具有排毒增强免疫力并防癌抗癌功能的猕猴桃酵素及其制备
工艺
技术领域
背景技术
[0002] 酵素是一种由
氨基酸组成的具有特殊
生物活性的物质，它存在于所有活的动
植物体内，是维持
机体正常功能，消化食物，修复组织等生命活动的一种必需物质，几乎参与所有的生命活动。同时酵素对体内由于具有作用明确、专一性强、疗效好等特点而被广泛用作助消化、抗炎、促凝、促纤溶和促进生物
氧化以及解毒、抗
肿瘤等方面的
治疗用药。
[0003] 猕猴桃除含有猕猴桃
碱、蛋白
水解酶、
单宁果胶和糖类等有机物，以及
钙、
钾、硒、锌、锗等微量元素和人体所需17种氨基酸外，还含有丰富的维生素C、葡萄酸、果糖、
柠檬酸、苹果酸、脂肪，具备丰富的医药功效、食疗价值和营养价值。研究证明，猕猴桃皮的营价值也不输于猕猴桃，猕猴桃中百分之八十的营养成分均集中在猕猴桃皮。猕猴桃皮富含抗
氧化剂，且其抗氧化剂的含量是果肉的三倍；此外，猕猴桃皮还含有丰富的果胶酶和水解蛋白酶，饭后食用猕猴桃和猕猴桃皮，2小时后就可使肠胃内的难溶性
粗蛋白得到分解，起到肠胃清洁的作用。猕猴桃皮中含有丰富的钙、镁及维生素C，有助于神经传导物质的合成与传递，此外，猕猴桃皮还含有其它水果中极为少见的钙质，具有稳定情绪及抑制交感神经的作用。
[0004] 十字花科甘蓝类蔬菜中的西兰花和白菜花是甘蓝家族的一双“姊妹花”，均富含矿物质、
蛋白质、
碳水化合物、
纤维、维生素C等。高含量的维生素C具有很强的清除自由基作用，尤其对致癌物—亚
硝酸胺的形成有明显的阻断作用。研究表明，西兰花和白菜花中所含的一种叫萝卜硫素的物质具有很强的防癌抗癌的功效，尤其对
乳腺癌、直肠癌、胃癌等有
预防作用，西兰花中此种物质含量更高，科学家们已从西兰花中提取这种物质用于癌症的预防和
辅助治疗。另外，西兰花还具有杀死导致胃癌的幽
门螺旋菌的功效。
[0005] 因此，将猕猴桃、菜花中的营养物质提取出来用于人体保健是非常必要的。获得体外营养物质的两大途径是生食和摄取营养物质补充物，但是生食麻烦费时，而且还有
农药污染的问题；同时食物经过高温和精加工后，食物中的酵素会遭到破坏。因此，酵素本身的特性及其制备过程决定了其是补充体外营养物质较好的选择。目前，国内酵素潜在市场空间广阔，然而传统的酵素生产需要经过1～3年的多次
发酵，不仅生产周期长，影响企业对市场的判断，而且在发酵的过程中常采用常温发酵，原料中营养成份大量流失，还容易引起一些杂菌的污染。酵素生产工艺有待进一步改进和提升，以满足市场的大量需求。
发明内容
[0006] 为了克服
现有技术的上述不足，本发明提供了一种增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素及其制备工艺。将猕猴桃与甘蓝类蔬菜中的西兰花和白菜花结合，通过多重共生菌种及分阶联合发酵技术，将猕猴桃和蔬菜的营养与功效成分充分释放，具有提高免疫力、预防癌症等多种生理活性。
[0007] 为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：
[0008] 本发明首先提供了一种排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素，该猕猴桃酵素由下列重量份的原料制成：猕猴桃60～80份、西兰花30～45份、胡萝卜30～45份、木
耳30～40份、白菜花30～40份、黄芪8～15份、白术8～15份、茯苓8～15份、当归8～15份、
银耳8～15份、洋葱8～15份、大蒜8～15份、香菇10～15份、芦笋10～15份、黄豆5～20份、蜂蜜10～15份、复合酶制剂3～8份、
益生菌发酵液10份。
[0009] 进一步地，所述益生菌包括
酵母菌发酵液、乳酸杆菌发酵液和
醋酸杆菌发酵液，所述酵母菌发酵液、乳酸杆菌发酵液和醋酸杆菌发酵液按重量各自占比4：3：3。
[0010] 进一步地，所述复合酶制剂包括蛋白酶、
淀粉酶、果胶酶、纤维酶，所述蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维酶按重量各自占比4：2：2：2。
[0011] 本发明还提供了一种排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0012] 步骤1：清洗，将去除表面柔毛的猕猴桃以及所有的蔬菜原料洗净，沥干后在紫外线辐照灭菌设备中杀菌，将杀菌后的猕猴桃打浆，将蔬菜类原料
