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一种南瓜保健食品及其制备方法

阅读：562发布：2024-02-25

专利汇可以提供一种南瓜保健食品及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种南瓜保健食品，以南瓜为原料，充分利用南瓜深加工中的副产品——南瓜籽、南瓜叶和南瓜蜂花粉为原料，全程采用低温加工技术，不添加任何香精、香料、食品添加剂和化学物质，最大限度地保持了南瓜的天然风味、品质和口感，有效提高了南瓜粉组分原料的食品安全性和提取率，将多种功能性提取物科学复配，协同作用，显著增强了南瓜粉的营养性、功能性、速溶性、流动性、保健效果和保质期。同时为南瓜种植及深加工开辟了一条新的捷径，增加了种植户经济收入，解决了因副产品废弃而造成的环境污染，有力地解决了“三农问题”，具有一定的经济和社会价值。，下面是一种南瓜保健食品及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉30-50份，钙果纤维粉10-16份，南瓜芽粉4-8份，南瓜叶提取物2-6份，冬黑麦肽2-6份，破壁南瓜蜂花粉1-5份；
所述南瓜发酵粉是以南瓜为原料，经清洗，去皮、去籽、去瓤，微波干燥，冷冻破碎、酶解得发酵基质，然后向其中加入酿酒酵母进行发酵而制得；
所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016，保藏编号为CGMCC No.12789。
2.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述南瓜发酵粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜清洗，去皮、去籽、去瓤，切片，平铺于塑料盘中，立即在功率3-5kW,频率
2450MHz,温度105-115℃微波干燥8-10s，然后放入质量百分比浓度为0.2-0.6％的丝胶肽溶液中浸泡4-6h，取出，沥干，置-18—-22℃冷冻5-10min，破碎至粒径0.5-1mm，加入破碎物质量1-3倍的水，搅拌均匀，调节混合物pH值为4-6，加入混合物质量0.08-0.12％的混合酶，于45-65℃酶解40-60min,过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为100-200g/L,于80-
90℃灭酶10-14min得发酵基质，加入发酵基质质量5-10％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量4-6L/min,罐压0.01-0.03MPa，400-600rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至20-
30h时，一次性添加终浓度为24-26mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵20-24h；发酵液于孔径
80-120μm筛网过滤得最终发酵液，最终发酵液减压浓缩、冷冻干燥即得南瓜发酵粉；
所述混合酶为纤维素酶、糖化酶、蛋白酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:1-2:0.5-1.5均匀混合。
3.如权利要求2所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述酿酒酵母种子液培养条件：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；
所述摇瓶培养基质量组成为：(NH4)2SO4 6g/L，葡萄糖35g/L，K2HPO4·3H2O 3g/L，KH2PO4
0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO4 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO4·7H2O 0.1g/L，余量为水，pH 6.0。
4.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述南瓜芽粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜籽于电场强度2-4kV/cm高压静电处理3-5min；依次在1-3℃冷藏6-10h,-4--
6℃冷冻18-24h,立即放入0.8-1.2％的碳酸氢钠溶液中室温浸泡8-12min,取出,沥干，于3-
5℃静置18-24h,于频率2450MHz、功率3000W、温度30-34℃、料层厚度2-4cm微波干燥5-9s,然后置温度为33-36℃、pH值为6-8的浸泡液中浸泡4-6h，浸泡液含有质量百分比浓度为
0.03-0.05％的复合酶，每隔15-20min通风一次，通风压力0.13-0.15MPa，浸泡同时于电场强度10-15kV/cm，脉冲时间100-300μs,脉冲频率60-80Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至南瓜籽水分含量为40-45％；浸泡后的南瓜籽沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为20-24h，经发芽后的南瓜籽干燥至水分含量为5-8％，低温粉碎，过80-100目筛即得南瓜芽粉；
所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比3-5:1-3:1-2均匀混合。
5.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述破壁南瓜蜂花粉的制备方法，包括如下步骤：
1)南瓜蜂花粉的预处理：将蜂花粉置于装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，室温下于200-400W、20-40KHz清洗3-5min，漂洗，沥干，在质量百分比为4-6％的丝胶肽溶液中浸泡8-12min，取出，置-18—-22℃冷冻5-10min，破碎至粒径0.3-0.5mm，立即在功率
3-5kW,频率2450MHz,温度105-115℃微波加热8-10s得预处理南瓜蜂花粉；
2)蛹虫肠道匀浆的制备：将2-3日龄的蜂王幼虫肠道和11-12日龄的雄蜂蛹肠道按质量比6-10:1-3混合，加入混合物质量1-2倍的质量百分比为3-5％的丝胶肽溶液，搅拌均匀，置-18—-22℃冷冻5-10min，破碎，研磨成匀浆得蛹虫肠道匀浆；
3)将步骤1)预处理南瓜蜂花粉、南瓜芽粉、步骤2)蛹虫肠道匀浆和去离子水按质量比
20-25:11-17:1-3:100均匀混合，用乳酸调节混合料液pH值为4-6，40-50℃恒温酶解30-
50min，酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为10-20％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得破壁南瓜蜂花粉。
6.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述南瓜叶提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)南瓜叶粉的制备：将南瓜叶放在装有0.01-0.03％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率200-400W、频率20-30KHz室温超声清洗3-5min，漂洗，沥干，接着于-20℃预冻3-8h，然后进行真空冷冻干燥至水分含量5-8％，最后超微粉碎、过80-100筛得南瓜叶粉；
2)一次提取物的制备：加入南瓜叶粉质量1-10％的柠檬酸粉末、1-10倍5-30％的醋酸、
1-10倍60-95％的乙醇，均匀混合，50-150r/min匀速搅拌下，首先于温度20-30℃，功率100-
150W，微波提取0.5-2h；保温，调整功率为150-200W，继续微波提取0.5-2h；然后升温至30-
40℃，调整功率为150-200W，微波提取0.5-4h，微波提取同时于功率15-30W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为30-40％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得一次提取物；
3)二次提取物的制备：加入步骤2)提取液过滤残渣质量10-20倍60-80％的乙醇，均匀混合，50-150r/min匀速搅拌下，首先于温度55-70℃，功率100-150W，微波提取10-30min；然后升温至70-80℃，调整功率为150-250W，微波提取10-40min，微波提取同时于功率15－30W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为10-20％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得二次提取物；
4)将所述一次提取物和二次提取物均匀混合即得南瓜叶提取物。
7.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10-18:5-7:1-3。
8.如权利要求7所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述冬黑麦提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦的种子装盘，首先于电场强度4-6kV/cm高压静电处理3-5min；接着在浓度为12-18mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡1-3h，同时在电场强度2-6kV/cm，脉冲时间50-
100μs,脉冲频率100-150Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-
24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外自然光照5-7h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为5.8-6.2；最后加入冬黑麦种子质量10-30％的啤酒麦芽粉，首先于35-50℃酶解10-30min,然后于60-70℃酶解20-40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得冬黑麦提取物。
9.如权利要求1所述的南瓜保健食品，其特征在于：所述钙果纤维粉的制备方法，包括如下步骤：将新鲜钙果、菊粉、钙果茎、钙果叶按质量比6-12:3-7:2-6:1-3均匀混合，置于超声波清洗机中于200W、30KHz清洗3-5min，沥干，破碎至粒径0.3-0.7mm，加入破碎物质量
0.5-1.5倍的水，室温200-400W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-
40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-
15min；调节pH值为5-7，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于50-60℃酶解10-15min；酶解液减压浓缩至固形物含量为40-60％，放入微波干燥机于2000W、130-150℃进行间歇式干燥，使之水分达到4-6％，然后粉碎至粒径0.4-0.6mm，加入粉碎物质量0.2-0.4％的碳酸氢钠，均匀混合，调整混合物水分含量为15-18％，室温、密封静置2-4h，于螺杆转速105-115r/min、温度140-160℃条件挤压膨化，然后超微粉碎至粒径0.1-0.3mm即得钙果纤维粉；
所述生物酶为纤维素酶、漆酶、葡聚糖酶、甘露糖酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:
1-3:0.5-1.5:0.4-1:0.2-0.8均匀混合。
10.如权利要求1-9任一所述南瓜保健食品的制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10-30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15-25min,搅拌转速20-40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20-40min,搅拌转速40-60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

说明书全文

一种南瓜保健食品及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及南瓜深加工，具体涉及一种南瓜保健食品及其制备方法。

背景技术

[0002] 南瓜(学名：Cucurbita moschata(Duch.ex Lam.)Duch.ex Poiret)葫芦科南瓜属的一个种，一年生蔓生草本植物，茎常节部生根，叶柄粗壮，叶片宽卵形或卵圆形，质稍柔软，叶脉隆起，卷须稍粗壮，雌雄同株，果梗粗壮，有棱和槽，因品种而异，外面常有数条纵沟或无，种子多数，长卵形或长圆形，具有良好的食疗作用。南瓜具有较高的营养价值：每100克南瓜含蛋白质0.6克，脂肪0.1克，碳水化合物5.7克，粗纤维1.1克，灰分0.6克，钙10毫克，磷32毫克，铁0.5毫克，胡萝卜素0.57毫克，核黄素0.04毫克，尼克酸0.7毫克，抗坏血酸5毫克。此外，还含有瓜氨素、精氨酸、天门冬素、葫芦巴碱、腺瞟吟、葡萄糖、甘露醇、戊聚糖、果胶等。

