吡唑并-喹唑啉衍生物、它们的制备方法和它们作为激酶抑制剂的用途
阅读：43发布：2024-02-05
专利汇可以提供吡唑并-喹唑啉衍生物、它们的制备方法和它们作为激酶抑制剂的用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且公开了如 说明书 所定义的式(Ia)或(Ib)吡唑并-喹唑啉衍 生物 及其药学上可接受的盐、它们的制备方法和包含它们的药物组合物；本 发明 化合物可以在疗法中用于 治疗 与失调的蛋白激酶活性有关的 疾病 ，像癌症。，下面是吡唑并-喹唑啉衍生物、它们的制备方法和它们作为激酶抑制剂的用途专利的具体信息内容。
1.由式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物
其中
R是氢或者可选被取代的选自下述的基团：氨基、直链或支链C1-C6烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
X是单键或者选自下述的二价原子团：-NR’-、-CONR’-、-NH-CO-NH-、-O-、-S-或-SO2-，其中R’是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基，或者R和R’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至
6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
与根据式(Ia)或(Ib)的吡唑环的任意一个氮原子键合的R1代表氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者在式(Ib)中，R1是与R2连接的二价-(CH2)n-NH-基团，其中n是2或3；
R2是选自-NR”R”’、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”和R”’各自独立地是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者R”和R”’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
A是选自-CH2-、-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-或-CH＝CH-的二价基团；
或者其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-NH-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
3.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-O-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
4.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-S-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
5.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-NH-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
6.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-O-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
7.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-S-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
8.根据权利要求1的式(Ib)化合物，其中R、X和A是如上所定义的，R1和R2通过二价-(CH2)n-NH-基团连接在一起，其中n是如上所定义的。
9.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中A是选自-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-或-C(CH3)2-CH2-的基团。
10.根据权利要求1的式(Ia)或(Ib)化合物，其中上述R、R’R1、R”和R”’中任意基团可以可选地在它们的任意游离位置被一个或多个独立地选自下述的基团取代：卤素、硝基、氧代基(＝O)、氰基、叠氮基、烷基、多氟化烷基、羟基烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、环烷基、烷基芳基、烷基杂环基、羟基、烷氧基、多氟化烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、杂环基氧基、杂环基烷氧基、亚甲二氧基、烷基碳酰氧基、烷基碳酰氧基烷基、芳基碳酰氧基、羧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、芳氧基羰基、环烷氧基羰基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、烷基氨基烷氧基、脲基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、甲酰氨基、烷基碳酰氨基、芳基碳酰氨基、杂环基碳酰氨基、烷氧基碳酰氨基、烷氧基亚氨基、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、甲酰基、烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、环烷基羰基、杂环基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳硫基和烷硫基。
11.根据权利要求1的任意具体式(Ia)或(Ib)化合物，可选地是药学上可接受的盐的形式，尤其是如表VI至XXI所定义的。
12.治疗由蛋白激酶活性改变所致和/或与之有关的细胞增殖性紊乱的方法，该方法包括对有此需要的哺乳动物给予有效量的如权利要求1所述的由式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物。
13.根据权利要求12的方法，其中该蛋白激酶活性是奥罗拉-2(Aurora-2)活性。
14.根据权利要求12的方法，其中该蛋白激酶活性是细胞周期依赖性激酶活性。
15.根据权利要求12的方法，其中该细胞增殖性紊乱选自由癌症、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自体免疫疾病和神经变性障碍组成的组。
16.根据权利要求15的方法，其中该癌症选自由癌、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系的造血肿瘤、间充质来源的肿瘤、中枢与外周神经系统的肿瘤、黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角膜黄瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西氏肉瘤组成的组。
17.根据权利要求12的方法，其中该细胞增殖性紊乱选自由良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄组成的组。
18.根据权利要求12的方法，其提供对肿瘤血管生成和转移的抑制作用，以及对器官移植排斥和宿主对抗移植物的疾病的治疗作用。
19.根据权利要求12的方法，其提供放射疗法诱导的或化学疗法诱导的脱发的治疗或预防作用。
20.根据权利要求12的方法，其进一步包含使需要的哺乳动物受到放射疗法或者化学疗法方案与至少一种细胞抑制剂或细胞毒性剂相组合的处理。
21.根据权利要求12的方法，其中该有需要的哺乳动物是人。
22.抑制奥罗拉-2激酶活性的方法，包括使所述激酶与有效量的如权利要求1所定义的化合物接触。
23.抑制细胞周期蛋白-依赖性激酶活性的方法，包括使所述激酶与有效量的如权利要求1所定义的化合物接触。
24.制备式(I)化合物、即如权利要求1所定义的式(Ia)或(Ib)化合物或者其药学上可接受的盐的方法，该方法包括：
(1)当A是-(CH2)2-基团时：
st.1)使2-乙氧基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在(双-三甲代甲硅烷基)氨基锂[LiN(TMS)2]的存在下反应，得到式(II)化合物
并将其用式(III)肼衍生物处理
R1-NHNH2 (III)
其中R1具有如上定义的含义，操作条件如步骤(st.2a)、(st.2b)或(st.2c)中任一所述
st.2a)在低级醇的存在下，得到式(IVa)和(IVb)化合物的混合物
其中R1是如上所定义的，将它们的混合物分离为单一化合物(IVa)和(IVb)；
st.2b)在乙酸的存在下，得到式(IVa)化合物；
st.2c)将在步骤(st.2a)或(st.2b)中得到的式(IVa)化合物(其中R1是氢)用式(IVc)化合物烷基化
R1Y (IVc)
其中Y是适合的离去基团，其选自甲磺酰基、甲苯磺酰基或卤素，得到式(IVa)和(IVb)化合物的混合物，其中R1是如上所定义的，再将它们的混合物分离为化合物(IVa)和(IVb)；
st.3)使按照步骤(st.2a)、(st.2b)或(st.2c)中任意之一制备的式(IVa)化合物或者按照步骤(st.2a)或(st.2c)制备的式(IVb)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛反应，得到式(Va)或(Vb)化合物
其中R1是如上所定义的；再使式(Va)或(Vb)化合物按照替代步骤(st.4a)、(st.4b)或(st.4c)中任意之一：
st.4a)与胍反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
其中R-X-是氨基，R2是乙氧基，R1是如上所定义的；再可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
st.4b)与式(VI)胍衍生物反应
R-NH-C(＝NH)NH2 (VI)
其中R是如上所定义的，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R和R1是如上所定义的，X是-NH-，R2是乙氧基；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
st.4c)与式(VII)烷基异硫脲反应
R-S-C(＝NH)NH2 (VII)
其中R是如上所定义的，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R和R1是如上所定义的，X是-S-，R2是乙氧基；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
st.4d)与甲基异脲反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R1是如上所定义的，R是甲基、X是-O-，R2是乙氧基；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
(2)当A是-C(CH3)2-CH2-基团时：
st.5)使2-甲氧基-4，4-二甲基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在[LiN(TMS)2]的存在下反应，得到式(VIII)化合物
st.6)使式(VIII)化合物与式(III)肼衍生物按照前述步骤(st.2a)或(st.2b)任意之一反应，得到式(IXa)或(IXb)化合物
其中R1是如上所定义的；
st.7)使式(IXa)或(IXb)化合物与甲酸乙酯在碱性条件下反应，得到式(Xa)或(Xb)化合物
st.8)使式(Xa)或(Xb)化合物与式(VI)胍衍生物反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物其中R和R1是如上所定义的，X是-NH-，R2是乙氧基；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
(3)当A是-CH2-C(CH3)2-基团时：
st.9)使2-甲氧基-5，5-二甲基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在氢化钠的存在下反应，得到式(XI)化合物
st.10)使式(XI)化合物与式(III)肼衍生物按照前述步骤(st.2a)或(st.2b)任意之一反应，得到式(XIIa)或(XIIb)化合物
其中R1是如上所定义的；
st.11)使式(XIIa)或(XIIb)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛反应，得到式(XIIIa)或(XIIIb)化合物
st.12)使式(XIIIa)或(XIIIb)化合物与式(VI)胍衍生物反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
其中R和R1是如上所定义的，X是-NH-，R2是乙氧基；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
(4)当式(Ib)中R1直接与R2连接得到四环结构时：
st.13)使按照该方法的(st.2)得到的其中R1是氢的式(IV)化合物与三苯基甲基氯反应，得到式(XIV)化合物
其中Tr代表三苯甲基(三苯基甲基)；
st.14)使式(XIV)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛如步骤(st.3)所述反应，得到式(XV)化合物
st.15)使式(XV)化合物与适合的式(VI)胍衍生物如步骤(st.4b)所述反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
其中R是如上所定义的，X是NH，R1是三苯甲基，R2是乙氧基；
st.16)使上述式(Ia)或(Ib)化合物在酸性条件下反应，得到对应的式(Ia)或(Ib)化合物，其中R1是氢；
st.17)使上述式(Ia)或(Ib)化合物与适合的式(XVI)烷基化剂在叔丁基锂的存在下反应
Br-(CH2)n-NH-BOC (XVI)
其中n是2或3，得到式(Ib)化合物
其中n和R是如上所定义的；
st.18)使上述式(Ib)化合物在酸性条件下反应，以将叔丁氧基羰基氨基转化为氨基(去保护)，并使其与碳酸铯(CsCO3)反应，得到两种式(Ib)化合物中任意之一其中R是如上所定义的，并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
(5)当R2是庞大的基团时：
st.19)使2-乙氧基-2-环己烯酮与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛如步骤(st.3)所报道的反应，得到式(XVII)化合物
st.20)使式(XVII)化合物与式(VII)的衍生物按照步骤(st.4c)反应，得到式
(XVIII)化合物
其中R是如上所定义的；随后在酸性条件下处理，得到式(XIX)化合物
st.21)使式(XIX)化合物与式(XX)化合物反应
其中R2是庞大的基团，得到式(XXI)化合物
st.22)使式(XXI)化合物与式(III)肼衍生物按照该方法的步骤(st.1)反应，得到式(I)化合物，其中R和R1是如上所定义的，X是-S-，R2是庞大的基团；并可选地将它们转化为其他式(I)衍生物。
25.权利要求24的方法，其中将在步骤(st.4a)、(st.4b)、(st.4c)、(st.8)、(st.12)、(st.13)、(st.18)和(st.22)任意之一中得到的式(I)化合物转化为其他式(I)化合物，该方法包括转化式(I)化合物：
st.23)若式(I)化合物中R2是乙氧基，用氢氧化铵处理而将之转化为其中R2是氨基的式(Ia)或(Ib)化合物
st.24)若式(I)化合物中R2是乙氧基，用式R”-NH2(XXII)胺处理而将之转化为其中R2是-NHR”的式(I)化合物，该R″是如上所定义的，
st.25)若式(I)化合物中R2是乙氧基，通过酸或碱水解而将之转化为其中R2是-OH的式(I)化合物
st.26)若式(I)化合物中R2是-OH，通过与式(XXIII)或(XXIV)衍生物
R”R”’NH (XXIII)
R”NHOH (XXIV)
在碱性条件下和在适合的缩合剂的存在下反应而将之转化为其中R2是-NR”R”’或-N(OH)R”的式(I)化合物，该R″和R″′如上所定义的，
st.27)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，通过与式R-COCl(XXV)的化合物反应而将之转化为其中R是如上所定义的除氢以外的基团、X是-CONH-的式(I)化合物st.28)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，通过与式R-NCO(XXVI)的异氰酸酯反应而将之转化为其中R是如上所定义的除氢以外的基团、X是-NH-CO-NH-的式(I)化合物st.29)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，如下转化为其中R是芳基、X是-NH-的式(I)化合物：首先在碘和CuI的存在下用亚硝酸异戊酯和二碘甲烷或碘化铯将氨基转化为碘，随后使该碘代衍生物与式R-NH2(XXVII)芳基胺在乙酸钯和(2，2’-双(二苯膦基))-1，
1’-联萘(BINAP)的存在下反应
st.29a)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，如下转化为其中R是烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、X是-NH-的式(I)化合物：首先如前一步骤(st.29)所述将氨基转化为碘，随后使该碘代衍生物与式RNH2(XXVII)的烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基胺反应，其中R是如其中所定义的；
st.30)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，如下转化为其中R是芳基、X是单键的式(I)化合物：首先按照上述步骤(st.29)将氨基转化为碘，随后使该碘代衍生物与式R-B(OH)2(XXVIII)芳基代硼酸在钯衍生物的存在下反应
st.31)若式(I)化合物中R是氢、X是-NH-，如下转化为其中R是芳基甲基、X是单键的式(I)化合物：与式R-CHO(XXIX)芳基醛在氰基硼氢化钠(NaBH3CN)的存在下反应st.32)若其中式(I)化合物中R是甲基、X是-S-，如下转化为其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基的式(I)化合物：首先在氧化条件下将RS-转化为RSO2-，然后使磺酰基衍生物与式R-NH2(XXVII)胺反应，其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基
st.33)若其中式(I)化合物中R是甲基、X是-S-，如下转化为其中R是除甲基外的基团、X是-O-的式(I)化合物：首先按照步骤(st.32)将RS-转化为RSO2-，然后使该磺酰基衍生物与式R-OH(XXX)化合物反应
st.33a)若其中式(I)化合物中R是甲基、X是-O-，如下转化为其中R是除甲基外的基团、X是-O-的式(I)化合物：首先将MeO-转化为HO-，然后使其与三氟甲磺酰化剂反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式R-OH(XXX)化合物反应
st.33b)若其中式(I)化合物中R是甲基、X是-O-，如下转化为其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、杂环基烷基、X是-NH-的式(I)化合物：首先将MeO-转化为HO-，然后使其与三氟甲磺酰化剂反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式R-NH2(XXVI I)胺反应，其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基
st.33c)若其中式(I)化合物中R是甲基、X是-O-，如下转化为其中R是芳基、X是-NH-的式(I)化合物：首先将MeO-转化为-OH，然后使其与三氟甲磺酰化剂反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式RNH2(XXVII)胺(其中R是可选被取代的芳基)在乙酸钯和BINAP的存在下反应；
st.34)若其中式(I)化合物中A是-(CH2)2-基团，在脱氢操作条件下、在Pd或Pt催化剂的存在下转化为其中A是-CH＝CH-基团的式(I)化合物。
26.如权利要求24的步骤(st.3)所定义的式(Va)或(Vb)化合物
其中R1是氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。
27.两种或多种式(Ia)或(Ib)化合物的文库
其中
R是氢或者可选被取代的选自下述的基团：氨基、直链或支链C1-C6烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
X是单键或者选自下述的二价原子团：-NR’-、-CONR’-、-NH-CO-NH-、-O-、-S-或-SO2-，其中R’是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C 3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基，或者R和R’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至
6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
与根据式(Ia)或(Ib)的吡唑环的任意一个氮原子键合的R1代表氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者在式(Ib)中，R1是与R2连接的二价-(CH2)n-NH-基团，其中n是2或3；
R2是选自-NR”R”’、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”和R”’各自独立地是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者R”和R’”与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
A是选自-CH2-、-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-或-CH＝CH-的二价基团；
或者其药学上可接受的盐。
28.一种药物组合物，其中包含治疗有效量的如权利要求1所定义的式(Ia)或(Ib)吡唑并-喹唑啉衍生物和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。
29.根据权利要求28的药物组合物，其中进一步包含一种或多种化学治疗剂。
30.产品或试剂盒，其中包含如权利要求1所定义的式(Ia)或(Ib)化合物或者如权利要求28所定义的其药物组合物和一种或多种化学治疗剂，作为组合制剂在抗癌疗法中同时、单独或先后使用。
31.用作药物的如权利要求1所定义的式(Ia)或(Ib)化合物。
32.如权利要求1所定义的式(Ia)或(Ib)化合物在制备具有抗肿瘤活性的药物中的用途。
吡唑并-喹唑啉衍生物、它们的制备方法和它们作为激酶
抑制剂的用途
[0001] 本申请是申请号为200480021075.2(PCT/EP2004/050612)、申请日为2004年4月27日、发明名称为“吡唑并-喹唑啉衍生物、它们的制备方法和它们作为激酶抑制剂的用途”的中国专利申请的分案申请。
技术领域
背景技术
[0003] 若干细胞毒性药、例如氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素和喜树碱，会损害DNA或者影响细胞代谢途径，因而在很多情况下导致细胞周期的间接阻断。因此，通过对正常和肿瘤细胞二者产生不可逆的损害，这些药物导致显著的毒性和副作用。
[0004] 在这方面，需要有通过选择性引起肿瘤细胞阻抑和细胞程序死亡而能够充当高度特异性抗肿瘤剂的化合物，功效相当于目前可用的药物，但是降低了毒性。
[0005] 众所周知，细胞周期的进程受到一系列检查点的控制，这些检查点也被称为限制点，它们受到称为细胞周期蛋白-依赖性激酶(cdk)的酶家族的调节。继而，cdk本身在很多水平上受调节，例如与细胞周期蛋白的结合。
[0006] 不同细胞周期蛋白/cdk复合物的协调性活化与失活是细胞周期正常前进所必需的。关键的G1-S和G2-M转变都受到不同细胞周期蛋白/cdk活性活化的控制。在G1中，细胞周期蛋白D/cdk4和细胞周期蛋白E/cdk2被认为介导S-期的起始。
[0007] S-期的前进需要细胞周期蛋白A/cdk2的活性，而细胞周期蛋白 A/cdc2(cdk1)和细胞周期蛋白B/cdc2的活化是有丝分裂的起始所需要的。关于细胞周期蛋白和细胞周期蛋白-依赖性激酶的一般参考，参见例如Kevin R.Webster et al，Exp.Opin.Invest.Drugs，1998，Vol.7(6)，865-887。
[0008] 检查点控制在肿瘤细胞中是有缺陷的，其部分原因是cdk活性的失调。例如，在肿瘤细胞中已经观察到细胞周期蛋白E和cdk的表达改变，并且小鼠cdk抑制性p27KIP基因的缺失已经显示会导致较高的癌症发生率。
[0009] 越来越多的证据支持了这样的观点，即cdk是细胞周期前进的限速酶，因此代表了治疗性干预的分子靶。确切而言，cdk/细胞周期蛋白激酶活性的直接抑制应当有助于限制肿瘤细胞的失调增殖。
[0010] 本领域已知在癌细胞生长中有牵连的其他蛋白激酶有奥罗拉激酶(Aurora kinase)，特别是奥罗拉-2。
[0011] 已发现奥罗拉-2在大量不同肿瘤类型中被过度表达。它的基因位点作图在20q13，这是在很多癌症(包括乳腺癌[Cancer Res.1999，59(9)2041-4]和结肠癌中经常被扩增的染色体区。
[0012] 20q13扩增与结节-阴性乳腺癌患者预后差相关，奥罗拉-2表达增加是膀胱癌患者预后差和存活时间缩短的指征[J.Natl.CancerInst.，2002，94(17)1320-9]。关于奥罗拉-2在癌症异常中心体功能中的作用的一般参考，另见Molecular Cancer Therapeutics，2003，2，589-595。
发明内容
[0013] 本发明的目的是提供可用于治疗由蛋白激酶活性(例如奥罗拉-2抑制活性和细胞周期依赖性激酶活性)改变所致和/或与之有关的细胞增殖性紊乱的化合物。另一目的是提供具有蛋白激酶抑制活性的化合物。
[0014] 本发明人现已发现，某些吡唑并-喹唑啉具有蛋白激酶抑制活性，因而在疗法中可用作抗肿瘤剂，并且在毒性和副作用上没有与目前可用的抗肿瘤药有关的上述缺点。 [0015] 更具体地，本发明的吡唑并-喹唑啉可用于治疗多种癌症，包括但 不限于：癌，例如膀胱、乳房、结肠、肾、肝、肺(包括小细胞肺癌)、食道、胆囊、卵巢、胰腺、胃、子宫颈、甲状腺、前列腺和皮肤(包括鳞状细胞癌)；淋巴系的造血肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、毛发细胞淋巴瘤和Burkett氏淋巴瘤；骨髓系的造血肿瘤，包括急性与慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞白血病；间充质来源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢与外周神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其他肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角膜黄瘤(keratoxanthoma)、甲状腺滤泡癌和卡波西氏肉瘤。
[0016] 由于细胞周期激酶、例如奥罗拉或cdk在细胞增殖调节中的关键作用，这些吡唑并-喹唑啉衍生物也可用于治疗多种细胞增殖性紊乱，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄。
[0019] 本发明化合物可以用于抑制肿瘤血管生成和转移，以及治疗器官移植排斥和宿主对抗移植物的疾病。
[0020] 本发明化合物也可以充当其他蛋白激酶(例如不同同工型的蛋白激酶C、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、STLK-2、DDR-2、Bub-1、PLK、Chk1、Chk2、HER2、raf1、MEK1、MAPK、EGF-R、PDGF-R、FGF-R、IGF-R、PI3K、weel激酶、Src、Ab1、Akt、MAPK、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nek)的抑制剂，因而可有效治疗与其他蛋白激酶有关的疾病。
[0021] 本发明化合物也可用于治疗和预防放射疗法-诱发的或化学疗法- 诱发的秃头症。
[0022] 因此，在第一种实施方式中，本发明提供治疗由蛋白激酶活性(例如奥罗拉-2活性和细胞周期依赖性激酶活性)改变所致和/或与之有关的细胞增殖性紊乱的方法，该方法对有此需要的哺乳动物给予有效量的由式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物 [0023]
[0024] 其中
[0025] R是氢或者可选被取代的基团，其选自氨基、直链或支链C1-C6烷基、C3-C10环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
[0026] X是单键或者二价原子团，选自-NR’-、-CONR’-、-NH-CO-NH-、-O-、-S-或-SO2-，其中R’是氢或者可选被取代的基团，其选自直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基，或者R和R’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，并可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
[0027] 与根据式(Ia)或(Ib)的吡唑环的任意一个氮原子键合的R1代表氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者在式(Ib)中，R1是与R2连接的二价-(CH2)n-NH-基团，其中n是2或3； [0028] R2是选自-NR”R”’、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”和R”’各自独立地是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者R”和R”’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
[0029] A是选自-CH2-、-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-或-CH＝CH-的二价基团； [0030] 或者其药学上可接受的盐。
[0031] 在另一种实施方式中，本发明也提供治疗由蛋白激酶活性(象细胞周期依赖性激酶活性)改变所致和/或与之有关的细胞增殖性紊乱的方法，该方法对有此需要的哺乳动物给予有效量的由上式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物。
[0032]
[0033] 在上述方法的优选实施方式中，细胞增殖性紊乱选自由癌症、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自体免疫疾病和神经变性障碍组成的组。
[0034] 可以治疗的具体癌症类型包括癌、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系的造血肿瘤、间质来源的肿瘤、中枢与外周神经系统的肿瘤、黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角膜黄瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西氏肉瘤。
[0035] 在上述方法的另一优选实施方式中，细胞增殖性紊乱选自由良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄组成的组。另外，本发明方法提供对肿瘤血管生成和转移的抑制作用，以及对器官移植排斥和宿主对抗移植物的疾病的治疗作用。本发明方法也可以提供对细胞周期的抑制作用或cdk/细胞周期蛋白依赖性抑制作用。
[0036] 除了上述以外，本发明方法提供对放射疗法-诱发的或化学疗法-诱发的秃头症的治疗和预防作用。
[0037] 本发明也提供由式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物
[0038]
[0039] 其中
[0040] R是氢或者可选被取代的基团，其选自氨基、直链或支链C1-C6烷基、C3-C10环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
[0041] X是单键或者选自-NR’-、-CONR’-、-NH-CO-NH-、-O-、-S-或-SO 2-的二价原子团，其中R’是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基，或者R和R’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子； [0042] 与根据式(Ia)或(Ib)的吡唑环的任意一个氮原子键合的R1代表氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者在式(Ib)中，R1是与R2连接的二价-(CH2)n-NH-基团，其中n是2或3； [0043] R2是选自-NR”R”’、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”和R”’各自独立地是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者R”和R’”与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，并可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子；
[0044] A是选自-CH2-、-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-或-CH＝CH-的二价基团； [0045] 或者其药学上可接受的盐。
[0046] 本发明也包括合成由式(Ia)或(Ib)代表的吡唑并-喹唑啉衍生物的方法，除非另有提示，所述衍生物可以被适宜地分组和定义为式(I)化合物。包含式(I)吡唑并-喹唑啉衍生物的药物组合物也包括在本发明中。
[0047] 参照下列详细说明有助于更好的理解，将容易获得对发明及其很多附加优点的更完全的认识。
[0048] 发明的详细说明
[0049] 本领域已知有若干杂环化合物是蛋白激酶抑制剂。以2-酰氨基-吡唑和2-脲基-吡唑及其衍生物为例，国际专利申请WO 01/12189、WO01/12188、WO 02/48114和WO02/70515已经公开了它们是蛋白激酶抑制剂，这些申请都是以本申请人的名义提交的。 [0050] WO 00/69846、WO 02/12242以及WO 03/028720和尚未公布的美国专利申请
60/381092(2002年5月17日提交)也已公开了稠合的二环化合物，它们包含吡唑部分，具备激酶抑制活性，这些申请都是以本申请人的名义提交的。
60/381092(2002年5月17日提交)也已公开了稠合的二环化合物，它们包含吡唑部分，具备激酶抑制活性，这些申请都是以本申请人的名义提交的。
[0051] 两份未决申请PCT/EP 03/01594和PCT/US 03/04844(分别要求2002年2月19日美国申请No.60/357918和No.60/357960的优先权)也公开了具备激酶抑制活性的稠合三环衍生物，这些申请引用在此作为参考；没有一份所述申请具体公开了这些衍生物本身。 [0052] 另外，国际专利申请WO 98/58926和WO 98/28281也公开了稠合多环嘧啶衍生物是蛋白激酶抑制剂，二者是以Celltech TherapeuticsLtd名义提交的；尽管被包含在两份申请的通式内，不过其中没有例证本发明吡唑并-喹唑啉的具体实例。
[0053] 最后，以Pfizer Inc名义提交的WO 96/40142公开了治疗过度增殖疾病的杂环稠合嘧啶衍生物。
[0055] 同样，式(I)化合物所有可能的异构体与它们的混合物和代谢产物与药学上可接受的生物前体(也称为前体药物)作为抗肿瘤剂的用途也都属于本发明的范围。
[0056] 前体药物是体内释放根据式(I)的活性母体药物的任意共价键合化合物。 [0057] 在化合物可能存在互变异构形式、例如酮-烯醇互变体的情况下，每种互变异构形式都包括在本发明内，无论处于平衡中还是一种形式 占优势。
[0058] 本发明中，除非另有指定，术语直链或支链C1-C6烷基表示任意这样的基团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、正己基等。 [0059] 除非另有提示，术语C3-C10环烷基表示环脂族环，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，以及具有至多10个碳原子的任意桥连环烷基。
[0060] 术语芳基包括具有1至2个环部分的碳环或杂环烃，所述环部分彼此稠合或者通过单键连接，其中至少一个环是芳族的；如果存在的话，任意芳族杂环烃(也被称为杂芳基)包含5至6元环，具有1至3个选自N、O或S的杂原子。
[0061] 根据本发明的芳基的实例例如有苯基、联苯、α-或β-萘基、二氢萘基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、 唑基、异 唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、异吲哚基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、二氢喹啉基、喹喔啉基、苯并二氧杂环戊烯基、二氢茚基、茚基、三唑基等。除非另有指定，术语杂环基包括5至6元饱和、部分不饱和或完全不饱和杂环，具有1至3个选自N、O或S的杂原子。除了完全不饱和的杂环(也就是前面被称为芳族杂环并且被术语芳基所涵盖)以外，根据本发明的饱和或部分不饱和杂环的实例例如有吡喃、吡咯烷、吡咯啉、咪唑啉、咪唑烷、吡唑烷、吡唑啉、噻唑啉、噻唑烷、二氢呋喃、四氢呋喃、1，3-二氧戊环、哌啶、哌嗪、吗啉等。 [0062] 鉴于所有上述，技术人员显然知道，其中X代表单键的本发明任意化合物必然具有直接与嘧啶部分连接的R基团。
[0063] 按照上述取代基含义，除非另有指定，任意上述R、R’、R1、R”和R”’基团可以可选地在它们的任意游离位置被一个或多个基团(例如1至6个基团)取代，所述基团独立地选自：卤素、硝基、氧代基(＝O)、氰基、叠氮基、烷基、多氟化(polyfluorinated)烷基、羟基烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、环烷基、烷基芳基、烷基杂环基、羟基、烷氧基、多氟化烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、杂环氧 基、杂环基烷氧基、亚甲二氧基、烷基羰基氧基、烷基羰基氧基烷基、芳基羰基氧基、羧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、芳氧基羰基、环烷氧基羰基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、烷基氨基烷氧基、脲基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、甲酰氨基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、杂环基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、烷氧基亚氨基、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、甲酰基、烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基、环烷基羰基、杂环基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳硫基和烷硫基。
[0064] 在这方面，术语卤原子表示氟、氯、溴或碘原子。
[0065] 术语全氟化(perfluorinated)烷基表示任意上述直链或支链C1-C6烷基，它们被一个以上氟原子取代，例如三氟甲基、三氟乙基、1，1，1，3，3，3-六氟丙基等。 [0066] 术语烷氧基、芳氧基、杂环氧基及其衍生物、例如全氟化烷氧基，表示通过氧原子(-O-)与分子其余部分连接的任意上述烷基、芳基或杂环基。
[0067] 鉴于所有上述，技术人员显然知道，其名称为复合名称的任意基团，其各个衍生部分必然作常规解释，例如芳基烷基或杂环基烷基指进一步被芳基或杂环基取代的烷基，其中烷基、芳基或杂环基是如上所定义的。
[0068] 同样，任意术语、例如烷硫基、烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基羰基、烷氧基羰基氨基、杂环基羰基、杂环基羰基氨基、环烷氧基羰基等，包括这样的基团，其中烷基、烷氧基、芳基、环烷基和杂环基部分是如上所定义的。
[0069] 式(I)化合物的药学上可接受的盐包括与无机或有机酸所生成的酸加成盐，所述酸例如硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、羟乙磺 酸和水杨酸，以及与无机或有机碱所生成的盐，所述碱例如碱金属或碱土金属、尤其是钠、钾、钙或镁的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，无环或环状胺，优选甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、哌啶等。
[0070] 按照针对式(Ia)或(Ib)化合物的第一发明实施方式，优选的衍生物是这样的，其中X是-NH-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
[0071] 也优选这样的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-O-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
