581 |
一种可同时高效富集多种蛋白质翻译后修饰肽段的方法和体系 |
CN202410019927.3 |
2024-01-06 |
CN117969736A |
2024-05-03 |
季飞洋; 朱惠惠; 孙泽宇; 周梦豪; 姜正一 |
本发明公开了一种可同时高效富集多种蛋白质翻译后修饰肽段的方法和体系,包括以下步骤:S1.样本制备,使用尿素裂解液裂解组织或细胞,通过胰蛋白酶将蛋白质水解为肽段;S2.富集方案,使用液体缓冲体系进行富集,缓冲液包括MOPS、NaOH、Na2HPO4、NaC l、ACN、TFA成分,多翻译后修饰的同时富集,同时富集多种翻译后修饰肽段;本发明可同时富集多种翻译后修饰肽段,节省了时间减少了过程中翻译后修饰肽段的损失,多种翻译后修饰肽段可通过质谱一次性鉴定,减少了质谱机时,节约了成本,与现有的翻译后修饰肽段占50%左右的富集效率相比其富集效率更高。 |
582 |
一种样本中DNA与RNA共提取通用方法 |
CN202410089808.5 |
2024-01-23 |
CN117603962A |
2024-02-27 |
李雪; 张晓阳; 徐娜; 杜洋 |
本发明涉及DNA与RNA共提取技术领域,本发明公开了一种样本中DNA与RNA共提取通用方法,包括下列步骤:1)柱膜准备,2)裂解,将缓冲液1A与缓冲液1B加入所述裂解介质管;3)去杂,4)DNA/RNA分离,5)RNA纯化,6)DNA纯化,7)漂洗8)洗脱,将柱子转移到DNA与RNA回收管;收集的滤液为RNA/DNA,用于下游应用;本发明简化了操作步骤,缩短了操作时间,降低了操作失误,提高了提取效果;有效提高产量与纯度,将潜在污染风险降低,提高了结果的准确性与可靠性;适用于高通量处理,满足了大规模样本处理的要求;适用于大部分样本。 |
583 |
一种低微生物量组织样品中微生物DNA的提取方法及其应用 |
CN202310272379.0 |
2023-03-20 |
CN116179539A |
2023-05-30 |
杨栋; 孟欣 |
本发明提供了一种低微生物量组织样品中微生物DNA的提取方法,属于DNA提取技术领域,所述方法包括以下步骤:1)将组织样品与裂解液混合、研磨后,用蛋白酶K处理,获得裂解后的组织液;2)将所述裂解后的组织液用RNA酶处理后,进行第一离心,收集第一上清液;3)将第一上清液与缓冲液SP混合进行第二离心,收集第二上清液;4)将所述第二上清液与氯仿混合进行第三离心,收集第三上清液;5)将乙醇与所述第三上清液混合,获得沉淀,即为DNA提取产物;所述提取方法能够有效的提取低微生物量样品组织中的微生物DNA,为探究组织微生物在动物健康与疾病中的作用奠定了基础,为发现并设计靶向疾病的新型生物标志物提高了可能性。 |
584 |
提取血浆样本游离DNA的试剂盒及提取方法 |
CN202311050793.3 |
2023-08-19 |
CN116875591A |
2023-10-13 |
陆亚平; 魏光; 曹现涛 |
本发明涉及核酸提取领域,具体涉及一种提取血浆样本游离DNA的试剂盒及提取方法,该试剂盒包括包括裂解液、洗涤液Ⅰ、洗涤Ⅱ、洗涤液Ⅲ、结合液、洗脱液、磁珠CF1,其中裂解液由SDS的质量体积比为15~25%的Buffer溶液和LiCl组成,LiCl的质量体积浓度为18~22%;洗涤液Ⅰ中包含异硫氰酸胍;洗涤液Ⅱ由Tris‑NaCl缓冲液、乙醇和磁珠MPG制备而成;洗涤液Ⅲ中由Tris‑NaCl缓冲液和乙醇制备而成;结合液中包含异硫氰酸胍和表面活性剂;洗脱液包含Tris;磁珠CF1为MagPure A4XP。该试剂盒通过对磁珠提取试剂进行改进,使得游离DNA的提取通过机器全自动化提取的得率得到显著提高,对于提高NIPT低胎儿浓度样本的检出率,降低假阴性率,具有重要意义,且提取过程不涉及氯仿苯酚等有毒试剂。 |
