款冬酮的制备方法
阅读：0发布：2023-03-03
专利汇可以提供款冬酮的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种从款冬花中高效率制备款冬 酮 的方法，包括步骤：将中药材款冬花以石油醚浸泡提取，过滤，浓缩，浓缩液经一次 硅 胶柱层析，最后多次重结晶，得到纯度99％以上的款冬酮。其各项指标满足中药化学对照品原料要求，可以作为对照品使用，收率相比 现有技术 显著提高；该方法不依赖于超声设备、高速逆流色谱仪、超临界萃取等特殊设备，设备成本低，易于投产，使用操作方便，工艺过程中的 溶剂 都可回收再利用；而且单批次处理样品量大，可得到百克级产品；工艺稳定可靠，重现性好，有利于大规模的工业化生产。，下面是款冬酮的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种款冬酮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)取干燥款冬花药材，粉碎，按药材重量加石油醚8-30L/kg，浸泡12～72h提取，得提取液；过滤，减压浓缩得浸膏A；
(b)浸膏A采用硅胶柱层析，用石油醚:极性溶剂的洗脱剂洗脱，石油醚:极性溶剂的体积比范围为100:0～100:30，所述极性溶剂选自乙酸乙酯或丙酮，HPLC检测洗脱液，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱液，减压浓缩得浸膏B；
(c)将浸膏B重结晶，重结晶溶剂为体积比石油醚:乙醇:水＝(0～100)：(7～99)：(0.2～1.3)的混合溶剂，重结晶溶剂用量为3-10L/kg，重结晶温度为0～-25℃，经过2-4次重结晶得款冬酮产品。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，石油醚的用量为10～20L/kg，室温浸泡时间为24～48h。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(b)中，采用梯度洗脱方式，调节石油醚与极性溶剂的体积比，先以低极性的洗脱剂进行洗脱再逐渐提高洗脱剂的极性，至款冬酮被洗脱出来。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，先以石油醚:极性溶剂＝100:0洗脱，再逐渐提高极性溶剂的比例至石油醚:极性溶剂＝100:30。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(c)中，重结晶混合溶剂石油醚:乙醇:水的比例为(0～100)：(20～99)：(1～1.3)。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤(c)中，石油醚:乙醇:水的比例为(10～60)：(20～99)：(1～1.2)。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，重结晶次数为3次。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，冲结晶溶剂用量为5-7L/kg。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，重结晶温度为-10～-20℃。
10.一种采用权利要求1-9任一项所述的方法制备得到的款冬酮。
款冬酮的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及医药领域，发明涉及从中药款冬花中高效率制备款冬酮的方法。
背景技术
[0002] 款冬花(Farfarae Flos)为菊科植物款冬(Tussilago farfara L.)的干燥花蕾。款冬花性温，味辛、微苦，归肺经，具有润肺下气、止咳化痰等功能，临床用于治疗新久咳嗽、喘咳痰多、劳嗽咳血。款冬花中已报道的化学成分包括倍半萜类、三萜类、黄酮类、酚酸类、挥发油类、生物碱类等。其中，倍半萜类是款冬花的特征成分，也是化学和药理研究最为深入的一类成分。款冬酮是款冬花中特征的倍半萜成分，更是2015版《中国药典》关于款冬花质量控制的特征性指标。
[0003] 现有技术中关于款冬酮的制备方法有以下报道：
[0004] CN 102659585A公开了一种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，其方法步骤包括：超声提取，活性炭脱色，硅胶柱层析，高速逆流色谱分离制备获取款冬酮。该方法的缺陷在于：1)未分离得到纯的款冬酮，其产品中的新款冬花内酯也是倍半萜类化合物，结构接近，难以分离去除；2)超声提取尚无工业级设备；3)高速逆流色谱仪成本昂贵且无工业级设备，样品处理量小，分析型设备的处理量为微克级，不利于大规模的工业化生产；4)制备工艺对设备要求高，高速逆流色谱分离不普及，设备投入大，成本高，能耗高，收率低。
