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疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法

阅读：710发布：2020-05-11

专利汇可以提供疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明提供了一种疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法，涉及疫苗技术领域。该疫苗饵料按照重量份数计包括牛肉粉30-200份、鸡肉粉100-600份、骨粉30-200份、酵母粉50-300份和奶粉50-300份；以及任选的辅料。该疫苗饵料适口性好，动物的采食率高，还有助于疫苗饵料中口服疫苗对机体的免疫效果，提高了动物口服疫苗的给药效率。，下面是疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种疫苗饵料，其特征在于，按照重量份数计包括牛肉粉30-200份、鸡肉粉100-600份、骨粉30-200份、酵母粉50-300份和奶粉50-300份；以及任选的辅料。
2.根据权利要求1所述的疫苗饵料，其特征在于，按照重量份数计包括牛肉粉40-170份、鸡肉粉150-500份、骨粉50-150份、酵母粉80-250份和奶粉50-200份；
更优选地，所述疫苗饵料按照重量份数计包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酵母粉80-200份和奶粉50-100份。
3.根据权利要求1所述的疫苗饵料，其特征在于，所述酵母粉包括酿酒酵母粉。
4.根据权利要求1所述的疫苗饵料，其特征在于，所述疫苗饵料还包括免疫增强剂；
优选地，所述免疫增强剂包括鞭毛蛋白和/或氢氧化铝；
优选地，所述鞭毛蛋白的用量为30-100份，优选为30-90份，更优选为30-80份；
优选地，所述氢氧化铝的用量为0.5-5份。
5.根据权利要求1所述的疫苗饵料，其特征在于，所述辅料包括增稠剂、保湿剂和防腐剂中的一种或多种；
优选地，所述增稠剂的用量为80-400份，优选为80-300份，更优选为80-200份；
优选地，所述增稠剂包括食用明胶、阿拉伯胶、琼脂、卡拉胶和果胶中的一种或多种；
优选地，所述保湿剂的用量为50-200份；优选为50-150份，更优选为50-80份；
优选地，所述保湿剂包括甘油、山梨糖醇和麦芽糖醇中的一种或多种；
优选地，所述防腐剂包括山梨酸钾和/或双乙酸钠；
优选地，所述防腐剂包括抗生素，抗生物优选包括青链霉素；
优选地，所述青链霉素的用量为0.02-0.1份。
6.根据权利要求1-5任一项所述的疫苗饵料，其特征在于，按照重量份数计所述疫苗饵料包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酿酒酵母粉80-200份、奶粉50-
100份、食用明胶80-200份、甘油50-80份、鞭毛蛋白30-80份、氢氧化铝0.5-5份和青链霉素
0.02-0.1份。
7.权利要求1-6任一项所述的疫苗饵料在制备口服疫苗中的应用。
8.口服疫苗，其特征在于，包含权利要求1-6任一项所述的疫苗饵料和抗原；
优选地，所述口服疫苗包括胶冻状的疫苗饵料和抗原，胶冻状的疫苗饵料包裹抗原；
优选地，所述胶冻状的疫苗饵料成长条状，抗原置于靠近疫苗饵料一端的位置；
优选地，疫苗饵料为厚0.2～0.4cm，长5～7cm和宽为0.15～0.3cm的胶冻状，所述抗原为口服疫苗胶囊，所述口服疫苗胶囊置于以疫苗饵料胶冻的长边计1/2的一侧；
优选地，所述口服疫苗包括狂犬病口服疫苗；
优选地，所述口服疫苗包装有可降解包装。
9.权利要求8所述的口服疫苗的制备方法，其特征在于，包括使用所述疫苗饵料包裹抗原。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，包括按照配方量将牛肉粉、鸡肉粉、骨粉、酵母粉、奶粉和增稠剂；以及任选的辅料和水混合成糊状，包裹抗原后干燥成型；
优选地，干燥温度为70～80℃，干燥时间为10～20min。

说明书全文

疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及疫苗技术领域，尤其是涉及一种疫苗饵料和应用、口服疫苗及其制备方法。

