技术领域
[0001] 本
发明属于化学制药技术领域，具体涉及一种苹果酸卡博替尼合成中杂质的制备方法。
背景技术
[0002] 卡博替尼(Cabozantinib)是由美国Exelixis
生物制药公司研发的新型分子靶向药物。2012年11月29日美国食品药物管理局(FDA)批准卡博替尼用于不可手术
切除的恶性局部晚期或转移性甲状腺髓样癌的
治疗，主要靶点：C-met，VEGFR，也有效作用于Ret，Kit，FLT1，FLT3，FLT4，Tie2和AXL，微弱抑制RON和PDGFR-β。体外生化和(或)细胞学分析显示，卡博替尼抑制RET、
肝细胞生长因子受体(human hepatocyte growthfactor receptor，MET)、血管内皮生成因子受体1(Vascular endothelial growth factor receptor 1，VEGFR-1)、VEGFR-2、VEGFR-3、干细胞生长因子受体(stemcell factor receptor，KIT)、酪
氨酸激酶受体(receptortyrosine kinase，TRKB)、FMS样酪氨酸激酶3(FMS-liketyrosine kinase-3，FLT-3)、AXL及上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(human tyrosine kinase with immunoglobulinlikeand EGF-like domains 2，TIE-2)的酪氨酸激酶活性，以上激酶受体在正常细胞和
肿瘤细胞生长过程中均起着重要作用，上述受体异常表达在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用，包括抑制肿瘤细胞凋亡，参与肿瘤血管生成及侵袭等病理过程。卡博替尼通过抑制上述激酶活性而发挥抗肿瘤作用，杀死肿瘤细胞，减少转移并抑制肿瘤血管新生。卡博替尼为CYP3A4底物，CYP3A4抑制药会降低其代谢产物N-
氧化物的形成(＞80％)，而CYP2A9抑制药则对该药的代谢影响较小(＜20％)，CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C19、CYP2D6及CYP2E1对该药代谢无影响。
[0003] 苹果酸卡博替尼的合成路线如下：
[0004]
[0005]
[0006] 其中：步骤1：POCl3/CAN，75-85℃，20-24h；步骤2：DMSO，t-BuOK，100-120℃，4-6h；步骤3：DMF/HCTU/DIEA，10-30℃，4-6h THF/EtOH，10-12h；步骤4：THF/ACN，50-65℃，4-6h。
[0007] 缩写备注：
[0008] DMF:N，N-二甲基甲酰胺；
[0009] DMSO：二甲基亚佩；
[0010] THF：四氢呋喃；
[0011] ACN：乙腈；
[0012] DIEA:N，N-二异丙基乙胺；
[0013] HCTU：6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟
磷酸酯；
[0014] POCI3：三氯氧磷；
[0016] 起始物料SM-3中可能会引入环丙基二酸、对氟苯胺(SM-3-A)和残留脱氟杂质SM-3-B，对氟苯胺很容易除去，而SM-3-B在后续的反应过程中还会发生反应；此外，步骤(2)和步骤(3)反应可能产生杂质。
[0017] 为控制药品的
质量，需要对药品的杂质进行控制，需要所用物料、中间产品及可能产生的杂质的对照品。物料、中间体需要精制标化使用，其他杂质需要合成。上述杂质目前没有文献报道过合成方法。
发明内容
[0018] 针对上述杂质目前没有文献报道过合成方法的
缺陷，本发明的目的在于提供一种苹果酸卡博替尼杂质的制备方法。
[0019] 一种苹果酸卡博替尼合成中杂质的制备方法，其特征在于：所述杂质包括KB-2-A，KB-A和SM-3-B；
[0020] 所述KB-2-A的制备方法，包括如下步骤：
[0021] 步骤a，向反应器皿A中依次加入KB-1，KBTN-SM-2，异丙醇，加热回流5-7小时，降至室温，搅拌14-18小时；
[0022] 步骤b，抽滤，80-120ml异丙醇淋洗
滤饼；
[0023] 步骤c，向反应器皿B中加入180-220ml乙醚，滤饼，室温搅拌1-3小时，抽滤，45-55℃鼓
