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一种红景天药物产品活性物的制备方法

阅读：0发布：2020-06-29

专利汇可以提供一种红景天药物产品活性物的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种红景天药物产品活性物的制备方法，包括：对红景天愈伤组织生根培养，使用茉莉酸甲酯刺激愈伤组织产生红景天苷及多糖；取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养；将红景天产品加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品。本发明培育出原生态的红景天药物产品活性细胞作为活性物，保证了红景天药物产品在化妆品中的活性效力，不但能长期保持红景天活性物的品质，而且使得红景天活性物成品化，简化了化妆品的制备程序，成品化的红景天活性物可供按需配量，进而提高了人工调控化妆品的可控性，本发明具有操作方法简单、生产成本低、并能够适用于大规模生产的特点。，下面是一种红景天药物产品活性物的制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，包括：
对红景天愈伤组织生根培养，使用茉莉酸甲酯刺激愈伤组织产生红景天苷及多糖；
取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养；
将红景天产品加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品。
2.根据权利要求1所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述红景天愈伤组织生根培养使用的红景天生根培养基为：
MS培养基+GamborgB5培养基+6％蔗糖+0.8％琼脂糖+IAA0.8mg/L+茉莉酸甲酯150Um/L，ph值5.8。
3.根据权利要求1所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养包括：
建立红景天属植物大花红景天的无菌培养体系，培养得到具有茎和叶的无菌红景天属植物大花红景天植株；
将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织；
将愈伤组织接种到液体培养基中震荡培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的细胞系悬浮颗粒；
将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养。
4.根据权利要求3所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织中：
大花红景天叶片起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L+6-BA0.1g/L+NAA2.0g/L；
大花红景天茎起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+蔗糖30g/L+琼脂
5.5g/L+6-BA0.1g/L+2,4D3.0g/L。
5.根据权利要求1所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养中液体培养基为：
MS基本培养基+蔗糖30g/L+NAA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L。
6.根据权利要求1所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述将红景天产品加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品包括：
采样：摘取具有生命活性的红景天药物产品植物为原料；
灭菌：将所需红景天药物产品植物消毒灭菌，然后切取灭菌后的所述红景天药物产品植物的组织器官为外植体；
培养：将外植体置于N6固体培养基中诱导培养，得到红景天药物产品植物的愈伤组织，所述诱导培养的时间为2～5周；
活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞；
清洗：将活性细胞放在纱布上，然后用清水冲洗，从而去除培养液中的杂质，得到干净的活性细胞；
分散：将干净的活性细胞分散于甘油中，得到红景天药物产品活性物。
7.根据权利要求6所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞包括：
选取细胞：将所得的愈伤组织中选取形体较好的细胞团；
传代培养：把形态较好的细胞团传代培养，从而获得疏松颗粒状的细胞团，所述传代培养的传代次数是2～4代；
悬浮培养：把疏松颗粒状的细胞团移至装有培养液的摇瓶中进行摇瓶培养，得到游离的细胞；
筛选：把游离的植物细胞过滤，筛选单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞。
8.根据权利要求6所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述灭菌包括：
用酒精擦洗红景天药物产品植物，所述酒精的浓度是40％～80％；
将红景天药物产品植物浸泡于饱和漂白粉的上清液中，所述浸泡时间是5～15min；
经无菌水清洗，得到消毒灭菌的红景天药物产品植物，所述无菌水清洗的次数是2～5次。
9.根据权利要求6所述的红景天药物产品活性物的制备方法，其特征在于，所述N6固体培养基中含有质量分数为0.05～0.3％的吲哚乙酸、质量分数为0.01～0.5％的6-苄基嘌呤、质量分数为0.01～0.2％的赤霉酸、质量分数为0.1～1.0％的果糖。

说明书全文

一种红景天药物产品活性物的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及生物活性物制备技术领域，特别是涉及一种红景天药物产品活性物的制备方法。

背景技术

[0002] 人类源于美化自身的渴望，自古以来便对化妆品有不断的追求。使用红景天原料作为化妆品时，必须严格把控化妆品的成分，以平衡化妆品的美肤性能和绿色性能。况且，随着人们生活质量的提高，消费者对化妆品的消费观念已不停留在美肤效果层面上，对化妆品的天然性能也有较大的权重追求，因此，制备出天然且美肤效果好的化妆品已成为化妆品行业的长期追求。现有制备天然健康化妆品的工艺主要是使用绿色有机原料代替化学原料，而添加的绿色有机原料是直接将绿色有机原料的自身成分与化妆品的主体成分加工，进而生产出受人们欢迎的绿色天然化妆品。