[0003] 南瓜籽，又名南瓜子，性微寒，入肾经、肝经。南瓜籽所含的高含量亚油酸，能够有效地降低血糖，是糖尿病患者的良药。陕西陕北地区为南瓜籽的主产地。专家研究表明：南瓜多糖和南瓜蛋白可显著提高糖尿病大鼠胰岛素水平，南瓜籽油中的蛋白质和精氨酸可改善糖尿病大鼠的糖耐量。防癌：南瓜能消除亚硝酸铵的突变作用，制止癌细胞出现。

[0004] 南瓜叶，南瓜叶中含有多种维生素、蛋白质与矿物质，其中维生素C的含量很高，使它具有出色的清热解毒功效，夏季时用南瓜叶煮水喝，可以起到消暑除烦的作用。南瓜叶的功效：(1)南瓜叶有治疗刀伤的作用，大家平时可以把南瓜叶晒末，制成粉末存放起来，在生活中意外被刀伤害时，可以直接取出南瓜叶的粉末撒在伤品上，就能起到止血和止疼的作用。(2)南瓜叶有治疗有儿疳积的作用，如果小孩出现了疳积病症，大家可以用南瓜叶五百克和腥豆叶两百五十克一起晒干制成粉末，然后每次取出五钱与猪肝同时蒸，然后让孩子食用，治疗疳积的效果特别好。(3)南瓜有治疗痢疾的作用，特别是对于风火引起的下痢有出色功效，具体用法是把十片左右的南瓜叶去掉叶柄，然后加水煎制，煎好后加入少量的食盐，然后饮用，连用五到六次，痢疾就能痊愈。

[0005] 南瓜蜂花粉：南瓜蜂花粉是指蜜蜂采蜜时带回的南瓜花粉团，在蜂巢内经过储藏和发酵后形成的南瓜花粉。蜜蜂在采蜜时，携粉足会收集南瓜花粉，形成南瓜花粉团，在进入蜂巢后，南瓜花粉团会被储藏起来。其主要食疗成分是：蛋白质、氨基酸、维生素、蜂花粉素、微量元素、活性酶、黄酮类化合物、脂类、核酸、芸苔素、植酸等。其中氨基酸含量及比例是最接近联合国粮农组织(FAO)推荐的氨基酸模式，这在天然食品中极其少见。南瓜蜂花粉是具有营养价值和药效价值的物质所组成的浓缩物，它含蛋白质、碳水化合物、矿物质、维生素和其它活性物质。南瓜蜂花粉既是极好的天然营养食品，同时也是一种理想的滋补品，并具有一定的医疗作用。南瓜蜂花粉来源于大自然，是蜜蜂从南瓜(蜜源植物和花粉源植物)花蕊内采集的花粉粒，并加入了特殊的腺体分泌物(花蜜和唾液)混合而成了一种不规则扁圆形状物。南瓜蜂花粉具有独特的天然保健作用与医疗及美容价值，具有多种氨基酸、对人体有很大的营养补充作用，特别是里头的氨基酸，可以被人体完全吸收，对身体的抵抗力提高有重要作用。南瓜蜂花粉还含有丰富的维生素B1，对于延缓皮肤衰老、消除疲劳、改善记忆、滋润皮肤有显著的功效。

[0006] 目前，已经公开的涉及制备南瓜保健食品及其制备方法的专利文献众多，例如公布号为104738443A的发明专利公开了一种保健食品，各成分含量为：冬瓜粉65％、南瓜粉15％、盐0.5％、黑芝麻0.8％，该产品制作简单，营养丰富，可作为正餐的佐餐食品或饮品食用，糖尿病患者长期使用，病情得到明显的缓解，非患者食用可起到保健作用。

[0007] 中国专利CN 104957477 A公开了一种南瓜子保健食品的制作方法，属于食品技术领域。该方法在制作食品的过程中以玉米、绿豆、南瓜子和黑芝麻为原料，在合理搭配和烹饪后，制备出南瓜子保健食品，以解决人们合理膳食和营养失衡的问题。该南瓜子保健食品剧院保护胃粘膜帮助消化的作用，南瓜子能消除致癌物质亚硝胺的突变作用，有防癌功效，并能帮助肝、肾功能的恢复，增强肝、肾细胞的再生能力，促进生长发育，南瓜子中含有丰富的锌，参与人体内核酸、蛋白质的合成，是肾上腺皮质激素的固有成分，为人体生长发育的重要物质。总之，该南瓜子保健食品克服了人们日常生活中饮食单一化，营养摄取不均衡等问题。

[0008] 中国专利CN 104413360 A公开了一种既能预防高血糖，又能降低血糖的保健食品片剂。该发明是通过这样的技术方案来实现的：选用具有调节血糖作用，同时含有丰富营养保健成份的豇豆，辅以多种药食植物苦瓜、南瓜、荞麦、蜂胶、沙棘油等加工成片剂。该发明的有益效果是克服现有技术存在的不足，提出一种患者服用后可增强体质、有效降低血糖；延缓动脉粥样硬化，增强红细胞活力，减少血清含量、控制并发症、自然康复的降血糖保健食品。

[0009] 中国专利CN 104286831 A公开了一种糖尿病人的保健食品。技术方案包括：南瓜粉6，玉米粉5，螺旋藻3，大豆粉5，海苔粉2，燕麦粉5，山药粉5，灵芝粉5，茯苓粉4，猪胰5，桑叶3，麦芽粉4，葛根粉3，高粱粉5，荞麦粉4。该发明的功效：搭配合理，共起扶助正气、补中益气、降低血糠、增强免疫、恢复胰岛素分泌，适宜糖尿病人长期食用，疗效高。

[0010] 中国专利CN 102038158A公开了一种即食南瓜粉及其制备方法，其中即食南瓜粉的原料构成为：南瓜，复合酶，复合酶由纤维素酶、液化酶和果胶酶构成；其制备方法是由上述原料经酶解和喷雾干燥制得即食南瓜粉。此发明不仅能有效改善南瓜粉的冲调性和口感，利于消化吸收，同时也能提高降血糖、降胆固醇的医疗保健作用。

[0011] 中国专利CN 104738449 A公开了一种酶解法制备速溶南瓜粉的方法，其特征在于，所述方法是将南瓜原料经预处理、酶解、灭酶、过滤和喷雾干燥后得到速溶南瓜粉；所述南瓜原料预处理是指：将南瓜去籽，然后将带皮和瓤的南瓜切块，加水粉碎打浆，得南瓜浆；所述酶解配方为：0.05-0.25％的果胶酶，0.01-0.03％的纤维素酶。本发明产品色泽极佳，速溶性好，口味酸甜，营养丰富，利于人体吸收，可以温水直接冲调食用，也可以作食品原料添加到其它食品中去使用。

[0012] 中国专利CN 103621929 A公开了一种制备去糖脱腥南瓜粉的方法，具体是一种制备去糖脱腥南瓜粉的方法。该方法以新鲜老熟南瓜为原料，采用胶体研磨制浆工艺辅助果胶酶、糖化酶和去腥木瓜蛋白酶酶解脱腥技术，并利用超声波絮凝效应结合低温沉降固液分离工艺，最后调配加工而成。该工艺不仅有效去除了南瓜的腥气，而且改善了南瓜粉的口感和冲调性，该方法制得的南瓜粉可溶性膳食纤维含量高，含糖量低，适宜于糖尿病、高血压患者食用。同时既可作为食品工业调配加工的原料，也可根据个人口味加工食用。该方法的特点是成本低、能耗少、热敏性营养物质损失少。

[0013] 中国专利CN 105124457 A公开了一种微纳米南瓜粉的制备方法，发明包括原料清洗去皮瓤、切片晾晒、清洗、烘干、初粉碎、超音速气流粉碎、行星球磨粉碎、真空冷冻干燥；最终将南瓜果肉加工成微纳米级别的超细粉体。该发明制得的微纳米南瓜粉，不仅具有良好的口感，而且还避免了营养成分在加工过程中的流失，最重要的是通过比较不同粒度的微纳米南瓜粉的有效成分提取率的和消化率的不同，分别得出了合适的粉碎粒度，为微纳米南瓜粉在食品加工、制药等领域的应用及研究提供数据基础。

[0014] 上述公开的相关南瓜保健食品的专利没有充分利用南瓜原料的保健作用，其营养及生物活性物质含量低，功能性单一，营养及保健效果差(抗氧化性、降血糖、降胆固醇等)，消化吸收率低；同时没有对高糖南瓜原料食品处理，保健食品中多糖或单糖含量高，不适宜糖尿病患者食用。

[0015] 中国专利CN 106070630 A公开了一种南瓜酸奶，由以下重量份配比的原料制成：鲜牛奶300-900份、南瓜粉10-50份、柠檬汁液1-5份、发酵剂0.5-1.5份、稳定剂2-10份、蜂蜜
10-30份、水100-300份。该发明的酸奶味道可口，有益健康，适合长期食用。

