序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 发明人 |
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1 | 一种催化碳-氟和碳-氯键形成的卤化酶 | CN201310710496.7 | 2013-12-20 | CN103695384A | 2014-04-02 | 瞿旭东; 王娅娅; 邓子新 |
本发明属于基因工程技术领域,涉及通过基因重组技术获得具有催化C-F键和C-Cl键形成的卤化酶。以来源于巴西诺卡菌的卤化酶基因为原始基因,根据卤化酶基因在大肠杆菌体内表达的密码子偏好,进行优化,合成以大肠杆菌为表达宿主的优化卤化酶基因序列;将优化卤化酶基因序列重组到克隆载体pUC57simple,经NdeI和HindⅢ双酶切之后,连接到具有同样内切酶位点的表达载体pET28a(+)片段上,获得表达载体pWHU2401;将表达载体pWHU2401转化大肠杆菌感受态细胞,获得能够异源表达卤化酶的工程菌,放大发酵,纯化,从而获得卤化酶。本发明的卤化酶能够特异性合成5’-FDA,催化活性跟已知的卤化酶FlA活性相当。在加入L-氨基酸氧化酶时,该卤化酶也能催化形成5’-ClDA。 |