[0003] 然而，直接添加将绿色有机原料自身成分制备化妆品的工艺存在以下不足之处：第一，绿色有机原料主要来自已发育完全的植物，但已发育完全的植物活性成分少，不利于提高化妆品的活性效力；第二，使用绿色有机原料为添加成分时，还需先对绿色有机原料进行多重前处理才能用作制备化妆品，而这些前处理步骤延长了制备化妆品的生产线程，不利于简化化妆品的制备程序。

[0004] 因此，现有技术需要改进。

发明内容

[0005] 本发明实施例所要解决的一个技术问题是：提供一种红景天药物产品活性物的制备方法，以解决现有技术中存在的问题。

[0006] 根据本发明实施例的一个方面，提供的一种红景天药物产品活性物的制备方法，包括：

[0007] 红景天愈伤组织生根培养，使用茉莉酸甲酯刺激愈伤组织产生红景天苷及多糖培养；

[0008] 取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养；

[0009] 加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品。

[0010] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述红景天愈伤组织生根培养使用的红景天生根培养基为：

[0011] MS培养基+GamborgB5培养基+6％蔗糖+0.8％琼脂糖+IAA 0.8mg/L+茉莉酸甲酯150Um/L，ph值5.8。

[0012] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养包括：

[0013] 建立红景天属植物大花红景天的无菌培养体系，培养得到具有茎和叶的无菌红景天属植物大花红景天植株；

[0014] 将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织；

[0015] 将愈伤组织接种到液体培养基中震荡培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的细胞系悬浮颗粒；

[0016] 将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养。

[0017] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织中：

[0018] 大花红景天叶片起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+ 蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L+6-BA0.1g/L+NAA2.0g/L；

[0019] 大花红景天茎起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L+6-BA0.1g/L+2,4D3.0g/L。

[0020] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养中液体培养基为：

[0021] MS基本培养基+蔗糖30g/L+NAA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L。

[0022] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品包括：

[0023] 采样：摘取具有生命活性的红景天药物产品植物为原料；

[0024] 灭菌：将所需红景天药物产品植物消毒灭菌，然后切取灭菌后的所述红景天药物产品植物的组织器官为外植体；

[0025] 培养：将外植体置于N6固体培养基中诱导培养，得到红景天药物产品植物的愈伤组织，所述诱导培养的时间为2～5周；

[0026] 活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞；

[0027] 清洗：将活性细胞放在纱布上，然后用清水冲洗，从而去除培养液中的杂质，得到干净的活性细胞；

[0028] 分散：将干净的活性细胞分散于甘油中，得到红景天药物产品活性物。

[0029] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞包括：

[0030] 选取细胞：将所得的愈伤组织中选取形体较好的细胞团；

[0031] 传代培养：把形态较好的细胞团传代培养，从而获得疏松颗粒状的细胞团，所述传代培养的传代次数是2～4代；

[0032] 悬浮培养：把疏松颗粒状的细胞团移至装有培养液的摇瓶中进行摇瓶培养，得到游离的细胞；

[0033] 筛选：把游离的植物细胞过滤，筛选单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞。

[0034] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述灭菌包括：

[0035] 用酒精擦洗红景天药物产品植物，所述酒精的浓度是40％～80％；

[0036] 将红景天药物产品植物浸泡于饱和漂白粉的上清液中，所述浸泡时间是 5～15min；

[0037] 经无菌水清洗，得到消毒灭菌的红景天药物产品植物，所述无菌水清洗的次数是2～5次。

[0038] 基于上述红景天药物产品活性物的制备方法的另一个实施例中，所述N6 固体培养基中含有质量分数为0.05～0.3％的吲哚乙酸、质量分数为0.01～0.5％的6-苄基嘌呤、质量分数为0.01～0.2％的赤霉酸、质量分数为0.1～1.0％的果糖。

[0039] 与现有技术相比，本发明具有以下优点：

[0040] 基于本发明上述实施例提供的红景天药物产品活性物的制备方法，通过红景天愈伤组织生根培养，使用茉莉酸甲酯刺激愈伤组织产生红景天苷及多糖培养；取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养；加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天产品。与现有技术相比，该制备方法培育出原生态的红景天药物产品活性细胞作为活性物，保证了红景天药物产品在化妆品中的活性效力，不但能长期保持红景天活性物的品质，而且使得红景天活性物成品化，简化了化妆品的制备程序，成品化的红景天活性物可供按需配量，进而提高了人工调控化妆品的可控性，本发明具有操作方法简单、生产成本低、并能够适用于大规模生产的特点。

