1.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-(X X X)i-Nb-Y Y Y-Nb-(Z Z Z)j-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-(X′X′X′)k-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-(Z′Z′Z′)
l-Na′-nq′5' (III)
其中：
i、j、k和l各自独立地是0或1；
p、p’、q、和q′各自独立地是0-6；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
Nb和Nb′各自独立地表示包含0-10个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列；
每个np、np′、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出核苷酸；
XXX、YYY、ZZZ、X′X′X′、Y′Y′Y′、和Z′Z′Z′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序；
Nb上的修饰不同于Y上的修饰并且Nb′上的修饰不同于Y′上的修饰；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合。
2.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中i是0；j是0；i是1；j是1；i和j两者都是0；或i和j两者都是1。
3.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中k是0；l是0；k是1；l是1；k和l两者都是0；或k和l两者都是1。
4.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中XXX与X'X'X'互补，YYY与Y'Y'Y'互补，并且ZZZ与Z'Z'Z'互补。
5.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该YYY基序出现在该有义链的裂解位点处或附近。
6.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该Y'Y'Y'基序出现在该反义链的从5'-端起的11、12以及13位处。
7.如权利要求6所述的双链RNAi剂，其中该Y'是2'-O-甲基。
8.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中式(III)被表示为式(IIIa)：
有义链：5'np-Na-Y Y Y-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-Y′Y′Y′-Na′-nq′5' (IIIa)。
9.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中式(III)被表示为式(IIIb)：
有义链：5'np-Na-Y Y Y-Nb-Z Z Z-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-Y′Y′Y′-Nb′-Z′Z′Z′-Na′-nq′5' (IIIb)其中每个Nb和Nb′独立地表示包含1-5个修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。
10.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中式(III)被表示为式(IIIc)：
有义链：5'np-Na-X X X-Nb-Y Y Y-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-X′X′X′-Nb′-Y′Y′Y′-Na′-nq′5' (IIIc)其中每个Nb和Nb′独立地表示包含1-5个修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。
11.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中式(III)被表示为式(IIId)：
有义链：5'np-Na-X X X-Nb-Y Y Y-Nb-Z Z Z-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-X′X′X′-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-Z′Z′Z′-Na′-nq′5' (IIId)
其中Nb和Nb′各自独立地表示包含1-5个修饰的核苷酸的寡核苷酸序列，并且Na和Na′各自独立地表示包含2-10个修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。
12.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为15-30个核苷酸对。
13.如权利要求12所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为17-23个核苷酸对。
14.如权利要求12所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为17-25个核苷酸对。
15.如权利要求12所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为23-27个核苷酸对。
