犬尿氨酸途径的抑制剂
阅读：428发布：2022-08-07
专利汇可以提供犬尿氨酸途径的抑制剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 申请 提供新颖的吲哚胺2,3-双加 氧 酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色 氨 酸2,3-双加氧酶的 抑制剂 、其 代谢物 和药用盐或前药。本申请还提供制备这些化合物的方法。 治疗 有效量的一种或多种式(I)化合物可用于抑制由犬尿氨酸途径的失调导致的 疾病 。式(I)化合物通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或 色氨酸 2,3-双加氧酶的酶活性或表达起作用。，下面是犬尿氨酸途径的抑制剂专利的具体信息内容。
1.式(I)化合物：
其中：
1 1
X为CR 、N或NO；
2 2
X为CR 、N或NO；
3 3
X为CR 、N或NO；
4 4
X为CR 、N或NO；
8
Y为O、S或NR；
5 5 5 6
Z为OR、SR或NR R；
1 2 3 4
R、R、R和R 独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C2-C6烯基、任选取代的C2-C6炔基、任选取代的C1-C6烷氧基、单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、单环或二环的任选取代的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、氨基烷基、烷基羧基、(烷基)羧基酰氨基、任选取代的(芳基)氨基、羟基、卤素、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)-、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、任选取代的芳基氧
7 A B
基、任选取代的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、S(O)
7 7
nR和具有1至2个选自O、S(O)n和NR 的杂原子的任选取代的杂环基氧基；
n为0至2；
A B
R和R 独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的C3-C8环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基；
7
R为H、C1-C6烷基、单环或二环的C6-C14芳基、单环或二环的杂芳基、(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、单环或二环的环烷基、单环或二环的杂环基、烷基羧基、杂环基(烷基)、杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、芳基氧基、杂芳基氧基、A
C3-C6环烷氧基或具有1至2个选自O、S(O)n和NR 的杂原子的杂环基氧基；
A
R为H、C1-C6烷基、单环或二环的C6-C14芳基、单环或二环的杂芳基、(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、单环或二环的环烷基、单环或二环的杂环基、烷基羧基、杂环基(烷基)、杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、芳基氧基、杂芳基氧基、C3-C6环烷氧基或任选取代的杂环基氧基；
5 6
R和R 独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基；且
8
R为H或任选取代的C1-C6烷基；
或其代谢物或药用盐或前药。
1 2 3 4
2.权利要求1的化合物，其中X 、X、X和X 中的一个或两个为N。
1 1 2 2 3 3 4 4
3.权利要求1的化合物，其中X 为CR ，X为CR ，X为CR 且X 为CR 。
3
4.权利要求1的化合物，其中X 为NO。
5.权利要求1的化合物，其具有式(I-A)：
6.权利要求1的化合物，其具有式(I-AA)：
7.权利要求1的化合物，其具有式(I-AAA)：
8.权利要求1的化合物，其具有式(I-B)：
9.权利要求1的化合物，其具有式(I-BB)：
10.权利要求1的化合物，其具有式(I-BBB)：
11.权利要求1的化合物，其具有式(I-BBBB)：
12.权利要求1的化合物，其具有式(I-BBBBB)：
13.权利要求1的化合物，其具有式(I-BBBBBB)：
14.权利要求1的化合物，其具有式(I-C)：
15.权利要求1的化合物，其具有式(I-CC)：
16.权利要求1的化合物，其具有式(I-D)：
17.权利要求1的化合物，其具有式(I-DD)：
18.权利要求1的化合物，其具有式(I-E)：
19.权利要求1的化合物，其具有式(I-EE)：
20.权利要求1的化合物，其具有式(I-F)：
21.权利要求1的化合物，其具有式(I-FF)：
22.权利要求1的化合物，其具有式(I-G)：
23.权利要求1的化合物，其具有式(I-GG)：
1
24.权利要求1的化合物，其中R 为H、卤素、CN、C1-C6羟基烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6烷基。
1
25.权利要求23的化合物，其中R 为H或CN。
2 7
26.权利要求1的化合物，其中R 为H、卤素、羟基、CN、N(R )2,单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、任选取代的C1-C6烷氧基、任选取代的C1-C6烷基或任选取代的芳基氧基。
2
27.权利要求26的化合物，其中R 为H或任选取代的C1-C6烷基。
2
28.权利要求26的化合物，其中R 为卤素。
2
29.权利要求28的化合物，其中R 为Cl、F、Br或I。
2
30.权利要求26的化合物，其中R 为任选取代的C1-C6烷氧基或任选取代的芳基氧基。
2 7
31.权利要求26的化合物，其中R 为N(R )2或单环或二环的任选取代的C6-C14芳基。
3
32.权利要求1的化合物，其中R 为H、卤素、NO2或CN。
3
33.权利要求1的化合物，其中R 为H。
4
34.权利要求1的化合物，其中R 为：
H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C2-C6烯基、任选取代的C2-C6炔基、任选取代的C1-C6烷氧基、单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、CH2-芳基、单环或二环的任选取代的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、氨基烷基、烷基羧基、(烷基)羧基酰氨基、任选取代的(芳基)氨基、羟基、卤素、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)-、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、任选取代的芳基氧基、任选取代
7 A B 7
的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、S(O)nR和具有1
7
至2个选自O、S(O)n和NR的杂原子的任选取代的杂环基氧基，且n为0至2。
4
35.权利要求34的化合物，其中R 为H、卤素或CN。
4
36.权利要求35的化合物，其中R 为Cl、F、Br或I。
4
37.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的烷基、任选取代的环烷基或任选取代的芳基烷基。
4
38.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的芳基烯基或任选取代的芳基炔基。
4 7
39.权利要求34的化合物，其中R 为N(R )2。
4
40.权利要求39的化合物，其中R 为任选取代的二芳基胺基团或任选取代的二苯基胺基团。
4
41.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的芳基、任选取代的二环芳基、杂芳基、任选取代的杂芳基或二环杂芳基。
4
42.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的杂环基。
4
43.权利要求41的化合物，其中R 为任选取代的吡啶、任选取代的2-甲基吡啶或任选取代的吡啶-2-甲酰胺。
4
44.权利要求34或41的化合物，其中R 为任选取代的苯基。
4
45.权利要求44的化合物，其中R 为取代有一个或多个C1-C6烷氧基或卤素的苯基。
4
46.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的吡啶。
4
47.权利要求34的化合物，其中R 为任选取代的(烷基)羧基酰氨基、(芳基)羧基
酰氨基、(烷基)酰氨基、烷基羧基、(烷氧基)羰基、COOH、C1-C6环烷基氧基、杂环基氧基、
7
芳基氧基、杂芳基氧基、全氟代烷基、S(O)nN(R)2或嘧啶基。
5 6
48.权利要求1的化合物，其中R 或R 为H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基或全氟代烷基。
5 6
49.权利要求1的化合物，其中R 或R 为任选取代的苯基。
5 6
50.权利要求49的化合物，其中R 或R 为：
C G
其中，R至R 独立地选自H、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、杂环基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、CN、-O(芳基)、C2-C6炔基、C(O)C1-C6烷基、-O-C1-C6卤代烷基和任选取代的芳基。
5 6
51.权利要求49的化合物，其中R 或R 为：
C G
其中，R至R 独立地选自H、卤素、CHF2、C(CH3)F2、OCF3、OCH3、OCH(CH3)2、吗啉基、哌啶基、CH3、C(CH3)3、CH2CH3、CH(CH3)2、环丙基、环己基、CH2-环丙基、CH2-环丁基、苄基、CN、苯氧基、乙炔基、C(O)CH3和苯基。
5 6
52.权利要求49的化合物，其中R 或R 为：
其中，RC至RG独立地选自H和任选取代的芳基。
53.权利要求52的化合物，其中RC至RG独立地选自H和取代有一个或多个卤素的芳
基。
54.权利要求53的化合物，其中RC至RG独立地选自H和取代有一个或多个Cl或F的
芳基。
55.权利要求49的化合物，其中R5或R6为苯基、2-Br-4-F-苯基、2,3,4-三-Cl-苯
基、2,3-二-Cl-4-F-苯基、2,4-二-Cl-苯基、2-Cl-4-F-苯基、2-Cl-苯基、2-Et-苯基、
2,4-二-F-3-Cl-苯基、2-F-3-CN-苯基、2,4-二-F-苯基、2-萘满基、2,3-二-Me-苯基、
2-Me-4-Br-苯基、2,4-二-Me-苯基、2,4-二-OMe-苯基、2-哌啶-苯基、3-Br-4,5-二-F-苯基、3-Br-4-F-苯 基、3-Br-4-Me-苯 基、3-Br- 苯 基、3- 乙 炔 基-4-F-苯 基、3-乙 炔基-苯基、3-CF2Me-4-F-苯基、3-CF3-4-Br-苯基、3-CF3-4-Cl-苯基、3-CF3-4-F-苯基、
3-CF3-苯基、3-CH2-环丁基-苯基、3-CH2-环丙基-苯基、3-CH2Ph-苯基、3-CHF2-苯基、
3,4-二-Cl-苯 基、3,5-二-Cl-4-F-苯 基、3-Cl-4,6- 二-F-苯 基、3-Cl-4-F- 苯 基、
3-Cl-4-I-苯基、3-Cl-4-Me-苯基、3-Cl-5-Me-苯基、3,6-二-Cl-苯基、3-Cl-6-F-苯基、
3-Cl-6-OMe-苯基、3-Cl-苯基、3-CN-苯基、3-环己基-苯基、3-环丙基-苯基、3-Et-苯基、3,4,6-三-F-苯基、3,4-二-F-苯基、3,5-二-F-苯基、3-F-苯基、3-萘满基、3-I-苯基、3-iPr-苯基、3-Me-4-Cl-苯基、3-Me-4-F-苯基、3,4-二-Me-苯基、3,5-二-Me-苯基、
3-Me-苯基、3-OCF3-4-F-苯基、苯并[d]二氧杂环戊烷基、3-OiPr-苯基、3-OMe-4-Cl-苯基、3,5-二-OMe-苯基、3-OMe-苯基、3-Ph-苯基、3-氯吡啶基、3-吡啶基、3,5-二-tBu-苯基、3-tBu-苯基、4-Br-苯基、4-乙炔基-苯基、4-CF3-苯基、4-CH2Ph-苯基、4-Cl-苯基、
4-CN-苯基、4-COMe-苯基、4-F-苯基、4-Me-苯基、4-吗啉-苯基、4-OCF3-苯基、4-OPh-苯基或5-Cl-6-F-苯基。
5 6
56.权利要求1的化合物，其中R 或R 为任选取代的杂芳基。
5 6
57.权利要求56的化合物，其中R 或R 为任选取代有一个或多个卤素的吡啶基。
58.权利要求57的化合物，其中每个卤素独立地选自F、Cl、Br和I。
59.权利要求58的化合物，其中所述卤素为Cl或F。
5 6
60.权利要求56的化合物，其中R 或R 为苯并[d]二氧杂环戊烷。
5 6
61.权利要求56的化合物，其中R 或R 为四氢萘基。
5 6
62.权利要求56的化合物，其中R 或R 为吡咯基、吲哚基、嘧啶基、烷基、苄基、环烷基、杂环烷基或杂环烷基烷基。
63.权利要求1的化合物，其选自：
3
N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4-二氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氯-3-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-溴-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-吗啉代苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4,5-三氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4,5-三氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,5-二甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-溴苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-碘苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-碘苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-溴-4-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-溴-4,5-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-苄基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-(哌啶-1-基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5-氯-2-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3-((2-氨基呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基)-2-氟苯甲腈、
3
N-(4-苯氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,3,4-三氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,5-二叔丁基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4-二甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-乙炔基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,5-二甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-((2-氨基呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基)苯甲腈、
3
N-(对甲苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
1-(4-((2-氨基呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基)苯基)乙酮、
3
N-(3-环丙基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-异丙基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-2,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,3-二氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,5-二氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(间甲苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-(三氟甲氧基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5-氯-2,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5-氯吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-([1,1'-联苯]-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4-二甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,5-二氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇、
3
4-氯-N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-溴-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(叔丁基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5,6,7,8-四氢萘-1-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(二氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-4-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙炔基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氯-3-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-乙基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-乙基-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-苄基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-乙基-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-丙基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-丙基-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-7-丙基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-甲基-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-苯基-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-异丙基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(环丙基甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-苄基-N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-5-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-环己基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(环丁基甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙炔基苯基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙炔基苯基)-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-乙基-N-(3-乙炔基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3-((2-氨基呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基)苯甲腈、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
5-丁氧基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-乙氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
5-(叔丁氧基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-异丙氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-环己基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-乙基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙炔基-4-氟苯基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-乙炔基-4-氟苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈、
2-氨基-3-((3-(三氟甲基)苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈、
2-氨基-3-(间甲苯基氨基)苯并呋喃-6-甲腈、
2-氨基-3-((3-溴苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈、
2-氨基-3-((2-氯苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3-((3-氯苯基)硫基)苯并[b]噻吩-2-胺、
3
5-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3-((3-氯苯基)硫基)苯并[b]噻吩-2-胺盐酸盐、
3
N-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3-(3-氯苯氧基)苯并[b]噻吩-2-胺盐酸盐、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
5-氯-N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3
5-氯-N-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
5-氯-N-(4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
5-氯-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
5-氯-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3 3
N-甲基-N-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-6-甲腈、
3
N-(3-乙炔基苯基)-1-苯并噻吩-2,3-二胺、
3
N-(2,3-二甲基苯基)-1-苯并噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(吡啶-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-5-甲
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-5-甲腈、
3
N-(3-甲氧基-5-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
7
N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[3,2-d]嘧啶-6,7-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲酸、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-N5,N5-二甲基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,5-三胺、
3
N-(3-环丁基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-环戊基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(三氟甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-2-基氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3 7
N-(3-氯-4-氟苯基)-N-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺、
3 7
N-(3-氯-4-氟苯基)-N-(吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(苯基乙炔基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(吡啶-2-基)呋喃并[2,3-c]
吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-(3-二甲基氨基)乙氧基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(哌啶-1-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-N-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯甲腈、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯甲酸甲酯、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-吗啉代吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,6-二甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
7-氯-N3-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(2-甲氧
基乙基)苯甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,3,4-三氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯
甲腈、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-氟苯基)-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-5-甲氧基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯
甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
5-氯-N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-6-硝基苯并呋喃-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((2-氯苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈、
2-氨基-3-((4-氟-3-(三氟甲基)苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈、
2-氨基-3-((3,5-二氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈、
3
N-(3,5-二氟苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡
啶-2-甲酰胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(2-甲氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-氯苯基)-N-(3,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-N7,N7-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺、
3
N-(4-氟苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氯苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(吡啶-4-基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(萘-1-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(2-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3
N-(3,4-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-7-基)苯甲腈、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-5-甲基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-5-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氯苯基)-5-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((2-氯苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲
酰胺、
3
N-(3-氯苯基)-5-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
5-氟-N-(3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
5-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲
酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲
酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-(三氟甲基)苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基
吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((4-氟-3-(三氟甲基)苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲
基吡啶-2-甲酰胺、
3
5-氟-N-(4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲氧基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-溴苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(2-乙基苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-甲氧基苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(4-溴-2-甲基苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N3-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
5-氟-N-(4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(2-(哌啶-1-基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(3-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-吗啉代呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-5-氟-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(萘-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-苯基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-丁基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(叔丁基)
吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-异丁基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-丙基吡
啶-2-甲酰胺、
3
N-(3-氯苯基)-5-氟-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,4-二氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-环己基吡
啶-2-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3,5-二氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-(叔丁基)吡啶-4-基)-N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-6-氧化物、
7-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N3-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-乙基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5-氯-2-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-2-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
(4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)吡啶-2-基)