[0016] 中国专利CN 103404809 B公开了一种南瓜自发粉及其专用发酵剂。该发明所提供的南瓜自发粉，由如下重量分数的各物质混合而成：南瓜粉150-200份，麦芯粉770-820份，安琪活性干酵母10-20份，梅山即发干酵母3-5份，安琪酿酒酵母2-5份。该发明所提供的南瓜自发粉原料纯天然，无添加剂，营养丰富，利于平衡人类膳食结构，同时对于血糖具有辅助调节作用，既可用于制备馒头、花卷等传统面食，也可用于烘焙西式点心，制作过程无需额外添加酵母、碱面等，制得的面食色泽金黄、结构蓬松、富弹性、口感绵软、有特征南瓜香气。本发明操作简单、易于生产、安全无毒无污染，在简化传统面食制作工艺、丰富面粉市场的同时，解决了我国南瓜资源大量滞留的问题，提供了南瓜利用的新途径。

[0017] 中国专利CN 103783616 B公开了一种发酵南瓜饮料的制备方法，它包括南瓜护色处理、南瓜面包干的制备以及南瓜面包干浸出物与南瓜浆混合后用植物乳杆菌菌液和酵母发酵处理的步骤。其中，植物乳杆菌菌液占发酵基质液体积的2-3％，酵母占发酵基质液重量的0.08-0.2％。该发明制得的发酵南瓜饮料营养价值丰富，含有独特的焙烤风味和发酵制品的风味，色泽金黄，质地均一，香气馥郁，口感适中，产品保存期长，深受消费者喜爱，为南瓜的深加工利用开辟了一条新途径。

[0018] 上述公开的专利虽然对南瓜原料处理并进行发酵，但发酵菌种增殖密度低，代谢产物功能性成分含量低，产品功能性不全面，功能性差。

[0019] 综上，以南瓜为原料，充分利用南瓜种植和加工后的南瓜叶、南瓜籽、南瓜蜂花粉等副产物，制备一种功能性及溶解性强、营养及保健效果好、易于消化吸收、保质期长的保健食品很有必要。

发明内容

[0020] 本发明所解决的技术问题是克服上述现有技术中南瓜保健食品制备的缺陷，以南瓜为原料，通过制备抗氧化性及生物活性强、具有降低血糖以及胆固醇功能的南瓜发酵粉，科学复配可显著提高南瓜保健食品抗冻效果、延缓和防止南瓜保健食品在冻藏时冰晶的形成和重结晶、防止南瓜保健食品结构、品质和风味受到破坏、延长市场流通期限的冬黑麦肽；可提高消化吸收率、抗氧化性含有丰富植物酶源的南瓜芽粉；可提高南瓜保健食品风味及抗氧化特性的南瓜叶提取物；可提高免疫力、延缓衰老、美容养颜的破壁南瓜蜂花粉；可防止南瓜保健食品结块、补充钙铁和膳食纤维、延长保质期、促进消化吸收、增强溶解性的钙果纤维粉。最终制得一种功能性及溶解性强、营养及保健效果好、易于消化吸收、保质期长的南瓜保健食品。

[0021] 为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

[0022] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：

[0023] 南瓜发酵粉30-50份，钙果纤维粉10-16份，南瓜芽粉4-8份，南瓜叶提取物2-6份，冬黑麦肽2-6份，破壁南瓜蜂花粉1-5份；

[0024] 优选地，所述南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：

[0025] 南瓜发酵粉35-45份，钙果纤维粉12-14份，南瓜芽粉5-7份，南瓜叶提取物3-5份，冬黑麦肽3-5份，破壁南瓜蜂花粉2-4份；

[0026] 更优选地，所述南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：

[0027] 南瓜发酵粉40份，钙果纤维粉13份，南瓜芽粉6份，南瓜叶提取物4份，冬黑麦肽4份，破壁南瓜蜂花粉3份；

[0028] 进一步地，所述南瓜发酵粉是以南瓜为原料，经清洗，去皮、去籽、去瓤，微波干燥，冷冻破碎、酶解得发酵基质，然后向其中加入功能性酿酒酵母进行发酵而制得；

[0029] 优选地，所述南瓜发酵粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜清洗，去皮、去籽、去瓤，切片，平铺于塑料盘中，立即在功率3-5kW,频率2450MHz,温度105-115℃微波干燥8-10s，然后放入质量百分比浓度为0.2-0.6％的丝胶肽溶液中浸泡4-6h，取出，沥干，置-
18—-22℃冷冻5-10min，破碎至粒径0.5-1mm，加入破碎物质量1-3倍的水，搅拌均匀，调节混合物pH值为4-6，加入混合物质量0.08-0.12％的混合酶，于45-65℃酶解40-60min,过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为100-200g/L,于80-90℃灭酶10-14min得发酵基质，加入发酵基质质量5-10％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量4-6L/min,罐压0.01-
0.03MPa，400-600rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至20-30h时，一次性添加终浓度为24-26mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵20-24h；发酵液于孔径80-120μm筛网过滤得最终发酵液，最终发酵液减压浓缩、冷冻干燥即得南瓜发酵粉；

[0030] 所述最终发酵液中GSH的含量为3268-3308mg/L.

[0031] 所述最终发酵液中酿酒酵母活菌含量为6×1011-8×1011cfu/ml；

[0032] 所述最终发酵液中总糖含量为2-10g/L；

[0033] 所述混合酶为纤维素酶、糖化酶、蛋白酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:1-2:0.5-1.5均匀混合；

[0034] 所述酿酒酵母种子液培养条件：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；

[0035] 所述摇瓶培养基质量组成为：(NH4)2SO4 6g/L，葡萄糖35g/L，K2HPO4·3H2O 3g/L，KH2PO4 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO4 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO4·7H2O 0.1g/L，余量为水，pH 6.0；

[0036] 所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016，该菌株已于保藏于2016年7月15日中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12789，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101；

[0037] 所述酿酒酵母tlj2016是从一株诱变菌株，经过诱变后获得的菌株tlj2016其葡萄糖耐受能力以及L-半胱氨酸耐受能力均得到提高，一方面在高浓度葡萄糖培养下能够提高细胞密度，另一方面L-半胱氨酸耐受能力的提高将有利于GSH在胞内大量合成，从而提高菌株大规模生产GSH的能力。

[0038] 进一步地，所述破壁南瓜蜂花粉是以南瓜蜂花粉为主要原料经超声清洗、冷冻、微波高温瞬时加热、蛹虫肠道匀浆和南瓜芽粉联合酶解、破壁而制得。

[0039] 优选地，所述破壁南瓜蜂花粉的制备方法，包括如下步骤：

[0040] 1)南瓜蜂花粉的预处理：将蜂花粉置装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，室温下于200-400W、20-40KHz清洗3-5min，漂洗，沥干，在质量百分比为4-6％的丝胶肽溶液中浸泡8-12min，取出，置-18—-22℃冷冻5-10min，破碎至粒径0.3-0.5mm，立即在功率3-5kW,频率2450MHz,温度105-115℃微波加热8-10s得预处理南瓜蜂花粉；

[0041] 2)蛹虫肠道匀浆的制备：将2-3日龄的蜂王幼虫肠道和11-12日龄的雄蜂蛹肠道按质量比6-10:1-3混合，加入混合物质量1-2倍的质量百分比为3-5％的丝胶肽溶液，搅拌均匀，置-18—-22℃冷冻5-10min，破碎，研磨成匀浆得蛹虫肠道匀浆；

[0042] 3)将步骤1)预处理南瓜蜂花粉、南瓜芽粉、步骤2)蛹虫肠道匀浆和去离子水按质量比20-25:11-17:1-3:100均匀混合，用乳酸调节混合料液pH值为4-6，40-50℃恒温酶解30-50min，酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为10-20％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得破壁南瓜蜂花粉。

[0043] 进一步地，所述南瓜芽粉是以南瓜籽为主要原料，依次经高压静电、冷冻、微波瞬时处理、超声辅助生物酶解浸泡、发芽、干燥、低温粉碎工艺而制得；

[0044] 优选地，所述南瓜芽粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜籽于电场强度2-4kV/cm高压静电处理3-5min；依次在1-3℃冷藏6-10h,-4--6℃冷冻18-24h,立即放入0.8-1.2％的碳酸氢钠溶液中室温浸泡8-12min,取出,沥干，于3-5℃静置18-24h,于频率2450MHz、功率3000W、温度30-34℃、料层厚度2-4cm微波干燥5-9s,然后置温度为33-36℃、pH值为6-8的浸泡液中浸泡4-6h，浸泡液含有质量百分比浓度为0.03-0.05％的复合酶，每隔15-20min通风一次，通风压力0.13-0.15MPa，浸泡同时于电场强度10-15kV/cm，脉冲时间100-300μs,脉冲频率60-80Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至南瓜籽水分含量为40-45％；浸泡后的南瓜籽沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为20-24h，经发芽后的南瓜籽干燥至水分含量为5-8％，低温粉碎，过80-100目筛即得南瓜芽粉；

