序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
1 一种催化-氟和碳-氯键形成的卤化酶 CN201310710496.7 2013-12-20 CN103695384A 2014-04-02 瞿旭东; 王娅娅; 邓子新
发明属于基因工程技术领域,涉及通过基因重组技术获得具有催化C-F键和C-Cl键形成的卤化酶。以来源于巴西诺卡菌的卤化酶基因为原始基因,根据卤化酶基因在大肠杆菌体内表达的密码子偏好,进行优化,合成以大肠杆菌为表达宿主的优化卤化酶基因序列;将优化卤化酶基因序列重组到克隆载体pUC57simple,经NdeI和HindⅢ双酶切之后,连接到具有同样内切酶位点的表达载体pET28a(+)片段上,获得表达载体pWHU2401;将表达载体pWHU2401转化大肠杆菌感受态细胞,获得能够异源表达卤化酶的工程菌,放大发酵,纯化,从而获得卤化酶。本发明的卤化酶能够特异性合成5’-FDA,催化活性跟已知的卤化酶FlA活性相当。在加入L-基酸化酶时,该卤化酶也能催化形成5’-ClDA。
QQ群二维码
意见反馈