(哌啶-1-基)甲酮、
(4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)吡啶-2-基)
(吗啉代)甲酮、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(吡
啶-2-基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(2-吗啉
代乙基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-戊基吡
啶-2-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-氯-5-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3,5-二甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3,5-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-苯乙烯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(异喹啉-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-溴-4-甲基苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-([1,1'-联苯]-3-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-溴-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
3
N-(3-(二氟甲基)苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3-((2-氨基-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基)苯甲腈、
3
N-(4-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-己基-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-苄基-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-环己基-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
3
(E)-N-(4-氟苯基)-7-苯乙烯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
(E)-N-(3,4-二氟苯基)-7-苯乙烯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
(E)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-7-苯乙烯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)-N-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲酰胺、
3
7-(氨基甲基)-N-(3-氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
乙酸2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基酯、
N-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)乙酰胺、
3
N-(2-氯苯基)-7-(哌啶-4-基甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(吡啶-4-基甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
(2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)甲醇、
3
N-(3-氯苯基)-7-(三氟甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(环己基氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-N-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-磺酰胺、
2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)-N-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-7-磺酰胺、
3
N-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氯苯基)-5-(三氟甲氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-5-甲腈、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N,N-二甲基
吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-乙基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-异丙基吡
啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(2-甲氧
基乙基)吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并
[2,3-c]吡啶-7-基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(吡
啶-3-基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(吡
啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(4-甲基
哌嗪-1-基)吡啶-2-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺、
3-((3-氯-4-氟苯基)硫基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-胺、
3-((3-氯-4-氟苯基)硫基)苯并呋喃-2-胺、
3-(3-氯-4-氟苯氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-胺、
3-(3-氯-4-氟苯氧基)苯并呋喃-2-胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)苯并呋喃-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并呋喃-2,3-二胺、
N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)苯并呋喃-2,3-二胺、
N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)苯并呋喃-2,3-二胺、
N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并呋喃-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰
胺、
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-5-醇、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)苯并呋喃-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4-氟苯基)-7-(2-氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-1H-吲哚-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-吲哚-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基
吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-1H-吲哚-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰
胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(4-甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(咪唑并[1,2-a]吡啶-5-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基-1H-咪
唑-1-甲酰胺、
3
N-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
7-(2-甲基吡啶-4-基)-N3-(1H-吡咯-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(1-甲基-1H-吲哚-2-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
N-(6-氯嘧啶-4-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(6-氟嘧啶-4-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2-氟嘧啶-5-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(4,5-二氟嘧啶-2-基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
7-(2,6-二氟吡啶-4-基)-N3-(4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(5-氯-2-氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(4-(甲氧基甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
7-(2-氯-6-氟苯基)-N3-(3,4-二氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
N-(4-(2-氨基-3-((3,4-二氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)苯基)吡咯
烷-1-甲酰胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(4-氟-2-甲基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(4-丙氧基苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3,4-二氟苯基)-7-(4-吗啉代苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
5-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-2-氟苯酚、
5-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-2-氯苯甲酸
甲酯、
3-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基苯甲
酰胺、
4-(4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)吡啶-2-甲
酰氨基)丁酸、
3
7-(2,6-二氟吡啶-4-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二
胺、
3
7-(2-氟吡啶-4-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
5-氟-7-(2-甲基吡啶-4-基)-N3-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基
吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-5-氟-3-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲
基吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-5-氟呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲
基吡啶-2-甲酰胺、
3
5-氟-N-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-6-氟苯并[b]噻吩-2,3-二胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-1-甲基-1H-吲哚-2,3-二胺、
3
7-(2,6-二氟吡啶-4-基)-N-(3-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
3
N-(2,5-二氟苯基)-7-(2,6-二氟吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-(2-羟基
乙基)吡啶-2-甲酰胺、
4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N,N-二乙基
吡啶-2-甲酰胺、
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2,3-二氯苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，或
3
N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(萘-2-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺。
64.权利要求1的化合物的前药，其中所述前药为酰基化的化合物，其具有式(II)：
其中R9为任选取代的C1-C6烷基。
65.权利要求64的化合物，其中R9为甲基。
66.权利要求1的化合物的前药，其中所述前药为氨基甲酸酯化合物，其具有式
(III)：
10
其中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。
10
67.权利要求66的化合物，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和
1-(C1-C6烷氧基)乙基。
68.权利要求1的化合物的前药，其中所述前药为二氨基甲酸酯化合物，其具有(IV)：
11
其中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。
11
69.权利要求68的化合物，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和
1-(C1-C6烷氧基)乙基。
9 11
70.权利要求64至69的化合物，其中R -R 为任选取代的C1-C6烷基或单环或二环的C6-C14芳基或杂芳基。
71.权利要求1至70的化合物，其为：
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸苄酯、
(2-(((苄基氧基)羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨
基甲酸苄酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯、
(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸
乙酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸甲酯、
(3-氯-4-氟苯基)(2-((甲氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸
甲酯、
(3-氯-4-氟苯基)(7-氰基-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)
氨基甲酸乙酯、
(3-氯-4-氟苯基)(7-(3-氰基苯基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-3-基)氨基甲酸乙酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-氰基呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸苄酯、
(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨
基甲酸乙酯,
(7-(4-氨甲酰基苯基)-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)
氨基甲酸乙酯、
(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯、
(7-溴-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨
基甲酸乙酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(2,6-二甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡
啶-2-基)氨基甲酸乙酯、
(3-氯-4-氟苯基)(7-(2,6-二甲基吡啶-4-基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并
[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯、
(3-氯-4-氟苯基)(6-氰基-2-((乙氧基羰基)氨基)苯并呋喃-3-基)氨基甲酸乙
酯、
(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(4-氟-3-(三
氟甲基)苯基)氨基甲酸乙酯、
(7-氰基-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(4-氟-3-(三氟甲
基)苯基)氨基甲酸乙酯、
(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-2-基)氨基甲酸乙酯、
(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]
吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯，或
(3,4-二氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]
吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯。
72.权利要求1至67或70中任一项的化合物，其为乙酰化的前药。
73.权利要求1至72中任一项的化合物，其为酸或碱的盐。
74.权利要求1至73中任一项的化合物，其中所述盐为乙酸盐、琥珀酸酯、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、异烟酸盐、乳酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、酒石酸盐、三氟乙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、鞣酸盐或吡啶鎓盐。
75.权利要求1或74的化合物，其为：
3
7-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3-((3-氯苯基)硫基)苯并[b]噻吩-2-胺盐酸盐、
3-(3-氯苯氧基)苯并[b]噻吩-2-胺盐酸盐、
3
5-氯-N-(3-氯-4-氟苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3
5-氯-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐、
3 3
N-甲基-N-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐，或
N3-(2-乙基苯基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺盐酸盐。
76.权利要求1至75中任一项的化合物，其中所述化合物为式(I)、(II)、(III)或(IV)化合物的代谢物及其药用盐或前药。
77.组合物，其包含权利要求1至76中任一项的化合物和药用载体。
78.试剂盒，其包含权利要求1至77中任一项的化合物。
79.权利要求78的试剂盒，还包含一种或多种其它药物，所述药物包括化疗剂、疫苗、靶向抗体、过继性T细胞转移、B细胞疗法、靶向药物和激素疗法。
80.调节犬尿氨酸途径的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至
77中任一项的化合物。
81.调节吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶
中任意一种或多种的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
82.权利要求80或81的方法，其中所述调节包括抑制犬尿氨酸途径或一种或多种所述酶。
83.减少犬尿氨酸途径代谢物的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77的化合物。
84.改变受试者中色氨酸水平的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予治疗有效量的权利要求1至77的化合物。
85.权利要求84的方法，其中所述色氨酸水平是增加的。
86.治疗免疫抑制的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
87.权利要求86的方法，其中所述免疫抑制与犬尿氨酸水平增加或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的酶活性增强相关。
88.减少或消除免疫介导的病症的方法，所述方法包括向有此需要的患者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
89.抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶
或这两者的活化的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
90.治疗由犬尿氨酸途径的失调导致的疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
91.治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加
氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求
1至77中任一项的化合物。
92.治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或色氨酸2,3-双加氧酶的活化引起的疾病的方
法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
93.治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶或此两者的活化引起的疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
94.治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或此两者引起的疾病
的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
95.治疗可通过抑制犬尿氨酸途径治疗的疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
96.调节特征在于由归因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色
氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化的失调的犬尿氨酸途径导致的异常免疫抑制的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
97.抑制自身免疫抗体产生的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给予权利要求
1至77中任一项的化合物。
98.权利要求98的方法，其中(i)吲哚胺2,3-双加氧酶-2被抑制，(ii)KYN水平减
少，或(ii)所述自身抗体产生与自身免疫病症、炎性病症或癌症相关。
99.权利要求80至98中任一项的方法，其中所述疾病为癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。
100.权利要求80至99中任一项的方法，其中所述疾病为抑郁、阿尔茨海默病、痴呆、精神分裂症、HIV感染、疟疾、类风湿性关节炎、失眠或多发性硬化症。
101.权利要求80至99中任一项的方法，其中所述癌症为鳞状细胞癌、腹膜癌、前列腺癌、头癌、颈癌、眼癌、口癌、喉癌、食道癌、支气管癌、喉癌、咽癌、甲状腺癌、胸癌、骨癌、肺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、子宫癌、宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、睾丸癌、阴茎癌、肛门癌、皮肤癌、甲状腺癌、血癌、淋巴结癌、肾癌、肝癌、肠癌、唾液腺癌、胰腺癌、脑癌、脊柱癌、肾上腺癌、皮肤癌或白血病。
102.权利要求80至101中任一项的方法，所述方法还包括一种或多种治疗剂或疗法。
103.权利要求80至99、101或102中任一项的方法，其中所述治疗剂或疗法为选自
以下的化疗剂：癌症疫苗、靶向药物、靶向抗体、抗体片段、抗代谢物、抗肿瘤药、抗叶酸剂、毒素、烷化剂、DNA链破坏剂、DNA小沟结合剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物、核苷酸还原酶抑制剂、微管蛋白相互作用剂、抗激素剂、免疫调节剂、抗肾上腺剂、细胞因子、放射疗法、细胞疗法或激素疗法。
104.权利要求105的方法，其中所述化疗剂选自：多柔比星、表柔比星、甲氨蝶呤、紫杉醇或其衍生物、环磷酰胺、5-FU、顺铂、吉西他滨、放线菌素、左旋咪唑、依托泊苷、拓扑替康、塞替派、长春碱和多西他赛和卡铂或其衍生物。
105.权利要求102的方法，其中所述治疗剂为癌症疫苗、靶向抗体、过继性T细胞转移、靶向药物和激素疗法。
106.权利要求105的方法，其中所述靶向抗体为抗-CTLA4、抗-PD1或抗-PD-L1。
107.制备式(I-C)化合物的方法，所述方法包括：
其中：
X1为CR1、N或NO；
X2为CR2、N或NO；
X3为CR3、N或NO；
X4为CR4、N或NO；且
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基；
5
(i) 与胺(R-NH2)反应；
(ii)步骤(i)的产物与氰化物盐反应；和
(iii)步骤(ii)的产物与路易斯酸反应。
108.权利要求107的方法，其中所述路易斯酸选自三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯、Sc(OTf)3、Fe(OTf)2、Ni(OTf)2和In(OTf)3。
109.权利要求107的方法，其中所述氰化物盐选自三烷基氰基甲硅烷、NaCN、KCN和Zn(CN)2。
110.权利要求109的方法，其中所述三烷基氰基甲硅烷为TMSCN。
111.权利要求108的方法，其中步骤(i)的产物为亚胺中间体。
112.通过权利要求107至111的方法获得的化合物。
113.诊断和治疗受试者中与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺
2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法，所述方法包括：
测定来自受试者的血液和/或组织样品；
确定样品中受试者的血液和/或组织色氨酸或犬尿氨酸浓度或此两者；
任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例；和
给予权利要求1至77中任一项的化合物。
114.监测受试者中与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧
酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法，所述方法包括：
向患有与犬尿氨酸途径相关的疾病的受试者投予权利要求1至77中任一项的化合
物；
在一个或多个时间点或在治疗方案过程中持续分析血液或组织样品或此两者；
确定血液或组织样品或此两者中色氨酸和犬尿氨酸浓度；
任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例；和
调整治疗方案或化合物的剂量。
115.诊断和治疗患者中与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双
加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法，所述方法包括：
分析患者样品存在或不存在改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，其中如果检测到改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，则所述患者诊断有与犬尿氨酸途径相关的疾病；和
向经诊断的患者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
116.治疗与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色
氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法，所述方法包括：
需要测试提供分析结果以确定患者的犬尿氨酸水平是否改变；和
如果患者的犬尿氨酸水平改变，则向患者给予权利要求1至77中任一项的化合物。
117.权利要求113至116的方法，其中所述疾病为癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。
犬尿氨酸途径的抑制剂
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本非临时申请要求2013年3月14日提交的美国临时申请系列号61782841的权益，通过引用的方式将其整体并入本文。
技术领域
[0003] 本申请大体涉及如下的药物化合物，其调节酶吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶且用于治疗具有改变的氨基酸L-色氨酸和犬尿氨酸途径的代谢物的水平的疾病和病症。
背景技术
[0004] 必需氨基酸色氨酸(Trp)通过犬尿氨酸(KYN)途径进行分解代谢。犬尿氨酸途径中的起始限速步骤由含血红素的氧化还原酶进行，所述氧化还原酶包括色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)、吲哚胺2,3-双加氧酶-1(IDO1)和吲哚胺2,3-双加氧酶-2(IDO2)。IDO1和IDO2与TDO在氨基酸水平共享非常有限的同源性，并且尽管它们具有不同的分子结构，但是每种酶具有相同的生物化学活性，即它们各自催化色氨酸形成N-甲酰基犬尿氨酸。由于IDO1、IDO2和/或TDO的活性可导致多种与免疫抑制相关的病症，这些酶活性能够改变局部色氨酸浓度和犬尿氨酸途径代谢物的蓄积(build-up)。
[0005] IDO1和TDO涉及与保持肿瘤抗性、慢性感染、HIV感染、疟疾、精神分裂症、抑郁相关的免疫抑制病症的维持和提高对预防子宫内胎儿排斥反应的免疫耐受的正常现象。抑制IDO1、IDO2和TDO活性的治疗剂可用于在与癌症和病毒感染相关的免疫抑制病症(例如HIV-AIDS、HCV)中调节调控性T细胞并活化细胞毒性T细胞。犬尿氨酸途径且特定地IDO1和TDO的局部免疫抑制性质已与癌症有关联。已经显示，大部分原发癌细胞过表达IDO1。此外，最近TDO已与人类脑肿瘤有关联。
[0006] 最早的实验已经提出IDO1的抗微生物作用，并且表明由IDO1的色氨酸的局部 耗竭(depletion)导 致微 生物 死亡 (Yoshida et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1978,75(8):3998–4000)。后续研究导致发现IDO1在免疫抑制中更复杂的作用，最佳例证是对同种异体胎儿的母胎耐受的情况，其中IDO1在预防胎儿从子宫的排斥反应中发挥免疫抑制作用。投予特定IDO1抑制剂的怀孕小鼠通过诱导T细胞迅速排斥同种异体胎儿(Munn et al.、Science,1998,281(5380):1191-3)。从那时起研究已确定IDO1作为免疫系统的某些病症的调节物且已发现其在移植组织在新宿主中的存活能力中发挥作用(Radu et al.,Plast.Reconstr.Surg.,2007Jun,119(7):2023-8)。据信，导致升高的犬尿氨酸途径代谢物的增强的IDO1活性引起外周免疫耐受并最终引起全身免疫耐受。体外研究表明淋巴细胞的增殖和功能对犬尿氨酸极度敏感(Fallarino et al.,Cell Death and Differentiation,2002,9(10):1069-1077)。通过活化的树突细胞的IDO1的吡啶通过以下机制抑制免疫应答：在T淋巴细胞中细胞周期停滞、向下调节T淋巴细胞受体(TCR)和活化调控性T细胞(T-regs)(Terness et al.,J.Exp.Med.,2002,196(4):447–457；Fallarino et al.,J.Immunol.,2006,176(11):6752–6761)。
[0007] IDO1由HIV感染长期诱导并转而增加调控性T细胞，导致患者的免疫抑制(Sci.Transl.Med.,2010；2)。最近已显示，在HIV的小鼠模型中，IDO1抑制可增强病毒特异性T细胞的水平并伴随地减少病毒感染的巨噬细胞(Potula et al.,2005,Blood,106(7):2382-2390)。IDO1活性还已与其它寄生虫感染有关联。已显示，小鼠疟疾模型中IDO1的活性升高由体内IDO1抑制所消除(Tetsutani K.,et al.,Parasitology.20077:923-30)。
[0008] 最近，由多个不同课题组发表的多篇报道已专注于肿瘤通过活化IDO1创造适用于存活、生长和转移的致耐受性环境的能力(Prendergast,Nature,2011,478(7368):192-4)。肿瘤抗性的研究已显示表达IDO1的细胞可增加调控性T细胞的数量并抑制细胞毒性T细胞应答，由此容许免疫逃逸并促进肿瘤耐受。
[0009] 犬尿氨酸途径和IDO1据信还在母胎耐受和预防子宫内胎儿排斥反应的免疫抑制过程中发挥作用(Munn et al.、Science,1998,281(5380):1191–1193)。投予特定IDO1抑制剂的怀孕小鼠通过抑制T细胞活性迅速排斥同种异体胎儿(Munn et al.、Science,1998,281(5380):1191-1193)。从那时起研究已确定IDO1作为免疫介导的病症的调节物且表明其在移植组织在新宿主中的存活能力中发挥作用(Radu et al.,Plast.Reconstr.Surg.,2007Jun,119(7):2023-8)。
[0010] 犬尿氨酸途径且特定地IDO1和TDO的局部免疫抑制性质已与癌症有关联。大部分原发癌细胞过表达IDO1和/或TDO(Pilotte et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.