[0045] 所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比3-5:1-3:1-2均匀混合。

[0046] 进一步地，所述南瓜叶提取物是南瓜叶经过超声清洗、真空冷冻干燥、超微粉碎后，将得到的南瓜叶粉经红外辅助微波分段提取制得；

[0047] 优选地，所述南瓜叶提取物的制备方法，包括如下步骤：

[0048] 1)南瓜叶粉的制备：将南瓜叶放在装有0.01-0.03％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率200-400W、频率20-30KHz室温超声清洗3-5min，漂洗，沥干，接着于-20℃预冻3-8h，然后进行真空冷冻干燥至水分含量5-8％，最后超微粉碎、过80-100筛得南瓜叶粉；

[0049] 2)一次提取物的制备：加入南瓜叶粉质量1-10％的柠檬酸粉末、1-10倍5-30％的醋酸、1-10倍60-95％的乙醇，均匀混合，50-150r/min匀速搅拌下，首先于温度20-30℃，功率100-150W，微波提取0.5-2h；保温，调整功率为150-200W，继续微波提取0.5-2h；然后升温至30-40℃，调整功率为150-200W，微波提取0.5-4h，微波提取同时于功率15-30W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为30-40％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得一次提取物；

[0050] 3)二次提取物的制备：加入步骤2)提取液过滤残渣质量10-20倍60-80％的乙醇，均匀混合，50-150r/min匀速搅拌下，首先于温度55-70℃，功率100-150W，微波提取10-30min；然后升温至70-80℃，调整功率为150-250W，微波提取10-40min，微波提取同时于功率15－30W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为10-20％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-0.3mm即得二次提取物；

[0051] 4)将所述一次提取物和二次提取物均匀混合即得南瓜叶提取物。

[0052] 进一步地，所述冬黑麦肽是以含有丰富抗冻基质的冬黑麦种子为原料制备的冬黑麦提取物与海藻糖、丝胶肽科学复配而成，不仅可显著提南瓜保健食品的抗冻性，进而大大提高其生物活性、营养性、功能性，而且又增加了南瓜保健食品的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为南瓜保健食品的抗冻保护剂；

[0053] 优选地，所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10-18:5-7:1-3；

[0054] 优选地，所述冬黑麦提取物是以冬黑麦的种子为原料，经高压静电、高压脉冲电场辅助水杨酸浸泡、冷藏冷冻处理后再经啤酒麦芽粉分段酶解而制得；

[0055] 更优选地，所述冬黑麦提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦的种子装盘，首先于电场强度4-6kV/cm高压静电处理3-5min；接着在浓度为12-18mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡1-3h，同时在电场强度2-6kV/cm，脉冲时间50-100μs,脉冲频率100-150Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外自然光照5-7h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为5.8-
6.2；最后加入冬黑麦种子质量10-30％的啤酒麦芽粉，首先于35-50℃酶解10-30min,然后于60-70℃酶解20-40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.1-
0.3mm即得冬黑麦提取物。

[0056] 进一步地，所述钙果纤维粉是以含钙、铁量和膳食纤维含量较高的钙果、菊粉、钙果茎和钙果叶为原料，经超声清洗、超声及高压脉冲电场提取、生物酶酶解、微波干燥、挤压膨化、超微粉碎而制得；其可溶性纤维素含量高、生物活性强、对人体益生菌群有重要的、积极作用的纤维，特别是可防止南瓜保健食品结块、补充钙铁、延长产品的保质期，与普通膳食纤维相比，其功能性、生物活性更强大；

[0057] 优选地，所述钙果纤维粉的制备方法，包括如下步骤：将新鲜钙果、菊粉、钙果茎、钙果叶按质量比6-12:3-7:2-6:1-3均匀混合，置于超声波清洗机中于200W、30KHz清洗3-5min，沥干，破碎至粒径0.3-0.7mm，加入破碎物质量0.5-1.5倍的水，室温200-400W、35-
40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率
200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；调节pH值为5-7，加入混合物质量0.1-
0.3％的生物酶，于50-60℃酶解10-15min；酶解液减压浓缩至固形物含量为40-60％，放入微波干燥机于2000W、130-150℃进行间歇式干燥，使之水分达到4-6％，然后粉碎至粒径
0.4-0.6mm，加入粉碎物质量0.2-0.4％的碳酸氢钠，均匀混合，调整混合物水分含量为15-
18％，室温、密封静置2-4h，于螺杆转速105-115r/min、温度140-160℃条件挤压膨化，然后超微粉碎至粒径0.1-0.3mm即得钙果纤维粉；

[0058] 所述生物酶为纤维素酶、漆酶、葡聚糖酶、甘露糖酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4:1-3:1-3:0.5-1.5:0.4-1:0.2-0.8均匀混合。

[0059] 本发明另一目的是提供上述南瓜保健食品的制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10-30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15-25min,搅拌转速20-40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20-40min,搅拌转速40-60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0060] 有益效果：

[0061] 本发明以南瓜为原料，充分利用南瓜深加工中的副产品——南瓜籽、南瓜叶和南瓜蜂花粉为原料，全程采用低温加工技术，不添加任何香精、香料、食品添加剂和化学物质，最大限度地保持了南瓜的天然风味、品质和口感，有效提高了南瓜保健食品组分原料的食品安全性和提取率，将多种功能性提取物科学复配，协同作用，显著增强了南瓜保健食品的营养性、功能性、速溶性、流动性、保健效果和保质期。通过制备抗氧化性及生物活性强、具有降低血糖以及胆固醇功能的南瓜发酵粉，科学复配可显著提高南瓜保健食品抗冻效果、延缓和防止南瓜保健食品在冻藏时冰晶的形成和重结晶、防止南瓜保健食品结构、品质和风味受到破坏、延长市场流通期限的冬黑麦肽；可提高消化吸收率、抗氧化性含有丰富植物酶源的南瓜芽粉；可提高南瓜保健食品风味及抗氧化特性的南瓜叶提取物；可提高免疫力、延缓衰老、美容养颜的破壁南瓜蜂花粉；可防止南瓜保健食品结块、补充钙铁和膳食纤维、延长保质期、促进消化吸收、增强溶解性的钙果纤维粉。最终制得一种功能性及溶解性强、营养及保健效果好、易于消化吸收、保质期长的南瓜保健食品。同时为南瓜种植及深加工开辟了一条新的捷径，增加了种植户经济收入，解决了因副产品废弃而造成的环境污染，有力地解决了“三农问题”，具有一定的经济和社会价值。试验表明：1)实验组、对照组A和对照组B的小鼠摄入样品的量是相同的，实验组小鼠的消化吸收率明显高于对照组A和对照组B，达到88.75％，而普通南瓜保健食品的消化吸收率却仅有53.75％和74.50％，表明本发明南瓜保健食品含有大量生物活性物质、消化酶、益生菌和益生因子，可促进营养物质的消化和吸收，更容易被机体消化吸收，具有十分显著的易消化吸收的特点；从体重更可以看出，较对照组A和B，实验组的小鼠体重有明显的升高，与初始体重20.03g相比提高了3.82g，平均增长率为24.06％。2)南瓜保健食品本身均具有降低血糖的作用，但相比于空白对照组以及实验组1和实验组2，实验组3在降低空腹血糖方面有显著作用，更显著有利于餐后血糖的改善；实验进行50d后,禁食12h,眼框取血,用放免法测定胰岛素水平,空白对照组,实验组1，实验组2，实验组3分别为18.97±12.54，21.78±4.83，24.67±11.73mmol/L，34.45±6.76mmol/L。实验组3胰岛素水平与实验组1以及实验组2相比有显著性差别,P<0.01。表明本发明的南瓜保健食品具有有效刺激胰岛素分泌功能。3)本发明在南瓜叶提取的第一阶段获得的一次提取物中总蛋白的提取率最高，且高于其他样品。说明第一阶段的浸提方法对于提取南瓜叶粉中的蛋白有较为显著的效果，且第一阶段在较短的浸提时间内即可获得较大总蛋白得率；本发明在南瓜叶提取的第二阶段获得的二次提取物中总黄酮的提取率最高，且高于其他样品。说明第二阶段的浸提方法对于提取南瓜叶粉中的黄酮类物质有较为显著的效果，且第二阶段在较短的浸提时间内即可获得较大黄酮类物质得率。4)本发明的南瓜保健食品对羟自由基的清除能力显著。且随着南瓜保健食品浓度的增加而增大。当浓度为16mg/mL时，清除率可达到96.88％，较市售的南瓜保健食品的清除率显著提高了
18.18％，故本发明的南瓜保健食品具有很强的抗氧化功能。5)冲饮本发明南瓜保健食品后，成年人血液中的总胆固醇的含量发生明显变化。与普通市售南瓜保健食品相比，本发明南瓜保健食品对成年人血液中的总胆固醇的含量明显的降低，其下降率为市售的6倍以上，而氯化钠组成年人血液中的总胆固醇的含量明显的增加，市售南瓜保健食品虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由此可知，本发明南瓜保健食品具有显著的降低胆固醇的保健效果。6)发明制备的南瓜保健食品从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售南瓜保健食品，特别是外观、风味和口感极好，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。7)在-12℃和40℃条件下储存12个月，本发明南瓜保健食品与市售相比，其蛋白酶酶活损失分别降低45％和16.9％，具有优良的温度储存性，酶活力非常稳定，同时也说明本发明南瓜保健食品含有的其它生物活性物质的损失率极低，具有较好的抗冻、抗热性能，产品质量稳定，保质期长。8)酿酒酵母tlj2016经5L高糖培养基发酵试验，发酵液中GSH的含量为3308mg/L；对于出发菌株，培养基中添加L-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低；而低浓度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着L-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而GSH浓度持续增长，这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH的生产；酿酒酵母tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。具体试验效果见实施例19-28，具体技术原理如下：