背景技术

[0002] 疫苗免疫在犬猫传染病的预防和控制上起着极其重要的作用。犬的核心疫苗包括犬瘟热疫苗、犬细小病毒疫苗、犬传染性肝炎疫苗和狂犬病疫苗等。猫的核心疫苗猫瘟疫苗、猫疱疹病毒Ⅰ型疫苗、猫杯状病毒疫苗和狂犬病疫苗等。国内宠物犬一般都能得到很好的免疫管理，然而经济欠发达的乡村犬猫或流浪犬的免疫免疫率普遍较低，甚至没有免疫。

[0003] 以狂犬病为例，狂犬病是由狂犬病病毒(Rabies Virus，RV)引起的传染病，所有温血动物都能感染狂犬病病毒，人多因被患病的动物咬伤而感染，临床表现为特有的恐水、怕风、咽肌痉挛等，动物通过互相间的撕咬而传播病毒。我国的狂犬病主要由犬传播，家犬可以成为无症状携带者，所以表面“健康”的犬对人的健康危害很大。对于狂犬病尚缺乏有效的治疗手段，人患狂犬病后的病死率几近100％，患者一般于3～6日内死于呼吸或循环衰竭，故应加强预防措施。国外的狂犬病防控经验表明，犬狂犬病疫苗免疫覆盖率达到75％，狂犬病的发病率即可得到有效控制，我国的狂犬病疫苗免疫率低，是造成高发病率的主要原因。国外应用口服狂犬病疫苗对野生动物进行免疫，获得较好的效果。因此开发一种疫苗饵料，能够诱导犬和猫，尤其是流浪的犬和猫采食，以促进犬和猫采食口服疫苗，从而提高疫苗的覆盖率，对于我国以犬和猫为传染媒介的疾病的防控具有重要价值。

[0004] 有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

[0005] 本发明的第一目的在于提供一种疫苗饵料，犬和猫对该疫苗饵料的采食率较高，可以促进犬和猫采食口服疫苗。

[0006] 本发明的第二目的在于提供上述疫苗饵料在制备口服疫苗中的应用以及一种口服疫苗。

[0007] 为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

[0008] 根据本发明的一个方面，本发明提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉30-200份、鸡肉粉100-600份、骨粉30-200份、酵母粉50-300份和奶粉50-300份；以及任选的辅料。

[0009] 优选地，按照重量份数计包括牛肉粉40-170份、鸡肉粉150-500份、骨粉50-150份、酵母粉80-250份和奶粉50-200份；

[0010] 更优选地，所述疫苗饵料按照重量份数计包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酵母粉80-200份和奶粉50-100份。

[0011] 优选地，所述酵母粉包括酿酒酵母粉。

[0012] 优选地，所述疫苗饵料还包括免疫增强剂；

[0013] 优选地，所述免疫增强剂包括鞭毛蛋白和/或氢氧化铝；

[0014] 优选地，所述鞭毛蛋白的用量为30-100份，优选为30-90份，更优选为30-80份；

[0015] 优选地，所述氢氧化铝的用量为0.5-5份。

[0016] 优选地，所述辅料包括增稠剂、保湿剂和防腐剂中的一种或多种；

[0017] 优选地，所述增稠剂的用量为80-400份，优选为80-300份，更优选为80-200份；

[0018] 优选地，所述增稠剂包括食用明胶、阿拉伯胶、琼脂、卡拉胶和果胶中的一种或多种；

[0019] 优选地，所述保湿剂的用量为50-200份；优选为50-150份，更优选为50-80份；

[0020] 优选地，所述保湿剂包括甘油、山梨糖醇和麦芽糖醇中的一种或多种；

[0021] 优选地，所述防腐剂包括山梨酸钾和/或双乙酸钠；

[0022] 优选地，所述防腐剂包括抗生素，抗生物优选包括青链霉素；

[0023] 优选地，所述青链霉素的用量为0.02-0.1份。

[0024] 优选地，按照重量份数计所述疫苗饵料包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酿酒酵母粉80-200份、奶粉50-100份、食用明胶80-200份、甘油50-80份、鞭毛蛋白30-80份、氢氧化铝0.5-5份和青链霉素0.02-0.1份。

