类中,高水平的普氏栖粪杆菌已经与肥胖症相关联(Balamurugan R,等人
“Quantitative differences in intestinal Faecalibacterium prausnitzii in obese 
Indian children[在印度肥胖儿童中肠道普氏栖粪杆菌的定量差异]”,Br J Nutr.[英国
营养学杂志]2010;103:335–338),而低丰度的普氏栖粪杆菌已经与炎症性肠病(IBD,即克
罗恩病(Sokol H,等人“Faecalibacterium prausnitzii is an anti-inflammatory 
commensal bacterium identified by gut microbiota analysis of Crohn disease 
patients[通过克罗恩病患者的消化道微生物群分析鉴定普氏栖粪杆菌是抗炎共生细
菌]”,Proc Natl Acad Sci U S A.[美国国家科学院院刊]2008;105:16731–16736)和溃疡
性结肠炎(Machiels K,等人“A decrease of the butyrate-producing species 
Roseburia hominis and Faecalibacterium prausnitzii defines dysbiosis in 
patients with ulcerative colitis[产丁酸盐物种罗斯拜瑞氏菌和普氏栖粪杆菌的减少
定义了患有溃疡性结肠炎的患者体内的微生态失调]”,Gut.[消化道]2013.doi:10.1136/
gutjnl-2013-304833))相关。
[0120] 此外,由普氏栖粪杆菌产生的丁酸盐既是肠细胞的能量来源,又起到抗炎剂的作用(Miquel S,等人“Identification of metabolic signatures linked to anti-
inflammatory effects of Faecalibacterium prausnitzii[与普氏栖粪杆菌的抗炎作用
相关的代谢标记的鉴定]”,MBio.2015;6:doi:10.1128/mBio.00300-15bioinf)。因此,不希望被理论束缚,认为本发明的GH25溶菌酶增加产丁酸盐细菌(例如来自梭菌目并且特别是
栖粪杆菌属的那些)的比例。
[0121] 可以进一步得出结论,即使来自体内试验4(实验8)的肉鸡经历抗生素Enro-Sleecol的3天处理,与当不给予抗生素时相比GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)也诱导了鸡消化
道中微生物组成的同样显著转变;即在栖粪杆菌属内的细菌物种的比例更高,梭菌目细菌
比例总体上增加,并且拟杆菌目细菌减少。
[0122] 因此在一方面,本发明涉及一种动物饲料或动物饲料添加剂,其包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0123] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0124] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0125] 在一个实施例中,EPEF改善至少1%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0126] 在一个实施例中,FCR改善至少1%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、1.25%和
2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0127] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:50至10000FYT/kg动物饲料,例如100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、
350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这些区间的任何组合(1FYT=1FTU=
1U)。
[0128] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是按下述水平给予:0.1至150ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至80ppm、5至60ppm、8至40ppm、10至30ppm、13至75ppm、15至50ppm、17.5至40ppm、25至75ppm或30至60ppm酶蛋白/kg动物饲料、或这些区间的任何组合。
[0129] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0130] 在一个实施例中,动物是除人类之外的任何动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如,动物,如绵羊、山羊、牛(例如,肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、yank、骆驼、美洲驼和袋鼠。非反刍动物是优选的并且包括单胃动物,例如,猪(包括但不限于仔猪、成长猪、和母猪);家禽,如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉用仔鸡、蛋鸡);马(包括但不限于热血马、冷血马和温血马);甲壳类动物(包含但不限于
河虾和对虾)以及鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼)。在一个优选的实施例中,该动物是单胃动物。在一个更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、家禽、甲壳类动物和鱼。在甚至更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0131] 在一个实施例中,包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽的动物饲料或动物饲料添加剂可以例如用于通过抑制病毒(包括但不限于冠
状病毒科、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、使得经历牛病毒性腹泻的佩尔西病毒
(Persivirus coursing Bovin virus diarre)等)、寄生病原体(球虫原生动物、巨型
球虫、和缓艾美球虫)或细菌病原体(例如产气荚膜梭菌、大肠杆菌、大肠弯曲菌、豚肠弯曲
菌和空肠弯曲菌、耶尔森菌属、猪密螺旋体(Treponema suis)、猪痢疾短螺旋体、胞内劳森
菌和沙门氏菌属(例如肠道沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和姆班达卡沙门氏菌))的生长/肠道
定殖来稳定动物的健康微生物区系,所述动物特别是家畜,例如但不限于绵羊、山羊、牛(包括但不限于肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、猪(包括但不限于仔猪、生长猪、和母猪)、家禽(包括但不限于鹅、火鸡、鸭和鸡(例如肉鸡、小鸡和蛋鸡);马、驼鹿和兔,还有鱼(包括但不限于鲑鱼、鳟鱼、罗非鱼、鲶鱼和鲤鱼);以及甲壳类动物(包含但不限于河虾和对虾)。在一个优选的实施例中,溶菌酶应用于鸡并且具有对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另外的实施
例中,将本发明的溶菌酶用作一种饲料添加剂,在其中它对动物消化道的微生物平衡可以
提供积极作用并且以此方式改善动物性能。
[0132] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少
2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。在可替代的实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0133] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实
施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少
15%或至少20%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少
3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0134] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实
施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少
3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0135] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该
栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少
20%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0136] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该
栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少
2.5倍或至少3.0倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0137] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至
少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少
99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至
少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。在可替代的实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5
倍或至少3.0倍。
[0138] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖
粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至
少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少
3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0139] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖
粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至
少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少
1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0140] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细
菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少
95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少
15%或至少20%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少
1.75%。
[0141] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细
菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少
95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少
1.75%。
[0142] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至
少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。在可替代的实施例中,该梭菌目细菌的比例增加
至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0143] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例
中,该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少
4%,或最优选至少5%。
[0144] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例
中,该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0145] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌
目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0146] 在一个实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌
目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0147] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自真菌界。在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自子囊菌门,例如盘菌亚门。在一
个更优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自散囊菌纲。在一个更优
选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自散囊菌目。在一个更优选的实
施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自曲霉科。在一个更优选的实施例中,具
有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自曲霉属。
[0148] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
[0149] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ IDNO:
27的至少60%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0150] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少70%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0151] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少80%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0152] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少90%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0153] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0154] 在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:27的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有溶菌酶活性的片段,其中该片段包括至少170个
氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少177个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)
的条件下,该片段具有SEQ ID NO:27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少
90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另一个方面,该多肽
包括SEQ ID NO:27的氨基酸1至213或由其组成。
[0155] 在另一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是SEQ ID NO:27的变体,其中该变体具有溶菌酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:27中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:27中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另外的实施例中,在SEQ ID NO:27中保守取代的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该变体具有SEQ ID NO:27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0156] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
[0157] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少60%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0158] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少70%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0159] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少80%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0160] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少90%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0161] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0162] 在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:29的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有溶菌酶活性的片段,其中该片段包括至少180个
氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至少210个氨基酸。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该片段
具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少
100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID NO:29的氨
基酸1至218或由其组成。
[0163] 在另一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是SEQ ID NO:29的变体,其中该变体具有溶菌酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:29中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:29中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:29中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:29中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另外的实施例中,在SEQ ID NO:29中保守取代的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该变体具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0164] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
[0165] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
30的至少60%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0166] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
30的至少70%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0167] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
30的至少80%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0168] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
30的至少90%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0169] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:30具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
30的至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0170] 在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:30的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有溶菌酶活性的片段,其中该片段包括至少170个
氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少177个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)
的条件下,该片段具有SEQ ID NO:30的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少
90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另一个方面,该多肽
包括SEQ ID NO:30的氨基酸1至208或由其组成。
[0171] 在另一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是SEQ ID NO:30的变体,其中该变体具有溶菌酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:30中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:30中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:30中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:30中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另外的实施例中,在SEQ ID NO:30中保守取代的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该变体具有SEQ ID NO:30的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0172] SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:30中的氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基末端的或羧基末端的延伸,例如氨基末端甲硫氨酸残基;多达
20-25个残基的小接头肽;或通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合
结构域)而有利于纯化的小的延伸。
[0173] 保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、
异亮氨酸和缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨
酸、丝氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且
例如由H.Neurath和R.L.Hill,1979,于The Proteins[蛋白质],Academic Press[学术出版
社],New York[纽约]中描述。常见取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly。
[0174] 可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science[科学]244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一种技术
中,在分子中的每个残基处引入单一丙氨酸突变,并且测试所得突变分子的溶菌酶活性以
识别对分子的活性关键的氨基酸残基。还参见,Hilton等,1996,J.Biol.Chem.[生物化学杂
志]271:4699-4708。酶或其他生物学相互作用的活性位点还可以通过对结构的物理分析来
确定,如通过这样的技术确定:如核磁共振、晶体学、电子衍射或光亲和标记,连同对推定的接触位点氨基酸进行突变。参见,例如,de Vos等,1992,Science 255:306-312;Smith等,
1992,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]224:899-904;Wlodaver等,1992,FEBS Lett.[欧洲生
化学会联合会快报]309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断必需氨基酸的身份。
[0175] 嗜碱枝顶孢(Acremonium alkalophilum)CBS114.92溶菌酶的晶体结构是以的解析度解析,如在WO 2013/076253中所披露。这些原子坐标可以用来生成描绘嗜碱枝顶
孢CBS114.92溶菌酶的结构或同源结构(例如本发明的这些变体)的三维模型。使用x射线结
构,将氨基酸残基D95和E97(使用SEQ ID NO:27用于编号)鉴定为催化性残基。
[0176] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是4-植酸酶(EC 3.1.3.26)。在另一个实施例中,植酸酶是获得自或可获得自真菌界。在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多