[0041] 下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

具体实施方式

[0042] 现在详细描述本发明的各种示例性实施例。应注意到：除非另外具体说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对布置、数字表达式和数值不限制本发明的范围。

[0043] 以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。

[0044] 对于相关领域普通技术人员已知的技术可能不作详细讨论，但在适当情况下，所述技术应当被视为说明书的一部分。

[0045] 红景天药物产品活性物的制备方法包括：

[0046] 红景天愈伤组织生根培养，使用茉莉酸甲酯刺激愈伤组织产生红景天苷及多糖培养；

[0047] 取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养；

[0048] 加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品。

[0049] 所述红景天愈伤组织生根培养使用的红景天生根培养基为：

[0050] MS培养基+GamborgB5培养基+6％蔗糖+0.8％琼脂糖+IAA 0.8mg/L+茉莉酸甲酯150Um/L，ph值5.8。

[0051] 所述取愈伤组织分离细胞，进行悬浮扩大培养包括：

[0052] 建立红景天属植物大花红景天的无菌培养体系，培养得到具有茎和叶的无菌红景天属植物大花红景天植株；

[0053] 将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织；

[0054] 将愈伤组织接种到液体培养基中震荡培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的细胞系悬浮颗粒；

[0055] 将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养。

[0056] 所述将无菌的茎或叶接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导培养和继代培养，得到红景天属植物大花红景天不同器官起源的愈伤组织中：

[0057] 大花红景天叶片起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+ 蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L+6-BA0.1g/L+NAA2.0g/L；

[0058] 大花红景天茎起源的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS MS基本培养基+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L+6-BA0.1g/L+2,4D3.0g/L。

[0059] 所述将得到的细胞系悬浮颗粒接种到含有液体培养基的生物反应器中进行放大培养中液体培养基为：

[0060] MS基本培养基+蔗糖30g/L+NAA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L。

[0061] 所述加入化妆品或保健品中，利用次生代谢物丰富的植物细胞，制成红景天药物产品包括：

[0062] 采样：摘取具有生命活性的红景天药物产品植物为原料；

[0063] 灭菌：将所需红景天药物产品植物消毒灭菌，然后切取灭菌后的所述红景天药物产品植物的组织器官为外植体；

[0064] 培养：将外植体置于N6固体培养基中诱导培养，得到红景天药物产品植物的愈伤组织，所述诱导培养的时间为2～5周；

[0065] 活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞；

[0066] 清洗：将活性细胞放在纱布上，然后用清水冲洗，从而去除培养液中的杂质，得到干净的活性细胞；

[0067] 分散：将干净的活性细胞分散于甘油中，得到红景天药物产品活性物。

[0068] 所述活性细胞的制备，得到单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞包括：

[0069] 选取细胞：将所得的愈伤组织中选取形体较好的细胞团；

[0070] 传代培养：把形态较好的细胞团传代培养，从而获得疏松颗粒状的细胞团，所述传代培养的传代次数是2～4代；

[0071] 悬浮培养：把疏松颗粒状的细胞团移至装有培养液的摇瓶中进行摇瓶培养，得到游离的细胞；

[0072] 筛选：把游离的植物细胞过滤，筛选单个细胞或小数目的细胞团作为活性细胞。

[0073] 所述灭菌包括：

[0074] 用酒精擦洗红景天药物产品植物，所述酒精的浓度是40％～80％；

[0075] 将红景天药物产品植物浸泡于饱和漂白粉的上清液中，所述浸泡时间是 5～15min；

[0076] 经无菌水清洗，得到消毒灭菌的红景天药物产品植物，所述无菌水清洗的次数是2～5次。

[0077] 所述N6固体培养基中含有质量分数为0.05～0.3％的吲哚乙酸、质量分数为0.01～0.5％的6-苄基嘌呤、质量分数为0.01～0.2％的赤霉酸、质量分数为 0.1～1.0％的果糖。

[0078] 本说明书中各个实施例均采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其它实施例的不同之处，各个实施例之间相同或相似的部分相互参见即可。

[0079] 本发明的描述是为了示例和描述起见而给出的，而并不是无遗漏的或者将本发明限于所公开的形式。很多修改和变化对于本领域的普通技术人员而言是显然的。选择和描述实施例是为了更好说明本发明的原理和实际应用，并且使本领域的普通技术人员能够理解本发明从而设计适于特定用途的带有各种修改的各种实施例。

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