[0025] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述的疫苗饵料在制备口服疫苗中的应用。

[0026] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种口服疫苗，包含上述疫苗饵料和抗原；

[0027] 优选地，所述口服疫苗包括胶冻状的疫苗饵料和抗原，胶冻状的疫苗饵料包裹抗原；

[0028] 优选地，所述胶冻状的疫苗饵料成长条状，抗原置于靠近疫苗饵料一端的位置；

[0029] 优选地，疫苗饵料为厚0.2～0.4cm，长5～7cm和宽为0.15～0.3cm的胶冻状，所述抗原为口服疫苗胶囊，所述口服疫苗胶囊置于以疫苗饵料胶冻的长边计1/2的一侧；

[0030] 优选地，所述口服疫苗包括狂犬病口服疫苗；

[0031] 优选地，所述口服疫苗包装有可降解包装。

[0032] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述口服疫苗的制备方法，包括使用所述疫苗饵料包裹抗原。

[0033] 优选地，所述制备方法包括按照配方量将牛肉粉、鸡肉粉、骨粉、酵母粉、奶粉和增稠剂；以及任选的辅料和水混合成糊状，包裹抗原后干燥成型；

[0034] 优选地，干燥温度为70～80℃，干燥时间为10～20min。

[0035] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

[0036] 本发明提供的疫苗饵料包括牛肉粉30-200份、鸡肉粉100-600份、骨粉30-200份、酵母粉50-300份和奶粉50-300份；以及任选的辅料。牛肉粉、鸡肉粉、骨粉和奶粉为疫苗饵料提供了丰富的蛋白质以及矿物质和微量元素，以及良好的口感和香味；酵母粉除去为疫苗饵料提供丰富的营养物质，还能够增强动物的免疫功能，提高疫苗饵料中口服疫苗的免疫效果。本发明提供的疫苗饵料适口性好，动物的采食率高，还有助于疫苗饵料中口服疫苗对机体的免疫效果，提高了口服疫苗施用给动物后的免疫应答水平。

[0037] 本发明提供的疫苗饵料适用于犬和猫，由于犬和猫对食物的偏好并不相同，本发明通过合理的选用了疫苗饵料的组成成分，以及通过合理的配合各组分的配比，得到疫苗饵料能够兼顾犬和猫的偏好，使犬和猫均爱采食。采用本发明提供的疫苗饵料能够促使犬和猫采食疫苗饵料中的口服疫苗，提高口服疫苗免疫动物的效率，尤其是提高口服疫苗对流浪犬和猫的覆盖率。附图说明

[0038] 为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

[0039] 图1为本发明提供的口服疫苗的示意图；

[0040] 图2为本发明效果例3中犬血清的VNA滴度。

[0041] 图标：100-疫苗饵料；200-胶囊抗原。

具体实施方式

[0042] 下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0043] 根据本发明的一个方面，本发明提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉30-200份、鸡肉粉100-600份、骨粉30-200份、酵母粉50-300份和奶粉50-300份；以及任选的辅料。牛肉粉、鸡肉粉、骨粉和奶粉为疫苗饵料提供了丰富的蛋白质以及矿物质和微量元素，以及良好的口感和香味；酵母粉除去为疫苗饵料提供丰富的营养物质，还能够增强动物的免疫功能，提高疫苗饵料中口服疫苗的免疫效果。本发明提供的疫苗饵料适口性好，动物的采食率高，还有助于疫苗饵料中口服疫苗对机体的免疫效果，提高了口服疫苗施用给动物的效率。

[0044] 本发明提供的疫苗饵料适用于犬和猫。犬和猫对食物的偏好并不相同，首先，狗和猫的采食习惯不同，狗喜欢吞咽(大口吃食)，猫细嚼慢咽；第二，狗的肠道长，猫的肠道相对短，狗是肉食性动物，配料中蛋白成分高，容易吸引狗的兴趣，猫杂食动物，常规猫粮中碳水化合物比例高于狗粮；第三，猫对于鱼腥气味更敏感，喜采食鱼类(含鱼粉的饵料)，狗对于常规鱼粉接受程度较高，但比列过高的鱼粉添加饵料，狗采食率会下降。本发明通过合理的选用了疫苗饵料的组成成分，以及通过合理的配合各组分的配比，得到疫苗饵料能够兼顾犬和猫的偏好，使犬和猫均爱采食。采用本发明提供的疫苗饵料能够引诱犬和猫采食疫苗饵料中的口服疫苗，提高口服疫苗免疫动物的效率，尤其是提高口服疫苗对流浪犬和猫的覆盖率。