[0062] 1.本发明制备的南瓜发酵粉以南瓜为原料首先经微波瞬时灭酶、灭菌，最大限度地保持了南瓜果肉的天然色泽和风味以及营养和活性物质的含量，防止在后续加工过程发生非酶氧化褐变；经冷冻、破碎，既防止了破碎时高剪切力发热产生的营养物质和生物活性物质的损失，又防止了因冷冻产生的对营养细胞的刺伤损失；经混合酶酶解将大分子营养物质转化为小分子、微生物可吸收的小分子物质，为后续功能性酿酒酵母发酵提供了天然的发酵基质，最终发酵液中GSH的含量为3268-3308mg/L，酿酒酵母活菌含量为6×1011-8×1011cfu/ml，总糖含量为2-10g/L；制得的发酵南瓜粉含有大量的生物活性物质—谷胱甘肽和活性益生菌(酿酒酵母)，提高了南瓜保健食品的生理活性和营养物质含量，增强了南瓜保健食品的营养性、功能性、抗氧化性和保健作用，同时，果胶含量高、含糖量低，非常适合糖尿病患者食用。

[0063] 2.本发明制备的南瓜芽粉含有多种营养及生物活性物质，对浸泡过程的南瓜籽进行高压静电、冷冻和高压脉冲电场处理有效防止了浸泡液污染杂菌，避免了产生臭味渗透到南瓜芽粉产品中，同时，可有效增强种皮细胞壁和细胞膜的相对透性、提高南瓜种子的吸水率，促进种子提前萌发，提高超氧阴离子自由基的产生速率及三磷酸腺苷(ATP)含量，促进发芽前期南瓜种子多种生物酶(淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶、磷酸酯酶等)的激活和释放、胚乳溶解及功能性营养成分、生物活性成分、抗氧化成分的合成，促进了种子的呼吸代谢作用，加快了营养及功能性物质、生物活性成分、抗氧化成分的富集进程，缩短了富集时间，提高了营养及功能性物质、生物活性成分、抗氧化成分的含量，与生物酶解有机结合，可进一步降解种皮纤维素及半纤维素结构，增加种皮通透性，激活各种生物活性物质(内源酶等)活力最强，富集量更大，可溶性纤维素含量随之增大，为南瓜芽粉中的植物乳杆菌提供了营养因子，效果更佳显著；将高压静电、高压脉冲电场技术和生物酶解有机结合，缩短了浸泡时间，提高了发芽率和发芽均一度；可最大限度保持南瓜芽粉热敏性物质含量，尤其是抗氧化物质(谷胱甘肽、六磷酸肌醇、维生素C、多酚等)，最大限度地保证南瓜芽粉的天然色泽、口感和风味，同时还可起到杀菌作用；特别是：1)特别是经高压静电与冷冻工艺结合，可诱导南瓜籽中抗冻蛋白的合成与富集，且便于南瓜籽破壁，增强通透性；2)经微波瞬时适度杀胚后，在不影响南瓜芽种子的生物活性的情况下，随着水分的吸收，南瓜芽胚被抑制但不影响各项酶及生物活性物质的增长和胚乳的溶解，芽生长很短，呼吸作用弱，发芽损失低，提高了南瓜芽粉的产量和质量，显著提高了南瓜芽粉产品中功能性、营养性、生物活性物质的含量，提高了南瓜芽粉的保健功能(提高人体免疫力、去除人体内氧自由基、降血脂、延缓衰老)、营养价值和食品安全性。制备的南瓜芽发芽率达98％以上，芽长0.2-0.5mm,长度均一，发芽损失仅为1.3-1.8％，比现有发芽工艺损失降低5.2-7.5％，功能性物质含量高，其中γ-氨基丁酸含量为304.8-315.6mg/100g，谷胱甘肽16.5-18.5mg/100g，六磷酸肌醇(IP6)462.8-485.4mg/100g，膳食纤维3.9-4.4mg/100g。

[0064] 3.本发明制备的南瓜叶提取物是南瓜叶经过超声清洗、真空冷冻干燥、超微粉碎后，将得到的南瓜叶粉经红外辅助微波分段提取而得；提取方法不仅安全有效，而且可最大限度地保留了南瓜叶中的蛋白质、总黄酮类物质等有效成分，缩短了提取时间，提高了南瓜叶有效成分的提取率，进一步提升了南瓜保健食品的天然风味、营养价值及抗氧化等功能特性。

[0065] 4.本发明制备的破壁南瓜蜂花粉以南瓜蜂花粉为主要原料，将酶活力高、酶系丰富的天然植物源酶——南瓜芽粉和含有蜂花粉形成过程最原始、酶系最全的蜂王幼虫和雄蜂蛹唾液和肠道酶系的蛹虫肠道匀浆科学复配，并采用超声、冷冻、微波高温瞬时膨化技术和生物酶解技术，对南瓜蜂花粉进行快速、有效和深度破壁，破壁率在99％以上，全程采用低温提取和冷冻保护，最大限度地保留和蜂花粉的有效成分，提高了蜂花粉的利用率和吸收率，增加了南瓜保健食品的营养和保健功效，同时也赋予了南瓜保健食品最天然的风味和口感。

[0066] 5.本发明制备的钙果纤维粉是以含钙、铁量和膳食纤维含量较高的钙果、菊粉、钙果茎和钙果叶为原料，经超声清洗、超声及高压脉冲电场提取、生物酶酶解、微波干燥、挤压膨化、超微粉碎而制得；特别是由于钙、铁含量高，与改性后的膳食纤维协同作用，不仅有效提高、增强了南瓜保健食品的流动性，降低了南瓜保健食品吸湿性能，防止高糖含量的南瓜保健食品粘结成块；而且补充了大量的钙、铁等矿质元素，避免了并发症的产生。同时经超微粉碎后，加入一定量的碳酸氢钠，经调整水分后密封静置，可显著增强膳食纤维的膨化度和可溶性膳食纤维的含量，提高了膳食纤维的功能性，所得钙果纤维粉持水性、膨胀性、增稠性更强，比单一方法制备的改性膳食纤维提高40-50％，且不受酸、碱、盐的影响，可溶性纤维素含量高，比单一方法制备的改性膳食纤维提高20-40％，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人体肠道的生长及繁殖能力，增加益生菌菌群的种类和数量，降低人体肠道pH值，改善人体肠道微生态环境；吸附能力强，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对他们的吸收；离子交换能力增强，对金属元素，特别是重金属元素吸附效果更强，有效防止了人体重金属中毒；调节和维持肠道菌群的定植时间，增强肠道的消化和吸收能力，提高机体免疫力；有效促进胃肠蠕动，减缓并消除胃胀、腹胀等不良反应；强大的包埋作用可防止环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对南瓜保健食品的影响，进一步稳定了南瓜保健食品的生物活性和稳定性，延长了产品的保质期。

[0067] 6.本发明制备的冬黑麦肽是以含有丰富抗冻基质的冬黑麦种子为原料制备的冬黑麦提取物与海藻糖、丝胶肽科学复配而成，不仅可显著提南瓜保健食品的抗冻性，进而大大提高其生物活性、营养性、功能性，而且又增加了南瓜保健食品的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为南瓜保健食品的抗冻保护剂；其中的冬黑麦提取物将含有丰富抗冻基质的冬黑麦种子经高压静电处理、高压脉冲电场辅助水杨酸诱导、低温分段胁迫处理和自然光照有机结合，使得本身含有抗冻基质的活性种子在外界环境的胁迫和诱导下，抗冻基质成分得到了最全面、最丰富的合成和积累，经富含淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、纤维素酶、磷酸酯酶、脂肪酶等多种酶系的啤酒麦芽粉分段酶解后可最大化溶出，同时可使抗冻肽含量增加，提高了冬黑麦提取物的渗透性、溶解性和稳定性，进而消除了因抗冻蛋白造成的南瓜保健食品溶解性差的问题，与钙果纤维粉等其它原料科学复配，效果更佳。

[0068] 需要说明的是本发明南瓜保健食品的技术效果是各组分相互协同、相互作用的结果，并非简单的原料功能的叠加，各原料组分的科学复配和提取，产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。

具体实施方式

[0069] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

[0070] 实施例1 原料制备

[0071] 1.南瓜发酵粉的制备：

[0072] 所述南瓜发酵粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜清洗，去皮、去籽、去瓤，切片，平铺于塑料盘中，立即在功率4kW,频率2450MHz,温度110℃微波干燥9s，然后放入质量百分比浓度为0.4％的丝胶肽溶液中浸泡5h，取出，沥干，置-20℃冷冻8min，破碎至粒径0.8mm，加入破碎物质量2倍的水，搅拌均匀，调节混合物pH值为5，加入混合物质量0.1％的混合酶，于55℃酶解50min,过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为150g/L,于85℃灭酶12min得发酵基质，加入发酵基质质量8％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量5L/min,罐压0.02MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至25h时，一次性添加终浓度为
25mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵22h；发酵液于孔径100μm筛网过滤得最终发酵液，最终发酵液减压浓缩、冷冻干燥即得南瓜发酵粉；

[0073] 所述最终发酵液中GSH的含量为3308mg/L.