USA,2012,Vol.109(7):2497-2502)。几项研究已专注于肿瘤通过活化IDO1创造适用于存活、生长和转移的致耐受性环境的能力(Prendergast,Nature,2011,478:192-4)。由过表达IDO1和/或TDO与犬尿氨酸途径的失调相关的T-regs数量的增加和细胞毒性T细胞应答的抑制似乎导致肿瘤抗性并促进肿瘤耐受。
USA,2012,Vol.109(7):2497-2502)。几项研究已专注于肿瘤通过活化IDO1创造适用于存活、生长和转移的致耐受性环境的能力(Prendergast,Nature,2011,478:192-4)。由过表达IDO1和/或TDO与犬尿氨酸途径的失调相关的T-regs数量的增加和细胞毒性T细胞应答的抑制似乎导致肿瘤抗性并促进肿瘤耐受。
[0011] 来自临床和动物研究的数据均表明抑制IDO1和/或TDO活性可对癌症患者有益且可减缓或防止肿瘤转移(Muller et al.,Nature Medicine,2005,11(3):312-319；Brody et al.,Cell Cycle,2009,8(12):1930-1934；Witkiewicz et al.,Journal of the American College of Surgeons,2008,206:849-854；Pilotte et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2012,Vol.109(7):2497-2502)。 小 鼠 中IDO1 基 因 的 基 因 切除(IDO1-/-)导致DMBA诱导的噁化前皮肤乳头状瘤的发生降低(Muller et al.,PN
AS,2008,105(44):17073–17078)。通过siRNA的IDO1表达的沉默或药理学IDO1抑制剂1-甲基色氨酸增强肿瘤特异性杀伤(Clin.Cancer Res.,2009,15(2)。此外，在荷瘤宿主中抑制IDO1改善在减少剂量的常规化疗的结果(Clin.Cancer Res.,2009,15(2))。
临床上，在数种人类肿瘤类型中发现的IDO1的明显表达与阴性预后和差存活率
有 关 (Zou,Nature Rev.Cancer,2005,5:263–274；Zamanakou et al.,Immunol.Lett.2007,111(2):69-75)。当与来自健康志愿者的血清相比时，来自癌症患者的血清具有较高的犬尿氨酸/色氨酸比例、较高的循环T-regs的数量和增加的效应器T细胞凋亡(Suzuki et al.,Lung Cancer,2010,67:361-365)。Pilotte等人已研究了通过抑制色氨酸2,3-双加氧酶的肿瘤免疫抗性的逆转(Pilotte et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2012,Vol.109(7):2497-2502)。因此，通过抑制IDO1和/或TDO降低犬尿氨酸产生的速度可对癌症患者有益。
AS,2008,105(44):17073–17078)。通过siRNA的IDO1表达的沉默或药理学IDO1抑制剂1-甲基色氨酸增强肿瘤特异性杀伤(Clin.Cancer Res.,2009,15(2)。此外，在荷瘤宿主中抑制IDO1改善在减少剂量的常规化疗的结果(Clin.Cancer Res.,2009,15(2))。
临床上，在数种人类肿瘤类型中发现的IDO1的明显表达与阴性预后和差存活率
有 关 (Zou,Nature Rev.Cancer,2005,5:263–274；Zamanakou et al.,Immunol.Lett.2007,111(2):69-75)。当与来自健康志愿者的血清相比时，来自癌症患者的血清具有较高的犬尿氨酸/色氨酸比例、较高的循环T-regs的数量和增加的效应器T细胞凋亡(Suzuki et al.,Lung Cancer,2010,67:361-365)。Pilotte等人已研究了通过抑制色氨酸2,3-双加氧酶的肿瘤免疫抗性的逆转(Pilotte et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2012,Vol.109(7):2497-2502)。因此，通过抑制IDO1和/或TDO降低犬尿氨酸产生的速度可对癌症患者有益。
[0012] IDO1和IDO2与炎性疾病有关联。IDO1敲除小鼠显现典型验证的自发性病症并且现有已知的IDO的小分子抑制剂不引起广泛的炎性反应(Prendergast et al.Curr Med Chem.2011；18(15):2257-62)。相反，IDO损伤减轻由慢性炎症促进的皮肤癌、炎症相关性关节炎和过敏性气道疾病的模型中疾病严重度。此外，IDO2为自身免疫性关节炎中自身抗体产生和炎性发病机制的关键中介物(mediator)。由于引致病性自身抗体和Ab分泌细胞的下降，与野生型小鼠相比，IDO2敲除小鼠具有减少的关节炎症(Merlo et al.J.Immunol.(2014)vol.192(5)2082-2090)。因此，IDO1和IDO2的抑制剂可用于治疗关节炎和其它炎性疾病。
[0013] 犬尿氨酸途径失调及IDO1和TDO在脑肿瘤中发挥重要作用并与几种神经变性病症的炎性应答有关联，所述病症包括多发性硬化症、帕金森病、阿尔茨海默病、中风、肌萎缩性侧索硬化症、痴呆(Kim et al.,J.Clin.Invest,2012,122(8):2940–2954；Gold et al.,J.Neuroinflammation,2011,8:17；Parkinson's Disease,2011,Volume 2011)。 由IDO1活性和犬尿氨酸代谢物诱导的免疫抑制可用IDO1和/或TDO的抑制剂治疗。例如，发现用抗病毒剂IDO1的抑制剂治疗的成胶质细胞瘤患者循环T-reg水平降低(et al.,J.Neuroinflammation,2010,7:44)。
[0014] 几项研究已发现犬尿氨酸途径代谢物具有神经活性和神经毒性。已知神经毒性犬尿氨酸代谢物在具有实验性过敏性脑脊髓炎的大鼠的脊髓中增加(Chiarugi et al.,Neuroscience,2001,102(3):687-95)。犬尿氨酸代谢物的神经毒性效应通过增加的血浆葡萄糖水平而加剧。另外，已在几种神经变性病症中发现犬尿氨酸相对或绝对浓度的变化，诸如阿尔茨海默病、亨廷顿病和帕金森病、中风和癫痫(Németh et al.,Central Nervous System Agents in Medicinal Chemistry,2007,7:45-56；Wu et al.2013；PLoS One；8(4))。
[0015] 神经精神疾病和心境障碍诸如抑郁和精神分裂症据说也具有IDO1和犬尿氨酸失调。色氨酸耗竭和神经递质5-羟色胺(5-HT)的缺乏导致抑郁和焦虑。增强的IDO1活性通过以下方式减少5-HT的合成：经由犬尿氨酸途径增加色氨酸分解代谢，减少用于5-HT合成的色氨酸的量(Plangar et al.(2012)Neuropsychopharmacol Hung 2012；14(4):239-244)。在已故精神分裂症患者的脑中已发现IDO1活性增强及犬尿氨酸和犬尿酸的水平均增加(Linderholm et al.、Schizophrenia Bulletin(2012)38:426–432))。因此，对于患有神经学疾病或病症和神经精神疾病或病症诸如抑郁和精神分裂症以及失眠的患者而言，抑制IDO1、IDO1和TDO也可为重要的治疗策略。
[0016] 犬尿氨酸途径失调及IDO1和/或TDO活性还与心血管风险因子有关，并且犬尿氨酸和IDO1为除肾病之外的动脉粥样硬化和其它心血管心脏病诸如冠心病的标志物 (Platten et al.、Science,2005,310(5749):850-5,Wirlietner et al.Eur J Clin Invest.2003Jul；33(7):550-4)。犬尿氨酸与氧化应激、炎症和患有晚期肾病的患者中心血管疾病的患病率相关(Pawlak et al.,Atherosclerosis,2009,(204)1:309–314)。研究显示，在患有慢性肾病的患者中犬尿氨酸途径代谢物与内皮机能障碍标志物相关(Pawlak et al.,Advances in Medical Sciences,2010,55(2):196-203)。
[0017] 本领域中需要作为吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶途径的抑制剂化合物，以及治疗可从上述抑制中获益的疾病的方法。发明内容
[0018] 在一个方面，本发明提供式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其中X1-X4、Y和Z在本文中定义。
[0019]
[0020] 在另一个方面，本发明提供式(I-A)、(I-AA)、(I-AAA)、(I-B)、(I-BB)、(I-BBB)、(I-BBBB)、(I-BBBBB)、(I-BBBBBB)、(I-C)、(I-CC)、(I-D)、(I-DD)、(I-E)、(I-EE)、(I-F)、(I-FF)、(I-G)和(I-GG)化合物，其中X1-X4、R1、R2、R3、R4、R5和R6在本文中定义。
[0021]
[0022]
[0023] 在另一个方面，本发明涉及式(I)化合物的前药，其具有式(II)、(III)或(IV)，9 11
其中R-R 在本文中定义。
其中R-R 在本文中定义。
[0024]
[0025] 在一个方面，本发明涉及式(I)-(IV)化合物或所述式(I)化合物的前药或药用盐或前药。
[0026] 在另一个方面，本发明提供组合物，其包含本文所述的化合物或其前药和药用载体。
[0027] 在另一个方面，本发明提供组合物，其包含本文所述的式(I)-(IV)化合物的代谢物或其前药和药用载体。
[0029] 在另一个方面，本发明提供治疗可通过抑制犬尿氨酸途径治疗的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，本发明提供调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0030] 在另一个方面，本发明提供调节吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，所述调节为抑制犬尿氨酸途径或一种或多种所述酶。
[0031] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0032] 在一个方面，本发明提供减少犬尿氨酸途径代谢物的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0033] 在另一个方面，本发明提供改变受试者中色氨酸水平的方法且包括给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个方面，色氨酸水平增加。在另一个方面，犬尿氨酸/色氨酸比例降低。
[0034] 在一个方面，本发明提供治疗与犬尿氨酸途径的失调相关的或由犬尿氨酸途径的失调导致的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0035] 在另一个方面，本发明提供治疗通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶的犬尿氨酸途径的失调引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其药用盐或前药。
[0036] 在另一个方面，本发明提供治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或色氨酸2,3-双加氧酶或两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，本发明提供治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶或两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0037] 在另一个方面，本发明通过治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0038] 在另一个方面，本发明提供抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0039] 在另一个方面，本发明提供治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0040] 在另一个方面，本发明提供治疗特征在于导致犬尿氨酸途径的失调的异常免疫抑制的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0041] 在另一个方面，本发明提供治疗特征在于由于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中任意一种或多种的活化导致失调的犬尿氨酸的异常免疫抑制的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物、其代谢物或药用盐或前药。
[0042] 在一个方面，本发明提供治疗免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，免疫抑制与增加的犬尿氨酸代谢物水平或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的酶活性相关。在另一个方面，本发明提供治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶的一种或多种相关的免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。因此，在一个方面中，本发明化合物用于治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的免疫抑制。
[0043] 在另一个方面，本发明通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶和/或色氨酸2,3-双加氧酶的酶活性治疗免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0044] 在另一个方面，本发明通过减少或消除免疫介导的病症的方法且包括向患者给予本文所述的式(I)-(IV)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0045] 在另一个方面，本发明提供抑制受试者中自身免疫反应或自身免疫抗体产生的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，抑制自身免疫反应或自身免疫抗体产生的方法通过以下方式进行抑制：(i)抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-2或(ii)减少犬尿氨酸代谢物，且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个方面，前述自身免疫反应或自身免疫抗体产生的减少与炎性疾病、癌症或自身免疫病症相关。
[0046] 在一个方面，疾病的名单包括癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。在另一个方面，所有前述方法包括给予一种或多种治疗剂或疗法。在一个方面，所述治疗剂为选自一组的化疗剂，其还包括癌症疫苗、靶向药物、靶向抗体、抗体片段、抗代谢物、抗肿瘤药、抗叶酸剂、毒素、烷化剂、DNA链破坏剂、DNA小沟结合剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物、核苷酸还原酶抑制剂、微管蛋白相互作用剂、抗激素剂、免疫调节剂、抗肾上腺剂、细胞因子、放射疗法、细胞疗法或激素疗法。
[0047] 在另一个方面，本发明提供治疗抑郁、阿尔茨海默病、痴呆、精神分裂症、HIV感染、疟疾、类风湿性关节炎、失眠或多发性硬化症的方法且包括向患者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0048] 在一个方面，所述疾病为癌症。在另一个方面，癌症疾病为鳞状细胞癌、腹膜癌、前列腺癌、头癌、颈癌、眼癌、口癌、喉癌(throat)、食道癌、支气管癌、喉癌(larynx)、咽癌、甲状腺癌、胸癌、骨癌、肺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、子宫癌、宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、睾丸癌、阴茎癌、肛门癌、皮肤癌、甲状腺癌、血癌、淋巴结癌、肾癌、肝癌、肠癌、唾液腺癌、胰腺癌、脑癌、脊柱癌、肾上腺癌、皮肤癌或白血病。在另一个方面，本发明提供治疗肿瘤抗性的方法，其包括向患者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0049] 在另一个方面，所述病毒感染为HIV感染。在另一个方面，寄生虫感染为疟疾或利什曼病。
[0050] 在另一个方面，本发明提供本文所述制备式(I-C)化合物的方法。在另一个方面，本发明提供通过制备式(I-C)化合物的方法获得的化合物。
[0051] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗受试者中与犬尿氨酸途径或与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一个或多个相关的疾病的方法且包括：(i)测定来自受试者的血液和/或组织样品；(ii)确定样品中受试者的血液和/或组织色氨酸或犬尿氨酸浓度或此两者；(iii)任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例；和(iv)向受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0052] 在另一个方面，本发明提供监测受试者中与犬尿氨酸途径或与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)向患有与犬尿氨酸途径相关的疾病的受试者投予化合物，(ii)在一个或多个时间点或在治疗方案过程中持续分析血液或组织样品或此两者，(iii)确定血液或组织样品或此两者中色氨酸和犬尿氨酸浓度，(iv)任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例，和(v)调整治疗方案或化合物的剂量。
[0053] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗患者中与犬尿氨酸途径或与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)分析患者样品存在或不存在改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，其中如果检测到改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，则所述患者诊断有与犬尿氨酸途径相关的疾病，和(ii)向经诊断的患者给予化合物。
[0054] 在另一个方面，本发明提供治疗与犬尿氨酸途径或与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)需要测试提供分析结果以确定患者的犬尿氨酸水平是否改变，和(ii)如果患者的犬尿氨酸水平改变，则向患者给予化合物。
[0055] 在另一个方面，本发明提供前述方法的用途，其中所述疾病为癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。
[0056] 从本发明的下列详细描述中将容易看出本发明的其它方面和优点。
[0058] 图1(a)显示当每日两次(BID)口服单独投予测试化合物2(40mg/kg在30％PEG400+20％PG在NS(生理盐水)中)或媒介物时Balb/c小鼠中CT-26肿瘤细胞的平均肿瘤生长率。
[0059] 图1(b)显示当每日两次口服单独投予测试化合物97(75mg/kg在40％PEG400+20％PG+10％DACM在NS中)或媒介物时Balb/c小鼠中CT-26肿瘤细胞的平均肿瘤生长率。
[0060] 图1(c)显示当每日两次口服单独投予测试化合物166(60mg/kg在40％PEG400+20％PG+10％DACM在NS中)或媒介物时Balb/c小鼠中CT-26肿瘤细胞的平均肿瘤生长率。
[0061] 图1(d)显示当每日两次口服单独投予测试化合物184(50mg/kg在40％PEG400+20％PG+10％DACM在NS中)或媒介物Balb/c小鼠中CT-26肿瘤细胞的平均肿瘤生长率。
[0062] 图2(a)显示当每日两次口服单独投予测试化合物184(50mg/kg在40％PEG400+20％PG+10％DACM在NS中)和媒介物或与多柔比星(DOXO)组合时Balb/c小鼠中CT-26细胞的平均肿瘤生长率。
[0063] 图2(b)显示当每日两次口服单独投予测试化合物97(75mg/kg在40％PEG400+20％PG+10％DACM在NS中)和媒介物或与DOXO组合时Balb/c小鼠中CT-26肿瘤细胞的平均肿瘤生长率。
具体实施方式
[0064] 定义
[0065] 除非上下文另有说明，否则下列定义用于本发明的化合物连接。
[0066] 在整个说明书和本说明书的权利要求中，词语“包括(comprise)”及其它形式的词语诸如“包含(comprising)”和“含有(comprises)”，意指包括但不限于，并且不旨在排除例如其它添加剂、组分、整数或步骤。