肽是获得自或可获得自担子菌门。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获
得自或可获得自伞菌纲。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可
获得自红菇目。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自隔
孢伏革菌科。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自隔孢
伏革菌属。
[0177] 在另外的实施例中,植酸酶源于细菌。在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自变形菌门。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是
获得自或可获得自丙型变形菌纲。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获
得自或可获得自肠杆菌目。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或
可获得自肠杆菌科。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得
自柠檬酸杆菌属、布丘氏菌属、哈夫尼菌属、耶尔森菌属和/或埃希氏杆菌属。
[0178] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0179] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:1的氨基酸1至410或由其组成。
[0180] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:1的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:1中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:1中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:1中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:1中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0181] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:1的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9。
[0182] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0183] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:4的氨基酸1至410或由其组成。
[0184] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:4的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:4中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:4中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:4中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:4中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0185] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0186] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:9的氨基酸1至411或由其组成。
[0187] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:9的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:9中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:9中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:9中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:9中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0188] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0189] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:10的氨基酸1至411或由其组成。
[0190] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:10的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:10中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:10中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:10中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:10中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0191] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:10的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。
[0192] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0193] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:11的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:11的氨基酸1至410或由其组成。
[0194] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:11的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:11中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:11中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:11中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:11中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0195] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0196] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:12的氨基酸1至414或由其组成。
[0197] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:12的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:12中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:12中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0198] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0199] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:15的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:15的氨基酸1至413或由其组成。
[0200] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:15的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:15中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:15中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:15中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:15中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0201] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19和SEQ 
ID NO:20。
[0202] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0203] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:17的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:17的氨基酸1至413或由其组成。
[0204] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:17的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:17中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:17中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:17中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:17中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0205] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0206] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:18的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:18的氨基酸1至413或由其组成。
[0207] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:18的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:18中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:18中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:18中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:18中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0208] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自隔孢伏革菌属。
[0209] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:21的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:21的氨基酸1至410或由其组成。
[0210] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:21的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:21中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:21中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:21中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:21中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0211] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:22。
[0212] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自隔孢伏革菌属。
[0213] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:22的氨基酸1至410或由其组成。
[0214] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:22的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:22中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:22中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:22中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:22中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0215] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0216] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:23的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:23的氨基酸1至413或由其组成。
[0217] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:23的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:23中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:23中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:23中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:23中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0218] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26。
[0219] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0220] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:25的氨基酸1至414或由其组成。
[0221] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:25的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:25中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:25中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:25中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:25中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0222] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0223] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:26的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:26的氨基酸1至414或由其组成。
[0224] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:26的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:26中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:26中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:26中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:26中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。在具体实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:26的变体,其包括取代D2E、A4E、A6S、F8Y、
K76N、N78T、V123A、E144A和G217S或由其组成。
[0225] 在一个优选的实施例中,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽、一种或多种具有溶菌酶活性的多肽以及一种或多种另外的组分,其中:
[0226] (a)具有溶菌酶活性的多肽,该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0227] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0228] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0229] (iii)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0230] (iv)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0231] (v)具有溶菌酶活性的(i)或(ii)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0232] (vi)具有溶菌酶活性的(ii)或(iv)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸;以及
[0233] (b)具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0234] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0235] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0236] (iii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0237] (iv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0238] (v)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0239] (vi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0240] (vii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0241] (viii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0242] (ix)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0243] (x)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0244] (xi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0245] (xii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0246] (xiii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0247] (xiv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0248] (xv)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0249] (xvi)具有植酸酶活性的(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)或(xv)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸;
[0250] (c)一种或多种另外的组分选自下列清单,该清单由以下各项组成:一种或多种载体、一种或多种另外的酶、一种或多种微生物、一种或多种维生素、一种或多种矿物质、一种或多种氨基酸;以及一种或多种其他饲料成分;以及
[0251] (d)与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)改善至少1%。
[0252] 载体、另外的酶、微生物、维生素、矿物质、氨基酸和其他饲料成分的非限制性实例是在此如下定义的。
[0253] 在进一步优选的实施例中,EPEF改善至少1.25%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0254] 在进一步优选的实施例中,FCR改善至少1.25%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、
1.25%和2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0255] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:10至20000FYT/kg动物饲料,例如25至15000FYT/kg、50至10000FYT/kg、100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、
250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这
些区间的任何组合(1FYT=1FTU=1U)。
[0256] 在进一步优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是以下述水平给予:0.01-200ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至
25ppm、2至80ppm、5至60ppm、8至40ppm或10至30ppm酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
[0257] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0258] 在进一步优选的实施例中,该动物是选自下组的单胃动物,该组由以下各项组成:猪(包括但不限于猪、小猪、生长猪和母猪)以及家禽(包括但不限于火鸡、鸭、鸡、肉鸡、小鸡和蛋鸡)。
[0259] 调配剂
[0260] 本发明的酶可以配制为液体或固体。针对液体配制品,该调配剂可以包括多元醇(如,例如,甘油、乙二醇或丙二醇)、盐(如,例如,氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸)或糖或糖衍生物(如,例如,糊精、葡萄糖蔗糖、和山梨醇)。因此,在一个实施例中,该组合物是一种液体组合物,该液体组合物包括本发明的多肽和一种或多种选自以下列表的调配剂,该列表
由以下各项组成:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、糊精、葡萄糖、蔗糖、和山梨醇。该液体配制品可以喷涂在已经历粒化的饲料上,或可以添加至供给动物的饮用水中。
[0261] 针对固体配制品,该配制品可以是例如作为颗粒、喷雾干粉或聚结物。调配剂可以包括盐(有机的或无机的锌、钠、钾或钙盐,例如,如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如,蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)。
[0262] 在一个实施例中,该固体组合物是处于颗粒形式。该颗粒可以具有基体结构(matrix structure),其中组分是均匀混合的。然而,该颗粒典型地包括核心颗粒和一种或
多种包衣,该包衣典型地是盐的和/或蜡质的包衣。蜡的实例是聚乙二醇;聚丙烯;巴西棕榈蜡;小烛树蜡;蜂蜡;氢化植物油或动物脂油如氢化牛脂、氢化棕榈油、氢化棉籽油和/或氢化豆油;脂肪酸醇;单甘油酯和/或二甘油酯,例如甘油硬脂酸酯,其中硬脂酸酯是硬脂酸和棕榈酸的混合物;微晶蜡石蜡;以及脂肪酸,例如氢化的线性长链脂肪酸和其衍生物。优选的蜡是棕榈油或氢化棕榈油。该核心颗粒可以是任选地与一种或多种另外的酶组合的本发
明的溶菌酶并且任选地连同一种或多种盐的均匀共混物,抑或是惰性颗粒(具有本发明的
溶菌酶,该溶菌酶任选地与施加到其上的一种或多种另外的酶组合)。
[0263] 在一个实施例中,核心颗粒的材料选自下组,该组由以下各项组成:无机盐(如乙酸钙、苯甲酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、山梨酸钙、硫酸钙、乙酸钾、苯甲酸钾、碳酸钾、氯化钾、柠檬酸钾、山梨酸钾、硫酸钾、乙酸钠、苯甲酸钠、碳酸钠、氯化钠、柠檬酸钠、硫酸钠、乙酸锌、苯甲酸锌、碳酸锌、氯化锌、柠檬酸锌、山梨酸锌、硫酸锌)、淀粉或糖或糖衍生物(像例如,蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、糖或糖衍生物(像例如,蔗糖、糊精、葡萄糖、乳糖、山梨醇)、有机小分子、淀粉、面粉、纤维素和矿物质以及粘土矿物质(也称作含水层状)。在一个优选的实施例中,该核心包括粘土矿物质,例如高岭石高岭土
[0264] 盐包衣典型地至少是1μm厚并且可以是一种具体的盐或多种盐的混合物,例如Na2SO4、K2SO4、MgSO4和/或柠檬酸钠。其他实例是在例如WO 2008/017659、WO 2006/034710、WO 1997/05245、WO 1998/54980、WO 1998/55599、WO 2000/70034中描述的那些,或是例如
在WO 2001/00042中描述的聚合物包衣。
[0265] 在另一个实施例中,该组合物是一种固体组合物,该固体组合物包括本发明的溶菌酶和一种或多种选自以下列表的一种或多种调配剂,该列表由以下各项组成:氯化钠、苯
甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉和纤维素。在一个优选的实施例中,该调配剂选自以下化合物中的一种或多种:硫酸钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠和碳酸钙。在一个优选的实施例中,该固体组合物是处于颗粒形式。在一个实施例中,该固体组合物是处于颗粒形式,并且包括核心颗