[0005] CN 103524342 A公开了一种采用可调三元溶剂体系快速分离款冬酮的方法，该方法步骤包括：石油醚反复超声提取制备原料浸膏，以三元溶剂系统高速逆流色谱萃取，获得款冬酮的方法。该方法的缺陷在于：1)收率低，500g原料仅制得97mg款冬酮；2)超声提取尚无工业级设备：3)高速逆流色谱仪成本昂贵且无工业级设备，样品处理量小，分析型设备的处理量为微克级，无法大规模和工业化生产；4)制备工艺对设备要求高，高速逆流色谱仪并不普及，设备投入大，成本高，产品纯度低(98.7％)。
[0006] CN 102633636 A公开了一种超临界流体萃取款冬花酮的方法，该方法步骤包括：原料用乙醇浸润，以超临界CO2设备提取，再经硅胶、氧化铝或氧化镁柱层析，多种有机试剂洗脱获取款冬酮。该方法的缺陷在于：1)收率低，10kg原料仅制得20～28mg款冬酮；2)超临界流体萃取对设备要求高；3)多种有机试剂混合洗脱不利于回收、污染环境，成本高，不利于工业化生产。
[0007] 目前款冬酮的制备技术现状为：1、依赖昂贵设备，如超临界流体色谱仪、高速逆流色谱仪，此类设备制备通量低，生产效率低下；2、制备所得产品纯度不高，结构相近的其他倍半萜类化合物杂质难以有效去除，一般HPLC纯度低于99％，且对残留溶剂、炙灼残渣、水分残留和TLC纯度均不做控制，难以达到中国食品药品检定研究院对中药化学对照品原料(作为药材质量控制)的纯度要求；3、现有方法制备收率低，仅20％～32％，其中，采用高速逆流色谱萃取等设备可达32％左右的收率但制备通量低，采用常规柱层析(萃取、硅胶和制备等)收率仅为20％左右。
发明内容
[0008] 本发明所要解决的技术问题在于，提供一种款冬酮的制备方法，具有收率高、纯度高、单批样品处理量大、设备要求低、易于工业化大规模生产的优点。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明提供的款冬酮的制备方法，包括以下步骤：
[0010] (a)取干燥款冬花药材，粉碎，按药材重量加石油醚8-30L/kg，室温浸泡12～72h提取，得提取液；过滤，减压浓缩得浸膏A；该试剂可回收循环使用。
[0011] (b)浸膏A采用硅胶柱层析，用石油醚:极性溶剂的洗脱剂进行洗脱，石油醚:极性溶剂的体积比范围为100:0～100:30，所述极性溶剂选自乙酸乙酯或丙酮，HPLC检测洗脱液，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱液，减压浓缩至稠膏，得款冬酮浸膏B。
[0012] (c)将浸膏B重结晶，重结晶溶剂为体积比石油醚:乙醇:水＝(0～100)：(7～99)：(0.2～1.3)的混合溶剂，重结晶溶剂用量按浸膏B重量计为3-10L/kg，重结晶温度为0～-25℃，经过2-4次重结晶得款冬酮产品。产品为款冬酮含量99％以上白色结晶。
[0013] 具体的，所述步骤(a)中，石油醚的用量优选为10～20L/kg，室温浸泡时间优选为24～48h。
[0014] 具体的，所述步骤(b)中采用梯度洗脱，调整石油醚与极性溶剂的体积比，先以低极性的洗脱剂进行洗脱，再以梯度洗脱方式逐渐提高洗脱剂的极性。优选的，先以石油醚:极性溶剂＝100:0洗脱，再逐渐提高极性溶剂的比例至石油醚:极性溶剂＝100:30。
[0015] 具体的，所述步骤(c)中，重结晶混合溶剂石油醚:乙醇:水的比例优选为(0～100)：(20～99)：(0.7～1.3)。优选的，所述步骤(c)中，石油醚:乙醇:水的比例优选为(10～
60)：(20～99)：(1～1.2)。
60)：(20～99)：(1～1.2)。
[0016] 具体的，重结晶次数优选为3次。
[0017] 具体的，重结晶溶剂用量优选为5-7L/kg。
[0018] 具体的，重结晶温度优选为-10～-20℃。
[0019] 本发明还提供一种通过上述方法制备得到的款冬酮，纯度达99％以上。
[0020] 本发明中的款冬花是指菊科植物款冬Tussilago farfar L.的干燥花蕾，按2015版《中国药典》款冬花的含量测定法检测本发明采用的款冬花干燥药材的款冬酮含量为0.060％。
[0021] 本发明提供的款冬酮的制备方法，收率高，每10kg款冬花干燥药材能制得3.05g～3.65g款冬酮，以干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率可达到50％以上，相比现有技术显著提高。
[0022] 本发明提供的款冬酮的制备方法，制得款冬酮的纯度高达99％以上，提高了款冬酮的产品质量，可以作为对照品使用。
[0023] 本发明提供的款冬酮的制备方法，采用硅胶柱层析和重结晶纯化，不依赖于超声设备、高速逆流色谱仪、超临界萃取等特殊设备，设备成本低，易于投产，使用操作方便，工艺过程中的溶剂都可回收再利用；而且单批次处理样品量大，可得到百克级产品；工艺稳定可靠，重现性好，有利于大规模的工业化生产。
[0024] 本发明的制备方法，解决了款冬酮难以大规模生产和产业化的技术难题，为款冬花的相关研究和质量控制提供物质基础，利于2015版《中国药典》的实施。
[0025] 本发明采用室温浸膏，经浓缩后硅胶柱层析，多次重结晶即能得到含量99％以上款冬酮，且各项指标满足中药化学对照品原料要求，收率大于50％；设备要求低，能耗低，操作简单，周期短，工艺稳定，成本低，可生产百克级产品，易于工业化、规模化生产，解决了款冬酮难以大规模生产和产业化的技术难题；产品纯度高，各项指标满足中药化学对照品原料要求，收率高，为款冬花的相关研究和质量控制提供物质基础，利于《中国药典》的实施。附图说明