[0074] 所述最终发酵液中酿酒酵母活菌含量为8×1011cfu/ml；

[0075] 所述最终发酵液中总糖含量为2g/L；

[0076] 所述混合酶为纤维素酶、糖化酶、蛋白酶单宁酶按质量比3:2:1.5:1均匀混合；

[0077] 所述酿酒酵母种子液培养条件：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；

[0078] 所述摇瓶培养基质量组成为：(NH4)2SO4 6g/L，葡萄糖35g/L，K2HPO4·3H2O 3g/L，KH2PO4 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO4 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO4·7H2O 0.1g/L，余量为水，pH 6.0；

[0079] 所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016，保藏编号为CGMCC No.12789。

[0080] 2.南瓜芽粉的制备：

[0081] 所述南瓜芽粉的制备方法，包括如下步骤：将南瓜籽于电场强度3kV/cm高压静电处理4min；依次在2℃冷藏8h,-5℃冷冻21h,立即放入1.0％的碳酸氢钠溶液中室温浸泡10min,取出,沥干，于4℃静置21h,于频率2450MHz、功率3000W、温度32℃、料层厚度3cm微波干燥7s,然后置温度为35℃、pH值为7的浸泡液中浸泡5h，浸泡液含有质量百分比浓度为
0.04％的复合酶，每隔18min通风一次，通风压力0.14MPa，浸泡同时于电场强度12kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率70Hz条件进行高压脉冲电场处理，直至南瓜籽水分含量为42％；浸泡后的南瓜籽沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持22℃，暗发芽时间为22h，经发芽后的南瓜籽干燥至水分含量为6％，低温粉碎，过100目筛即得南瓜芽粉；

[0082] 所述复合酶为纤维素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按质量比4:2:1.5均匀混合。

[0083] 3.破壁南瓜蜂花粉的制备：

[0084] 破壁南瓜蜂花粉的制备方法，包括如下步骤：

[0085] 1)南瓜蜂花粉的预处理：将蜂花粉置装有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，室温下于300W、30KHz清洗4min，漂洗，沥干，在质量百分比为5％的丝胶肽溶液中浸泡10min，取出，置-20℃冷冻8min，破碎至粒径0.4mm，立即在功率4kW,频率2450MHz,温度110℃微波加热9s得预处理南瓜蜂花粉；

[0086] 2)蛹虫肠道匀浆的制备：将2-3日龄的蜂王幼虫肠道和11-12日龄的雄蜂蛹肠道按质量比8:2混合，加入混合物质量1.5倍的质量百分比为4％的丝胶肽溶液，搅拌均匀，置-20℃冷冻8min，破碎，研磨成匀浆得蛹虫肠道匀浆；

[0087] 3)将步骤1)预处理南瓜蜂花粉、南瓜芽粉、步骤2)蛹虫肠道匀浆和去离子水按质量比22:14:2:100均匀混合，用乳酸调节混合料液pH值为5，45℃恒温酶解40min，酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为15％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.2mm即得破壁南瓜蜂花粉。

[0088] 4.南瓜叶提取物的制备：

[0089] 所述南瓜叶提取物的制备方法，包括如下步骤：

[0090] 1)南瓜叶粉的制备：将南瓜叶放在装有0.02％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于功率300W、频率25KHz室温超声清洗4min，漂洗，沥干，接着于-20℃预冻5h，然后进行真空冷冻干燥至水分含量6％，最后超微粉碎、过100目筛得南瓜叶粉；

[0091] 2)一次提取物的制备：加入南瓜叶粉质量5％的柠檬酸粉末、5倍17％的醋酸、5倍75％的乙醇，均匀混合，100r/min匀速搅拌下，首先于温度25℃，功率120W，微波提取1.5h；
保温，调整功率为180W，继续微波提取1h；然后升温至35℃，调整功率为180W，微波提取2h，微波提取同时于功率25W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为
35％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.2mm即得一次提取物；

[0092] 3)二次提取物的制备：加入步骤2)提取液过滤残渣质量15倍70％的乙醇，均匀混合，100r/min匀速搅拌下，首先于温度62℃，功率130W，微波提取20min；然后升温至75℃，调整功率为200W，微波提取25min，微波提取同时于功率20W进行红外辅助提取，提取液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为15％，浓缩液真空冷冻干燥、低温粉碎至粒径0.2mm即得二次提取物；

[0093] 4)将所述一次提取物和二次提取物均匀混合即得南瓜叶提取物。

[0094] 5.冬黑麦提取物的制备：

[0095] 所述冬黑麦提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦的种子装盘，首先于电场强度5kV/cm高压静电处理4min；接着在浓度为15mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2h，同时在电场强度4kV/cm，脉冲时间80μs,脉冲频率120Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于4℃静置21h,然后依次在2℃冷藏3d,-4℃冷冻2d、-16℃冷冻12h,立即放在室外自然光照6h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径1.0mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为6.0；最后加入冬黑麦种子质量20％的啤酒麦芽粉，首先于42℃酶解20min,然后于65℃酶解30min；酶解液过滤、滤液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径
0.2mm即得冬黑麦提取物。

[0096] 6.钙果纤维粉的制备：

[0097] 所述钙果纤维粉的制备方法，包括如下步骤：将新鲜钙果、菊粉、钙果茎、钙果叶按质量比8:5:4:2均匀混合，置于超声波清洗机中于200W、30KHz清洗4min，沥干，破碎至粒径0.5mm，加入破碎物质量1.0倍的水，室温300W、40KHz条件超声提取12min,然后在电场强度
30kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；调节pH值为
6，加入混合物质量0.2％的生物酶，于55℃酶解12min；酶解液减压浓缩至固形物含量为
50％，放入微波干燥机于2000W、140℃进行间歇式干燥，使之水分达到5％，然后粉碎至粒径
0.5mm，加入粉碎物质量0.3％的碳酸氢钠，均匀混合，调整混合物水分含量为16％，室温、密封静置3h，于螺杆转速110r/min、温度150℃条件挤压膨化，然后超微粉碎至粒径0.2mm即得钙果纤维粉；

[0098] 所述生物酶为纤维素酶、漆酶、葡聚糖酶、甘露糖酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:2:2:1:0.7:0.5均匀混合。

[0099] 以下实施例2-6所使用的南瓜发酵粉、南瓜芽粉、破壁南瓜蜂花粉、南瓜叶提取物、冬黑麦提取物、钙果纤维粉均为实施例1制备。

[0100] 实施例2

[0101] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉40份，钙果纤维粉13份，南瓜芽粉6份，南瓜叶提取物4份，冬黑麦肽4份，破壁南瓜蜂花粉3份；

[0102] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝14:6:2；

[0103] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的20％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合20min,搅拌转速30r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合30min,搅拌转速50r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0104] 实施例3

[0105] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉30份，钙果纤维粉10份，南瓜芽粉4份，南瓜叶提取物2份，冬黑麦肽2份，破壁南瓜蜂花粉1份；

[0106] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:5:1；

[0107] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0108] 实施例4

[0109] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉50份，钙果纤维粉16份，南瓜芽粉8份，南瓜叶提取物6份，冬黑麦肽6份，破壁南瓜蜂花粉5份；

[0110] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:7:3；

[0111] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0112] 实施例5

[0113] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉35份，钙果纤维粉12份，南瓜芽粉5份，南瓜叶提取物3份，冬黑麦肽3份，破壁南瓜蜂花粉2份；

[0114] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:7:1；

[0115] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0116] 实施例6

[0117] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉45份，钙果纤维粉14份，南瓜芽粉7份，南瓜叶提取物5份，冬黑麦肽5份，破壁南瓜蜂花粉4份；

[0118] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:5:3；

[0119] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0120] 实施例7

[0121] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉65份，钙果纤维粉20份，南瓜芽粉13份，南瓜叶提取物1.5份，冬黑麦肽0.6份，破壁南瓜蜂花粉0.6份；

[0122] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝14:6:2；

[0123] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的20％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合20min,搅拌转速30r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合30min,搅拌转速50r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0124] 实施例8

[0125] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉55份，钙果纤维粉17份，南瓜芽粉10份，南瓜叶提取物1份，冬黑麦肽0.2份，破壁南瓜蜂花粉0.2份；