16.如权利要求12所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为19-21个核苷酸对。
17.如权利要求12所述的双链RNAi剂，其中该双链区在长度上为21-23个核苷酸对。
18.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中每条链具有15-30个核苷酸。
19.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中在这些核苷酸上的修饰选自下组，该组由以下各项组成：LNA、HNA、CeNA、2′-甲氧基乙基、2′-O-烷基、2′-O-烯丙基、2′-C-烯丙基、2′-氟、2′-脱氧、2’-羟基、及其组合。
20.如权利要求19所述的双链RNAi剂，其中在这些核苷酸上的修饰是2′-O-甲基或
2′-氟修饰。
21.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该配体是通过一种二价或三价支链连接物附接的一种或多种GalNAc衍生物。
22.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该配体是
23.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该配体附接到该有义链的3′端。
24.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中该RNAi剂根据以下示意图中所示与该配体缀合
其中X是O或S。
25.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中所述试剂进一步包含至少一个硫代磷酸酯或甲基膦酸酯核苷酸间键合。
26.如权利要求25所述的双链RNAi剂，其中该硫代磷酸酯或甲基膦酸酯核苷酸间键合是在一条链的3'-末端处。
27.如权利要求26所述的双链RNAi剂，其中所述链是该反义链。
28.如权利要求26所述的双链RNAi剂，其中所述链是该有义链。
29.如权利要求25所述的双链RNAi剂，其中该硫代磷酸酯或甲基膦酸酯核苷酸间键合是在一条链的5'-末端处。
30.如权利要求29所述的双链RNAi剂，其中所述链是该反义链。
31.如权利要求29所述的双链RNAi剂，其中所述链是该有义链。
32.如权利要求25所述的双链RNAi剂，其中该硫代磷酸酯或甲基膦酸酯核苷酸间键合是在一条链的5’-和3’-末端两者处。
33.如权利要求32所述的双链RNAi剂，其中所述链是该反义链。
34.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该双链体的反义链的5′-端的1位处的碱基对是AU碱基对。
35.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中这些Y核苷酸含有2′-氟修饰。
36.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中这些Y′核苷酸含有2′-O-甲基修饰。
37.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中p′>0。
38.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中p′＝2。
39.如权利要求38所述的双链RNAi剂，其中q'＝0，p＝0，q＝0，并且p'突出端核苷酸与该靶mRNA互补。
40.如权利要求38所述的双链RNAi剂，其中q'＝0，p＝0，q＝0，并且p'突出端核苷酸与该靶mRNA不互补。
41.如权利要求28所述的双链RNAi剂，其中该有义链具有总共21个核苷酸，并且该反义链具有总共23个核苷酸。
42.如权利要求37-41中任一项所述的双链RNAi剂，其中至少一个np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上。
43.如权利要求42所述的双链RNAi剂，其中所有np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上。
44.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中所述RNAi剂选自下组，该组为在表1、表2、表9、表10、表12、和图12A中列出的RNAi剂。
45.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中所述RNAi剂选自下组，该组由以下各项组成：AD-53815、AD-56663、AD-56658、AD-56676、AD-56666、AD-57928、和AD-60212。
46.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-(X X X)i-Nb-Y Y Y-Nb-(Z Z Z)j-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-(X′X′X′)k-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-(Z′Z′Z′)
l-Na′-nq′5' (III)
其中：
i、j、k和l各自独立地是0或1；
p、p’、q、和q′各自独立地是0-6；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
Nb和Nb′各自独立地表示包含0-10个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列；
每个np、np′、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出端核苷酸；