585 |
一种免抽提的核酸检测方法及试剂盒 |
CN202011236028.7 |
2020-11-09 |
CN112280832A |
2021-01-29 |
徐根明; 鞠巍; 秦闯华; 潘艺; 赵谦 |
本发明公开了一种免抽提的核酸检测方法及试剂盒。检测方法包括以下步骤:(1)将含有待检测核酸的生物样本放在多功能缓冲液中进行裂解,释放出待检测核酸;(2)将含有释放的待检测核酸的多功能缓冲液加入检测试剂进行待检测核酸的复制反应;(3)反应完成后根据检测结果判断样本中是否含有待检测核酸。所述的多功能缓冲液具有裂解失活生物样本,促进待检测核酸释放,以及作为待检测核酸复制和检测过程所需缓冲液的作用;所述的检测试剂包含待检测核酸复制扩增和检测核酸复制扩增产物所需要的各种酶、引物、以及辅助因子。该方法可以实现快速简便、高特异性、高灵敏度的检测病毒、细菌、细胞、生物组织等原始样本是否存在特定的核酸序列。 |
586 |
一步洗涤磁珠法血液DNA提取试剂盒 |
CN201910208558.1 |
2019-03-19 |
CN109913445B |
2020-10-02 |
周杰锋 |
本发明属于分子生物学检测技术领域,具体地,本申请提供了一种仅需要一步洗涤的磁珠法血液DNA提取试剂盒。一种血液DNA提取试剂盒,包括裂解液、结合液、蛋白酶K溶液、洗涤液以及洗脱缓冲液;其特征在于,其中裂解液包含Tris、EDTA、NaCl、NaDC、十二烷基‑N‑甜菜碱、NLS、GuHCl、TritonX100、NH4Cl、巯基乙醇;结合液包括异丙醇、PEG 8000、Brij 58;洗涤液包括GuHCl、Tris、乙醇、碳酸氢钠;洗脱缓冲液包括Tris、EDTA。申请通过配制含较高浓度的碳酸氢钠(碱性略强于醋酸钠和氯化钠)的洗涤液同时兼顾离子平衡和提供碱性的作用,并配合使用两性离子型去垢剂CHAPS,构建了仅需要一步洗涤的磁珠法血液DNA提取试剂盒。 |
587 |
具微米多孔结构的富血小板裂解液血浆基水凝胶 |
CN201810592947.4 |
2018-06-11 |
CN109111580B |
2021-08-03 |
邓俊杰; 袁珊珊; 寻晓洁; 苏明; 王辰飞 |
本发明公开了一种具微米多孔结构的富血小板裂解液血浆基水凝胶,其制备方法为:1)配制富血小板裂解液血浆溶液;2)配制交联剂溶液,加入EDC,反应,再加入NHS,混匀;3)在离心管中依次加入:a.富血小板裂解液血浆溶液;b.罗丹明‑牛血清蛋白水溶液;c.磷酸缓冲溶液;d.步骤2)获得的液体;混匀后倒入模具中,低温下反应获得。(1)本发明的凝胶富含多种细胞因子和生长因子,具有内部微孔结构和高孔隙率,便于干细胞在多孔凝胶内部铺展和相互交联。同时多孔凝胶能缓慢释放多种生长因子和细胞因子促进干细胞增殖。(3)本发明的方法简便,低温环境有利于生物活性分子的保存。 |
588 |
质粒DNA快速提取试剂盒及其应用方法 |
CN99113448.6 |
1999-01-29 |
CN1226600A |
1999-08-25 |
朱明华 |
本发明涉及分子生物学研究领域,为一种简易快速提取质粒DNA的试剂盒及其应用方法。本试剂盒包括菌体重悬缓冲液、菌体裂解缓冲液、质粒沉淀缓冲液、异丙醇、蛋白沉淀缓冲液和DNA稀释液六种试剂。本发明与国内外相关的试剂盒相比,具有快速、简易、高效、高质、价廉和无害的优点,提取的质粒DNA(1A、2A、3A)与应用Qiagen柱式纯化试剂盒提取的相应质粒DNA(1B、2B、3B)的电泳图谱比较,电泳条带同样清晰,无RNA混杂。 |