风烘干1.5-2.5小时，得黄色固体即为KB-2-A杂质；
[0024] 所述KB-A杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0025] 步骤(1)向反应器皿C中依次加入SM3-0，THF，搅拌下滴加Et3N，Et3N内温为10-20℃，Et3N滴加完毕后保温反应0.5-1.5小时；
[0026] 步骤(2)，向步骤(1)保温反应结束后滴加SOCl2，滴加过程中有放热现象，滴加完毕后搅拌3-5小时，得反应液；
[0027] 步骤(3)用400-600ml EA稀释反应液，250-350ml 1N
盐酸萃取，弃去有机相，将
水相有1N盐酸调pH＝5～6，抽滤，滤饼用150-250ml EA淋洗，45-55℃鼓风烘干至恒重，得固体即为KB-A杂质；
[0028] SM-3-B杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0029] 步骤A，向反应器皿D中依次加入SM3-0，EA，滴加Et3N，Et3N的内温小于5℃，滴加完毕，室温搅拌0.5-1.5小时；
[0030] 步骤B，之后滴加SOCl2，SOCl2内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌3-5小时；
[0031] 步骤C，之后滴加苯胺，苯胺内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌14-18小时；
[0032] 步骤D，之后加13-17ml水淬灭反应，分相，15-25ml水洗涤有机相，
碳酸钠水溶液洗涤有机相，保留水相，弃去有机相；
[0033] 步骤E，1N盐水调pH至3.5-4.5，2*100ml EA萃取水相，合并有机相，40-60ml饱和NaCl洗涤有机相，8-12g无水
硫酸钠干燥有机相，抽滤，减压浓缩，得固体即为SM-3-B杂质。
[0034] 本
申请的技术方案中，KB-2-A，KB-A和SM-3-B的反应式分别如下
[0035]
[0036] 制备了起始物料中的杂质SM-3-B，中间产品中的杂质KB-2-A和KB-A，目的是为了控制苹果酸卡博替尼的质量，对制备苹果酸卡博替尼过程中的杂质进行了控制；
[0037] 制备的杂质纯度高，可作为对照品对苹果酸卡博替尼中间体和起始物料进行对照，对苹果酸卡博替尼中间体和起始物料进行定性和定量分析。
[0038] 优选的，KB-1，KBTN-SM-2和异丙醇的投料比为5g：3g：50ml。
[0039] 优选的，SM3-0，KB-2，SOCl2，Et3N与THF的投料比为13.47g：30.6g：12.2g：10.59g：150ml。
[0040] 优选的，SM3-0，苯胺，SOCl2，Et3N与EA的投料比为6.5g：4.1g：6.0g：5.11g：65ml。
[0041] 优选的，
[0042] 步骤a中，反应器皿A为500ml四口瓶，加热回流6小时，降至室温，搅拌16小时；
[0043] 步骤b，抽滤，100ml异丙醇淋洗滤饼；
[0044] 步骤c中，向500ml单口瓶中加入200ml乙醚，滤饼，室温搅拌2小时，抽滤，50℃鼓风烘干2小时。
[0045] 优选的，
[0046] 步骤(1)中，反应器皿C为250ml四口瓶，保温反应的时间为1小时；
[0047] 步骤(2)中，滴加完毕后搅拌4小时；
[0048] 步骤(3)中，用500ml EA稀释反应液，300ml 1N盐酸萃取，弃去有机相，将水相有1N盐酸调pH＝5.5，抽滤，滤饼用200ml EA淋洗，50℃鼓风烘干至恒重。
[0049] 优选的，
[0050] 步骤A，向250ml四口瓶中依次加入SM3-0，EA，滴加Et3N，Et3N的内温小于5℃，滴加完毕，室温搅拌1小时；
[0051] 步骤B，之后滴加SOCl2，SOCl2内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌4小时；
[0052] 步骤C，之后滴加苯胺，苯胺内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌16小时；
[0053] 步骤D，之后加15ml水淬灭反应，分相，20ml水洗涤有机相，碳酸钠水溶液洗涤有机相，保留水相，弃去有机相；