[0067] 如在说明书和所附权利要求书中，单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”包括复数对象，除非上下文另有明确说明。因此，例如，提及“一种组合物”包括两种或更多种这类组合物的混合物。
[0068] “任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可发生或不发生，并且该描述包括其中事件或情况发生的实例和其中事件或情况不发生的实例。
[0069] 下列定义用于本发明的化合物，除非上下文另有说明。通常，存在于给定基团的碳原子数被指定为“Cx-Cy”，其中x和y分别为下限和上限。例如，指定为“C1-C6”的基团含有1至6个碳原子。本文定义中使用的碳数是指碳骨架和碳支链，但不包括取代基诸如烷氧基取代等的碳原子。除非另有说明，未明确在本文中定义的取代基的命名法是通过从左到右命名官能团的末端部分和朝向连接点的相邻官能团获得。例如，取代基“芳基烷基氧基羰基”是指基团(C6-C14芳基)-(C1-C6烷基)-OC(O)-。术语任选取代的是指将基团的氢原子替代为烷基、烷氧基、芳基、单环或二环环烷基、单或二环杂环基、(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基取代、-NH2、氨基烷基、烷基羧基、(烷基)羧酰氨基、(芳基)氨基、卤代烷基、杂芳基、杂环基、杂芳基(烷基)、单、二或全氟烷基、卤素、CN、C(O)OH、酰胺、由伯胺或仲胺形成的酰胺、NO2、OH、单氟烷氧基、二氟烷氧基、三氟烷氧基和羟基烷基。本文中未定义的术语具有本领域技术人员通常归于它们的含义。
[0070] “烷基”是指可为直链或支链的烃链，其含有指定的碳原子数，例如C1-C12烷基在其中可具有1至12个(包括在内)碳原子。C1-C6烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、新戊基和异己基。C1-C8烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、戊基、己基、庚基、3-甲基己-1-基、2,3-二甲基戊-2-基、3-乙基戊-1-基、辛基、2-甲基庚-2-基、2,3-二甲基己-1-基和2,3,3-三甲基戊-1-基。
烷基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、NH2、(烷基)NH、(烷基)(烷基)N-、-N(烷基)C(O)(烷基)、-NHC(O)(烷基)、-NHC(O)H、-C(O)NH2、-C(O)NH(烷基)、-C(O)N(烷基)(烷基)、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、-C(O)O(烷基)、-C(O)(烷基)、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基、卤代烷基、氨基烷基、-OC(O)(烷基)、羧酰氨基烷基-、NO2和烷基-CN。
烷基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、NH2、(烷基)NH、(烷基)(烷基)N-、-N(烷基)C(O)(烷基)、-NHC(O)(烷基)、-NHC(O)H、-C(O)NH2、-C(O)NH(烷基)、-C(O)N(烷基)(烷基)、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、-C(O)O(烷基)、-C(O)(烷基)、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基、卤代烷基、氨基烷基、-OC(O)(烷基)、羧酰氨基烷基-、NO2和烷基-CN。
[0071] “烷氧基”是指其中R为上文定义的烷基的基团R-O-。示例性C1-C6烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-丙氧基、正丁氧基和叔丁氧基。烷氧基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、OH,烷氧基、NH2、(烷基)氨基-、二(烷基)氨基-、(烷基)C(O)N(C1-C3烷基)-、(烷基)羧基酰氨基-、HC(O)NH-、H2NC(O)-、(烷基)NHC(O)-、二(烷基)NC(O)-、CN、C(O)OH、(烷氧基)羰基-、(烷基)C(O)-、芳基、杂芳基、环烷基、卤代烷基、氨基(C1-C6烷基)-、(烷基)羧基-或羧基酰氨基烷基-。
[0072] 芳基是指芳族的6至14元烃基。C6-C14芳基的实例包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、联苯、蒽基、四氢萘基、芴基、茚满基、亚联苯基(biphenylenyl)和苊基(acenanaphthyl)。C6-C10芳基的实例包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、联苯和四氢萘基。芳基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：烷基、卤素、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、OH、羟基烷基、O(羟基烷基)、-O(烷基)C(O)OH、-(烷基)(烷氧基)卤素、NH2,氨基烷基-、二烷基氨基-、C(O)OH、-C(O)O(烷基)、-OC(O)(烷基)、-O(烷基)N(烷基)(烷基)、N-烷基酰氨基-、-C(O)NH2、(烷基)酰氨基-、NO2、(芳基)烷基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、(芳基)氨基、(烷氧基)羰基-、(烷基)酰氨基-、(烷基)氨基、氨基烷基-、烷基羧基-、(烷基)羧基酰氨基-、(芳基)烷基-、(芳基)氨基-、环烯基、二(烷基)氨基-、杂芳基、(杂芳基)烷基-、杂环基、-O(杂环基)、杂环基(烷基)-、(羟基烷基)NH-、(羟基烷基)2N、-SO2(烷基)、-NHC(O)(芳基)、-C(O)NH(芳基)、-NHC(O)(杂芳基)、-C(O)NH(杂芳基)或螺取代基。
[0073] 本文使用的术语“二环”或“二环的”是指具有两个稠合环的分子，其中环为环烷基、杂环基或杂芳基。在一个实施方案中，所述环跨越两个原子间的键稠合。由其形成的二环部分共享环之间的键。在另一个实施方案中，二环部分由跨越环的原子的序列形成桥头的两个环稠合形成。类似地，“桥”为多环化合物中连接两个桥头的一个或多个原子的未支化链。在另一个实施方案中，二环分子为“螺”或“螺环”部分。所述螺环基团是通过螺环部分的单个碳原子结合至碳环或杂环部分的单个碳原子的碳环或杂环。在一个实施方案中，螺环基团为环烷基且结合至另一个环烷基。在另一个实施方案中，螺环基团为环烷基且结合至杂环基。在进一步的实施方案中，螺环基团为杂环基且结合至另一个杂环基。在又一实施方案中，螺环基团为杂环基且结合至环烷基。
[0074] “(芳基)烷基”是指上文定义的烷基，其中一个或多个烷基的氢原子已被上文定义的芳基替代。(C6-C14芳基)烷基-部分包括苄基、二苯甲基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基、1-萘基甲基、2-萘基甲基等。(芳基)烷基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、CN、NH2,OH、(烷基)氨基-、二(烷基)氨基-、(烷基)C(O)N(烷基)-、(烷基)羧基酰氨基-、HC(O)NH-、H2NC(O)-、(烷基)NHC(O)-、二(烷基)NC(O)-、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、(烷氧基)羰基-、(烷基)C(O)-、芳基、杂芳基、环烷基、卤代烷基、氨基(烷基)-、(烷基)羧基-、羧酰氨基烷基-或NO2。
[0075] “(烷氧基)羰基-”是指基团烷基-O-C(O)-。示例性(C1-C6烷氧基)包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-丙氧基、正丁氧基和叔丁氧基。(烷氧基)羰基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、OH、NH2、(烷基)氨基-、二(烷基)氨基-、(烷基)C(O)N(烷基)-、(烷基)羧基酰氨基-、HC(O)NH-、H2NC(O)-、(烷基)NHC(O)-、二(烷基)NC(O)-、CN,烷氧基、C(O)OH、(烷氧基)羰基-、(烷基)C(O)-、芳基、杂芳基、环烷基、卤代烷基、氨基(烷基)-、(烷基)羧基-、羧酰氨基烷基-或NO2。
[0076] “(烷基)酰氨基-”是指-C(O)NH-基团，其中所述基团的氮原子连接至上文定义的C1-C6烷基。(C1-C6烷基)酰氨基-的代表性实例包括但不限于-C(O)NHCH3、-C(O)NHCH2CH3、-C(O)NHCH2CH2CH3、-C(O)NHCH2CH2CH2CH3、-C(O)NHCH2CH2CH2CH2CH3、-C(O)NHCH(CH3)2、-C(O)NHCH2CH(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)CH2CH3、-C(O)NH-C(CH3)3和 -C(O)NHCH2C(CH3)3。
[0077] “(烷基)氨基-”是指-NH基团，所述基团的氮原子连接至上文定义的烷基。(C1-C6烷基)氨基-的代表性实例包括但不限于CH3NH-、CH3CH2NH-、CH3CH2CH2NH-、CH3CH2CH2CH2NH-、(CH3)2CHNH-、(CH3)2CHCH2NH-、CH3CH2CH(CH3)NH-和(CH3)3CNH-。(烷基)氨基可为未取代的或在烷基部分取代有一个或多个以下基团：卤素、NH2、(烷基)氨基-、二(烷基)氨基-、(烷基)C(O)N(烷基)-、(烷基)羧基酰氨基-、HC(O)NH-、H2NC(O)-、(烷基)NHC(O)-、二(烷基)NC(O)-、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、(烷氧基)羰基-、(烷基)C(O)-、芳基、杂芳基、环烷基、卤代烷基、氨基(烷基)-、(烷基)羧基-、羧酰氨基烷基-或NO2。
[0078] “氨基烷基-”是指上文定义的烷基，其中一个或多个烷基的氢原子已被-NH2替代；NH2的一个或两个H可被取代基替代。
[0079] “烷基羧基-”是指通过羧基(C(O)-O-)官能团的氧原子连接至母体结构的上文定义的烷基。(C1-C6烷基)羧基-的实例包括乙酰氧基(acetoxy)、丙酰氧基(propionoxy)、丙基羧基和异戊基羧基。
[0080] “(烷基)羧基酰氨基-”是指-NHC(O)-基团，其中所述基团的羰基碳原子连接至上文定义的C1-C6烷基。(C1-C6烷基)羧基酰氨基-的代表性实例包括但不限 于 -NHC(O)CH3、-NHC(O)CH2CH3、-NHC(O)CH2CH2CH3、-NHC(O)CH2CH2CH2CH3、-NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3、-NHC(O)CH(CH3)2、NHC(O)CH2CH(CH3)2、-NHC(O)CH(CH3)
CH2CH3、-NHC(O)-C(CH3)3和-NHC(O)CH2C(CH3)3。
CH2CH3、-NHC(O)-C(CH3)3和-NHC(O)CH2C(CH3)3。
[0081] “(芳基)氨基”是指式(芳基)-NH-的基团，其中芳基如上文所定义。“(芳基)氧基”是指基团Ar-O-，其中Ar为上文定义的芳基。
[0082] “环烷基”是指非芳族的、饱和的、部分饱和的、单环、二环或多环烃3至12元环系统。C3-C12环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环戊基、环庚基、环辛基、十氢萘-1-基、八氢-1H-茚-2-基、十氢-1H-苯并[7]轮烯-2-基和十二氢-引达省-4-基。C3-C10环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、十氢萘-1-基和八氢-1H-茚-2-基。C3-C8环烷基的的代表性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基和八氢并环戊二烯-2-基。环烷基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、NH2、(烷基)NH、(烷基)(烷基)N-、-N(烷基)C(O)(烷基)、-NHC(O)(烷基)、-NHC(O)H、-C(O)NH2、-C(O)NH(烷基)、-C(O)N(烷基)(烷基)、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、-C(O)O(烷基)、-C(O)烷基)、芳基、杂芳基、环烷基、卤代烷基、氨基烷基-、-OC(O)(烷基)、羧酰氨基烷基-和NO2。另外，碳环的同一碳原子上任意两个氢原子中的每一个可被氧原子替代形成氧代(＝O)取代基。
[0083] “卤代”或“卤素”是指-F、-Cl、-Br和-I。
[0084] “C1-C6卤代烷基”是指上文定义的C1-C6烷基，其中一个或多个C1-C6烷基的氢原子已被F、Cl、Br或I替代。每个取代可独立地选自F、Cl、Br或I。C1-C6卤代烷基-的代表性实例包括但不限于-CH2F、-CCl3、-CF3,CH2CF3、-CH2Cl、-CH2CH2Br、-CH2CH2I、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CH2Cl、-CH2CH2CH2CH2Br、-CH2CH2CH2CH2I、-CH2CH2CH2CH2CH2Br、-CH2CH2CH2CH2CH2I、-CH2CH(Br)CH3、-CH2CH(Cl)CH2CH3、-CH(F)CH2CH3和-C(CH3)2(CH2Cl)。
[0085] “杂芳基”是指含有至少一个选自氧、硫和氮的杂原子的单环、二环或多环芳族环系统。C1-C9杂芳基的实例包括呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1,3,4-噁二唑、1,2,4-三唑、1-甲基-1,2,4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异噁唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和异喹啉。二环C1-C9杂芳基包括这样的基团：其中苯基、吡啶、嘧啶或哒嗪环稠合至5或6元单环杂芳基环，所述环具有环中的一个或两个氮原子、环中与一个氧原子或一个硫原子一起的一个氮原子，或一个O或S原子。单环C1-C4杂芳基的实例包括2H-四唑、3H-1,2,4-三唑、呋喃、噻吩、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、咪唑和吡咯。杂芳基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：C1-C6烷基、卤素、卤代烷基、OH、CN、羟基烷基、NH2、氨基烷基-、二烷基氨基-、C(O)OH、-C(O)O-(烷基)、-OC(O)(烷基)、N-烷基酰氨基-、-C(O)NH2、(烷基)酰氨基-、-NO2、(芳基)烷基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、(芳基)氨基、(烷氧基)羰基-、(烷基)酰氨基-、(烷基)氨基、氨基烷基-、烷基羧基-、(烷基)羧基酰氨基-、(芳基)烷基-、(芳基)氨基-、环烯基、二(烷基)氨基-、杂芳基、(杂芳基)烷基-、杂环基、杂环基(烷基)-、(羟基烷基)NH-、(羟基烷基)2N、-NHC(O)芳基、-C(O)NH芳基、-NHC(O)杂芳基、-C(O)NH(杂芳基)或螺取代基。
[0086] “杂环”或“杂环基”是指其中至少一个环原子为杂原子的单环的、二环的、多环的或桥头分子。杂环可为饱和的或部分不饱和的。示例性C1-C9杂环基包括但不限于氮杂环丙烷、氧杂环丙烷、氧杂环丙烯、硫杂环丙烷、吡咯啉、吡咯烷、二氢呋喃、四氢呋喃、二氢噻吩、四氢噻吩、二硫杂环戊烷、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶-1-基、四氢吡喃、吡喃、硫杂环戊烷(thiane)、硫杂环戊烯(thiine)、哌嗪、氮杂环庚烷、二氮杂环庚烷、噁嗪、5,6-二氢-4H-1,3-噁嗪-2-基、2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷、2,5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷、3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷、3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷、6-氧杂-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷、7-氧杂-2,5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷、2,7-二氧杂-5-氮杂二环[2.2.2]辛烷、2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基、2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.2]辛烷、3,6-二氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷、3-氧杂-6-氮杂二环[3.1.1]庚烷、3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基、5,7-二氧杂-2-氮杂二环[2.2.2]辛烷、6,8-二氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷、6-氧杂-3-氮杂二环[3.1.1]庚烷、8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基、2-甲基-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-5-基、1,3,3-三甲基-6-氮杂二环[3.2.1]辛-6-基、3-羟基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基-、7-甲基-3-氧杂-7,9-二氮杂二环[3.3.1]壬-9-基、9-氧杂-3-氮杂二环[3.3.1]壬-3-基、3-氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-9-基、3,7-二氧杂-9-氮杂二环[3.3.1]壬-9-基、4-甲基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基、噻嗪、二噻烷和二噁烷。预期杂环或环系统至少为3元的。因此，例如，C1杂环基将会包括但不限于氧氮杂环丙基(oxaziranyl)、二氮杂环丙基(diaziridinyl)和二氮环丙烯基(diazirinyl)，C2杂环基包括但不限于氮杂环丙基、氧杂环丙基和二氮杂环丁基，C9杂环基包括但不限于氮杂环辛基(azecanyl)、四氢喹啉基和全氢异喹啉基。杂环基可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：烷基、卤素、烷氧基、卤代烷基、OH、羟基烷基、-C(O)-(羟基烷基)、NH2、氨基烷基-、二烷基氨基-、C(O)OH、-C(O)O-(烷基)、-OC(O)(烷基)、N-烷基酰氨基-、-C(O)NH2、(烷基)酰氨基-、-C(O)-(烷基)-CN、(烷基)-CN或NO2。
[0087] “杂环基(烷基)-”是指上文定义的烷基，其中一个或多个烷基的氢原子已被上文定义的杂环基替代。杂环基(C1-C6烷基)-部分包括1-哌嗪基乙基、4-吗啉基丙基、6-哌嗪基己基等。杂环基(烷基)可为未取代的或取代有一个或多个以下基团：卤素、NH2、(烷基)氨基-、二(烷基)氨基-、(烷基)C(O)N(烷基)-、(烷基)羧基酰氨基-、HC(O)NH-,H2NC(O)-、(烷基)NHC(O)-、二(烷基)NC(O)-、CN、OH、烷氧基、烷基、C(O)OH、(烷氧基)羰基-、(烷基)C(O)-、4元至7元单环杂环、芳基、杂芳基或环烷基。
[0088] “杂芳基(烷基)”是指连接至烷基的杂芳基且所述杂芳基在上文中定义。
[0089] “羟基烷基”是指上文定义的烷基，其中一个或多个烷基的氢原子已被OH替代。C1-C6羟基烷基部分的实例包括例如-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH2OH、-CH2CH(OH)CH3、-CH(CH3)CH2OH和更高级的同系物。
[0090] “全氟代烷基-”是指具有两个或更多个氟原子的上文定义的烷基。C1-C6全氟代烷基-的实例包括CF3、CH2CF3、CF2CF3和CH(CF3)2。
[0091] 这还可指单氟或二氟取代的烷基诸如CHF2或CH2F。
[0092] “受试者”为哺乳动物，包括但不限于人、小鼠、大鼠、豚鼠、狗、猫、马、牛、猪或非人类灵长类动物，诸如猴、黑猩猩、狒狒或大猩猩。在某些实施方案中，受试者为人。在某些实施方案中，受试者为非人类动物。术语“个体”、“患者”和“受试者”在本文可互换使用。
[0094] “治疗有效量”意指当给予受试者用于治疗疾病时足以实现疾病的此种治疗的化合物的量。“治疗有效量”可根据化合物、疾病及其严重度，以及所治疗受试者的年龄，体重等而变化。