粉碎，然后将猕猴桃和蔬菜混合后放入无菌罐中，其中猕猴桃60～80份、西兰花30～45份、胡萝卜30～45份、木耳30～40份、白菜花30～40份、黄芪8～15份、白术8～15份、茯苓8～15份、当归8～15份、银耳8～15份、洋葱8～15份、大蒜8～15份、香菇10～15份、芦笋10～15份、黄豆5～20份；
[0013] 步骤2：发酵前酶解：将步骤1中的得到的猕猴桃、蔬菜的混合物和复合酶制剂加入按重量1:4配比的纯净水中搅拌均匀并进行酶解，得到无菌原料酶解液；
[0014] 步骤3：初期发酵：按配方量向步骤2中的无菌原料酶解液中接入酵母菌发酵液，通无菌空气搅拌50～60min后在26℃度恒
温室初期发酵30天，每天搅拌两次，发酵结束后过100～200目筛即得一次滤液；
[0015] 步骤4：深层发酵：按配方量向步骤4中的初期发酵滤液中接入乳酸杆菌发酵液，22℃～25℃、密封条件下深层发酵60天；
[0016] 步骤5：储存发酵：将步骤5中发酵液通入无菌空气，按配方量向步骤5中的发酵液接入醋酸杆菌发酵液，并加入配方量的蜂蜜，密封罐口，22℃～25℃发酵25～30天，待pH值降至3.5～4.5下即发酵结束，精滤后弃去酵渣后滤液经低温
真空浓缩即得酵素原液。
[0017] 步骤6：步骤6中的酵素液再经检验合格、罐装，即得排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素。
[0018] 进一步地，所述步骤2中酶解的具体方法为：将猕猴桃和蔬菜的混合物和复合酶制剂加入按重量1:4配比的纯净水中搅拌均匀，然后进行提取，提取时间为7～8小时，
温度为31～32℃，提取后200目下过滤，滤渣进行二次提取，二次提取是在滤渣中加入滤渣
质量10倍的去离子水，常温提取2～3小时，将两次得到的提取液混合后浓缩至总液体体积的30％，得到无菌原料酶解液。
[0019] 本发明的有益效果：(1)本发明将猕猴桃与甘蓝类蔬菜中的西兰花和白菜花结合结合，通过多重共生菌种及分阶联合发酵技术，将猕猴桃、西兰花和白菜花的营养与功效成分充分释放，激活人
体细胞相应的酶的基因表达，因此，本发明的酵素具有提高免疫力、预防癌症等多种生理活性；(2)本发明的原料猕猴头采用不去皮发酵处理，充分保留了猕猴桃中丰富的营养成份，进一步提高了酵素产品的抗氧化、提高免疫力等功能；(3)本发明发酵工艺采用低温多段发酵，能更好的保留猕猴桃、西兰花和白菜花以及其它原料的营养成分，使产品具备各种果蔬的营养成份，
味道柔和纯正，绿色健康；同时配方中增加了黄芪、白术、胡萝卜、木耳、茯苓、当归、银耳、洋葱、大蒜、香菇、芦笋和黄豆，使本发明中猕猴桃酵素营养更加全面均衡，富含更多的活性成份，进一步加强了酵素排毒增强免疫力和防癌抗癌的功效。
附图说明
[0020] 图1为本发明的排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素生产工艺
流程图。
具体实施方式
[0021] 展示一下实例来具体说明本发明的某些
实施例，且不应解释为限制本发明的范围。对本发明公开的内容可以同时从材料、方法和反应条件进行改进，所有这些改进，均应落入本发明的的精神和范围之内。
[0022] 实施例1：
[0023] 一种排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素，该猕猴桃酵素由下列重量份的原料制成：猕猴桃60份、西兰花30份、胡萝卜30份、木耳30份、白菜花30份、黄芪8份、白术8份、茯苓8份、当归8份、银耳8份、洋葱8份、大蒜8份、香菇10份、芦笋10份、黄豆5份、蜂蜜10份、复合酶制剂3份、益生菌10份，其中复合酶制剂包括蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维酶，所述蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维酶按重量各自占比4：2：2：2，益生菌发酵液分别为酵母菌发酵液、乳酸杆菌发酵液和醋酸杆菌发酵液，重量各自占比4：3：3。
[0024] 以上具有增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素的步骤如下：
[0025] 步骤1：清洗，按上述的比例，取去除表面柔毛的猕猴桃以及所有的蔬菜原料洗净，沥干后在紫外线辐照灭菌设备中杀菌，将杀菌后的猕猴桃打浆，将蔬菜类原料粉碎，然后将猕猴桃和蔬菜混合后放入无菌罐中。此步骤中原料新鲜、无腐烂、无虫蛀，有良好的
风味和芳香，色泽稳定，酸度适中。
