专利汇可以提供一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种从解 淀粉 芽孢杆菌 发酵 液中分离提纯环已酰亚胺方法,包括如下步骤:(1)将解淀粉芽孢杆菌发酵液离心取上清;萃取,旋蒸,得黄色粘稠物;(2)将黄色粘稠物经大孔 树脂 层析,用甲醇 水 溶液洗脱,得到Fr.1-Fr.3组分;(3)将组分Fr.2和Fr.3合并后使用 硅 胶柱柱层析,用三氯甲烷:甲醇体系洗脱,共得到Fc.1-Fc.20;(4)将Fc.17-Fc.19合并浓缩分离,收集T1;(5)T1 冷冻干燥 ,得到环已酰亚胺固体。本发明发现了解淀粉芽孢杆菌 次级代谢产物 中存在环已酰亚胺;并且使用大孔树脂对环已酰亚胺进行分离提纯,降低了成本,提高了效率;环已酰亚胺的提取率为65%以上,纯度为91%以上。,下面是一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法专利的具体信息内容。
1.一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法,其特征是包括如下步骤:
(1)将解淀粉芽孢杆菌发酵液离心取上清液;用乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取液;旋蒸除去乙酸乙酯,得黄色粘稠物;
(2)将所述黄色粘稠物经大孔树脂层析,依次用体积浓度为50%,60%,70%的甲醇水溶液进行洗脱,每个梯度使用4倍柱体积洗脱剂,得到Fr.1、Fr.2、Fr.3组分;
(3)将200-300目柱层析用硅胶粉用乙酸乙酯浸泡24-28h,装填在硅胶柱中;将组分Fr.2和Fr.3合并后使用硅胶柱柱层析,依次用体积比为(50:1),(20:1),(15:1),(10:1)的三氯甲烷:甲醇体系洗脱,每个梯度使用3倍柱体积洗脱剂,每个梯度依次收集5份洗脱剂,共得到20个组分,依次为Fc.1~Fc.20;
(4)将Fc.17,Fc.18,Fc.19合并浓缩,通过高效制备液相进行分离,检测器为视差检测器,收集RT=14min的组分为T1;
(5)将T1冷冻,再用冷冻干燥机冷冻干燥,得到环已酰亚胺固体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens LWYZ003,保藏编号:CGMCC NO.18345。
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