[0095] 本文使用的术语“治疗剂”、“治疗药剂”、“药品”和“药物”在整个说明书中可互换使用。
[0096] “化疗剂”为可用于癌症治疗的生物学(大分子)或化学(小分子)化合物，而不管作用机制如何。化疗剂的种类包括但不限于：烷化剂、抗代谢物、纺锤体毒植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、蛋白质、抗体、光增敏剂和激酶抑制剂。化疗剂包括在“靶向疗法”和非靶向常规化疗中使用的化合物。
[0097] 本文使用的术语“同位素变体”或“同位素”或“放射性标记的”是指本发明的化合物，其中一个或多个原子被具有不同于通常在自然界中发现的(即天然存在的)原子质量或质量数的原子质量或质量数的原子替代或取代。例如，化合物的“同位素变体”或“放射2 3 11
性标记”化合物可包含一个或多个非放射性同位素，例如氘(H或D)、氚(H)、碳-11( C)、
13 14 15 15 17 18 18
碳-13( C)、碳-14( C)、氮-15( N)、氧-15( O)、氧-17( O)、氧-18( O)、氟-18( F)、
35 36 75 76 77 82
硫 -35( S)、氯 -36( Cl)、溴 -75( Br)、溴 -76( Br)、溴 -77( Br)、溴 -82( Br)、
123 125 131
碘-123( I)、碘-125( I)、碘-131( I)等。应当理解的是，在其中进行此类同位素取代
2 13
的化合物中，以下原子，当存在时可发生变化，从而使例如任意氢可为 H/D，任意碳可为 C，
15
或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由本领域技术人员确定。同样，本发明可包括用放射性同位素制备同位素变体，在该实例中，例如，其中所得化合物可用于药物和/或
3
底物组织分布研究。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位素氚，即 H，和碳-14，即
14 11 18 15 13
C，可特别用于此目的。此外，可制备取代有正电子发射同位素诸如 C、F、O和 N的化合物，并且将可用于正电子发射断层(PET)研究中以检查底物受体占据。本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论具有放射性与否，旨在涵盖于被本发明的范围内。
性标记”化合物可包含一个或多个非放射性同位素，例如氘(H或D)、氚(H)、碳-11( C)、
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碳-13( C)、碳-14( C)、氮-15( N)、氧-15( O)、氧-17( O)、氧-18( O)、氟-18( F)、
35 36 75 76 77 82
硫 -35( S)、氯 -36( Cl)、溴 -75( Br)、溴 -76( Br)、溴 -77( Br)、溴 -82( Br)、
123 125 131
碘-123( I)、碘-125( I)、碘-131( I)等。应当理解的是，在其中进行此类同位素取代
2 13
的化合物中，以下原子，当存在时可发生变化，从而使例如任意氢可为 H/D，任意碳可为 C，
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或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由本领域技术人员确定。同样，本发明可包括用放射性同位素制备同位素变体，在该实例中，例如，其中所得化合物可用于药物和/或
3
底物组织分布研究。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位素氚，即 H，和碳-14，即
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C，可特别用于此目的。此外，可制备取代有正电子发射同位素诸如 C、F、O和 N的化合物，并且将可用于正电子发射断层(PET)研究中以检查底物受体占据。本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论具有放射性与否，旨在涵盖于被本发明的范围内。
[0098] 术语“前药”意指在体内转化产生本发明化合物的化合物。转化可通过各种机制诸如通过在血液中水解、氧化或还原发生。使用前药的良好讨论由T.Higuchi and W.Stella,“Pro-drugs as Novel Delivery Systems,”Vol.14of the A.C.S.Symposium Series,and in Bioreversible Carriers in Drug Design,ed.Edward B.Roche,American Pharmaceutical Association an Pergamon Press,1987提供。
[0099] “代谢物”为通过代谢在特定化合物或其盐的体内产生的产物。化合物的代谢物可使用本领域中已知的常规技术鉴定且使用测试诸如本文所述的测试确定它们的活性。此类产物可源于所给予化合物的例如氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等。
[0100] “盐”是指所披露化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有的酸或碱部分转化为其盐的形式进行修饰。盐的实例包括但不限于无机酸(诸如HCl、HBr、H2SO4)或有机酸(诸如乙酸、苯甲酸、三氟乙酸)的盐；碱性残基的盐，所述碱性残基诸如胺(伯胺、仲胺和叔胺；取代的胺，包括天然存在的取代胺；环胺(诸如咖啡因、精氨酸、二乙胺、N-乙基哌啶、组氨酸、葡糖胺、异丙胺、赖氨酸、吗啉、N-乙基吗啉、哌嗪、哌啶、三乙胺、二异丙基乙基胺和三甲胺)；有机胺，例如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或氨基酸)；碱(诸如Li、Na、K、Mg、Ca)或酸性残基(诸如羧酸)的有机盐(诸如三烷基铵)，烷基或芳基烷基吡啶鎓盐等。本发明的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此种盐可通过以下方式制备：这些化合物的游离酸或碱形式，在水中或在有机溶剂中，或在两者的混合物中，与化学计量量的适当的碱或酸反应；通常，优选非水介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。
[0101] 短语“药用”表示物质组合物必须与包含制剂的其它成分和/或用其治疗的哺乳动物在化学上和/或毒理学上相容。
[0102] 本文使用的代表性“药用盐”是指本发明化合物的药用有机或无机盐且包括但不限于酸或碱的药用盐。合适盐的名单可参见Remington’s Pharmaceutical thSciences,17 ed.,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985,p 1418and Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977)，将其中每一个整体并入本文。在一个实施方案中，药物盐选自水溶性和水不溶性盐，诸如乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、丁酸盐、钙盐、氯化物、胆碱盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐(樟脑磺酸盐)、甲酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、异烟酸盐、乳酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(methylsufonate)、甲磺酸盐(mesylate)、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、钾盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、钠盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐和鞣酸盐。药用盐可涉及包含另一种分子诸如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。抗衡离子可为稳定母体化合物电荷的任何有机或无机部分。此外，药用盐可具有多个抗衡离子。因此，药用盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
[0103] “溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的物理缔合物或络合物。本发明化合物可呈非溶剂化物以及溶剂化形式。形成溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的络合物。该物理缔合涉及不同程度的离子和共价键合，包括氢键。在某些情况下，溶剂化物能够分离，例如当一个或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时。溶剂化物的制备时公知的，例如M.Caira et al.J.Pharmaceutical Sci.93(3),601-611(2004)。E.C是.van Tonder et al.AAPS PharmSciTech,5(1),article 12(2004)；and A.L.Bingham et al.Chem.Commun.,603-604(2001)描述了溶剂化物、半溶剂化物、水合物等的类似制备。典型的非限制性方法涉及在所需量的所需溶剂(有机溶剂或水或其混合物)在高于环境温度的温度溶解本发明化合物，以足以形成晶体的速度冷却所述溶液，然后通过标准方法分离。分析技术，例如红外(I.R.)光谱，显示溶剂(或作为溶剂化物(或水合物)的晶体中的水)的存在。
[0104] 本文使用的术语“协同性”是指比两种或更多种单一药物的累加效应更有效的治疗组合。确定一种或多种本发明化合物之间或者本发明化合物与一种或多种治疗剂之间的协同性相互作用可基于从本文所述测定法获得的结果。组合疗法可提供“协同作用”并证明“协同性”，即当活性成分一起使用时所达到的效应大于分别使用所述化合物的效应的总和。当所述活性成分：(1)以组合的单位剂量制剂共同配制且同时施用或递送；(2)作为单独的制剂交替或平行递送；或(3)通过一些其它方案，可实现协同效应。当在交替疗法中递送时，当化合物依序施用或递送时，例如通过在单独的注射器中进行不同的注射，可实现协同效应。通常，在交替治疗期间，两种或更多种活性成分的有效剂量一起施用。
[0105] 本文使用的术语“提高(enhance)”或“增强(enhancing)”意指增加或延长预期效果的效力或持续时间。因此，就增强治疗剂的效果而言，术语“增强”是指在效力或持续时间上增加或延长其它治疗剂对系统的作用的能力。本文使用的“增强有效量”是指足以增强另一治疗剂在所需系统中的效果的量。
[0106] 本发明范围内的一些化合物可具有一个或多个手性中心，并且在一些实施方案中，每个中心以R或S构型存在。本发明包括此类化合物的每个单独对映体以及对映体的混合物。当本发明化合物中存在多个手性中心时，本发明包括化合物中手性中心的每个可能组合以及所有可能的对映体和非对映体混合物。除非具体指出特定的立体化学或异构体形式，本发明旨在包括结构的所有手性、非对映体和外消旋形式。本领域公知如何诸如通过拆分外消旋形式或通过合成从光学活性起始原料制备光学活性形式。本发明化合物还包括互变异构形式。互变异构形式产生于单键与相邻双键伴随质子迁移的交换。例如，烯醇和酮为互变异构体，因为它们通过用酸或碱处理迅速相互转化。互变异构现象的另一个实例为苯基硝基甲烷的酸(aci-)和硝基形式，它们同样通过用酸或碱形成。互变异构形式可能与实现感兴趣的化合物的最优化学反应性和生物学活性有关。
[0107] 本文使用的术语“同位素变体”是指在一个或多个构成此类化合物的原子处含有非天然比例的同位素的化合物。例如，化合物的“同位素变体”可含有一个或多个非放射性2 2 13 15
同位素，诸如氘(H或 D)、碳-13( C)、氮-15( N)等。应当理解的是，在其中进行此类同
2
位素取代的化合物中，以下原子，当存在时可发生变化，从而使例如任意氢可为 H/D，任意
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碳可为 C，或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由本领域技术人员确定。同样，本发明可包括用放射性同位素制备同位素变体，在该实例中，例如，其中所得化合物可用于
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药物和/或底物组织分布研究。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位素氚，即 H，
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和碳-14，即 C，可特别用于此目的。此外，可制备取代有正电子发射同位素诸如 C、F、O
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和 N的化合物，并且将可用于正电子发射断层(PET)研究中以检查底物受体占据。本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论具有放射性与否，旨在涵盖于被本发明的范围内。
同位素，诸如氘(H或 D)、碳-13( C)、氮-15( N)等。应当理解的是，在其中进行此类同
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位素取代的化合物中，以下原子，当存在时可发生变化，从而使例如任意氢可为 H/D，任意
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碳可为 C，或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由本领域技术人员确定。同样，本发明可包括用放射性同位素制备同位素变体，在该实例中，例如，其中所得化合物可用于
3
药物和/或底物组织分布研究。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位素氚，即 H，
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和碳-14，即 C，可特别用于此目的。此外，可制备取代有正电子发射同位素诸如 C、F、O
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和 N的化合物，并且将可用于正电子发射断层(PET)研究中以检查底物受体占据。本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论具有放射性与否，旨在涵盖于被本发明的范围内。
[0108] 为了本发明的目的，术语“化合物”、“本发明化合物”、“测试化合物”和“物质组合物”等同地表示本文所述的犬尿氨酸途径和/或所述IDO1和/或IDO2和/或TDO的抑制剂及其代谢物，其包括所有对映体形式、非对映形式、外消旋形式，外消旋-对映体混合物、旋光异构体、互变异构形式，盐、多晶型物等。术语“化合物”、“本发明化合物”、“测试化合物”和“物质组合物”在整个说明书中可互换使用。
[0109] 为了本发明的目的，术语“疾病”、“病况”和“病症”等同地表示其中受试者可从犬尿氨酸途径和/或IDO1和/或IDO2和/或TDO的调节中获益的情况，并且在整个说明书中可互换使用。
[0110] 使用下列缩写并且具有所示的定义：
[0111]
[0112]
[0113]
[0114] 本发明提供式(I)化合物及其代谢物或药用盐或前药，以及其代谢物和药物组合物(以下统称为“本发明化合物”或“化合物”、“测试化合物”或“物质组合物”)，其作为独立的疗法(单一治疗)或与其它疗法(包括但不限于抗病毒疗法、抗炎疗法、常规化疗)组合能够降低或消除免疫介导的病症，或与抗癌疫苗组合或与激素疗法组合以减缓或预防各种病况或疾病(包括肿瘤生长)。本发明还提供化合物和组合物，其通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1(IDO1)或吲哚胺2,3-双加氧酶-2(IDO2)或色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)或者三种酶的任意组合降低血浆和/或组织中犬尿氨酸的水平和/或改变色氨酸的水平起作用。
[0115] 在一个实施方案中，所述化合物为式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0116]
[0117] 在该化合物中，X1为CR1、N或NO；X2为CR2、N或NO；X3为CR3、N或NO；X4为CR4、N1 2 3 4 1
或NO。在一个实施方案中，X、X、X和X 中的一个或两个为N。在另一个实施方案中，X
1 2 2 3 3 4 4
为CR，X为CR ，X为CR 且X 为CR 。
或NO。在一个实施方案中，X、X、X和X 中的一个或两个为N。在另一个实施方案中，X
1 2 2 3 3 4 4
为CR，X为CR ，X为CR 且X 为CR 。
[0118] Y为O、S或NR8且Z为OR5、SR5或NR5R6。
[0119] R1、R2、R3和R4独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C2-C6烯基、任选取代的C2-C6炔基、任选取代的C1-C6烷氧基、单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、单环或二环的任选取代的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、氨基烷基、烷基羧基、(烷基)羧基酰氨基、任选取代的(芳基)氨基、羟基、卤素、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)-、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、任选取代的芳7 A B
基氧基、任选取代的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、
7 7
S(O)nR和具有1至2个选自O、S(O)n和NR 的杂原子的任选取代的杂环基氧基。
基氧基、任选取代的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、
7 7
S(O)nR和具有1至2个选自O、S(O)n和NR 的杂原子的任选取代的杂环基氧基。
[0120] 在一个实施方案中，R1为H、卤素、CN、C1-C6羟基烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6烷基。1 1 1
在另一个实施方案中，R为H。在另一个实施方案中，R 为卤素。在另一个实施方案中，R
1 1
为Cl。在另一个实施方案中，R为甲氧基或甲基。在另一个实施方案中，R 为CN。
在另一个实施方案中，R为H。在另一个实施方案中，R 为卤素。在另一个实施方案中，R
1 1
为Cl。在另一个实施方案中，R为甲氧基或甲基。在另一个实施方案中，R 为CN。
[0121] 在另一个实施方案中，R2为H、卤素、羟基、CN、N(R7)2、单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、任选取代的C1-C6烷氧基、任选取代的C1-C6烷基或任选取代的芳基氧基。在另2 2
一个实施方案中，R为F、Cl、Br或I。在另一个实施方案中，R 为H或任选取代的C1-C6烷
2
基。在另一个实施方案中，R为任选取代的C1-C6烷氧基或任选取代的芳基氧基。在另一个
2 7
实施方案中，R为N(R )2或单环或二环的任选取代的C6-C14芳基。
一个实施方案中，R为F、Cl、Br或I。在另一个实施方案中，R 为H或任选取代的C1-C6烷
2
基。在另一个实施方案中，R为任选取代的C1-C6烷氧基或任选取代的芳基氧基。在另一个
2 7
实施方案中，R为N(R )2或单环或二环的任选取代的C6-C14芳基。
[0122] 在另一个实施方案中，R3为H、卤素、NO2或CN。在另一个实施方案中，R3为H。在3
另一个实施方案中，R为NO2或CN。
另一个实施方案中，R为NO2或CN。
[0123] H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C2-C6烯基、任选取代的C2-C6炔基、任选取代的C1-C6烷氧基、单环或二环的任选取代的C6-C14芳基、CH2-芳基、单环或二环的任选取代的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、氨基烷基、烷基羧基、(烷基)羧基酰氨基、任选取代的(芳基)氨基、羟基、卤素、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)-、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、任选取代的芳基氧基、任选取代7 A B 7
的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、S(O)nR和具有1
7
至2个选自O、S(O)n和NR的杂原子的任选取代的杂环基氧基，且n为0至2.