[0072] 也优选这样的式(Ia)或(Ib)化合物，其中X是-S-，R2是选自-NHR”-、-N(OH)R”、-OR”或-R”的基团，其中R”是可选被取代的选自下述的基团：C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；R、R1和A是如上所定义的。
[0073] 进而更优选地，在上述化合物(Ia)或(Ib)种类中，A是-(CH2)2-。
[0074] 按照针对式(Ia)或(Ib)化合物的本发明另一实施方式，一类优选的化合物是由这样的衍生物所代表的，其中X是-NH-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
[0075] 另一类优选的本发明式(Ia)或(Ib)化合物是由这样的衍生物所代表的，其中X是-O-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
[0076] 另一类优选的本发明式(Ia)或(Ib)化合物是由这样的衍生物所代表的，其中X是-S-，R2是-NHR”-或-N(OH)R”，其中R”是氢原子或者直链或支链C1-C4烷基；A、R和R1是如上所定义的。
[0077] 另一类优选的本发明(Ib)化合物是由这样的衍生物所代表的，其中R、X和A是如上所定义的，R1和R2通过二价-(CH2)n-NH-基团连接 在一起，得到：
[0078]
[0079] 也 优 选 地，在 上 述 式 (Ia) 和 (Ib) 衍 生 物 种 类 中，A 是 选自-CH2-C(CH3)2-或-C(CH3)2-CH2-的基团。
[0081] 正如前文所示，本发明的进一目的是由制备式(I)化合物的方法所代表的，除非另有具体提示，该式必然包含式(Ia)和(Ib)衍生物。
[0082] 因此，式(I)化合物或者其药学上可接受的盐可以由这样一种方法得到，该方法包括：
[0083] (1)当A是-(CH2)2-基团时：
[0085]
[0086] 并将其用式(III)肼衍生物处理
[0087] R1-NHNH2 (III)
[0088] 其中R1具有如上报道的含义，操作条件如下(st.2a)、(st.2b)或(st.2c)中任意步骤所述
[0089] st.2a)在低级醇的存在下，得到式(IVa)和(IVb)化合物的混合物
[0090]
[0091] 其中R1是如上所报道的，并将它们的混合物分离为单一的化合物(IVa)和(IVb)； [0092] st.2b)在乙酸的存在下，得到式(IVa)化合物；
[0093] st.2c)将在步骤(st.2a)或(st.2b)中得到的式(IVa)化合物(其中R1是氢)用式(IVc)化合物烷基化
[0094] R1Y (IVc)
[0095] 其中Y是适合的离去基团，例如甲磺酰基、甲苯磺酰基、卤素，得到式(IVa)和(IVb)化合物的混合物，其中R1是如上所报道的，再将它们的混合物分离为化合物(IVa)和(IVb)；
[0096] st.3)使按照(st.2a)、(st.2b)或(st.2c)中任意步骤之一制备的式(IVa)化合物或者按照步骤(st.2a)或(st.2c)制备的式(IVb)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛反应，得到式(Va)或(Vb)化合物
[0097]
[0098] 其中R1是如上所报道的；再使式(Va)或(Vb)化合物按照任意替代步骤(st.4a)、(st.4b)或(st.4c)之一：
[0099] st.4a)与胍反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
[0100]
[0101] 其中R-X-是氨基，R2是乙氧基，R1是如上所定义的；再可选地转化它们为其他式(I)衍生物；
[0102] st.4b)与式(VI)胍衍生物反应
[0103] R-NH-C(＝NH)NH2 (VI)
[0104] 其中R是如上所报道的，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R和R1是如上所报道的，X是-NH-，R2是乙氧基；再可选地转化它们为其他 式(I)衍生物；
[0105] st.4c)与式(VII)烷基异硫脲反应
[0106] R-S-C(＝NH)NH2 (VII)
[0107] 其中R是如上所报道的，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R和R1是如上所报道的，X是-S-，R2是乙氧基；再可选地转化它们为其他式(I)衍生物；
[0108] st.4d)与甲基异脲反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物，其中R1是如上所报道的，R是甲基、X是-O-，R2是乙氧基；再可选地转化它们为其他式(I)衍生物；
[0109] (2)当A是-C(CH3)2-CH2-基团时：
[0110] st.5)使2-甲氧基-4，4-二甲基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在[LiN(TMS)2]的存在下反应，得到式(VIII)化合物
[0111]
[0112] st.6)使式(VIII)化合物与式(III)肼衍生物按照任意在先步骤(st.2a)或(st.2b)之一反应，得到式(IXa)或(IXb)化合物
[0113]
[0114] 其中R1是如上所报道的；
[0115] st.7)使式(IXa)或(IXb)化合物与甲酸乙酯在碱性条件下反应，得到式(Xa)或(Xb)化合物
[0116]
[0117] st.8)使式(Xa)或(Xb)化合物与胍或式(VI)胍衍生物反应，得到式
[0118]
[0119] 其中R和R1是如上所报道的，X是-NH-，R2是乙氧基；再可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
[0120] (3)当A是-CH2-C(CH3)2-基团时：
[0121] st.9)使2-甲氧基-5，5-二甲基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在氢化钠的存在下反应，得到式(XI)化合物
[0122]
[0123] st.10)使式(XI)化合物与式(III)肼衍生物按照任意在先步骤(st.2a)或(st.2b)之一反应，得到式(XIIa)或(XIIb)化合物
[0124]
[0125] 其中R1是如上所报道的；
[0126] st.11)使式(XIIa)或(XIIb)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛反应，得到式(XIIIa)或(XIIIb)化合物
[0127]
[0128] st.12)使式(XIIIa)或(XIIIb)化合物与胍或式(VI)胍衍生物反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
[0129]
[0130] 其中R和R1是如上所报道的，X是-NH-，R2是乙氧基；再可选地将它们转化为其他式(I)衍生物；
[0131] (4)当式(Ib)中的A是-(CH2)2-基团、-CH2-C(CH3)2-基团、-C(CH3)2-CH2-基团，R1直接与R2连接得到四环结构时：
[0132] st.13)使按照该方法的(st.2)、(st.6)、(st.10)得到的式(IV)、(IX)、(XII)化合物(其中R1是氢)与三苯基甲基氯反应，得到式(XIV)化合物
[0133]
[0134] 其中Tr代表三苯甲基(三苯基甲基)；
[0135] st.14)使式(XIV)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛如步骤(st.3)所述反应，得到式(XV)化合物
[0136]
[0137] st.15)使式(XV)化合物与适合的式(VI)胍衍生物如步骤(st.4b)所述反应，得到式(Ia)或(Ib)化合物
[0138]
[0139] 其中R是如上所定义的，A是-(CH2)2-基团、-CH2-C(CH3)2-基团、-C(CH3)2-CH2-基团，X是NH，R1是三苯甲基，R2是乙氧基；
[0140] st.16)使上述式(Ia)或(Ib)化合物在酸性条件下反应，得到对应的式(Ia)或(Ib)化合物，其中R1是氢；
[0141] st.17)使上述式(Ia)或(Ib)化合物与适合的式(XVI)烷基化剂在叔丁基锂的存在下反应
[0142] Br-(CH2)n-NH-BOC (XVI)
[0143] 其中n是2或3，得到式(Ib)化合物
[0144]
[0145] 其中A、n和R是如上所定义的；
[0146] st.18)使上述式(Ib)化合物在酸性条件下反应，转化叔丁氧基碳酰氨基为氨基(去保护)，再使其与碳酸铯(CsCO3)反应，得到下述两种式(Ib)化合物中任意之一 [0147]
[0148] 其中A和R是如上所定义的，再可选地转化它们为其他式(I)衍生 物；
[0149] (5)当R2是庞大的基团时：
[0150] st.19)使2-乙氧基-2-环己烯酮与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛如步骤(st.3)所报道的反应，得到式(XVII)化合物
[0151]
[0152] st.20)使式(XVII)化合物与式(VII)衍生物按照步骤(st.4c)反应，得到式(XVIII)化合物
[0153]
[0154] 其中R是如上所定义的；随后在酸性条件下处理，得到式(XIX)化合物
[0155]
[0156] st.21)使式(XIX)化合物与式(XX)化合物反应
[0157]
[0158] 其中R2是庞大的基团，得到式(XXI)化合物
[0159]
[0160] st.22)使式(XXI)化合物与式(III)肼衍生物按照该方法的步骤(st.1)反应，得到式(I)化合物，其中R和R1是如上所定义的，X是-S-，R2是庞大的基团；再可选地转化它们为其他式(I)衍生物。
[0161] 如上所报道的，按照熟知的操作条件进行操作，可以将按照本发明方法、例如步骤(st.4a)、(st.4b)、(st.4c)、(st.8)、(st.12)、(st.13)、(st.18)和(st.22)所述制备的式(I)化合物适宜地转化为其他式(I)化合物。
[0162] 作为实例，这样的式(I)化合物：
[0163] st.23)其中R2是乙氧基的式(I)化合物用氢氧化铵处理可以转化为其中R2是氨基的式(Ia)或(Ib)化合物
[0164]
[0165] st.24)其中R2是乙氧基的式(I)化合物用式R”-NH2(XXII)胺处理可以转化为其中R2是-NHR”的式(I)化合物
[0166]
[0168]
[0169] st.26)其中R2是-OH的式(I)化合物通过与式(XXIII)或(XXIV) 衍生物
[0170] R”R”’NH (XXIII)
[0171] R”NHOH (XXIV)
[0172] 在碱性条件下和在适合的缩合剂的存在下反应，可以转化为其中R2是-NR”R”’或-N(OH)R”的式(I)化合物
[0173]
[0174] st.27)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物通过与酸的卤化物、例如式R-COCl(XXV)氯化物反应，可以转化为其中R是如上所定义的除氢以外的基团、X是-CONH-的式(I)化合物
[0175]
[0176] st.28)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物通过与式R-NCO(XXVI)异氰酸酯反应，可以转化为其中R是如上所定义的除氢以外的基团、X是-NH-CO-NH-的式(I)化合物 [0177]
[0178] st.29)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是芳基、X是-NH-的式(I)化合物：首先在碘和CuI的存在下用亚硝酸异戊酯和二碘甲烷或碘化铯转化氨基为碘、随后使碘代衍生物与式R-NH2(XXVII)芳基胺在乙酸钯和(2，2’-双(二苯膦基))-1，1’-联萘(BINAP)的存在下反应
[0179]
[0180] st.29a)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、X是-NH-的式(I)化合物：首先如前一步骤(st.29)所述转化氨基为碘，随后使碘代衍生物与式RNH2(XXVII)的烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基胺反应，其中R是如其中所定义的； [0181] st.30)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是芳基、X是单键的式(I)化合物：首先按照上述步骤(st.29)转化氨基为碘，随后使碘代衍生物与式R-B(OH)2(XXVIII)的芳基代硼酸在钯衍生物的存在下反应
[0182]
[0183] st.31)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是烷基或芳基甲基的式(I)化合物：与式R-CHO(XXIX)的烷基醛或芳基醛在氰基硼氢化钠(NaBH3CN)和乙酸的存在下反应
[0184]
[0185] st.31a)其中R是氢、X是-NH-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是环烷基或杂环烷基的式(I)化合物：与环烷基酮或杂环烷基酮在三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)3)和三氟乙酸的存在下反应
[0186]
[0187] st.32)其中R是如上所定义的(例如甲基)、X是-S-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基的式(I)化合物：首先在氧化条件下转化RS-基团为RSO2-，然后使该磺酰基衍生物与式R-NH2(XXVII)的胺反应，其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基
[0188]
[0189] st.33)其中R是如上所定义的(例如甲基)、X是-S-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是如式(I)所定义的、X是-O-的式(I)化合物：首先按照步骤(st.32)转化RS-基团为RSO2-，然后使该磺酰基衍生物与式R-OH(XXX)化合物反应
[0190]
[0191] st.33a)其中R是甲基、X是-O-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是如式(I)所定义的、X是-O-的式(I)化合物：首先转化MeO-基团为HO-，然后使其与三氟甲磺酰化剂(triflating agent)反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式R-OH(XXX)化合物反应
[0192]
[0193] st.33b)其中R是甲基、X是-O-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、杂环基烷基、X是-NH-的式(I)化合物：首先转化MeO-为HO-，然后使其与三氟甲磺酰化剂反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式R-NH2(XXVII)的胺反应，其中R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基、芳基烷基或杂环基烷基
[0194]
[0195] st.33c)其中R是甲基、X是-O-的式(I)化合物可以这样转化为其中R是芳基、X是-NH-的式(I)化合物：首先转化MeO-为-OH，然后使其与三氟甲磺酰化剂反应，得到对应的三氟甲磺酸酯，最后使其与式RNH2(XXVII)的胺在乙酸钯和BINAP的存在下反应，其中R是可选被取代的芳基；
[0196] st.34)其中A是-(CH2)2-基团的式(I)化合物可以在脱氢操作条件下、在Pd或Pt催化剂的存在下转化为其中A是-CH＝CH-基团的式(I)化合物。
[0197] 上述方法在任意上述变化之一中是可以按照本领域熟知方法进行的类似方法。 [0198] 按照该方法的步骤(st.1)，使2-乙氧基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯在LiN(TMS)2和适合的溶剂(例如二 烷、四氢呋喃或二乙醚)的存在下反应。
[0199] 按照步骤(st.2a)，使式(II)化合物与适合的式(III)肼衍生物在低级醇(例如甲醇、乙醇或其混合物)的存在下反应。优选地，在乙醇中、在回流温度下进行上述反应，得到式(IVa)和(IVb)两种化合物的混合物，其中前者是大量存在的。在常规方法下将它们分离为单一的化合物(IVa)和(IVb)，例如利用制备型HPLC。
[0200] 相反，按照该方法的步骤(st.2b)操作，也就是使式(II)化合物与式(III)肼衍生物在乙酸的存在下反应，得到单一的式(IVa)化合物。该反应优选地是在室温下进行的。 [0201] 按照该方法的步骤(st.2c)，在碱、例如氢化钠的存在下，在适合的溶剂(例如四氢呋喃、二 烷或二甲基甲酰胺)中，在室温至100℃的温度下，使其中R1是氢的式(IVa)化合物与适合的式(IVc)化合物反应，得到化合物(IVa)和(IVb)的混合物，其中前者是大量存在的，再在常规方法下分离它们，例如利用制备型HPLC。
[0202] 按照该方法的步骤(st.3)，使式(IVa)或(IVb)化合物与二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛在适合的溶剂、例如二甲基甲酰胺的存在下反应，分别得到式(Va)或(Vb)化合物。优选地，反应是在室温至约70℃的温度下进行的。
[0203] 按照该方法任意替代步骤(st.4a)、(st.4b)、(st.4c)或(st.4d)之一，使式(Va)或(Vb)化合物与胍、胍盐或其衍生物、烷基异硫脲或者甲基异脲反应，通过嘧啶环生成得到对应的式(Ia)或(Ib)化合物。任意上述反应是按照常规方法进行的。作为实例，如步骤(st.4a)或(st.4b)所述与胍或其盐(例如盐酸盐、碳酸盐或硝酸盐)或者与式(VI)胍衍生物的反应是这样进行的，即在低级醇溶剂中，在中性或碱性条件下，优选用乙醇和乙醇钠或者二氮杂二环十一碳烯(DBU)在回流温度下，或者作为替代选择，在二甲基甲酰胺中在80℃至回流温度的温度下，在碳酸钾的存在下进行。(st.4c)中与烷基异硫脲(VII)的反应是这样进行的，即在乙酸钾的存在下，在适合的溶剂、例如二甲基甲酰胺中，在回流温度下。 [0204] 与甲基异脲的反应(st.4d)是这样进行的，即在适合的溶剂、例如乙腈中，在碱、例如碳酸钾的存在下，在回流温度下。
[0205] 步骤(st.5)和(st.6)的反应是在如步骤(st.1)、(st.2a)或(st.2b)所述操作条件下进行的，分别得到所需的式(IXa)或(IXb)化合物。
[0206] 该方法的步骤(st.7)优选地是这样进行的，即使式(IXa)或(IXb)衍生物与甲酸乙酯在碱性条件下反应，优选地在乙醇钠或氢化钠和适 合的溶剂(例如二乙醚、四氢呋喃或二 烷)的存在下，在室温至回流温度的温度下。
[0207] 步骤(st.8)的反应条件同前步骤(st.4a与st.4b)。
[0208] 按照步骤(st.9)，在氢化钠的存在下，在适合的溶剂(例如二乙醚、四氢呋喃或二 烷)中，在回流温度下，使2-甲氧基-5，5-二甲基-2-环己烯-1-酮与草酸二乙酯反应。 [0209] 步骤(st.10)的后续反应条件本质上同前步骤(st.2a)或(st.2b)，步骤(st.11)和(st.12)的反应条件分别相当于(st.3)和(st.4a与st.4b)。
[0210] 按照该方法的步骤(st.13)，技术人员显然知道，其中R1是氢原子的式(IVa)或(IVb)化合物都是给定化合物的互变异构形式，它们可以简便地表征为具有式(IV)。在这方面，使这种相同的衍生物与三苯基甲基氯反应，得到式(XIV)化合物，其中两个吡唑氮原子之一被三苯甲基(例如三苯基甲基)烷基化。
[0211] 该方法的步骤(st.14)和(st.15)的操作条件基本上相当于已经报道的步骤(st.3)和(st.4a与st.4b)。按照步骤(st.16)，在酸性条件下除去式(I)化合物的三苯甲基，例如用三氟乙酸，在适合的溶剂、例如二氯甲烷的存在下进行，以得到对应的两种形式的式(I)化合物，其中R1是氢：
[0212]
[0213] 按照该方法的步骤(st.17)，用式(XVI)衍生物进行的后续烷基化可以选择性烷基化靠近-COOEt基团的吡唑氮原子；该反应可以用叔丁醇锂、在适合的溶剂(例如二 烷、二乙醚或四氢呋喃)中进行。
[0214] 按照步骤(st.18)，首先按照常规方法操作而将上述化合物转化为游离氨基衍生物，例如在酸性条件下，优选用盐酸，在适合的溶剂、例如二 烷中，在回流温度下；随后在如下条件下环化为所需四环衍 生物：在碱、例如碳酸铯(CsCO3)的存在下，在适合的溶剂(例如低级醇，优选甲醇)中，在室温至回流下。
[0215] 该方法步骤(st.19)和(st.20)的操作条件基本上相当于已经报道的步骤(st.3)和(st.4c)；随后用酸处理式(XVIII)化合物得到式(XIX)化合物的反应优选地在约100℃的温度下用乙酸水溶液进行。
[0216] 按照步骤(st.21)，在氢化钠和适合的溶剂(例如二乙醚、四氢呋喃或二 烷)的存在下，在约-50℃至室温的温度下，使式(XIX)化合物与适合的式(XX)衍生物反应。 [0217] 步骤(st.22)的操作条件基本上相当于该方法的步骤(st.1)。
[0218] 如上所示，如此制备的式(I)化合物可以容易地转化为本发明的若干其他式(I)化合物。
[0219] 作为实例，携带R2乙氧基、甚至烷氧基的式(I)化合物可以按照本领域熟知的方法转化为多种衍生物，以转化羧基酯(-COOR2)为酰胺(-CONH2)、N-取代的酰胺(-CONHR”)和羧酸(-COOH)，例如步骤(st.23)、(st.24)和(st.25)中所报道的。
[0220] 操作条件是本领域公知的，例如在羧基酯基团向酰胺基团的转化中，在适合的溶剂(例如低级醇、二甲基甲酰胺或其混合物)中与氨或氢氧化铵反应；优选地，反应是用氢氧化铵在甲醇/二甲基甲酰胺混合物中、在约50℃至约100℃的温度下进行的。
[0221] 类似操作条件适用于N-取代的酰胺的制备，其中使用适合的伯胺代替氨或氢氧化铵。
[0222] 同样，通过本领域公知的碱性或酸性水解条件，可以将羧基酯基团转化为羧酸衍生物。
[0223] 按照该方法的步骤(st.26)，其中R2是羟基(-COOH)的式(I)化合物可以转化为酰氨基衍生物(-CONR”R”’)或[-CON(OH)R”]，其中R”和R’”是如上所示的，也包括这样的化合物，即其中R”和R”’与它们所键合的氮原子一起构成5或6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子。
[0224] 反应是这样进行的，即在式(XXIII)胺或式(XXIV)化合物的存在 下，并视情况而定，在碱性条件下，优选用N，N-二异丙基-N-乙胺或三乙胺，在适合的溶剂(例如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃或 烷)中，在适合的缩合剂(例如N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基异脲 四氟硼酸盐(TBTU))的存在下；还可能需要催化量的(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基 六氟磷酸盐(PyBOP)。
[0225] 另外，其中R-NH-是氨基(-NH2)的式(I)化合物可以容易地转化为对应的酰氨基(-NHCOR)或脲基(-NHCONHR)衍生物，分别如该方法步骤(st.27)或(st.28)所述。通常，与异氰酸酯的反应是用氢化钠在二甲基甲酰胺中进行的，而与酰氯的反应可以在适合的溶剂(例如吡啶、四氢呋喃、乙酸乙酯或二 烷或者它们的混合物)中在室温下进行。 [0226] 其中R-NH-代表芳基氨基或杂芳基氨基的式(I)化合物可以从对应的碘代衍生物得到，后者继而可以按照该方法的步骤(st.29)从其中R-NH-是氨基的对应式(I)化合物制备。
[0227] 碘代衍生物的制备可以这样进行，即在适合的溶剂(例如四氢呋喃、二乙醚或二甲氧基乙烷)中，在室温至约70℃的温度下，时间为约8小时至约48小时。
[0228] 碘代衍生物的后续转化可以这样进行，即在适合的溶剂(例如二甲基甲酰胺、二甲氧基乙烷或乙腈)中，在催化量乙酸钯、(2，2’-双(二苯膦基)-1，1’-联萘(BINAP)和碱(例如碳酸钾、磷酸钾或碳酸铯)的存在下，在室温至110℃的温度下，时间为约2至约24小时。
[0229] 正如步骤(st.30)所报道的，其中R是芳基、X是单键的式(I)化合物可以这样得到，即从上述碘代衍生物开始，与式(XXVIII)芳基代硼酸在适合的溶剂(例如二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲醇、二甲氧基乙烷或乙腈)中，在三(二亚苄基丙酮)二钯(0)或四(三苯膦)钯[Pd(PPh3)4]的存在下，可选地在氟化铯的存在下，在室温至100℃的温度下进行反应。
[0230] 其中RNH-代表烷基氨基、环烷基氨基、环烷基-烷基氨基、杂环 基氨基、杂环基烷基氨基的式(I)化合物可以从对应的碘代衍生物如该方法的步骤(st.29a)所述得到。反应可以这样进行，即在适合的溶剂(例如二甲基甲酰胺、二 烷或乙腈)中，或者无需溶剂，在40℃至120℃的温度下，时间为3至18小时。
[0231] 其中R-NH-是氨基的式(I)化合物也可以如(st.31)所报道的，在适合的溶剂或溶剂的混合物(例如包含乙酸、甲醇和水的1∶1∶1混合物)中操作，转化为对应的式(I)烷基氨基或芳基甲氨基衍生物。
[0232] 其中R-NH-是氨基的式(I)化合物也可以转化为对应的式(I)环烷基氨基或杂环烷基氨基衍生物，正如(st.31a)所报道的，通过在适合的溶剂(例如二氯甲烷、乙腈、二甲基甲酰胺)中操作进行。
[0233] 其中R-X-代表烷硫基(R-S-)的式(I)化合物可以这样转化为其中X是-NH-的多种式(I)化合物：首先将烷硫基氧化为烷基磺酰基，再用R-NH-基团置换之，正如(st.32)所报道的。该氧化步骤可以这样进行，即使用过硫酸氢钾试剂(oxone)，在适合的溶剂(优选二甲基甲酰胺或二甲基亚砜)的存在下，在室温下进行；用适合的氨基衍生物置换烷基磺酰基的后续操作优选地是这样进行的，即在二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二甲氧基乙烷、二 烷、乙腈、N-甲基吡咯烷酮或二甘醇二甲醚的存在下，在室温至约100℃的温度下进行。
[0234] 有趣的是，当在二甲基亚砜作为适合的溶剂的存在下进行最后一步时，这种溶剂也能充当氧化剂，能够得到其中A代表-CH＝CH-的所需化合物。然后按照常规方法将这些后面的衍生物从反应混合物中分离，例如利用色谱或制备型HPLC。
[0235] 按照该方法的步骤(st.33)，其中X是-O-的式(I)化合物可以这样容易地得到，即使磺酰基衍生物与式(XXX)的醇或酚衍生物反应，其中R同式(I)。反应可以在碱(例如钾或钠的碳酸盐、丁基锂、氨基锂、氢化钠等)的存在下，在适合的溶剂(例如二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中，在室温至约100℃的温度下操作而进行。
[0236] 作为替代选择，按照步骤(st.4d)和(st.33a)，其中X是-O-的式(I)化合物可以这样得到，即在适合的溶剂(例如二 烷、二甲基甲酰 胺或乙腈)中，在碱(例如钠或钾的碳酸盐)的存在下，在50℃至100℃的温度下，使式(Va)和(Vb)化合物与硫酸甲基异脲反应。其中X是-O-、R是氢的式(I)化合物可以这样得到，即在碘化钠的存在下，在适合的溶剂(例如二 烷、四氢呋喃或乙腈)中，在室温下，使其中X是-O-、R是甲基的式(I)化合物与三甲代甲硅烷基氯反应。其中X是-O-、R是三氟磺酰基的式(I)化合物可以这样得到，即可选地在碱(例如三乙胺或N，N-二异丙基-N-乙胺(DIPEA))的存在下，在适合的溶剂(例如二氯甲烷、四氢呋喃或二 烷)中，在-78℃至室温的温度下，使其中X是-O-、R是氢的式(I)化合物与三氟甲磺酰化剂(例如三氟甲磺酸酐、三氟甲磺酰氯或N-苯基-双(三氟甲磺酰亚胺))反应。
[0237] 其中X是-O-、R是如上所述的式(I)化合物可以这样得到，即在适合的溶剂(例如二 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、乙腈、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜)中，在室温至约90℃的温度下，可选地在碱(例如碳酸钾、叔丁醇钾或氢化钠)的存在下，使其中X是-O-、R是三氟甲磺酰基的式(I)化合物与式(XXX)醇或酚反应，其中R同式(I)中所述。
[0238] 作为替代选择，反应可以这样进行，即在适合的溶剂(例如甲苯、二甲基甲酰胺、二甲氧基乙烷或乙腈)中，在乙酸钯、(±)-BINAP和碱(例如磷酸钾(K3PO4)或者钾或铯的碳酸盐(K2CO3或CsCO3))的存在下，在0℃至100℃的温度下(st.33c)。
[0239] 其中X是-NH-、R是可选被取代的烷基、环烷基、杂环基、环烷基-烷基或杂环基烷基的式(I)化合物可以这样得到，即在适合的溶剂(例如二 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、乙腈、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜)中，在室温至90℃的温度下，可选地在碱(例如碳酸钾或三乙胺)的存在下，使其中X是-O-、R是三氟甲磺酰基的式(I)化合物与式R-NH2(XXVII)的胺反应，其中R同式(I)中所述。
[0240] 最后，按照该方法的(st.34)，其中A代表-CH2-CH2-基团的任意上述式(I)化合物可以在可选有载体承载的钯或铂催化剂的存在下经历脱氢作用，得到其中A是-CH＝CH-的对应芳族衍生物。
[0241] 关于涉及本发明式(I)化合物的制备和它们向其他式(I)化合物的转化的任意具体实例，参见实验一节。
[0242] 根据该方法的步骤(st.3)的式(Va)或(Vb)中间体化合物是新颖的，
[0243]
[0244] 其中R1是氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，因此这些化合物代表本发明的进一目的。 [0245] 按照制备式(I)化合物的方法的任意变化，原料和任意其他反应剂是已知的或者是容易按照已知方法制备的。
[0246] 作为实例，2-乙氧基-2-环己烯-1-酮是已知的化合物，可以在催化量对-甲苯磺酸(TsOH)的存在下使环己烷-1，2-二酮与乙醇在甲苯中回流而得到。
[0247] 同样，2-甲氧基-4，4-二甲基-2-环己烯-1-酮是已知的化合物，它可以通过环氧化商业上可得到的4，4-二甲基-2-环己烯-1-酮、随后在甲醇中用氢氧化钾处理该环氧化物而得到。
[0248] 最后，2-甲氧基-5，5-二甲基-2-环己烯-1-酮可以按照下列流程从商业上可得到的5，5-二甲基-环己烷-1，3-二酮制备：
[0249]
[0250] 式(III)、(VI)、(VII)、(XVI)、(XXII)、(XXIII)、(XXIV)、(XXV)、(XXVI)、(XXVII)、(XXVIII)、(XXIX)和(XXX)的化合物是已知的，或者是容易按照已知方法制备的。 [0251] 仅作为实例，在制备给定的式(VI)胍基衍生物(其中R是相当复杂的化学部分)时，可以遵照下列流程：
[0252]
[0253] 鉴于所有上述，技术人员显然知道，在按照上述方法变化任意之一制备式(I)化合物时，原料或其中间体内可能引起不希望的副反应的可选官能团需要按照常规技术加以适当保护。同样，这些被保护化合物向游离的去保护化合物的转化可以按照已知工艺进行。 [0254] 将容易领会的是，如果按照上述方法制备的式(I)化合物是以异构体的混合物形式得到的，那么按照常规技术将它们分离为单一的式(I)异构体也属于本发明的范围。 [0255] 外消旋物拆分的常规技术例如包括非对映异构体盐衍生物的分步结晶或者制备型手性HPLC。
[0256] 另外，本发明式(I)化合物也可以按照本领域公知的组合化学技术加以制备，例如以连续方式在若干中间体之间完成上述反应和在固相合成(SPS)条件下操作。
[0257] 关于对按照组合化学技术制备本发明式(I)化合物的一般参考，参见实验一节。 [0258] 因此，本发明的进一目的是两种或多种式(Ia)或(Ib)化合物的文库
[0259]
[0260] 其中
[0261] R是氢或者可选被取代的选自下述的基团：氨基、直链或支链C1-C6烷基、C3-C10环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
[0262] X是单键或者选自下述的二价原子团：-NR’-、-CONR’-、-NH-CO-NH-、-O-、-S-或-SO2-，其中R’是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基，或者R和R’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子； [0263] 与根据式(Ia)或(Ib)的吡唑环的任意一个氮原子键合的R1代表氢原子或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者在式(Ib)中，R1是与R2连接的二价-(CH2)n-NH-基团，其中n是2或3； [0264] R2是选自-NR”R”’、-N(OH)R”、-OR”或-R”的选自下述的基团：R”和R’”各自独立地是氢或者可选被取代的选自下述的基团：直链或支链C1-C6烷基、C3-C6环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，或者R”和R”’与它们所键合的氮原子一起可以构成5至6元杂芳基或杂环基，其可选地含有另外一个选自N、O或S的杂原子； [0265] A是选自-CH2-、-(CH2)2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-或-CH＝CH-的二价基团； [0266] 或者其药学上可接受的盐。
[0267] 药理学
[0268] 式(I)化合物有蛋白激酶抑制剂的活性，因此例如可用于限制肿瘤细胞的失调增殖。
[0269] 在疗法中，它们可以用于治疗各种肿瘤，例如前面所报道的那些，以及治疗其他细胞增殖性紊乱，例如牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖和手术后狭窄与再狭窄，和治疗阿尔茨海默氏病。
[0270] 推定的cdk/细胞周期蛋白抑制剂的抑制活性和所选择的化合物的效力是通过基于SPA技术(Amersham Pharmacia Biotech)的测定方法加以测定的。
[0271] 该测定法由放射性标记的磷酸部分被激酶转移至生物素基化底物组成。使所得33P-标记的生物素化产物与链霉抗生物素蛋白涂覆的SPA珠粒(生物素容量130pmol/mg)结合，在闪烁计数器中测量所发出的光。
[0272] cdk2/细胞周期蛋白A活性的抑制作用测定
[0273] 激酶反 应：向96孔U形底 平板 的每孔 加入4μM生 物素化 组蛋 白H1(Sigma#H-5505)底物、10μMATP(0.1μCi P33γ-ATP)、1.1nM细胞周期蛋白A/cdk2复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRISHCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT
7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育60min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，该缓冲液中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育60min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，该缓冲液中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
[0274] IC50测定：在从0.0015至10μM不等的不同浓度下测试抑制剂。利用下列四参数对数方程，借助计算机程序GraphPad Prizm分析实验数据：
[0275] y＝底值+(顶值-底值)/(1+10^((logIC50-x)*斜率))
[0276] 其中x是抑制剂浓度的对数，y是响应值；y开始于底值，呈S形到达顶值。 [0277] Ki计算：
[0278] 实验方法：在缓冲液(10mM Tris pH 7.5，10mM MgCl2，0.2mg/mlBSA，7.5mM DTT)中进行反应，其中含有3.7nM酶、组蛋白和ATP(冷 /标记ATP之比恒定为1/3000)。用EDTA终止反应，在磷酸膜(来自Millipore的Multiscreen 96孔平板)上捕获底物。充分洗涤后，在Top计数器上读取Multiscreen平板。测量每种ATP和组蛋白浓度的对照(零时间)。
[0279] 实验设计：在四种ATP、底物(组蛋白)和抑制剂浓度下测量反应速率。在各自的ATP与底物Km值和抑制剂IC50值附近(Km或IC50值的0.3、1、3、9倍)设计80-点浓度矩阵。在没有抑制剂的存在下和在不同ATP与底物浓度下的初步时间进程实验可以在Ki测定实验反应的线性范围内选择单一的终点时间(10min)。
[0280] 动力学参数估计：使用完整的数据组(80点)，利用[Eq.1]借助同时非线性最小平方回归估计动力学参数(关于ATP的竞争性抑制剂，随机机理)：
[0281]
[0282] 其中A＝[ATP]，B＝[底物]，I＝[抑制剂]，Vm＝最大速率，Ka、Kb、Ki分别是ATP、底物和抑制剂的解离常数，α和β分别是底物与ATP结合和底物与抑制剂结合之间的协同因子。
[0283] 另外，鉴定了所选择的化合物对一组严格涉及细胞周期的ser/thre激酶(cdk2/细胞周期蛋白E、cdk1/细胞周期蛋白B1、cdk5/p25、cdk4/细胞周期蛋白D1)的活性和对MAPK、PKA、EGFR、IGF1-R、奥罗拉-2和Cdc7的特异性。
[0284] cdk2/细胞周期蛋白E活性的抑制作用测定
[0285] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入10μM实验室内(inhouse)生物素基33
化的组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P γ-ATP)、4ng GST-细胞周期蛋白E/cdk2复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2
10mM，DTT7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育60min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100 和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0286] IC50测定：见上。
化的组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P γ-ATP)、4ng GST-细胞周期蛋白E/cdk2复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2
10mM，DTT7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育60min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100 和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0286] IC50测定：见上。
[0287] cdk1/细胞周期蛋白B1活性的抑制作用测定
[0288] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入4μM实验室内生物素化的组蛋白33
H1(Sigma#H-5505)底物、20μMATP(0.2μCi P γ-ATP)、3ng细胞周期蛋白B/cdk1复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT
7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育20min后，加入100μL PBS+32mM EDTA+0.1％TritonX-100+500μMATP终止反应，其中含有1mg SPA珠粒。然后将110μL体积转移至Optiplate。温育20min捕获底物后，加入100μL 5M CsCl使珠粒层化至Optiplate顶部，静置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。
H1(Sigma#H-5505)底物、20μMATP(0.2μCi P γ-ATP)、3ng细胞周期蛋白B/cdk1复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT
7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育20min后，加入100μL PBS+32mM EDTA+0.1％TritonX-100+500μMATP终止反应，其中含有1mg SPA珠粒。然后将110μL体积转移至Optiplate。温育20min捕获底物后，加入100μL 5M CsCl使珠粒层化至Optiplate顶部，静置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。
[0289] IC50测定：见上。
[0290] cdk5/p25活性的抑制作用测定
[0291] cdk5/p25活性的抑制作用测定是按照下列方案进行的。
[0292] 激酶反应：向96 孔U形底平板的每孔加入10μM生物素化组蛋 白33
H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P γ-ATP)、15ng cdk5/p25复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl210mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。
在室温下温育35min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P γ-ATP)、15ng cdk5/p25复合物、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl210mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。
在室温下温育35min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