[0054] 步骤E，1N盐水调pH至4，2*100ml EA萃取水相，合并有机相，50ml饱和NaCl洗涤有机相，10g无水硫酸钠干燥有机相，抽滤，减压浓缩，得固体即为SM-3-B杂质。
[0055] 本申请的技术方案中：
[0056] KB-1为4-氯-6,7-二甲氧基喹啉，CAS：35654-56-9，分子量223.7；
[0057] KBTN-SM-2为对氨基
苯酚，CAS：123-30-8，分子量109.5；
[0058] KB-2-A为4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉基)氨基]苯酚，CAS:748707-58-6分子量：296.32；
[0059] SM3-0为1,1-环丙烷二
羧酸，分子量130.1；
[0060] KB-2为4-[(6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基]苯胺，CAS：190728-25-7，分子量296.1；
[0061] SOCl2为亚硫酰氯又名氯化亚砜；
[0062] Et3N为三乙胺；
[0063] THF为四氢呋喃；
[0064] KB-A为1-{4-[(6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基]苯胺基}酰基环丙烷羧酸，分子量408.38；
[0065] SM3-0为1,1,-环丙烷二羧酸，分子量93.14；
[0066] EA为乙酸乙酯。
[0067] 综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
[0068] (1)制备了起始物料中的杂质SM-3-B，中间产品中的杂质KB-2-A和KB-A，作为苹果酸卡博替尼中间体、
原料药及其复方制剂质量研究的对照品，目的是为了控制苹果酸卡博替尼的质量，对制备苹果酸卡博替尼过程中的杂质进行了控制；
[0069] (2)提供了制备SM-3-B，KB-2-A和KB-A的方法；
[0070] (3)制备的杂质纯度高，可作为对照品对苹果酸卡博替尼中间体和起始物料进行对照，对苹果酸卡博替尼中间体和起始物料进行定性和定量分析。
具体实施方式
[0071] 本
说明书中公开的所有特征，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
[0073] 苹果酸卡博替尼杂质演变过程：
[0074] KB-2-A杂质：步骤(2)亲核取代反应中引入的杂质。
[0075] 在该步反应中，KB-1和对氟苯胺在
碱性条件下，放生亲核取代反应，在是不同的碱或不同的
溶剂时，会生成KB-2和KB-2-A两种产物，见如下的反应式：
[0076]
[0077] 该杂质的控制方法如下：通过控制反应条件可以控制KB-2-A的生成，在本反应条件下(叔丁醇钾/二甲基亚碱)，该副产物的生成量非常少，通过后处理即可除去。
[0078] 在中间体KB-2的分析方法建立及质量控制过程中，考虑了杂质KB-2-A的存在。通过可行的分析方法可以控制该杂质的含量。由于该杂质可以进行后续的反应，为了在保证终产品的质量，所以在中间体KB-2的质控中，将该杂质KB-2-A的含量限定在≤0.1％。
[0079] KB-A杂质：步骤(3)缩合反应中引入的杂质。
[0080] KB-A杂质的化学式如下
[0081]
[0082] 产生机理：杂质A的产生是由于步骤3中，中间体KB-2和起始物料SM-3中残留的环丙基二酸生成的过程如下：
[0083]
[0084] SM-3-B杂质：起始物料1-(4-氟苯基氨基甲酰基)环丙烷羧酸(SM-3)引入杂质，[0085] 合成路线如下：
[0086]
[0087] 起始物料SM-3中会引入环丙基二酸、对氟苯胺(SM-3-A)和残留脱氟杂质SM-3-B，对氟苯胺很容易除去，而SM-3-B在后续的反应过程中发生如下反应：
[0088]
[0089] 上述产生杂质的结构和终产品极其相似，很难在最后的纯化过程中除去。为了保证终产品的质量合格，所以，控制起始物料SM-3中杂质SM-3-B的含量不得过0.1％。这样保证在最后的产物中由于SM-3-B产生的新杂质的含量在限度内。
[0090] 实施例2
[0091] 所述KB-2-A的制备方法，包括如下步骤：