[0045] 牛肉粉富含蛋白质，且香味浓郁、肉香四溢，能够为疫苗饵料提供营养和良好的口感，引诱动物食用。牛肉粉的用量为30-200份，例如可以为但不限于为30份、40份、50份、60份、70份、80份、90份、100份、110份、120份、130份、140份、150份、160份、170份、180份、190份或200份。

[0046] 鸡肉粉蛋白质含量高、具有鸡脂香和鸡肉汁的鲜甜味儿，能够为疫苗饵料提供营养和良好的口感，引诱动物食用。鸡肉粉的用量为100-600份，例如可以为但不限于为100份、120份、150份、180份、200份、250份、300份、350份、400份、450份、500份、550份或600份。

[0047] 骨粉是以畜骨为原料制成的粉状饲料，骨粉中含有丰富的矿物质，比如丰富的钙和磷，以及镁和钠；骨粉中还含有12～35％的蛋白质，且其中富含胶原蛋白；骨粉中脂肪酸以及维生素种类丰富。骨粉能够为疫苗饵料提供丰富的营养和口感。骨粉的用量为30-200份，例如可以为但不限于为30份、100份、120份、150份、175份或200份。

[0048] 酵母粉蛋白质含量高，氨基酸齐全，含有B族维生素、微量元素及各种酶，还具有浓郁的香气，并且能促进禽畜的新陈代谢，可增强禽畜的免疫功能。酵母粉可选的包括酿酒酵母粉，酿酒酵母粉中含有醇类脂类等芳香性物质以及核苷酸，多肽等增味物质，改善疫苗饵料的适口性；酿酒酵母粉还富含氨基酸、葡萄糖、维生素和有机酸，改善胃肠道内环境，抑制有害菌生长；酿酒酵母粉还能够提高机体的非特异性免疫，从而增强机体抗病力。酵母粉的用量为30-300份，例如可以为但不限于为30份、50份、80份、100份、120份、150份、180份、200份、225份、250份、280份或300份。

[0049] 奶粉富含蛋白质、脂肪、糖类、矿物质和维生素，奶粉味道香甜，能够为疫苗饵料提供营养和口感。奶粉的用量为50-300份，例如可以为但不限于为50份、80份、100份、125份、150份、180份、200份、220份、250份、270份或300份。

[0050] 合理配比各组分能够提高疫苗饵料的采食率，平衡犬和猫对食物的不同偏好。在一些优选的实施方式中，按照重量份数计疫苗饵料包括牛肉粉40-170份、鸡肉粉150-500份、骨粉50-150份、酵母粉80-250份和奶粉50-200份。更优选地，按照重量份数计包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酵母粉80-200份和奶粉50-100份。

[0051] 在一些优选的实施方式中，疫苗饵料中还包括免疫增强剂，免疫增强剂是指单独使用或者与抗原联用均能增强机体免疫应答的物质。免疫增强剂能够通过增强机体的特异性免疫、非特异性免疫、抗原的提成效率和抗原的稳定性中一个或多个方面提高机体对疫苗的免疫应答。免疫增强剂优选采用氢氧化铝和/或鞭毛蛋白。氢氧化铝是一种广泛使用的免疫增强剂，有一定的免疫增强作用，氢氧化铝有助于保持犬猫的胃环境(缓解胃酸过强)。鞭毛蛋白是TLR5和NLRC4的配体，可活化树突细胞，诱导淋巴细胞中细胞因子的分泌并促进其迁移至次级淋巴器官，促进细胞因子和趋化因子的产生。鞭毛蛋白有助于口服免疫，提升免疫效果，适合用于添加至疫苗饵料中，增强口服疫苗的免疫效果。可选地，所述免疫增强剂包括鞭毛蛋白，可选地，所述免疫增强剂包括氢氧化铝；优选地，所述免疫增强剂包括鞭毛蛋白和氢氧化铝，可以提高黏膜免疫功能，提升疫苗的使用效果。按照重量份数剂，鞭毛蛋白的用量优选30-100份，例如可以为但不限于为30份、40份、50份、60份、70份、80份、90份或100份，优选为30-90份，更优选为30-80份。按照重量份数剂，氢氧化铝的用量优选为0.5-
5份，例如可以为但不限于为0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份或5份。

