一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基
技术领域
[0001] 本
发明属于
生物技术应用领域,具体地,涉及一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基。
背景技术
[0002] 乳腺癌是女性最常见的癌症,主要包括
导管癌和小叶癌。2016年美国CA(A Cancer Journal for Clinicians)公布的最新统计数据显示,美国2016年预计将有420840例女性患乳腺癌,占女性新发
恶性肿瘤的38%,居女性恶性肿瘤发病率第一位,并且死亡人数将达52930例。更为严重的是全球的乳腺癌发病率正在逐年增长。
[0003] 细胞培养基是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展,目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要
基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关
疾病的病理和药物的药理(毒理)机制,开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。
[0004] 其中,MCF-7乳腺癌细胞作为人源性低转移乳腺癌细胞,常用于乳腺癌原位生长、血管生成等乳腺癌的体内外研究。此外,MCF-7乳腺癌细胞还会同其他乳腺癌高转移性细胞进行对比研究。
[0005] 本发明的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基营养丰富,MCF-7细胞生长速度快,细胞状态好,边界清晰,镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳,可以有利于乳腺癌的原位生长、血管生成以及与其他乳腺癌高转移性细胞进行对比研究等的相关研究。
发明内容
[0006] 发明目的:本发明提供了一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,专用于MCF-7乳腺癌细胞的体外培养。
[0007] 技术方案:本发明提供了一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:
葡萄糖 80-90份、
碳酸氢钠 10-20份、丙
酮酸钠8-18份、转
铁蛋白2-10份、氯化
钾 30-50份、无
水硫酸镁 5-12份、
氯化钠60-80份、氯化锂3-10份、无水
磷酸二氢钠 8-16份、叶酸 0.2-0.6份、肌醇0.5-1.5份、烟酰胺0.2-0.8份、无水氯化
钙20-40份、
硝酸铁0.1-0.5份、丁二酸 5-10份、丁二酸钠9-18份、D-泛酸钙 0.2-0.8份、
酒石酸胆
碱0.5-1份、核黄素0.1-
0.3份、
盐酸硫胺0.1-0.5份、盐酸吡哆辛 0.1-0.6份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.2-0.8份、亚麻油0.5-2份、聚
脂肪酸酯0.5-1.8份、酚红钠0.8-1.5份和去离子水100份。
[0008] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:葡萄糖 82-88份、
碳酸氢钠12-25份、
丙酮酸钠10-16份、转铁蛋白3-8份、
氯化钾35-45份、无水
硫酸镁 6-10份、氯化钠70-78份、氯化锂5-8份、无水磷酸二氢钠10-14份、叶酸 0.3-0.5份、肌醇0.8-1.2份、烟酰胺0.3-0.6份、无水
氯化钙25-35份、硝酸铁0.2-0.4份、丁二酸6-8份、丁二酸钠12-16份、D-泛酸钙 0.3-0.6份、酒石酸胆碱0.6-0.8份、核黄素0.1-0.3份、盐酸硫胺0.2-0.4份、盐酸吡哆辛 0.3-0.5份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.3-0.6份、亚麻油1-1.5份、聚脂肪酸酯0.8-1.6份、酚红钠1-1.3份和去离子水100份。
[0009] 作为本发明的一种优选方式,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:葡萄糖 86份、碳酸氢钠 18份、丙酮酸钠12份、转铁蛋白6份、氯化钾40份、无水硫酸镁8份、氯化钠75份、氯化锂6份、无水磷酸二氢钠12份、叶酸 0.4份、肌醇1份、烟酰胺0.5份、无水氯化钙30份、硝酸铁0.3份、丁二酸7份、丁二酸钠14份、D-泛酸钙 0.5份、酒石酸胆碱0.7份、核黄素0.2份、盐酸硫胺0.3份、盐酸吡哆辛 0.4份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.5份、亚麻油1.2份、聚脂肪酸酯1.2份、酚红钠1.2份和去离子水100份。
[0010] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,还包括3-8份
氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 5-10份、L-盐酸胱氨酸 3-8份、L-丝氨酸3-6份、甘氨酸1-5份、L-盐酸组氨酸 4-6份、L-异亮氨酸8-20份、L-亮氨酸7-18份、L-盐酸赖氨酸10-20份、L-甲硫氨酸1-6份、L-苯丙氨酸2-8份、L-苏氨酸5-15份、L-
色氨酸1-3份、L-酪氨酸5-9份和L-缬氨酸8-12份。
[0011] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,还包括2-5份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子3-8份、白介素6 2-5份、白介素10 1-4份、白介素12 3-6份、TNF-β2-10份、GM-CSF1-5份。