[0293] IC50测定：见上。
[0294] cdk4/细胞周期蛋白D1活性的抑制作用测定
[0295] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入0.4μM小鼠GST-Rb (769-921)(来33
自Santa Cruz的#sc-4112)底物、10μM ATP(0.5μCiP γ-ATP)、100ng杆状病毒表达的GST-cdk4/GST-细胞周期蛋白D1、适合浓度的抑制剂，最终体积为50μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在37℃下温育40min后，用20μL EDTA 120mM终止反应。
自Santa Cruz的#sc-4112)底物、10μM ATP(0.5μCiP γ-ATP)、100ng杆状病毒表达的GST-cdk4/GST-细胞周期蛋白D1、适合浓度的抑制剂，最终体积为50μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在37℃下温育40min后，用20μL EDTA 120mM终止反应。
[0296] 捕获：从每孔转移60μL至MultiScreen平板，使底物与磷酸纤维素滤器结合。然+ ++后将平板用150μL/孔无Ca/Mg 的PBS洗涤3次，借助MultiScreen过滤系统过滤。 [0297] 检测：将滤器在37℃下干燥，然后加入100μL/孔闪烁剂，在Top-Count仪器中借
33
助放射性计数检测 P标记的Rb片段。
33
助放射性计数检测 P标记的Rb片段。
[0298] IC50检测：见上。
[0299] MAPK活性的抑制作用测定
[0300] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入10μM实验室内生物素化的33
MBP(Sigma#M-1891) 底 物、15μM ATP(0.15μCi P γ-ATP)、30ngGST-MAPK(Upstate Biotechnology#14-173)、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育35min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0301] IC50测定：见上。
MBP(Sigma#M-1891) 底 物、15μM ATP(0.15μCi P γ-ATP)、30ngGST-MAPK(Upstate Biotechnology#14-173)、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRIS HCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育35min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0301] IC50测定：见上。
[0302] PKA活性的抑制作用测定
[0303] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入10μM实验室内生物素化的组蛋白33
H1(Sigma#H-5505)底物、10μM ATP(0.2μCi P γ-ATP)、0.45U PKA(Sigma#2645)、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRISHCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育90min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆 的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5MCsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
H1(Sigma#H-5505)底物、10μM ATP(0.2μCi P γ-ATP)、0.45U PKA(Sigma#2645)、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为TRISHCl 10mM pH 7.5，MgCl2 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA。在室温下温育90min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆 的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5MCsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
[0304] IC50测定：见上。
[0305] EGFR活性的抑制作用测定
[0306] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入10μM实验室内生物素化的33
MBP(Sigma#M-1891)底 物、2μM ATP(0.04μCi P γ-ATP)、36ng 昆 虫 细 胞 表 达 的GST-EGFR、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为Hepes50mM pH 7.5，MgCl2 3mM，MnCl2 3mM，DTT 1mM，NaVO3 3μM，+0.2mg/mlBSA。在室温下温育20min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的
96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0307] IC50测定：见上。
MBP(Sigma#M-1891)底 物、2μM ATP(0.04μCi P γ-ATP)、36ng 昆 虫 细 胞 表 达 的GST-EGFR、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为Hepes50mM pH 7.5，MgCl2 3mM，MnCl2 3mM，DTT 1mM，NaVO3 3μM，+0.2mg/mlBSA。在室温下温育20min后，加入100μL PBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的
96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。 [0307] IC50测定：见上。
[0308] IGF1-R活性的抑制作用测定
[0309] IGF1-R活性的抑制作用测定是按照下列方案进行的。
[0310] 酶的活化：在开始实验之前，IGF1-R必须被自动磷酸化作用所活化。在临测定之前，将浓酶溶液(694nM)在100μM ATP的存在下在28℃下温育半小时，然后在所示缓冲液中稀释到工作稀释度。
[0311] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入10μM生物素化IRS1肽(PRIMM)底物、33
0-20μM抑制剂、6μM ATP、1μCi P-ATP和6nMGST-IGF1-R(与冷的60μM ATP在室温下预温育30min)，最终体积为30μL，缓冲液为50mM HEPES pH 7.9，3mM MnCl2，1mM DTT，3μM NaVO3。在室温下温育35min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，
500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育
20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
0-20μM抑制剂、6μM ATP、1μCi P-ATP和6nMGST-IGF1-R(与冷的60μM ATP在室温下预温育30min)，最终体积为30μL，缓冲液为50mM HEPES pH 7.9，3mM MnCl2，1mM DTT，3μM NaVO3。在室温下温育35min后，加入100μLPBS缓冲液终止反应，其中含有32mM EDTA，
500μM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒。温育
20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL 5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在PackardTOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
[0312] 奥罗拉-2活性的抑制作用测定
[0313] 激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入8μM生物素化肽(LRRWSLG的4个重复33
单元)、10μM ATP(0.5μCi P γ-ATP)、7.5ng奥罗拉-2、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为HEPES 50mM pH 7.0，MgCl210mM，1mM DTT，0.2mg/ml BSA，3μM原钒酸盐。在室温下温育60分钟后，终止反应，加入100μL珠粒悬液捕获生物素化肽。
单元)、10μM ATP(0.5μCi P γ-ATP)、7.5ng奥罗拉-2、抑制剂，最终体积为30μL，缓冲液为HEPES 50mM pH 7.0，MgCl210mM，1mM DTT，0.2mg/ml BSA，3μM原钒酸盐。在室温下温育60分钟后，终止反应，加入100μL珠粒悬液捕获生物素化肽。
[0314] 层化：向每孔加入100μL CsCl25M，静置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。
[0315] IC50测定：见上。
[0316] Cdc7/dbf4活性的抑制作用测定
[0317] Cdc7/dbf 4活性的抑制作用测定是按照下列方案进行的。
[0318] 在用γ33-ATP示踪的ATP的存在下，使生物素-MCM2底物被Cdc7/Dbf4复合物反式-磷酸化。然后用链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒捕获磷酸化生物素-MCM2底物，用β计数评价磷酸化的程度。
[0319] 按照下列方案在96孔平板中进行Cdc7/dbf4活性的抑制作用测定。
[0320] 向平板的每孔中加入：
[0321] -10μL底物(生物素化MCM2，最终浓度6μM)
[0322] -10μL酶(Cdc7/Dbf4，最终浓度17.9nM)
[0323] -10μL供试化合物(从nM递增至μM的12种浓度，生成剂量-响应曲线)
[0324] -然后使用10μL冷ATP(最终浓度2μM)与放射性ATP(与冷ATP摩尔比为1/5000)的混合物开始反应，在37℃下进行。
[0325] 将底物、酶和ATP稀释在50mM HEPES pH 7.9(其中含有15mM MgCl2，2mM DTT，3μM NaVO3，2mM甘油磷酸(盐)和0.2mg/ml BSA)中。供试化合物的溶剂也含有10％DMSO。 [0326] 温育60分钟后，向每孔加入100μL PBS pH 7.4(其中含有50mM EDTA，1mM冷ATP，0.1％Triton X100和10mg/ml链霉抗生物素蛋白-涂覆的SPA珠粒)终止反应。
[0327] 温育20min后，抽取110μL悬液，转移至含有100μL5M CsCl的96孔OPTIPLATE。4小时后，在Packard TOP-Count放射性读数器中读取平板达2min。
[0328] IC50测定：见上。
[0329] 本发明化合物可以作为单一药物给药，或者作为替代选择，可以与已知抗癌治疗联合给药，例如放射疗法或者与下列药物相组合的化疗方案：细胞抑制剂或细胞毒性剂、抗生素型药、烷基化剂、抗代谢物剂、激素药、免疫药、干扰素型药、环加氧酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体药、抗-HER剂、抗-EGFR剂、抗血管生成剂(例如血管生成抑制剂)、法呢基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂、其他cdk抑制剂、微管蛋白结合剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。
[0331] 在不适用组合制剂时，式(I)化合物可以与已知抗癌剂先后使用。
[0332] 适合于对哺乳动物、例如人类给药的本发明式(I)化合物可以借助平常途径给药，剂量水平依赖于患者的年龄、体重、状况和给药途径。
[0333] 例如，适合于式(I)化合物口服给药的剂量可以从约10至约500mg每剂，每天1至5次。
[0334] 本发明化合物可以在多种剂型中给药，例如口服片剂、胶囊剂、糖衣或膜衣片、液体溶液或悬液；直肠栓剂；肠胃外，例如肌内，或者通过静脉内和/或鞘内和/或脊柱内注射或输注。
[0335] 本发明也包括药物组合物，其中包含式(I)化合物或者其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂，它可以是载体或稀释剂。
[0336] 含有本发明化合物的药物组合物通常是遵照常规方法制备的，在适合的药物剂型中给药。
[0337] 例如，固体口服剂型可以与活性化合物一起含有稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、蔗二糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑 剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、镁或钙的硬脂酸盐和/或聚乙二醇；粘合剂，例如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、藻酸、藻酸盐或羟乙酸淀粉钠；泡腾混合物；染剂；甜味剂；湿润剂，例如卵磷脂、聚山梨酸酯、月桂基硫酸盐；和一般用在药物制剂中的无毒和无药理活性物质。这些药物制备物可以按已知方式制造，例如借助混合、造粒、压片、包糖衣或包膜衣过程。
[0338] 口服给药的液体分散体例如可以是糖浆剂、乳剂和悬液。
[0339] 作为实例，糖浆剂可以含有作为载体的蔗糖或者蔗糖与甘油和/或甘露糖醇和山梨糖醇。
[0340] 作为载体的实例，悬液和乳剂可以含有天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。
[0341] 肌内注射的悬液或溶液可以与活性化合物一起含有药学上可接受的载体，例如无菌的水、橄榄油、油酸乙酯、二醇(例如丙二醇)和适量盐酸利多卡因(如果需要的话)。 [0342] 静脉内注射或输注的溶液可以含有无菌水作为载体，或者优选地，它们可以是无菌、含水、等渗的盐水溶液，或者它们可以含有丙二醇作为载体。
[0344] 为了更好地阐述本发明，而不对其强加任何限制，现在给出下列实施例。 实施例
[0345] 已经制备了若干式(I)化合物，包括本发明式(Ia)和(Ib)的那些化合物。它们当中的一些已被具体命名和列举在下列实验一节中，而按照实验一节所报道的表格中的编码系统，大多数已被适宜地鉴定，还记载了它们的分析数据。
[0346] 每个代码仅明确表示一种具体式(I)化合物，由五个单元 B-X-M(C)-D组成。 [0347] 代码B代表根据式(I)的任意R取代基，其通过X键连接该分子的其余部分；每个B基团是由下表I中恰当的化学式所代表，也指示了它与分子X-M其余部分的连接点。 [0348] 代码X就代表式(I)中的X基团；它的含义是由下表II所代表的，也指示了它与分子M其余部分的连接点。
[0349] 代码C代表根据式(I)的R1基团，其通过吡唑氮原子中任意之一连接该分子的其余部分。每个C基团是由下表III中恰当的化学式所代表的，也指示了它与分子M其余部分的连接点。
[0350] 代码D代表根据式(I)的R2基团，其通过羰基连接该分子的其余部分。每个D基团是由下表IV中恰当的化学式所代表的，也指示了它与分子M其余部分的连接点。 [0351] 最后，代码M表示在3位携带羰基的分子(I)的中心。鉴于所有上述，技术人员显然知道，M被基团-X-(代码X)、R1(代码C)和R2(代码D)所取代，正如式(I)所反映的；每个M基团是由下表V中恰当的化学式所代表的，也指示了其他取代基的位置。
[0352] 因此，当前用于一些式(I)化合物的编码系统可以简要总结如下：
[0353]
[0354] 仅仅作为实例，而不打算限制本发明的范围，化合物 B66-X03-M00(C01)-D01(参见实施例36)代表这样的式(Ia)吡唑并-喹唑啉衍生物，其中中心是由表V的M00部分所代表的，R是表I的式B66基团，X是表II的二价基团X03，R1是表III的基团C01，R2是表IV的基团D01，该化合物具有下式
[0355]
[0356] 鉴于所有上述，技术人员显然知道，若R1和R2按照式(Ib)连接在一起，则这个额外的环已被包括在M部分的结构中，因此缺少代码C和D。
[0357] 表I
[0358]
[0359]
[0360]
[0361]
[0362]
[0363]
[0364]
[0365]
[0366]
[0367]
[0368]
[0369] 表II
[0370]
[0371] 表III
[0372]
[0373]
[0374] 表IV
[0375]
[0376]
[0377]
[0378]
[0379]
[0380]
[0381]
[0382]
[0383]
[0384]
[0385]
[0386]
[0387] 表V
[0388]
[0389]
[0390] 也借助1H NMR和/或HPLC/MS分析数据表征按照下列实施例制备的本发明化合物；遵照下列方法1、2或3中任意之一收集HPLC/MS数据。
[0391] HPLC/MS方法1
[0392] HPLC设备由配有996Waters PDA检测器的Waters 2790HPLC系统和配有电子喷射(ESI)离子源的Micromass mod.ZQ单一四极质谱计组成。仪器控制、数据获取和数据加工是由Empower and MassLynx 4.0软件驱动的。
[0393] 使用RP18 Waters X Terra(4.6×50mm，3.5μm)柱，在25℃下进行HPLC，流速1mL/min。移动相A是乙酸铵5mM缓冲液(用乙酸/乙腈95∶5调至pH 5.5)，移动相B是H2O/乙腈(5∶95)；梯度是在8分钟内从10至90％B，然后保持90％B达2分钟。注射体积是10μL。
[0395] HPLC/MS方法2
[0396] HPLC设备由配有996 Waters PDA检测器的Waters 2790HPLC系统和配有电子喷射(ESI)离子源的Micromass mod.ZQ单一四极质谱计组成。仪器控制、数据获取和数据加工是由Empower and MassLynx 4.0软件驱动的。
[0397] 使用RP18 Waters X Terra(3.0×30mm，3.5μm)柱，在25℃下进行HPLC，流速1mL/min。移动相A是乙酸铵5mM缓冲液(用乙酸/乙腈95∶5调至pH 5.5)，移动相B是H2O/乙腈(5∶95)；梯度是在4 分钟内从10至90％B，然后保持90％B达1分钟。注射体积是10μL。
[0398] 按照阳离子和阴离子模式操作质谱计，毛细管电压设置在2.5KV；离子源温度是120℃；锥形电压是10V；全扫描质量范围设置在100至800amu。
[0399] HPLC/MS方法3
[0400] 利用电子喷射(ESI)电离技术和阳离子与阴离子检测法，在Finnigan LCQ离子阱质谱计上记录质谱。质谱计直接与SSP4000HPLC系统(Thermo Separation)连接，它配有LcPal自动进样器(CTCAnalytic)和UV 6000LP PDA检测器(Thermo Separation)。仪器控制、数据获取和加工是用Xcalibur 1.2软件进行的。使用RP C18 WatersZorbaxSB C18柱(4.6×50mm，1.8μm)，在室温下进行HPLC分析，流速1mL/min。
[0401] 移动相A是乙酸铵5mM缓冲液(用乙酸调至pH 5.5)：乙腈90∶10，移动相B是乙酸铵5mM缓冲液(用乙酸调至pH 5.5)：乙腈10∶90；梯度是在7分钟内从0至100％B，然后保持100％B达2分钟，之后重新平衡。总LC时间是12分钟。注射体积是10μL。在215与400nm之间进行UV检测。
[0402] 在下列条件下生成离子：ESI喷射器电压4.0kV，加热毛细管温度255℃，护套氮气压力5.0Bar。采用全扫描检测模式(从50至1000amu)，对最强离子进行MS/MS分析(标准化碰撞能：35％)。
[0403] UV检测：215-400nm。
[0404] 实施例1
[0405] 2-乙氧基环己-2-烯-1-酮
[0406]
[0407] 将50g(0.45mo l)1，2-二环己烷二酮溶于1L甲苯与0.5L乙醇的混合物中。加入10g对-甲苯磺酸，将溶液在回流下加热2天(TLC氯 仿/甲醇6/1)。然后蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用饱和NaHCO3溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩。粗产物经过硅胶柱色谱纯化，用环己烷/乙酸乙酯98/2混合物洗脱(66％收率，油)。
[0408] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.20(t，3H)2.33-2.39(m，6H)3.67(q，2H)5.97(t，1H).
[0409] 实施例2
[0410] (3-乙氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯
[0411]
[0412] 将41.40g(0.29mol)2-乙氧基环己-2-烯-1-酮溶于310mL二乙醚，在-50℃下滴加325mL 1M LiN(TMS)2的四氢呋喃溶液。在相同温度下30分钟后，在搅拌下加入44.2mL草酸二乙酯。将溶液在室温下保持过夜(TLC氯仿)。然后加入300mL水，加入1N HCl调节至pH 4-5，所得溶液用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过硅胶柱色谱纯化，用氯仿洗脱(76％收率，油)。
[0413] 1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 1.12(t，3H)1.51(t，3H)2.06-2.58(m，4H)3.57(m，1H)3.86(q，2H)4.38(q，2H)6.09(m，1H).
[0414] 实施例3
[0415] 1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0416]
[0417] 将30g(0.125mol)(3-乙氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯溶于150mL冰乙酸，加入6.5mL甲基肼。将混合物在室温下搅拌6小时。然后蒸发溶剂，将粗产物重新溶于水，用30％NH4OH调节溶液为碱性，用氯仿萃取。然后将有机层经Na2SO4干燥，浓缩。残余 物经过硅胶柱色谱处理(洗脱剂：氯仿)，从正己烷/二乙醚混合物中结晶(TLC氯仿；63％收率，白色固体)。
[0418] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.12(t，J6.89Hz，3H)1.51(t，J6.94Hz，3H)2.06-2.58(m，4H)3.57(m，1H)3.86(q， J6.83Hz，2H)4.38(q，J6.94Hz，2H；6.09(m，，1H). [0419] 按照相同方法，但是采用适合的取代的肼衍生物，制备下列化合物：
[0420] 1-叔丁基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0421] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.16(t，J6.83HZ，3H)1.58(s，9H)2.30-2.93(3m，6H)4.18（q，J6.83Hz，2H)；
[0422] 1-(2-羟基乙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0423] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.20Hz，3H)1.9-2.9(3m，6H)3.7(m，2H)4.3(q，J7.20Hz，2H)4.53(t，J5.85，2H)4.77(t，J5.73，OH)；
[0424] 1-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0425] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 1.18(t，J7.20Hz，3H)1.29(t，J7.20Hz，3H)2.04(m，2H)；2.52(m，2H)2.93(t，J6.10Hz，2H)4.04(q，J7.07Hz，2H)4.37(q，J 7.20Hz，
2H)5.26(s，1H)；
2H)5.26(s，1H)；
[0426] 7-氧代-1-(2，2，2-三氟乙基)-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0427] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.20(t，J7.07Hz，3H)2.05(m，2H)2.57(m，2H)2.95(m，2H)4.2(q，J7.07Hz，2H)5.3(2d，2H)；
[0428] 7-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-4，5，6，7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0429] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.29(t，J7.08Hz，3H)2.05(m，2H)2.57(t，J7.44Hz，2H)2.94(m，，2H)4.30(q，J 7.19Hz，2H)5.46(2d，2H)；
[0430] 7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0431] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.28(t，J ＝ .07Hz，3H)2.04(m，2H)2.51(m，2H)2.87(t，J＝6.10Hz，2H)4.27(q，J＝7.11Hz，2H)14.39(s，1H)；
[0432] 1-[4-(氨基磺酰基)苯基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0433] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(t，J ＝ 7.13Hz，3H)2.10-2.19(m，2H)2.57-2.63(m，2H)3.05(t，J＝6.10Hz，2H)4.37(q，J＝7.07Hz，2H)7.54(s，2H)7.77(d，J＝8.78Hz，2H)7.96(d，J＝8.90Hz，2H)；
[0434] 1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0435] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J＝.07Hz，3H)2.05-2.17(m，2H)2.56(dd，J＝7.26，5.55Hz，2H)3.03(t，J＝6.10Hz，2H)3.85(s，3H)4.34(q，J＝7.07Hz，2H)7.05(d，J＝9.02Hz，2H)7.44(d，J＝9.02Hz，2H)；
[0436] 1-(4-氰基苯基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0437] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(t，J ＝ 7.07Hz，3H)2.09-2.19(m，2H)2.60(dd，J ＝ 7.32，5.49Hz，2H)3.04(t，J ＝ 6.16Hz，2H)4.36(q，J ＝ 7.11Hz，
2H)7.80(d，J＝8.90Hz，2H)8.03(d，J＝8.78Hz，2H)；
2H)7.80(d，J＝8.90Hz，2H)8.03(d，J＝8.78Hz，2H)；
[0438] 7-氧代-1-吡啶-2-基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0439] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(t，J ＝ 7.13Hz，3H)2.10-2.21(m，2H)2.58(dd，J ＝ 7.32，5.61Hz，2H)3.05(t，J ＝ 6.16Hz，2H)4.36(q，J ＝ 7.07Hz，
2H)7.61(ddd，J＝ 7.41，4.73，1.04Hz，1H)7.64(dt，J ＝ 7.93，0.98Hz，1H)8.07(td，J＝
7.74，1.83Hz，1H)8.57(ddd，J＝4.79，1.86，0.79Hz，1H)；
2H)7.61(ddd，J＝ 7.41，4.73，1.04Hz，1H)7.64(dt，J ＝ 7.93，0.98Hz，1H)8.07(td，J＝
7.74，1.83Hz，1H)8.57(ddd，J＝4.79，1.86，0.79Hz，1H)；
[0440] 7-氧代-1-苯基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0441] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.30(t，3H，J7.08)2.08(m，2H)2.54(m，2H)4.30(q，2H，J7.08)7.49(m，5H)；
[0442] 1-苄基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0443] 1-(1-甲基哌啶-4-基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0444] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J＝7.07Hz，3H)1.84-2.11(m，6H)2.28(s，3H)2.48-2.53(m，2H)2.52-2.60(m，2H)2.91-3.00(m，2H)2.94(t，J＝6.16Hz，2H)4.32(q，J＝7.15Hz，2H)4.93-5.11(m，1H)
[0445] (所采用的肼基衍生物不是商业上可获得的(CAS n°53242-78-7，因此如文献WO02/085906所述合成)
[0446] 7-氧代-1-哌啶-4-基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0447] (所采用的肼基衍生物不是商业上可获得的，因此如文献DE3634942 A1所述合成)
[0448] 1-(1-苄基哌啶-4-基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0449] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，3H，J 7.07Hz)3.34(s，2H)4.31(q，2H，J7.07Hz)5.06(m，1H)7.35(m，5H)；
[0450] 1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0451] (所采用的肼基衍生物不是商业上可获得的，因此如实施例69所述合成) [0452] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(bs，3H)2.59(m，1H)2.71(m，1H)2.95(m，1H)3.29(m，1H)3.94(m，1H)4.30(m，2H)4.48(m，1H)5.29(m，1H)
[0453] 1-(2-二甲氨基乙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0454] 1-(2-二甲氨基丙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0455] 实施例4
[0456] 1(2)-(3，3-二甲基丁基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0457]
[0458] 步骤1.7-乙氧基-4，5-二氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0459] 将1.2g(5mmol)(3-乙氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯溶于20mL乙醇，滴加25mL(5.2mmol)水合肼98％。将该溶液在室温下搅拌5小时，然后在60℃下加热另外5小时。在真空中除去溶剂， 将残余物溶于二乙醚，过滤收集所得沉淀，得到
0.8g标题化合物，无需任何进一步纯化即可用于下一步。
0.8g标题化合物，无需任何进一步纯化即可用于下一步。
[0460] 步骤2.1(2)-(3，3-二甲基丁基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0461] 将0.28g(1.17mmol)7-乙氧基-4，5-二氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于12mL无水二甲基甲酰胺，加入0.25g(1.40mmol)甲磺酸3，3-二甲基丁基酯。将所得溶液用
0.06g(1.40mmol)氢化钠的60％矿物油分散体处理，将反应混合物在65℃下搅拌4小时。
向反应中加入水，溶液用乙酸乙酯萃取。在真空中蒸发溶剂，将残余物重新溶于10mL甲醇。
然后加入几滴1N HCl，3小时后使反应在水与乙酸乙酯之间分配，得到粗产物，经Na2SO4干燥后，经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯95/5)(75％收率)。
0.06g(1.40mmol)氢化钠的60％矿物油分散体处理，将反应混合物在65℃下搅拌4小时。
向反应中加入水，溶液用乙酸乙酯萃取。在真空中蒸发溶剂，将残余物重新溶于10mL甲醇。
然后加入几滴1N HCl，3小时后使反应在水与乙酸乙酯之间分配，得到粗产物，经Na2SO4干燥后，经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯95/5)(75％收率)。
[0462] 实施例5
[0463] 7-氧代-1(2)-[(5-苯基-1，3- 唑-2-基)甲基]-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0464]
[0465] 将900mg(4.3mmol)7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于26mL DMF，加入712mg(5.16mmol)K2CO3和995mg(5.16mmol)2-(氯甲基)-5-苯基-1，3- 唑。将反应混合物在室温下搅拌5小时，然后在真空下除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。经过色谱处理，回收405mg(30％收率)两种区域异构体(regioisomer)。
[0466] 7-氧代-1-[(5-苯基-1，3- 唑-2-基)甲基]-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯1
[0467] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.29(t，3H)2.09(m，2H)2.59(m，2H)2.97(m，2H)4.31(q，2H)6.04(s，2H)7.39(m，1H)7.49(m，2H)7.63(s，1H)7.66(m，2H)
[0468] 7-氧代-2-[(5-苯基-1，3- 唑-2-基)甲基]-4，5，6，7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸乙酯1
[0469] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，3H)2.09(m，2H)2.60(m，2H)2.99(m，2H)4.31(q，2H)5.98(s，2H)7.39(m，1H)7.49(m，2H)7.62(s，1H)7.66(m，2H). [0470] 实施例6
[0471] 1-[(5-乙基-1，3- 唑-2-基)甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0472]
[0473] 步骤1.[3-(乙氧羰基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-1(2)-基]乙酸 [0474] 将1g(4.8mmol)7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于30mL无水DMF，在室温下用1.59g(11.52mmol)K2CO3和800mg(5.76mmol)溴乙酸处理。在80℃下加热过夜后，将混合物冷却，在真空下除去溶剂。将粗产物溶于水，用HCl 37％中和。用二氯甲烷萃取三次，得到1.7g粗产物，经过快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷)，得到783mg(61％)产物，为区域异构体混合物。
[0475] 步骤2.7-氧代-1(2)-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0476] 将 743mg(2.79mmol)[3-( 乙 氧 羰 基 )-7- 氧 代 -4，5，6，7- 四 氢 -1H- 吲唑-1-(2)-基]乙酸的异构体混合物溶于28mL DMF，加入2.18g (4.18mmol)苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷子基) 六氟磷酸盐(PyBOP)、690mg(5.58mmol)1-氨基丁
烷-2-酮盐酸盐和2.4mL (13.95mmol)N-乙基-N，N-二异丙基胺。2小时后，在真空下蒸发溶剂，将粗产物溶于二氯甲烷，用饱和NaHCO3、盐水和水洗涤。经过快速色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯8/2)，得到511mg7-氧代-1-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯和20mg 7-氧代-2-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(57％总收率)。
烷-2-酮盐酸盐和2.4mL (13.95mmol)N-乙基-N，N-二异丙基胺。2小时后，在真空下蒸发溶剂，将粗产物溶于二氯甲烷，用饱和NaHCO3、盐水和水洗涤。经过快速色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯8/2)，得到511mg7-氧代-1-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯和20mg 7-氧代-2-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(57％总收率)。
[0477] 7-氧代-1-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯1
[0478] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.94(t，3H)1.32(t，3H)2.09(m，2H)2.44(q，2H)2.52(t，2H)2.96(t，2H)3.98(d，2H)4.31(q，2H)5.26(s，2H)8.44(t，1H)； [0479] 7-氧代-2-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
1
1
[0480] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.94(t，3H)1.31(t，3H)2.08(m，2H)2.44(q，2H)2.53(t，2H)2.94(t，2H)3.99(d，2H)4.29(q，2H)5.32(s，2v8.48(t，1H).
[0481] 步骤3.1-[(5-乙基-1，3- 唑-2-基)甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0482] 将506mg(1.51mmol)7-氧代-1-{2-氧代-2-[(2-氧代丁基)氨基]乙基}-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯的甲苯(45mL)溶液用0.422mL(4.53mmol)三氯化磷处理，在90℃下加热15小时。将混合物冷却至室温，倒入冰中，用NaOH 5N中和。水相用二氯甲烷萃取，从有机层得到425mg粗产物，经过硅胶纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯7/3)。从而分离到285mg标题化合物(60％收率)。
[0483] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.16(t，3H)1.32(t，3H)2.08(m，2H)2.63(m，4H)2.97(t，2H)4.31(q，2H)5.84(s，2H)6.79(s，1H).
[0484] 实施例7
[0485] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0486]
[0487] 将16g(0.07mol)1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于100mL二甲基甲酰胺，加入32mL二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛。将混合物在60℃下搅拌
8小时。然后在真空中蒸发溶剂，使产物从乙醇中结晶(90％收率)。
8小时。然后在真空中蒸发溶剂，使产物从乙醇中结晶(90％收率)。
[0488] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 2.72-2.95(m，4H)3.04-3.14(m，6H)4.10(s，3H)4.24(q，J7.20Hz，2H)7.46(m，1H).