[0052] 本发明提供的疫苗饵料还可以包括本领域可接受的任选的辅料，所述“任选的”指的是所述疫苗饵料中可以含有辅料也可以不含有辅料。在一些优选的实施方式中，所述辅料包括增稠剂、保湿剂和防腐剂中的一种或多种。辅料的实例可选地包括增稠剂、保湿剂或防腐剂；可选地包括保湿剂和防腐剂；优选同时包括增稠剂、保湿剂和防腐剂。

[0053] 增稠剂可以改善疫苗饵料的物理性质或组织状态，使疫苗饵料粘滑适口。增稠剂包括但不限于食用明胶、阿拉伯胶、琼脂、卡拉胶或果胶；增稠剂的实例可选地包括食用明胶；可选地包括卡拉胶和果胶；可选地包括琼脂和果胶。增稠剂优选使用食用明胶，食用明胶是一种无脂肪的高蛋白，除去增稠作用还可以提供营养，同时起到塑形作用。按照重量份数剂，增稠剂的用量优选为80-400份，例如可以为但不限于为80份、100份、150份、200份、250份、300份、350份或400份；优选为80-300份，更优选为80-200份。

[0054] 保湿剂能够使疫苗饵料爽滑可口，保湿剂包括但不限于甘油、山梨糖醇和麦芽糖醇中的一种或多种，保湿剂的实例可选地包括甘油、山梨糖醇或麦芽糖醇；可选地包括甘油；可选地包括山梨糖醇和麦芽糖醇。按照重量份数计，保湿剂的用量优选为50-200份，例如可以为但不限于为50份、80份、100份、125份、150份、180份或200份；优选为50-150份，更优选为50-80份。

[0055] 防腐剂能够防止疫苗饵料腐败变质，延长疫苗饵料的保质期。防腐剂可选地包括山梨酸钾和/或双乙酸钠；也可选择抗生素类防腐剂，抗生素在临床使用中效果好，可能和抗生素还可以对动物隐性细菌类感染有一定的治疗作用。抗生素类防腐剂优选使用青链霉素，青链霉素指的是青霉素和链霉素。按照重量份数计，青链霉素的用量优选为0.02份、0.03份、0.04份、0.05份、0.06份、0.07份、0.08份、0.09份或0.1份，每份青链霉素中含青霉素100U和链霉素100μg。

[0056] 在一些优选地实施方式中，下述配方的疫苗饵料使用效果较佳：按照重量份数计包括牛肉粉50-150份、鸡肉粉150-400份、骨粉50-100份、酿酒酵母粉80-200份、奶粉50-100份、食用明胶80-200份、甘油50-80份、鞭毛蛋白30-80份、氢氧化铝0.5-5份和青链霉素0.02-0.1份。该配方的疫苗饵料犬和猫的采食率均较高，且由于含有鞭毛蛋白和氢氧化铝可以提高黏膜免疫功能，提升疫苗的使用效果；配方中的食用明胶可使疫苗饵料成胶冻状，使疫苗饵料粘滑适口，提高适口性。

[0057] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述疫苗饵料在制备口服疫苗中的应用。本发明提供的上述疫苗饵料在制备口服疫苗中的应用和上述疫苗是基于相同的发明构思，因此具有上述疫苗饵料的所有优异效果，在此不再赘述。上述疫苗饵料尤其能够提高犬和猫的采食率，因此更适用于制备犬和猫的口服疫苗。口服疫苗的实例例如有犬瘟热疫苗、犬细小病毒疫苗、犬传染性肝炎疫苗、狂犬病疫苗、猫瘟疫苗、猫疱疹病毒Ⅰ型疫苗和猫杯状病毒疫苗等。