的杂芳基氧基、任选取代的C3-C8环烷氧基、N(R )2、CN、NO2、CO2H、CONRR、S(O)nR和具有1
7
至2个选自O、S(O)n和NR的杂原子的任选取代的杂环基氧基，且n为0至2.
[0124] 在另一个实施方案中，R4为H、卤素或CN。在另一个实施方案中，R4为任选取代的4
苯基。在另一个实施方案中，R为取代有一个或多个C1-C6烷氧基或卤素的苯基。在另一个
4
实施方案中，R为取代有F、Cl、Br或I的苯基。
苯基。在另一个实施方案中，R为取代有一个或多个C1-C6烷氧基或卤素的苯基。在另一个
4
实施方案中，R为取代有F、Cl、Br或I的苯基。
[0125] 在另一个实施方案中，R4为任选取代的烷基、任选取代的环烷基或任选取代的芳4 7 4
基烷基。在另一个实施方案中，R为N(R )2。在另一个实施方案中，R为任选取代的芳基烯
4
基或任选取代的芳基炔基。在另一个实施方案中，R为任选取代的二芳基胺或任选取代的
4
二苯基胺。在另一个实施方案中，R为任选取代的芳基、任选取代的二环芳基、杂芳基、任选
4
取代的杂芳基或二环杂芳基。在另一个实施方案中，R为任选取代的杂环基。
基烷基。在另一个实施方案中，R为N(R )2。在另一个实施方案中，R为任选取代的芳基烯
4
基或任选取代的芳基炔基。在另一个实施方案中，R为任选取代的二芳基胺或任选取代的
4
二苯基胺。在另一个实施方案中，R为任选取代的芳基、任选取代的二环芳基、杂芳基、任选
4
取代的杂芳基或二环杂芳基。在另一个实施方案中，R为任选取代的杂环基。
[0126] 在另一个实施方案中，R4为任选取代的吡啶、任选取代的2-甲基吡啶(picolyl)、4
任选取代的吡啶-2-甲酰胺。在另一个实施方案中，R为任选取代的(烷基)羧基酰氨基、(芳基)羧基酰氨基、(烷基)酰氨基、烷基羧基、(烷氧基)羰基、COOH、C1-C6环烷基氧基
7
(cyclyloxy)、杂环基氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、全氟代烷基、S(O)nN(R)2或嘧啶。
任选取代的吡啶-2-甲酰胺。在另一个实施方案中，R为任选取代的(烷基)羧基酰氨基、(芳基)羧基酰氨基、(烷基)酰氨基、烷基羧基、(烷氧基)羰基、COOH、C1-C6环烷基氧基
7
(cyclyloxy)、杂环基氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、全氟代烷基、S(O)nN(R)2或嘧啶。
[0127] RA和RB独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的C3-C8环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基。
[0128] 在该化合物中，n为0至2。在一个实施方案中，n为0。在另一个实施方案中，n为1。在另一个实施方案中，n为2。
[0129] R7为H、C1-C6烷基、单环或二环的C6-C14芳基、单环或二环的杂芳基、(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、单环或二环的环烷基、单环或二环的杂环基、烷基羧基、杂环基(烷基)、杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、芳基氧基、杂芳A A基氧基、C3-C6环烷氧基或具有1至2个选自O、S(O)n和NR 的杂原子的杂环基氧基。R 为H、C1-C6烷基、单环或二环的C6-C14芳基、单环或二环的杂芳基、(芳基)烷基、(烷氧基)羰基、(烷基)酰氨基、(烷基)氨基、单环或二环的环烷基、单环或二环的杂环基、烷基羧基、杂环基(烷基)、杂芳基(烷基)、羟基烷基、全氟代烷基、芳基氧基、杂芳基氧基、C3-C6环烷氧基或任选取代的杂环基氧基。
[0130] R8为H或任选取代的C1-C6烷基。
[0131] R5和R6独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选5 6
取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基。在一个实施方案中，R或R 为任选取代的
5 6 C G
苯基。在另一个实施方案中，R或R 具有下列结构，其中R 至R 独立地选自H、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、杂环、任选取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、CN、-O(芳基)、C2-C6炔基、C(O)C1-C6烷基、-O-C1-C6卤代烷基和任选取代的芳基。
取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基。在一个实施方案中，R或R 为任选取代的
5 6 C G
苯基。在另一个实施方案中，R或R 具有下列结构，其中R 至R 独立地选自H、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、杂环、任选取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、CN、-O(芳基)、C2-C6炔基、C(O)C1-C6烷基、-O-C1-C6卤代烷基和任选取代的芳基。
[0132]
[0133] 在另一个实施方案中，R5或R6具有下列结构，其中RC至RG独立地选自H、卤素、CHF2、C(CH3)F2,OCF3,OCH3,OCH(CH3)2,吗啉、哌啶、CH3,C(CH3)3,CH2CH3,CH(CH3)2,环丙基、环己基、CH2-环丙基、CH2-环丁基、苄基、CN、苯氧基、乙炔基、C(O)CH3和苯基。
[0134]
[0135] 在另一个实施方案中，R5或R6具有下列结构，其中RC至RG独立地选自H和任选取代的芳基。在一个实施方案中，RC至RG独立地选自H和取代有一个或多个卤素的芳基。在另一个实施方案中，每个卤素独立地选自F、Cl、Br或I。在另一个实施方案中，RC至RG独立地选自H和取代有一个或多个Cl或F的芳基。
[0136]
[0137] 在另一个实施方案中，R5或R6为苯基、2-Br-4-F-苯基、2,3,4-三-Cl-苯基、2,3-二-Cl-4-F-苯基、2,4-二-Cl-苯基、2-Cl-4-F-苯基、2-Cl-苯基、2-Et-苯 基、
2,4-二-F-3-Cl-苯基、2-F-3-CN-苯基、2,4-二-F-苯基、2-萘满、2,3-二-Me-苯基、
2-Me-4-Br-苯基、2,4-二-Me-苯基、2,4-二-OMe-苯基、2-哌啶-苯基、3-Br-4,5-二-F-苯基、3-Br-4-F-苯 基、3-Br-4-Me-苯 基、3-Br- 苯 基、3- 乙 炔 基-4-F-苯 基、3-乙 炔基-苯基、3-CF2Me-4-F-苯基、3-CF3-4-Br-苯基、3-CF3-4-Cl-苯基、3-CF3-4-F-苯基、
3-CF3-苯基、3-CH2-环丁基-苯基、3-CH2-环丙基-苯基、3-CH2Ph-苯基、3-CHF2-苯基、3,4-二-Cl-苯基、3,5-二-Cl-4-F-苯基、3-Cl-4,6-二-F-苯基、3-Cl-4-F-苯基、
3-Cl-4-I-苯基、3-Cl-4-Me-苯基、3-Cl-5-Me-苯基、3,6-二-Cl-苯基、3-Cl-6-F-苯基、
3-Cl-6-OMe-苯基、3-Cl-苯基、3-CN-苯基、3-环己基-苯基、3-环丙基-苯基、3-Et-苯基、3,4,6-三-F-苯基、3,4-二-F-苯基、3,5-二-F-苯基、3-F-苯基、3-萘满、3-I-苯基、3-iPr-苯基、3-Me-4-Cl-苯基、3-Me-4-F-苯基、3,4-二-Me-苯基、3,5-二-Me-苯基、
3-Me-苯基、3-OCF3-4-F-苯基、苯并[d]二氧杂环戊烷、3-OiPr-苯基、3-OMe-4-Cl-苯基、
3,5-二-OMe-苯基、3-OMe-苯基、3-Ph-苯基、3-氯吡啶基、3-吡啶基、3,5-二-tBu-苯基、3-tBu-苯基、4-Br-苯基、4-乙炔基-苯基、4-CF3-苯基、4-CH2Ph-苯基、4-Cl-苯基、
4-CN-苯基、4-COMe-苯基、4-F-苯基、4-Me-苯基、4-吗啉-苯基、4-OCF3-苯基、4-OPh-苯基或5-Cl-6-F-苯基。
2,4-二-F-3-Cl-苯基、2-F-3-CN-苯基、2,4-二-F-苯基、2-萘满、2,3-二-Me-苯基、
2-Me-4-Br-苯基、2,4-二-Me-苯基、2,4-二-OMe-苯基、2-哌啶-苯基、3-Br-4,5-二-F-苯基、3-Br-4-F-苯 基、3-Br-4-Me-苯 基、3-Br- 苯 基、3- 乙 炔 基-4-F-苯 基、3-乙 炔基-苯基、3-CF2Me-4-F-苯基、3-CF3-4-Br-苯基、3-CF3-4-Cl-苯基、3-CF3-4-F-苯基、
3-CF3-苯基、3-CH2-环丁基-苯基、3-CH2-环丙基-苯基、3-CH2Ph-苯基、3-CHF2-苯基、3,4-二-Cl-苯基、3,5-二-Cl-4-F-苯基、3-Cl-4,6-二-F-苯基、3-Cl-4-F-苯基、
3-Cl-4-I-苯基、3-Cl-4-Me-苯基、3-Cl-5-Me-苯基、3,6-二-Cl-苯基、3-Cl-6-F-苯基、
3-Cl-6-OMe-苯基、3-Cl-苯基、3-CN-苯基、3-环己基-苯基、3-环丙基-苯基、3-Et-苯基、3,4,6-三-F-苯基、3,4-二-F-苯基、3,5-二-F-苯基、3-F-苯基、3-萘满、3-I-苯基、3-iPr-苯基、3-Me-4-Cl-苯基、3-Me-4-F-苯基、3,4-二-Me-苯基、3,5-二-Me-苯基、
3-Me-苯基、3-OCF3-4-F-苯基、苯并[d]二氧杂环戊烷、3-OiPr-苯基、3-OMe-4-Cl-苯基、
3,5-二-OMe-苯基、3-OMe-苯基、3-Ph-苯基、3-氯吡啶基、3-吡啶基、3,5-二-tBu-苯基、3-tBu-苯基、4-Br-苯基、4-乙炔基-苯基、4-CF3-苯基、4-CH2Ph-苯基、4-Cl-苯基、
4-CN-苯基、4-COMe-苯基、4-F-苯基、4-Me-苯基、4-吗啉-苯基、4-OCF3-苯基、4-OPh-苯基或5-Cl-6-F-苯基。
[0138] 在另一个实施方案中，R5或R6为任选取代的杂芳基。
[0139] 在另一个实施方案中，R5或R6为任选取代有一个或多个卤素的吡啶。在一个实施方案中，每个卤素独立地选自F、Cl、Br和I。
[0140] 在一个实施方案中，R5或R6为吡咯基、吲哚基、嘧啶基、烷基、苄基、环烷基、杂环烷基或杂环烷基烷基。
[0141] 在另一个实施方案中，R5或R6为苯并[d]二氧杂环戊烷。
[0142] 在另一个实施方案中，R5或R6为四氢萘。
[0143] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-A)，其中X1-X4,Y、R5和R6在本文中定义。
[0144]
[0145] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-AA)，其中X1-X4、R5和R6在本文中定义。
[0146]
[0147] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-AAA)，其中X1-X4、R5和R6在本文中定义。
[0148]
[0149] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-B)，其中X1-X4、Y和R5在本文中定义。
[0150]
[0151] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-BB)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0152]
[0153] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-BBB)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0154]1 4 5
[0155] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-BBBB)，其中X-X、Y和R在本文中定义。
[0156]
[0157] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-BBBBB)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0158]
[0159] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-BBBBBB)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0160]
[0161] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-C)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0162]
[0163] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-CC)，其中X1-X4和R5在本文中定义。
[0164]
[0165] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-D)，其中R5和R6在本文中定义。
[0166]
[0167] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-DD)，其中R5和R6在本文中定义。
[0168]5 6
[0169] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-E)，其中R和R 在本文中定义。
[0170]
[0171] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-EE)，其中R5和R6在本文中定义。
[0172]
[0173]
[0174] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-F)，其中R1、R2和R4-R6在本文中定义。
[0175]
[0176] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-FF)，其中R1、R2和R4-R6在本文中定义。
[0177]1 5
[0178] 在另一个实施方案中，所述化合物具有式(I-G)，其中R-R在本文中定义。
[0179]1 5
[0180] 在另一个方面，所述化合物具有式(I-GG)，其中R-R在本文中定义。
[0181]
[0182] 本文所述的式(I)化合物的体内代谢产物化合物及其前药也落入本发明的范围内。此类代谢产物可源于所给予化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶法裂解等。因此，本发明化合物包括但不限于式(I)化合物的代谢物及其前药。此外，本发明包括式(I)化合物的代谢物及其前药，所述代谢物包括合成所产生的化合物和/或通过包括使本发明化合物与哺乳动物或细胞接触足以产生其代谢产物的一段时间的方法所产生的化合物，所述细胞例如哺乳动物细胞(包括但不限于大鼠、小鼠、人、猿、猴、兔、豚鼠、仓鼠、猪、牛、山羊、绵羊、猫、狗等)或真核细胞诸如酵母细胞。
[0183] 代谢产物通常通过以下方式鉴定：制备本发明化合物的放射性标记的(例如14C或3
H)同位素，以可检测剂量胃肠外给予(例如大于约0.5mg/kg)动物诸如大鼠、小鼠、豚鼠、猴、兔、牛诸如奶牛(cow)、猿、山羊、猫或给予人，允许有足够的时间发生代谢(通常约30秒至30小时)并从尿、血液或其它生物学样品中分离其转化产物。这些产物因为它们被标记而易于分离(其余通过使用能够结合代谢物中尚存表位的抗体来分离)。然而，代谢物的初始鉴定和分析也可使用非放射性标记的化合物来进行。通常，代谢物的分析以与本领域技术人员公知的常规药物代谢研究相同的方式来完成。代谢物结构以常规方式例如MS、LC/MS/MS或NMR分析来确定。
H)同位素，以可检测剂量胃肠外给予(例如大于约0.5mg/kg)动物诸如大鼠、小鼠、豚鼠、猴、兔、牛诸如奶牛(cow)、猿、山羊、猫或给予人，允许有足够的时间发生代谢(通常约30秒至30小时)并从尿、血液或其它生物学样品中分离其转化产物。这些产物因为它们被标记而易于分离(其余通过使用能够结合代谢物中尚存表位的抗体来分离)。然而，代谢物的初始鉴定和分析也可使用非放射性标记的化合物来进行。通常，代谢物的分析以与本领域技术人员公知的常规药物代谢研究相同的方式来完成。代谢物结构以常规方式例如MS、LC/MS/MS或NMR分析来确定。
[0184] 在一个方面，本发明涉及式(I)化合物及其前药的经纯化和分离的代谢物，以及其代谢物的药用盐。在另一个方面，本发明涉及式(I)化合物及其前药的药用代谢物。在本发明的一个方面，式(I)化合物的代谢物的分子量小于相应的或母体式(I)化合物的分子量。在本发明的另一个方面，代谢物的分子量大于相应的或母体式(I)化合物的分子量。在本发明的一个实施方案中，式(I)化合物的代谢物的分子量比相应的或母体式(I)化合物的分子量少1个或2个单位。在本发明的另一个实施方案中，式(I)化合物的代谢产物的分子量少2个单位。在本发明的另一个方面，代谢物在体外和体内能够转化回相应的(母体)化合物。转化可为完全的或部分的。因此，式(I)化合物的代谢物可用作前药。
[0185] 式(I)化合物或其碱性的代谢物能够与各种无机酸和有机酸形成多种不同的盐。虽然此类盐对施用于动物和哺乳动物必须是药学上可接受的，但在实践中通常希望开始从反应混合物中分离出作为不可药用盐化合物或代谢物，然后通过用碱性试剂进行处理简单地使后者转化回游离碱化合物，最后使游离碱转化成药用酸加成盐。本发明的碱化合物的酸加成盐容易通过以下方式制备：在含水溶剂介质中或在合适的有机溶剂中(包括但不限于甲醇或乙醇)用基本上等当量的选择的无机酸或有机酸处理碱化合物。小心蒸发溶剂后，得到所期望的固体盐。
