201 |
幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒和应用 |
CN201610070257.3 |
2016-02-02 |
CN105506160B |
2019-02-26 |
张艳梅; 赵虎; 赵付菊; 胡彬婕; 王诗雯; 陈飞; 吴勇; 缪应新; 张景皓; 姜文荣; 徐玲丽; 南丽 |
本发明涉及一种幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒和应用。幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系包括多对引物,分别针对菌种鉴定基因(16S rRNA),定量分析基因ureC和ß‑globin,以及毒力基因(cagA、vacA‑s1、vacA‑s2、vacA‑m1、vacA‑m2、iceA1、iceA2、dupA、oipA和luxS)。本发明的幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒不需要采用常规培养等步骤,可在同一反应体系直接对组织样本进行菌种鉴定、定量、毒力的同步检测和分析,弥补了常规检测方法通量低、耗时长和检出率低等缺点,检测结果的准确性明显提高,第一时间为临床提供全面、精准、低成本的病原学诊断,为幽门螺杆菌感染的精准诊断与鉴别诊断和疾病预后判断提供重要参考。 |
202 |
一种快速检测绿脓杆菌强毒力菌株的方法、检测试剂盒和应用 |
CN201811073258.9 |
2018-09-14 |
CN109266763A |
2019-01-25 |
谢之景; 张伯顺 |
本发明涉及一种快速检测绿脓杆菌强毒力菌株的方法、检测试剂盒和应用,本发明检测方法采用三重PCR方法,同时检测绿脓杆菌exoT、exoS及toxA毒力基因,如果能同时扩增出exoT、exoS及toxA的基因片段,则所检绿脓杆菌为强毒力菌株;如果未能同时扩增出exoT、exoS及toxA的基因片段,则所检绿脓杆菌不是强毒力菌株。三重PCR方法采用三对可分别扩增exoT基因片段、exoS基因片段、toxA基因片段的特异性引物。本发明还提供用于快速检测绿脓杆菌强毒力菌株的PCR引物组及含该引物组的快速检测绿脓杆菌强毒力菌株的试剂盒,及所述试剂盒在检测貂源绿脓杆菌中的应用。本发明具有检测便捷快速、特异性强、敏感性高等优点,可以快速准确地实现绿脓杆菌强毒力菌株的检测。 |
203 |
一种幽门螺旋杆菌毒力亚型混合代表株群及其制备的免疫牛乳 |
CN201810153602.9 |
2018-02-22 |
CN108660089A |
2018-10-16 |
单保恩; 赵川; 史中立; 胡代伦; 赵连梅; 刘维华; 徐保红; 殷长甫; 王苋 |
本发明提供一种幽门螺旋杆菌毒力亚型混合代表株群,利用该代表株群制备的奶牛疫苗,奶牛疫苗免疫奶牛制备的免疫牛乳和利用免疫牛乳中多克隆IgG抗体制备的生物制品,以用于满足临床特异性治疗幽门螺杆菌感染的需要,同时解决了细菌耐药性等问题。具有成本低、患者依从性好、可长期饮用等优点。 |
204 |
对鳞翅目害虫高毒力的苏云金杆菌YN108、培养方法及其应用 |
CN201810251762.7 |
2018-03-26 |
CN108486008A |
2018-09-04 |
金大勇 |
本发明属于微生物杀虫剂技术领域,具体涉及一种对鳞翅目害虫高毒力的苏云金杆菌YN108、培养方法及其应用,所述苏云金杆菌YN108为Bacillus thuringensis subsp.aizawai,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15140,保藏日期为2018年01月02日。本发明公开的苏云金杆菌YN108对鳞翅目害虫的毒力很高,尤其对斜纹夜蛾3龄幼虫的半致死浓度(LC50)只有3.25×105cfu/mL,比已经公开发表的YN1-1菌株及CAB109菌株还要小。同时,其室内药效及田间防效也好于已经商品化的苏云金杆菌鲇泽亚种T产品、SB产品及苏云金杆菌库斯塔克亚种SL产品,表现出了优良的杀虫活性。此外,本发明的苏云金杆菌YN108使用过后无残留,无抗药性,绿色环保。 |
205 |
一种用于检测哈维弧菌多重毒力基因的引物组、试剂盒及其应用 |
CN201711158684.8 |
2017-11-20 |
CN107916294A |
2018-04-17 |
邓益琴; 冯娟; 苏友禄; 刘婵; 吴金军; 郭志勋 |