589 |
一种磁珠法病原体核酸提取试剂盒及使用方法 |
CN202210215944.5 |
2022-03-07 |
CN114457069A |
2022-05-10 |
傅明华; 李美琼; 夏姝瑞; 聂晶 |
本发明公开了一种磁珠法病原体核酸提取试剂盒及使用方法,该试剂盒包括裂解液、蛋白酶K、磁珠液、洗涤液A、洗涤液B及洗脱液;其中所述裂解液包含高离序盐,去污剂,ph5.0‑8.0的缓冲液。该试剂盒可对多生物样本(全血、血清、血浆、唾液、咽拭子及粪便)、多病原体(RNA/DNA病毒、细菌、支原体、衣原体)的核酸进行高得率、高纯度提取,无需进行预处理,且该发明也适用于全自动化核酸提取。 |
590 |
一种鱼类病原菌海豚链球菌分子诊断试剂盒及检测方法 |
CN200810220112.2 |
2008-12-18 |
CN101586157B |
2012-01-11 |
李安兴; 周素明; 樊媛 |
本发明公开一种鱼类病原菌海豚链球菌(Streptococcus iniae)分子诊断试剂盒及检测方法。本发明内容包括裂解缓冲液A、DNA提取B液、DNA提取C液、DNA提取D液、阳性模板对照E液和PCR反应液F液。该试剂盒及检测方法是以海豚链球菌基因组中的保守序列设计的一对特异引物为主体而组成的。同时,本发明还对DNA提取裂解液及PCR反应条件包括镁离子浓度、退火温度、循环数进行了优化。该试剂盒能对鱼类病原菌海豚链球菌的特异DNA片断进行定性检测,简便快速,特异性好,灵敏度高;还可用于养殖鱼类各个养殖过程的细菌跟踪检测,具有很高的实用价值。 |
591 |
具微米多孔结构的富血小板裂解液血浆基水凝胶 |
CN201810592947.4 |
2018-06-11 |
CN109111580A |
2019-01-01 |
邓俊杰; 袁珊珊; 寻晓洁; 苏明; 王辰飞 |
本发明公开了一种具微米多孔结构的富血小板裂解液血浆基水凝胶,其制备方法为:1)配制富血小板裂解液血浆溶液;2)配制交联剂溶液,加入EDC,反应,再加入NHS,混匀;3)在离心管中依次加入:a.富血小板裂解液血浆溶液;b.罗丹明-牛血清蛋白水溶液;c.磷酸缓冲溶液;d.步骤2)获得的液体;混匀后倒入模具中,低温下反应获得。(1)本发明的凝胶富含多种细胞因子和生长因子,具有内部微孔结构和高孔隙率,便于干细胞在多孔凝胶内部铺展和相互交联。同时多孔凝胶能缓慢释放多种生长因子和细胞因子促进干细胞增殖。(3)本发明的方法简便,低温环境有利于生物活性分子的保存。 |
592 |
一种提取土壤宏基因组DNA的方法及其应用 |
CN202310259870.X |
2023-03-17 |
CN116144647A |
2023-05-23 |
梁婷婷; 董亚晨 |
本发明公开了一种提取土壤宏基因组DNA的方法及其应用。所述方法包括:将土壤样品与提取缓冲液、溶菌酶混合孵育,再与蛋白酶K、裂解液A和裂解液B混合,加热孵育,离心获取上清液,将所述上清液与沉淀液混合,再次离心获取最终上清液,进行除杂纯化处理,得到DNA;所述沉淀液含有醋酸盐和氯化钠。本发明的方法提取获得的DNA满足三代测序平台对DNA质量的要求,该方法提取的DNA可以获得较多大片段、纯度和核酸总量都较高,此方法具有成本低、步骤简单、安全高效等优点,适合大规模的推广和应用。 |
593 |
一种鱼类病原菌海豚链球菌分子诊断试剂盒及检测方法 |
CN200810220112.2 |