[0186] 用于制备本发明的碱化合物的药用酸加成盐的酸为那些形成无毒酸加成盐的酸，所述盐即含有药用阴离子的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或酸式磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐或酸式柠檬酸盐、酒石酸盐或酒石酸氢盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、糖酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐和扑酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘酸)盐)等。
[0187] 式(I)化合物或其也为酸性的代谢物，例如，其中R1-R6包括COOH或四唑部分，能够与各种药理学上可接受的阳离子形成碱盐。此类盐的实例包括碱金属或碱土金属盐，特别是钠盐和钾盐。这些盐用常规技术制备。用作制备本发明的药用碱盐的试剂的化学碱为那些与本文所述式(I)化合物的酸性代谢物形成无毒碱盐的碱。这些无毒碱盐包括那些衍生自药用阳离子诸如钠、钾、钙和镁等的盐。这些盐可容易地通过以下方式制备：用含有所需可接受阳离子的水溶液处理相应的酸性化合物，然后蒸发所得溶液至干，优选在减压下。可选择地，它们也可通过以下方式制备：将酸性化合物的低级碱性溶液与所需碱金属醇盐一起混合，然后以与上述相同的方式蒸发所得溶液至干。在任一种情况下，为了确保反应的完整性和最大的产物收率，优选使用化学计量量的试剂。
[0188] 本发明的一个方面涉及本发明化合物的前药。在另一个实施方案中，本发明化合物可为式(I)化合物的前药。本发明的另一个方面涉及所述化合物的代谢物的前药。
[0189] 在一个实施方案中，本发明化合物可为式(I)化合物的前药。可使用本文所述方法制备式(I)化合物的乙酰基、酰胺、氨基甲酸酯、碳酸酯或碳酸酯前药。在一个实施方案Z Z中，式(I)化合物可与酰氯反应。在另一个实施方案中，所述酰氯可为RC(O)Cl，其中R为C1-C6任选取代的烷基、C6-C10任选取代的芳基或杂芳基。在一个实施方案中，所述前药为具
9
有式(II)的酰化的式(I)化合物，其中R为任选取代的C1-C6烷基。
9
有式(II)的酰化的式(I)化合物，其中R为任选取代的C1-C6烷基。
[0190]
[0191] 在一个实施方案中，所述前药具有式(II)，其中R9为甲基。在另一个实施方案中，反应可在碱诸如叔丁醇钾存在下进行，得到式(I)化合物的前药。在另一个实施方案中，反应可在碱诸如吡啶存在下进行。此外，式(I)化合物的乙酰胺前药可通过式(I)化合物与MeCN反应制备。在一个实施方案中，反应在酸性条件下进行。
[0192] 因此，在一个实施方案中，所述前药为乙酰基化的式(I)化合物。在另一个实施方案中，所述前药为式(I)化合物的磷酰胺。在另一个实施方案中，所述前药为式(I)化合物的乙酸酯。
[0193] 在另一个实施方案中，所述前药为具有式(III)的式(I)化合物的氨基甲酸酯，其10
中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。在一个实
10
施方案中，所述前药结构为式(III)，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和
1-(C1-C6烷氧基)乙基。
中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。在一个实
10
施方案中，所述前药结构为式(III)，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和
1-(C1-C6烷氧基)乙基。
[0194]
[0195] 在另一个实施方案中，所述前药为具有式(IV)的式(I)化合物的(二)氨基甲酸11
酯，其中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。在一
11
个实施方案中，所述前药结构为式(IV)，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和1-(C1-C6烷氧基)乙基。
酯，其中R 为任选取代的C1-C6烷基、芳基、(芳基)烷基、杂芳基或(杂芳基)烷基。在一
11
个实施方案中，所述前药结构为式(IV)，其中R 选自甲基、乙基、苄基、(C1-C6烷氧基)甲基和1-(C1-C6烷氧基)乙基。
[0196]
[0197] 因此，在另一个实施方案中，氨基甲酸酯基团选自以下：
[0198]
[0199] 使用多种本领域技术人员已知的方法，可制备式(I)化合物的前药并可用作调节药物动力学性质的方法。参见例如Rautio,Nature Reviews Drug
Discovery,7:255-270(2008)和 Ettmayer,J.Med.Chem.,47:2393-2404(2004)，通 过 引用的方式将其并入本文。在药物含有羟基部分、乙酰基和其它酯类似物的情况下考虑使用前药。参见例如Beaumont,Current Drug Metabolism,4:461-485(2003)，通过引用的方式将其并入本文。在药物含有胺部分的情况下，考虑含有酰胺和氨基甲酸酯的前药。参见例如Simplício,Molecules,13:519-547(2008)，通过引用的方式将其并入本文。作为特定实例，可采用氨基甲酸(烷氧基-羰基氧基)-烷基酯、氨基甲酸(酰基氧基)烷基酯和氨基甲酸(氧代间二氧杂环戊烯基)烷基酯作为针对胺的有效前药策略。参见 例如Li,Bioorg.Med.Chem.Lett.,7:2909-2912(1997)；Alexander,J.Med.Chem.,34:78-81(1991)；Alexander,J.Med.Chem.,31:318-322(1988)； 和 Alexander,J.Med.Chem.,39:480-486(1996)，通过引用的方式将其全部并入本文。
Discovery,7:255-270(2008)和 Ettmayer,J.Med.Chem.,47:2393-2404(2004)，通 过 引用的方式将其并入本文。在药物含有羟基部分、乙酰基和其它酯类似物的情况下考虑使用前药。参见例如Beaumont,Current Drug Metabolism,4:461-485(2003)，通过引用的方式将其并入本文。在药物含有胺部分的情况下，考虑含有酰胺和氨基甲酸酯的前药。参见例如Simplício,Molecules,13:519-547(2008)，通过引用的方式将其并入本文。作为特定实例，可采用氨基甲酸(烷氧基-羰基氧基)-烷基酯、氨基甲酸(酰基氧基)烷基酯和氨基甲酸(氧代间二氧杂环戊烯基)烷基酯作为针对胺的有效前药策略。参见 例如Li,Bioorg.Med.Chem.Lett.,7:2909-2912(1997)；Alexander,J.Med.Chem.,34:78-81(1991)；Alexander,J.Med.Chem.,31:318-322(1988)； 和 Alexander,J.Med.Chem.,39:480-486(1996)，通过引用的方式将其全部并入本文。
[0200] 式(I)化合物及其代谢物和药用盐和前药以及式(I)化合物的前药的代谢物(统称为“本发明化合物”、“化合物”或“测试化合物”)均在本发明的范围内。
[0201] 制备方案
[0202] 可通过包括类似于化学领域公知的和包括在本发明中的方法的合成路线合成本发明化合物。起始原料通常得自商业来源诸如Sigma Aldrich Chemicals(Milwakee,Wis.)或容易使用本领域公知的方法制备(例如通过通常述于以下文献的方法：LouisF.Fieser and Mary Fieser,Reagents for Organic Sythesis,v.1-19,Wiley,N.
Y.(1967-1999ed.), 或 Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry(5th Edition)A.I.Vogel et al.,或Beilsteins Handbuch der organischen Chemi,4,Aufl.Ed.Springer-Verlag,Berlin,包括增刊(也可经Beilstein和Reaxys在先数据库得到)。
Y.(1967-1999ed.), 或 Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry(5th Edition)A.I.Vogel et al.,或Beilsteins Handbuch der organischen Chemi,4,Aufl.Ed.Springer-Verlag,Berlin,包括增刊(也可经Beilstein和Reaxys在先数据库得到)。
[0203] 通过常规方法，可将本发明化合物转化成药用盐，并且可将盐转化成游离碱化合物。本发明化合物作为游离碱或作为药用盐可为治疗学上有效的，这取决于所需的性质，诸如溶解度、溶解度、吸湿性和药物动力学。药用盐的实例包括与无机酸的盐，所述无机酸诸如盐酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、乙磺酸、天冬氨酸和谷氨酸。盐可为甲磺酸盐、盐酸盐、磷酸盐、苯磺酸盐或硫酸根。盐可为单盐或二盐。例如，甲磺酸酯可为单甲磺酸盐或二甲磺酸酯。
[0204] 本发明化合物还可呈水合物或溶剂化物形式。
[0205] 在制备式(I)-(IV)化合物中可有必要保护中间体的官能团(例如伯胺或仲胺)。对此种保护的需要将取决于该远程官能团的性质和制备方法的条件而变化。合适的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苄基氧基羰基(CBz)和9-芴基亚乙基氧基羰基(Fmoc)。对此种保护的需要容易由本领域技术人员确定。对于保护基团及其用途的一般性描述，参见T.W.Greene,Protective roups in Organic Synthesis,John Wiley&Sons,New York,1991。
[0206] 可用于制备式(I)化合物的方法述于以下实施例中并概述于方案1-28中。本领域技术人员将会理解，根据本发明，方案1-28可适于制备其它式(I)化合物、式(I)化合物的前药、代谢物和药用盐。
[0207] 方案1
[0208]
[0209] 方案1描述呋喃并吡啶衍生物(I-C)的合成。将化合物A1用胺(R5-NH2)进行处5 5
理。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺。在另一个实施方案中，胺(R-NH2)
5
为杂环胺。在另一个实施方案中，胺(R-NH2)为烷基胺。起始原料完全消失后，加入烷基氰基甲硅烷，得到化合物(I-C)。在一个实施方案中，所述烷基氰基甲硅烷为TMSCN。
理。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺。在另一个实施方案中，胺(R-NH2)
5
为杂环胺。在另一个实施方案中，胺(R-NH2)为烷基胺。起始原料完全消失后，加入烷基氰基甲硅烷，得到化合物(I-C)。在一个实施方案中，所述烷基氰基甲硅烷为TMSCN。
[0210] 方案1A
[0211]
[0212] 方案1A描述化合物(I-H)的合成。将3-羟基吡啶-2-甲醛1-1用胺(R5NH2)处5
理。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺。起始原料完全消失后，加入TMSCN，得到化合物(I-H)。
理。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺。起始原料完全消失后，加入TMSCN，得到化合物(I-H)。
[0213] 方案1B
[0214]
[0215] 方案1B描述呋喃并吡啶衍生物1-2的合成。将3-羟基吡啶-2-甲醛1-1用3-氯-4-氟苯胺处理。起始原料完全消失后，加入TMSCN，得到化合物1-2。
[0216] 方案2
[0217]
[0218] 方案2提供式(I-C)化合物。将醇钠或醇钾或NaH加至化合物B1的溶液中。在一个实施方案中，所述醇钾为叔丁醇钾。化合物B1与甲氧基甲基氯或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(SEMCl)反应，得到MOM或SEM经保护的化合物C1、然后将TMEDA、HMPA、TEA或DIPEA加至化合物C1的溶液中，接着先后加入烷基锂试剂和DMF、N-甲酰基哌啶或甲酸乙酯，得到醛D1。在一个实施方案中，所述烷基锂试剂为n-BuLi。保护MOM或SEM基团得到5
3-羟基醛化合物A1。然后化合物A1与胺(R-NH2)在酸存在下反应，得到亚胺E1。然后使用TMSCN使亚胺E1先后经受Strecker反应和分子内环化，形成呋喃并吡啶化合物(I-C)。
3-羟基醛化合物A1。然后化合物A1与胺(R-NH2)在酸存在下反应，得到亚胺E1。然后使用TMSCN使亚胺E1先后经受Strecker反应和分子内环化，形成呋喃并吡啶化合物(I-C)。
[0219] 方案2A
[0220]
[0221] 方案2A提供式(I-I)化合物。将叔丁醇钾加至3-羟基吡啶2-1的溶液中。然后加入甲氧基甲基氯，得到所期望的MOM保护的化合物2-2。然后将TMEDA加至化合物2-2中。然后n-BuLi加至该溶液中。然后加入DMF，得到MOM保护的醛2-3。MOM基团脱保护得到化合物2-4。在一个实施方案中，使用3N HCl/THF进行脱保护。然后将化合物2-4用胺5 5
(R-NH2)处理，得到作为中间体的亚胺E2。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为苯胺。然后亚胺E2与TMSCN反应形成呋喃并吡啶化合物(I-I)。
(R-NH2)处理，得到作为中间体的亚胺E2。在一个实施方案中，胺(R-NH2)为苯胺。然后亚胺E2与TMSCN反应形成呋喃并吡啶化合物(I-I)。
[0222] 方案2B
[0223]
[0224] 方案2B提供化合物2-6的形成。将叔丁醇钾加至3-羟基吡啶2-1中。然后加入甲氧基甲基氯，得到所期望的MOM保护的化合物2-2。然后将TMEDA加至化合物2-2中，接着加入n-BuLi。然后加入DMF，得到MOM保护的醛2-3。MOM基团脱保护得到3-羟基吡啶-2-甲醛2-4。在一个实施方案中，使用3N HCl进行脱保护。将化合物2-4用3-氯-4-氟苯胺处理，得到亚胺2-5。使用TMSCN使相应的亚胺先后经受Strecker反应和分子内环化形成呋喃并吡啶2-6。
[0225] 方案3
[0226]
[0227] 方案3显示化合物(I-J)的合成。化合物F1与胺(R5-NH2)偶联。在一个实施方5
案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺，得到相应的亚胺化合物G1。使化合物G1与TMSCN反应，得到目标化合物(I-J)。
案中，胺(R-NH2)为任选取代的苯胺，得到相应的亚胺化合物G1。使化合物G1与TMSCN反应，得到目标化合物(I-J)。
[0228] 方案3A
[0229]
[0230] 方案3A显示化合物(I-K)的合成。首先，化合物F2与胺(R5-NH2)偶联，得到相应的G2亚胺。然后亚胺G2与TMSCN反应，得到化合物(I-K)。
[0231] 方案3B
[0232]
[0233] 方案3B显示[2-氨基-3-(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇3-3的合成。吡哆醛盐酸盐3-1与4-氟-3-氯苯胺反应，得到相应的亚胺中间体3-2。与TMSCN反应得到化合物3-3。
[0234] 方案4
[0235]
[0236] 方案4描述另一种呋喃并吡啶衍生物(I-C)的合成。向经搅拌的化合物B1的溶液中加入醇钠或醇钾，得到MOM保护的化合物C1。在一个实施方案中，所述醇钾为叔丁醇钾。然后加入甲氧基甲基氯形成MOM保护的化合物C1。将LDA或LTMP加至化合物C1的溶液中，接着加入N-甲酰基哌啶或DMF，得到化合物D1。经由与酸反应将醛D1脱保护。在一5
个实施方案中，所述酸为HCl或TFA/DCM。脱保护的醛A1与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体E1。将亚胺中间体E1用TMSCN处理，得到呋喃并吡啶(I-C)。
个实施方案中，所述酸为HCl或TFA/DCM。脱保护的醛A1与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体E1。将亚胺中间体E1用TMSCN处理，得到呋喃并吡啶(I-C)。
[0237] 方案4A
[0238]
[0239] 方案4A描述呋喃并吡啶衍生物(I-L)的合成。向化合物4-1加入叔丁醇钾。然后加入甲氧基甲基氯性MOM保护的化合物4-2。然后将LDA加至化合物4-2的溶液中。然后将N-甲酰基哌啶加至该溶液中，导致形成化合物4-3。然后使用酸将醛4-3脱保护成化合物4-4。在一个实施方案中，使用3N HCl进行脱保护。脱保护的醛4-4与胺(R5-NH2)偶联，得到亚胺中间体E2。将相应的亚胺中间体用TMSCN处理，先后经由Strecker反应和分子内环化，得到呋喃并吡啶(I-L)。
[0240] 方案4B
[0241]
[0242] 方案4B描述呋喃并吡啶衍生物4-6的合成。向3-氯-5-羟基吡啶4-1中先后加入叔丁醇钾和甲氧基甲基氯，导致形成MOM保护的化合物4-2。将LDA加至化合物4-2中。然后加入N-甲酰基哌啶，导致形成化合物4-3。使用HCl将经保护的醛4-3脱保护，得到