本发明公开了一种用于检测哈维弧菌多重毒力基因的引物组,所述引物组包括8个引物对,每个引物对包括上游引物和下游引物,各引物的核苷酸序列如表1所示。还公开了含有上述引物组的用于检测哈维弧菌毒力基因的多重PCR检测试剂盒。以及上述引物组及试剂盒在检测环境样本中哈维弧菌污染中的应用。本发明针对已知8种哈维弧菌的毒力基因设计特异性引物,通过单管反应,一次性快速高效的检测8种基因而得知待检样品中是否含有携带毒力基因、具有潜在致病能力的哈维弧菌,其检测覆盖面广,可大大提高哈维弧菌致病性评价的准确性。 |
206 |
一种对秀丽隐杆线虫高毒力的几丁质酶及其编码基因 |
CN201510124341.4 |
2015-03-20 |
CN104894149B |
2018-04-10 |
刘子铎; 陈林; 吴高兵 |
本发明属于农业微生物基因工程技术领域,具体涉及一种对秀丽隐杆线虫高毒力的几丁质酶及其编码基因。本发明克隆的基因来源于假单胞菌。本发明包含几丁质酶基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/6p‑pachi保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M2015139。经过生物学功能验证,证明该杀虫几丁质酶对秀丽隐杆线虫具有毒性,可以通过降解秀丽隐杆线虫的虫卵和角质层来达到毒杀效果。本发明公开了所述几丁质酶在生防线虫方面的应用。 |
207 |
重组低毒力1型牛疱疹病毒(BoHV‑1)疫苗载体 |
CN201280074502.8 |
2012-07-04 |
CN104640991B |
2017-09-19 |
蒂莫西·约翰·马奥尼 |
本公开内容教导一般属于牛科动物的疫苗接种和疾病控制领域。提供了重组1型牛疱疹病毒(BoHV‑1)疫苗载体来有效控制一种或更多种牛病原体如与牛呼吸道疾病综合症相关的那些牛病原体,例如牛病毒性腹泻病毒(BVDV),并且其改善了由此引起的疾病病症。本文还包括用于管理受限或成群牛科动物的方案。 |
208 |
一种利用简易装置测定桔小实蝇胃毒毒力的方法 |
CN201510140895.3 |
2015-03-27 |
CN104770340B |
2017-07-11 |
许益镌; 陈朗杰; 曾玲 |
本发明属于害虫抗药性监测技术领域,公开了一种利用简易装置测定桔小实蝇胃毒毒力的方法。该方法包括步骤:在塑料杯的底部开6个1.5~3.5mm直径的小孔,并在杯壁用解剖针扎若干个小孔;将目标药剂用溶剂或饵剂稀释成不同浓度的工作液;将饥饿24h处理的桔小实蝇成虫吸入准备好的塑料杯中,用纱布封住塑料杯的开口,将塑料杯倒置;向6个移液器吸头中加入工作液然后尖头向下分别插入塑料杯底部的小孔中,在每个移液器吸头的上端开口处塞上棉球减少蒸发并在适宜的条件中饲养,再根据目标药剂的作用时间选择不同时间记录死虫数。整个过程操作简单,并能准确测出胃毒作用毒力。本发明也可以用于其他舐吸式口器昆虫胃毒毒力作用的测定。 |
209 |
一种沙门氏菌毒力岛基因mgtC、sseL双重PCR检测方法及用途 |
CN201611101231.7 |
2016-12-05 |
CN106755353A |
2017-05-31 |
徐睿; 王燕群; 李凤琴; 刘余 |
本发明属于微生物检测技术领域,具体提供了一种沙门氏菌毒力岛基因mgtC、sseL的双重PCR快速检测方法,并具体公开引物、反应体系和反应条件等。该检测操作简单、检测时间短、特异性强、敏感度高,结果判定简单。 |
210 |
超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株及其应用 |
CN201611024568.2 |
2016-11-17 |
CN106754743A |
2017-05-31 |
李新生; 崔保安; 黄宗梅; 周云飞; 常婧竹; 王洁琼; 王莉 |
本发明公开了一种超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株,其保藏编号为:CCTCC NO:V201316,以及该超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株在制备鸡传染性法氏囊病病毒疫苗、诊断用抗原试剂、诊断用阳性血清试剂和治疗用卵黄抗体、抗血清中的应用。本发明的鸡传染性法氏囊病病毒CL40毒株,具有超强流行毒株特性,具有良好的免疫原性,而且适应细胞规模化培养。本发明的鸡传染性法氏囊病病毒CL40毒株的TCID50为10‑8.0/0.1 ml,对超强毒株IBDV‑CL的致死性攻击,具有100%的保护率,同时免疫效力稳定、持续时间长,对预防和控制鸡传染性法氏囊超强毒流行具有重要的价值。 |