2008-12-18 |
CN101586157A |
2009-11-25 |
李安兴; 周素明; 樊媛 |
本发明公开一种鱼类病原菌海豚链球菌(Streptococcus iniae)分子诊断试剂盒及检测方法。本发明内容包括裂解缓冲液A、DNA提取B液、DNA提取C液、DNA提取D液、阳性模板对照E液和PCR反应液F液。该试剂盒及检测方法是以海豚链球菌基因组中的保守序列设计的一对特异引物为主体而组成的。同时,本发明还对DNA提取裂解液及PCR反应条件包括镁离子浓度、退火温度、循环数进行了优化。该试剂盒能对鱼类病原菌海豚链球菌的特异DNA片断进行定性检测,简便快速,特异性好,灵敏度高;还可用于养殖鱼类各个养殖过程的细菌跟踪检测,具有很高的实用价值。 |
594 |
一步洗涤磁珠法血液DNA提取试剂盒 |
CN201910208558.1 |
2019-03-19 |
CN109913445A |
2019-06-21 |
周杰锋 |
本发明属于分子生物学检测技术领域,具体地,本申请提供了一种仅需要一步洗涤的磁珠法血液DNA提取试剂盒。一种血液DNA提取试剂盒,包括裂解液、结合液、蛋白酶K溶液、洗涤液以及洗脱缓冲液;其特征在于,其中裂解液包含Tris、EDTA、NaCl、NaDC、十二烷基-N-甜菜碱、NLS、GuHCl、TritonX100、NH4Cl、巯基乙醇;结合液包括异丙醇、PEG 8000、Brij 58;洗涤液包括GuHCl、Tris、乙醇、碳酸氢钠;洗脱缓冲液包括Tris、EDTA。申请通过配制含较高浓度的碳酸氢钠(碱性略强于醋酸钠和氯化钠)的洗涤液同时兼顾离子平衡和提供碱性的作用,并配合使用两性离子型去垢剂CHAPS,构建了仅需要一步洗涤的磁珠法血液DNA提取试剂盒。 |
595 |
一种从冷阱排污气体中回收三氟化氮并制备氢氟酸的方法 |
CN202210219052.2 |
2022-03-08 |
CN114524421A |
2022-05-24 |
冀延治; 宋富财; 武建鹏; 李海军; 王永迪; 邱世杰; 张帅; 袁瑞玲 |
本发明提供了一种从冷阱排污气体中回收三氟化氮并制备氢氟酸的方法,包括以下步骤,先将排污尾气通过排污气体送入管送入缓冲罐中,在高温裂解塔中去除原料气中的N2F2,经过缓冲罐的气体进入高温裂解塔,在降膜塔内吸收HF和高温裂解塔生成的F2,冷却后流入HF储存罐中,从降膜塔流出的气体通过管道进入低温冷却塔,经过低温冷却塔的气体进入超低温的冷阱中液化收集,并采用对超低温的冷阱进行抽真空的办法去除其中的N2/O2杂质,当冷阱中收集并液化NF3、N2O气体达到预定量后,对冷阱升温,利用压力将NF3、N2O气体压入气体储罐中。本发明生产成本低且操作简单,并有效的解决了传统工艺去除HF中存在排放NF3的问题,消耗碱液的问题,N2F2的危险性问题。 |
596 |
质粒DNA快速提取试剂盒及其应用方法 |
CN99113448.6 |
1999-01-29 |
CN1086201C |
2002-06-12 |
朱明华 |
本发明涉及分子生物学研究领域,为一种简易快速提取质粒DNA的试剂盒及其应用方法。本试剂盒包括菌体重悬缓冲液、菌体裂解缓冲液、质粒沉淀缓冲液、异丙醇、蛋白沉淀缓冲液和DNA稀释液六种试剂。本发明与国内外相关的试剂盒相比,具有快速、简易、高效、高质、价廉和无害的优点,提取的质粒DNA(1A、2A、3A)与应用Qiagen柱式纯化试剂盒提取的相应质粒DNA(1B、2B、3B)的电泳图谱比较,电泳条带同样清晰,无RNA混杂。 |
597 |
丝氨酸激酶和硫裂解酶的突变酶及其发酵生产方法以及在生产含羞草素中的应用 |