[0012] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,还包括体积比10-30%的胎
牛血清。
[0013] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的
链霉素。
[0014] 进一步的,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0015] 有益效果:本发明所述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,其组分合理,营养丰富,MCF-7细胞生长速度快,细胞状态好,边界清晰,镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳,可以有利于乳腺癌的原位生长、血管生成以及与其他乳腺癌高转移性细胞进行对比研究等的相关研究。
具体实施方式
[0016] 下面将通过几个具体
实施例,进一步阐明本发明,这些实施例只是为了说明问题,并不是一种限制。
[0017] 实施例1一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:包括以下组分:葡萄糖 80份、碳酸氢钠10份、丙酮酸钠8份、转铁蛋白2份、氯化钾 30份、无水硫酸镁 5份、氯化钠60份、氯化锂3份、无水磷酸二氢钠 8份、叶酸 0.2份、肌醇0.5份、烟酰胺0.2份、无水氯化钙20份、硝酸铁0.1份、丁二酸 5份、丁二酸钠9份、D-泛酸钙 0.2份、酒石酸胆碱0.5份、核黄素0.1份、盐酸硫胺0.1份、盐酸吡哆辛 0.1份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.2份、亚麻油
0.5份、聚脂肪酸酯0.5份、酚红钠0.8份和去离子水100份。
[0018] 另,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括3份氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 5份、L-盐酸胱氨酸 3份、L-丝氨酸3份、甘氨酸1份、L-盐酸组氨酸 4份、L-异亮氨酸8份、L-亮氨酸7份、L-盐酸赖氨酸10份、L-甲硫氨酸1份、L-苯丙氨酸2份、L-苏氨酸5份、L-色氨酸1份、L-酪氨酸5份和L-缬氨酸8份。
[0019] 再,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括2份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子3份、白介素6 2份、白介素10 1份、白介素12 3份、TNF-β2份、GM-CSF1份。
[0020] 此外,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括体积比10%的胎牛血清。并且,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。其中,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0021]实施例2
一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:包括以下组分:葡萄糖 90份、碳酸氢钠20份、丙酮酸钠18份、转铁蛋白10份、氯化钾 50份、无水硫酸镁 12份、氯化钠80份、氯化锂10份、无水磷酸二氢钠 16份、叶酸 0.6份、肌醇1.5份、烟酰胺0.8份、无水氯化钙40份、硝酸铁0.5份、丁二酸 10份、丁二酸钠18份、D-泛酸钙 0.8份、酒石酸胆碱1份、核黄素0.3份、盐酸硫胺0.5份、盐酸吡哆辛 0.6份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.8份、亚麻油2份、聚脂肪酸酯1.8份、酚红钠1.5份和去离子水100份。
[0022] 另,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括8份氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 10份、L-盐酸胱氨酸 8份、L-丝氨酸6份、甘氨酸5份、L-盐酸组氨酸 6份、L-异亮氨酸20份、L-亮氨酸18份、L-盐酸赖氨酸20份、L-甲硫氨酸6份、L-苯丙氨酸8份、L-苏氨酸15份、L-色氨酸3份、L-酪氨酸9份和L-缬氨酸12份。
[0023] 再,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括5份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子8份、白介素6 5份、白介素10 4份、白介素12 6份、TNF-β10份、GM-CSF 5份。
[0024] 此外,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括体积比30%的胎牛血清。并且,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。其中,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0025]实施例3
一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:包括以下组分:葡萄糖 82份、碳酸氢钠 12份、丙酮酸钠10份、转铁蛋白3份、氯化钾35份、无水硫酸镁 6份、氯化钠70份、氯化锂5份、无水磷酸二氢钠10份、叶酸 0.3份、肌醇0.8份、烟酰胺0.3份、无水氯化钙25份、硝酸铁0.2份、丁二酸6份、丁二酸钠12份、D-泛酸钙 0.3份、酒石酸胆碱0.6份、核黄素0.1份、盐酸硫胺0.2份、盐酸吡哆辛 0.3份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.3份、亚麻油1份、聚脂肪酸酯0.8份、酚红钠1份和去离子水100份。