粒、包含本发明的溶菌酶的酶层以及盐包衣。
[0266] 在另外的实施例中,该调配剂选自以下化合物中的一种或多种:甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、淀粉、高岭土和纤维素。在一个优选的实施例中,该调配剂选自以下化合物中的一种或多种:1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、硫酸
钠、糊精、纤维素、硫代硫酸钠、高岭土和碳酸钙。
[0267] 动物饲料和动物饲料添加剂
[0268] 动物饲料组合物或饮食具有相对高的蛋白含量。家禽和猪饮食的特征如WO 01/58275,表B第2-3栏所示。鱼饮食可被表征为该表B第4栏中所示的。此外,这类鱼食通常具有
200-310g/kg的粗脂肪含量。
[0269] 根据本发明的动物饲料组合物具有50-800g/kg的粗蛋白含量,并且另外包括如在此描述的一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽。
[0270] 此外,或可替代地(对于以上指出的粗蛋白含量),本发明的动物饲料组合物具有10-30MJ/kg的可代谢能量的含量;和/或0.1-200g/kg的钙含量;和/或0.1-200g/kg的有效
磷含量;和/或0.1-100g/kg的甲硫氨酸含量;和/或0.1-150g/kg的甲硫氨酸加半胱氨酸含
量;和/或0.5-50g/kg的赖氨酸含量。
[0271] 在具体实施例中,可代谢能量、粗蛋白、钙、磷、甲硫氨酸、甲硫氨酸加半胱氨酸、和/或赖氨酸的含量落入WO 01/58275,表B,范围2、3、4或5(R.2-5)中的任何一个中。
[0272] 粗蛋白以氮(N)乘以系数6.25计算,即粗蛋白(g/kg)=N(g/kg)X6.25。通过凯氏定氮法(Kjeldahl method)测定氮含量(A.O.A.C.,1984,Official Methods of Analysis[官
方分析方法]第14版,Association of Official Analytical Chemists[官方分析化学家
集],华盛顿特区)。
[0273] 可代谢能量可根据NRC出版物Nutrient requirements in swine[猪的营养需求],第九次再版1988,subcommittee on swine nutrition,committee on animal 
nutrition,board of agriculture,national research council[国家研究委员会农业部
动物营养协会猪营养分会]。National Academy Press[美国国家科学院出版社],华盛顿特
区,第2-6页和European Table of Energy Values for Poultry Feed-stuffs[欧洲家禽
饲养材料能量值表],Spelderholt centre for poultry research and extension[斯克
得霍特家禽研究与推广中心],7361DA贝克贝亨,荷兰,Grafisch bedrijf Ponsen&looijen
公司,Wageningen[瓦赫宁恩].ISBN 90-71463-12-5计算。
[0274] 可基于饲料表,如在Veevoedertabel[饲料表]1997,gegevens over chemische samenstelling[化学成分数据],verteerbaarheid  en voederwaarde  van 
voedermiddelen[饲料的消化率和营养价值],Central Veevoederbureau[中央饲料局],
Runderweg 6,8219pk Lelystad[莱利斯塔德].ISBN 90-72839-13-7中所述的,计算在动物
全饮食中的钙、有效磷和氨基酸的膳食含量。
[0275] 在具体实施例中,本发明的动物饲料组合物包含如上定义的至少一种植物蛋白。
[0276] 本发明的动物饲料组合物还可以包含动物性蛋白,如肉和骨粉、羽毛粉、和/或鱼粉,通常量为0-25%。本发明的动物饲料组合物还可以包含具有可溶物的干酒糟(Dried 
Distillers Grains),通常量为0-30%。
[0277] 在再进一步具体的实施例中,本发明的动物饲料组合物包含0-80%玉蜀黍;和/或0-80%高粱;和/或0-70%小麦;和/或0-70%大麦;和/或0-30%燕麦;和/或0%-40%大豆
粉;和/或0-25%鱼粉;和/或0-25%肉和骨粉;和/或0-20%乳清
[0278] 该动物饲料可以包括植物蛋白。在具体实施例中,这些植物蛋白的蛋白含量是至少为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、或90%(w/w)。植物蛋白可以衍生自植物蛋白来源,如豆类和谷类,例如得自蝶形花科(豆科)、十字花科、藜科和早熟禾科植物的
材料,如大豆粉饼、羽扇豆粉饼、油菜籽粉饼及其组合。
[0279] 在一个具体实施例中,植物蛋白来源是来自豆科(Fabaceae)的一种或多种植物的材料,如大豆、羽扇豆、豌豆、豆。在另一个具体实施例中,植物蛋白来源是得自藜科的一种或多种植物,例如甜菜、糖甜菜、菠菜或奎奴亚藜的材料。植物蛋白来源的其他实例是油菜
和卷心菜。在另一个具体实施例中,大豆是一种优选的植物蛋白来源。植物蛋白来源的其他
实例是谷物,如大麦、小麦、黑麦、燕麦、玉蜀黍(玉米)、水稻、和高粱。
[0280] 可将动物饮食制成例如糊状饲料(非粒化)或粒化饲料。通常,混合研磨的饲料并根据所讨论的这些种类的说明添加充足量的必需维生素和矿物质。以固体或液体酶配制品
的形式添加酶。例如,对于糊状饲料,在成分混合步骤前或期间可添加固体或液体酶配制
品。对于粒化饲料而言,也可以在饲料成分步骤之前或过程中添加该(液体或固体)植酸酶/
溶菌酶/酶制剂。典型地,液体酶制剂包括本发明的植酸酶、溶菌酶或植酸酶和溶菌酶二者,任选地具有多元醇(如甘油、乙二醇或丙二醇),并且是在粒化步骤后添加,如通过将该液体
配制品喷涂至丸粒上。也可以将植酸酶和/或溶菌酶掺入饲料添加剂或预混物中。
[0281] 可替代地,可以通过冷冻液体酶溶液与填充剂(例如研磨的大豆粉)的混合物,并且然后冻干该混合物,来制备植酸酶/溶菌酶。
[0282] 在一个实施例中,该组合物包括一种或多种另外的酶。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种微生物。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种维生素。在一个实施例
中,该组合物包括一种或多种矿物质。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种氨基酸。
在一个实施例中,该组合物包括一种或多种其他饲料成分。
[0283] 在另一个实施例中,该组合物包括一种或多种本发明的多肽、一种或多种调配剂和一种或多种另外的酶。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种本发明的多肽、一种或
多种调配剂和一种或多种微生物。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种本发明的多
肽、一种或多种调配剂和一种或多种维生素。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种本
发明的多肽和一种或多种矿物质。在一个实施例中,该组合物包括本发明的多肽、一种或多
种调配剂和一种或多种氨基酸。在一个实施例中,该组合物包括一种或多种本发明的多肽、
一种或多种调配剂和一种或多种其他饲料成分。
[0284] 在另外的实施例中,该组合物包括一种或多种本发明的多肽、一种或多种调配剂和一种或多种选自以下清单的组分,该清单由以下各项组成:一种或多种另外的酶;一种或
多种微生物;一种或多种维生素;一种或多种矿物质;一种或多种氨基酸;以及一种或多种
其他饲料成分。
[0285] 最终溶菌酶在饮食中的浓度是在下述范围内:0.01-200ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至80ppm、5至60ppm、8至
40ppm或10至30ppm酶蛋白/kg动物饲料,或这些区间的任何组合。
[0286] 目前考虑,按以下量(剂量范围)中的一个或多个给予溶菌酶:0.01-200;0.01-100;0.5-100;1-50;5-100;5-50;10-100;0.05-50;5-25;或0.10-10-所有这些范围都是每kg饲料中溶菌酶的mg数(ppm)。
[0287] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:10至20000FYT/kg动物饲料,例如25至15000FYT/kg、50至10000FYT/kg、100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、
250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这
些区间的任何组合(1FYT=1FTU=1U)。
[0288] 为了测定每kg饲料中溶菌酶或植酸酶蛋白的mg数,将溶菌酶或植酸酶从饲料组合物纯化,并且使用相关测定确定纯化的溶菌酶或植酸酶的比活性(参见溶菌酶或植酸酶活
性)。还使用相同测定确定所述饲料组合物的溶菌酶或植酸酶活性,并且在这两次测定的基
础上计算出以每kg饲料中溶菌酶或植酸酶的mg数计的剂量。
[0289] 在具体实施例中,本发明的动物饲料添加剂以0.01%至10.0%,更具体0.05%至5.0%或0.2%至1.0%(%指g添加剂/100g饲料)的水平包含(或规定为必须包含)在动物饮
食或饲料中。具体地说,对预混物也是如此。
[0290] 将同样的原理应用于确定饲料添加剂中的溶菌酶/植酸酶蛋白的mg数。当然,如果样品使用了用于制备饲料添加剂或饲料的溶菌酶/植酸酶,可以由此样品确定比活性(不需
要从饲料组合物或添加剂中纯化溶菌酶/植酸酶)。
[0291] 另外的酶
[0292] 在另一个实施例中,在此描述的这些组合物任选地包括一种或多种酶。酶可在来自NC-IUBMB,1992年的酶命名法(Enzyme Nomenclature)手册的基础上分类,还可以在以下
网址参见ENZYME网站:http://www.expasy.ch/enzyme/。ENZYME是相对于酶命名法的信息
储库。它主要基于国际生物化学和分子生物学联合会命名委员会(IUB-MB),学术出版社公
司(Academic Press,Inc.),1992的推荐并且描述了所表征的酶的每种类型,为所述酶提供
EC(酶委员会)编号(Bairoch A.The ENZYME database[酶数据库],2000,Nucleic Acids 
Res[核酸研究]28:304-305)。这种IUB-MB酶命名法是基于它们的底物特异性,有时基于它
们的分子机制;这样的分类法不反映这些酶的结构特征。
[0293] Henrissat等人在“The carbohydrate-active enzymes database(CAZy)in 2013[2013年的碳水化合物活性酶数据库](CAZy)”,Nucl.Acids Res.[核酸研究](2014年1月1
日)42(D1):D490-D495中描述了某些糖苷水解酶(例如内切葡聚糖酶、木聚糖酶、半乳聚糖
酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶、溶菌酶和半乳糖苷酶)的另一种分类;还参见www.cazy.org。
[0294] 因此,本发明的组合物还可以包括选自下组的至少一种其他酶,该组由以下各项构成:木聚糖酶(EC 3.2.1.8);半乳聚糖酶(EC 3.2.1.89);α-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.22);
蛋白酶(EC 3.4),磷脂酶A1(EC 3.1.1.32);磷脂酶A2(EC 3.1.1.4);溶血磷脂酶(EC 
3.1.1.5);磷脂酶C(3.1.4.3);磷脂酶D(EC 3.1.4.4);淀粉酶,如,例如α-淀粉酶(EC 
3.2.1.1);阿拉伯呋喃糖苷酶(EC 3.2.1.55);β-木糖苷酶(EC 3.2.1.37);乙酰木聚糖酯酶(EC 3.1.1.72);阿魏酸酯酶(EC 3.1.1.73);纤维素酶(E.C.3.2.1.4);纤维二糖水解酶(EC 
3.2.1.91);β-葡糖苷酶(EC 3.2.1.21);支链淀粉酶(EC 3.2.1.41)、α-甘露糖苷酶(EC 
3.2.1.24)、甘露聚糖酶(EC 3.2.1.25)和β-葡聚糖酶(EC 3.2.1.4或EC 3.2.1.6),或其任
何组合。
[0295] 在一个具体实施例中,本发明的组合物包括植酸酶(EC 3.1.3.8或3.1.3.26)。可商购的植酸酶的实例包括Bio-FeedTM植酸酶(诺维信(Novozymes))、 P、
NP和 HiPhos(帝斯曼营养产品公司(DSM Nutritional 
TM
Products))、Natuphos (巴斯夫(BASF))、 和 Blue(AB酶公司(AB 
Enzymes))、 (Huvepharma)、 XP(范恩尼姆/杜邦公司(Verenium/
DuPont))和 PHY(杜邦公司(DuPont))。其他优选的植酸酶包括描述于例如WO 98/
28408、WO 00/43503、和WO 03/066847中的那些。
[0296] 在一个具体实施例中,本发明的组合物包括木聚糖酶(EC 3.2.1.8)。可商购的木聚糖酶的实例包括 WX和 G2(帝斯曼营养产品公司(DSM 
Nutritional Products))、 XT和Barley(AB维斯塔公司(AB Vista))、
(范恩尼姆公司(Verenium))、 X(Huvepharma)和 XB(木聚糖酶/β-葡聚
糖酶,杜邦公司(DuPont))。
[0297] 在一个具体实施例中,本发明的组合物包括蛋白酶(EC 3.4)。可商购的蛋白酶的实例包括 ProAct(帝斯曼营养产品公司(DSM Nutritional Products))。
[0298] 微生物
[0299] 在一个实施例中,该动物饲料组合物进一步包含一种或多种另外的微生物。在一个具体实施例中,该动物饲料组合物进一步包括来自以下属中的一个或多个属的细菌:乳
杆菌属、乳球菌属、链球菌属、芽孢杆菌属、片球菌属、肠球菌属、明串珠菌属、
Carnobacterium、杆菌属、丙酸杆菌属、双歧杆菌属、梭菌属和巨型球菌属(Megasphaera)或其任何组合。
[0300] 在一个优选的实施例中,该动物饲料组合物进一步包括来自以下菌株中的一个或多个菌株的细菌:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、屎肠球菌、肠球菌属和片球菌属、乳酸杆菌属、双歧杆菌属、嗜酸乳杆菌、乳酸片球菌(Pediococcus 
acidilactici)、乳酸乳球菌、两歧双歧杆菌、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium 
thoenii)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌、丁酸梭菌、动物双歧
杆菌动物专化型(Bifidobacterium animalis ssp.animalis)、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆
菌唾液专化型(Lactobacillus salivarius ssp.salivarius)、埃氏巨型球菌
(Megasphaera elsdenii)、丙酸杆菌属。
[0301] 在一个更优选的实施例中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包括来自以下枯草芽孢杆菌菌株中的一个或多个的细菌:3A-P4(PTA-6506)、15A-P4(PTA-6507)、22C-P1
(PTA-6508)、2084(NRRL B-500130)、LSSA01(NRRL-B-50104)、BS27(NRRL B-501 05)、BS 18(NRRL B-50633)、BS 278(NRRL B-50634)、DSM 29870、DSM 29871、NRRL B-50136、NRRL B-
50605、NRRL B-50606、NRRL B-50622和PTA-7547。
[0302] 在一个更优选的实施例中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料进一步包括来自以下短小芽孢杆菌菌株中的一个或多个的细菌:NRRL B-50016、ATCC 700385、NRRL B-
50885或NRRL B-50886。
[0303] 在一个更优选的实施例中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料进一步包括来自以下地衣芽孢杆菌菌株中的一个或多个的细菌:NRRL B 50015、NRRL B-50621或NRRL B-
50623。
[0304] 在一个更优选的实施例中,组合物、动物饲料添加剂或动物饲料还包括来自以下解淀粉芽孢杆菌菌株中的一个或多个的细菌:DSM 29869、DSM 29872、NRRL B 50607、PTA-
7543、PTA-7549、NRRL B-50349、NRRL B-50606、NRRL B-50013、NRRL B-50151、NRRL B-
50141、NRRL B-50147或NRRL B-50888。
[0305] 该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x104和1x1014CFU/kg的干物质之间,优选地1x106和1x1012CFU/kg的干物质之间,并且更优选地1x107至1x1011CFU/kg的
干物质之间。在一个更优选的实施例中,该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数
为1x108和1x1010CFU/kg的干物质之间。
[0306] 该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x105和1x1015CFU/动物/天之间,优选地1x107和1x1013CFU/动物/天之间,并且更优选地1x108和1x1012CFU/动物/天之间。
在一个更优选的实施例中,该动物饲料组合物中的每种细菌菌株的细菌计数为1x109和
1x1011CFU/动物/天之间。
[0307] 在另一个实施例中,该一种或多种细菌菌株以稳定的孢子形式存在。
[0308] 预混物
[0309] 在一个实施例中,该动物饲料可以包括预混物,该预混物例如包括混合到动物饲料中的维生素、矿物质、酶、氨基酸、防腐剂、抗生素、其他饲料成分或其任何组合。
[0310] 氨基酸
[0311] 本发明的组合物还可包括一种或多种氨基酸。用于动物饲料的氨基酸的实例是赖氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸和色氨酸。
[0312] 维生素和矿物质
[0313] 在另一个实施例中,该动物饲料可以包括一种或多种维生素,例如一种或多种脂溶性维生素和/或一种或多种水溶性维生素。在另一个实施例中,该动物饲料可任选地包括
一种或多种矿物质,例如一种或多种痕量矿物质和/或一种或多种巨量矿物质。
[0314] 通常,脂溶性维生素-和水溶-性维生素、以及痕量矿物质形成了一种所谓的旨在添加到饲料中的预混料的部分,而大量矿物质通常被分开地添加到饲料中。
[0315] 脂-溶性维生素的非限制性实例包括维生素A、维生素D3、维生素E、以及维生素K,例如维生素K3。
[0316] 水-溶性维生素的非限制性实例包括维生素B12、生物素和胆碱、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、叶酸和泛酸盐,例如Ca-D-泛酸盐。
[0317] 痕量矿物质的非限制性实例包括、钴、氯化物、铬、铜、氟化物、碘、、锰、钼、硒和锌。
[0318] 巨量矿物质的非限制性实例包括钙、镁、钾和钠。
[0319] 在WO 01/58275的表A中,列出了这些组分的营养需求(以家禽和仔猪/猪为例)。营养需求指的是应在饮食中提供指定浓度的这些组分。
[0320] 在可替代的实施例中,本发明的动物饲料添加剂包含WO 01/58275的表A中指定的单独组分中的至少一种。至少一种指的是一种或两种或三种或四种等直至所有十三种、或
直至所有十五种单独组分中的任一种,一种或多种。更具体地,该至少一种单独组分以提供
在表A的第四栏或第五栏或第六栏说明的范围内的饲料中浓度(in-feed-concentration)
的量包括在本发明的添加剂内。
[0321] 在仍另外的实施例中,本发明的动物饲料添加剂包含以下维生素中的至少一种,优选使得其饲料内浓度落入下表1中所限定的范围之内(分别对于仔猪饮食和肉鸡饮食)。
[0322] 表1:一般性维生素建议
[0323]
[0324]
[0325] 其他饲料成分
[0326] 本发明的组合物可以进一步包括着色剂、稳定剂、生长改进添加剂和香料化合物/调味品、多不饱和脂肪酸(PUFA);活性氧生物质、抗微生物肽和抗真菌多肽
[0327] 着色剂的实例是类葫萝卜素,例如β-胡萝卜素、虾青素、和叶黄素。
[0328] 香料化合物/调味品的实例是甲氧甲酚,茴香醚,十、十一和/或十二内酯、紫罗、鸢尾酮、姜辣素、哌啶、亚丙基苯酞(propylidene phatalide)、亚丁基苯酞(butylidene phatalide)、辣椒素和鞣质。
[0329] 稳定剂(例如酸化剂)的实例是有机酸。这些的实例是苯甲酸( 帝斯曼营养产品公司)、甲酸、丁酸、富马酸和丙酸。
[0330] 抗微生物肽(AMP)的实例是CAP18、林可霉素(Leucocin)A、三色肽(Tritrpticin)、Protegrin-1、死亡素(Thanatin)、防卫素(Defensin)、乳铁蛋白、乳铁蛋白肽、和奥维司匹林(Ovispirin)如诺维司匹林(Novispirin)(罗伯特莱勒(Robert Lehrer),2000)、菌丝霉
素(Plectasins)以及他汀类,包含在WO 03/044049和WO 03/048148中所披露的化合物和多
肽,以及以上的保留了抗微生物活性的变体或片段。
[0331] 抗真菌多肽(AFP)的实例是巨大曲霉(Aspergillus giganteus)和黑曲霉的肽,连同其保留了抗真菌活性的变体和片段,如在WO 94/01459和WO 02/090384中披露的。
[0332] 多不饱和脂肪酸的实例为C18、C20和C22多不饱和脂肪酸,如花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸和γ-亚油酸。
[0333] 活性氧生成种类的实例为化学品,如过硼酸盐、过硫酸盐或过碳酸盐;和酶,如氧化酶、加氧酶或合成酶。
[0334] 本发明的组合物可以进一步包括至少一种氨基酸。用于动物饲料的氨基酸的实例是赖氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸和色氨酸。
[0335] 改善动物性能的方法
[0336] 在第二方面,本发明涉及一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包
括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0337] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0338] (b)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)。
[0339] 在另外的方面,本发明涉及一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂
包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0340] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;
[0341] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶);并且
[0342] (c)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)。
[0343] 在一个优选的实施例中,该改善是与相同的但不含溶菌酶的饲料相比较。
[0344] 在一个实施例中,EPEF改善至少1%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0345] 在一个实施例中,FCR改善至少1%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、1.25%和
2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0346] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:50至10000FYT/kg动物饲料,例如100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、
350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这些区间的任何组合(1FYT=1FTU=
1U)。
[0347] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是按下述水平给予:0.1至150ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至
80ppm、5至60ppm、8至40ppm、10至30ppm、13至75ppm、15至50ppm、17.5至40ppm、25至75ppm或
30至60ppm酶蛋白/kg动物饲料、或这些区间的任何组合。
[0348] 在一个实施例中,动物是除人类之外的任何动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如,动物,如绵羊、山羊、牛(例如,肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、yank、骆驼、美洲驼和袋鼠。非反刍动物是优选的并且包括单胃动物,例如,猪(包括但不限于仔猪、成长猪、和母猪);家禽,如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉用仔鸡、蛋鸡);马(包括但不限于热血马、冷血马和温血马);甲壳类动物(包含但不限于
河虾和对虾)以及鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼)。在一个优选的实施例中,该动物是单胃动物。在一个更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、家禽、甲壳类动物和鱼。在甚至更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0349] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0350] 在一个实施例中,该方法包括增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少
10%、至少15%或至少20%。在可替代的实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25
倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0351] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌
的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少
5%。
[0352] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌
的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0
倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0353] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例