[0489] 按照相同方法进行操作，制备下列化合物：
[0490] 1-叔丁基-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯；
[0491] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-(2-羟基乙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0492] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.80(t，J6.34Hz，2H)2.88(t，J6.21，2H)3.70(m，2H)4.24(q，J7.07Hz，3H)4.58(t，J5.97Hz，2H)4.79(bs，OH)7.47(bs，1H)；
[0493] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0494] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.17(t，J7.07Hz，3H)1.28(t，J7.13Hz，3H)2.86(m，4H)3.10(s，6H)4.10(q，J7.11Hz，2H)4.26(q，J7.11Hz，2H)5.33(s，2H)7.43(s，
1H)；
1H)；
[0495] 1-[4-(氨基磺酰基)苯基]-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯；
[0496] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0497] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J ＝ 7.07Hz，3H)2.87-2.93(m，2H)2.95-3.00(m，2H)3.12(s，6H)3.83(s，3H)4.32（q，J＝7.07Hz，2H)7.00(d，J＝9.02Hz，
2H)7.39(d，J＝9.02Hz，2H)7.42(s，1H)；
2H)7.39(d，J＝9.02Hz，2H)7.42(s，1H)；
[0498] 1-(4-氰基苯基)-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0499] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J ＝ 7.13Hz，3H)2.88-2.94(m，2H)2.97-3.03(m，2H)3.14(s，6H)4.34(q，J＝7.15Hz，2H)7.48(s，1H)7.73(d，J＝8.90Hz，
2H)7.96(d，J＝8.78Hz，2H)；
2H)7.96(d，J＝8.78Hz，2H)；
[0500] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1-吡啶-2-基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0501] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J＝7.07Hz，3H)2.87-2.93(m，2H)3.00(t，J＝6.71Hz，2H)3.13(s，6H)4.33(q，J＝7.07Hz，2H)7.40(s，1H)7.54(ddd，J＝7.47，4.79，1.04Hz，1H)7.56(dt，J ＝ 8.02，0.93Hz，1H)7.99-8.04(m，1H)8.52(ddd，J ＝ 4.82，1.89，
0.85Hz，1H)；
0.85Hz，1H)；
[0502] 6-(二甲氨基)亚甲基-1-(3，3-二甲氨基丁基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯；
[0503] 6-(二甲氨基)亚甲基-2-(3，3-二甲氨基丁基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0504] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1-(2，2，2-三氟乙基)-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯；
[0505] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.30(t，J7.07Hz，3H)2.88(2m，4H)3.10(s，6H)4.33(q，J7.07Hz，2H)5.45(q，J8.90Hz，2H)7.50(bs，1H)；
[0506] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-2-(2，2，2-三氟乙基)-4，5，6，7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0507] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1，28(t，J7.07Hz，3H)2.82(2m，4H)3.12(s，3H)4.29(q，J7.07Hz，2H)5.57(q，J9.02Hz，2H)7.53(bs，1H)；
[0508] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1-苯基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0509] 1-苄基-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0510] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-(1-甲基哌啶-4-基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0511] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1-哌啶-4-基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0512] 1-(1-苄基哌啶-4-基)-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0513] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.31(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.76-2.15(m，4H)2.79-3.01(m，4H)3.13(s，6H)3.24-3.64(m，6H)4.29(q，J ＝ 7.07Hz，2H)5.30(dd，J＝
17.01，7.26Hz，1H)7.14-7.40(m，6H)；
17.01，7.26Hz，1H)7.14-7.40(m，6H)；
[0514] 1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0515] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-(1-甲酰基哌啶-4-基)-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0516] 1-(2-二甲氨基乙基)-6-二甲氨基亚甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0517] 1-(2-二甲氨基丙基)-6-二甲氨基亚甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0518] 实施例8
[0519] 1-甲基-8-(甲硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B67-X04-M00(C01)-D01]
[0520]
[0521] 将9g(69mmol)乙基-6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸酯溶于350mL无水二甲基甲酰胺，加入13.4g无水乙酸钾(138mmol)和19.18g(69mmol)硫酸甲基异硫脲。将混合物在90℃下维持搅拌8小时。然后蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。粗产物最后用二乙醚研制，过滤收集，得到15.5g(74％收率)标题化合物。1
[0522] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.29(t，J7.07Hz，3H)2.54(s，3H)2.84-3.00(m，4H)4.26(q，J7.07Hz，2H)4.31(s，3H)8.53(m， 1H).
[0523] 按照相同方法，但是采用适合的取代的异硫脲衍生物，可以制备 下列化合物： [0524] 8-(苄硫基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B05-X04-M00(C01)-D01]；
[0525] 1-甲基-8-(苯硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B04-X04-M00(C01)-D01].
[0526] 实施例9
[0527] 8-苄基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[BO5-X06-M00(C01)-D01]
[0528]
[0529] 在氮气氛下，将0.5M溴化苄基锌的THF溶液(3.11mL，1.556mmol)加入到1-甲基-8-(甲硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(237mg，0.778mmol)与Pd(PPh3)4(9mg，0.0078mmol，1％)的混合物中。在60℃和氮下加热20小时后，将混合物冷却至室温，与含水碳酸氢钠和乙酸乙酯摇动，然后过滤。然后分离有机相，水相用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，经Na2SO4干燥，蒸发，残余物经过硅胶纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97/3)。分离到20mg标题化合物。
[0530] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，3H)2.99(m，4H)4.23(s，2H)4.27(m，5H)7.23(m，1H)7.32(m，2H)7.36(m，2H)8.66(s，1H)
[0531] 实施例10
[0532] 1-甲基-8-(苯硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B04-X04-M00(C01)-D01]
[0533]
[0534] 在室温和氩气氛下，向搅拌着的1-甲基-8-(甲磺酰基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(46mg，0.137mmol)与苯硫酚(16μL，17mg，0.15mmol)的乙醇(1mL)悬液加入1N氢氧化钠(150μL，0.15mmol)。将混合物搅拌3天后，加入1N盐酸(150μL，0.15mmol)，在真空下除去溶剂。经过硅胶色谱处理(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97/3)，分离到13mg1-甲基-8-(苯硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯和10mg8-乙氧基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯。 [0535] B04-X04-M00(C01)-D01
[0536] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.26(t，3H)2.86(t，2H)2.93(t，2H)3.68(s，3H)4.25(q，2H)7.48(m，3H)7.64(m，2H)8.53(s，1H)；
[0537] B03-X03-M00(C01)-D01
[0538] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H)1.38(t，3H)2.91(t，2H)3.01(t，2H)4.33(m，5H)4.41((q，2H).
[0539] 实施例11
[0540] 1-甲基-8-(甲硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑 啉-3-酰胺[B67-X04-M00(C01)-D03]
[0541]
[0542] 将13.00g(0.043mol)1-甲基-8-(甲硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯悬浮在200mL甲醇、200mL二甲基甲酰胺与200mL氢氧化铵(ammonium hydrate)30％的混合物中。在密封的瓶子中将混合物在65℃下搅拌约8小时。然后蒸发溶剂至干，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。粗产物经过硅胶柱色谱纯化，用环己烷/乙酸乙酯混合物洗脱，得到6.16g(52％收率)标题化合物。 [0543] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.54(s，3H)2.75-3.05(m，4H)4.28(s，3H)7.47(bs，2H)8.51(m，1H).
[0544] 实施例12
[0545] 1-甲基-8-(甲磺酰基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B67-X05-M00(C01)-D03]
[0546]
[0547] 将6.00g(0.022mol)1-甲基-8-(甲硫基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺溶于1000mL二甲基甲酰胺，加入40.18g臭氧。将混合物在室温下搅拌16小时。然后加入水和乙酸乙酯，分离各层。最后将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。残余物用二乙醚研制，过滤收集5.40g(80％收率)标题化合物。
[0548] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.06(m，4H)3.43(s，3H)4.29(s，3H)7.45(bs，2H)8.91(m，1H).
[0549] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0550] 1-甲基-8-(甲磺酰基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B67-X05-M00(C01)-D01]
[0551] 实施例13
[0552] 8-(环己氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B27-X00-M00(C01)-D03]和8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B27-X00-M01(C01)-D03]
[0553]
[0554] 将1.5g 1-甲基-8-(甲磺酰基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺溶于100mL无水二甲亚砜中，加入1.15mL环己胺。在80℃和氮下16小时后，在减压下蒸发溶剂。然后将残余物重新溶于二氯甲 烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。经过硅胶柱色谱处理(洗脱剂：二氯甲烷/丙酮9/1)，得到300mg 8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺和200mg 8-(环己氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(30％总收率)。
[0555] B27-X00-M00(C01)-D03
[0556] 1H NMR(400MHZ，DMSO-d6)δppm 1.63(m，10H)2.73(m，2H)2.94(m， 2H)3.69(m，1H)4.31(m，3H)6.94(d，J6.58Hz，1H)7.23(s，1H)7.43(s，1H)8.20(s，1H)；
[0557] B27-X00-M01(C01)-D03
[0558] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.63(m，10H)3.88(m，1H)4.66(s，3H)7.40(s，1H)7.47(d，J8.66Hz，1H)7.59(s，1H)7.74(s，1H)7.87(d，J8.66HZ，1H)9.13(s，1H) [0559] 按照这种方法操作，并且考虑到胺可以盐的形式获得，采用化学计算量的碳酸钾，制备下列化合物，正如表VI代码所表示的：
[0560] 表VI
[0561]
[0562]
[0563]
[0564]
[0565]
[0566]
[0567] 实施例14
[0568] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1，4，4-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0569]
[0570] 步骤1.3-甲氧基-5，5-二甲基-环己-2-烯酮
[0571]
[0572] 将5，5-二甲基-环己烷-1，3-二酮(80.0g，0.57mol)的无水甲醇(600mL)溶液用1M氯化钛(TiCl4)的二氯甲烷(17.2mL)溶液处理。在室温下搅拌1小时后，将混合物缓慢倒入冷的5％NaHCO3溶液，用二乙醚萃取(450mL×6)。收集有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干，得到标题化合物(81.5g，92％收率)，为淡黄色油。
1
1
[0573] H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.05(s，6H)2.19(s，2H)2.26(s，2H)3.68(s，3H)5.35(s，1H).
[0574] 步骤2.5，5-二甲基-环己-2-烯酮
[0575]
[0576] 在氩气氛下，将3-甲氧基-5，5-二甲基-环己-2-烯酮(80g，0.52mol)的无水四氢呋喃(270mL)溶液用1M LiAlH4的四氢呋喃溶液(182mL)逐滴处理，同时保持反应温度在0℃与5℃之间。使温度升至25℃，将混合物搅拌4小时。将所得浆液用冰浴冷却，用乙酸乙酯(30mL)猝灭，小心倒入冷却的2M H2SO4溶液中。然后将水溶液用二乙醚萃取(300mL×3)，经Na2SO4干燥，在减压下蒸发，以除去大多数溶剂。粗产物含有标题化合物，为低沸点油，无需进一步纯化即可用于下一步。
[0577] 1H NMR(300MHz，CHCL3-d)δppm 1.04(s，6H)2.23(dd，J4.10，2.05Hz，2H)2.27(s，2H)6.02(dt，J9.96，2.05Hz，1H)6.85(dt，J9.96，4.10Hz，1H).
[0578] 步骤3.4，4-二甲基-7-氧杂-二环[4.1.0]庚烷-2-酮
[0579]
[0580] 将来自前步的5，5-二甲基-环己-2-烯酮(理论上0.52mol)溶于甲醇(500mL)，冷却至0℃，用30％过氧化氢(265mL，2.6mol)处理。将所得溶液用2％NaOH溶液(142mL，0.067mol)逐滴处理，同时保持反应温度在0℃附近。将混合物在4℃下放置20小时，然后用水(900mL)稀释，用乙醚萃取(450mL×4)。收集萃取液，用5％Na2S2O5溶液并用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在减压下浓缩。残余物经过真空蒸馏纯化，得到标题化合物(56.8g，78.3％收率)，为无色的油。
[0581] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 0.91(s，3H)1.01(s，3H)1.82(m，2H)2.03(d，J15.53Hz，1H)2.64(d，J 13.77HZ，1H)3.20(dt，J 3.74，0.92Hz，1H)3.49(t，J 4.10Hz，1H). [0582] 步骤4.2-甲氧基-5，5-二甲基-环己-2-烯酮
[0583]
[0584] 在室温下，将4，4-二甲基-7-氧杂-二环[4.1.0]庚烷-2-酮(44.0g，0.31mol)的甲醇(150mL)溶液加入到85％氢氧化钾(20.7g，0.31mol)的甲醇(450mL)溶液中。将混合物在这种温度下保持20小时，然后加热至回流达30分钟。冷却后，将溶液用水(1.2L)稀释，用乙醚萃取(350mL×5)。收集有机萃取液，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空下蒸发，以除去大多数溶剂。粗产物经过蒸馏纯化，得到纯的标题化合物(32.8g，68％收率)，为油。
[0585] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.04(s，6H)2.30(d，J4.69Hz，2H)2.35(s，2H)3.59(t，3H)5.67(t，J4.54Hz，1H).
[0586] 步骤5.(3-甲氧基-6，6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯 [0587]
[0588] 在氩气氛下，将60％氢化钠的矿物油分散体(2.41g，60.3mmol)悬浮在无水四氢呋喃(60mL)中，用2-甲氧基-5，5-二甲基-环己-2-烯酮(6.20g，40.2mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液处理。15分钟后，加入草酸二乙酯(8.17mL，60.3mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液，将混合物回流1小时。将浆液用水(800mL)稀释，用1N HCl(50mL)酸化，用乙酸乙酯萃取(500mL×2)。收集有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干，得到粗的标题化合物(10.60g)，为橙色的油，无需进一步纯化即可使用。
[0589] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.41(t，3H)2.77(s，2H)3.13(s，6H)4.23(s，3H)4.4(q， J7.13HZ,2H)7.58(s，1H).
[0590] 步骤6.1，4，4-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0591]
[0592] 将来自前步的(3-甲氧基-6，6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯(理论上40.2mmol)的乙酸(65mL)溶液用甲基肼(2.14mL，40.2mmol)的乙酸(20mL)溶液逐滴处理，在室温下放置过夜。然后将混合物用水(800mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(500mL×2)。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过硅胶色谱处理，用二氯甲烷/乙酸乙酯100∶5洗脱，得到纯的标题化合物(4.8g，47.7％收率)。 [0593] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.42(t，J7.18Hz，3H)1.49(s，3H)1.98(t，J6.45Hz，2H)2.61(t，J6.45Hz，2H)4.19(s，3H)4.43(q，J7.03Hz，2H)
[0594] 步骤7.6-[(二甲氨基)亚甲基]-1，4，4-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0595]
[0596] 在65℃下，将1，4，4-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(4.8g，19.18mmol)的无水二甲基甲酰胺(30mL)溶液用二甲基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛(9.19mL，38.35mmol)处理2小时。将混合物蒸发至干，使粗产物从己烷中结晶，得到标题化合物(5.1g，87％收率)。
[0597] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.21(m，9H)2.76(s，2H)3.15(s，6H)4.22(s，3H)4.41(q，2H).
[0598] 实施例15
[0599] 6-(羟基亚甲基)-1，5，5-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0600]
[0601] 步骤1.5，5-二甲基-7-氧杂二环[4.1.0]庚烷-2-酮
[0602]
[0603] 将4，4-二甲基-环己-2-烯酮(32.0g，0.26mol)与30％过氧化氢(132mL，1.29mol)的甲醇(250mL)溶液用2％氢氧化钠溶液(70mL，0.035mol)逐滴处理，同时保持反应温度在0℃附近。将混合物在4℃下放置20小时，然后用水(400mL)稀释，用二乙醚萃取(250mL×4)。收集萃取液，用5％Na2S2O5溶液并用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在减压下浓缩。残余物经过真空蒸馏纯化，得到标题化合物(27.6g，76.4％收率)，为油。
[0604] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.05(s，3H)1.21(s，3H)1.20-2.50(m，5H)3.20(m，1H).
[0605] 步骤2.2-甲氧基-4，4-二甲基环己-2-烯-1-酮
[0606]
[0607] 在室温下，将5，5-二甲基-7-氧杂二环[4.1.0]庚烷-2-酮(19.4g，138.4mmol)的甲醇(95mL)溶液加入到85％氢氧化钾(9.1g，138.4mmol)的甲醇(285mL)溶液中。将混合物在这种温度下保持20小时，然后加热至回流达30分钟。冷却后，将溶液用水(750mL)稀释，用二乙醚萃取(350mL×4)。收集有机萃取液，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。将粗产物溶于己烷(380mL)，维持剧烈搅拌30分钟，过滤除去固体产物。在真空下蒸发滤液，得到纯的标题化合物(9.8g，45.9％收率)，为淡黄色油。
[0608] 1H NMR(CDCl3400MHZ)δppm 1.23(s，6H)1.87(t，2H)2.61(t，2H)3.60(s，3H)5.57(s，1H)
[0609] 步骤3.(3-甲氧基-5，5-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯 [0610]
[0611] 在氩气氛下，将2-甲氧基-4，4-二甲基-环己-2-烯酮(12.5g，81.1mmol)与草酸二乙酯(12.1mL，89.2mmol)的乙醚溶液用1M双(三甲代甲硅烷基)氨基锂的四氢呋喃溶液处理。将反应物在室温下搅拌2小时，倒入10％NaH2PO4溶液(500mL)，用二乙醚萃取(300mL×2)。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。将粗产物溶于己烷，搅拌，过滤，得到标题化合物(16.8g，81.5％收率)，为黄色结晶性固体。1
[0612] H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.15(s，6H)1.38(t，3H)2.77(s，2H)3.63(s，3H)4.35(q，2H)5.62(s，1H).
[0613] 步骤4.1，5，5-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [0614]
[0615] 将(3-甲氧基-5，5-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯(15.50g，0.061mol)的乙酸(100mL)溶液用甲基肼(3.49mL，0.066mol)的乙酸(50mL)溶液逐滴处理。在室温下24小时后，在剧烈搅拌下将反应混合物用水(2L)稀释。过滤所得沉淀，用水洗涤，得到标题化合物(10.30g，67.6％收率)，为黄色固体。
[0616] 1H NMR(300MHz，CHCl3-d)δppm 1.20(s，6H)1.42(t，3H)2.43(s，2H)2.93(s，2H)4.21(s，3H)4.41(q，2H).
[0617] 步骤5.6-(羟基亚甲基)-1，5，5-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[0618]
[0619] 将1，5，5-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(1.00g，4mmol)的无水甲酸乙酯(10mL)溶液用乙醇钠(0.54g，8mmol)处理，回流3小时。将混合物冷却至室温，倒入冷水(40mL)中。将水层用二乙醚(40mL)洗涤，以除去未反应的原料，用20％NaH2PO4溶液酸化，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)。收集有机萃取液，经Na2SO4干燥，蒸发至干，得到标题化合物(0.88g，78.8％收率)，为褐色固体。
[0620] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.21(s，6H)1.32(t，3H)2.87(s，2H)4.19(s，3H)4.30(q，2H)7.74(s，1H)14.00(br，1H)
[0621] 实施例16
[0622] 8- 氨 基 -1- 甲 基 -1H- 吡 唑 并 [4，3-h] 喹 唑 啉 -3- 羧 酸 乙 酯[B00-X00-M00(C01)-D01]
[0623]
[0624] 将16.00g(0.06mol)乙基-6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸酯溶于600mL乙醇，连续加入3.90g乙醇钠和5.44g盐酸胍。将溶液在回流下搅拌12小时。然后蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。然后将有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩。残余物用二乙醚研制，过滤收集产物(85％收率，白色固体)。
1
1
[0625] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm：1.28(t，J7.07Hz，3H)2.68-2.93(m，4H)4.25(q，J7.07Hz，2H)4.30(s，3H)6.54(bs，2H)8.15(m，1H).
[0626] 按照这种相同方法，但是采用适合的取代的胍衍生物，制备下列化合物，正如表VII所报道的：
[0627] 表VII
[0628]
[0629]
[0630]
[0631]
[0632] 实施例17
[0633] 步骤8.8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B13-X00-M03(C01)-D01]
[0634]
[0635] 将6-[(二甲氨基)亚甲基]-1，4，4-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(0.50g，1.6mmol)与N-[3-氯-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胍(0.48g，1.8mmol)的无水二甲基甲酰胺溶液加热至100℃，在该温度下保持37小时。冷却后，将混合物用水(50mL)稀释，过滤收集所得沉淀，干燥，得到标题化合物(0.72g，85％收率)，为黄色固体。
[0636] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(m，9H)2.75(s，2H)2.84(s，3H)3.33(m，8H)4.32(q，J7.07Hz，2H)4.37(s，3H)7.20(d，J8.78Hz，1H)7.57(dd，J8.84，2.50Hz，
1H)8.01(d，J2.44Hz，1H)8.44(s，1H)9.68(s，1H).
1H)8.01(d，J2.44Hz，1H)8.44(s，1H)9.68(s，1H).
[0637] 按照这种方法操作，并且考虑到当胍衍生物可以盐的形式得到时，采用化学计算量的碳酸钾，制备下列化合物：
[0638] 1，4，4-三甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B12-X00-M03(C01)-D01]
[0639] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J7.13Hz，3H)1.34(s，6H)2.24(s，3H)2.46(s，4H)2.75(s，2H)2.84(t，J4.63Hz，4H)4.32(q，J7 11Hz，2H)4.34(s，3H)7.54(d，J8 78Hz，1H)7.93(dd，J8.84，2.50Hz，1H)8.06(d，J2.44Hz，1H)8.45(s，1H)9.78(s，1H)； [0640] 8-苯胺基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B04-X00-M03(C01)-D01]
[0641] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(m，9H)2.74(s，2H)4.32(q，J7.15Hz，2H)4.36(s，3H)6.98(tt，J7.36，1.07，1.04Hz，1H)7.31(dd，J8.47，7.38Hz，2H)7.71(dd，J8.60，0.91Hz，2H)8.42(s，1H)9.54(s，1H)；
[0642] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B10-X00-M03(C01)-D01]
[0643] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.33(s，6H)2.27(s，3H)2.52(m， 4H)2.71(s，2H)3.03-3.15(m，4H)4.32(q，J＝7.07Hz，2H)4.33(s，3H)6.9(d， J＝9.02Hz，2H)7.53(d，J＝9.02Hz，2H)8.35(s，1H)9.28(s，1H)；
[0644] 8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B00-X00-M03(C01)-D01]
[0645] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.31(s，6H)2.64(s，2H)4.3(q，J＝7.07Hz，2H)4.33(s，3H)6.61(s，2H)8.18(s，1H).
[0646] 实施例18
[0647] 8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-1，5，5-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B13-X00-M02(C01)-D01]
[0648]
[0649] 将6-(羟基亚甲基)-1，5，5-三甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(400mg，1.44mmol)与N-[3-氯-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胍(424mg，1.58mmol)的无水二甲基甲酰胺(5mL)溶液在100℃下加热3小时。冷却后，将反应混合物倒入盐水(50mL)中，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)。收集萃取液，经Na2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过硅胶快速色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇9∶1洗脱，得到纯的标题化合物(240mg，
33％收率)。
33％收率)。
[0650] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(m，9H)2.27(s，3H)2.52(m，4H)2.92(s，2H)2.95(t，J4.63Hz，4H)4.31(q，J7.07Hz，2H)4.39(s，3H)7.14(d，J8.78Hz，1H)7.52(dd，J8.78，2.44Hz，1H)7.98(d，J2.44Hz，1H)8.54(s，1H)9.63(s，1H).
[0651] 按照这种方法操作，并且考虑到当胍衍生物可用盐的形式时采用化学计算量的碳酸钾，制备下列化合物：
[0652] 1，5，5-三甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B12-X00-M02(C01)-D01]
[0653] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(m，9H)2.27(s，3H)2.52(m，4H)2.86(t，J4.51Hz，4H)2.93(s，2H)4.32(q，J7.15Hz，2H)4.37(s，3H)7.54(d，J 8.66Hz，1H)7.93(dd，J8.78，2.56Hz，1H)8.09(d，J2.44Hz，1H)8.56(s，1H)9.81(s，1H)；
[0654] 8-苯胺基-1，5，5-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B04-X00-M02(C01)-D01]
[0655] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(m，9H)2.93(s，2H)4.31(q，J7.15Hz，2H)4.38(s，3H)6.98(tt，J7.36，1.07，1.04Hz，1H)7.32(dd，J8.47，7.50Hz，2H)7.72(dd，J8.60，1.04Hz，2H)8.53(s，1H)9.57(s，1H)；
[0656] 1，5，5-三甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基]氨基}-4，5-二氢-IH-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B10-X00-M02(C01)-D01]
[0657] 1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.30(s，6H)1.34(t，J ＝ 7.07Hz，3H)2.25(s，3H)2.4(m，4H)2.91(s，2H)3.09(m，4H)4.31(q，J ＝ 7.19Hz，2H)4.35(s，3H)6.92(d，J ＝
9.29Hz，2H)7.52(d，J＝9.29Hz，2H)8.46(s，1H)9.30(s，1H)；
9.29Hz，2H)7.52(d，J＝9.29Hz，2H)8.46(s，1H)9.30(s，1H)；
[0658] 1，5，5-三甲基-8-氨基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B00-X00-M02(C01)-D01]
[0659] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.25(s，6H)1.32(t，J ＝ 7.13Hz，3H)2.86(s，2H)4.30(q， J＝7.07Hz，2H)4.35(s，3H)6.61(s，2H)8.29(s，1H).
[0660] 实施例19
[0661] 8-(1-乙酰基-哌啶-4-基)氨基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B91-X00-M00(C01)-D01]
[0662]
[0663] 向5.187g(19mmol)8-氨基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯的无水二甲基甲酰胺(120mL)悬液加入1-乙酰基-4-哌啶酮(4.7mL，38mmol)、CF3COOH(10mL，128mmol)和NaBH(OAc)3(8.862g，42mmol)。18小时后，向混合物滴加NaOH0.33N(800mL，264mmol)。过滤沉淀，用水洗涤，在烘箱中干燥至干，得到5.3g(70％收率)标题化合物。
[0664] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 1.34(t，J7.07Hz，3H)1.47(m，2H)1.95(m，2H)2.02(s，3H)2.73(m，1H)2.77(m，2H)3.17(m，1H)3.83(m，1H)3.95(m，1H)4.30(q，J7.07Hz，2H)4.31(m，1H)4.33(s，3H)7.14(m，1H)8.24(s，1H)
[0665] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[0666] 表VIII
[0667]
[0668]
[0669]
[0670]
[0671] 实施例20
[0672] 8-甲氧基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B67-X03-M00(C01)-D01]
[0673]
[0674] 将2.0g(7.2mmo l)6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于200mL乙腈，加入17.4g(70.6mmol)硫酸甲基异脲(methylisourea sulfate)和10.0g(72.4mmol)碳酸钾。将反应混合物在回流下搅拌16小时。然后蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩。经过硅胶柱色谱处理(洗脱剂：二氯甲烷)后，得到1.7g产物(86％收率)。 [0675] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J7.07Hz，3H)2.98(m，4H)3.97(s，
3H)4.31(q，J7.07Hz，2H)4.34(s，3H)8.54(s，1H).
3H)4.31(q，J7.07Hz，2H)4.34(s，3H)8.54(s，1H).
[0676] 实施例21
[0677] 8-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B00-X03-M00(C01)-D01]
[0678]
[0679] 将1.5g(5.2mmol)8-甲氧基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于90mL乙腈，加入1.6g(10.6mmol)碘化钠和1.5mL三甲代甲硅烷基氯。
在氮气氛和室温下搅拌一天后，蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷/甲醇4/1混合物，用饱和Na2S2O3水溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。使残余物从甲醇中结晶，得到1.1g标题化合物(78％收率)。
在氮气氛和室温下搅拌一天后，蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷/甲醇4/1混合物，用饱和Na2S2O3水溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。使残余物从甲醇中结晶，得到1.1g标题化合物(78％收率)。
[0680] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J7.07Hz，3H)2.84(m，4H)4.31(q，J7.07Hz，2H)4.29(s，3H)7.87(s，1H)11.70(s，1H).
[0681] 实施例22
[0682] 1-甲基-8-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B66-X03-M00(C01)-D01]
[0683]
[0684] 将0.60g(2.19mmol)8-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯和0.31mL(2.19mmol)三乙胺溶于60mL二氯甲烷，在-78℃下搅拌5小时；
然后加入0.72mL(2.19mmol)三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)。将反应物搅拌过夜，恢复至室温，用含水NaHCO3洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。残余物用二乙醚/丙酮研制，过滤收集产物，得到0.60g(67％收率)标题化合物。
然后加入0.72mL(2.19mmol)三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)。将反应物搅拌过夜，恢复至室温，用含水NaHCO3洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。残余物用二乙醚/丙酮研制，过滤收集产物，得到0.60g(67％收率)标题化合物。
[0685] 1H NMR (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J7.13Hz，3H)3.09(s，4H)4.28(s，3H)4.32(q，J7.11Hz，2H)8.86(s，1H).
[0686] 实施例23
[0687] 8-{[1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H- 吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B97-X00-M00(C01)-D01]
[0688]
[0689] 将1.5g(5.2mmo l)8-甲氧基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于90mL乙腈，加入1.6g(10.6mmo )碘化钠和1.5mL三甲代甲硅烷基氯。在氮气氛和室温下搅拌一天后，蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷/甲醇4/1混合物中，用饱和Na2S2O3水溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。使残余物从甲醇中结晶，得到1.1g标题化合物(78％收率)。
1
1
[0690] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J7.07Hz，3H)2.84(m，4H)4.31(q，J7.07Hz，2H)4.29(s，3H)7.87(s，1H)11.70(s，1H).
[0691] 实施例22
[0692] 1-甲基-8-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B66-X03-M00(C01)-D01]
[0693]
[0694] 将0.60g(2.19mmol)8-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯和0.31mL(2.19mmol)三乙胺溶于60mL二氯甲烷，在-78℃下搅拌5小时；然后加入0.72mL(2.19mmol)三氟甲磺酸酐。将反应搅拌过夜，恢复至室温，用含水NaHCO3洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。残余物用二乙醚/丙酮研制，过滤收集产物，得到
0.60g(67％收率)标题化合物。
0.60g(67％收率)标题化合物。
[0695] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J7.13Hz，3H)3.09(s，4H)4.28(s，3H)4.32(q，J7.11Hz，2H)8.86(s，1H).
[0696] 实施例23
[0697] 8-{[1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B97-X00-M00(C01)-D01]
[0698]
[0699] 向1.5g(3.7mmol)1-甲基-8-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯的150mL无水二 烷溶液加入756mg(4.1mmol)3-氨基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后在减压下除去溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，蒸发。用二乙醚研制后过滤收集到1.2g(88％收率)标题化合物。
[0700] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.38-1.44((m，9H)1.81-1.99(m，1H)2.09-2.23(m，1H)2.79(t，J ＝ 7.68Hz，2H)2.95(t，J ＝ 7.80Hz，
2H)3.13-3.66(m，4H)4.30(q，J ＝ 7.07Hz，2H)4.32-4.41(m，1H)4.34(s，3H)7.40(s，
1H)8.27(s，1H)
2H)3.13-3.66(m，4H)4.30(q，J ＝ 7.07Hz，2H)4.32-4.41(m，1H)4.34(s，3H)7.40(s，
1H)8.27(s，1H)
[0701] 类似地，但是采用适合的氨基衍生物，制备下列化合物：
[0702] 8-[(1-苄基吡咯烷-3-基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B98-X00-M00(C01)-D01]
[0703] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，3H，J 7.07Hz)2.21and 1.79(2m，2H)2.51and 2.69(2m，4H)2.93and 2.74(2t，4H，J 7.68Hz)4.30(m，5H)7.33(m，6H)8.23(s，
1H).
1H).
[0704] 实施例24
[0705] 8-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B00-X00-M00(C01)-D03] [0706]
[0707] 将2.5g8-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(9.16mmol)溶于40mL甲醇、40mL二甲基甲酰胺与50mL NH4OH 30％混合物。将混合物在65℃下维持搅拌一天。然后蒸发溶剂至干，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。粗产物用二乙醚研制，过滤收集产物(50％收率)。
[0708] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.68 和 2.90(2m，4H)4.28(s，3H)6.50(bs，2H)7.13-7.42(bs，2H)8.15(s，1H).
[0709] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0710] 表IX
[0711]
[0712]
[0713]
[0714]
[0715]
[0716] 实施例25
[0717] 1-甲基-8-[(苯基乙酰基)氨基}-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B05-X01-M00(C01)-D03]
[0718]
[0719] 将0.40g(1.47mmol)8-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺悬浮在20mL四氢呋喃中，加入5mL吡啶和0.42mL(3.22mmol)苯乙酰氯。将反应混合物在室温下搅拌16小时。蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3、再用水洗涤。经无水Na2SO4干燥后，在减压下除去溶剂，粗产物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：环己烷/丙酮)，得到0.35mg标题化合物(60％收率)。
[0720] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 2.62-3.02(2m，4H)3.76(m，2H)4.3(s，3H)7.00-7.50(m，7H)8.50(s，1H)10.80(bs，1H).