211 |
弱毒力CMV载体表达抗性基因增强植物抗除草剂性能的应用 |
CN201610256085.9 |
2016-04-22 |
CN105925603A |
2016-09-07 |
竺锡武; 彭日民; 王强; 张媛媛; 吴娟 |
本发明公开了一种黄瓜花叶病毒弱毒力载体表达抗除草剂基因在增强植物抗除草剂性能方面的应用。黄瓜花叶病毒弱毒力载体的构建方法包括如下步骤:1)、改造病毒CMV成缺失2b基因序列的弱病毒表达载体;具体为:将已构建好的病毒CMV侵染性克隆质粒之一pCB‑CMVF209采用酶切连接的方法改造,使2b基因缺失,并加入酶切位点,构建成为弱毒力的病毒表达载体‑‑‑弱病毒载体;2)、将抗除草剂基因编码区(ORF)序列插入步骤1)所得的弱病毒载体构建重组病毒表达载体;构建所得的含抗除草剂基因编码区序列的重组弱病毒表达载体用于增强植物对除草剂的抗性。 |
212 |
弱毒力CMV载体在表达抗虫基因增强植物抗虫性方面的应用 |
CN201610257242.8 |
2016-04-22 |
CN105907781A |
2016-08-31 |
竺锡武; 吴娟; 王强; 刘津; 李晓超; 王青; 陈亚妮 |
本发明公开了一种黄瓜花叶病毒弱毒力载体在增强植物抗虫性能方面的应用。所述黄瓜花叶病毒弱毒力载体的构建方法包括如下步骤:1)、改造病毒CMV成缺失2b基因序列的弱病毒表达载体;具体为:将已构建好的病毒CMV侵染性克隆质粒之一pCB?CMVF209采用酶切连接的方法改造,使2b基因缺失,并加入酶切位点,构建成为弱毒力的病毒表达载体???弱病毒载体;2)、将抗虫基因编码区(ORF)序列插入步骤1)所得的弱病毒载体构建重组弱病毒表达载体;构建所得的含抗虫基因编码区序列的重组弱病毒表达载体用于增强植物对害虫的抗性。 |
213 |
一种用于检测鸭疫里默氏菌主要毒力因子的多重PCR引物 |
CN201610483937.8 |
2016-06-28 |
CN105886658A |
2016-08-24 |
陈红梅; 黄瑜; 程龙飞; 施少华; 傅光华; 万春和; 傅秋玲; 陈翠腾; 刘荣昌 |
本发明提供了一种用于检测鸭疫里默氏菌主要毒力因子的多重PCR引物,本发明根据NCBI (National Center for Biotechnology Information)数据库中鸭疫里默氏菌CH3株全基因序列,对该菌的TonB依赖受体(TbdR1)、OmpA、TonB1蛋白、TonB2蛋白和载铁体相互作用蛋白(SIP)等毒力基因的保守序列进行引物设计,于国内外率先建立鸭疫里默氏菌主要毒力因子的多重PCR引物,该方法灵敏度高、特异性强,最低可检测169pg的核酸。 |
214 |
一种评价Bt毒蛋白对鳞翅目幼虫毒力的测定方法 |
CN201610216309.3 |
2016-04-08 |
CN105866425A |
2016-08-17 |
李国平; 封洪强; 黄建荣; 钟景; 封洪云; 黄博; 田彩红; 邱峰 |
一种评价Bt毒蛋白对鳞翅目幼虫毒力的测定方法,包括以下步骤:(1)人工饲料预处理;(2)饲料表面的Bt毒蛋白涂染和毒力的测定;(3)试验统计。本发明Bt蛋白毒力测定方法采用挤瓶饲料倒入到24孔培养板中,速度快、效率高,能够形成均一的表面积,加入Bt蛋白后,能形成均匀稳定的表面浓度,不仅可以准确的测定Bt蛋白毒力,还能节约蛋白,达到测试成本较低的效果。 |
215 |
幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒和应用 |
CN201610070257.3 |
2016-02-02 |
CN105506160A |
2016-04-20 |
张艳梅; 赵虎; 赵付菊; 胡彬婕; 王诗雯; 陈飞; 吴勇; 缪应新; 张景皓; 姜文荣; 徐玲丽; 南丽 |
本发明涉及一种幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒和应用。幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系包括多对引物,分别针对菌种鉴定基因(16S rRNA),定量分析基因ureC和?-globin,以及毒力基因(cagA、vacA-s1、vacA-s2、vacA-m1、vacA-m2、iceA1、iceA2、dupA、oipA和luxS)。本发明的幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系及其试剂盒不需要采用常规培养等步骤,可在同一反应体系直接对组织样本进行菌种鉴定、定量、毒力的同步检测和分析,弥补了常规检测方法通量低、耗时长和检出率低等缺点,检测结果的准确性明显提高,第一时间为临床提供全面、精准、低成本的病原学诊断,为幽门螺杆菌感染的精准诊断与鉴别诊断和疾病预后判断提供重要参考。 |