[0058] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种口服疫苗，该口服疫苗包括上述疫苗饵料和抗原。该口服疫苗和上述疫苗饵料基于相同的发明构思，因此具有上述疫苗饵料的所有优异效果，在此不再赘述。口服疫苗中使用的抗原可选择本领域的常规口服疫苗抗原；或直接将本领域现有的口服疫苗包裹于上述疫苗饵料中，以引诱动物采食。

[0059] 在一些优选的实施方式中，所述口服疫苗包括胶冻状的疫苗饵料和包裹于疫苗饵料中的疫苗的抗原。在一些实施例中，胶冻状的疫苗饵料成长条状，抗原置于疫苗饵料中的一端。优选地，疫苗饵料为厚0.2～0.4cm，长5～7cm和宽为0.15～0.3cm的胶冻状，口服疫苗胶囊置于疫苗饵料胶冻的一端，即疫苗饵料的长边的对称轴的一侧，包装时对折，机器压边封装。如图1所示。

[0060] 优选地，所述口服疫苗包括狂犬病口服疫苗，由于本发明提供的疫苗饵料能够引诱动物采食，以所述疫苗饵料作为狂犬病疫苗的疫苗饵料能够引诱野生犬猫采食，提高狂犬病口服疫苗的覆盖率，达到有效防控狂犬病的效果。优选地，所述口服疫苗采用可降解包装包装，可降解包装上可印刷有警示文字，用于在流浪犬猫经常出没的地方或野生动物活动区域投放时，避免人误食。

[0061] 根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述口服疫苗的制备方法，所述制备方法包括使用所述疫苗饵料包括口服疫苗。在一些优选的实施方式中，制备方法如下：包括按照配方量将牛肉粉、鸡肉粉、骨粉、酵母粉、奶粉和增稠剂；以及任选的辅料和水混合成糊状，包裹抗原后干燥成型，其中干燥温度优选70～80℃，干燥时间优选10～20min。

[0062] 下面结合优选实施例进一步说明本发明的技术方案和有益效果。

[0063] 实施例1

[0064] 本实施例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉100份、鸡肉粉300份、骨粉80份、酿酒酵母粉150份、奶粉70份、食用明胶140份、甘油65份、鞭毛蛋白55份、氢氧化铝3份和青链霉素0.05份。

[0065] 制备方法如下：将上述各组分与水搅拌制成糊状，模具中压制成约0.3厘米厚，长6厘米、宽2厘米长方体，75℃烘干15分钟，制成胶冻状。

[0066] 实施例2

[0067] 本实施例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉50份、鸡肉粉400份、骨粉50份、酿酒酵母粉200份、奶粉50份、食用明胶200份、甘油50份、鞭毛蛋白80份、氢氧化铝0.5份和青链霉素0.1份。

[0068] 实施例3

[0069] 本实施例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉150份、鸡肉粉150份、骨粉100份、酿酒酵母粉80份、奶粉100份、食用明胶80份、甘油80份、鞭毛蛋白30份、氢氧化铝5份和青链霉素0.02份。

[0070] 实施例4

[0071] 本实施例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉40份、鸡肉粉500份、骨粉50份、酿酒酵母粉250份、奶粉50份、食用明胶80份、甘油150份、鞭毛蛋白80份、氢氧化铝3份和青链霉素0.05份。

[0072] 实施例5

[0073] 本实施例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉30份、鸡肉粉600份、骨粉30份、酿酒酵母粉300份、奶粉50份、食用明胶80份、甘油200份、鞭毛蛋白55份、氢氧化铝3份和青链霉素0.05份。

[0074] 实施例6

[0075] 本实施例提供了一种疫苗饵料，与实施例1的区别在于，不含有鞭毛蛋白。

[0076] 对比例1

[0077] 本对比例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉20份、鸡肉粉650份、骨粉20份、酿酒酵母粉350份、奶粉30份、食用明胶140份、甘油65份、鞭毛蛋白55份、氢氧化铝3份和青链霉素0.05份。

[0078] 对比例2

[0079] 本对比例提供了一种疫苗饵料，按照重量份数计包括牛肉粉250份、鸡肉粉50份、骨粉250份、酿酒酵母粉25份、奶粉350份、食用明胶140份、甘油65份、鞭毛蛋白55份、氢氧化铝3份和青链霉素0.05份。