[0721] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0722] 8-(苯甲酰氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B04-X01-M00(C01)-D03]
[0723] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 2.87-3.04(2m，4H)4.33(s，3H)7.20-7.46(bs，2H)7.47-7.53(m，3H)7.90-8.00(m，2H)8.60(s，1H)10.97(m，1H).
[0724] 实施例26
[0725] 8-[(氨基羰基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B00-X02-M00(C01)-D01]
[0726]
[0727] 将1.00g(3.7mmol)8-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于50mL吡啶，加入1mL(8.0mmol)三氯乙酰异氰酸酯。将混合物在室温下搅拌过夜。然后在减压下蒸发溶剂，将残余物用50mL甲醇处理。搅拌2小时后，除去溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用稀氢氧化铵溶液洗涤。经无水Na2SO4干燥后，蒸发有机层至干，残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/丙酮4/1)，得到0.40g(34％收率)标题化合物。 [0728] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 1.28(t，J7.07Hz，3H)2.8-3.0(2m，4H)4.19-4.34(1s和1q，J7.07Hz，3H)7.04(bs，2H)8.44(bs，1H)9.91(bs，1H). [0729] 实施例27
[0730] 8-{[(乙氨基)羰基]氨基}-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B03-X02-M00(C01)-D01]
[0731]
[0732] 在0℃搅拌下，向18mg(0.44mmol)氢化钠60％矿物油分散体(0.37mmol)的无水二甲基甲酰胺悬液滴加100mg8-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(0.37mmol)在5mL相同溶剂中的溶液。5分钟后，向混合物加入0.070mL(0.88mmol)异氰酸乙酯，使反应物恢复至室温。8小时后，在减压下蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。经Na2SO4干燥后，除去溶剂，产物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/丙酮)，得到64mg(50％收率)标题化合物。
[0733] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)δppm 1.10(t，J7.20Hz，3H)1.29(t，J7.07Hz，3H)2.76-3.04(2m，4H)3.12(m，2H)4.21(q，J7.07Hz，2H)4.32(s，3H)8.45(m，1H)8.71(t，
1H)9.70(bs，1H).
1H)9.70(bs，1H).
[0734] 实施例28
[0735] 8-[(氨基羰基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B00-X02-M00(C01)-D03]
[0736]
[0737] 在封闭的瓶子中，将0.20g(0.63mmol)8-[(氨基羰基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯在15mL甲醇/二甲基甲酰胺/氢氧化铵30％1/1/1混合物中的悬液在65℃下搅拌48小时。然后在减压下蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷/甲醇9/1混合物，用水洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥，蒸发至干。产物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/丙酮/甲醇)，得到0.09g(50％收率)标题化合物。
[0738] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)，δppm 2.91-3.09(m，4H)3.81(s，3H)6.47(m，3H)7.83(bs，2H)8.58(m，1H).
[0739] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[0740] 8-{[(乙氨基)羰基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B03-X02-M00(C01)-D 03]
[0741] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)，δppm 1.10(t，J7.19Hz，3H)2.82(t，J7.62Hz，2H)2.97(t，J7.74Hz，2H)3.23(m，2H)4.28(s，3H)7.24(s，1H)7.45(s，1H)8.42(s，
1H)8.75(t，J5.61Hz，1H)9.67(s，1H).
1H)8.75(t，J5.61Hz，1H)9.67(s，1H).
[0742] 实施例29
[0743] 8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[0744]
[0745] 维持在惰性氩气氛下，向充分搅拌着的温热的乙基8-氨基-1-甲 基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(8.8g，0.032mol)的二甲氧基乙烷(1.2L)悬液按顺序加入碘化铯(9.13g，0.035mol)、重升华碘(4.45g，0.018mol)、碘化铜(2.01g，0.01mol)和亚硝酸异戊酯(7.00mL，6.14g，0.052mol)。将反应混合物在65-70℃下剧烈搅拌18小时。在冰水浴中冷却后，滤出固体，将滤液用二氯甲烷(2.0L)稀释，用30％氢氧化铵(150mL)、硫代硫酸钠(300mL)、盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥。浓缩至二甲氧基乙烷体积约100mL，粗的8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯沉淀出来；然后过滤，用二甲氧基乙烷洗涤。经过硅胶快速色谱处理(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇
98∶2)，得到5.69g标题化合物(46％收率)。
98∶2)，得到5.69g标题化合物(46％收率)。
[0746] 1H NMR(400MHz)，DMSO-d6)，δppm 1.28(t，J7.07Hz，3H)2.81-3.07(2t，J8.90Hz，4H)4.24(s，3H)4.27(q，J7.07Hz，2H)8.5(bs，1H).
[0747] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0748] 8-碘-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯 [0749] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)1.3(s，6H)2.8(s，2H)4.3(s，3H)4.3(q，J7.1Hz，2H)8.5(s，1H)；
[0750] 8-碘-1，5，5-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯 [0751] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J ＝ 7.19Hz，3H)1.32(s，6H)2.96(s，2H)4.31(q，J＝7.07Hz，2H)4.28(s，3H)8.58(s，1H)；
[0752] 1-(3，3-二甲基丁基)-8-碘-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯；
[0753] 2-(3，3-二甲基丁基)-8-碘-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯.
[0754] 实施例30
[0755] 8-(环戊氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B73-X00-M00(C01)-D01]
[0756]
[0757] 将8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(0.5g，1.3mmol)和环戊胺(0.65mL，6.5mmol)在100℃氮下加热3小时。在减压下浓缩混合物，残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/环己烷70/30)，得到0.24g 8-(环戊氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸酯(54％收率)。
[0758] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(t，J7.13Hz，3H)1.54(m，4H)1.70(m，2H)1.94(m，2H)2.77(m，2H)2.94(t，J7.74Hz，2H)4.17(m，1H)4.30(q，J7.07Hz，2H)4.35(s，
3H)7.11(d，J6.34Hz，1H)8.22(s，1H)
3H)7.11(d，J6.34Hz，1H)8.22(s，1H)
[0759] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0760] 8-{[1-(乙氧羰基)哌啶-4-基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸酯[B89-X00-M00(C01)-D01]
[0761] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.20(t，J7.07Hz，3H)1.32(t，J7.13Hz，3H)1.41(m，2H)1.92(dd，J12.62，2.99Hz，2H)2.89(m，6H)3.94(m，3H)4.05(q，J7.07Hz，
2H)4.30(q，J7.19Hz，2H)4.33(s，3H)7.13(d，J 5.85Hz，1H)8.24(s，1H)；
2H)4.30(q，J7.19Hz，2H)4.33(s，3H)7.13(d，J 5.85Hz，1H)8.24(s，1H)；
[0762] B27-X00-M00(C03)-D01
[0763] B27-X00-M04(C03)-D01
[0764] 实施例31
[0765] 8-(环戊氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾[B73-X00-M00(C01)-D02]
[0766]
[0767] 将8-(环戊氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(230mg，0.67mmol)悬浮在无水乙醇(5mL)中，在回流温度下用1.5M氢氧化钾的乙醇溶液(1.33mL，3eq.)处理1.5小时。在冰浴中冷却后，过滤收集所得沉淀，得到标题化合物(193mg，82％收率)，为结晶性固体。1
[0768] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.61(m，6H)1.94(m，2H)2.67(m，2H)2.90(m，2H)4.16(m，1H)4.21(s，3H)6.90(d，J6.83Hz，1H)8.12(s，1H)
[0769] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[0770] 表X
[0771]
[0772] 实施例32
[0773] 8-(环戊氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-甲酰胺[B73-X00-M00(C01)-D03]
[0774]
[0775] 将8-(环戊氨基)-1甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾(180mg，0.51mmol)的无水二甲基甲酰胺(3.0mL)与无水四氢呋喃(3.0mL)悬液用N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.175mL，2eq.)和N-乙基-N′，N′-二异丙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)(195mg，2eq.)处理。然后将混合物冷却至0℃，用1H-1，2，3-苯并三唑-1-酸铵(137mg，2eq.)处理。5分钟后，将反应升温至室温，在这种温度下保持过夜。将反应物用水稀释，过滤收集所得沉淀，得到标题化合物(143mg，90％收率)。
[0776] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.65(m，6H)1.94(m，2H)2.73(m，2H)2.95(t，J7.62Hz，2H)4.17(m，1H)4.32(s，3H)7.08(d，J6.83Hz，1H)7.23(s，1H)7.43(s，1H)8.20(s，1H)
[0777] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[0778] 表XI
[0779]
[0780]
[0781]
[0782]
[0783]
[0784]
[0785] 下表XII中，参见本发明一些代表性化合物的HPLC/质谱数据。
[0786] 表XII
[0787]
[0788]
[0789]
[0790] 实施例33
[0791] 1-甲基-8-(吡咯烷-3-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B99-X00-M00(C01)-D03]
[0792]
[0793] 将110mg(0.27mmol)8-{[1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯在二氯甲烷-三氟乙酸9/1混合物中的溶液在室温下搅拌6小时。在真空中除去溶剂，将所得油溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。残余物用二乙醚研制，得到83mg(60％收率)标题化合物。
[0794] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.98-2.11(m，1H)2.22(s，1H)2.77(t，J＝7.62Hz，2H)2.92-3.02(m，2H)3.14-3.55(m，4H)4.31(s，3H)4.44-4.57(m，1H)7.27(s，2H)8.29(s，
1H)8.76(s，1H)
1H)8.76(s，1H)
[0795] 类似地，制备下列化合物：
[0796] N，1-二甲基-8-(哌啶-4-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B79-X00-M00(C01)-D03]
[0797] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.65-1.82(m，2H)2.05-2.16(m，2H)2.75(d，J＝4.76Hz，3H)2.75-2.80(m，2H)2.97(t，J ＝ 7.68Hz，2H)3.01-3.09(m，，2H)3.27-3.49(m，
2H)3.93-4.10(m，1H)4.31(s，3H)7.59(s，1H)8.07(q，J ＝ 4.47Hz，1H)8.26(s，
1H)8.44-8.63(m，1H)8.69-8.90(m，1H)
2H)3.93-4.10(m，1H)4.31(s，3H)7.59(s，1H)8.07(q，J ＝ 4.47Hz，1H)8.26(s，
1H)8.44-8.63(m，1H)8.69-8.90(m，1H)
[0798] 实施例34
[0799] 1-甲基-8-(哌啶-4-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B79-X00-M00(C01)-D03]
[0800]
[0801] 向1g(2.4mmol)8-[(1-苄基哌啶-4-基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺的90mL无水乙醇溶液加入1g披钯碳10％w和30mL 98％甲酸。将所得混合物在60℃下搅拌12小时。然后通过C盐过滤催化剂，蒸发滤液。粗产物经过硅胶柱色谱纯化，用CH2Cl2-MeOH-Et3N混合物洗脱，得到350mg(45％收率)标题化合物。 [0802] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.65-1.77(m，2H)2.04-2.17(m，2H)2.75(t，J＝ 7.56Hz，2H)2.96(t，J ＝ 7.56Hz，2H)2.99-3.09(m，2H)3.28-3.44(m，2H)3.93-4.08(m，
1H)4.31(s，3H)7.25(s，1H)7.31(d，J＝7.56Hz，1H)7.43(s，1H)8.25(s，1H). [0803] 实施例35
1H)4.31(s，3H)7.25(s，1H)7.31(d，J＝7.56Hz，1H)7.43(s，1H)8.25(s，1H). [0803] 实施例35
[0804] 8-[(1-甲酰基哌啶-4-基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B169-X00-M00(C01)-D03]
[0805]
[0806] 将500mg(1.53mmol)1-甲基-8-(哌啶-4-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺溶于10mL二甲基甲酰胺，其中含有253mg(1.68mmol)叔丁基二甲基甲硅烷基氯、0.26mL三乙胺和7mg 4-二甲氨基吡啶(0.06mmol)，将混合物在35-40℃氮下搅拌25小时。然后使混合物在二氯甲烷与水之间分配，分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。在真空中蒸发挥发物，得到435mg(80％收率)标题化合物。
[0807] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.25-1.48(m，2H)1.88-2.03(m，2H)2.74(t，J＝ 7.68Hz，2H)2.77-2.87(m，1H)2.95(t，J ＝ 7.62Hz，2H)3.10-3.20(m，1H)3.66-3.79(m，1H)3.93-4.05(m，1H)4.09-4.17(m，1H)4.31(s，3H)7.13(d，J ＝ 6.83Hz，1H)7.23(s，
1H)7.44(s，1H)8.01(s，1H)8.23(s，1H).
1H)7.44(s，1H)8.01(s，1H)8.23(s，1H).
[0808] 实施例36
[0809] 8-(环戊氨基)-1-哌啶-4-基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B73-X00-M00(C18)-D03]
[0810]
[0811] 将500mg(1.1mmol)1-(1-苄基哌啶-4-基)-8-(环戊氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺溶于50mL乙酸，加入50mgPtO2。使混合物在60psi和室温下进行氢化。12小时后，通过C盐过滤催化剂，蒸发滤液。将残余物重新溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂。用二乙醚研制后过滤收集标题化合物(80％收率)。
[0812] 实施例37
[0813] 8-(环戊氨基)-N-羟基-N，1-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B73-X00-M00(C01)-D142]
[0814]
[0815] 在0℃下，向400mg(1.14mmol)8-(环戊氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾的80mL二氯甲烷与几滴二甲基甲酰胺悬液加入0.11mL(0.13mmol)草酰氯。将混合物在室温下搅拌6小时，然后蒸发，重新溶于无水二氯甲烷，滴加到冷却至
0℃的344mg(2.28mmol)N-甲基羟胺盐酸盐与0.33mL三乙胺在20mL相同溶剂中的溶液中。
4小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发至干。将残余物用二乙醚研制，过滤，得到780mg(60％收率)标题化合物。
1
0℃的344mg(2.28mmol)N-甲基羟胺盐酸盐与0.33mL三乙胺在20mL相同溶剂中的溶液中。
4小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发至干。将残余物用二乙醚研制，过滤，得到780mg(60％收率)标题化合物。
1
[0816] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.46-1.61(m，4H)1.64-1.78(m，2H)1.87-2.01(m，2H)2.67-2.89(m，4H)3.35(s，3H)4.11-4.23(m，1H)4.31(s，3H)7.06(d，J ＝ 6.58Hz，
1H)8.20(s，1H)9.88(s，1H).
1H)8.20(s，1H)9.88(s，1H).
[0817] 类似地，但是采用适合的羟基氨基衍生物，制备下列化合物：
[0818] N-环己基-8-(环戊氨基)-N-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B73-X00-M00(C01)-D29]1
[0819] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm0.96-2.04(m，18H)2.67-2.81(m，4H)4.04-4.45(m，2H)4.30(s，3H)6.97-7.10(m，1H)8.20(s，1H)9.45(s，1H)；
[0820] N-苄基-8-(环戊氨基)-N-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B73-X00-M00(C01)-D28]1
[0821] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.51-1.61(m，4H)1.64-1.79(m，2H)1.87-2.00(m，2H)2.70-2.88(m，4H)4.08-4.22(m，1H)4.31(s，3H)5.01(s，2H)7.06(d，J ＝ 6.58Hz，
1H)7.22-7.43(m，5H)8.21(s，1H)9.89(s，1H).
1H)7.22-7.43(m，5H)8.21(s，1H)9.89(s，1H).
[0822] 实施例38
[0823] 8-苯胺基-N-羟基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B04-X00-M00(C01)-D05]
[0824]
[0825] 向260mg(0.81mmol)8-苯胺基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸的50mL无水二甲基甲酰胺溶液连续加入111mgN-羟基苯并三唑(0.81mmol)、0.16mL N-甲基吗啉、205mg(1.07mmol)N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐和
585mg(2.13mmol)三苯基甲基羟胺。在室温下48小时后，在减压下除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷，用水洗涤。然后将有机层经硫酸钠干燥，蒸发。将粗产物用10mL二氯甲烷-三氟乙酸混合物处理，4小时后在真空中除去挥发物。将残余物重新溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3洗涤，产物经过硅胶柱色谱纯化，用CH2Cl2-CH3COCH3 4/1洗脱，得到180mg(66％收率)标题化合物。
1
585mg(2.13mmol)三苯基甲基羟胺。在室温下48小时后，在减压下除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷，用水洗涤。然后将有机层经硫酸钠干燥，蒸发。将粗产物用10mL二氯甲烷-三氟乙酸混合物处理，4小时后在真空中除去挥发物。将残余物重新溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3洗涤，产物经过硅胶柱色谱纯化，用CH2Cl2-CH3COCH3 4/1洗脱，得到180mg(66％收率)标题化合物。
1
[0826] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.80-2.91(m，2H)2.93-3.06(m，2H)4.33(s，3H)6.97(tt，J ＝ 7.35，1.07Hz，1H)7.31(dd，J ＝ 8.47，7.38Hz，2H)7.72(dd，J＝ 8.66，
1.10Hz，2H)8.42(s，1H)8.91(s，1H)9.52(s，1H)10.93(s，1H)
1.10Hz，2H)8.42(s，1H)8.91(s，1H)9.52(s，1H)10.93(s，1H)
[0827] 实施例39
[0828] 8- 碘 -1- 甲 基 -4，5- 二 氢 -1H- 吡 唑 并 [4，3-h] 喹 唑 啉 -3- 酰 胺[B73-X00-M00(C01)-D03]
[0829]
[0830] 将1.0g(2.6mmol)8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于100mL甲醇与100mL氢氧化铵33％的混合物中。在封闭的瓶子中将溶液在60℃下搅拌4小时。收集所得沉淀，得到0.5g(54％收率)标题化合物。
[0831] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.99(m，4H)4.25(s，3H)7.31(s，1H)7.51(s，1H)8.47(s，1H)
[0832] 实施例40
[0833] 1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B90-X00-M00(C01)-D03]
[0834]
[0835] 将8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(0.10g，0.28mmol)和1-甲基哌啶-4-胺(0.19g，1.7mmol)在80℃氮下加热3小时。在减压下浓缩混合物，残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙醇/氢氧化铵90/10/1)，得到0.047mg 1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(50％收率)。
[0836] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.54(m，2H)1.91(m，2H)2.06(m，2H)2.4(s，3H)2.73(m，2H)2.83(m，2H)2.94(m，2H)3.70(m，1H)4.30(s，3H)7.01(m，1H)7.25(s，
1H)7.44(s，1H)8.29(s，1H)
1H)7.44(s，1H)8.29(s，1H)
[0837] 实施例41
[0838] [8-(环己氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B27-X00-M01(C01)-D07]和[8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B27-X00-M01(C01)-D07]
[0839]
[0840] 步骤1.6-[(二甲氨基)亚甲基]-2-乙氧基环己-2-烯-1-酮
[0841]
[0842] 将3.4g(0.02mmol)2-乙氧基环己-2-烯-1-酮溶于30mL无水二甲基甲酰胺，加入30mL(0.05mmol)二甲基甲酰胺-二甲基乙缩醛。将该溶液在60℃下搅拌2小时。然后在真空下蒸发溶剂，残余物用二乙醚研制，过滤收集，得到6.6g标题化合物(80％收率)。 [0843] 步骤2.2-(苄硫基)-8-乙氧基-5，6-二氢喹唑啉
[0844]
[0845] 向2.0g(0.01mol)6-[(二甲氨基)亚甲基]-2-乙氧基环己-2-烯-1-酮的20mL二甲基甲酰胺溶液加入2.6g S-苄基异硫脲(2eq.mol.)。将反应混合物在95℃下搅拌4小时。然后在减压下蒸发溶剂，粗产物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇9/1)，得到1.5g(50％收率)标题化合物。
[0846] 步骤3.2-(苄硫基)-6，7-二氢喹唑啉-8(5H)-酮
[0847]
[0848] 将1.5g(5mmol)2-(苄硫基)-8-乙氧基-5，6-二氢喹唑啉溶于50mL乙酸和3mL水。将溶液在回流温度下搅拌4小时。然后在真空下除去溶剂，使残余物在二氯甲烷与NaHCO3饱和溶液之间分配。将有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩，得到1.0g(74％收率)标题化合物。
[0849] 步骤4.1-[2-(苄硫基)-8-氧代-5，6，7，8-四氢喹唑啉-7-基]-2-苯基乙烷-1，2-二酮
[0850]
[0851] 向冷却至-50℃的0.22g(0.81mmol)2-(苄硫基)-6，7-二氢喹唑啉-8(5H)-酮的5mL无水四氢呋喃溶液加入0.10g氢化钠60％矿物油分散体。将所得悬液在相同温度下维持30分钟，然后加入0.59mLα-氧代苯乙酸乙酯(PhCOCOOEt)，使反应混合物恢复至室温。
16小时后，使混合物在水与乙酸乙酯之间分配，将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯7/3)，得到0.22g(68％收率)标题化合物。 [0852] 步骤5.[8-(苄硫基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B05-X04-M00(C01)-D07]
16小时后，使混合物在水与乙酸乙酯之间分配，将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯7/3)，得到0.22g(68％收率)标题化合物。 [0852] 步骤5.[8-(苄硫基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B05-X04-M00(C01)-D07]
[0853]
[0854] 将0.22g(0.55mmol)1-[2-(苄硫基)-8-氧代-5，6，7，8-四氢喹唑啉-7-基]-2-苯基乙烷-1，2-二酮溶于6mL乙醇，加入0.03g(0.66mmol)甲基肼。将反应混合物在回流温度下维持搅拌5小时。然后在减压下除去溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩，得到0.16g标题化合物(70％收率)。
[0855] 步骤6.[8-(苄磺酰基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B05-X05-M00(C01)-D07]
[0856]
[0857] 向70mg(0.17mmol)[8-(苄硫基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并 [4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮的3mL二氯甲烷溶液加入115mg(0.34mmol)间-氯过苯甲酸。将反应混合物维持在室温下达1小时。溶液然后用含水NaHCO3洗涤，将有机层经Na2SO4干燥，在真空中蒸发，得到70mg(93％收率)标题化合物。
[0858] 步骤7.[8-(环己氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B27-X00-M00(C01)-D07]和[8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮[B27-X00-M01(C01)-D07]
[0859]
[0860] 将83mg(0.19mmol)[8-(苄磺酰基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮溶于3mL二甲基亚砜和环己胺(0.033mL，0.29mmol)，将溶液在100℃下加热16小时，同时搅拌。然后在减压下除去溶剂，粗产物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/丙酮)，得到31mg[8-(环己氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，
3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮和15mg[8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮(70％总收率)。
3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮和15mg[8-(环己氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-基](苯基)甲酮(70％总收率)。
[0861] B27-X00-M00(C01)-D071
[0862] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.00-2.00(5m，11H)2.61(m，2H)2.66(m，2H)3.80(s，3H)7.17(bs，1H)7.34-7.37(m，3H)7.41-7.51(m，3H)8.27(s，1H)； [0863] B27-X00-M01(C01)-D07
1
1
[0864] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.20-2.20(5m，11H)4.02(bs，3H)6.69(m，1H)7.37-7.58(2m，6H)7.93(bs，1H)8.83(bs，1H).
[0865] 实施例42
[0866] 1-甲基-8-(吡啶-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉 -3-羧酸乙酯[B15-X00-M00(C01)-D01]
[0867]
[0868] 将乙酸钯[Pd(OAc)2](15.3mg，0.07mmol，10％)、(±)-BINAP(42.6mg，0.07mmol，10％)和二甲基甲酰胺(12mL)装入用氩冲洗过的圆底烧瓶。将混合物在氩下搅拌30分钟。然后加入2-氨基吡啶(70.4mg，0.75mmol)、8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，
3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(250mg，0.65mmol)、碳酸钾(1.89g，13.67mmol)和二甲基甲酰胺(5mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在氩下在油浴中加热至120℃，同时充分搅拌18小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中，用二氯甲烷萃取。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，将粗制固体溶于二乙醚，过滤，用二乙醚洗涤，经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)，得到145mg(63.8％收率)标题化合物。
3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(250mg，0.65mmol)、碳酸钾(1.89g，13.67mmol)和二甲基甲酰胺(5mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在氩下在油浴中加热至120℃，同时充分搅拌18小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中，用二氯甲烷萃取。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，将粗制固体溶于二乙醚，过滤，用二乙醚洗涤，经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)，得到145mg(63.8％收率)标题化合物。
[0869] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)3.0(m，4H)4.3(q，J7.2Hz，2H)4.4(s，3H)7.0(ddd，J7.2，4.9，1.0Hz，1H)7.8(ddd，1H)8.2(d，J 8.4Hz，1H)8.3(ddd，J4.8，2.0，0.9Hz，1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H).