[0026] 步骤2：发酵前酶解：将步骤1中的得到的猕猴桃和蔬菜的混合物和复合酶制剂加入按重量1:4配比的纯净水中搅拌均匀，然后进行提取，提取时间为7～8小时，温度为31～32℃，酶提取时的pH值为4.5～6.0，提取后200目下过滤。滤渣进行二次提取，二次提取是在滤渣中加入滤渣质量10倍的去离子水，常温提取2～3小时，将两次得到的提取液混合后浓缩至总液体体积的30％，得到无菌原料酶解液。
[0027] 步骤3：初期发酵：按配方量向步骤2中的无菌原料酶解液中接入酵母菌发酵液，通无菌空气搅拌50～60min后在26℃度恒温室初期发酵30天，每天搅拌两次，发酵结束后过100～200目筛即得一次滤液；初期发酵主要进行蛋白质分解、脂肪分解、淀粉分解和果胶分解。
[0028] 其是酵母菌发酵液的制备方法为：
[0029] 1)斜面菌种培养：将柠檬形克勒克氏酵母(Kloeckera apiculata)接种斜面，30℃±1℃培养18-24h；
[0030] 2)液体菌种的制备：将果酒酵母菌苔用无菌水制备成菌悬液，按10％的接种量转接至液体
种子培养基中，30℃±1℃，125rpm振荡培养8-12h；然后用无菌水调整菌浓度为1×108-2×108cfu/mL，制备得到液体种子液；
[0031] 3)扩大培养：将果酒酵母液体种子液按15％的接种量转接至扩大培养基中，30℃±1℃，75rpm振荡培养8-12h，制备得到酵母菌发酵液；
[0032] 步骤4：深层发酵：按配方量向步骤4中的初期发酵滤液中接入乳酸杆菌发酵液，22℃～25℃、密封条件下深层发酵60天；
[0033] 其中乳酸杆菌发酵液的制备方法为：
[0034] 1)斜面菌种培养：将嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)和鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)分别接种斜面，37℃±1℃培养24-32h；
[0035] 2)液体菌种的制备：分别将嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌斜面菌苔用无菌水制备成菌悬液，按10％的接种量分别转接至液体种子培养基中，37℃±1℃，35rpm振荡培养12-24h；然后用无菌水调菌浓度为1×108～2×108cfu/mL，制备得到液体种子液；
[0036] 3)扩大培养：分别将嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的液体种子液按15％的接种量转接至扩大培养基中，37℃±1℃，35rpm振荡培养24-28h，制备得到各乳酸杆菌发酵液；
[0037] 4)将上述各乳酸菌发酵液按等比例混合，即得到乳酸杆菌发酵液。
[0038] 步骤5：储存发酵：将步骤5中发酵液通入无菌空气，按配方量向步骤5中的发酵液接入醋酸杆菌发酵液，并加入配方量的蜂蜜，密封罐口，22℃～25℃发酵25～30天，待pH值降至3.5～4.5下即发酵结束，精滤后弃去酵渣后滤液经低温真空浓缩即得酵素原液。
[0039] 其中醋酸杆菌发酵液的制备方法为：
[0040] 1)斜面菌种培养：将巴氏醋酸杆菌(Acetobacerpasteurianus)接种斜面，30℃±1℃培养24-36h；
[0041] 2)液体菌种的制备：将醋酸杆菌用无菌水制备成菌悬液，按10％的接种量转接至液体种子培养基中，30℃±1℃，30rpm振荡培养24-36h；然后用无菌水调整菌浓度为1×108～2×108cfu/mL，制备得到液体种子液；
[0042] 3)扩大培养：将醋酸杆菌液体种子液按13％的接种量转接至扩大培养基中，30℃±1℃，30rpm振荡培养8-12h，制备得到醋酸杆菌发酵液；
[0043] 步骤6：步骤6中的酵素液再经检验合格、罐装，即得增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素。
[0044] 实施例2：
[0045] 一种排毒增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素，该猕猴桃酵素由下列重量份的原料制成：猕猴桃80份、西兰花45份、胡萝卜45份、木耳40份、白菜花40份、黄芪15份、白术15份、茯苓15份、当归15份、银耳15份、洋葱15份、大蒜15份、香菇15份、芦笋15份、黄豆20份、蜂蜜15份、复合酶制剂8份、益生菌发酵液10份。其中复合酶制剂包括蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维酶，所述蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维酶按重量各自占比4：2：2：2，益生菌发酵液分别为酵母菌发酵液、乳酸杆菌发酵液和醋酸杆菌发酵液，重量各自占比4：3：3。