增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且FCR增加至少
1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0354] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例
增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0355] 在一个实施例中,该方法增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少
5%、至少10%、至少15%或至少20%。在可替代的实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0356] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID 
NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0357] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID 
NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍
或至少3.0倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0358] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33
具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少
97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0359] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33
具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少
97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至
少3.0倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0360] 在一个实施例中,该方法增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少
5%或至少7.5%。在可替代的实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少
1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0361] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增
加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且EPEF增加至少
1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0362] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增
加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0363] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少
1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0364] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少
1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0365] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自真菌界。在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自子囊菌门,例如盘菌亚门。在一
个更优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自散囊菌纲。在一个更优
选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自散囊菌目。在一个更优选的实
施例中,具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自曲霉科。在一个更优选的实施例中,具
有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自曲霉属。
[0366] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
[0367] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少60%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0368] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少70%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0369] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少80%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0370] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少90%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0371] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
27的至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0372] 在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:27的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有溶菌酶活性的片段,其中该片段包括至少170个
氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少177个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)
的条件下,该片段具有SEQ ID NO:27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少
90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另一个方面,该多肽
包括SEQ ID NO:27的氨基酸1至213或由其组成。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID NO:30
的氨基酸1至208或由其组成。
[0373] 在另一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是SEQ ID NO:27的变体,其中该变体具有溶菌酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:27中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:27中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:27中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另外的实施例中,在SEQ ID NO:27中保守取代的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该变体具有SEQ ID NO:27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0374] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
[0375] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少60%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0376] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少70%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0377] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少80%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0378] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少90%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0379] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少
89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且在50%MHB(pH 6)的条件下具有SEQ ID NO:
29的至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0380] 在一个优选的实施例中,具有溶菌酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:29的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有溶菌酶活性的片段,其中该片段包括至少180个
氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少205个氨基酸或至少210个氨基酸。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该片段
具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少
100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID NO:29的氨
基酸1至218或由其组成。
[0381] 在另一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是SEQ ID NO:29的变体,其中该变体具有溶菌酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:29中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:29中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:29中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:29中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另外的实施例中,在SEQ ID NO:29中保守取代的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,该变体具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0382] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是4-植酸酶(EC 3.1.3.26)。在另一个实施例中,植酸酶是获得自或可获得自真菌界。在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多
肽是获得自或可获得自担子菌门。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获
得自或可获得自伞菌纲。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可
获得自红菇目。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自隔
孢伏革菌科。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自隔孢
伏革菌属。
[0383] 在另外的实施例中,植酸酶源于细菌。在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自变形菌门。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是
获得自或可获得自丙型变形菌纲。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获
得自或可获得自肠杆菌目。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或
可获得自肠杆菌科。在一个更优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得
自柠檬酸杆菌属、布丘氏菌属、哈夫尼菌属、耶尔森菌属和/或埃希氏杆菌属。
[0384] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0385] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:1的氨基酸1至410或由其组成。
[0386] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:1的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:1中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:1中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:1中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:1中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0387] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:1的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9。
[0388] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0389] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:4的氨基酸1至410或由其组成。
[0390] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:4的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:4中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:4中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:4中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:4中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0391] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自埃希氏杆菌属。
[0392] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:9的氨基酸1至411或由其组成。
[0393] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:9的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:9中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:9中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:9中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、
9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:9中的取代,优选保守取代的数目不超过10,
例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0394] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0395] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:10的氨基酸1至411或由其组成。
[0396] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:10的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:10中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:10中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:10中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:10中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0397] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:10的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。
[0398] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0399] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:11的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:11的氨基酸1至411或由其组成。
[0400] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:11的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:11中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:11中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:11中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:11中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0401] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自柠檬酸杆菌属。
[0402] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:12的氨基酸1至414或由其组成。
[0403] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:12的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:12中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:12中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:12中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0404] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0405] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:15的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:15的氨基酸1至413或由其组成。
[0406] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:15的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:15中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:15中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:15中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:15中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0407] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19和SEQ 
ID NO:20。
[0408] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0409] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:17的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:17的氨基酸1至413或由其组成。
[0410] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:17的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQID NO:17中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个
或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45之
间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:17中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:17中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:17中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0411] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自布丘氏菌属。
[0412] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:18的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:18的氨基酸1至413或由其组成。
[0413] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:18的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:18中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:18中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:18中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:18中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0414] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自隔孢伏革菌属。
[0415] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:21的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:21的氨基酸1至410或由其组成。
[0416] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:21的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:21中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:21中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:21中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:21中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0417] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:22。
[0418] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自隔孢伏革菌属。
[0419] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:22的氨基酸1至410或由其组成。
[0420] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:22的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:22中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:22中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:22中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:22中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0421] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0422] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:23的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:23的氨基酸1至413或由其组成。