CN202410759907.X |
2024-06-13 |
CN118773161A |
2024-10-15 |
张新帅; 黄华; 李贤艺; 冯晨曦; 龙秋妮; 王彩芹 |
本申请公开了丝氨酸激酶和硫裂解酶的突变酶及其发酵生产方法以及在生产含羞草素中的应用,丝氨酸激酶突变酶(AhSerK)的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,硫裂解酶突变酶(Aphydry)的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示。一种生产含羞草素的方法,包括以下步骤:在缓冲液中加入L‑丝氨酸、3,4‑二羟基吡啶、三磷酸腺苷二钠盐ATP和六水氯化镁,最后加入丝氨酸激酶突变酶和硫裂解酶突变酶启动反应;至少4小时后反应完全,将反应液调至酸性使酶失活沉淀。本发明在相应天然酶的基础上,通过定向改造,获得了丝氨酸激酶突变酶和硫裂解酶突变酶,提高了活性和稳定性,从而实现更高的转化率及规模化应用性能。 |
598 |
工业连续化环保节能型废轮胎热裂解设备 |
CN201310204208.0 |
2013-05-29 |
CN103242883A |
2013-08-14 |
牛勇超; 牛岩; 牛潇田 |
本发明涉及一种工业连续化环保节能型废轮胎热裂解设备,可有效解废轮胎热裂解设备安全性能差和使用寿命短的问题,技术方案是,包括输送机、螺旋进料器、冷凝器、绞龙机、磁选机、循环泵和燃气发电机,第一输送机的出料端置于第二输送机进料口上方,第二输送机出料端置于螺旋进料器进料口上方,螺旋进料器出料端与裂解釜进料端相连,裂解釜出料端经出气筒与反应塔进气口相连,反应塔出气端分别经第一冷凝器和第二冷凝器与储油罐相连,储油罐与第三冷凝器、不凝气体的洗涤罐、碱液储罐、除液罐、缓冲罐、真空泵、清洗罐、压缩机、气体存储罐、气体减压罐依次相连通,构成不凝的可燃气体提取系统,本发明安全可靠,使用寿命长、效果好。 |
599 |
病原体的等温扩增 |
CN202280036191.X |
2022-03-18 |
CN117321221A |
2023-12-29 |
张红华; 安德鲁·P·米勒; 布里翁·梅尔梅; 蔡立君 |
本文的公开内容包括用于检测样品中的靶核酸序列的方法、组合物和试剂盒。该方法可以包括使用包含裂解性剂和/或还原剂的裂解缓冲液来处理样品和检测靶核酸序列的存在。在一些实施方案中,该方法包括例如在等温条件下,使包含扩增剂和能够隔离裂解性剂的一种或更多种保护剂(例如,环糊精化合物)的试剂组合物与经处理的样品接触,以产生扩增反应混合物,用于检测。 |
600 |
偏氟乙烯的生产系统 |
CN201310695774.6 |
2013-12-18 |
CN103664509B |
2015-08-12 |
徐建林; 邹建良; 宗建青; 仇峰 |
本发明公开了一种偏氟乙烯的生产系统,包括二氟一氯乙烷原料槽,二氟一氯乙烷原料槽的输出端连接裂解炉,裂解炉通过反应缓冲器连接压缩机的输入端,压缩机的输出端连接冷凝器;冷凝器的液体输出端与二氟一氯乙烷回收槽连接,二氟一氯乙烷回收槽接收冷凝器中冷凝的末被裂解的二氟一氯乙烷;冷凝器的气体输出端与水洗塔连接,水洗塔接收冷凝器中的末被冷凝的氯化氢和偏氟乙烯;水洗塔的液体输出端与盐酸槽连接,盐酸槽接收盐酸;水洗塔的气体输出端与偏氟乙烯气库连接,偏氟乙烯气库接收偏氟乙烯的粗制气体。本发明偏氟乙烯的生产系统,裂解后全部压缩分去二氟一氯乙烷后去脱酸,回收偏氟乙烯,能提高偏氟乙烯的生产效率,降低成本。 |