[0026] 另,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括3份氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 5份、L-盐酸胱氨酸 3份、L-丝氨酸3份、甘氨酸1份、L-盐酸组氨酸 4份、L-异亮氨酸8份、L-亮氨酸7份、L-盐酸赖氨酸10份、L-甲硫氨酸1份、L-苯丙氨酸2份、L-苏氨酸5份、L-色氨酸1份、L-酪氨酸5份和L-缬氨酸8份。
[0027] 再,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括2份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子3份、白介素6 2份、白介素10 1份、白介素12 3份、TNF-β2份、GM-CSF 1份。
[0028] 此外,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括体积比10%的胎牛血清。并且,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。其中,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0029]实施例4
一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:包括以下组分:葡萄糖 88份、碳酸氢钠25份、丙酮酸钠16份、转铁蛋白8份、氯化钾45份、无水硫酸镁10份、氯化钠78份、氯化锂8份、无水磷酸二氢钠14份、叶酸 0.5份、肌醇1.2份、烟酰胺0.6份、无水氯化钙35份、硝酸铁0.4份、丁二酸8份、丁二酸钠16份、D-泛酸钙 0.6份、酒石酸胆碱0.8份、核黄素0.3份、盐酸硫胺0.4份、盐酸吡哆辛 0.5份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.6份、亚麻油
1.5份、聚脂肪酸酯1.6份、酚红钠1.3份和去离子水100份。
[0030] 另,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括8份氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 10份、L-盐酸胱氨酸 8份、L-丝氨酸6份、甘氨酸5份、L-盐酸组氨酸 6份、L-异亮氨酸20份、L-亮氨酸18份、L-盐酸赖氨酸20份、L-甲硫氨酸6份、L-苯丙氨酸8份、L-苏氨酸15份、L-色氨酸3份、L-酪氨酸9份和L-缬氨酸12份。
[0031] 再,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括5份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子8份、白介素6 5份、白介素10 4份、白介素12 6份、TNF-β10份、GM-CSF 5份。
[0032] 此外,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括体积比30%的胎牛血清。并且,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。其中,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0033]实施例5
一种MCF-7乳腺癌细胞专用培养基,以重量组分计,包括以下组分:包括以下组分:葡萄糖 86份、碳酸氢钠18份、丙酮酸钠12份、转铁蛋白6份、氯化钾40份、无水硫酸镁8份、氯化钠
75份、氯化锂6份、无水磷酸二氢钠12份、叶酸 0.4份、肌醇1份、烟酰胺0.5份、无水氯化钙30份、硝酸铁0.3份、丁二酸7份、丁二酸钠14份、D-泛酸钙 0.5份、酒石酸胆碱0.7份、核黄素
0.2份、盐酸硫胺0.3份、盐酸吡哆辛 0.4份、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.5份、亚麻油1.2份、聚脂肪酸酯1.2份、酚红钠1.2份和去离子水100份。
[0034] 另,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括5份氨基酸,所述氨基酸以重量组分计,由以下组分组成:L-盐酸精氨酸 8份、L-盐酸胱氨酸 6份、L-丝氨酸5份、甘氨酸4份、L-盐酸组氨酸5份、L-异亮氨酸12份、L-亮氨酸10份、L-盐酸赖氨酸16份、L-甲硫氨酸3份、L-苯丙氨酸6份、L-苏氨酸9份、L-色氨酸2份、L-酪氨酸6份和L-缬氨酸10份。
[0035] 再,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括3份辅助因子,所述辅助因子以重量组分计,由以下组分组成:胰岛素生长因子4份、白介素6 4份、白介素10 3份、白介素12 5份、TNF-β8份、GM-CSF3份。
[0036] 此外,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基还包括体积比25%的胎牛血清。并且,上述的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基以重量组分计,还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。其中,所述青霉素选自10000U/ml,所述链霉素选自10000μg/ml。
[0037] 以上所述仅是发明的几个实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离发明原理的前提下,还可以做出若干改进,这些改进也应视为本发明的保护范围。