[0080] 对比例3

[0081] 本对比例提供了一种疫苗饵料，与实施例1的区别在于不含有牛肉粉。

[0082] 对比例4

[0083] 本对比例提供了一种疫苗饵料，与实施例1的区别在于不含有鸡肉粉。

[0084] 对比例5

[0085] 本对比例提供了一种疫苗饵料，与实施例1的区别在于不含有骨粉。

[0086] 效果例1

[0087] 制作40份实施例1饵料，直接饲喂募集的10只成年犬、10只成年猫，每只犬猫各2份饵料，半小时后，所有犬猫均吃掉饲喂的饵料。观察半日，未见不良反应。半日后正常饲喂商品猫粮和狗粮，犬猫精神和排便均正常。

[0088] 效果例2

[0089] 将实施例1～实施例5和对比例1～对比例5的疫苗饵料各40份，每组投放在街道垃圾堆放处附近10份(每投放点2份)、公寓流浪猫经常出没地点30份(每投放点2份)，分别放置警示牌并安装摄像头收集饵料被采食情况。半日后，统计实施例1～实施例5和对比例1～对比例5的饵料的采食率，摄像头视频回放信息显示，投放点饵料，均为犬猫采食，未见放弃采食饵料现象，其中2处投放点临近，出现同一动物采食4份实施例1疫苗饵料的情况。实验结果如表1所示。

[0090] 表1

[0091] 初始投放量半日后剩余 1日后剩余 2日后剩余
实施例1 40 36 22 4
实施例2 40 33 26 6
实施例3 40 35 23 6
实施例4 40 32 26 5
实施例5 40 34 18 7
对比例1 40 38 32 21
对比例2 40 36 30 19
对比例3 40 38 29 11
对比例4 40 39 32 12
对比例5 40 37 28 14

[0092] 效果例3

[0093] 按图1所示，如实施例1制作的5份疫苗饵料100和实施例6制作的5份疫苗饵料100，放入重组狂犬病毒G蛋白胶囊抗原200(50μg/头份)饲喂4月龄招募健康犬(狂犬病毒血清抗体均为阴性)，随机每组5只犬，A组为添加鞭毛蛋白组(实施例1)、B组为不添加鞭毛蛋白组(实施例6)。饲喂后第21天，所有犬前肢皮下静脉采血1mL，血样进行血清分离，收集血清，进行病毒中和抗体(VNT)水平检测。方法如下。

[0094] 免疫后VNA抗体水平(CVS-eGFP方法检测)：

[0095] 1、材料及处理方法：

[0096] (1)CVS-eGFP病毒，TCID50为105.8/ml，试验需要100个TCID50/50μl，该病毒需要稀释200倍用，稀释方法15ml MEM中加入75μl病毒。

[0097] (2)BHK细胞，试验需要细胞液浓度为4×105-5×105个/ml。

[0098] (3)阳性血清，狂犬病病毒抗体效价为10.26IU/ml，-30℃保存，需要稀释到0.5IU/ml，稀释20倍使用。

[0099] (4)待检血清。处理方法：56℃灭活30分钟，加入10％体积的沙星4℃过夜，-30℃保存。

[0100] (5)2％MEM培养液。

[0101] 2、试验步骤：

[0102] (1)将血清进行3倍梯度稀释。每孔先加入100μl MEM，第一列每孔加入50μl血清，3倍稀释至第6列(抗体效价高的可增加几个梯度)，做4个重复。

[0103] (2)每孔加入50μl稀释好的CVS-eGFP。(病毒对照中每孔加入150μlMEM，第一列每孔加50μl稀释好的病毒做4倍梯度稀释，稀释至第6列，做4个重复。细胞对照中不加病毒。)[0104] (3)37℃，5％CO2温箱中感作1小时。

[0105] (4)感作后每孔加入50μl消化稀释好的BHK细胞。

[0106] (5)37℃，5％CO2温箱中感作48小时。

[0107] (6)荧光显微镜下观察。

[0108] (7)计算抗体效价。

[0109] 结果如图2所示，A组犬血清的VNA滴度显著高于B组犬血清的VNA滴度，说明鞭毛蛋白具有免疫增强效应。

[0110] 最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

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