[0870] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[0871] 8-[(3，5-二氯苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B14-X00-M00(C01)D01]
[0872] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)4.3(q，J7.2Hz，2H)4.4(s，3H)7.1(m，1H)7.4(m，2H)8.5(s，1H)10(s，1H)；
[0873] 8-{[3-甲氧基-5-(三氟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B16-X00-M00(C01)D01]
[0874] 1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)3.8(s，3H)4.3(q，J7.2Hz，2H)4.4(s，3H)6.8(s，1H)7.6(s，1H)7.8(s，1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H)； [0875] 8-[(4-羟基苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B18-X00-M00(C01)D01]
[0876] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)4.3(m，5H)6.7(d，J8.8Hz，2H)7.4(d，J8.9Hz，2H)8.3(s，1H)9.1(s，1H)9.2(s，1H)；
[0877] 8-(1H-咪唑-1-基氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B21-X00-M00(C01)D01]
[0878] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(m，3H)2.9(m，4H)4.3(d，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)7.1(s，1H)7.6(d，J8.9Hz，2H)7.7(s，1H)7.9(d，J8.9Hz，2H)8.2(s，1H)8.5(s，1H)9.7(s，
1H)；
1H)；
[0879] 1-甲基-8-(1，3-噻唑-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B86-X00-M00(C01)D01]
[0880] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(m，3H)3.0(m，4H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)7.1(d，J3.5Hz，1H)7.5(d，J3.7Hz，1H)8.6(s，1H)11.6(s，1H)；
[0881] 1-甲基-8-(1H-吡唑-3-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B77-X00-M00(C01)D01]
[0882] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)6.5(s，1H)7.6(s，1H)8.4(s，1H)9.6(s，1H)12.2(s，1H)；
[0883] 1-甲基-8-[(4-吗啉-4-基苯基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B19-X00-M00(C01)D01]
[0884] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)3.1(m，4H)3.8(m，4H)4.3(q，J7.2Hz，2H)4.3(s，3H)6.9(d，J9.0Hz，2H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.3(s，
1H)；
1H)；
[0885] 8-{[4-(乙氧羰基)苯基]氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B87-X00-M00(C01)D01]
[0886] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，6H)3.0(m，4H)4.3(m，4H)4.4(s，3H)7.9(m，4H)8.5(s，1H)10.0(s，1H)；
[0887] 8-{[4-(N，N-二乙氨基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B17-X00-M00(C01)-D01]
[0888] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.1(t，J7.0Hz，6H)1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)3.3(m，4H)4.3(q，J7.1，7.1Hz，2H)4.3(s，3H)6.7(d，J9.1Hz，2H)7.4(d，J9.0Hz，
2H)8.3(s，1H)9.1(s，1H)；
2H)8.3(s，1H)9.1(s，1H)；
[0889] 8-{[4-(乙酰氨基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B22-X00-M00(C01)-D01]
[0890] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.0(s，3H)2.9(m，4H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)7.5(d，J9.0Hz，2H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.4(s，1H)9.8(s，1H)；
[0891] 8-{[3-(羟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B11-X00-M00(C01)-D01]
[0892] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)4.5(s，2H)6.9(m，1H)7.3(t，J7.8Hz，1H)7.5(m，1H)7.8(s，1H)8.4(s，
1-H)9.5(s，1H)；
1-H)9.5(s，1H)；
[0893] 8-[(4-甲氧基苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B68-X00-M00(C01)-D01]
[0894] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)3.7(s，3H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.3(s，3H)6.9(d，J9.0Hz，2H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.3(s，1H)； [0895] 8-{[(4-溴-3-氯)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B88-X00-M00(C01)-D01]
[0896] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.3(t，J7.1Hz，3H)2.9(m，4H)4.3(q，J7.1Hz，2H)4.4(s，3H)7.6(dd，J8.8，2.4Hz，1H)7.7(d，J8.8Hz，1H)8.2(d，J2.4Hz，1H)8.5(s，
1H)9.9(s，1H)；
1H)9.9(s，1H)；
[0897] 8-{[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B115-X00-M00(C01)-D01]
[0898] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm1.33(t，J ＝ 7.1Hz，3H)2.95(m，4H)4.31(q，J ＝7.2Hz，2H)4.39(s，3H)7.49(s，1H)8.10(s，1H)8.36(s，1H)8.54(s，1H)10.11(s，1H)； [0899] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-(羟甲基)苯基氨基]-1-甲基-4，5- 二
氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B116-X00-M00(C01)-D01]
氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B116-X00-M00(C01)-D01]
[0900] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J＝7.07Hz，3H)2.28(s，3H)2.42-2.61(m，4H)2.79-2.88(m，6H)2.98(t，J＝7.80Hz，2H)4.31(q，J＝7.15Hz，2H)4.36(s，3H)4.56(d，J＝5.24Hz，2H)5.06(t，J＝5.30Hz，1H)7.03(d，J＝8.66Hz，1H)7.50(dd，1H)7.81(d，J＝
2.68Hz，1H)8.39(s，1H)9.42(s，1H)；
2.68Hz，1H)8.39(s，1H)9.42(s，1H)；
[0901] 1-甲基-8-{[4-(吗啉-4-基甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B102-X00-M00(C01)-D01]
[0902] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J ＝ 7.13Hz，3H)2.35(s，4H)2.86(t，J＝7.62Hz，2H)2.99(t，J＝7.80Hz，2H)3.42(s，2H)3.55-3.61(m，4H)4.31(q，J＝7.07Hz，2H)4.37(s，3H)7.24(d，J＝8.41Hz，2H)7.66(d，J＝8.41Hz，2H)8.42(s，1H)9.52(s，1H)； [0903] 1-甲基-8-({4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]苯基}氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B103-X00-M00(C01)-D01]
[0904] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 132(t，3H)2.09(m，4H)2.86(m，5H)2.98(t，2H)3.37(m，5H)4.30(q，2H)4.34(s，3H)7.03(m，2H)7.61(m，2H)8.39(s，1H)9.40(s，1H)； [0905] 1-甲基-8-({3-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B104-X00-M00(C01)-D01]
[0906] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H)2.21(m，3H)2.40(m，8H)2.86(t，2H)2.99(t，2H)3.44(s，2H)4.30(q，2H)4.39(s，3H)6.91(m，1H)7.24(m，1H)7.56(m，
1H)7.75(dd，1H)8.43(m，1H)9.54(s，1H)；
1H)7.75(dd，1H)8.43(m，1H)9.54(s，1H)；
[0907] 8-{[3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B109-X00-M00(C01)-D01]
[0908] 1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H)2.28(s，3H)2.85(t，2H)2.99(m，6H)4.30(q，2H)4.37(s，3H)7.01(t，1H)7.35(dd，1H)7.64(dd，1H)8.42(m，1H)9.56(s，1H)； [0909] 8-[(4-氯苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B112-X00-M00(C01)-D01]
[0910] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H)2.86(t，2H)2.99(t，2H)4.30(q，2H)4.37(s，3H)7.38(d，2H)7.74(d，2H)8.45(s，1H)9.70(s，1H)；
[0911] 8-{[4-(羟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B114-X00-M00(C01)-D01]
[0912] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H)2.86(t，2H)2.99(t，2H)4.30(q，2H)4.37(s，3H)4.45(s，2H)7.27(d，2H)7.65(d，2H)8.42(s，1H)9.50(s，1H). [0913] 实施例43
[0914] 1-甲基-8-(吡啶-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B15-X00-M00(C01)-D03]
[0915]
[0916] 向1-甲基-8-(吡啶-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(220mg，0.63mmol)的甲醇(250mL)溶液加入33％含水氢氧化铵(100mL)，将溶液在65℃下搅拌8小时。浓缩溶液，通过抽吸过滤收集所沉淀的最终化合物，用水洗涤，从含有氢氧化钠的甲醇中结晶两次，在40℃真空下干燥。从而得到60mg标题化合物。
1
1
[0917] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.0(m，4H)4.4(s，3H)7.0(ddd，J7.2，4.9，1.0Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.8(ddd，1H)8.2(d，J8.4Hz，1H)8.3(ddd，J4.8，2.0，0.9Hz，
1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H)
1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H)
[0918] 按照相同工艺操作，制备下列化合物：
[0919] 8-[(3，5-二氯苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B14-X00-M00(C01)-D03]
[0920] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.0(m，4H)4.4(s，3H)7.1(t，J1.8Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.9(d，J1.8Hz，2H)8.5(s，1H)10.0(s，1H)；
[0921] 8-{[3-甲氧基-5-(三氟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B16-X00-M00(C01)-D03]
[0922] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)3.8(s，3H)4.3(s，3H)6.8(s，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(s，1H)7.8(s，1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H)；
[0923] 8-[(4-羟基苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B18-X00-M00(C01)-D03]
[0924] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)4.3(s，3H)6.7(d，J8.8Hz，2H)7.2(s，1H)7.4(d，J8.9Hz，2H)7.5(s，1H)8.3(s，1H)9.1(s，1H)9.2(s，1H)；
[0925] 8-{[4-(1H-咪唑-1-基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B21-X00-M00(C01)-D03]
[0926] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)4.4(s，3H)7.1(s，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(d，J8.9Hz，2H)7.7(t，J1.2Hz，1H)7.9(d，J9.0Hz，2H)8.2(s，1H)8.4(s，1H)9.7(s，
1H)；
1H)；
[0927] 1-甲基-8-(噻唑-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B86-X00-M00(C01)-D03]
[0928] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.0(m，4H)4.4(s，3H)7.1(d，J3.7Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(d，J3.7Hz，1H)7.5(s，1H)8.6(s，1H)11.8(s，1H)；
[0929] 1-甲基-8-(1H-吡唑-3-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B77-X00-M00(C01)-D03]
[0930] 1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)4.3(s，3H)6.5(bs，1H)7.25(s，1H)7.45(s，1H)7.6(bs，1H)8.4(s，1H)9.9(s，1H)；
[0931] 8-{[4-(N-吗啉代基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B19-X00-M00(C01)-D03]
[0932] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)3.1(m，4H)3.8(m，4H)4.3(s，3H)6.9(d，J9.1Hz，2H)7.2(s，1H)7.5(s，1H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.3(s，1H)； [0933] 8-{[4-(二乙氨基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B17-X00-M00(C01)-D03]
[0934] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.1(t， J7.0Hz，6H)2.9(m，4H)3.3(m，4H)4.3(s，3H)6.7(d，J9.0Hz，2H)7.2(s，1H)7.4(m，J9.0Hz，1H)7.4(d，J9.0Hz，2H)8.3(s，1H)9.1(s，
1H)；
1H)；
[0935] 8-{[4-(乙酰氨基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B22-X00-M00(C01)-D03]
[0936] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.0(s，3H)2.9(m，4H)4.3(s，3H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.5(d，J8.9Hz，2H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.4(s，1H)9.8(s，1H)； [0937] 8-{[3-(羟甲基)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B11-X00-M00(C01)-D03]
[0938] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)4.3(s，3H)4.5(s，2H)5.2(s，1H)6.9(d，J8.0Hz，1H)7.2(m，2H)7.5(s，1H)7.5(dd，J8.1，1.4Hz，1H)7.8(t，J1.8Hz，1H)8.4(s，1H)9.5(s，1H)；
[0939] 8-[(4-甲氧基苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B68-X00-M00(C01)-D03]
[0940] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)3.7(s，3H)4.3(s，3H)6.9(d，J9.1Hz，2H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(d，J9.0Hz，2H)8.4(s，1H)9.3(s，1H)；
[0941] 8-{[(4-溴-3-氯)苯基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B88-X00-M00(C01)-D03]
[0942] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)4.4(s，3H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(dd，J8.8，2.4Hz，1H)7.7(d，J8.8Hz，1H)8.2((d，J2.4Hz，1H)8.5(s，1H)9.9(s，1H)； [0943] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-(羟甲基)苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B116-X00-M00(C01)-D03]
[0944] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.29(s，3H)2.45-2.61(m，4H)2.73-2.87(m，6H)2.99(t，J ＝ 7.56Hz，2H)4.34(s，3H)4.56(d，J ＝ 5.24Hz，2H)5.0(t，J ＝ 5.37Hz，
1H)7.03(d，J＝8.66Hz，1H)7.26(s，1H)7.46(s，1H)7.50(dd，J＝8.23，2.99Hz，1H)7.83(d，J＝2.68Hz，1H)8.38(s，1H)9.40(s，1H)；
1H)7.03(d，J＝8.66Hz，1H)7.26(s，1H)7.46(s，1H)7.50(dd，J＝8.23，2.99Hz，1H)7.83(d，J＝2.68Hz，1H)8.38(s，1H)9.40(s，1H)；
[0945] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-(羟甲基)苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B116-X00-M00(C01)-D04]
[0946] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.28(s，3H)2.45-2.55(m，4H)2.75(d，J＝4.63Hz，3H)2.81(t，J ＝ 7.19Hz，2H)2.83(t，J ＝ 4.63Hz，4H)2.99(t，J ＝ 7.56Hz，2H)4.34(s，
3H)4.56(d，J＝ 5.24Hz，2H)5.05(t，J＝ 5.37Hz，1H)7.03(d，J＝ 8.54Hz，1H)7.50(d，J＝8.41，2.56Hz，1H)7.83(d，J＝2.68Hz，1H)8.07(q，J＝4.63Hz，1H)8.37(s，1H)9.40(s，
1H)；
3H)4.56(d，J＝ 5.24Hz，2H)5.05(t，J＝ 5.37Hz，1H)7.03(d，J＝ 8.54Hz，1H)7.50(d，J＝8.41，2.56Hz，1H)7.83(d，J＝2.68Hz，1H)8.07(q，J＝4.63Hz，1H)8.37(s，1H)9.40(s，
1H)；
[0947] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-(溴)苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺三盐酸盐[B117-X00-M00(C01)-D03]
[0948] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.83(m，2H)2.88(d，J ＝ 4.68Hz，3H)3.01(m，4H)3.19(m，2H)3.53(m，2H)4.37(s，3H)7.23(m，1H)7.29(s，1H)7.46(s，1H)7.63(m，
1H)8.21(m，1H)8.44(s，1H)9.67(s，1H)10.13(s，1H)；
1H)8.21(m，1H)8.44(s，1H)9.67(s，1H)10.13(s，1H)；
[0949] 8-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B104-X00-M00(C01)-D03]
[0950] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.27(s，3H)2.44(s，4H)2.78-3.03(m，4H)3.04-3.40(m，4H)3.45(s，2H)4.37(s，3H)6.90(d，J＝7.32Hz，1H)7.25(t，J＝7.68Hz，
1H)7.27(s，1H)7.46(s，1H)7.57(dd，J＝7.68，1.59Hz，1H)7.76(t，J＝1.77Hz，1H)8.42(s，
1H)9.52(s，1H)；
1H)7.27(s，1H)7.46(s，1H)7.57(dd，J＝7.68，1.59Hz，1H)7.76(t，J＝1.77Hz，1H)8.42(s，
1H)9.52(s，1H)；
[0951] 8-{[{3-羟基)-5-三氟甲基]苯基氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B118-X00-M00(C01)-D03]
[0952] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.77-3.07(m，4H)3.84(s，3H)4.35(s，3H)6.84(s，1H)7.28(s，1H)7.47(s，1H)7.57(s，1H)7.85(s，1H)8.49(s，1H)9.86(s，1H)； [0953] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，
3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B10-X00-M00(C01)-D04]
3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B10-X00-M00(C01)-D04]
[0954] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.75(d，J＝ 4.76Hz，3H)2.81(t，J ＝ 7.68Hz，2H)2.85(d，J ＝ 4.39Hz，3H)2.94-3.07(m，4H)3.11-3.25(m，2H)3.51(d，J ＝ 11.83Hz，
2H)3.73(d，J ＝ 13.66Hz，2H)4.33(s，3H)6.99(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.60(d，J ＝ 9.02Hz，
2H)8.08(q，J＝4.67Hz，1H)8.37(s，1H)9.40(s，1H)10.36(s，1H)；
2H)3.73(d，J ＝ 13.66Hz，2H)4.33(s，3H)6.99(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.60(d，J ＝ 9.02Hz，
2H)8.08(q，J＝4.67Hz，1H)8.37(s，1H)9.40(s，1H)10.36(s，1H)；
[0955] 8-苯胺基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B04-X00-M00(C01)-D04]
[0956] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.72(d，J＝ 4.76Hz，3H)2.79(t，J ＝ 7.68Hz，2H)2.97(t，J＝7.68Hz，2H)4.31(s，3H)6.94(t，J＝7.38Hz，1H)7.21-7.32(m，2H)7.68(d，J＝7.56Hz，2H)8.06(q，J＝4.35Hz，1H)8.38(s，1H)9.48(s，1H).
[0957] 实施例44
[0958] 1-甲基-8-(吡啶-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺盐酸盐
[0959]
[0960] 向1-甲基-8-(吡啶-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺在甲醇与二氯甲烷的1∶1混合物中的溶液内加入4N HCl的 烷溶液(1mL)。在室温下1小时后，在真空下除去溶剂，将固体用二乙醚研制，得到标题化合物。
[0961] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.0(m，4H)4.4(s，3H)7.3(m，2H)7.5(s，1H)7.8(d，J8.8Hz，1H)8.2(t，J7.7Hz，1H)8.4(dd，J5.9，1.0Hz，2H)8.6(s，1H)11.6(s，1H). [0962] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0963] 1-甲基-8-(噻唑-2-基氨基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺盐酸盐
[0964] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.0(m，4H)4.4(s，3H)7.1(d，J3.7Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(d，J3.7Hz，1H)7.5(s，1H)8.6(s，1H)11.8(s，1H)；
[0965] 8-[4-(N-甲基哌嗪子基)-3-氯苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺三氯水合物(trichlorohydrate)
[0966] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.1(m，15H)4.4(s，3H)7.2(d，J8.9Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(dd，J8.8，2.4Hz，1H)8.0(d，J2.6Hz，1H)8.4(s，1H)9.7(s，1H)10.5(s，
1H)；
1H)；
[0967] 8-[4-(N-甲基哌嗪子基)-3-溴苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺三氯水合物(trichlorohydrate)
[0968] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.1(m，15H)4.4(s，3H)7.2(d，J8.8Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.6(dd，J8.6，2.4Hz，1H)8.0(d，J2.6Hz，1H)8.2(s，1H)9.7(s，1H)10.5(s，
1H)；
1H)；
[0969] N-苄基-1-甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(L)-酒石酸盐
[0970] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.40(s，3H)2.70(m，4H)2.80(t，J ＝ 7.62Hz，2H)3.00(t，J ＝ 7.62Hz，2H)3.14(m，4H)4.20(s，2H)4.34(s，3H)4.43(d，J ＝ 6.34Hz，
2H)6.93(d，J＝9.15Hz，2H)7.27(m，5H)7.55(d，J＝9.02Hz，2H)8.35(s，1H)8.69(t，J＝
6.34Hz，1H)9.28(s，1H)；
2H)6.93(d，J＝9.15Hz，2H)7.27(m，5H)7.55(d，J＝9.02Hz，2H)8.35(s，1H)8.69(t，J＝
6.34Hz，1H)9.28(s，1H)；
[0971] 1-甲基-8-[(4-吗啉-4-基苯基)氨基]-N-[(1R)-1-苯基乙基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺盐酸盐
[0972] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.51(m，3H)2.97(m，4H)3.21(m，4H)3.84(m，4H)4.37(m，3H)5.15(m，1H)7.28(m，7H)7.63(m，2H)8.40(m，1H)8.44(m，1H)9.50(m，1H)； [0973] N-(3-氟苄基)-1-甲基-8-[(4-吗啉-4-基苯基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺盐酸盐
[0974] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.91(m，J ＝ 73.53Hz，4H)3.16(m，4H)3.81(m，4H)4.35(s，3H)4.43(m，2H)7.07(m，6H)7.61(m，2H).37(m，1H)8.80(m，1H)9.44(m，1H)； [0975] N-(3-氟苄基)-1-甲基-8-[(4-吗啉-4-基苯基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺甲磺酸盐
[0976] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.33(s，3H)3.00(s，4H)3.17(s，4H)3.80(s，4H)4.35(s，3H)4.43(m，2H)7.07(m，6H)7.61(m，2H)8.37(m，1H)8.80(m，1H)9.46(m，1H). [0977] 实施例45
[0978] 8-苯胺基-N-(2-羟基乙基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B04-X00-M00(C01)-D06]
[0979]
[0980] 向0.30g(0.86mmol)8-苯胺基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并 [4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯在10mL甲醇与10mL二甲基甲酰胺的混合物中的悬液加入5mL乙醇胺。在封闭的瓶子中将混合物在65℃下加热，同时搅拌。5小时后除去溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发。残余物用二乙醚研制，过滤收集产物(60％收率)。
[0981] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm：2.7-3.0(2m，4H)3.47(m，4H)4.32(s，3H)4.71(t，1H)6.94-7.67(3m，5H)7.91(t，J 5.73Hz，1H)8.38(bs，1H)9.48(bs，1H).通过类似地操作，制备下列化合物：
[0982] 8-苯胺基-N，1-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B04-X00-M00(C01)-D04]
[0983] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.72(d，J4.76Hz，3H)2.79(t，J7.68Hz，2H)2.97(t，J7.68Hz，2H)4.31(s，3H)6.94(t，J7.38Hz，1H)7.28(m，2H)7.68(d，J7.56Hz，
2H)8.06(q，J4.35Hz，1H)8.38(s，1H)9.48(s，1H).
2H)8.06(q，J4.35Hz，1H)8.38(s，1H)9.48(s，1H).
[0984] 实施例46
[0985] 8-[(4-甲氧基-3-氯苯基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B20-X00-M00(C01)-D03]
[0986]
[0987] 将Pd(OAc)2(20mg，0.09mmol，10％)、(±)-BINAP(55mg，0.09mmol，10％)和二甲基甲酰胺(15mL)装入经过氩冲洗的圆底烧瓶。将混合物在氩下搅拌30分钟。然后加入3-氯-对-茴香胺(153mg，0.97mmol)、8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(300mg，0.84mmol)、K2CO3(2.45g，17.8mmol)和二甲基甲酰胺(6mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在氩下在油浴中加热至120℃，同时充分搅拌18小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(300mL)中，用二氯甲烷萃取(5×60mL)。将有机萃取液用水洗涤(2×20mL)，经无水Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，将粗产物溶于二乙醚，过滤， 用二乙醚洗涤，经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)，得到95mg纯的标题化合物。
[0988] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.9(m，4H)3.8(s，3H)4.3(s，3H)7.1(d，J9.0Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.5(dd，J9.0，2.6Hz，1H)7.9(d，J2.6Hz，1H)8.4(s，1H)9.5(s，1H) [0989] 按照相同工艺操作，制备下列化合物：
[0990] 8-[4-(N-甲基-N-哌嗪基)-3-氯苯基氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B13-X00-M00(C01)-D03]
[0991] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.3(s，3H)2.5(m，4H)2.9(m，8H)4.4(s，3H)7.1(d，J8.8Hz，1H)7.3(s，1H)7.5(s，1H)7.5(dd，J8.8，2.4Hz，1H)8.0(d，J2.6Hz，1H)8.4(s，1H)9.6(s，1H).
[0992] 实施例47
[0993] 8-[(4-甲氧基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B60-X00-M00(C01)-D03]
[0994]
[0995] 在圆底烧瓶中，向8-氨基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(244mg，1.0mmol)在冰乙酸/甲醇/水(1∶1∶1)混合物(30mL)中的溶液加入对-甲氧基苯甲醛(0.44mL，450mg，3.0mmol)，再加入85％氰基硼氢化钠(210mg，2.0mmol)。将溶液在室温下搅拌7小时。此时加入更多的醛(0.44mL)和氰基硼氢化钠(210mg)，继续搅拌过夜。将反应混合物倒入冰水(200mL)中，加入饱和碳酸钠调节pH至10，溶液用乙酸乙酯萃取(4×20mL)。收集有机萃取液，用盐水洗至中性，用水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空下蒸发溶剂，得到黄色固体残余物，经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到250mg黄色纯的化合物。从甲醇中结晶，得到225mg结晶性标题化合物。
[0996] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)3.7(s，3H)4.2(s，3H)4.5(d，J6.1Hz，2H)7.2(s，1H)6.8(d，J8.8Hz，2H)7.4(s，1H)7.3(d，J8.8Hz，2H)7.6(m，1H)8.2(s，1H) [0997] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[0998] 1-甲基-8-[(噻吩-3-基甲基)氨基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B43-X00-M00(C01)-D03]
[0999] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)4.2(s，3H)4.5(d，J6.1Hz，2H)7.1(m，1H)7.2(s，1H)7.3(m，1H)7.4(s，1H)7.5(m，1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H)；
[1000] 8-[(3，5-二羟基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B62-X00-M00(C01)-D03]
[1001] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)4.2(m，2H)4.3(s，3H)4.4(d，J6.2Hz，2H)6.0(m，1H)6.2(m，2H)7.2(s，1H)7.4(s，1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H)；
[1002] 8-({4-[3-(二甲氨基)丙氧基]苄基}氨基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B61-X00-M00(C01)-D03]
[1003] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.8(m，2H)2.2(s，6H)2.4(t，2H)2.8(m，4H)4.0(t，2H)4.3(s，3H)4.5(d，J6.5Hz，2H)6.9(m，J9.0Hz，2H)7.2(d，J8.7Hz，2H)7.2(s，1H)7.4(s，
1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H)；
1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H)；
[1004] [5-({[3-(氨基羰基)-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-8-基]氨基}甲基)-2-糠基]甲基乙酸酯[B65-X00-M00(C01)-D03]
[1005] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.0(s，3H)2.8(m，4H)4.3(s，3H)4.5(d，J6.1Hz，2H)5.0(s，2H)6.2(d，J3.2Hz，1H)6.4(d，J3.2Hz，1H)7.2(s，1H)7.4(s，1H)7.6(t，J6.0Hz，
1H)8.2(s，1H)；
1H)8.2(s，1H)；
[1006] 8-[(3-氰基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B63-X00-M00(C01)-D03]
[1007] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)4.1(s，3H)4.6(d，J6.1Hz，2H)7.2(s，1H)7.4(s，1H)7.5(t，J7.7Hz，1H)7.7(m，4H)8.2(s，1H)；
[1008] 8-[(4-溴苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B64-X00-M00(C01)-D03]
[1009] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)4.2(s，3H)4.5(d，J6.3Hz，2H)7.2(s，1H)7.3(d，J8.5Hz，2H)7.4(s，1H)7.5(d，J8.5Hz，2H)7.7(m，1H)8.2(s，1H)； [1010] 8-{[4-(乙酰氨基)苄基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B80-X00-M00(C01)-D03]
[1011] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.0(s，3H)2.7(m，2H)2.9(t，J7.7Hz，2H)4.2(s，3H)4.5(d，J6.2Hz，2H)7.2(s，1H)7.3(d，J8.5Hz，2H)7.4(s，1H)7.5(d，J8.5Hz，2H)7.6(t，J7.4Hz，1H)8.2(s，1H)9.9(s，1H)；
[1012] B81-X00-M00(C01)-D03
[1013] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.7(m，2H)2.9(t，J7.6Hz，2H)4.3(s，3H)4.3(s，2H)4.5(d，J6.0Hz，2H)5.1(s，1H)6.2(m，2H)7.2(s，1H)7.4(s，1H)7.6(t，J5.9Hz，1H)8.2(s，
1H)；
1H)；
[1014] 8-[(1-甲基咪唑-2-基)甲氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B82-X00-M00(C01)-D03]
[1015] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)3.7(s，3H)4.3(s，3H)4.6(m，2H)6.9(s，1H)7.17(s，1H)7.24(s，1H)7.43(s，1H)7.5(m，1H)8.3(s，1H)；
[1016] 8-[(4-氨基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B83-X00-M00(C01)-D03]
[1017] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.7(m，2H)2.9(t，J7.7Hz，2H)4.3(s，3H)4.4(d，J6.1Hz，2H)5.1(s，2H)6.5(d，J8.4Hz，2H)7.0(d，J8.3Hz，2H)7.2(s，1H)7.4(m，2H)8.2(s，1H)；
[1018] 8-[(4-氟苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺 [1019] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.73(t，J＝ 7.74Hz，2H)2.94(t，J ＝ 7.56Hz，2H)4.18(s，3H)4.52(d，J＝6.22Hz，2H)7.13(t，J＝8.90Hz，2H)7.23(s，1H)7.38(dd，J＝
8.66，5.61Hz，2H)7.42(t，1H)7.71(t，J＝5.97Hz，1H)8.23(s，1H).
8.66，5.61Hz，2H)7.42(t，1H)7.71(t，J＝5.97Hz，1H)8.23(s，1H).
[1020] 实施例48
[1021] 8-{[4-(2-吗啉代基乙氧基)苄基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B84-X00-M00(C01)-D03]
[1022]
[1023] 步骤1.8-[(4-羟基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B85-X00-M00(C01)-D03]
[1024] 在室温下，向充分搅拌着的8-[(4-甲氧基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(242mg，0.7mmol)的氯仿(30mL)溶液历经5分钟加入三溴化硼(1M二氯甲烷溶液，5.12mL，5.1mmol)。将混合物加热至回流达8小时。历经
10分钟在0℃下滴加10％氢氧化铵水溶液(30mL)。有沉淀生成，2小时后过滤，用水洗涤，在40℃真空下干燥。得到130mg标题化合物。
10分钟在0℃下滴加10％氢氧化铵水溶液(30mL)。有沉淀生成，2小时后过滤，用水洗涤，在40℃真空下干燥。得到130mg标题化合物。
[1025] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(m，4H)4.2(s，3H)4.5(m，2H)6.7(d，J8.65Hz，2H)7.2(d，J8.5Hz，2H)7.25(s，1H)7.4(s，1H)7.8(m，1H)8.2(s，1H)
[1026] 步骤2.8-{[4-(2-吗啉代基乙氧基)苄基]氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B84-X00-M00(C01)-D03]
[1027] 向8-[(4-羟基苄基)氨基]-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(70mg，0.2mmol)的无水二甲基甲酰胺(3mL)溶液加入N-吗啉代基乙基氯盐酸盐(47mg，0.3mmol)和粉碎的碳酸钾(45mg，3.3mmol)。将混合物加热至回流达1小时。将反应混合物倒入冰水(70mL)中，用二氯甲烷萃取；将有机萃取液用盐水洗至中性pH，再用水洗涤，经Na2SO4干燥。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇96∶4)，得到白色固体，从甲醇中结晶，得到47.0mg标题化合物。
[1028] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.5(m，4H)2.7(t，2H)2.8(m，4H)3.6(m，4H)4.0(t，2H)4.2(s，3H)4.5(m，2H)6.9(d，J8.42Hz，2H)7.2(s，1H)7.25(d，J8.54Hz，2H)7.4(s，
1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H).
1H)7.6(m，1H)8.2(s，1H).
[1029] 类似地制备下列化合物：
[1030] 8-{[3-(2-吗啉代基乙氧基)-5-三氟甲基]苯基氨基}-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B119-X00-M00(C01)-D03]
[1031] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.47-2.56(m，4H)2.73(t，J＝7.26Hz，2H)2.85(t，J＝7.80Hz，2H)3.01(t，J＝7.80Hz，2H)3.57-3.64(m，4H)4.17(t，J＝5.49Hz，2H)4.35(s，3H)6.86(t，J＝1.83Hz，1H)7.28(s，1H)7.48(s，1H)7.61(t，J＝2.32Hz，1H)7.80(t，J＝
1.46Hz，1H)8.49(s，1H)9.85(s，1H).
1.46Hz，1H)8.49(s，1H)9.85(s，1H).
[1032] 实施例49
[1033] 2-苯胺基-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B04-X00-M06]
[1034]
[1035] 步骤1.7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[1036]
[1037] 将1g(4.2mmol)(3-乙氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯溶于10mL乙醇，加入0.21mL水合肼，将溶液在回流下搅拌一天。然后蒸发溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩。粗产物用二乙醚研制，过滤，得到(70％收率)标题化合物。
1
1
[1038] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.16(t，J6.83Hz 3H)2.25-3-27(3m，6H)4.18(q，J6.83Hz，2H)8.45(bs，1H).
[1039] 类似地制备下列化合物：
[1040] 4，4-二甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯1
[1041] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J＝6.95Hz，3H)1.42(s，6H)1.90-2.02(m，2H)2.55-2.63(m，2H)4.33(q，J＝6.95Hz，2H)14.34(s，1H).
[1042] 步骤2.7-氧代-1(与2)-三苯甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧 酸乙酯 [1043]
[1044] 将1.20g(4.8mmol)7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于40mL二氯甲烷，加入0.76mL三乙胺和1.47g(5.3mmol)三苯基甲基氯。将溶液在室温下搅拌6小时。然后将溶液用更多的二氯甲烷稀释，用水洗涤。将有机层用无水Na2SO4处理，蒸发至干。最后从二乙醚中结晶，得到产物，为区域异构体的混合物(80％收率)。
[1045] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.25(t，3H)1.94-2.98(3m，6H)4.25(q，2H)6.85-7.36(2m，15H).
[1046] 类似地制备下列化合物：
[1047] 1-三苯甲基-4，4-二甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [1048] 1H NMR(400MHz， DMSO-D6)δppm 1.26(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.45(s，6H)1.79-1.88(m，2H)2.18-2.26(m，2H)4.27(q，J ＝ 7.15Hz，2H)6.84-7.01(m，
6H)7.14-7.33(m，9H)；
6H)7.14-7.33(m，9H)；
[1049] 2-三苯甲基-4，4-二甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯 [1050] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.88(t，J＝7.13Hz，3H)1.27(s，6H)1.92-1.99(m，2H)2.56-2.63(m，2H)3.44(q，J＝7.15Hz，2H)6.99-7.05(m，6H)7.31-7.37(m，9H). [1051] 步骤3.6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1(2)-三苯甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[1052]
[1053] 将3.0g(6.6mmol)7-氧代-1(2)-三苯甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯溶于20mL二甲基甲酰胺，加入3.2mL(13.2mmol)二甲 基甲酰胺-二叔丁基乙缩醛。将溶液在65℃下加热一天，同时搅拌，然后蒸发至干。从二乙醚/乙酸乙酯混合物中结晶，得到产物(90％收率)。
[1054] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.24and 0.79(2t，J7.07Hz，3H)2.70-2.90(2t，J6.71Hz，6H)2.94and 2.99(2m，6H)4.21(q，J7.07Hz，2H)6.90-7.30(m，15H). [1055] 类似地制备下列化合物：
[1056] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-三苯甲基-4，4-二甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[1057] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.26(t，J ＝ 7.13Hz，3H)1.36(s，6H)2.66(s，2H)2.98(s，6H)4.25(q，J＝7.15Hz，2H)6.96(t，7H)7.15-7.29(m，9H)；
[1058] 6-[(二甲氨基)亚甲基]-2-三苯甲基-4，4-二甲基-7-氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
[1059] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.90(t，J ＝ 7.19Hz，3H)1.19(s，6H)2.78(s，2H)3.11(s，6H)3.42(q，J＝7.23Hz，2H)6.97-7.09(m，6H)7.30-7.37(m，9H)7.48(s，1H). [1060] 步骤4.8-苯胺基-1(与2)-三苯甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑
啉-3-羧酸乙酯
啉-3-羧酸乙酯
[1061]
[1062] 向636mg6-[(二甲氨基)亚甲基]-7-氧代-1(2)-三苯甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(1.18mmol)与440mg(1.18mmol)苯基胍碳酸盐的100mL无水乙醇溶液加入0.5mL二氮杂二环十一碳烯。将混合物在回流下搅拌48小时，然后在减压下蒸发溶剂。将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：环己烷/乙酸乙酯8/2)，得到240mg标题化合物(35％收率)。
1
1
[1063] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.81(t，J7.20Hz，3H)2.80-2.95(m，4H)3.58(q，J7.20Hz，2H)6.85-7.80(5m，20H)8.38(bs，1H)9.49(bs，1H).
[1064] 按照相同方法，但是采用适合的胍衍生物，制备下列化合物：
[1065] 8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-1(与2)-三苯甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1066] 8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-1(与2)-三苯甲基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1067] 8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-1(与2)-三苯甲基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1068] 8-氨基-1(与2)-三苯甲基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1069] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1-三苯甲基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯1
[1070] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.24((t，J7.20Hz，3H)1.31(s，6H)2.20(s，3H)2.43(m，4H)2.56(m，2H)2.99(m，4H)4.24(q，J7.20Hz，2H)6.61(d，J ＝ 8.79Hz，
2H)6.92-7.37(m，17H)8.07(bs，1H)；
2H)6.92-7.37(m，17H)8.07(bs，1H)；
[1071] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-2-三苯甲基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯1
[1072] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.89(t，J7.20Hz，3H)1.17(s，6H)2.21(s，3H)2.46(m，4H)2.71(m，2H)3.04(m，4H)3.40(q，J7.20Hz，2H)6.80(d，J ＝ 8.79Hz，
2H)6.96-7.43(m，15H)7.60(d，J＝8.79Hz，2H)8.31(bs，1H)9.31(bs，1H)；
2H)6.96-7.43(m，15H)7.60(d，J＝8.79Hz，2H)8.31(bs，1H)9.31(bs，1H)；
[1073] 8-苯胺基-1(与2)-三苯甲基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯；
[1074] 8-氨基-1-三苯甲基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1075] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.27(t，J ＝ 7.13Hz，3H)1.31(s，6H)2.52(s，2H)4.27(q，J＝7.07Hz，2H)5.20(s，2H)7.03-7.09(m，6H)7.16-7.34(m，9H)7.93(s，1H)； [1076] 8-氨基-2-三苯甲基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1077] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.95(t，J ＝ 7.13Hz，3H)1.16(s，6H)2.63(s，2H)3.46(q，J＝7.07Hz，2H)6.47(s，2H)7.09-7.16(m，6H)7.24-7.41(m，9H)8.14(s，1H). [1078] 步骤5.8-苯胺基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙 酯
[B04-X00-M00(C00)-D01]
[B04-X00-M00(C00)-D01]
[1079]
[1080] 将1.50g(2.6mmol)8-苯胺基-1(2)-三苯甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于50mL二氯甲烷，加入5mL三氟乙酸。将溶液搅拌过夜，在真空中除去溶剂。将残余物重新溶于二氯甲烷，用饱和NaHCO3溶液洗涤。然后将有机层经Na2SO4干燥，蒸发溶剂至干。从二异丙醚中结晶，得到0.70mg标题化合物(80％收率)。 [1081] 1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.17(t，3H，J7.07Hz)3.05-3.28(2m，4H)4.18(q，2H，J7.07Hz)6.83-7.63(3m，5H)8.31(bs，1H)9.10(m，2H).
[1082] 按照相同方法制备下列化合物：
[1083] 8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B12-X00-M00(C00)-D01]
[1084] 8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B13-X00-M00(C00)-D01]
[1085] 8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B10-X00-M00(C00)-D01]
[1086] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.35(t，J7.20Hz，3H)2.30(s，3H)2.50-2.60(m，4H)2.86(m，2H)2.99(m，2H)3.10(m，4H)4.33(q，J7.20Hz，2H)6.90(d，J ＝ 8.90Hz，
2H)7.71(d，J＝8.90Hz，2H)8.34(s，1H)9.27(bs，1H)14.22(bs，1H)
2H)7.71(d，J＝8.90Hz，2H)8.34(s，1H)9.27(bs，1H)14.22(bs，1H)
[1087] 8- 氨 基 -4，5- 二 氢 -1H- 吡 唑 并 [4，3-h] 喹 唑 啉 -3- 羧 酸 乙 酯[B00-X00-M00(C00)-D01]
[1088] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，3H，J7.2Hz)2.78(m，2H)2.96(m，2H)4.31(q，2H，J7.2Hz)6.64(m，2H)8.19(bs，1H)；
[1089] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B10-X00-M03(C00)-D01]
[1090] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.31(t，J7.20Hz，3H)1.33(s，6H)2.22(s，3H)2.40-2.50(m，4H)2.73(m，2H)3.07(m，4H)4.35(q，J7.20Hz，2H)6.91(d，J ＝ 9.02Hz，
2H)7.70(d，J＝9.02Hz，2H)8.33(bs，1H)9.30(bs，1H)14.13(bs，1H)；
2H)7.70(d，J＝9.02Hz，2H)8.33(bs，1H)9.30(bs，1H)14.13(bs，1H)；
[1091] 8-氨基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B00-X00-M03(C00)-D01]
[1092] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(m，9H)2.66(s，2H)4.22-4.42(m，2H)6.36(d，2H)8.19(d，1H)14.11(d，1H)；
[1093] 8-苯胺基-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B04-X00-M03(C00)-D01].