216 |
一种利用基因操作提高球孢白僵菌分生孢子产量和毒力的方法 |
CN201510466294.1 |
2015-08-03 |
CN105274130A |
2016-01-27 |
张永军; 何张江; 罗林丽; 罗志兵; 范艳华; 裴炎 |
本发明涉及一种提高球孢白僵菌分生孢子产量和毒力的方法,通过破坏球孢白僵菌Pmt1基因编码的MIR结构域,并保留完成的PMT结构域,获得球孢白僵菌突变菌株,所述球孢白僵菌突变菌株具有提高的分生孢子产量和毒力。 |
217 |
一种绿僵菌和氯虫苯甲酰胺联合使用的杀虫毒力评价方法 |
CN201510247617.8 |
2015-05-15 |
CN104865350A |
2015-08-26 |
曹广春; 贾苗; 李一波; 张泽华 |
本发明公开了一种氯虫苯甲酰胺和绿僵菌联合使用的杀虫毒力评价方法。本发明提供了一种鉴定化学药剂和菌剂联用杀虫效果的方法,包括如下步骤:1)分别检测化学药剂、菌剂和由化学药剂和菌剂组成的混剂的LC50值;2)将所述菌剂浓度单位换算为化学药剂浓度单位;3)计算化学药剂和菌剂联用的共毒系数;若所述共毒系数大于等于100,即化学药剂和菌剂联用杀虫效果大于等于单独作用效果,则为增效效果;若所述共毒系数小于100,即化学药剂和菌剂联用杀虫效果小于单独作用效果则为拮抗效果。本发明以绿僵菌菌株、氯虫苯甲酰胺和飞蝗为实验材料,用统一的单位来换算绿僵菌和氯虫苯甲酰胺的LC50,然后计算共毒系数,设定评价标准。 |
218 |
一种利用简易装置测定桔小实蝇胃毒毒力的方法 |
CN201510140895.3 |
2015-03-27 |
CN104770340A |
2015-07-15 |
许益镌; 陈朗杰; 曾玲 |
本发明属于害虫抗药性监测技术领域,公开了一种利用简易装置测定桔小实蝇胃毒毒力的方法。该方法包括步骤:在塑料杯的底部开6个1.5~3.5mm直径的小孔,并在杯壁用解剖针扎若干个小孔;将目标药剂用溶剂或饵剂稀释成不同浓度的工作液;将饥饿24h处理的桔小实蝇成虫吸入准备好的塑料杯中,用纱布封住塑料杯的开口,将塑料杯倒置;向6个移液器吸头中加入工作液然后尖头向下分别插入塑料杯底部的小孔中,在每个移液器吸头的上端开口处塞上棉球减少蒸发并在适宜的条件中饲养,再根据目标药剂的作用时间选择不同时间记录死虫数。整个过程操作简单,并能准确测出胃毒作用毒力。本发明也可以用于其他舐吸式口器昆虫胃毒毒力作用的测定。 |
219 |
针对单增李斯特菌inlB毒力基因的一种快速检测方法 |
CN201410708006.4 |
2014-11-27 |
CN104388567A |
2015-03-04 |
侯红漫; 桑雪; 张公亮; 孙黎明; 王彦 |
本发明公开一种针对单增李斯特菌inlB毒力基因的快速检测方法,首次针对毒力基因inlB设计特异引物,将反转录技术与SYBR Green Ⅰ嵌合荧光定量PCR技术相结合,建立了一种快速检测单增李斯特菌的方法,具体包括单增李斯特菌RNA的提取及cDNA的合成、SYBR Green Ⅰ嵌合荧光定量PCR检测建立标准曲线、人工污染样本的验证;食物样本RNA的提取及cDNA的合成、普通SYBR Green Ⅰ嵌合荧光定量PCR法检测验证。检测速度快、特异性高、灵敏度高、检出限低的优点,具有广泛的应用前景。 |
220 |
一种测定杀菌剂对香蕉尾孢叶斑病菌毒力的方法 |
CN201410428735.4 |
2014-08-27 |
CN104237047A |
2014-12-24 |
宋晓兵; 彭埃天; 凌金锋; 陈霞 |
本发明公开一种测定杀菌剂对香蕉尾孢叶斑病菌毒力的方法,属于植物病害防控领域。通过本发明的方法,香蕉尾孢菌在特定液体培养基中菌丝体生长良好,采用菌丝体干重测定法可以达到有关室内毒力测定的目的要求,相比大田活体病斑扩展法,节省大量人力、物力成本,试验影响因素小,数据准确可信。真空抽滤法过滤菌液,有效将菌丝球内的水分过滤掉,保证菌丝干湿度有效统一。香蕉尾孢菌在液体培养基中形成菌丝球,若采用烘箱干燥法,菌丝球容易粘附在滤纸上,菌丝量不同烘干效果不一致,对称重误差影响较大。 |