XXX、YYY、ZZZ、X′X′X′、Y′Y′Y′、和Z′Z′Z′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序；并且其中这些修饰是2′-O-甲基或2′-氟修饰；
Nb上的修饰不同于Y上的修饰并且Nb′上的修饰不同于Y′上的修饰；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合。
47.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-(X X X)i-Nb-Y Y Y-Nb-(Z Z Z)j-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-(X′X′X′)k-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-(Z′Z′Z′)
l-Na′-nq′5' (III)
其中：
i、j、k和l各自独立地是0或1；
每个np、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出端核苷酸；
p、q、和q′各自独立地是0-6；
np′>0并且至少一个np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
Nb和Nb′各自独立地表示包含0-10个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列；
XXX、YYY、ZZZ、X′X′X′、Y′Y′Y′、和Z′Z′Z′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序，并且其中这些修饰是2′-O-甲基或2′-氟修饰；
Nb上的修饰不同于Y上的修饰并且Nb′上的修饰不同于Y′上的修饰；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合。
48.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-(X X X)i-Nb-Y Y Y-Nb-(Z Z Z)j-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-(X′X′X′)k-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-(Z′Z′Z′)
l-Na′-nq′5' (III)
其中：
i、j、k和l各自独立地是0或1；
每个np、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出端核苷酸；
p、q、和q′各自独立地是0-6；
np′>0并且至少一个np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
Nb和Nb′各自独立地表示包含0-10个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列；
XXX、YYY、ZZZ、X′X′X′、Y′Y′Y′、和Z′Z′Z′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序，并且其中这些修饰是2′-O-甲基或2′-氟修饰；
Nb上的修饰不同于Y上的修饰并且Nb′上的修饰不同于Y′上的修饰；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合，其中该配体是通过一种二价或三价支链连接物附接的一种或多种GalNAc衍生物。
49.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-(X X X)i-Nb-Y Y Y-Nb-(Z Z Z)j-Na-nq 3'
反义链：3'np′-Na′-(X′X′X′)k-Nb′-Y′Y′Y′-Nb′-(Z′Z′Z′)
l-Na′-nq′5' (III)
其中：
i、j、k和l各自独立地是0或1；
每个np、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出端核苷酸；
p、q、和q′各自独立地是0-6；
np′>0并且至少一个np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
Nb和Nb′各自独立地表示包含0-10个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列；
XXX、YYY、ZZZ、X′X′X′、Y′Y′Y′、和Z′Z′Z′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序，并且其中这些修饰是2′-O-甲基或2′-氟修饰；
Nb上的修饰不同于Y上的修饰并且Nb′上的修饰不同于Y′上的修饰；
其中该有义链包含至少一个硫代磷酸酯键；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合，其中该配体是通过一种二价或三价支链连接物附接的一种或多种GalNAc衍生物。
50.一种双链RNAi剂，其能够抑制细胞中的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶
Kexin9(PCSK9)的表达，其中所述双链RNAi剂包含与反义链互补的有义链，其中所述反义链包含与编码PCSK9的mRNA的一部分互补的区域，其中每个链在长度上为约14至约30个核苷酸，其中所述双链RNAi剂由式(III)表示：
有义链：5'np-Na-Y Y Y-Na-nq3'