[0126] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:5:1；

[0127] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0128] 实施例9

[0129] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉75份，钙果纤维粉23份，南瓜芽粉16份，南瓜叶提取物2份，冬黑麦肽1份，破壁南瓜蜂花粉1份；

[0130] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:7:3；

[0131] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0132] 实施例10

[0133] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉25份，钙果纤维粉3份，南瓜芽粉1.4份，南瓜叶提取物0.5份，冬黑麦肽0.6份，破壁南瓜蜂花粉0.6份；

[0134] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝14:6:2；

[0135] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的20％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合20min,搅拌转速30r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合30min,搅拌转速50r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0136] 实施例11

[0137] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉20份，钙果纤维粉2份，南瓜芽粉1份，南瓜叶提取物0.2份，冬黑麦肽0.2份，破壁南瓜蜂花粉0.2份；

[0138] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:5:1；

[0139] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0140] 实施例12

[0141] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉30份，钙果纤维粉4份，南瓜芽粉1.8份，南瓜叶提取物0.8份，冬黑麦肽1份，破壁南瓜蜂花粉1份；

[0142] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:7:3；

[0143] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0144] 实施例13

[0145] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉65份，钙果纤维粉6份，南瓜芽粉13份，南瓜叶提取物4份，冬黑麦肽4份，破壁南瓜蜂花粉3份；

[0146] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝14:6:2；

[0147] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的20％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合20min,搅拌转速30r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合30min,搅拌转速50r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0148] 实施例14

[0149] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉55份，钙果纤维粉3份，南瓜芽粉10份，南瓜叶提取物2份，冬黑麦肽2份，破壁南瓜蜂花粉1份；

[0150] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:5:1；

[0151] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0152] 实施例15

[0153] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉75份，钙果纤维粉9份，南瓜芽粉16份，南瓜叶提取物6份，冬黑麦肽6份，破壁南瓜蜂花粉5份；

[0154] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:7:3；

[0155] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0156] 实施例16

[0157] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉65份，钙果纤维粉3份，南瓜芽粉3份，南瓜叶提取物1.5份，冬黑麦肽0.6份，破壁南瓜蜂花粉0.6份；

[0158] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝14:6:2；

[0159] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的20％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合20min,搅拌转速30r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合30min,搅拌转速50r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0160] 实施例17

[0161] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉55份，钙果纤维粉2份，南瓜芽粉2份，南瓜叶提取物1份，冬黑麦肽0.2份，破壁南瓜蜂花粉0.2份；

[0162] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝10:5:1；

[0163] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的10％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合15min,搅拌转速20r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合20min,搅拌转速40r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0164] 实施例18

[0165] 一种南瓜保健食品，主要由以下重量份数的原料制备：南瓜发酵粉75份，钙果纤维粉4份，南瓜芽粉4份，南瓜叶提取物2份，冬黑麦肽1份，破壁南瓜蜂花粉1份；

[0166] 所述冬黑麦肽的质量组成为：冬黑麦提取物:海藻糖:丝胶肽＝18:7:3；

[0167] 制备方法，按照配方，包括如下步骤：首先依次将破壁南瓜蜂花粉、冬黑麦肽、南瓜叶提取物、南瓜芽粉、钙果纤维粉质量的30％、南瓜发酵粉加入V型混合罐均匀混合25min,搅拌转速40r/min,然后加入剩余钙果纤维粉均匀混合40min,搅拌转速60r/min,无菌灌装、密封、包装即得南瓜保健食品。

[0168] 实施例19 南瓜保健食品的消化吸收率以及增重的性能试验

[0169] 选择4周龄雄性，平均体重为20g昆明种小鼠，随机分为实验组、对照组A、对照组B和氯化钠对照组。实验组为本发明实施例2制备的的南瓜保健食品；对照组A和B为市售普通南瓜保健食品；

[0170] 小鼠每组10只。各组动物均用代谢笼单笼词养。实验小鼠于第1天9：00开始禁食不禁水，12h后进行灌胃，正常对照组和实验组动物分别用配好的浓度为0.1g/ml的南瓜保健食品，每次1mL，每8h灌胃一次，连续4次。氯化钠对照组小鼠每次只给予相同剂量的氯化钠。收集各组小鼠类便并称量湿重和干重，计算粪便含水量和食物消化吸收率。

[0171] 其中第二次灌胃后1h后，三组小鼠均给予30％D-木糖溶液0.5mL灌胃，1h后采用眼球后静脉丛取血法取血200μL，1500r/min离心10min，吸取上层血清备用，检测D-木糖含量。

[0172] 计算食物消化吸收率：

[0173] 实验组、对照组A和对照组B样品浓度为0.1g/ml，每次灌胃1mL，共灌胃4次，每只小鼠的样品摄入量为0.4g。

[0174] 按以下公式计算样品吸收率：

[0175]

[0176] D-木糖的含量:采用间苯三酷法检测血清中D-木糖含量。

[0177] 表1 空腹小鼠对南瓜保健食品的吸收率

[0178]

[0179] 由本次实验空腹小鼠对南瓜保健食品的消化吸收率检测结果可见，实验组、对照组A和对照组B的小鼠摄入样品的量是相同的，实验组小鼠的消化吸收率明显高于对照组A和对照组B，达到88.75％，而普通南瓜保健食品的消化吸收率却仅有53.75％和74.50％，表明本发明南瓜保健食品含有大量生物活性物质、消化酶、益生菌和益生因子，可促进营养物质的消化和吸收，更容易被机体消化吸收，具有十分显著的易消化吸收的特点。

[0180] 表2 小鼠增重情况

[0181]分组平均始重(g/只) 平均末重(g/只) 平均增长率(％)
氯化钠对照组 20.03±0.21 18.70±0.59 -6.64
对照组A 20.00±0.04 20.23±0.09 1.15
对照组B 20.02±0.13 21.22±0.65 5.99
实验组 20.03±0.15 24.85±0.05 24.06

[0182] 从体重更可以看出，较对照组A和B，实验组的小鼠体重有明显的升高，与初始体重20.03g相比提高了3.82g，平均增长率为24.06％。

[0183] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0184] 实施例20 南瓜保健食品降血糖性能测试

[0185] 1.模型制造

[0186] 预选ICR雄性小鼠68只(18～24g)。其中10只作空白对照,其余58只禁食16h后,经腹腔注射2％四氧嘧啶(190mg/kg),在低血糖时相给20％葡萄糖作饮用水。72h后选用空腹血糖≥13.0mmol/L 30只。随机分成模型对照及南瓜保健食品实验组(高低剂量)3组,每组10只。

[0187] 2 实验设计

[0188] 实验组1、2、3分别为1：市售的普通南瓜保健食品；2：市售的超细南瓜保健食品；3：本发明实施例2制备的南瓜保健食品。

[0189] 实验组按南瓜保健食品质量10g/kg用水溶解并定容至20ml进行灌胃,每日一次,不足部分喂鼠料,空白对照组按常规饲养。分别测定空腹血糖、餐后血溏:考察给药时间与降糖作用的关系；观察饮水量与排尿量、排便量变化等项目。50d后解剖,取眼眶血测胰岛素水平。

[0190] 3 血糖变化

[0191] 用南瓜保健食品饲料喂养15d后测空腹及餐后血糖。空腹血糖测定前禁食12h,与0d比较,计算下降百分率,数据如表3。餐后血糖测定在给饲料3h后进行。

[0192] 实验数据表明南瓜保健食品本身均具有降低血糖的作用，但相比于空白对照组以及实验组1和实验组2，实验组3在降低空腹血糖方面有显著作用，更显著有利于餐后血糖的改善。

[0193] 表3 小鼠血糖变化情况

[0194]

[0195] 4 胰岛素水平测定

[0196] 实验进行50d后,禁食12h,眼框取血,用放免法测定胰岛素水平,空白对照组,实验组1，实验组2，实验组3分别为18.97±12.54，21.78±4.83，24.67±11.73mmol/L，34.45±6.76mmol/L。实验组3胰岛素水平与实验组1以及实验组2相比有显著性差别,P<0.01。表明本发明的南瓜保健食品具有有效刺激胰岛素分泌功能。

[0197] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0198] 实施例21 本发明制备的南瓜叶提取物有效物质含量的测定

[0199] 1.蛋白质含量的测定：利用微量凯氏定氮法测定不同样品的蛋白提取率，检测结果如表4：

[0200] 表4 不同南瓜叶提取物样品的总黄酮含量

[0201]

[0202] 其中A样品为市售的南瓜叶提取物保健品；B样品为工厂利用常规方法提取的南瓜叶提取物；C：某研究院提供的南瓜叶提取物；D：本发明实施例1制备的南瓜叶提取物；E：本发明实施例1制备南瓜叶提取物的一次提取物；F:本发明实施例1制备南瓜叶提取物的二次提取物。

[0203] 足以证明，本发明在南瓜叶提取的第一阶段获得的一次提取物中总蛋白的提取率最高，且高于其他样品。说明第一阶段的浸提方法对于提取南瓜叶粉中的蛋白有较为显著的效果，且第一阶段在较短的浸提时间内即可获得较大总蛋白得率。