[0026] 图1为实施例1所制得款冬酮的高效液相检测色谱图，其中款冬酮HPLC含量为99.5％。
[0027] 图2为实施例1中款冬花提取液的高效液相检测色谱图。
[0028] 图3为实施例1中得到款冬酮浸膏B的高效液相检测色谱图，其中款冬酮含量为46％。
[0029] 图4为对比例1制得的款冬酮的高效液相检测色谱图，其中款冬酮含量为78％。
[0030] 图5为对比例2制得的款冬酮的高效液相检测色谱图，其中款冬酮含量为85％。
[0031] 图6为对比例3制得的款冬酮的高效液相检测色谱图，其中款冬酮含量为90％[0032] 图7为对比例4制得的款冬酮的高效液相检测色谱图，其中款冬酮含量为87％[0033] 图8为实施例1所制得款冬酮的薄层(TLC)检测色谱图，仅有目标斑点，无杂质斑点。
具体实施方式
[0034] 下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0035] 实施例1
[0036] 取干燥款冬花药材20kg，粉碎，加入20倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取16h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B，HPLC检测浸膏B中款冬酮含量为46％。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝60:20:1.2混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶3次得款冬酮粉末，干燥后称重为7.3g，HPLC含量99.5％，以原料干燥药材中款冬酮含量为
0.060％计算，收率60.8％。
0.060％计算，收率60.8％。
[0037] 对比例1
[0038] 取干燥款冬花药材20kg，粉碎，加入20倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取16h。提取液过滤，浓缩得浸膏A。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝100:99:0混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶3次得款冬酮，干燥后称重仅3.3g，含量最高为78％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率27.5％。
[0039] 实施例2
[0040] 取干燥款冬花药材30kg，粉碎，加入15倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取48h。提取液过滤，浓缩得浸膏A。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以5倍体积的石油醚:乙醇:水＝100:99:0.2混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶2次，干燥后得含量99％以上的款冬酮粉末10.2g，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率56.7％。
[0041] 对比例2
[0042] 取干燥款冬花药材30kg，粉碎，加入15倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取48h。提取液过滤，浓缩得浸膏A。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏C以5倍体积的石油醚:乙醇:水＝0:7:2混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶2次得款冬酮，干燥后称重仅4.8g，含量最高为85％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率为26.7％。
[0043] 实施例3
[0044] 取干燥款冬花药材30kg，粉碎，加入10倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取24h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝0:99:0.2混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶3次得款冬酮，干燥后称重为9.8g，含量
99％以上，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率54.4％。
99％以上，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率54.4％。