[0092] 步骤a，向反应器皿A中依次加入KB-1，KBTN-SM-2，异丙醇，加热回流5小时，降至室温，搅拌14小时；
[0093] 步骤b，抽滤，80ml异丙醇淋洗滤饼；
[0094] 步骤c，向反应器皿B中加入180ml乙醚，滤饼，室温搅拌1小时，抽滤，45℃鼓风烘干2.5小时，得黄色固体即为KB-2-A杂质。
[0095] 本实施例中，得黄色固体13g，产品纯度为97％，收率为49.0％。
[0096] 实施例3
[0097] 所述KB-2-A的制备方法，包括如下步骤：
[0098] 步骤a，向反应器皿A中依次加入KB-1，KBTN-SM-2，异丙醇，加热回流5-7小时，降至室温，搅拌14-18小时；
[0099] 步骤b，抽滤，80-120ml异丙醇淋洗滤饼；
[0100] 步骤c，向反应器皿B中加入180-220ml乙醚，滤饼，室温搅拌1-3小时，抽滤，45-55℃鼓风烘干1.5-2.5小时，得黄色固体即为KB-2-A杂质(KB-2-A4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉基)氨基]苯酚CAS:748707-58-6分子量：296.32)；KB-1，KBTN-SM-2和异丙醇的投料比为20g：12g：200ml。
[0101] 本实施例中，得黄色固体12g，产品纯度为96％，收率为45.2％。
[0102] 实施例4
[0103] 所述KB-2-A的制备方法，包括如下步骤：
[0104] 步骤a，向反应器皿A中依次加入KB-1，KBTN-SM-2，异丙醇，加热回流7小时，降至室温，搅拌18小时；
[0105] 步骤b，抽滤，120ml异丙醇淋洗滤饼；
[0106] 步骤c，向反应器皿B中加入220ml乙醚，滤饼，室温搅拌3小时，抽滤，55℃鼓风烘干1.5小时，得黄色固体即为KB-2-A杂质。
[0107] 本实施例中，得黄色固体11g，产品纯度为97％，收率为41.4％。
[0108] 实施例5
[0109] 所述KB-A杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0110] 步骤(1)向反应器皿C中依次加入SM3-0，THF，搅拌下滴加Et3N，Et3N内温为10℃，Et3N滴加完毕后保温反应1.5小时，反应器皿C为250ml四口瓶；
[0111] 步骤(2)，向步骤(1)保温反应结束后滴加SOCl2，滴加过程中有放热现象，滴加完毕后搅拌3小时，得反应液；
[0112] 步骤(3)用400ml EA稀释反应液，250ml 1N盐酸萃取，弃去有机相，将水相有1N盐酸调pH＝5，抽滤，滤饼用150ml EA淋洗，45℃鼓风烘干至恒重，得固体即为KB-A杂质(KB-A 1-{4-[(6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基]苯胺基}酰基环丙烷羧酸分子量408.38)；
[0113] SM3-0，KB-2，SOCl2，Et3N与THF的投料比为13.47g：30.6g：12.2g：10.59g：150ml。
[0114] 得固体16g，产率38％，纯度90％。
[0115] 实施例6
[0116] 所述KB-A杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0117] 步骤(1)中，反应器皿C为250ml四口瓶，保温反应的时间为1小时；
[0118] 步骤(2)中，滴加完毕后搅拌4小时；
[0119] 步骤(3)中，用500ml EA稀释反应液，300ml 1N盐酸萃取，弃去有机相，将水相有1N盐酸调pH＝5.5，抽滤，滤饼用200ml EA淋洗，50℃鼓风烘干至恒重；
[0120] SM3-0，KB-2，SOCl2，Et3N与THF的投料比为13.47g：30.6g：12.2g：10.59g：150ml。
[0121] 得固体18g，产率42％，纯度92％。
[0122] 实施例7
[0123] 所述KB-A杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0124] 步骤(1)向反应器皿C中依次加入SM3-0，THF，搅拌下滴加Et3N，Et3N内温为20℃，Et3N滴加完毕后保温反应0.5小时，反应器皿C为250ml四口瓶；
[0125] 步骤(2)，向步骤(1)保温反应结束后滴加SOCl2，滴加过程中有放热现象，滴加完毕后搅拌5小时，得反应液；