[1094] 步骤6.8-苯胺基-2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1095]
[1096] 将500mg 8-苯胺基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(1.5mmol)溶于10mL无水二甲基甲酰胺，向冷却了的溶液加入1.63mL 1M叔丁醇锂的四氢呋喃溶液。在0℃下搅拌30分钟后，滴加432mg叔丁氧羰基氨基丙基溴的8mL无水四氢呋喃溶液。在室温下一夜后，将混合物倒入NaH2PO4溶液中，用二氯甲烷萃取。然后将有机层经Na2SO4干燥，蒸发溶剂，得到油，无需任何进一步纯化即可按照下列步骤7处理。 [1097] 类似地可以制备下列化合物：
[1098] 2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1099] 2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉 -3-羧酸乙酯
[1100] 2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1101] 8-氨基-2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1102] 8-氨基-2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1103] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1104] 8-苯胺基-2-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯.
[1105] 遵照上述方法，但是采用叔丁氧羰基氨基乙基溴，制备下列化合物：
[1106] 8-苯氨基-2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1107] 2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1108] 2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1109] 2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-8-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1110] 8-氨基-2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1111] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.31(s，9H)1.36(t，3H，J7.2Hz)2.74(m，2H)2.94(m，2H)3.34(m，2H)4.33(q，2H，J7.2Hz)4.57(t，2H)6.50(m，2H)6.87(t，
1H)8.15(bs，1H)；
1H)8.15(bs，1H)；
[1112] 8-氨基-2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1113] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯
[1114] 8-苯胺基-2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-4，4-二甲基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯.
[1115] 步骤7.2-(3-氨基丙基)-8-苯胺基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐[B04-X00-M04(C13)-D01]
[1116]
[1117] 将前述步骤6的粗产物溶于20mL二 烷，加入8mL HCl 37％。在室温下搅拌6小时后，在真空中除去溶剂，残余物用乙醇研制，过滤收集产物(80％收率)。
[1118] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1119] B04-X00-M04(C12)-D01
[1120] B00-X00-M04(C12)-D01
[1121] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.37(t，3H，J7.2Hz)2.85(m，2H)3.02(m，2H)3.50(m，2H)4.37(q.2H，J7.2Hz)4.84(t，2H)7.47(m，1H)8.08(m，3H)8.29(s，1H)； [1122] B12-X00-M04(C12)-D01
[1123] B13-X00-M04(C12)-D01
[1124] B10-X00-M04(C12)-D01
[1125] B12-X00-M04(C13)-D01
[1126] B13-X00-M04(C13)-D01
[1127] B10-X00-M04(C13)-D01
[1128] 8-氨基-2-(3-氨基丙基)-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B00-X00-M04(C13)-D01；
[1129] 8-氨基-2-(3-氨基丙基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B00-X00-M09(C13)-D01；
[1130] 2-(3-氨基丙基)-8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B10-X00-M09(C13)-D01；
[1131] 8-苯氨基-2-(3-氨基丙基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B04-X00-M09(C13)-D01；
[1132] 8-氨基-2-(3-氨基乙基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B00-X00-M09(C12)-D01；
[1133] 2-(3-氨基乙基)-8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B10-X00-M09(C12)-D01；
[1134] 8-苯胺基-2-(3-氨基乙基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐B04-X00-M09(C12)-D01.
[1135] 步骤8.2-苯胺基-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B04-X00-M06]
[1136]
[1137] 将185mg(0.43mmol)2-(3-氨基丙基)-8-苯胺基-4，5-二氢-2H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯盐酸盐溶于10mL甲醇，加入400mg碳酸铯。在室温下搅拌3小时后，在减压下除去溶剂。然后向残余物加入水，过滤收集固体，用水和丙酮洗涤，得到100mg(70％收率)标题化合物。
[1138] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.18(ddd，J13.02，6.65，6.55Hz，2H)2.88(m，4H)3.21(q，J5.89Hz，2H)4.50(t，J6.77Hz，2H)6.93(t，J7.32Hz，1H)7.28(dd，J8.29，
7.56Hz，2H)7.85(d，J7.68Hz，2H)8.27(t，J5.18Hz，1H)8.38(s，1H)9.62(s，1H) [1139] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
7.56Hz，2H)7.85(d，J7.68Hz，2H)8.27(t，J5.18Hz，1H)8.38(s，1H)9.62(s，1H) [1139] 按照这种方法操作，制备下列化合物：
[1140] 2-苯胺基-5，6，9，10-四氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B04-X00-M05]
[1141] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.92(m，4H)3.65(m，2H)4.41(m，2H)6.93(m，1H)7.28(m，2H)7.85(m，2H)8.26(m，1H)8.39(s，1H)9.61(s，1H)；
[1142] 2-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-5，6，9，10-四氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B12-X00-M05]
[1143] 2-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-5，6，9，10-四氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B13-X00-M05]
[1144] 2-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-5，6，9，10-四氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B10-X00-M05]
[1145] 2-氨基-5，6，9，10-四氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B00-X00-M05]
[1146] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.74(t，J ＝ 7.56Hz，2H)2.88-2.98(m，2H)3.60-3.68(m，2H)4.29-4.42(m，2H)6.48(s，2H)8.15(s，1H)8.21-8.32(m，1H)； [1147] 2-氨基-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，
3-h]喹唑啉-7-酮[B00-X00-M06]
1
3-h]喹唑啉-7-酮[B00-X00-M06]
1
[1148] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.18(ddd，J13.02，6.65，6.55Hz，2H)2.74(m，2H)2.92(m，2H)3.21(q，J5.89Hz，2H)4.50(t，J6.77Hz，2H)6.48(m，2H)8.17(8，1H)8.23(m，
1H)；
1H)；
[1149] 2-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]氨基}-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B12-X00-M06] [1150] 2-{[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B13-X00-M06]
[1151] 2-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-5，6，8，9，10，11-六氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B10-X00-M06]
[1152] 2-氨基-6，6-二甲基-5，9，10-三氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B00-X00-M07]
[1153] 2-苯胺基-6，6-二甲基-5，9，10-三氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B04-X00-M07]
[1154] 2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-6，6-二甲基-5，9，10-三氢吡嗪并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7(8H)-酮[B10-X00-M07]1
[1155] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(s，6H)2.23(s，3H)2.47(m，4H)2.92(m，2H)3.07(m，4H)3.65(m，2H)4.41(m，2H)6.91(d，J ＝ 9.02Hz，2H)7.53(d，J ＝ 9.02Hz，
2H)8.23(m，1H)8.34(s，1H)9.12(s，1H)；
2H)8.23(m，1H)8.34(s，1H)9.12(s，1H)；
[1156] 2-氨基-6，6-二甲基-5，8，9，10，11-五氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B00-X00-M08]
[1157] 2-苯胺基-6，6-二甲基-5，8，9，10，11-五氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B04-X00-M08]
[1158] 2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-6，6-二甲基-5，8，9，10，11-五氢-7H-[1，4]二氮杂 并[1′，2′：1，5]吡唑并[4，3-h]喹唑啉-7-酮[B10-X00-M08] [1159] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(s，6H)2.18(ddd，J13.02，6.65，6.55Hz，2H)2.23(s，3H)2.47(m，4H)2.92(m，2H)3.07(m，4H)3.21((q，J5.89Hz，2H)4.50(t，J6.77Hz，
2H)6.91(d，J＝9.02Hz，2H)7.53(d，J＝9.02Hz，2H)8.27(m，1H)8.34(s，1H)9.12(s，1H). [1160] 实施例50
2H)6.91(d，J＝9.02Hz，2H)7.53(d，J＝9.02Hz，2H)8.27(m，1H)8.34(s，1H)9.12(s，1H). [1160] 实施例50
[1161] 8-苯 胺 基-1- 甲 基-4，5-二 氢 -1H-吡 唑 并[4，3-h] 喹 唑 啉-3-羧 酸[B04-X00-M00(C01)-D02]
[1162]
[1163] 将0.63g(1.80mmol)8-苯胺基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯溶于100mL四氢呋喃/甲醇/水8/1/1混合物，加入0.19g(4.53mmol)氢氧化锂水合物。将溶液在60℃下搅拌1.5小时。然后将混合物冷却至室温，加入1N HCl直至中性pH。加入水，过滤收集所得沉淀(87％收率)。1
[1164] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.85(t，J7.74Hz，2H)2.99(m，2H)4.36(s，3H)6.98(tt，J7.35，1.07Hz，1H)7.31(dd，J8.47，7.50Hz，2H)7.72(dd，J8.60，0.91Hz，
2H)8.42(s，1H)9.52(s，1H)12.68(s，1H)
2H)8.42(s，1H)9.52(s，1H)12.68(s，1H)
[1165] 按照相同工艺操作，制备下列化合物：
[1166] B00-X00-M00(C01)-D021
[1167] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.48 和 3.64(2t，J7.25Hz，4H)3.84(s，3H)8.04(bs，2H)8.46(bs，1H)；
[1168] B09-X00-M00(C03)-D021
[1169] H NMR(400MHz，DMSO-d6Hz)6.49(m，1H)7.07(m，2H)7.94(bs，1H)8.30(s，1H)9.35(bs，1H)；
[1170] B09-X00-M04(C03)-D021
[1171] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.80(s，9H)1.62(m，2H)2.26(s，3H)2.52(m，4H)3.13(m，4H)4.86(m，2H)6.58(m，1H)7.13(m，1H)7.20(m，1H)8.41(s，1H)9.20(bs，1H)； [1172] B10-X00-M00(C01)-D02
1
1
[1173] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.89(s，3H)2.74(m，2H)2.95(m，2H)4.30(s，3H)6.93(m，2H)7.52(m，2H)8.33(s，1H)9.28(bs，1H)；
[1174] B103-X00-M00(C01)-D021
[1175] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.09(m，4H)2.83(m，5H)2.97(t，2H)4.33(s，3H)7.02(m，2H)7.61(m，2H)8.38(s，1H)9.39(s，1H)；
[1176] B09-X00-M00(C01)-D021
[1177] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.81(m，5H)2.93(t，2H)3.09(m，4H)3.71(m，4H)4.32(s，3H)6.64(m，1H)7.17(m，1H)7.29(m，2H)8.38(s，1H)9.42(s，1H)10.33(s，1H)； [1178] B04-X04-M00(C01)-D02
1
1
[1179] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.89(t，2H)2.97(t，2H)3.70(s，3H)7.51(m，3H)7.67(m，2H)8.56(s，1H)12.81(bs，1H)；
[1180] B05-X06-M00(C01)-D021
[1181] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.92(t，2H)2.97(t， 2H)4.23(s，2H)4.26(s，3H)7.23(m，1H)7.32(m，2H)7.36(m，2H)8.65(s，1H)12.82(bs，1H)；
[1182] B10-X00-M04(C15)-D02
[1183] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.60(m，5H)2.89(m，2H)3.04(m，4H)3.33(m，4H)6.31(s，2H)6.78(d，2H)7.39(m，3H)7.47(m，2H)7.63(m，2H)7.67(s，1H)8.42(s，
1H)9.33(s，1H)13.55(s，1H).
1H)9.33(s，1H)13.55(s，1H).
[1184] 实施例51
[1185] 8-苯胺基-1-甲基-N-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B04-X00-M00(C01)-D20]
[1186]
[1187] 将45mg(0.14mmol)8-苯胺基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸溶于7mL二甲基甲酰胺，然后加入145.6mg(0.28mmol)(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基 六氟磷酸盐(PyBOP)、0.12mL(0.70mmol)N，N-二异丙基-N-乙基胺和0.08mL(0.70mmol)苯胺。6小时后除去溶剂，将残余物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干。使产物从甲醇中结晶(60％收率)。
[1188] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm ：2.88(m，2H)3.07(m，2H)4.43(s，3H，)6.97-7.85(6m，10H)8.45(s，1H)9.55(s，1H)10.09(s，1H).
[1189] 通过类似地操作，制备下列化合物：
[1190] 表XIII
[1191]
[1192]
[1193]
[1194]
[1195]
[1196]
[1197]
[1198]
[1199]
[1200]
[1201]
[1202]
[1203]
[1204]
[1205]
[1206]
[1207] 实施例52
[1208] 8-碘-1-甲基-N-[(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺
[1209]
[1210] 维持在惰性氩气氛下，向充分搅拌的温热的8-氨基-1-甲基-N-[(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(3g，6.92mmol)的二甲氧基乙烷(240mL)悬液按顺序加入碘化铯(2.16g，8.3mmol)、重升华碘(870mg，3.46mmol)、碘化铜(460mg，2.42mmol)和亚硝酸异戊酯(1.71mL，1.5g，12.46mmol)。将反应混合物在65-70℃下剧烈搅拌18小时。在冰水浴中冷却后，滤出固体，将滤液用二氯甲烷(100mL)稀释，用30％氢氧化铵(50mL)、硫代硫酸钠(100mL)、盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶59)，分离到1.48g标题化合物(40％收率)。
[1211] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.52(m，6H)2.89(t，2H)2.99(t，2H)4.30(s，3H)5.17(m，1H)7.22(m，1H)7.34(m，2H)7.41(m，2H)8.47(s，1H)
[1212] 实施例53
[1213] 1-甲基-8-{[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-N-[(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B09-X00-M00(C01)-D38] [1214]
[1215] 在用氩冲洗过的圆底烧瓶中装入乙酸钯[Pd(OAc)2](10mg，0.022mmol，10％)、(±)-BINAP(14mg，0.022mmol，10％)和二甲基甲酰胺(4mL)。将混合物在氩下搅拌30分钟。然后加入3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基胺(84mg，0.44mmol)、8-碘-1-甲基-N-[(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基]-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺(120mg，
0.22mmol)、碳酸钾(670mg，4.85mmol)和二甲基甲酰胺(1.5mL)。在氩下，将所得混合物在
80℃油浴中加热1.5小时，同时充分搅拌。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中，用二氯甲烷萃取。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到40mg(30％收率)标题化合物。 [1216] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.27(s，3H)2.52(m，8H)2.80(t，2H)2.94(m，
4H)3.13(m，4H)3.56(m，4H)4.39(s，3H)5.16(m，1H)6.59(m，1H)7.14(m，1H)7.24(m，
2H)7.33(m，2H)7.42(m，2H)8.39(m，2H)9.33(s，1H).
0.22mmol)、碳酸钾(670mg，4.85mmol)和二甲基甲酰胺(1.5mL)。在氩下，将所得混合物在
80℃油浴中加热1.5小时，同时充分搅拌。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中，用二氯甲烷萃取。将有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到40mg(30％收率)标题化合物。 [1216] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.27(s，3H)2.52(m，8H)2.80(t，2H)2.94(m，
4H)3.13(m，4H)3.56(m，4H)4.39(s，3H)5.16(m，1H)6.59(m，1H)7.14(m，1H)7.24(m，
2H)7.33(m，2H)7.42(m，2H)8.39(m，2H)9.33(s，1H).
[1217] 通过类似地操作，制备下列化合物：
[1218] 表XIV
[1219]
[1220] 实施例54
[1221]
[1222] 步骤1.N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-1-甲基-8-{4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B10-X00-M00(C01)-D71] [1223] 向129mg(0.228mmol)N-[(1S)-2-叠氮基-1-苯基乙基]-1-甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺的16mL甲醇溶液加入65mg(1.2mmol)NH4Cl的3.2mL水溶液和39mg铁(0.7mmol)，将混合物回流过夜。将悬液冷却至室温，过滤。除去甲醇后，向水相分批加入固体Na2CO3，直至pH 10，然后用二氯甲烷萃取产物。粗产物经过快速色谱处理(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95/5)，得到94mg标题化合物。
[1224] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.24(s，3H)2.47(m，4H)2.78(t，J ＝ 7.68Hz，2H)2.96(m，3H)3.08(m，5H)4.37(s，3H)5.01(m，1H)6.91(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.31(m，
5H)7.54(d，J＝9.02Hz，2H)8.34(s，1H)8.54(d，J＝8.17Hz，1H)9.26(s，1H). [1225] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
5H)7.54(d，J＝9.02Hz，2H)8.34(s，1H)8.54(d，J＝8.17Hz，1H)9.26(s，1H). [1225] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1226] B10-X00-M03(C01)-D71
[1227] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.21(s，3H)1.34(s，3H)2.24(s，3H)2.45-2.49(m，4H)2.62-2.72(m，2H)2.90-3.05(m，2H)3.06-3.10(m，4H)4.35(s，3H)5.01(td，J ＝ 8.20，
5.67Hz，1H)6.91(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.24-7.29(m，1H)7.33-7.38(m，2H)7.38-7.41((m，
2H)7.53(d，J＝9.15Hz，2H)8.34(s，1H)8.65(d，J＝8.29Hz，1H)9.26(s，1H). [1228] 步 骤2.N-[(1S)-2-(二 甲 氨 基)-1-苯 基 乙 基 ]-1-甲 基-8-{[4-(4- 甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3- 酰胺
[B10-X00-M00(C01)-D72]
5.67Hz，1H)6.91(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.24-7.29(m，1H)7.33-7.38(m，2H)7.38-7.41((m，
2H)7.53(d，J＝9.15Hz，2H)8.34(s，1H)8.65(d，J＝8.29Hz，1H)9.26(s，1H). [1228] 步 骤2.N-[(1S)-2-(二 甲 氨 基)-1-苯 基 乙 基 ]-1-甲 基-8-{[4-(4- 甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3- 酰胺
[B10-X00-M00(C01)-D72]
[1229] 向50mg(0.091mmol)N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-1-甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺的甲醇
(5mL)溶液加入0.027mL甲醛(40％水溶液，0.364mmol)和乙酸(0.02mL)。30分钟后，加入77mg(0.364mmol)三乙酰氧基硼氢化钠，将混合物搅拌5小时。在真空下除去溶剂，将粗产物溶于水，分批加入Na2CO3，直至碱性pH。用二氯甲烷萃取产物，为单一的化合物(34mg，
66％收率)。
(5mL)溶液加入0.027mL甲醛(40％水溶液，0.364mmol)和乙酸(0.02mL)。30分钟后，加入77mg(0.364mmol)三乙酰氧基硼氢化钠，将混合物搅拌5小时。在真空下除去溶剂，将粗产物溶于水，分批加入Na2CO3，直至碱性pH。用二氯甲烷萃取产物，为单一的化合物(34mg，
66％收率)。
[1230] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.26(s，9H)2.52(m，4H)2.78(t，2H)2.95(t，2H)3.09(m，4H)4.37(s，3H)5.11(m，1H)6.93(d，2H)7.24(m，1H)7.33(m，2H)7.41(m，
2H)7.53(d，2H)8.34(m，2H)9.26(s，1H).
2H)7.53(d，2H)8.34(m，2H)9.26(s，1H).
[1231] 通过类似地操作，制备下列化合物：
[1232] 1-甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基}-N-{(1S)-2-[(1-甲基哌啶-4-基)氨基]-1-苯基乙基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺
[B10-X00-M00(C01)-D145]
[B10-X00-M00(C01)-D145]
[1233] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.76(m，4H)2.73(m，24H)4.39(s，3H)5.34(m，1H)6.98(d，2H)7.30(m，1H)7.38(m，2H)7.43(m，2H)7.57(d，2H)8.36(s，1H)8.75(s，
1H)9.33(bs，1H)
1H)9.33(bs，1H)
[1234] B10-X00-M03(C01)-D72
[1235] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.21(s，3H)1.32(s，3H)2.24(s，6H)2.25(s，3H)2.49(m，4H)2.67(m，2H)2.80(m，2H)3.08(m，4H)4.34(s，3H)5.12(td，J＝8.20，5.67Hz，
1H)6.91(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.25(m，1H)7.34(m，2H)7.42(m，2H)7.53(d，J ＝ 9.15Hz，
2H)8.33(s，1H)8.45(d，J＝8.29Hz，1H)9.26(s，1H)
1H)6.91(d，J ＝ 9.15Hz，2H)7.25(m，1H)7.34(m，2H)7.42(m，2H)7.53(d，J ＝ 9.15Hz，
2H)8.33(s，1H)8.45(d，J＝8.29Hz，1H)9.26(s，1H)
[1236] 实施例55
[1237] N-苄基-1-甲基-8-{[4-(4-甲基-4-氧化哌嗪-1-基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺
[1238]
[1239] 向39.4mg(0.0774mmol)N-苄基-1-甲基-8-{[4-(4-甲基哌嗪-1- 基)苯基]氨基}-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺的溶液加入17.4mg(0.0774mmol)3-氯过苯甲酸(3-chlorobenzenecarboperoxoic acid)，将混合物在室温下搅拌。45分钟后，加入NaHCO3水溶液，除去溶剂。用甲醇处理，过滤，得到26.6mg标题化合物(66％收率)。1
[1240] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.81(t，J＝ 7.74Hz，2H)3.00(t，J ＝ 7.62Hz，2H)3.37(m，8H)3.15(s，3H)4.34(s，3H)4.43(d，J ＝ 6.34Hz，2H)6.98(d，J ＝ 9.15Hz，
2H)7.24(m，1H)7.33(m，4H)7.57(d，J ＝ 9.15Hz，2H)8.36(s，1H)8.70(t，J ＝ 6.34Hz，
1H)9.30(s，1H).
2H)7.24(m，1H)7.33(m，4H)7.57(d，J ＝ 9.15Hz，2H)8.36(s，1H)8.70(t，J ＝ 6.34Hz，
1H)9.30(s，1H).
[1241] 实施例56
[1242] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯[B10-X00-M03(C01)-D01]
[1243]
[1244] 在 用 氩 冲 洗 过 的 圆 底 烧 瓶 中 装 入Pd(OAc)2(762.34mg，3.395mmol)、(±)-BINAP(2.145g，3.395mmol)和二甲基甲酰胺(250mL)。将混合物在氩下搅拌30分钟。然后加入4-(4-甲基-哌嗪-1-基)苯基胺(19.493g，101.908mmol)、8-碘-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(14.00g，33.961mmol)、K2CO3(60.00g，434.112mmol)和二甲基甲酰胺(250mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后在氩下在油浴中加热至80℃3小时，同时充分搅拌。冷却至室温后，将反应混合物抽吸过滤，用二氯甲烷洗涤，蒸发滤液至干。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇94∶6)，得到11.60g(收率72％)纯的标题化合物。
[1245] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(t，J ＝ 7.07Hz，3H)1.33(s，6H)2.27(s，3H)2.52(m，4H)2.71(s，2H)3.03-3.15(m，4H)4.32(q，J＝7.07Hz，2H)4.33(s，3H)6.91(d，J＝9.02Hz，2H)7.53(d，J＝9.02Hz，2H)8.35(s，1H)9.28(s，1H). 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1246] 表XV
[1247]
[1248] 实施例57
[1249] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾盐[B10-X00-M03(C01)-D02]
[1250]
[1251] 在充分搅拌下，向8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(11.60g，24.390mmol)的无水乙醇(450mL)悬液加入1.5M氢氧化钾的95％乙醇溶液(63mL)，将混合物加热至回流达3小时。
在冰浴中冷却后，有固体生成，过滤，用乙醇洗涤，在40℃真空下干燥，得到11.8g(定量收率)标题化合物。
在冰浴中冷却后，有固体生成，过滤，用乙醇洗涤，在40℃真空下干燥，得到11.8g(定量收率)标题化合物。
[1252] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.31(s，6H)2.23(s，3H)2.47(m，4H)2.58(s，2H)3.03-3.15(m，4H)4.17(s，3H)6.91(d，J＝9.02Hz，2H)7.54(d，J＝9.02Hz，2H)8.24(s，
1H)9.12(s，1H)
1H)9.12(s，1H)
[1253] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1254] 表XVI
[1255]
[1256] 实施例58
[1257] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B10-X00-M03(C01)-D04]
[1258]
[1259] 向8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾盐(9.5g，19.561mmol)在无水四氢呋喃与二甲基甲酰胺的1∶1混合物(50mL)中的悬液按顺序加入2M甲胺的四氢呋喃溶液(21.12mL，42.24mmol)、
1-羟基苯并三唑(5.332g，39.458mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)(7.567g，39.473mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物倒入水(2.5L)中，用二氯甲烷萃取(4×250mL)。合并有机萃取液，用水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇94∶6)，得到
8.20g(收率92％)纯的标题化合物。
1
1-羟基苯并三唑(5.332g，39.458mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)(7.567g，39.473mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物倒入水(2.5L)中，用二氯甲烷萃取(4×250mL)。合并有机萃取液，用水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇94∶6)，得到
8.20g(收率92％)纯的标题化合物。
1
[1260] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(s，6H)2.26(s，3H)2.44-2.54(m，4H)2.68(s，2H)2.76(d，J＝4.76Hz，3H)3.04-3.13(m，4H)4.31(s，3H)6.91(d，J＝9.02Hz，2H)7.53(d，J＝9.02Hz，2H)8.15(q，J＝4.84Hz，1H)8.34(s，1H)9.25(s，1H)
[1261] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1262] 表XVII
[1263]
[1264]
[1265]
[1266] 下面报道本发明一些代表性化合物的分析型HPLC/质谱数据。
[1267] 表XVIII
[1268]
[1269]
[1270] 实施例59
[1271] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺三-盐酸盐[B10-X00-M03(C01)-D04]
[1272]
[1273] 向8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺(7.00g，15.192mmol)在甲醇/二氯甲烷的1∶1混合物(149mL)中的溶液加入4M盐酸的二 烷溶液(12.12mL，48.48mmol)，将溶液在室温下搅拌2小时。在减压下除去溶剂后，将微红色固体在43℃真空下干燥10小时。得到8.11g标题化合物，为红色固体。
[1274] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(s，6H)2.69(s，2H)2.76(d，J ＝ 4.76Hz，3H)2.85(d，J＝3.54Hz，3H)2.95-3.08(m，2H)3.10-3.26(m，2H)3.39-3.55(m，2H)3.74(d，J＝13.41Hz，2H)4.30(s，3H)7.00(d，J＝9.02Hz，2H)7.59(d，J＝8.90Hz，2H)8.16(q，J＝
4.51Hz，1H)8.36(s，1H)9.44(s，1H)10.37(s，1H)
4.51Hz，1H)8.36(s，1H)9.44(s，1H)10.37(s，1H)
[1275] 实施例60
[1276]
[1277] 8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B10-X00-M03(C01)-D03]
[1278] 向8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾盐(185.5mg，0.382mmol)在无水四氢呋喃与二甲基甲酰胺的1∶1混合物(4.8mL)中的悬液按顺序加入N-乙基二异丙基胺(0.13mL，0.760mmol)、1-羟基苯并三唑铵盐(102mg，0.760mmol)。将反应混合物冷却至0℃，用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)(146mg，0.760mmol)处理，然后在室温下搅拌18小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，过滤沉淀，用水洗涤，在40℃真空下干燥4小时。得到130mg(收率76％)纯的标题化合物。
[1279] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(s，6H)2.26(s，3H)2.46-2.56(m，4H)2.68(s，2H)3.04-3.14(m，4H)4.31(s，3H)6.91(d，J＝9.15Hz，2H)7.29(s，1H)7.53(d，J＝9.15Hz，
2H)7.55(s，1H)8.34(s，1H)9.25(s，1H)
2H)7.55(s，1H)8.34(s，1H)9.25(s，1H)
[1280] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1281] 表XIX
[1282]
[1283]
[1284] 实施例61
[1285]
[1286] 步骤1.8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾盐[B00-X00-M03(C01)-D02]
[1287] 在充分搅拌下，向8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸乙酯(20.00g，66.368mmol)的无水乙醇(250mL)悬液加入1.5M氢氧化钾的乙醇溶液(150mL)，将混合物加热至回流达1.5小时。在冰浴中冷却后，有固体生成，过滤，用乙醇洗涤，在40℃真空下干燥，得到17.34g(收率84％)白色固体化合物。
[1288] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.28(s，6H)2.51(s，2H)4.16(s，3H)6.37(s，2H)8.07(s，1H)
[1289] 步骤2.8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B00-X00-M03(C01)-D04]
[1290] 向8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸钾盐(17.00g，54.594mmol)在无水四氢呋喃与二甲基甲酰胺的1∶1混合物(340mL)中的悬液按顺序加入2M甲胺的四氢呋喃溶液(40.80mL，81.60mmol)、1-羟基苯并三唑(8.840g，65.418mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)(12.540g，65.418mmol)，将浓稠的浆液在室温下搅拌20小时。将反应混合物倒入水(2.5L)中，用二氯甲烷萃取(4×250mL)。合并有机萃取液，用水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂。
得到17.0g微黄色固体，用二乙醚研制，得到13.05g(收率87％)所需化合物。
得到17.0g微黄色固体，用二乙醚研制，得到13.05g(收率87％)所需化合物。
[1291] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.31(s，6H)2.60(s，2H)2.75(d，J ＝ 4.76Hz，3H)4.30(s，3H)6.55(s，2H)8.12(q，J＝4.39Hz，1H)8.17(s，1H).