[0423] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:23的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:23中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:23中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:23中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:23中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0424] 在具体实施例中,作为SEQ ID NO:15的变体的具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26。
[0425] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0426] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:25的氨基酸1至414或由其组成。
[0427] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:25的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:25中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:25中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:25中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:25中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0428] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在一个实施例中,该多肽衍生自或可衍生自哈夫尼菌属。
[0429] 在一个优选的实施例中,具有植酸酶活性的多肽包括或者其组成为SEQ ID NO:26的氨基酸序列或其等位基因变体;或其具有植酸酶活性的片段,其中该片段包括至少360个
氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。在另一个方面,该多肽包括SEQ ID 
NO:26的氨基酸1至414或由其组成。
[0430] 在另一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是SEQ ID NO:26的变体,其中该变体具有植酸酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、
23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49或50个位置中包括一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或
其任何组合。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:26中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一
个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合的位置的数目是在1与45
之间,如1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个位置。在一个实施例中,在SEQ ID NO:26中包括一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基
酸插入或其任何组合的位置的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在另一个实施例中,在SEQ ID NO:26中的取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、
8、9或10个。在一个另外的实施例中,SEQ ID NO:26中的取代,优选保守取代的数目不超过
10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。氨基酸变化可以是如在此先前描述的那些。
[0431] 在一个优选的实施例中,本发明涉及一种改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲
料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活
性的多肽,其中:
[0432] (a)具有溶菌酶活性的多肽,该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0433] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0434] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0435] (iii)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0436] (iv)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0437] (v)具有溶菌酶活性的(i)或(ii)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0438] (vi)具有溶菌酶活性的(ii)或(iv)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸;并且
[0439] (b)具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0440] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0441] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0442] (iii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0443] (iv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0444] (v)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0445] (vi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0446] (vii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0447] (viii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0448] (ix)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0449] (x)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0450] (xi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0451] (xii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0452] (xiii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0453] (xiv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0454] (xv)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0455] (xvi)具有植酸酶活性的(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)或(xv)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸;并且
[0456] (c)与相同的但不含溶菌酶的饲料相比,欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且饲料转化率(FCR)改善至少1%。
[0457] 在进一步优选的实施例中,EPEF改善至少1.25%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0458] 在进一步优选的实施例中,FCR改善至少1.25%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、
1.25%和2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0459] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:10至20000FYT/kg动物饲料,例如25至15000FYT/kg、50至10000FYT/kg、100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、
250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这
些区间的任何组合(1FYT=1FTU=1U)。
[0460] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是按下述水平给予:0.01-200ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至
80ppm、5至60ppm、8至40ppm、10至30ppm、13至75ppm、15至50ppm、17.5至40ppm、25至75ppm或
30至60ppm酶蛋白/kg动物饲料、或这些区间的任何组合。
[0461] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0462] 在进一步优选的实施例中,该动物是选自下组的单胃动物,该组由以下各项组成:猪(包括但不限于猪、小猪、生长猪和母猪)以及家禽(包括但不限于火鸡、鸭、鸡、肉鸡、小鸡和蛋鸡)。
[0463] 产气荚膜梭菌感染的治疗
[0464] 在第三方面,本发明涉及用于在治疗产气荚膜梭菌感染中使用的本发明第一方面的动物饲料添加剂或动物饲料。
[0465] 因此,本发明特别地涉及一种动物饲料或动物饲料添加剂,其包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0466] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0467] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)
[0468] 用于在产气荚膜梭菌感染的治疗中使用。
[0469] 改善动物性能的用途
[0470] 在第四方面,本发明涉及本发明第一方面的动物饲料添加剂或动物饲料用于在一种或多种动物中改善欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的用途。
[0471] 因此,本发明特别地涉及一种动物饲料添加剂或动物饲料用于改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的用途,该动物饲料添加剂或动物饲料包括一种
或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中
[0472] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0473] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0474] 在一个优选的实施例中,该改善是与相同的但不含溶菌酶的饲料相比较。
[0475] 在一个优选的实施例中,本发明涉及一种动物饲料添加剂或动物饲料用于改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)的用途,该动物饲料添加剂或动物饲料
包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0476] (a)具有溶菌酶活性的多肽,该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0477] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0478] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0479] (iii)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0480] (iv)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0481] (v)具有溶菌酶活性的(i)或(ii)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0482] (vi)具有溶菌酶活性的(ii)或(iv)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸;并且
[0483] (b)具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0484] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0485] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0486] (iii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0487] (iv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0488] (v)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0489] (vi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0490] (vii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0491] (viii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0492] (ix)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0493] (x)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0494] (xi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0495] (xii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0496] (xiii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0497] (xiv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0498] (xv)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0499] (xvi)具有植酸酶活性的(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)或(xv)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸;并且
[0500] (c)与相同的但不含溶菌酶的饲料相比,欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且饲料转化率(FCR)改善至少1%。
[0501] 在一个实施例中,EPEF改善至少1%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0502] 在一个实施例中,FCR改善至少1%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、1.25%和
2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0503] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:50至10000FYT/kg动物饲料,例如100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、
350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这些区间的任何组合(1FYT=1FTU=
1U)。
[0504] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是按下述水平给予:0.1至150ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至
80ppm、5至60ppm、8至40ppm、10至30ppm、13至75ppm、15至50ppm、17.5至40ppm、25至75ppm或
30至60ppm酶蛋白/kg动物饲料、或这些区间的任何组合。
[0505] 在一个实施例中,动物是除人类之外的任何动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如,动物,如绵羊、山羊、牛(例如,肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、yank、骆驼、美洲驼和袋鼠。非反刍动物是优选的并且包括单胃动物,例如,猪(包括但不限于仔猪、成长猪、和母猪);家禽,如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉用仔鸡、蛋鸡);马(包括但不限于热血马、冷血马和温血马);甲壳类动物(包含但不限于
河虾和对虾)以及鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼)。在一个优选的实施例中,该动物是单胃动物。在一个更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、家禽、甲壳类动物和鱼。在甚至更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0506] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0507] 改变动物胃肠道细菌群体的方法
[0508] 在第五方面,本发明涉及一种增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的方法。
[0509] 因此,本发明特别地涉及一种增加动物胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加
剂包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0510] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0511] (b)与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,该动物饲料或动物饲料添加剂改善了动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)。
[0512] 本发明还涉及一种增加动物胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种
或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0513] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0514] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0515] 本发明还涉及一种增加动物胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种
或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0516] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;
[0517] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶);并且
[0518] (c)该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。
[0519] 在一个优选的实施例中,在动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的增加是相比于被给予相同的但不含溶菌酶的饲料的动物而言的。
[0520] 在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0521] 在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0522] 在一个实施例中,EPEF改善至少1%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0523] 在一个实施例中,FCR改善至少1%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、1.25%和
2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0524] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌
的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少
5%。
[0525] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌
的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0
倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0526] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例
增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%,并且FCR增加至少
1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0527] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。在一个实施例中,该栖粪杆菌属细菌的比例
增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0528] 本发明还涉及一种增加动物胃肠道微生物群中梭菌目细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多
种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0529] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0530] (b)与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,该动物饲料或动物饲料添加剂改善了动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)。
[0531] 本发明还涉及一种增加动物胃肠道微生物群中梭菌目细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多
种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0532] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0533] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0534] 在一个优选的实施例中,在动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌群体的增加是相比于被给予相同的但不含溶菌酶的饲料的动物而言的。
[0535] 在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0536] 在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0537] 在一个实施例中,EPEF改善至少1%,例如至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%或至少5%。在另一个实施例中,EPEF是以1%和15%之间,例如1%和12%之间、1%和10%之间、1.5%和8%之间、2.0%和7%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0538] 在一个实施例中,FCR改善至少1%,例如至少1.25%、至少1.5%或至少1.75%。在另一个实施例中,FCR是以1%和5%之间,例如1%和4%之间、1%和3%之间、1.25%和
2.5%之间、1.5%和2%之间、或这些区间的任何组合改善。
[0539] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增
加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且EPEF增加至少
1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0540] 在一个实施例中,该方法将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增
加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且EPEF增加至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0541] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少
1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%,并且FCR增加至少1.5%,优选至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0542] 在一个实施例中,该方法将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。在一个实施例中,该梭菌目细菌的比例增加至少
1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍,并且FCR增加至少1.25%,优选至少1.5%或最优选至少1.75%。