[0126] 步骤(3)用600ml EA稀释反应液，350ml 1N盐酸萃取，弃去有机相，将水相有1N盐酸调pH＝6，抽滤，滤饼用250ml EA淋洗，55℃鼓风烘干至恒重，得固体即为KB-A杂质；
[0127] SM3-0，KB-2，SOCl2，Et3N与THF的投料比为13.47g：30.6g：12.2g：10.59g：150ml。
[0128] 得固体17g，产率40％，纯度90％。
[0129] 实施例8
[0130] SM-3-B杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0131] 步骤A，向反应器皿D中依次加入SM3-0，EA，滴加Et3N，Et3N的内温小于5℃，滴加完毕，室温搅拌0.5小时；
[0132] 步骤B，之后滴加SOCl2，SOCl2内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌3小时；
[0133] 步骤C，之后滴加苯胺，苯胺内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌14小时；
[0134] 步骤D，之后加13ml水淬灭反应，分相，15ml水洗涤有机相，碳酸钠水溶液洗涤有机相，保留水相，弃去有机相；
[0135] 步骤E，1N盐水调pH至3.5，2*100ml EA萃取水相，合并有机相，40ml饱和NaCl洗涤有机相，8g无水硫酸钠干燥有机相，抽滤，减压浓缩，得固体即为SM-3-B杂质。
[0136] 本实施例中，得SM-3-B固体量为6.5g，收率63％，纯度97％。
[0137] 实施例9
[0138] SM-3-B杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0139] 步骤A，向250ml四口瓶中依次加入SM3-0，EA，滴加Et3N，Et3N的内温小于5℃，滴加完毕，室温搅拌1小时；
[0140] 步骤B，之后滴加SOCl2，SOCl2内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌4小时；
[0141] 步骤C，之后滴加苯胺，苯胺内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌16小时；
[0142] 步骤D，之后加15ml水淬灭反应，分相，20ml水洗涤有机相，碳酸钠水溶液洗涤有机相，保留水相，弃去有机相；
[0143] 步骤E，1N盐水调pH至4，2*100ml EA萃取水相，合并有机相，50ml饱和NaCl洗涤有机相，10g无水硫酸钠干燥有机相，抽滤，减压浓缩，得固体即为SM-3-B杂质(1-(苯基氨基甲酰基)环丙烷羧酸，CAS:145591-80-6，分子量205.21)。
[0144] 本实施例中，得SM-3-B固体量为7g，收率67％，纯度97％。
[0145] 实施例10
[0146] SM-3-B杂质的制备方法，包括如下步骤：
[0147] 步骤A，向反应器皿D中依次加入SM3-0，EA，滴加Et3N，Et3N的内温小于5℃，滴加完毕，室温搅拌1.5小时；
[0148] 步骤B，之后滴加SOCl2，SOCl2内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌5小时；
[0149] 步骤C，之后滴加苯胺，苯胺内温<10℃，滴加完毕，室温搅拌18小时；
[0150] 步骤D，之后加17ml水淬灭反应，分相，25ml水洗涤有机相，碳酸钠水溶液洗涤有机相，保留水相，弃去有机相；
[0151] 步骤E，1N盐水调pH至4.5，2*100ml EA萃取水相，合并有机相，60ml饱和NaCl洗涤有机相，12g无水硫酸钠干燥有机相，抽滤，减压浓缩，得固体即为SM-3-B杂质。
[0152] 本实施例中，得SM-3-B固体量为7.2g，收率70％，纯度96％。
[0153] 以上实施例中，2*100ml EA表示用100ml的EA萃取，再用100ml的EA萃取，也就是萃取两次。
[0154] 如上所述即为本发明的实施例。本发明不局限于上述实施方式，任何人应该得知在本发明的启示下做出的结构变化，凡是与本发明具有相同或相近的技术方案，均落入本发明的保护范围之内。