[0046] 以上具有增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素的步骤如下：
[0047] 步骤1：清洗，按上述的比例，取去除表面柔毛的猕猴桃以及所有的蔬菜原料洗净，沥干后在紫外线辐照灭菌设备中杀菌，将杀菌后的猕猴桃打浆，将蔬菜类原料粉碎，然后将猕猴桃和蔬菜混合后放入无菌罐中。此步骤中原料新鲜、无腐烂、无虫蛀，有良好的风味和芳香，色泽稳定，酸度适中。
[0048] 步骤2：发酵前酶解：将步骤1中的得到的猕猴桃和蔬菜的混合物和复合酶制剂加入按重量1:4配比的纯净水中搅拌均匀，然后进行提取，提取时间为7～8小时，温度为31～32℃，酶提取时的pH值为4.5～6.0，提取后200目下过滤。滤渣进行二次提取，二次提取是在滤渣中加入滤渣质量10倍的去离子水，常温提取2～3小时，将两次得到的提取液混合后浓缩至总液体体积的30％，得到无菌原料酶解液。
[0049] 步骤3：初期发酵：按配方量向步骤2中的无菌原料酶解液中接入酵母菌发酵液，通无菌空气搅拌60min后在26℃度恒温室初期发酵30天，每天搅拌两次，发酵结束后过100～200目筛即得一次滤液；初期发酵主要进行蛋白质分解、脂肪分解、淀粉分解和果胶分解。
[0050] 步骤4：深层发酵：按配方量向步骤4中的初期发酵滤液中接入乳酸杆菌发酵液，22℃～25℃、密封条件下深层发酵60天；
[0051] 步骤5：储存发酵：将步骤5中发酵液通入无菌空气，按配方量向步骤5中的发酵液接入醋酸杆菌发酵液，并加入配方量的蜂蜜，密封罐口，22℃～25℃发酵25～30天，待pH值降至3.5～4.5下即发酵结束，精滤后弃去酵渣后滤液经低温真空浓缩即得酵素原液。
[0052] 步骤6：步骤6中的酵素液再经检验合格、罐装，即得增强免疫力及防癌抗癌猕猴桃酵素。
[0053] 本实施例的酵素的制备方法中使用到的3种益生菌发酵液的制备方法与实施例1中益生菌发酵液的制备方法相同。
[0054] 对实施例1和实施例2制备得到的酵素原料进行ICP-MS半定量检验，结果如下表所示(单位：mg/kg)：
[0056]营养元素 实施例1 实施例2
维生素C 498 501
维生素E 81 96
钾 115 136
镁 110 136
钙 148 157
胡萝卜素 9.37 10.21
[0057] 上表中数据显示，本发明的酵素中含有丰富的维生素C、维生素E、维生素K等成份，具有抗氧化、促进肝脏解毒，增强人的体质，增加抗病能力，提高人体机体免疫功能；高含量的维生素C具有很强的清除自由基作用，尤其对致癌物—亚硝酸胺的形成有明显的阻断作用；研究表明，患胃癌时人体血清硒的水平明显下降，胃液中的维生素C的浓度也显著低于正常人，而本发明的酵素不但能给人补充一定量的维生素C，同时也能供给丰富的胡萝卜素，起到阻止癌前病变细胞形成的作用，抑制癌肿生长。
[0058] 除此以外，酵素中保留了原料中的如萝卜硫素物质、吲哚衍生物等防癌抗癌类物质和
抗坏血酸等能提高机体免疫力的物质，因此，本发明的猕猴桃酵素增强免疫力及防癌抗癌效果更加明显。
[0059] 此外，本发明的猕猴桃酵素中还含有Zn、Cr、Mn、Sr、Ti、Rb、Ba等对人体有益的微量元素。
[0060] 本发明将猕猴桃与甘蓝类蔬菜中的西兰花和白菜花结合结合，通过多重共生菌种及分阶联合发酵技术，将猕猴桃、西兰花和白菜花的营养与功效成分充分释放，激活人体细胞相应的酶的基因表达，因此，本发明的酵素具有提高免疫力、预防癌症等多种生理活性；本发明的原料猕猴头采用不去皮发酵处理，充分保留了猕猴桃中丰富的营养成份，进一步提高了酵素产品的抗氧化、提高免疫力等功能；本发明发酵工艺采用低温多段发酵，能更好的保留猕猴桃、西兰花和白菜花以及其它原料的营养成分，使产品具备各种果蔬的营养成份，味道柔和纯正，绿色健康；同时配方中增加了黄芪、白术、胡萝卜、木耳、茯苓、当归、银耳、洋葱、大蒜、香菇、芦笋和黄豆，使本发明中猕猴桃酵素营养更加全面均衡，富含更多的活性成份，进一步加强了酵素排毒增强免疫力和防癌抗癌的功效。
[0061] 以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉
本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