[0543] 在一个实施例中,该具有溶菌酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0544] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0545] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0546] (iii)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0547] (iv)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0548] (v)具有溶菌酶活性的(i)或(ii)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0549] (vi)具有溶菌酶活性的(ii)或(iv)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸;
[0550] 并且该具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0551] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0552] (ii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0553] (iii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0554] (iv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0555] (v)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0556] (vi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0557] (vii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0558] (viii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0559] (ix)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0560] (x)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0561] (xi)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0562] (xii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0563] (xiii)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0564] (xiv)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少70%,例如至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少
93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0565] (xv)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0566] (xvi)具有植酸酶活性的(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)或(xv)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸;并且
[0567] (c)与相同的但不含溶菌酶的饲料相比,欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,并且饲料转化率(FCR)改善至少1%。
[0568] 在一个实施例中,具有植酸酶活性的多肽是按下述水平给予:50至10000FYT/kg动物饲料,例如100至6000FYT/kg、200至4000FYT/kg、250至3000FYT/kg、300至2500FYT/kg、
350至2000FYT/kg或400至2000FYT/kg动物饲料、或这些区间的任何组合(1FYT=1FTU=
1U)。
[0569] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽是按下述水平给予:0.1至150ppm酶蛋白/kg动物饲料,例如0.1至150ppm、0.5至100ppm、1至75ppm、2至50ppm、3至25ppm、2至
80ppm、5至60ppm、8至40ppm、10至30ppm、13至75ppm、15至50ppm、17.5至40ppm、25至75ppm或
30至60ppm酶蛋白/kg动物饲料、或这些区间的任何组合。
[0570] 在一个实施例中,动物是除人类之外的任何动物。动物的实例为非反刍动物和反刍动物。反刍动物包括例如,动物,如绵羊、山羊、牛(例如,肉牛、奶牛和牛犊)、鹿、yank、骆驼、美洲驼和袋鼠。非反刍动物是优选的并且包括单胃动物,例如,猪(包括但不限于仔猪、成长猪、和母猪);家禽,如火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子(包括乳鸽)和鸡(包括但不限于肉用仔鸡、蛋鸡);马(包括但不限于热血马、冷血马和温血马);甲壳类动物(包含但不限于
河虾和对虾)以及鱼(包括但不限于琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼)。在一个优选的实施例中,该动物是单胃动物。在一个更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、家禽、甲壳类动物和鱼。在甚至更优选的实施例中,该动物选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0571] 在一个实施例中,具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活性的多肽具有SEQ ID NO:
27的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。在一个实施例中,在50%MHB(pH 6)的条件下,具有溶菌酶活
性的多肽具有SEQ ID NO:29的至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少
95%或至少100%的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性。针对产气荚膜梭菌的抗微生物活
性可以根据实例4中描述的抗微生物测定来测定。
[0572] 优选实施例
[0573] 1.一种动物饲料或动物饲料添加剂,其包括一种或多种具有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0574] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;并且
[0575] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶)。
[0576] 2.如项目1所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1%,优选至少1.5%、至少2.0%、至少
2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0577] 3.如项目1至2中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1%,优选至少1.25%、至少1.5%,或最
优选至少1.75%。
[0578] 4.如项目2至3中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)得以改
善。
[0579] 5.如项目1至4中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。
[0580] 6.如项目5所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0581] 7.如项目5所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0582] 8.如项目1所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物
的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。
[0583] 9.如项目8所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0584] 10.如项目8所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0585] 11.如项目1至4中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。
[0586] 12.如项目11所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0587] 13.如项目11所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0588] 14.如项目1所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物
的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。
[0589] 15.如项目14所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0590] 16.如项目14所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0591] 17.如项目5至16中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1.5%,优选至少2.0%、至少
2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0592] 18.如项目5至16中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至
少1.75%。
[0593] 19.如项目17至18中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)得
以改善。
[0594] 20.如项目1至19中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽是在50至10000FYT/kg动物饲料的水平给予。
[0595] 21.如项目1至20中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽是在0.1-150ppm酶蛋白/kg动物饲料的水平给予。
[0596] 22.如项目1至21中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0597] 23.如项目1至22中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽获得自或可获得自子囊菌门。
[0598] 24.如项目1至23中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽获得自或可获得自散囊菌纲。
[0599] 25.如项目1至24中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0600] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0601] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0602] (c)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0603] (d)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0604] (e)具有溶菌酶活性的(a)或(c)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0605] (f)具有溶菌酶活性的(b)或(d)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸。
[0606] 26.如项目25所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有溶菌酶活性的多肽包括SEQ ID NO:27的氨基酸1至213、SEQ ID NO:29的氨基酸1至218或SEQ ID NO:30的氨基
酸1至208,或者由其组成。
[0607] 27.如项目1至26中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽源于细菌。
[0608] 28.如项目1至27中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽获得自或可获得自肠杆菌科。
[0609] 29.如项目1至28中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽获得自或可获得自柠檬酸杆菌属、布丘氏菌属、哈夫尼菌属或埃希氏杆菌属。
[0610] 30.如项目1至29中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0611] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0612] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0613] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0614] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0615] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0616] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0617] (g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0618] (h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0619] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0620] (j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0621] (k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0622] (l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0623] (m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0624] (n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0625] (o)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0626] (p)具有植酸酶活性的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)或(o)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。
[0627] 31.如项目1至30中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,进一步包含选自以下列表的一种或多种组分,该列表由以下各项组成:
[0628] 一种或多种载体;
[0629] 一种或多种另外的酶;
[0630] 一种或多种微生物;
[0631] 一种或多种维生素;
[0632] 一种或多种矿物质;
[0633] 一种或多种氨基酸;以及
[0634] 一种或多种其他饲料成分。
[0635] 32.如项目31所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该一种或多种载体选自下组,该组由以下各项组成:水、甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、麦芽糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、小麦粉、小麦麸、玉米面筋粉、淀粉、高岭土和纤维素或其任何组合。
[0636] 33.如项目31所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该一种或多种另外的酶选自下组,该组由以下各项组成:木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、磷脂酶C、磷脂酶D、淀粉酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β-葡糖苷酶、支链淀粉酶、甘露糖苷酶、甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶或其任何组合。
[0637] 34.如项目31所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该一种或多种微生物选自下组,该组由以下各项组成:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆
菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、肉食杆菌属(Carnobacterium sp.)、丁酸梭菌、梭菌属、屎肠球菌、肠球菌属、乳酸杆菌属、嗜酸乳杆菌、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳
杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆菌、乳酸乳球菌、乳球菌属、明串珠菌属、埃氏巨型球菌
(Megasphaera elsdenii)、巨型球菌属(Megasphaera sp.)、乳酸片球菌(Pediococcus 
acidilactici)、片球菌属、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、丙酸杆菌属、以
及链球菌属或其任何组合。
[0638] 35.如项目1至34中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该具有植酸酶活性的多肽处于颗粒形式,该具有溶菌酶活性的多肽处于颗粒形式,或者该具有植酸酶活
性的多肽和该具有溶菌酶活性的多肽二者均处于颗粒形式。
[0639] 36.如项目35所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该颗粒被包衣。
[0640] 37.如项目36所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该包衣包含盐和/或蜡和/或面粉。
[0641] 38.如项目1-37中任一项所述的动物饲料,其中该具有植酸酶活性的多肽处于液体配制品中和/或该具有溶菌酶活性的多肽处于液体配制品中。
[0642] 39.如项目38所述的动物饲料,其中在已经将该饲料粒化之后将该液体配制品喷涂到该饲料上。
[0643] 40.如项目1至39中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中将该动物饲料或动物饲料添加剂给予非反刍动物,优选单胃动物,更优选选自下组,该组由以下各项组
成:猪、仔猪、生长猪、母猪,家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽,鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡,马,甲壳类动物、河虾、对虾,鱼、琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、
bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼;或者甚至更优选地选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0644] 41.如项目1至40中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该动物饲料或动物饲料添加剂包括至少一种蛋白或蛋白源。
[0645] 42.如项目41所述的动物饲料或动物饲料添加剂,其中该蛋白或蛋白源是植物蛋白,例如大豆、羽扇豆、豌豆、豆、甜菜、糖甜菜、菠菜、奎奴亚藜、油菜、卷心菜或其任何组合。
[0646] 43.一种粒化动物饲料,其包括基于植物的材料和如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂。
[0647] 44.如项目43所述的粒化动物饲料,其中该基于植物的材料包括处于其加工形式的燕麦、黑麦、大麦、小麦、玉蜀黍、玉米、高粱、柳枝稷、粟、珍珠粟、谷子、大豆、野生大豆、豆、羽扇豆、花菜豆、红花菜豆、瘦豆(slimjim bean)、利马豆、法国菜豆、蚕豆(fava bean)、鹰嘴豆、小扁豆、花生、西班牙花生、卡诺拉、油菜(oilseed rape)或豌豆,或者其任何组合。
[0648] 45.一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植
酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0649] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0650] (b)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)。
[0651] 46.一种改善动物中的一种或多种性能参数的方法,该方法包括向一种或多种动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植
酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0652] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25并且是获得自或可获得自真菌界;
[0653] (b)该具有植酸酶活性的多肽归类为EC 3.1.3.26植酸酶(4-植酸酶);并且
[0654] (c)该一种或多种性能参数选自下组,该组由以下各项组成:欧洲生产效率因子(EPEF)和饲料转化率(FCR)。
[0655] 47.如项目45至46中任一项所述的方法,其中该EPEF改善至少1%,优选至少1.5%、至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0656] 48.如项目45至47中任一项所述的方法,其中该FCR改善至少1%,优选至少1.25%、至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0657] 49.如项目45至48中任一项所述的方法,其中与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)得以改善。
[0658] 50.如项目45至49中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。
[0659] 51.如项目50所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0660] 52.如项目50所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0661] 53.如项目45至49中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠
道微生物群中栖粪杆菌属细菌的比例。
[0662] 54.如项目53所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0663] 55.如项目53所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0664] 56.如项目45至49中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂增加动物的胃肠道微生物群中梭菌目细菌的比例。
[0665] 57.如项目56所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0666] 58.如项目56所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0667] 59.如项目45至49中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)改善至少1%,并且增加动物的胃肠
道微生物群中梭菌目细菌的比例。
[0668] 60.如项目59所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0669] 61.如项目59所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0670] 62.如项目45至49中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少
3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0671] 63.如项目62所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0672] 64.如项目62所述的方法,其中与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)得以改善。
[0673] 65.如项目45至64中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽是在50至10000FYT/kg动物饲料的水平给予。
[0674] 66.如项目45至65中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽是在0.1-150ppm酶蛋白/kg动物饲料的水平给予。
[0675] 67.如项目45至66中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽具有针对产气荚膜梭菌的抗微生物活性。
[0676] 68.如项目45至67中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自真菌界。
[0677] 69.如项目45至68中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自子囊菌门。
[0678] 70.如项目45至69中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽是获得自或可获得自散囊菌纲。
[0679] 71.如项目45至70中任一项所述的方法,其中该具有溶菌酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0680] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:27具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0681] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:29具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0682] (c)SEQ ID NO:27的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0683] (d)SEQ ID NO:29的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;