[0045] 对比例3
[0046] 取干燥款冬花药材30kg，粉碎，加入10倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取24h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝100:30:0混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶3次得款冬酮粉末，干燥后称重为3.2g，HPLC含量90％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率17.7％。
[0047] 实施例4
[0048] 取干燥款冬花药材80kg，粉碎，加入20倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取48h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝0:7:1.3混合溶剂重结晶，析晶温度为-10～-25℃，重结晶3次得款冬酮粉末，干燥后称重为25.5g，HPLC含量99.5％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率53.2％。
[0049] 对比例4
[0050] 取干燥款冬花药材80kg，粉碎，加入20倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取48h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝0:7:1.3混合溶剂重结晶，析晶温度为4℃，重结晶3次得款冬酮粉末，干燥后称重为8.6g，HPLC含量87％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率17.9％。
[0051] 实施例5
[0052] 取干燥款冬花药材15kg，粉碎，加入20倍体积于款冬花重量的石油醚，浸泡提取48h。提取液过滤，浓缩得浸膏A，提取液取样检测。浸膏A与硅胶拌样、烘干，采用硅胶柱层析，用体积比石油醚:乙酸乙酯100:0～100:30梯度洗脱，HPLC检测，收集HPLC中款冬酮含量大于40％的洗脱部分，减压浓缩，得浸膏B。浸膏B以10倍体积的石油醚:乙醇:水＝0:7:1.3混合溶剂重结晶，析晶温度为0～-10℃，重结晶3次得款冬酮粉末，干燥后称重为4.7g，HPLC含量99.5％，以原料干燥药材中款冬酮含量为0.060％计算，收率52.2％。
[0053] 实施例6检测款冬酮产品的技术指标
[0054] 按中药化学对照品原料技术指标要求，对实施例1-5所制备的款冬酮产品进行检测。款冬酮产品作为对照品原料使用需满足以下技术指标要求：1、HPLC含量＞98.5％；2、TLC上100μg下无明显杂质斑点；3、水分含量＜2％；4、残留溶剂＜0.2％；5、炙灼残渣＜0.1％。
[0055] 中药化学对照品原料技术指标检测方法：
[0056] 1、HPLC含量的检测，采用2015版《中国药典》“款冬花”项下“【含量测定】”方法。
[0057] 2、TLC的检测，采用2015版《中国药典》“款冬花”项下“【鉴别】”和“通则0502”方法。
[0058] 3、水分的检测，采用2015版《中国药典》“通则0832第二法”方法。
[0059] 4、残留溶剂的检测，采用2015版《中国药典》“通则0861”方法。
[0060] 5、炙灼残渣的检测，采用2015版《中国药典》“通则0841”方法。
[0061] 经检测，实施例1-5所制备的款冬酮产品均满足上述技术指标要求。以实施例1为例，具体检测结果为：1、HPLC含量的检测：99.5％；2、TLC的检测：无杂质斑点(见图8)；3、水分的检测：0.20％；4、残留溶剂的检测：0.003％；5、炙灼残渣的检测：0.06％。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 一种多功能家用结肠水疗仪 | 2023-12-08 | 1 |
| 碳二亚胺和多酚组合处理的生物瓣膜材料制备及保存方法 | 2020-08-27 | 2 |
| 装饰用组装式墙体及其施工方法 | 2022-12-30 | 1 |
| 一种可降解、高柔软性的非织造布及其制造方法 | 2020-07-29 | 1 |
| 10000马力废钢破碎生产线 | 2023-02-23 | 1 |
| 一种柑橘类固体饮料加工装置 | 2022-05-22 | 0 |
| 用于PCB板的传送装置 | 2020-09-08 | 1 |
| 带有防虫网的大棚 | 2020-07-22 | 1 |
| 一种简易式厨房用水净化器 | 2021-08-30 | 1 |
| 一种干燥降温除雾用的微过滤器膜组件 | 2020-10-05 | 2 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
多花性热门专利
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