[0204] 2.黄酮类化合物的测定：

[0205] 2.1 测定原理

[0206] 以芦丁为对照测定南瓜叶提取物的总黄酮含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜的pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物,在可见光波长段内获得稳定吸收。

[0207] 2.2 样品处理

[0208] 准确称取1.0g本发明实施例1制备的南瓜叶提取物，加水约150mL溶解,加入50mL石油醚脱色2次,弃去醚层。加水定容至250mL容量瓶中,作为待测液。

[0209] 2.3 标准曲线

[0210] 将经120℃干燥至恒重、精确称取的芦丁标准品10mg,置于小烧杯中,以乙醇溶液微热溶解,将溶液移至100mL容量瓶中,用30％的乙醇溶液定容。此溶液为0.1mg·mL-1芦丁标准液。分别吸取芦丁标准液0,1,2,4,6,8mL,置于25mL容量瓶中,分别加入30％的乙醇溶液补足至12.50mL,加5％的NaNO2溶液0.75mL,摇匀,放置6min,加10％的Al(NO3)30.75mL,摇匀,放置6min,加入4％的NaOH溶液5mL,再用30％的乙醇溶液稀释至刻度,摇匀。在510nm处测定其吸光度A,绘制标准曲线得芦丁质量浓度与吸光度间的回归方程为:Y＝9.8921A-0.0047,相关系数为R2＝0.998 9。

[0211] 2.4 测定方法

[0212] 取2.2中待测液10.0mL置于100mL容量瓶中,用30％的乙醇溶液定容,取5.0mL置于25mL容量瓶中,以下操作同2.3标准曲线项,测定其510nm处的吸光度A。南瓜叶提取物中总黄酮含量可按下列公式计算:

[0213] 总黄酮含量(mg·g-1)＝Y×(250/10)×(100/5)×25/W

[0214] 式中:Y为提取液的总黄酮浓度(mg·mL-1),W为南瓜叶提取物干重(g)。

[0215] 表5 不同样品的总黄酮含量

[0216]

[0217] 其中A样品为市售的南瓜叶提取物保健品；B样品为工厂利用常规方法提取的南瓜叶提取物；C：某研究院提供的南瓜叶提取物；D：本发明实施例1制备的南瓜叶提取物；E：本发明实施例1制备南瓜叶提取物的一次提取物；F:本发明实施例1制备南瓜叶提取物的二次提取物。

[0218] 足以证明，本发明在南瓜叶提取的第二阶段获得的二次提取物中总黄酮的提取率最高，且高于其他样品。说明第二阶段的浸提方法对于提取南瓜叶粉中的黄酮类物质有较为显著的效果，且第二阶段在较短的浸提时间内即可获得较大黄酮类物质得率。

[0219] 实施例22 南瓜保健食品抗氧化性能测试

[0220] 实验采用Fenton反应体系。在试管中加入6mmol/L FeSO4 2mL，不同浓度VC或待测溶液2mL，6mmol/L H2O2溶液2mL，摇匀，静置10min，再加入6mmol/L水杨酸-乙醇2mL反应，37℃温浴30min，于510nm测吸光值。

[0221] 清除率s＝[A0-(Ai-Ai O)]/A0×100％

[0222] 式中：A0为对照,不加南瓜保健食品；Ai为某浓度时的吸光值；Ai O为无显色剂时的该浓度的本底值。

[0223] 表6为对照品VC，市售南瓜保健食品以及本发明实施例2制备的南瓜保健食品冲液对羟自由基的清除率的对照表

[0224] 表6 羟自由基的清除率的对照表

[0225]

[0226] 数据表明，本发明的南瓜保健食品对羟自由基的清除能力显著。且随着南瓜保健食品浓度的增加而增大。当浓度为16mg/mL时，清除率可达到96.88％，较市售的南瓜保健食品的清除率显著提高了18.18％，故本发明的南瓜保健食品具有很强的抗氧化功能。这加大了南瓜的食用和药用价值，更为今后南瓜产品的深加工指明了方向，并提供了可靠的参考。

[0227] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0228] 实验例23 食用南瓜保健食品后总胆固醇的变化

[0229] 选总胆固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人50名，男女各半，随机分成三组；第一组每天晚餐饮用100ml氯化钠；第二组每天晚餐冲饮普通市售南瓜保健食品100g，第三组每天晚餐冲饮本发明实施例2制备的南瓜保健食品100g，期间每天食用同样的食物，食物包括肉150g、蛋80g、牛奶250ml、蔬菜和水果各200g。分别在实验开始的前一天和第10、20、30天采集试验者的血液，测定血液中的总胆固醇含量，结果如表7：

[0230] 表7 血液中总胆固醇含量检测结果

[0231]

[0232] 由上表可知冲饮本发明南瓜保健食品后，成年人血液中的总胆固醇的含量发生明显变化。与普通市售南瓜保健食品相比，本发明南瓜保健食品对成年人血液中的总胆固醇的含量明显的降低，其下降率为市售的6倍以上，而氯化钠组成年人血液中的总胆固醇的含量明显的增加，市售南瓜保健食品虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由此可知，本发明南瓜保健食品具有显著的降低胆固醇的保健效果。

[0233] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0234] 实施例24 本发明南瓜保健食品的感官品评试验

[0235] 邀请50名人员对本发明实施例2制备的南瓜保健食品与市售两种同类相同生产日期的南瓜保健食品进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各25名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表8：

[0236] 表8 感官品评统计结果

[0237]

[0238] 注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。

[0239] 以上结果表明，本发明制备的南瓜保健食品从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售南瓜保健食品，特别是外观、风味和口感极好，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。

[0240] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0241] 实施例25本发明南瓜保健食品的生物活性(稳定性)试验

[0242] 将本发明实施例2制备的南瓜保健食品与市售相同生产日期的粉状蛋白酶分别于-12℃和40℃条件下储存12个月，采用《GB/T23527-2009中华人民共和国国家标准蛋白酶制剂》中检测方法测定南瓜保健食品和蛋白酶的酶活力，计算酶活损失率，酶活损失率是指实际检测的酶活力与产品标注酶活力的差值占标注酶活力的百分率，结果如表9[0243] 表9 储存期酶活力损失率

[0244]

[0245] 以上结果表明，在-12℃和40℃条件下储存12个月，本发明南瓜保健食品与市售相比，其蛋白酶酶活损失分别降低45％和16.9％，具有优良的温度储存性，酶活力非常稳定，同时也说明本发明南瓜保健食品含有的其它生物活性物质的损失率极低，具有较好的抗冻、抗热性能，产品质量稳定，保质期长。

[0246] 需要说明的是：本发明实施例3-18制备的南瓜保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0247] 实施例26高糖条件下酿酒酵母tlj2016发酵产GSH能力实验

[0248] (1)摇瓶培养

[0249] 取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；

[0250] 所述摇瓶培养基质量组成为：(NH4)2SO4 6g/L，葡萄糖35g/L，K2HPO4·3H2O 3g/L，KH2PO4 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO4 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO4·7H2O 0.1g/L，余量为水，pH 6.0；

[0251] (2)5L 发酵罐培养

[0252] 将种子液按10％接种量，接入装有3L发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，总发酵时间为50h；

[0253] 所述发酵培养基质量组成为：(NH4)2SO4 10g/L，葡萄糖100g/L，K2HPO4·3H2O 8g/L，KH2PO4 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO4 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO4·7H2O 0.1g/L，余量为水，pH6.0；

[0254] 发酵结束后，测定发酵液中GSH的含量为3308mg/L.

[0255] 实施例27 酿酒酵母tlj2016L-半胱氨酸耐受力实验

[0256] 将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环，分别接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养，在培养至12h时，向摇瓶中加入不同终浓度的L-半胱氨酸，再培养10h，测定细胞干重，结果表10、11；

[0257] 摇瓶培养基(g/L)：(NH4)2SO4 6、葡萄糖20、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1，pH6.0；

[0258] 表10：出发菌株L-半胱氨酸耐受力

[0259]L-半胱氨酸浓度mmol/L 0 5 10 15 20 40
出发菌株干重g/L 22.6 15.7 10.2 4.3 2.2 0.8
GSH浓度(mg/L) 35.6 46.7 43.2 40.7 37.9 25.3

[0260] 表11 tlj2016L-半胱氨酸耐受力

[0261]L-半胱氨酸浓度mmol/L 0 5 10 15 20 40
tlj2016干重g/L 25.7 28.5 23.6 21.2 20.6 18.7
GSH浓度(mg/L) 73.2 98.3 113.5 121.7 127.5 135.8

[0262] 从表10、11的结果可以看出，对于出发菌株，培养基中添加L-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低；而低浓度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着L-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而GSH浓度持续增长，这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH的生产。

[0263] 实施例28 酿酒酵母tlj2016耐盐能力实验

[0264] 取tlj2016菌液1mL接种菌种于含有不同NaCl浓度的(含量梯度为0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mL YPD液体培养基(pH＝6.5)，置于30℃下分别培养24h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于YPD固体平板中涂布，于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表12，可知该菌的耐盐浓度为18％，说明酿酒酵母tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。

[0265] 表12 耐盐能力检测(×107cfu/ml)

[0266]

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