[0684] (e)具有溶菌酶活性的(a)或(c)的多肽的片段,其中该片段包括至少170个氨基酸,例如至少175个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少
195个氨基酸或至少200个氨基酸;以及
[0685] (f)具有溶菌酶活性的(b)或(d)的多肽的片段,其中该片段包括至少180个氨基酸,例如至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸、至少200个氨基酸、至少
205个氨基酸或至少210个氨基酸。
[0686] 72.如项目45至71中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽是4-植酸酶(EC 3.1.3.26)。
[0687] 73.如项目45至72中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽源于细菌。
[0688] 74.如项目45至73中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽是获得自或可获得自肠杆菌科。
[0689] 75.如项目45至74中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽获得自或可获得自柠檬酸杆菌属、布丘氏菌属、哈夫尼菌属或埃希氏杆菌属。
[0690] 76.如项目45至75中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:
[0691] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:1具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0692] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0693] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:9具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0694] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0695] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:11具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0696] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0697] (g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:15具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0698] (h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:17具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0699] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:18具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0700] (j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:21具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0701] (k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:22具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0702] (l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:23具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0703] (m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:25具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0704] (n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:26具有至少50%,例如至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少
91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性;
[0705] (o)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的变体,该变体包括在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;以及
[0706] (p)具有植酸酶活性的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)或(o)的多肽的片段,其中该片段包括至少360个氨基酸,例如至少370个氨基酸、至少380个氨基酸、至少385个氨基酸、至少390个氨基酸、至少395个氨基酸、至少400个氨基酸或至少405个氨基酸。
[0707] 77.如项目45至76中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂还包括选自以下清单的一种或多种组分,该清单由以下各项组成:
[0708] 一种或多种载体;
[0709] 一种或多种另外的酶;
[0710] 一种或多种微生物;
[0711] 一种或多种维生素;
[0712] 一种或多种矿物质;
[0713] 一种或多种氨基酸;以及
[0714] 一种或多种其他饲料成分。
[0715] 78.如项目77所述的方法,其中该一种或多种载体选自下组,该组由以下各项组成:水、甘油、乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、氯化钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、硫代硫酸钠、碳酸钙、柠檬酸钠、糊精、麦芽糊精、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、小麦粉、小麦麸、玉米面筋粉、淀粉、高岭土和纤维素或其任何组合。
[0716] 79.如项目77所述的方法,其中该一种或多种另外的酶选自下组,该组由以下各项组成:木聚糖酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、磷脂酶C、磷脂酶D、淀粉酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、纤维素酶、纤维二糖水解酶、β-葡糖苷酶、支链淀粉酶、甘露糖苷酶、甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶或其任何组合。
[0717] 80.如项目77所述的方法,其中该一种或多种微生物选自下组,该组由以下各项组成:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、多粘菌芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、肉食杆菌属、丁酸梭菌、梭菌属、屎肠球菌、肠球菌属、乳酸杆菌属、嗜酸乳杆菌、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminus)、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳酸杆菌、乳酸乳球菌、乳球菌属、明串珠菌属、埃氏巨型球菌(Megasphaera elsdenii)、巨型球菌属、乳酸片球菌
(Pediococcus acidilactici)、片球菌属、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、
丙酸杆菌属、以及链球菌属或其任何组合。
[0718] 81.如项目45至80中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽处于颗粒形式,该具有溶菌酶活性的多肽处于颗粒形式,或者该具有植酸酶活性的多肽和该具有溶
菌酶活性的多肽二者均处于颗粒形式。
[0719] 82.如项目81所述的方法,其中将该颗粒进行包衣。
[0720] 83.如项目82所述的方法,其中该包衣包含盐和/或蜡和/或面粉。
[0721] 84.如项目45至83中任一项所述的方法,其中该具有植酸酶活性的多肽处于液体配制品中和/或该具有溶菌酶活性的多肽处于液体配制品中。
[0722] 85.如项目84所述的方法,其中在已经将该饲料粒化之后将该液体配制品喷涂到该饲料上。
[0723] 86.如项目45至85中任一项所述的方法,其中该动物是非反刍动物,优选单胃动物,更优选选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪,家禽、火鸡、鸭、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽,鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡,马,甲壳类动物、河虾、对虾,鱼、琥珀鱼、巨滑舌鱼、魮鱼、鲈鱼、蓝鱼、bocachico、鲤科鱼、鲶鱼、cachama、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉鱼、遮目鱼、嘉鱼、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、小翻车鱼、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、guapote、大比目鱼、爪哇鱼(java)、野鲮属鱼、莱鱼(lai)、泥鳅、鲭鱼、牛奶鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕高鱼(paco)、pearlspot、pejerrey、河鲈鱼、狗鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、鲑鱼、虾米鱼(sampa)、加拿大鰤鲈、黑鲈、海鲤、发光鱼(shiner)、睡鲨(sleeper)、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、比目鱼、刺足鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼(sweetfish)、丁鲷、特罗尔鱼(terror)、罗非鱼、鳟鱼、鲔鱼、多宝鱼、白鳟鱼、白斑鱼和白鱼;或者甚至更优选地选自下组,该组由以下各项组成:猪、仔猪、生长猪、母猪、鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡。
[0724] 87.如项目45至86中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂包括至少一种蛋白或蛋白源。
[0725] 88.如项目87所述的方法,其中该蛋白或蛋白源是植物蛋白,例如大豆、羽扇豆、豌豆、豆、甜菜、糖甜菜、菠菜、奎奴亚藜、油菜、卷心菜或其任何组合。
[0726] 89.如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂的或者如项目43至44中任一项所述的粒化动物饲料的用于改善动物中的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料
转化率(FCR)的用途。
[0727] 90.一种改善动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)的方法,该方法包括向该动物给予如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或者如项
目43至44中任一项所述的粒化动物饲料。
[0728] 91.如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或者如项目43至44中任一项所述的粒化动物饲料,用于在治疗产气荚膜梭菌感染中使用。
[0729] 92.一种增加动物胃肠道微生物群中栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具
有植酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0730] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0731] (b)与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,该动物饲料或动物饲料添加剂改善了动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)。
[0732] 93.一种增加动物的胃肠道微生物群中的栖粪杆菌属细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或其粒化动物饲
料。
[0733] 94.如项目92至93中任一项所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1%,例如至少2%、至少5%、至少10%、至少15%或至少20%。
[0734] 95.如项目92至93中任一项所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌的比例增加至少1.25倍,例如至少1.50倍、至少1.75倍、至少2.0倍、至少2.5倍或至少3.0倍。
[0735] 96.一种增加动物胃肠道微生物群中梭菌目细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予动物饲料或动物饲料添加剂,该动物饲料或动物饲料添加剂包括一种或多种具有植
酸酶活性的多肽和一种或多种具有溶菌酶活性的多肽,其中:
[0736] (a)该具有溶菌酶活性的多肽是来自糖基水解酶家族25;并且
[0737] (b)与相同饲料但不含溶菌酶的动物饲料相比,该动物饲料或动物饲料添加剂改善了动物的欧洲生产效率因子(EPEF)和/或饲料转化率(FCR)。
[0738] 97.一种增加动物的胃肠道微生物群中的梭菌目细菌群体的方法,该方法包括向该动物给予如项目1至42中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或其粒化动物饲料。
[0739] 98.如项目96至97中任一项所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1%,例如至少1.5%、至少2%、至少2.5%、至少5%或至少7.5%。
[0740] 99.如项目96至97中任一项所述的方法,其中该梭菌目细菌的比例增加至少1.025倍,例如至少1.05倍、至少1.075倍、至少1.1倍、至少1.15倍或至少1.2倍。
[0741] 100.如项目92至99中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的欧洲生产效率因子(EPEF)改善至少1.5%,优选至少2.0%、至少2.5%、至少3%、至少
3.5%、至少4%,或最优选至少5%。
[0742] 101.如项目92至100中任一项所述的方法,其中该动物饲料或动物饲料添加剂将动物的饲料转化率(FCR)改善至少1.25%,优选至少1.5%,或最优选至少1.75%。
[0743] 102.如项目4至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或者如项目50至55或92至95中任一项所述的方法,其中在用抗生素处理后,栖粪杆菌属细菌的比例增加。
[0744] 103.如项目4至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或者如项目50至55或92至95中任一项所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33至54中的任一
个具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少
97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。
[0745] 104.如项目4至10中任一项所述的动物饲料或动物饲料添加剂或者如项目50至55或92至95中任一项所述的方法,其中该栖粪杆菌属细菌包括与SEQ ID NO:33具有至少
90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少
98%、至少99%、或100%序列一致性的16S rRNA。
[0746] 实例
[0747] 菌株
[0748] 根据vor Schnimmelkulture中央局(Central Bureau vor Schnimmelkulture),由A.Yoneda在1984年从日本的津久井湖(Tsukui Lake)附近的猪粪便堆肥的污泥中分离出
嗜碱枝顶孢CBS 114.92。
[0749] 根据vor Schnimmelkulture中央局,C.Thom在1926年或之前从来自德国的土壤样品中分离出烟曲霉CBS 113.26。
[0750] 实例1:GH25溶菌酶的克隆、表达和纯化
[0751] 如WO 2013/076253的实例8中所述,将来自嗜碱枝顶孢CBS 114.92的GH25溶菌酶(SEQ ID NO:27)克隆并表达,并如实例5中所述的进行纯化。可替代地,可以如WO 2013/
076253的实例2中所述的将SEQ ID NO:27克隆并表达。
[0752] 可以使用基础分子技术克隆来自烟曲霉的GH25溶菌酶(SEQ ID NO:29)(Ausubel等人,2003,Curr.Prot.Mol.Biol.[当前蛋白质与分子生物学],John Wiley&Sons[约翰威
利父子公司],Cambridge[坎布里奇],美国;Christgau等人1995,Curr.Genet.[当前基因组
学]27,135-141)。
[0753] 实例2:植酸酶活性的测定
[0754] 将适当稀释于0.25M醋酸钠、0.005%(w/v)Tween-20(pH 5.5)中的75微升含植酸酶的酶溶液分配在微量滴定板孔例如NUNC 269620中,并且添加75微升底物(通过将100mg
来自稻的植酸钠(奥德里奇目录号274321)溶解于10ml 0.25M醋酸钠缓冲液(pH 5.5)中来
制备)。将板密封并孵育15min,在750rpm在37℃下振荡。在孵育之后,添加75微升终止剂(该终止剂是通过将10ml钼酸盐溶液(10%(w/v)七钼酸铵于0.25%(w/v)氨溶液中)、10ml
铵(来自Bie&Berntsen的0.24%商业产品,目录号LAB17650)和20ml 21.7%(w/v)硝酸混合
来制备),并且在微量滴定板分光光度计中测量405nm处的吸光度。植酸酶活性以FYT单位表
示,一个FYT是酶在上述条件下每分钟释放1微摩尔无机正磷酸盐的量。所测量的植酸酶活
性的绝对值可以通过参考从无机磷酸盐的适当稀释物制得的标准曲线或通过参考从具有
已知活性的植酸酶酶制剂的稀释物得到的标准曲线获得(这种具有已知活性的标准酶制剂
经要求是可从DK-2880巴格斯维尔德的克罗格休约尔36的诺维信公司(Novozymes A/S,
Krogshoejvej 36,DK-2880Bagsvaerd)获得的)。
[0755] 实例3:溶菌酶活性的测定
[0756] 通过在分光光度计中测量被测的重悬溶壁微球菌ATTC号4698(西格玛奥德里奇M3770)或不死微小杆菌(DSM14481)的溶液在540nm下的吸光度/光密度的减少(下降)测定
溶菌酶的活性。
[0757] 溶壁微球菌底物的制备
[0758] 在使用前,将这些细胞重悬在柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 6.5)中,至0.5mg细胞/mL的浓度并且在540nm下测量光密度(OD)。然后调节细胞悬液,这样使得细胞浓度等同于
OD540=1.0。然后在使用之前将调节的细胞悬液冷冻存储。在4小时内使用重悬的细胞。
[0759] 不死微小杆菌底物的干细胞的制备
[0760] 使不死微小杆菌(DSM14481)的培养物在500mL摇瓶中,在30℃、250rpm下,在100mL LB培养基(Fluka 51208,25g/L)中生长过夜。然后将过夜的培养物在20℃和5000g下离心10
分钟,并且然后将沉淀用无菌的milliQ水洗涤两次,并且将其重悬于Milli-Q水中。将洗涤
的细胞在13000rpm下离心1分钟并且倾析尽可能的上清液。将洗涤的细胞在真空离心机中
干燥1小时。将细胞沉淀重悬于柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 4、5或6)中,这样使得在540nm处
的光密度(OD)=1。
[0761] 在浊度测定中测量溶菌酶抗微生物活性
[0762] 将待测的溶菌酶样品稀释于柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 4、5或6)中,至浓度为100-200mg酶蛋白/L,并且将其保持在上直到使用。在一个96孔微量滴定板(Nunc)中,向每个
孔中添加200μL的底物,并且将该板在VERSAmax酶标仪(分子设备公司(Molecular 
Devices))中在37℃下孵育5分钟。孵育后,在540nm处测量每个孔的吸光度(起始值)。为了
开始测量活性,向每个底物(200μL)中添加20μL的稀释的溶菌酶样品并且在37℃下,在
540nm处开始吸光度的动力学测量,持续最少30分钟长达24小时。监测每个孔在540nm处的
测量的吸光度并且如果该溶菌酶具有溶菌酶活性,那么看到吸光度随着时间下降。结果呈
现于下表2中。
[0763] 表2:如通过光密度下降所测量的针对溶壁微球菌和不死微小杆菌的溶菌酶活性
[0764]
[0765] 1-意指没有显著效应;+意指小的效应;++意指中等效应;+++意指大的效应。括号内的pH值列出了基于溶菌酶-底物组合的测定pH。
[0766] 数据证实来自原鸡的GH22溶菌酶、来自嗜碱枝顶孢的GH25溶菌酶和来自烟曲霉的GH25溶菌酶都具有溶菌酶活性。
[0767] 实例4:抗微生物活性的测定
[0768] 使用如先前Lehrer等人(Lehrer RI,Rosenman M,Harwig SS等人(1991),“Ultrasensitive assays for endogenous antimicrobial polypeptides[对于内源性抗
微生物多肽的超灵敏测定]”,J Immunol Methods[免疫学方法杂志],137:167–73)所述的
RDA但对其进行若干改进,对来自烟曲霉的GH25溶菌酶(SEQ ID NO:29)、来自嗜碱枝顶孢的
GH25溶菌酶(SEQ ID NO:27)和来自原鸡的GH22溶菌酶(鸡蛋清溶菌酶(HEWL),西格玛,
62971,SEQ ID NO:28)对抗产气荚膜梭菌DSM756的抗微生物活性进行测试。
[0769] 简言之,通过在来自LB(Luria-Bertani)琼脂板(西格玛L3027)上的冷冻储备液中划出产气荚膜梭菌DSM756制备RDA细菌,并将板在厌氧条件下(Anaerogen,Oxoid)在37℃下
在罐中孵育过夜。次日将菌落悬浮于0.9%NaCl中,并将悬浮液调整至麦氏浊度标准1
(McFarland std.1)。加入87%无菌甘油,以给出最终甘油浓度为20%,并且将细胞在-80℃
下冷冻直至使用。为了估计每毫升RDA细菌的菌落形成单位(CFU),从在0.9%NaCl中的冷冻
储备液制备10-倍连续稀释物,并且将100μl稀释物铺板在LB琼脂板(西格玛L3027)上并在
厌氧条件下(Anaerogen,Oxoid)在罐中在37℃孵育过夜。
[0770] 当制备RDA板时,将具有琼脂的肉汤培养基熔化并冷却至42℃。在实验中测试了两种培养基:
[0771] a)1/2米勒-辛顿(Mueller-Hinton)肉汤(MHB)(西格玛/Fluka,90922)(即用4M HCl调节至pH 6,并用水1:1稀释),含1.5%琼脂糖,以及
[0772] b)1/10米勒-辛顿肉汤(MHB)(西格玛/Fluka,90922)(即用水1:9稀释),含1%琼脂糖。
[0773] 对于每个测定板,加入30ml熔化的培养基以获得约5.0×105cfu/mL的产气荚膜梭菌DSM756,并将其倒入单孔omnitray(Nunc)板中。将omnitray板由TSP板(Nunc)覆盖并且留
固化(在室温或低于室温)。之后,将TSP板移除;留下96孔,其中可以测试10μL感兴趣的化合物。
[0774] 每孔点10μl的测试溶液,并且将板在37℃下在罐中在厌氧条件下(Anaerogen,Oxoid)孵育过夜。第二天,透明区指示测试细菌生长的抑制,并且由此指示抗微生物活性。
对于采用1/2MHB的RDA板,通过用MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四氮唑,
一种黄色的四唑)着色将透明区可视化,MTT在活细胞中被还原为紫色的甲臜(Mosmann,Tim
(1983),“Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:application 
to proliferation and cytotoxicity assays[用于细胞生长和存活的快速比色测定:对
增殖和细胞毒性分析的应用]”,Journal of Immunological Methods[免疫学方法杂志]65
(1–2):55–63)。这一着色为活细胞提供黑色着色并且不为没有活细胞的透明区提供着色。
[0775] 包括杆菌肽锌盐(西格玛B-8800)(50μg/ml)作为阳性对照,并使用100μg/ml的溶液测试溶菌酶。结果呈现于下表3中。
[0776] 表3:通过RDA测量的对抗产气荚膜梭菌的抗微生物活性
[0777]
[0778]
[0779] *MTT着色后可见的生长的不完全抑制
[0780] 来自烟曲霉和来自嗜碱枝顶孢的GH25溶菌酶在两种测试条件下均显示出针对产气荚膜梭菌DSM756的活细胞的抗微生物活性。对于来自烟曲霉的GH25溶菌酶,大约7-9mm的
区域存在于接种有酶的孔周围。对于来自嗜碱枝顶孢的GH25溶菌酶,11mm的区域存在于1/
10MBH(pH 7)中,而在1/2MHB(pH 6)中,直径为4-6mm的较小透明区和20mm的较大不完全透
明区二者均存在于接种有酶的孔周围。在用MTT着色后较大不完全透明区变得存在。对于
HEWL,在1/2MHB(pH 6)中观察到没有抑制区,而在1/10MHB(pH 7)生长抑制存在并且导致9-
10mm的抑制区。
[0781] 总之,虽然HEWL仅在1/10MHB(pH 7)中抑制生长,但两种GH25溶菌酶出人意料地抑制了在两组条件下产气荚膜梭菌DSM756的生长。
[0782] 实例5:体内肉鸡试验1
[0783] 处理与饮食组成
[0784] 基础饮食以小麦、黑麦、豆粕、鱼粉和葵花籽粕为基础,并根据生长中的动物不断改变需求分两个阶段配制并调整(起始期和生长期分别为7天和17天)。除了可代谢能量、磷
和钙之外,饮食组成被设计成满足或超过要求(表5.2、5.3和5.4)。
[0785] 起始饲料不包含溶菌酶或植酸酶,但供应于7天的相似饲养期,并对鸡引入生长饲料中的主要饮食组分。在生长期期间,将溶菌酶(SEQ ID NO:27)以50g/t作为液体配制品施
用,并且以推荐剂量(表5.1)补充植酸酶( Blue,AB酶或 HiPhos,
帝斯曼营养产品公司)。 Blue是可商购的动物饲料大肠杆菌变体植酸酶,而