[1292] 以类似方式操作，制备下列化合物：
[1293] 8-氨 基 -4，5-二 氢-1H-吡 唑 并 [4，3-h]喹 唑 啉-3-羧 酸 甲 基 酰 胺[B00-X00-M00(C01)-D04]
[1294] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.69-2.74(m，2H)2.74(d，J＝4.76Hz，3H)2.94(t，J＝7.56Hz，2H)4.31(s，3H)6.54(s，2H)7.99-8.08(m，1H)8.18(s，1H)；
[1295] 8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺[B00-X00-M03(C01)-D03]
[1296] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.32(s，6H)2.61(s，2H)4.30(s，3H)6.57(s，2H)7.27(s，1H)7.51(s，1H)8.17(s，1H)
[1297] 步骤3.8-碘-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺
[1298] 在维持在氩气氛下的圆底烧瓶中，将乙基8-氨基-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺(13.00g，45.400mmol)溶于无水二甲氧基乙烷(800mL)；按顺序加入碘化铯 (11.795g，45.400mmol)、重升华碘(5.761g，22.698mmol)、碘化铜(I)(2.594g，13.621mmol)和亚硝酸异戊酯(9.107mL，68.100mmol)，将混合物加热至70℃达22小时。冷却至室温后，抽吸过滤除去固体产物，用二氯甲烷洗涤。
将滤液浓缩至400mL，用二氯甲烷(1000mL)稀释，用30％氢氧化铵(100mL)、5％硫代硫酸钠(50mL)、水(4×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂，得到11.00g深色的油，用二乙醚研制，得到4.300g标题化合物，为黄色固体。母液经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97∶3)，得到另外2.04g微黄色固体化合物(总收率35％)。 [1299] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(s，6H)2.76(d，J ＝ 4.76Hz，3H)2.80(s，
2H)4.24(s，3H)8.16-8.25(m，1H)8.48(s，1H)
将滤液浓缩至400mL，用二氯甲烷(1000mL)稀释，用30％氢氧化铵(100mL)、5％硫代硫酸钠(50mL)、水(4×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂，得到11.00g深色的油，用二乙醚研制，得到4.300g标题化合物，为黄色固体。母液经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇97∶3)，得到另外2.04g微黄色固体化合物(总收率35％)。 [1299] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.34(s，6H)2.76(d，J ＝ 4.76Hz，3H)2.80(s，
2H)4.24(s，3H)8.16-8.25(m，1H)8.48(s，1H)
[1300] 步骤4.8-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯基氨基]-1，4，4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺[B104-X00-M03(C01)-D04]
[1301] 在 用 氩 冲 洗 过 的 圆 底 烧 瓶 中 装 入Pd(OAc)2(16.34mg，0.0728mmol)、(±)-BINAP(45.33mg，0.0728mmol)和二甲基甲酰胺(12mL)。将混合物在氩下搅拌30分钟。然后加入3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯基胺(448.4mg，2.184mmol)、乙基8-碘-1，4，
4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺(300mg，0.728mmol)、K2CO3(1.508g，10.910mmol)和二甲基甲酰胺(10mL)。在氩下将所得混合物在油浴中加热至
80℃3小时，同时充分搅拌。冷却至室温后，抽吸过滤反应混合物，用二氯甲烷洗涤，蒸发滤液至干。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到215mg(收率62％)纯的标题化合物。
4-三甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸甲基酰胺(300mg，0.728mmol)、K2CO3(1.508g，10.910mmol)和二甲基甲酰胺(10mL)。在氩下将所得混合物在油浴中加热至
80℃3小时，同时充分搅拌。冷却至室温后，抽吸过滤反应混合物，用二氯甲烷洗涤，蒸发滤液至干。粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到215mg(收率62％)纯的标题化合物。
[1302] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.35(s，6H)2.25(s，3H)2.42(m，4H)2.71(s，2H)2.77(d，J ＝ 4.76Hz，3H)3.44(m，4H)3.48(s，2H)4.35(s，3H)6.91(d，J ＝ 7.31Hz，
1H)7.26(t，J ＝ 7.68Hz，1H)7.56(d，J ＝ 8.78Hz，1H)7.76(s，1H)8.15(s，1H)8.41(s，
1H)9.5(s，1H)
1H)7.26(t，J ＝ 7.68Hz，1H)7.56(d，J ＝ 8.78Hz，1H)7.76(s，1H)8.15(s，1H)8.41(s，
1H)9.5(s，1H)
[1303] 按照上述方法操作，制备下列化合物：
[1304] 表XX
[1305]
[1306]
[1307] 下面报道本发明一些代表性化合物的分析型HPLC/质谱数据。
[1308] 表XXI
[1309]
[1310]
[1311] 实施例62
[1312]
[1313] 步骤1.向固体载体(树脂)加载伯胺
[1314] A：其中“树脂”是4-(4-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)丁酰基聚乙二醇接枝的氨甲基聚苯乙烯-1％DVB的情况：
[1315] 就R2伯胺的每种变化而言，将1克(0.39mmol)上述树脂装入10mLArgonaut Quest 210反应试管内。向试管中加入原甲酸三甲酯(7mL)以及5当量(1.95mmol)每种伯胺(在流程中以R2表示)。在25℃下使反应在Quest上混合16小时，继之以在70℃下加热2小时。冷却和除去反应溶液后，将树脂用原甲酸三甲酯洗涤一次(7mL)，用无水甲醇洗涤三次(各7mL)。然后向树脂加入无水甲醇(5mL)，继之以加入 148mg(3.9mmol，10equiv)硼氢化钠。剧烈的气体放出停止后，将试管密封，在室温下混合8小时。将树脂用甲醇(5mL)洗涤三次，用甲醇/水(1∶1，5mL)洗涤三次，用DMF(5mL)洗涤三次。然后在室温下将树脂用20％哌啶的DMF溶液处理1小时。再次将树脂用DMF(5mL)洗涤三次，用甲醇(5mL)洗涤三次，用二氯甲烷(5mL)洗涤三次。利用下述FmocUV-分光光度法测试树脂中样品的定量胺加载率。利用下述氯醌(chloranil)试验法定性分析树脂。
[1316] B：其中“树脂”是Rink酰胺、4-(2′，4′-二甲氧基苯基-fmoc-氨甲基)苯氧基(共聚苯乙烯-1％DVB)的情况：
[1317] 将1g(0.39mmol)上述树脂装入10mL Argonaut Quest 210反应试管。将树脂用20％哌啶的DMF溶液处理5分钟，然后在室温下进行二次处理达30分钟。将树脂用DMF(3×5mL)、用甲醇(3×5mL)和用二氯甲烷(3×5mL)洗涤。
[1318] 利用Fmoc UV-分光光度法测试定量胺加载率：
[1319] 将精确涂焦油量(25mg±5mg)的干燥、已加载的树脂装入3mL聚丙烯注射器，注射器装有过滤盘。向注射器装入3当量氯甲酸9-芴甲基酯的1mL二氯甲烷溶液，然后加入1.5当量N，N-二异丙基乙胺。借助轨道摇动器摇动树脂1小时。将树脂用DMF(3×2mL，
5min.)、甲醇(3×2mL，5min.)和DCM(3×2mL，5min.)洗涤。
5min.)、甲醇(3×2mL，5min.)和DCM(3×2mL，5min.)洗涤。
[1320] 从注射器抽取1mL 20％哌啶的DMF溶液，在室温下搅动5分钟。将溶液分配在10mL容量瓶中。抽取第二等份20％哌啶的DMF溶液，在室温下搅动30分钟。再次将溶液分配在相同10mL容量瓶中(储备溶液)。向容量瓶加入DMF，达到10mL总体积。将这只含有储备溶液的容量瓶充分搅动，精确转移0.5mL至第二只10mL容量瓶(供试溶液)。再次向容量瓶加入DMF至高达10mL总体积。利用Amerasham PharmaciaBiotech Ultrospec
3000Pro，UV-Vi s分光光度计在λ＝302nm下测量这种供试溶液的吸光度，以DMF作为空白。利用下式计算反应后的树脂取代度：
3000Pro，UV-Vi s分光光度计在λ＝302nm下测量这种供试溶液的吸光度，以DMF作为空白。利用下式计算反应后的树脂取代度：
[1321] 加载率(mmol/g)＝(A302×20倍×10mL)/8100×wt
[1322] 其中A302是λ＝302nm处的吸光度，ε＝8100是哌啶-芴酮加合物的消光系数，wt是树脂的皮重(tare)，以毫克计。
[1323] 与树脂结合的仲胺的定性氯醌(3，4，5，6-四氯-1，2-苯醌)试验：将一小份预先洗涤过的附着有胺的树脂置于微量试管中。将珠粒用丙酮洗涤一次，滗析除去溶剂。向试管加入一滴氯醌供试溶液，在室温下放置5分钟。深绿至褐色是仲胺的阳性指征。颜色的强度是仲胺浓度的非定量指征。
[1324] 供试溶液：室温下3，4，5，6-四氯-1，2-苯醌在甲苯中的饱和溶液。
[1325] 步骤2.固体承载的胺被8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-碳酰氟酰化
[1326] 就向1g(0.39mmol)上述步骤1中树脂上加载的R2伯胺的每种变化而言，加入下列预先活化的羧酸氟化物试剂。在5mL二氯甲烷中，溶解166mg(0.47mmol，1.2当量)8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-羧酸酯、155mg(0.585mmol，1.5当量)四甲基氟代甲脒 六氟磷酸盐和0.102mL(0.585mmol，1.5当量)N，N-二异丙基乙胺。向该溶液滴加N，N-二甲基乙酰胺，直至所有试剂在声波处理下都已溶解。将反应系统在室温下搅拌30分钟。在30分钟内向该溶液加入另外0.102mL(0.585mmol，1.5当量)N，N-二异丙基乙胺，在Quest 210合成仪上将全部内容物装上树脂。将树脂在室温下混合
18小时。将树脂排干酰化反应混合试剂，用DMF(3×5mL，5min.)、甲醇(3×5mL，5min.)和DCM(3×5mL，5min.)洗涤。将树脂在真空下干燥除去DCM。利用氯醌试验法定性测试树脂的酰化反应完成与否。对每份干燥树脂样品进行定量Fmoc UV-分光光度分析，以测定树脂结合的酰化的程度。
18小时。将树脂排干酰化反应混合试剂，用DMF(3×5mL，5min.)、甲醇(3×5mL，5min.)和DCM(3×5mL，5min.)洗涤。将树脂在真空下干燥除去DCM。利用氯醌试验法定性测试树脂的酰化反应完成与否。对每份干燥树脂样品进行定量Fmoc UV-分光光度分析，以测定树脂结合的酰化的程度。
[1327] 步骤3.固体承载的8-碘-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺的催化性胺化
[1328] 利用4mL Argonaut Trident合成盒，将来自上述步骤2的200mg(0.078mmol)每种类型树脂装入单独的小瓶。向用氩冲洗过的每只反应小瓶加入碳酸钾(0.158g，1.56mmol)、乙酸钯[Pd(OAc)2](1.8mg， 0.008mmol，10％)、(±)-BINAP(5.0mg，0.008mmol，10％)与对应的R1胺(0.156mmol，2当量)的二甲基乙酰胺(2mL)溶液。将所得混合物在室温下搅动1小时，然后在Argonaut Trident外部搅动热量单元(EATU)合成站上加热至60℃达16小时。
[1329] 将树脂排干合成混合试剂，利用Argonaut Trident EATU合成站用DMF(1×2mL，5min.)、水(1×2mL，5min.)、DMF/水(1∶1)(3×2mL，5min.)、DMF(3×2mL，5min.)、甲醇(3×2mL，5min.)和DCM(3×2mL，5min.)洗涤。
[1330] 步骤4.不同取代的8-氨基-1-甲基-4，5-二氢-1H-吡唑并[4，3-h]喹唑啉-3-酰胺从固体载体上裂解
[1331] 向每只Argonaut Triden t反应小瓶加入2mL下列树脂裂解混合试剂：二氯甲烷(50mL)、三氟乙酸(49mL)和水(1mL)。在Argonaut TridentEATU合成站上将悬浮在裂解混合试剂中的树脂在室温下摇动1小时。将含有粗产物的溶液捕集在单独的小瓶中，也向相同的对应的小瓶捕集另外三份用二氯甲烷洗涤(各2mL)的树脂。
[1332]
[1333] 4-(4-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)丁酰基聚 4-(2′，4′-二甲氧基苯基-fmoc-氨
[1334] 乙二醇接枝的氨甲基聚苯乙烯-1％DVB 甲基)苯氧基(共聚苯乙烯-1％DVB)
[1335] 实施例63
[1336] N-[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]胍
[1337] 步骤1.1，3-双(叔丁氧羰基)胍
[1338]
[1339] 将15g 1，3-双(叔丁 氧羰基)-2-甲 基-2-硫假 脲 (thiopseudourea)(0.052mol)悬浮在150mL氨气的甲醇溶液中，在封闭的瓶子中将混合物在室温下搅拌。在真空中浓缩所得溶液，直至沉淀出10g(74％收率)标题化合物，过滤收集。
[1340] 步骤2.1，3-双(叔丁氧羰基)-2-三氟甲磺酰基胍
[1341]
[1342] 在搅拌下，将5.2g(20mmol)1，3-双(叔丁氧羰基)胍的100mL无水二氯甲烷溶液冷却至-78℃，滴加5.6g(20mmol)三氟甲磺酸酐。使反应混合物恢复至室温，搅拌5小时。加入NaHSO4水溶液，将有机层经Na 2SO4干燥，蒸发至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯7/3)，得到4.0g(51％收率)标题化合物。
[1343] 步骤3.N-[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]胍
[1344]
[1345] 向3.0g(13.3mmol)4-(3-氯-4-甲基哌嗪-1-基)苯胺与2.22mL(16.0mmol)三乙胺的36mL二氯甲烷溶液加入6.0g(15.3mmol)1，3-双(叔丁氧羰基)-2-三氟甲磺酰基胍。将反应混合物在室温下搅拌72小时。将溶液用更多的二氯甲烷稀释，用水洗涤，将溶剂经Na2SO4干燥，在真空中蒸发。残余物经过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇92/8)，得到5.4g(86.2％收率)被保护的中间体，用60mL 4N HCl的二 烷溶液处理。将混合物在室温下搅拌过夜。在减压下除去溶剂，将残余物重新溶于水，中和所得溶液，用乙酸乙酯萃取产物。在减压下除去溶剂，得到2.4g(78.7％收率)标题化合物。
1
1
[1346] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.23(s，3H)2.48(m，4H)2.90(m，4H)5.38(bs，4H)6.72(dd，J2.44，8.42Hz，1H)6.82(d，J2.44，1H)7.01(d，J8.42Hz，1H).
[1347] 通过类似地操作，但是采用适合的取代的苯胺衍生物，制备下列化合物： [1348] N-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]胍；
[1349] N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]胍；1
[1350] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.80(s，3H)7.09(m.4H)7.41(s，2H)9.85(s，1H)11.39(s，1H)(as dihydrochloride)；
[1351] (作为二盐酸盐)
[1352] N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基]胍1
[1353] H NMR(400Mz，DMSO-d6)δppm 2.22(s，3H)2.43(m，4H)2.80(m，4H)5.46(bs，4H)7.02(m，2H)7.37(d，1H，J 8.42Hz)；
[1354] N-(3-氯苯基)胍.
[1355] 实施例64
[1356]
[1357] 步骤1.(1S)-2-羟基-1-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯
[1358] 将40g(0.291mol)(2S)-2- 氨 基-2- 苯 基 乙 醇 的 1250mL乙 酸 乙 酯 与99.83mL(0.583mol)N-乙基-N，N-二异丙基胺溶液冷却至0℃，分批加入76.21g(0.349mol)二碳酸二叔丁酯。将混合物在室温下搅拌3小时，然后用400mL 1M KHSO4洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，得到69.88g标题化合物。
[1359] 步骤2.甲磺酸(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-苯基乙酯
[1360] 将68.9g(0.29mol)(1S)-2-羟基-1-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯与三乙胺(40.36mL，0.29mol)的700mL无水二氯甲烷溶液在惰性气氛下 冷却至-10℃，滴加
24.79mL(0.319mol)甲磺酰氯。在0℃下2小时后，将混合物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取。
将有机相用稀HC l、含水NaHCO3、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，得到89.8g产物(98％收率)。 [1361] 步骤3.(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯
24.79mL(0.319mol)甲磺酰氯。在0℃下2小时后，将混合物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取。
将有机相用稀HC l、含水NaHCO3、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，得到89.8g产物(98％收率)。 [1361] 步骤3.(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯
[1362] 将25g(0.0792mol)甲磺酸(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-苯基乙基酯与吗啉(69.37mL，0.792mol)在250mL无水THF中的混合物在惰性气氛下回流8小时。然后将反应冷却至室温，用二乙醚处理，过滤固体。蒸发溶液，得到粗产物，为黄色的油，经过硅胶色谱纯化(洗脱剂：己烷/乙酸乙酯6/4)。分离到11.59g标题产物(48％收率)。
[1363] 步骤4.(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙胺二盐酸盐
[1364] 将11.58g(0.0378mol)(1S)-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯的100mL二氯甲烷溶液用120mL HCl 4M的二 烷溶液处理，搅拌18小时。将混合物用二乙醚稀释，过滤产物(9.48g，90％收率)。
[1365] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.37(m，6H)3.83(m，4H)4.90(m，1H)7.51(m，5H)8.84(bs，3H).
[1366] 通过类似地操作，制备下列化合物：
[1367] (1S)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-苯基乙胺三盐酸盐
[1368] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.78(m，13H)4.47(m，1H)7.46(m，5H)8.45(bs，3H)10.40(bs，1H).
[1369] 实施例65
[1370]
[1371] 步骤1.1-叔丁基-4-(4-硝基苯基)哌嗪
[1372] 将800mg(5.67mmol)1-氟-4-硝基苯、2.07g(1.2mmol)1-叔丁 基哌嗪二氢溴酸盐与3.2mL(20.41mmol)三乙胺的22mL乙腈溶液回流10小时。将混合物冷却至室温，用水稀释，用二氯甲烷萃取。将有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发。经过快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇7/3)，得到860mg标题化合物，为黄色固体。1
[1373] HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.05(s，9H)2.63(m，4H)3.43(m，4H)7.03(d，2H)8.05(d，2H).
[1374] 步骤2.4-(4-叔丁基哌嗪-1-基)苯基胺
[1375] 向840mg(3.189mmol)1-叔丁基-4-(4-硝基苯基)哌嗪的24mL甲醇溶液加入904mg(16.9mmol)氯化铵的6mL水溶液和552mg(9.886mmol)铁。7小时后，将悬液冷却，过滤。向水相分批加入Na2CO3调节pH至10。用二氯甲烷萃取，得到667mg标题胺。
[1376] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.05(s，9H)2.62(m，4H)2.89(m，4H)4.52(s，2H)6.50(d，J＝8.78Hz，2H)6.67(d，J＝8.78Hz，2H).
[1377] 实施例66
[1378]
[1379] N-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-苯基]-乙酰胺
[1380] 将N-(3-羟基-苯基)-乙酰胺(30.2g)的无水四氢呋喃(600mL)悬液用4-羟基-N-甲基哌啶(30.54mL)和三苯膦(68.18g)处理；滴加氮杂二羧酸二乙酯的无水四氢呋喃(40.94mL前者在THF 60mL中)溶液，将混合物在室温下搅拌2小时，然后加热至50℃过夜。加入更多量的三苯膦(28.00g)和氮杂二羧酸二乙酯(14mL)，继续加热另外24小时。
在真空下除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(600mL)，用2N盐酸萃取(3×200mL)。将水层用乙酸乙酯洗涤，加入20％氢氧化钠调节pH至10。用乙酸乙酯萃取(4×100mL)，合并有机萃取液，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂，粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇85∶15，然后+0.1％三乙胺)，得到21g所需化 合物。 [1381] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.52-1.68(m，2H)1.83-1.96(m，2H)2.01(s，
3H)2.14(s，3H)2.46-2.52(m，2H)2.52-2.63(m，2H)4.18-4.20(m，1H)6.59(d，1H)7.05(d，
1H)7.14(t，1H)7.26(s，1H)9.83(s，1H).
在真空下除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(600mL)，用2N盐酸萃取(3×200mL)。将水层用乙酸乙酯洗涤，加入20％氢氧化钠调节pH至10。用乙酸乙酯萃取(4×100mL)，合并有机萃取液，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂，粗产物经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇85∶15，然后+0.1％三乙胺)，得到21g所需化 合物。 [1381] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.52-1.68(m，2H)1.83-1.96(m，2H)2.01(s，
3H)2.14(s，3H)2.46-2.52(m，2H)2.52-2.63(m，2H)4.18-4.20(m，1H)6.59(d，1H)7.05(d，
1H)7.14(t，1H)7.26(s，1H)9.83(s，1H).
[1382] 3-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-苯基胺
[1383] 将N-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-苯基]-乙酰胺(2.604g)的无水乙醇(40mL)溶液用37％盐酸处理，将溶液加热至回流达3小时。在真空下除去溶剂后，将残余物溶于水，用乙酸乙酯(30mL)洗涤。将水溶液用20％氢氧化钠碱化，用乙酸乙酯萃取(4×50mL)；合并有机层，用盐水(4×20mL)、水(2×10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。除去溶剂后，使粗产物(2.00g)从正己烷和乙酸乙酯中结晶，得到1.00g纯的化合物。
[1384] 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.54-1.68(m，2H)1.82-1.94(m，2H)2.12-2.27(m，2H)2.21(s，3H)2.58-2.71(m，2H)4.14-4.29(m，1H)4.98(s，2H)6.09(ddd，J ＝ 8.11，2.32，
0.79Hz，1H)6.14(ddd，J＝ 7.83，2.04，0.98Hz，1H)6.16(t，J ＝ 2.19Hz，1H)6.88(t，J ＝
7.99Hz，1H)
0.79Hz，1H)6.14(ddd，J＝ 7.83，2.04，0.98Hz，1H)6.16(t，J ＝ 2.19Hz，1H)6.88(t，J ＝
7.99Hz，1H)
[1385] 实施例67
[1386] 5-氨基-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-甲醇
[1387]
[1388] 2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯
[1389] 将2-氟-5-硝基苯甲酸(3.702g，20mmol)的无水甲醇(10.00mL)溶液用98％硫酸处理，将溶液加热至回流达4小时。在真空下除去溶剂， 将残余物溶于乙酸乙酯(50mL)。将溶液用饱和含水碳酸氢钠洗涤(3×10mL)，用盐水洗至中性，再用水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂，得到浓稠的油，开始结晶。加入正己烷(3mL)后，将粗产物在冰箱中贮存2天。过滤结晶性化合物，用正己烷洗涤，得到3.147g纯的化合物。浓缩母液，得到第二批(390mg)(y＝89％)。
[1390] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.94(s，3H)7.69(m，1H)8.55(m，1H)8.65(m，1H). [1391] 2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-苯甲酸甲酯
[1392] 将2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯(3.487g，17.511mmol)与N-甲基哌嗪(3.855mL，3.508g，35.022mmol)的30mL无水甲醇溶液加热至回流达5小时。在减压下除去挥发物后，将粗的橙色油用水(约20mL)缓慢处理，在冰浴中搅拌1小时。抽吸过滤所生成的结晶性化合物，用水洗涤，在40℃真空下干燥24小时。得到4.627g黄色化合物(y＝96％)。 [1393] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.25(s，3H)2.46(m，4H)3.27(m，4H)3.87(s，
3H)7.22(d J＝9.27Hz，1H)8.08(dd J＝9.27Hz J＝2.80Hz，1H)8.33(d J＝2.80Hz，1H). [1394] [2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-苯基]-甲醇
3H)7.22(d J＝9.27Hz，1H)8.08(dd J＝9.27Hz J＝2.80Hz，1H)8.33(d J＝2.80Hz，1H). [1394] [2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-苯基]-甲醇
[1395] 将2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-苯甲酸甲酯(1.40g，5.00mmol)的无水二乙醚(60mL)悬液用硼氢化锂(190.5mg，8.75mmol)处理，观察到沉淀的生成。然后加入无水甲醇(0.350mL，280.3mg，8.75mmol)，将溶液加热至回流达2小时。由于反应不完全，每4小时两次加入更多的硼氢化锂(190.5mg)和甲醇(0.350mL)。在冰浴中冷却后，将反应混合物用水以及用1N HCl(6mL)处理，在室温下搅拌15分钟。然后将溶液用1N氢氧化钠碱化至pH 11，用二氯甲烷萃取；将有机萃取液用盐水以及用水洗涤，经无水硫酸钠干燥。蒸发溶剂至干，得到1.35g微褐色固体，经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到1.10g所需化合物(y＝87％)。
[1396] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.28(s，3H)2.52(m，4H)3.03(m，4H)4.54(m，2H)5.53(t，1H)7.17(d J＝8.90Hz，1H)8.08(dd J＝8.90Hz J＝2.92Hz，1H)8.33(d J＝
2.92Hz，1H).
2.92Hz，1H).
[1397] [5-氨基-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-甲醇
[1398] 向粗制的[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-苯基]-甲醇(437mg，1.74mmol)的甲醇(1.5mL)溶液加入氯化铵(NH4Cl)(465mg)、水(4.9mL)和Fe粉(290mg)，将混合物在100℃下加热3小时。将反应混合物过滤，黑色沉淀用MeOH/水1∶1(10mL)洗涤。在真空下除去甲醇，剩余的水用碳酸钠(Na2CO3)碱化，用乙酸乙酯萃取(5×20mL)。将有机萃取液用盐水(2×10mL)以及用水(2×5mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥。蒸发后，所得粗制的橙色固体经过硅胶快速色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/三乙胺90∶10∶0.1)，得到357mg纯的标题化合物(y＝92％)。
[1399] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.26(s，3H)2.52(m，4H)2.73(m，4H)4.48(m，2H)4.75(bs，2H)4.95(t，1H)6.43(dd J ＝8.42Hz J ＝2.68Hz，1H)6.67(d J＝ 2.68Hz，
1H)6.80(d J＝8.42Hz，1H).
1H)6.80(d J＝8.42Hz，1H).
[1400] 实施例68
[1401] 1-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-哌啶-4-酮盐酸盐
[1402]
[1403] 向4-甲基哌嗪-1-碳酰氯盐酸盐(19.9g，0.1mol)与哌啶酮一水合物盐酸盐(15.3g，0.1mol)的200mL二氯甲烷悬液滴加无水三乙胺(45mL，0.33mol)。将混合物搅拌2小时。将有机相用盐水洗涤(2×20mL)，经硫酸钠干燥。过滤后，在真空中蒸发溶剂，将粗产物溶于EtOH(50mL)和二乙醚(100mL)，用HCl 4N的二 烷溶液(25mL)处理。1小时后，过滤沉淀，在烘箱中干燥，得到13g(收率50％)标题化合物。
[1404] 1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.40(t，J ＝ 6.16Hz，4H)2.81(s，3H)3.00-3.11(m，2H)3.12-3.23(m，2H)3.28-3.42(m，2H)3.51(t，J＝6.16Hz，4H)3.73(d，J＝14.27Hz，2H)10.12(s，1H)
[1405] 实施例69
[1406] 1-乙酰基-4-肼基哌啶盐酸盐
[1407]
[1408] 步骤1：N′-(1-乙酰基亚哌啶-4-基)苯酰肼(benzohydrazide)
[1409]
[1410] 将20g(0.142mol)1- 乙 酰 基-4- 哌 啶 酮 溶 于400mL 无 水 乙 醇，加 入21.2g(0.156mol)苯甲酰肼(benzoylhydrazine)。将所得溶液在搅拌下回流6小时。然后在真空中除去溶剂，使残余物在二氯甲烷与水之间分配。将有机层经硫酸钠干燥，蒸发至干。残余物用二乙醚研制，过滤收集到30g(83％收率)标题化合物。
[1411] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.07(s，3H)2.43-2.62(m，4H)3.45-3.74(m，4H)7.51(m，3H)7.84(m，2H)10.7(bs，1H).
[1412] 步骤2：N′-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯酰肼
[1413]
[1414] 将30g(0.12mol)N′-(1-乙酰基亚哌啶-4-基)苯酰肼溶于500mL冰乙酸，加入1g PtO2。将混合物在40psi和室温下氢化12小时。然后通过C盐过滤催化剂，在真空中蒸发滤液。将残余物重新溶于二氯甲烷，用含水NaHCO3洗涤。将溶剂经硫酸钠干燥，在减压下除去，用 二乙醚研制后得到28.6g(92％收率)标题化合物。
[1415] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.25(m，2H)1.81(m，2H)2.00(s，3H)3.75(m，2H)4.10(m，2H)4.19(s，1H)7.49-7.51(m，3H)7.84(m，2H)10.01(s，1H).
[1416] 步骤3：1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-苯甲酰肼-1，2-二羧酸二-叔丁酯
[1417]
[1418] 向28.6g(0.11mol)N′-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯酰肼的700mL乙腈溶液加入53.19g(0.44mol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)和77.2g(0.35mol)二碳酸二叔丁酯。将混合物搅拌过夜，除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷，用含水KHSO4洗涤以除去DMAP。将有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到45g标题化合物，为油。
[1419] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.18and 1.40(2s，18H)1.97(s，3H)4.28(m，1H)7.51-7.53(m，4H).
[1420] 步骤4：1-(1-乙酰基哌啶-4-基)肼-1，2-二羧酸二-叔丁酯
[1421]
[1422] 将45g(0.1mol)1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-苯甲酰肼-1，2-二羧酸二-叔丁酯溶于1L四氢呋喃，加入5.8g(0.14mol)氢氧化锂一水合物的1L水溶液。将混合物在室温下搅拌16小时，在真空中除去四氢呋喃，水层用二氯甲烷萃取若干次。将有机相经硫酸钠干燥，蒸发至干，得到32g(84％收率)标题化合物。1
[1423] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.41和1.42(2s，18H)1.99(s，3H)4.09(m，1H)2.52和3.05/2m，4H)3.95和4.41(2m，4H)8.81(bs，1H).
[1424] 步骤5：1-乙酰基-4-肼基哌啶盐酸盐
[1425]
[1426] 将32g(0.09mol)1-(1-乙酰基哌啶-4-基)肼-1，2-二羧酸二-叔丁酯溶于300mL甲醇，加入30mL HCl 4M的二 溶液。将混合物在室温下搅拌过夜。然后蒸发溶剂，使残余物从乙醇中结晶，得到14g(77％收率)标题化合物。
[1427] 实施例70
[1428] (1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基胺二盐酸盐
[1429]
[1430] 步骤1.N-(叔丁氧羰基)-2-苯基-D-丙氨酸
[1431] 向500mg 2-苯基-D-丙氨酸(3.02mmol)与氢氧化三甲基铵(水溶液10％，2.8mL，3.02mmol)的15mL乙腈悬液加入碳酸二叔丁酯(1.047g，4.8mmol)，将混合物在室温下搅拌
2天。然后在真空下除去溶剂，将残余物溶于水，用二乙醚洗涤。将水层用柠檬酸酸化至pH＝3-4，产物用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并有机相，用水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发。回收标题产物，为白色固体(630mg，收率78％)。
2天。然后在真空下除去溶剂，将残余物溶于水，用二乙醚洗涤。将水层用柠檬酸酸化至pH＝3-4，产物用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并有机相，用水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发。回收标题产物，为白色固体(630mg，收率78％)。
[1432] 步骤2.N-(叔丁氧羰基)-(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺 [1433] 将630mg(2.374mmol)N-(叔丁氧羰基)-2-苯基-D-丙氨酸溶于20mL无水DMF，加入O-(苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲 四氟硼酸盐(TBTU，1.37g，4.27mmo l)、吗啉(0.412mL，4.73mmol)和二异丙基乙胺(1.63mL，9.5mol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷。将溶液用饱和NaHCO3、盐水、水洗涤，经Na2SO4干燥。回收到700mg标题化合物(88％收率)。
[1434] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.40(s，9H)1.65(s，3H)3.33(m，8H)7.35(m，6H). [1435] 步骤3.(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺盐酸盐
[1436] 将630mg(1.884mmol)N-(叔丁氧羰基)-(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺的20mL二 烷溶液用2.5mL HCl 4N的二 烷溶液处理过夜。在真空下除去溶剂，固体用二乙醚研制，得到560mg标题化合物。
1
1
[1437] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.94(s，3H)3.35(m，8H)7.51(m，5H)8.52(bs，3H). [1438] 步骤4.(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-1-苯基乙基胺二盐酸盐
[1439] 在氩气氛下，将412mg(1S)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺盐酸盐(1.522mol)溶于30mL无水THF。在0℃下滴加2M硼烷二甲硫溶液(4.4mL，5.78mmol)，将混合物在0℃下搅拌10分钟，然后使之达到室温(气体放出)。4小时后，将反应用甲醇猝灭(非常小心地加入)，当泡腾停止时用甲醇稀释。在真空下除去THF，将甲醇溶液在60℃下加热30分钟。最后完全除去溶剂，回收330mg胺，随后溶于15mL二 烷，用1.35mL HCl4N的二 烷溶液处理。1小时后，蒸发溶剂，产物用二乙醚研制，得到350mg预期的盐。
1
1
[1440] H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.66(s，3H)2.52(m，6H)3.57(m，4H)7.51(m，5H)8.53(s，3H).
[1441] 实施例71
[1442] (1S)-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺盐酸盐
[1443]
[1444] 步骤1.N-(叔丁氧羰基)-(1S)-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺
[1445] 将1g(3.98mmol)Boc-L-苯基甘氨酸溶于18mL无水DMF，加入O-(苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲 四氟硼酸盐(TBTU，1.92g，5.97mmol)、吗啉(0.555mL，
6.37mmol)和二异丙基乙胺(2.72mL，15.92mol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷。将溶液用饱和NaHCO3、盐水、水洗涤，经Na2SO4干燥。回收
1.327g标题化合物。
6.37mmol)和二异丙基乙胺(2.72mL，15.92mol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后除去溶剂，将残余物溶于二氯甲烷。将溶液用饱和NaHCO3、盐水、水洗涤，经Na2SO4干燥。回收
1.327g标题化合物。
[1446] 步骤2.(1S)-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺盐酸盐
[1447] 将1.327g N-(叔丁氧羰基)-(1S)-2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基胺溶于
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 女性孕后期和哺乳期饮用的强化营养的酸羊乳及制备方法 | 2020-06-28 | 1 |
| 用于保护地下水环境的暗挖隧道止水结构及其施工方法 | 2020-08-28 | 1 |
| 一种七月红梨的栽培方法 | 2021-03-06 | 2 |
| 具有海量医疗分析的医疗处理计算机规划方法和系统 | 2020-05-20 | 0 |
| 一种石菖蒲种植方法 | 2022-05-31 | 0 |
| 二尖瓣假体 | 2023-01-05 | 0 |
| 一种泡沫喷雾干燥法制备雨生红球藻中虾青素微胶囊及其制备方法 | 2020-09-19 | 2 |
| 一种母猪分娩期与哺乳期的饲养方法 | 2020-10-27 | 1 |
| 一种驱除黔北麻羊体外寄生虫的方法 | 2021-05-15 | 2 |
| 一种集家居服和内衣于一体的孕产妇哺乳衣 | 2020-05-14 | 2 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