反义链：3'np′-Na′-Y′Y′Y′-Na′-nq′5' (IIIa)
其中：
每个np、nq、和nq′，其中每个可以是存在的或可以是不存在的，独立地表示突出端核苷酸；
p、q、和q′各自独立地是0-6；
np′>0并且至少一个np′经由硫代磷酸酯键连接到相邻核苷酸上；
Na和Na′各自独立地表示包含0-25个修饰的或未修饰的或其组合的核苷酸的寡核苷酸序列，每个序列包含至少两个不同修饰的核苷酸；
YYY和Y′Y′Y′各自独立地表示在三个连续核苷酸上具有三个相同修饰的一个基序，并且其中这些修饰是2′-O-甲基或2′-氟修饰；
其中该有义链包含至少一个硫代磷酸酯键；并且
其中该有义链与至少一个配体缀合，其中该配体是通过一种二价或三价支链连接物附接的一种或多种GalNAc衍生物。
51.一种选自下组的RNAi剂，该组RNAi剂为在表1、表2、表9、表10、表12、和图12A中列出的RNAi剂。
52.一种细胞，其含有如权利要求1和46-51中任一项所述的双链RNAi剂。
53.一种药物组合物，其包含如权利要求1和46-51中任一项所述的双链RNAi剂。
54.如权利要求53所述的药物组合物，其中RNAi剂在一种非缓冲溶液中给予。
55.如权利要求54所述的药物组合物，其中所述非缓冲溶液是盐水或水。
56.如权利要求53所述的药物组合物，其中所述siRNA与一种缓冲溶液给予。
57.如权利要求56所述的药物组合物，其中所述缓冲溶液包括乙酸盐、柠檬酸盐、醇溶谷蛋白、碳酸盐或磷酸盐或其任何组合。
58.如权利要求57所述的药物组合物，其中所述缓冲溶液是磷酸盐缓冲盐水(PBS)。
59.一种抑制细胞中PCSK9表达的方法，该方法包括：
(a)使该细胞与如权利要求1和46-51中任一项所述的双链RNAi剂或如权利要求
53-58中任一项所述的药物组合物接触；并且
(b)将步骤(a)中产生的细胞维持一段时间，该时间足以获得PCSK9基因的mRNA转录本的降解，由此抑制该细胞中PCSK9基因的表达。
60.如权利要求59所述的方法，其中所述细胞在受试者体内。
61.如权利要求60所述的方法，其中该受试者是人。
62.如权利要求59-61中任一项所述的方法，其中该PCSK9表达被抑制至少约30％。
63.一种治疗患有由PCSK9表达介导的失调的受试者的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的如权利要求1和46-51中任一项所述的双链RNAi剂或如权利要求53-58中任一项所述的药物组合物，从而治疗所述受试者中。
64.如权利要求63所述的方法，其中该受试者是人。
65.如权利要求64所述的方法，其中该人患有高胆固醇血症。
66.如权利要求63所述的方法，其中将该双链RNAi剂以约0.01mg/kg至约10mg/kg或约0.5mg/kg至约50mg/kg的剂量给予。
67.如权利要求66所述的方法，其中将该双链RNAi剂以约10mg/kg至约30mg/kg的剂量给予。
68.如权利要求66所述的方法，其中将该双链RNAi剂皮下给予。
69.如权利要求66所述的方法，其中将该双链RNAi剂静脉内给予。
70.如权利要求66所述的方法，其中将所述RNAi剂以两个或更多个剂量给予。
71.如权利要求70所述的方法，其中所述RNAi剂是以包括一个负荷阶段继之以一个维持阶段的给药方案给予的，
其中该负荷阶段包括给予2mg/kg、1mg/kg或0.5mg/kg的剂量，每周五次，并且其中该维持阶段包括给予2mg/kg、1mg/kg或0.5mg/kg的剂量，每周一次、每周两次、每周三次，每两周一次，每三周一次，每月一次，每两个月一次，每三个月一次，每四个月一次，每五个月一次，或每六个月一次。
72.如权利要求70所述的方法，其中所述RNAi剂以选自下组的时间间隔给予，该组由以下各项组成：约每12小时一次、约每24小时一次、约每48小时一次、约每72小时一次、以及约每96小时一次。
73.一种治疗受试者的高胆固醇血症方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的如权利要求1和46-51中任一项所述的双链RNAi剂或如权利要求53-58中任一项所述的药物组合物，从而治疗所述受试者中。
74.如权利要求73所述的方法，其中该受试者是灵长动物或啮齿动物。
75.如权利要求73所述的方法，其中该受试者是人。
76.如权利要求73所述的方法，其中将该双链RNAi剂以约0.01mg/kg至约10mg/kg或约0.5mg/kg至约50mg/kg的剂量给予。
77.如权利要求73所述的方法，其中将该双链RNAi剂以约10mg/kg至约30mg/kg的剂量给予。
78.如权利要求73所述的方法，其中将所述RNAi剂以两个或更多个剂量给予。
79.如权利要求73所述的方法，其中所述RNAi剂是以包括一个负荷阶段继之以一个维持阶段的给药方案给予的，
其中该负荷阶段包括给予2mg/kg、1mg/kg或0.5mg/kg的剂量，每周五次，并且其中该该维持阶段包括给予2mg/kg、1mg/kg或0.5mg/kg的剂量每周一次、两次、或三次，每两周一次，每三周一次，每个月一次，每两个月一次，每三个月一次，每四个月一次，每五个月一次，或每六个月一次。
80.如权利要求73所述的方法，其中所述RNAi剂以选自下组的时间间隔给予，该组由以下各项组成：约每12小时一次、约每24小时一次、约每48小时一次、约每72小时一次、以及约每96小时一次。
81.如权利要求73所述的方法，其中将该双链RNAi剂皮下给予。
82.如权利要求73所述的方法，其中将该双链RNAi剂静脉内给予。
83.如权利要求73所述的方法，进一步包括确定该受受试者的LDLR基因型或表型。
84.如权利要求73所述的方法，其中给药导致该受试者的血清胆固醇减少。
85.如权利要求73所述的方法，进一步包括测定该受试者的血清胆固醇水平。