HiPhos是可商购的动物饲料柠檬酸杆菌属植酸酶。
[0786] 饮食中没有补充其他酶或任何抗球虫药。
[0787] 这些饮食是在专门从事实验饮食的饲料厂里制备的,并且糊状饲料随意喂给鸡。
[0788] 表5.1:研究设计
[0789]
[0790]
[0791] 表5.2:饮食组成(g/kg)
[0792]阶段 起始期(第1天-第7天) 生长期(第8天-第24天)
小麦 511.25 473.90
黑麦 50.00 100.00
豆粕(48%XP) 261.00 207.00
豆壳1 29.00 23.00
鱼粉70%XP 50.00 20.00
葵花籽粕(低XP)   70.00
动物脂肪(Lard)   30.00
大豆油 62.50 42.00
预混物 5.00 5.00
细石灰(Lime fine) 13.50 13.50
磷酸一钙 9.50 4.80
盐 1.20 1.30
NaHCO3 2.10 2.60
L-赖氨酸盐酸盐 1.35 2.70
DL-甲硫氨酸 2.60 2.60
L-苏氨酸 0.95 1.15
L-缬氨酸 0.05 0.45
[0793] 1为了模拟低蛋白SBM,将豆壳引入饮食中,所述低蛋白SBM作为单一成分是不可得的
[0794] 表5.3:预期和分析的营养物浓度(g/kg)和可代谢能量(AMEN,MJ/kg)
[0795]
[0796]
[0797] 表5.4:预混物组成
[0798]
[0799]
[0800] 动物和圈舍
[0801] 在孵出当天,从Cobb Germany Avimex GmbH,Wiesenena( 80,04509Wiesenena)获得雄性日龄肉鸡型鸡(Cobb 500雌性亲本系的雄性副产物)。
[0802] 将这些鸡以22只鸡为组随机分配到实验圈栏(约3平方米)中,圈栏配备有钟型饮水器和圆形喂食器。在同等饲养7天后,择出明显轻的鸡,每个圈栏中鸡数目减少至20只。立即通过统计学评价记录的体重(BW)。为了确保处理之间平均BW和处理内的变化相似,对小
鸡的BW-布局的统计学评价进行协调,其方式为使得平均BW的圈栏内变化和处理间差异最
小化。
[0803] 饲料和水是自由可获得的,记录饲料消耗。最初的垫料由木屑组成。在实验期间,将饮用者周围的结排泄物碎片移除数次,并在需要时加入更多的垫料。根据培育者的
建议管理光照和温度方案。
[0804] 第18天,将鸡针对新城疫和甘保罗病进行例行疫苗接种。
[0805] 数据记录和性能参数的计算
[0806] 在放置时和每次育肥期结束时,对鸡进行称重(按组)。在最后的称重中,对鸡进行单独称重。填补喂食器时连续记录提供的饲料;在每次育肥期结束时记录喂食器中剩余的
饲料。根据这些数据计算饲料消耗量。
[0807] 发生时记录损失和剔除的重量。
[0808] 每只鸡的每日BW增加(BW增加)和饲料转化率(FCR)计算如下:
[0809] BW增加:每只鸡的BW在结束时和研究开始时之间的差别,再除以天数
[0810] FCR:一个圈栏的总饲料消耗除以该圈栏的总BW增加(总BW增加=结束时总BW+去除和损失的重量-开始时的总BW)
[0811] 欧洲生产效率因子(EEF)计算如下:
[0812] EEF=[(存活率,%×BW增加,kg)/(研究持续天数×FCR)]×100。
[0813] 统计学分析
[0814] 统计单位是‘圈栏’。在进行统计分析之前,进行异常值检验(Grubb检验)。作为这个程序的结果,没有数据被排除在数据集之外。
[0815] 采用溶菌酶和植酸酶补充的固定效应以及它们的相互作用,使用两因素ANOVA(程序PROC GLM)分析性能数据。在每个主因素的不同水平之间进行差异研究(图基(Tukey)检
验),在适当时考虑多重比较(植酸酶)。
[0816] 所有统计分析均使用SAS 9.3软件包进行。
[0817] 结果与讨论
[0818] 对于单独处理,贯穿整个研究的损失和剔除范围为从1.4%到2.3%。没有检测到溶菌酶水平或植酸酶之间的差异。
[0819] 表5.5:使用溶菌酶(SEQ ID NO:27)和 Blue(SEQ ID  NO:4)或HiPhos(SEQ ID NO:10)的FCR和EPEF结果
[0820]
[0821] 结果显示,与当饮食仅包含植酸酶时相比,当将SEQ ID NO:27的GH25溶菌酶添加至肉鸡饮食时,FCR和EPEF二者均有改善。
[0822] 实例6:体内肉鸡试验2
[0823] 除了如表6.1中所示使用2种不同的植酸酶以外,使用相同的设置、饮食和鸡的数目,如实例5中所述重复该研究。 PHY是可商购的动物饲料布丘氏菌属植酸酶,而
NP是可商购的动物饲料隔孢伏革菌(Peniophora lycii)变体植酸酶。
[0824] 表6.1:研究设计
[0825]
[0826] 结果与讨论
[0827] 对于单独处理,贯穿整个研究的损失和剔除范围为从0.8%到2.0%。没有检测到溶菌酶水平或植酸酶之间的差异。
[0828] 表6.2:使用溶菌酶(SEQ ID NO:27)和 PHY(SEQ  ID  NO:17)或NP(SEQ ID NO:22)的FCR和EPEF结果
[0829]
[0830] 结果显示,与当饮食仅包含植酸酶时相比,当将SEQ ID NO:27的GH25溶菌酶添加至肉鸡饮食时,FCR和EPEF二者均有改善。
[0831] 实例7:体内肉鸡试验3
[0832] 除了如表7.1中所示使用3种不同的溶菌酶以外,使用相同的设置、饮食和鸡的数目,如实例5中所述重复该研究。 HiPhos是可商购的动物饲料柠檬酸杆菌属
植酸酶。
[0833] SEQ ID NO:27是来自嗜碱枝顶孢的GH25溶菌酶,SEQ ID NO:28是来自原鸡的GH22溶菌酶(鸡蛋清溶菌酶,HEWL(西格玛62971,Lot 62971-50G-F)),并且SEQ ID NO:29是来自
烟曲霉的GH25溶菌酶。
[0834] 表7.1:研究设计
[0835]
[0836] 结果与讨论
[0837] 对于单独处理,贯穿整个研究的损失和剔除范围为从0.9%到1.8%。没有检测到不同的溶菌酶之间的差异。
[0838] 由于试验期间的细菌感染,在第5天至第11天(含)向肉鸡给予在水中的Methaxasol-T。
[0839] 表7.2:使用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:27)、GH22溶菌酶(SEQ ID NO:28)或GH25溶菌酶(SEQ ID NO: 29)和 HiPhos(SEQ ID NO:10)的FCR和EPEF结果
[0840]
[0841] 结果显示植酸酶和鸡蛋清溶菌酶(SEQ ID NO:28)的组合对鸡的性能产生不利影响,导致FCR和EPEF更差。然而,出人意料的是两种GH25溶菌酶(SEQ ID NO:27和29)与植酸
酶的组合均改善FCR和EPEF。
[0842] 结果还显示,甚至在用抗生素Methaxasol-T治疗7天后,给予了任一种GH25溶菌酶的肉鸡的FCR和EPEF也得以改善,这也是出人意料的,因为众所周知仅抗生素改善动物性
能。
[0843] 实例8:体内肉鸡试验4
[0844] 处理与饮食组成
[0845] 基础饮食以小麦、黑麦、豆粕、鱼粉和葵花籽粕为基础,并根据生长中的动物不断改变需求分两个阶段配制并调整(起始期和生长期分别为6天和18天)。除了可代谢能量、磷
和钙之外,饮食组成被设计成使用如表5.4中所述的预混物组成满足或超过要求(表8.2和
8.3)。
[0846] 起始饲料不包含溶菌酶,但供应于6天的相似饲养期,并对鸡引入生长饲料中的主要饮食组分。在生长期期间,将溶菌酶(SEQ ID NO:30)以25g/t粒化后作为液体配制品施
用。饮食中没有补充其他酶或任何抗球虫药。饮食包含推荐水平的商业植酸酶(Phyzyme 
XP10000TPT,50g/吨(500FTU/kg))。Phyzyme XP10000TPT是可商购的动物饲料大肠杆菌变
体植酸酶。
[0847] 这些饮食是在专门从事实验饮食的饲料厂里制备的,并且粒化饲料随意喂给鸡。
[0848] 表8.1:研究设计
[0849]
[0850] 数据记录和统计分析是如实例5所述进行。
[0851] 表8.2:饮食组成(g/kg)
[0852]阶段 起始期(第1天-第6天) 生长期(第7天-第24天)
小麦 508.55 466.4
黑麦 50 100
豆粕(48%XP) 261 216
豆壳1 29 20
鱼粉70%XP 50 20
葵花籽粕(低XP)   70
动物脂肪(Lard)   30
大豆油 65 45
预混物 5 5
细石灰(Lime fine) 13.3 11.8
磷酸一钙 9.5 5
盐 1.2 1.3
NaHCO3 2.1 2.6
L-赖氨酸盐酸盐 1.55 2.7
DL-甲硫氨酸 2.7 2.6
L-苏氨酸 1 1.1
L-缬氨酸 0.1 0.5
[0853] 1为了模拟低蛋白SBM,将豆壳引入饮食中,所述低蛋白SBM作为单一成分是不可得的
[0854] 表8.3:预期和分析的营养物浓度(g/kg)和可代谢能量(AMEN,MJ/kg)
[0855]
[0856] 动物和圈舍
[0857] 在孵出当天,从Geflügelhof  (Pabsdorfer Weg 9,39291 )获得雄性日龄Ross 308肉用仔鸡。
[0858] 将这些鸡以42只鸡为组随机分配到实验圈栏(约3平方米)中,圈栏配备有钟型饮水器和圆形喂食器。
[0859] 在同等饲养6天后,择出明显轻的鸡,每个圈栏中鸡数目减少至40只。立即通过统计学评价记录的体重(BW)。为了确保处理之间平均BW和处理内的变化相似,对小鸡的BW-布
局的统计学评价进行协调,其方式为使得平均BW的圈栏内变化和处理间差异最小化。
[0860] 饲料和水是自由可获得的,记录饲料消耗。最初的垫料由木屑组成。在实验期间,将饮用者周围的结块的排泄物碎片移除数次,并在需要时加入更多的垫料。
[0861] 根据培育者的建议管理光照和温度方案。第14天,将鸡针对新城疫和甘保罗病进行例行疫苗接种。
[0862] 接种疫苗后,鸡群产生了一般的细菌感染,导致损失增加。因此,第18天开始用Enro-Sleecol进行抗生素治疗三天。
[0863] 结果与讨论
[0864] 在整个研究中,在12天和18天喂食期中,单独处理的损失和剔除范围分别是从2.7%至4.1%和从3.4%至5.8%。没有检测到溶菌酶或植酸酶补充之间的差异。
[0865] 表8.4:使用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)和Phyzyme XP10000TPT的FCR和EPEF结果
[0866]
[0867] 结果显示大肠杆菌植酸酶和25ppm的GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)的组合相对于相同的单独植酸酶而言出人意料地改善了FCR和EPEF二者。
[0868] 结果还显示,甚至在用抗生素Enro-Sleecol治疗3天后,FCR和EPEF也得以改善,这也是出人意料的,因为众所周知仅抗生素改善动物性能。
[0869] 实例9:体内肉鸡试验5
[0870] 处理与饮食组成
[0871] 基础饮食以小麦、黑麦、豆粕、鱼粉和葵花籽粕为基础,并根据生长中的动物不断改变需求分两个阶段配制并调整(起始期和生长期分别为7天和18天)。除了可代谢能量、磷
和钙之外,饮食组成被设计成使用如表5.4中所述的预混物组成满足或超过要求并且非常
相似于表8.2和8.3中所述的。
[0872] 起始饲料不包含任何溶菌酶,但供应于7天的相似饲养期,并对鸡引入主要饮食组分。在生长饲料中,如表9.1所示,使用SEQ ID NO:30的溶菌酶或鸡蛋清溶菌酶(SEQ ID NO:
28)。将测试产品作为液体配制品施加到糊状饮食中。起始饮食和生长饮食包含抗球虫药
(拉沙里菌素(Lasalocid),100ppm)。这些饮食是在专门从事实验饮食的饲料厂里制备的,
并且糊状饲料随意喂给鸡。
[0873] 表9.1:研究设计
[0874]
[0875]
[0876] 1预期圈栏数/用于数据评价的圈栏数。弃去的圈栏遭受鸡穿越圈栏隔离物。
[0877] 数据记录和统计分析是如实例5所述进行。
[0878] 动物和圈舍
[0879] 在孵出当天,从 (Pabsdorfer Weg 9,39291 )获得雄性日龄Ross 308肉用仔鸡。
[0880] 将这些鸡以42只鸡为组随机分配到实验圈栏(约3平方米)中,圈栏配备有钟型饮水器和圆形喂食器。
[0881] 在同等饲养7天后,择出明显轻的鸡,每个圈栏中鸡数目减少至40只。立即通过统计学评价记录的体重(BW)。为了确保处理之间平均BW和处理内的变化相似,对小鸡的BW-布
局的统计学评价进行协调,其方式为使得平均BW的圈栏内变化和处理间差异最小化。
[0882] 饲料和水是自由可获得的,记录饲料消耗。最初的垫料由木屑组成。在实验期间,将饮用者周围的结块的排泄物碎片移除数次,并在需要时加入更多的垫料。
[0883] 根据培育者的建议管理光照和温度方案。第15天,将鸡针对新城疫和甘保罗病进行例行疫苗接种。
[0884] 结果与讨论
[0885] 在整个研究中,贯穿整个研究的损失和剔除范围为从1.4%到3.6%。
[0886] 表9.2:使用GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)或GH22溶菌酶(SEQ ID NO:28)和NP(SEQ ID NO:22)的FCR和EPEF结果
[0887]
[0888] 结果显示植酸酶和鸡蛋清溶菌酶(SEQ ID NO:28)的组合对鸡的性能产生不利影响,导致FCR和EPEF更差。然而,出人意料的是GH25溶菌酶(SEQ ID NO:30)与植酸酶的组合
改善FCR和EPEF。
[0889] 实例10:来自体内肉鸡试验4(实例8)和体内肉鸡试验5(实例9)的微生物群分析。
[0890] 如下所述对来自体内试验4和5(分别描述于实例8和9)的肉鸡的微生物群进行分析。对于体内试验4(实例8),选择来自每个处理的45只鸡(各自代表15个单独的圈栏)以分
析微生物群。对于体内试验5(实例9),选择来自处理1和2每一个中的64只鸡以及来自处理3
的48只鸡(各自代表16个单独的圈栏)以分析微生物群。
[0891] 取样
[0892] 在饲养试验结束时,将选择用于微生物群分析的鸡宰杀以收集来自两个盲肠的肠内容物。屠宰后将鸡直接解剖,并将肠取出。然后通过切割离回盲部近约1厘米处的盲肠,将盲肠与肠其余部分分开。这是通过使用剪刀(在乙醇浴中灭菌)或通过使用一次性手术刀完
成的。将两个盲肠的内容物一起倒入一个15ml管中。将管的内容物与接种针混合,并将消化
物以小的等分试样(50-500mg)分布到4个分开的Eppendorf管中。将样品在干冰上快速冷冻
并置于-80℃冷冻箱中直至进一步处理。
[0893] DNA提取
[0894] 根据Macherey-Nagel公司的“ Soil”方案提取DNA。简短地,将来自鸡消化道的每个单独样品(50-250mg)悬浮在缓冲液中,将抑制剂与DNA分离。随后进行细菌细
胞裂解,包括珠磨法。然后将DNA在离液盐的存在下吸附到柱上。使用高盐液体和乙醇的洗
涤步骤以去除污染物,并最后使用低盐或水洗脱将DNA洗脱。
[0895] PCR扩增16S RNA基因
[0896] 提取DNA后,将提取的DNA用作靶向16S rRNA基因的V3-V4可变区的PCR反应模板。
[0897] 使用10-15ng提取的DNA作为模板,并且PCR反应(25μL)包含dNTP(各400nM)、Hot Start II DNA聚合酶HF(2mU)、1× 高保真缓冲液(新英格兰生物
实验室公司(New England Biolabs Inc.),美国)以及含有如下V3-4特异性引物的条形码
化文库衔接子(400nM):
[0898] 扩增16S RNA基因的V3-4区
[0899] 正向引物(341F):CCTACGGGNGGCWGCAG(SEQ ID NO:31)
[0900] 反向引物(805R):GACTACHVGGGTATCTAATCC(SEQ ID NO:32)
[0901] PCR设置:在98℃2分钟的起始变性;30个循环:98℃30秒,52℃30秒,72℃30秒;以及72℃最终延伸5分钟。使用AMpure XP珠粒方案(Beckmann Coulter,美国)纯化扩增子文库。
[0902] DNA测序
[0903] 将纯化的测序文库合并,并使用MiSeq试剂盒v3,600循环(Illumina)按照在MiSeq上制备和加载样品的标准指南在MiSeq(Illumina)上对样品进行配对末端测序(280bp×
260bp读段,8bp双指标)。加入10%Phix对照文库或基因组DNA以克服通常在扩增子样品中
观察到的低复杂度问题。
[0904] 生物信息学处理,OTU聚类和分类
[0905] 使用Trimmomatic v.0.32(Bolger,Anthony M.,Marc Lohse,和Bjoern Usadel.2014.“Trimmomatic:A flexible trimmer for Illumina sequence data.
[Trimmomatic:Illumina序列数据的灵活修整器]”Bioinformatics[生物信息学]30(15):
2114–20.doi:10.1093/bioinformatics/btu170),设置为SLIDINGWINDOW:5:3和MINLEN:
275,对正向和反向读段进行修整以保证质量。使用FLASH v.1.2.7(Magoc,Tanja,和Steven 
L Salzberg.2011“. FLASH:fast length adjustment of short reads to improve 
genome assemblies.[FLASH:短读段的快速长度调整以改善基因组组装]”Bioinformatics
[生物信息学](英国牛津)27(21):2957–63,doi:10.1093/bioinformatics/btr507),设置
为-m 25-M 200,对修整的正向和反向读段进行合并。将合并的读段解复制并格式化以用于
UPARSE工作流程(Edgar,Robert C.2013.“UPARSE:highly accurate OTU sequences from 
microbial amplicon reads.[UPARSE:来自微生物扩增子读段的高度准确的OTU序列]”
Nature Methods[自然方法]10(10):996–8.doi:10.1038/nmeth.2604)。使用具有默认设置
的usearch v.7.0.1090-cluster_otus命令对解复制的读段进行聚簇。使用usearch 
v.7.0.1090-usearch_global命令(-id 0.97)估算OTU丰度。使用RDP分类器(Wang,Qiong,
George M Garrity,James M Tiedje,和James R Cole.2007.“Naive Bayesian 
classifierfor rapid assignment of rRNA sequences into the new bacterial 
taxonomy[将rRNA序列快速指定到新的细菌分类的本土贝叶斯分类器].”Applied and 
Environmental Microbiology[应用与环境微生物学]73(16):5261–7.doi:10.1128/
AEM.00062-07.)对分类进行指定,如在QIIME中的parallel_assign_taxonomy_rdp.py脚本
(Caporaso,J Gregory,Justin Kuczynski,Jesse Stombaugh,Kyle Bittinger,Frederic 
D Bushman,Elizabeth K Costello,Noah Fierer,等人2010“. QIIME allows analysis of 
high-throughput community sequencing data.[QIIME允许分析高通量群落测序数据]”
Nature Methods[自然方法]7(5),Nature Publishing Group[自然出版集团]:335–6.doi:
10.1038/nmeth.f.303)中使用MiDAS数据库v.1.20(McIlroy,Simon Jon,Aaron Marc 
Saunders,Mads Albertsen,Marta Nierychlo,Bianca McIlroy,Aviaja Anna Hansen,
 Michael Karst,Jeppe Lund Nielsen,和Per Nielsen.2015.“MiDAS:the 
field guide to the microbes of activated sludge.[MiDAS:针对活性污泥微生物的野
外指南]”Database[数据库]2015(2):bav062.doi:10.1093/database/bav062)实施的。
[0906] 统计学分析
[0907] 将结果通过Rstudio IDE使用ampvis软件包v.1.9.1以R(R Core Team 2015)(Albertsen,Mads,  M Karst,Anja S Ziegler,Rasmus H Kirkegaard,和Per H 
Nielsen.2015.“Back to basics–the influence of DNA extraction and primer 
choice on phylogenetic analysis of activated sludge communities[回到基础:DNA
提取和引物选择对活性污泥群落系统发育分析的影响]”,PLoS ONE 10(7):e0132783,doi:
10.1371/journal.pone.0132783)进行分析,该软件包是建立在用于以差异丰度检测物种
的R软件包DESeq2(Love,Michael I.,Wolfgang Huber,和Simon Anders.2014“.Moderated 
estimation of fold change and dispersion for RNA-seq data with DESeq2.[采用
DESeq2针对RNA-seq数据对倍数变化和分散的适中估算]”Genome Biology[基因组生物学]
15(12):550.doi:10.1186/s13059-014-0550-8.)和用于排序和排列manova分析的vegan 
(Oksanen,Jari,Guillaume F Blanchet,Roeland Kindt,Pierre Legendre,Peter 
R.Minchin,R.B.O’Hara,Gavin L.Simpson,Peter Solymos,Henry H.Stevens,和Helene 
Wagner.2015“.vegan:Community Ecology Package[vegan:群落生态学软件包]”)上的。将圈栏用作微生物群统计分析的统计单位,这意味着将所有细菌的丰度在每个单独的圈栏中
的所有鸡上进行平均化。处理组之间具有差异丰度的物种的检测是通过针对多重检验调整
的p值(padj)进行评价,使得认为低于0.05的padj值是显著的。
[0908] 结果
[0909] 下面的表9.1示出用SEQ ID NO:30处理后鸡消化道微生物群组成的总体变化。
[0910] 表9.1:与对照组相比,观察到微生物群组成的转变
[0911]试验 溶菌酶 浓度 显著性1 图
体内试验4 SEQ ID NO:30 25ppm +++ 图1
体内试验5 SEQ ID NO:30 50ppm +++ 图2
体内试验5 SEQ ID NO:28 50ppm - 图3
[0912] 1显著变化(+++),p值<0.05,无显著变化(-)
[0913] 在用SEQ ID NO:30的溶菌酶处理后,观察到鸡消化道中微生物组成的转变,并且该效应与鸡的增加的欧洲生产效率因子(EPEF)相关联。这种转变对于体内试验4和5是显著
的(表9.1)。在用鸡蛋清溶菌酶(SEQ ID NO:28的溶菌酶)处理后,未观察到鸡消化道中微生
物组成的显著变化。
[0914] 下面的表9.2和9.3示出用SEQ ID NO:30处理后鸡消化道微生物群组成在操作分类单位(OTU)水平上的总体变化。
[0915] 表9.2:来自体内试验4的鸡消化道微生物群在OTU水平上的变化
[0916]
[0917] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)3分类学指定
[0918] 表9.3:来自体内试验5的鸡消化道微生物群在OTU水平上的变化
[0919]
[0920] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)3分类学指定
[0921] 用SEQ ID NO:30的处理导致鸡消化道中栖粪杆菌属细菌物种的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联,并且该细菌物种与物种普氏栖粪杆菌
具有96%的一致性。
[0922] 下面的表9.4和9.5示出用SEQ ID NO:30处理后鸡消化道微生物群组成在属水平上的总体变化。
[0923] 表9.4:来自体内试验4的鸡消化道微生物群在属水平上的变化
[0924]属水平 p值 padj 对照1 溶菌酶2 变化 比率
栖粪杆菌属 0.0001 0.0018 34.2551 54.7182 20.4632 1.5974
[0925] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)
[0926] 表9.5:来自体内试验5的鸡消化道微生物群在属水平上的组成
[0927]属水平 p值 padj 对照1 溶菌酶2 变化 比率
栖粪杆菌属 0.0000 0.0000 28.4033 50.3584 21.9551 1.7730
[0928] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)
[0929] 用SEQ ID NO:30的处理导致鸡消化道中栖粪杆菌属细菌的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联。
[0930] 下面的表9.6和9.7示出用SEQ ID NO:30处理后鸡消化道微生物群组成在目水平上的总体变化。
[0931] 表9.6:来自体内试验4的鸡消化道微生物群在目水平上的变化
[0932]目水平 p值 padj 对照 溶菌酶 变化 比率
梭菌目 0.3013 0.4522 75.7656 83.9434 8.1778 1.1079
拟杆菌目 0.2517 0.4522 10.4007 5.9195 -4.4812 0.5691
[0933] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)
[0934] 表9.7:来自体内试验5的鸡消化道微生物群在目水平上的变化
[0935]目水平 p值 padj 对照1 溶菌酶2 变化 比率
梭菌目 0.0001 0.0004 60.0516 74.4266 14.3750 1.2394
拟杆菌目 0.0773 0.1368 21.4920 9.6368 -11.8552 0.4484
[0936] 1处理1(无溶菌酶);2处理2(溶菌酶,SEQ ID NO:30)
[0937] 用SEQ ID NO:30的处理导致鸡消化道中梭菌目细菌的比例更高,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联。
[0938] 用SEQ ID NO:30的处理导致鸡消化道中拟杆菌目细菌的比例更低,并且这种转变与鸡的欧洲生产效率因子(EPEF)增加相关联。
[0939] 下表9.8列出了与对照组相比观察到的微生物群组成转变的总结。
[0940] 表9.8:与对照组相比,观察到微生物群组成的转变
[0941]
[0942] 1显著变化(+++),padj<0.05,数值变化(+)
[0943] 总之可以看出,GH25溶菌酶诱导了鸡消化道中微生物组成的显著变化,并且这种效应与鸡的增加的欧洲生产效率因子(EPEF)相关。用GH25溶菌酶的处理导致在栖粪杆菌属
内的细菌物种的比例更高,并且梭菌目细菌比例总体上增加,并且拟杆菌目细菌减少。
[0944] 可以进一步得出结论,即使来自体内试验4(实验8)的肉鸡经历抗生素Enro-Sleecol的3天处理,与当不给予抗生素时相比GH25溶菌酶也诱导了鸡消化道中微生物组成
的同样显著转变;即在栖粪杆菌属内的细菌物种的比例更高,梭菌目细菌比例总体上增加,
并且拟杆菌目细菌减少。
[0945] 本申请中描述并且要求保护的本发明不限于在此披露的特定方面的范围,因为这些方面旨在作为本发明若干方面的说明。任何等同方面预期在本发明的范围之内。实际上,
除本申请中所示和描述的那些之外,对于本领域的技术人员而言本发明的多种修改将从前
述的描述变得显然。这样的修改也旨在落入所附权利要求的范围内。在冲突的情况下,以包
括定义的本披露为准。
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