3-氯-5-羟基-吡啶-4-甲醛4-4。将脱保护的醛4-4与3-氯-4-氟苯胺偶联，得到亚胺中间体4-5。然后将亚胺中间体用TMSCN处理，得到呋喃并吡啶4-6。
3-氯-5-羟基-吡啶-4-甲醛4-4。将脱保护的醛4-4与3-氯-4-氟苯胺偶联，得到亚胺中间体4-5。然后将亚胺中间体用TMSCN处理，得到呋喃并吡啶4-6。
[0243] 方案5
[0244]
[0245] 方案5描述化合物(I-C)的合成。将NBS或N-碘代琥珀酰亚胺加至化合物H1中，得到化合物J1。然后化合物J1与二(频哪醇合)二硼烷、乙酸钾或乙酸钠和Pd(dppf)Cl2.DCM、Pd(OAc)2或Pd2(dba)3反应得到化合物K1。然后化合物K1与四水合过硼酸钠反应，得到化合物B1，使用叔丁醇钾或叔丁醇钠和甲氧基甲基氯或SEMCl将其保护成MOM醚。经由与TMEDA或HMPA反应，接着与n-BuLi反应，将所得化合物C1进行甲酰化，得到化合物D1。5
使用酸将相应的醛D1脱保护，得到化合物A1。然后化合物A1与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E1。使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将相应的亚胺E1转化成化合物(I-C)。
使用酸将相应的醛D1脱保护，得到化合物A1。然后化合物A1与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E1。使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将相应的亚胺E1转化成化合物(I-C)。
[0246] 方案5A
[0247]
[0248] 方案5A描述化合物(I-M)的合成。NBS与R1-取代的吡啶反应得到M1。化合物M1、二(频哪醇合)二硼烷、乙酸钾和Pd(dppf)Cl2.DCM反应得到化合物N1。化合物N1与四水合过硼酸钠在水中反应得到化合物O1，然后使用叔丁醇钾和甲氧基甲基氯将其保护成MOM醚。经由与TMEDA反应，接着加入n-BuLi，将所得化合物P1甲酰化，得到化合物Q1。然后使用酸将相应的醛Q1脱保护，得到化合物R1。然后化合物R1与胺(R5-NH2)反应，得到亚胺中间体S1。然后使用TMSCN将相应的亚胺S1转化成化合物(I-M)。
[0249] 方案5B
[0250]
[0251] 方案5B提供化合物5-9的合成。将NBS加至2-甲氧基吡啶在MeCN中的溶液中，得到化合物5-2。在Pd(dppf)Cl2.DCM存在下，5-溴-2-甲氧基吡啶与二(频哪醇合)二硼烷和乙酸钾反应，得到2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]-二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶5-3。将化合物5-3加至四水合过硼酸钠在水中的混悬液中，得到6-甲氧基吡啶-3-醇5-4。使用叔丁醇钾和甲氧基甲基氯将化合物5-4保护成MOM醚。然后加入TMEDA、n-BuLi和DMF将化合物5-5甲酰化，得到2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛5-6。使用
3N HCl将醛5-6脱保护，得到5-羟基-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛5-7。然后化合物5-7与
3-氯-4-氟苯胺反应，得到亚胺中间体5-8。使用TMSCN将亚胺转化成N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺5-9。
3N HCl将醛5-6脱保护，得到5-羟基-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛5-7。然后化合物5-7与
3-氯-4-氟苯胺反应，得到亚胺中间体5-8。使用TMSCN将亚胺转化成N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺5-9。
[0252] 方案6
[0253]
[0254] 在方案6中，DIPEA或TEA与化合物B1反应。加入甲氧基甲基氯或SEMCl得到MOM或SEM保护的化合物C1。然后将TMEDA加至化合物C1中，接着加入烷基锂试剂诸如n-BuLi或sec-BuLi，最后加入DMF，得到MOM保护的醛D1。使用酸将化合物D1脱保护，得到化合5
物A1。然后将化合物A1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体化合物E1。通过用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN处理相应的亚胺E1合成化合物(I-N)。
物A1。然后将化合物A1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体化合物E1。通过用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN处理相应的亚胺E1合成化合物(I-N)。
[0255] 方案6A
[0256]
[0257] 在方案6A中，将DIPEA加至3-羟基-2-取代的吡啶B2中。然后加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的化合物C2。将TMEDA加至化合物C2中，接着加入n-BuLi，再加入DMF，得到MOM保护的醛D2。使用3N HCl将化合物D2脱保护，得到化合物A2。然后化合物A25
与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E2。通过亚胺E2与TMSCN反应合成化合物(I-O)。
与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E2。通过亚胺E2与TMSCN反应合成化合物(I-O)。
[0258] 方案6B
[0259]
[0260] 在方案6B中，将DIPEA加至3-羟基-2-甲基吡啶6-1中。然后加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的化合物6-2。然后加入TMEDA，加入n-BuLi(2.17M在己烷中的溶液)，然后加入DMF，得到MOM保护的醛6-3，使用3N HCl将其脱保护，得到3-羟基-2-甲基吡啶-4-甲醛6-4。然后将化合物6-4用3-氯-4-氟苯胺处理，导致形成亚胺中间体6-5。通过用TMSCN处理亚胺6-5合成N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡
啶-2,3-二胺6-6。
啶-2,3-二胺6-6。
[0261] 方案7
[0262]
[0263] 方案7提供的化合物(I-C)合成。具体地，化合物J1、二(频哪醇合)二硼烷、乙酸钾或乙酸钠与Pd(dppf)Cl2.DCM、Pd(OAc)2、Pd(dba)3或Pd2(dba)3反应，得到(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶K1。化合物K1与四水合过硼酸钠反应，得到吡哆醛或酚化合物B1。化合物B1与醇钾或醇钠诸如叔丁醇钾、甲氧基甲基氯和TMEDA或HMPA组合，得到化合物C1。然后化合物C1与烷基锂试剂诸如n-BuLi或s-BuLi以及DMF或n-甲酰基哌啶反应，得到化合物D1。然后使用酸将化合物D1脱保护，得到化合物A1。然后5
化合物A1与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E1，将其用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN处理，得到化合物(I-C)。
化合物A1与胺(R-NH2)反应，得到亚胺中间体E1，将其用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN处理，得到化合物(I-C)。
[0264] 方案7A
[0265]1
[0266] 方案7A提供化合物(I-P)的合成，具体地，R-取代的3-溴-吡啶U2、二(频哪醇合)二硼烷、乙酸钾和Pd(dppf)Cl2.DCM反应，得到5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼1
杂环戊-2-基)-吡啶V2。化合物V2与四水合过硼酸钠在水中反应，得到R-取代的-吡啶-3-醇W2。将化合物W2逐步与叔丁醇钾、甲氧基甲基氯和TMEDA组合，得到化合物X2。
然后化合物X2与n-BuLi和DMF反应，得到化合物Y2。然后使用酸将化合物Y2脱保护，得
5
到化合物Z2。然后将化合物Z2用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体AA2，将其用TMSCN处理，得到化合物(I-P)。
杂环戊-2-基)-吡啶V2。化合物V2与四水合过硼酸钠在水中反应，得到R-取代的-吡啶-3-醇W2。将化合物W2逐步与叔丁醇钾、甲氧基甲基氯和TMEDA组合，得到化合物X2。
然后化合物X2与n-BuLi和DMF反应，得到化合物Y2。然后使用酸将化合物Y2脱保护，得
5
到化合物Z2。然后将化合物Z2用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体AA2，将其用TMSCN处理，得到化合物(I-P)。
[0267] 方案7B
[0268]
[0269] 方案7B提供化合物7-8的合成。3-溴-5-甲氧基吡啶7-1、二(频哪醇合)二硼烷、乙酸钾和Pd(dppf)Cl2.DCM反应，得到3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶7-2。化合物7-2与四水合过硼酸钠在水中的混悬液反应，得到5-甲氧基-吡啶-3-醇7-3。通过使化合物7-3、叔丁醇钾和甲氧基甲基氯反应，制备化合物7-4。使用n-BuLi和TMEDA将化合物7-4锂化并将所得锂化物用DMF淬灭，得到3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛7-5。使用3N HCl将化合物7-5脱保护，得到3-羟基-5-甲氧基-吡啶-4-甲醛7-6。然后将化合物7-6用3-氯-4-氟苯胺处理，形成亚胺
3
中间体7-7，将其用TMSCN处理，得到N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺7-8。
3
中间体7-7，将其用TMSCN处理，得到N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺7-8。
[0270] 方案8
[0271]
[0272] 方案8描述化合物(I-Q)的合成。具体地，将酸通过化合物BB1鼓泡，得到化合物CC1在丙酮中的溶液。在一个实施方案中，所述酸为无水HCl。然后在催化量的DMF存在下，将亚硫酰氯或草酰氯加至化合物CC1中，得到化合物DD1。使用催化剂诸如Pd/C和乙酸钠或乙酸钾，将化合物DD1用氢气进行氢化，得到化合物EE1。将化合物EE1的醇基团氧化，得到醛FF1。在一个实施方案中，使用二氧化锰或氯铬酸吡啶鎓盐进行氧化。然后化合物FF15
与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体，在乙酸存在下与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到化合物(I-Q)。
与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体，在乙酸存在下与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到化合物(I-Q)。
[0273] 方案8A
[0274]
[0275] 方案8A描述化合物(I-R)的合成，用无水酸诸如HCl气体或硫酸处理化合物BB2的丙酮溶液，得到化合物CC2。然后将亚硫酰氯加至化合物CC2中，得到化合物DD2。使用催化剂诸如Pd/C和乙酸钠，将化合物DD2用氢气进行氢化，得到化合物EE2。将化合物EE25
的醇基用试剂诸如二氧化锰氧化，得到醛FF2。然后化合物FF2与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体，在乙酸存在下与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到化合物(I-R)。
的醇基用试剂诸如二氧化锰氧化，得到醛FF2。然后化合物FF2与胺(R-NH2)偶联，得到亚胺中间体，在乙酸存在下与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到化合物(I-R)。
[0276] 方案8B
[0277]3
[0278] 方案8B描述N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺8-6的合成。将无水HCl通过吡哆醇盐酸盐8-1在丙酮中的混悬液鼓泡，得到2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶-5-基)甲醇盐酸盐8-2。然后将亚硫酰氯加至化合物8-2的溶液中，得到5-(氯甲基)-2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶盐酸盐8-3。化合物8-3与Pd/C和乙酸钠在氢气下进行氢化，导致形成4-(羟基甲基)-2,5-二甲基吡啶-3-醇8-4。将化合物8-4的醇基用二氧化锰氧化，得到醛8-5。
3-羟基-2,5-二甲基吡啶-4-甲醛8-5与3-氯-4-氟苯胺偶联，导致形成亚胺中间体，其
3
与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺8-6。
3-羟基-2,5-二甲基吡啶-4-甲醛8-5与3-氯-4-氟苯胺偶联，导致形成亚胺中间体，其
3
与TMSCN先后经受原位Strecker反应和分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺8-6。
[0279] 方案9
[0280]
[0281] 方案9提供化合物(I-S)的合成。将强碱诸如醇钠或醇钾加至化合物GG1中。在一个实施方案中，所述强碱为叔丁醇钾。然后滴加甲氧基甲基氯，导致形成MOM保护的化合4
物HH1。向经搅拌的化合物HH1的溶液中加入R-取代的烷基化剂和催化剂得到化合物II1。
在一个实施方案中，所述烷基化剂为硼酸三乙酯(triethylborate)。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。然后将TMEDA或HMPA加至经搅拌的化合物II1的溶液中。然后加入n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP，接着加入DMF或N-甲酰基哌啶，得到化合物JJ1。将化合物JJ1脱保护，得到化合物KK1。在一个实施方案中，使用酸进行该反应。在另一个实施
5
方案中，所述酸为HCl。然后将化合物KK1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL1。然后使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将化合物LL1转化成化合物(I-S)。
物HH1。向经搅拌的化合物HH1的溶液中加入R-取代的烷基化剂和催化剂得到化合物II1。
在一个实施方案中，所述烷基化剂为硼酸三乙酯(triethylborate)。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。然后将TMEDA或HMPA加至经搅拌的化合物II1的溶液中。然后加入n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP，接着加入DMF或N-甲酰基哌啶，得到化合物JJ1。将化合物JJ1脱保护，得到化合物KK1。在一个实施方案中，使用酸进行该反应。在另一个实施
5
方案中，所述酸为HCl。然后将化合物KK1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL1。然后使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将化合物LL1转化成化合物(I-S)。
[0282] 方案9A
[0283]
[0284] 方案9A提供化合物(I-O)的合成。将叔丁醇钾加至化合物GG2的溶液中。然后4
加入甲氧基甲基氯，导致形成MOM保护的化合物HH2。向化合物HH2中加入R-取代的烷基化剂诸如硼酸三乙酯、K2CO3和Pd(PPh3)4，得到化合物C2。然后将TMEDA加至化合物C2中。
然后加入n-BuLi，接着加入DMF，得到化合物D2。将化合物D2脱保护，得到化合物I2。然
5
后将化合物I2用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体E2。然后使用TMSCN将化合物E2转化成化合物(I-O)。
加入甲氧基甲基氯，导致形成MOM保护的化合物HH2。向化合物HH2中加入R-取代的烷基化剂诸如硼酸三乙酯、K2CO3和Pd(PPh3)4，得到化合物C2。然后将TMEDA加至化合物C2中。
然后加入n-BuLi，接着加入DMF，得到化合物D2。将化合物D2脱保护，得到化合物I2。然
5
后将化合物I2用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体E2。然后使用TMSCN将化合物E2转化成化合物(I-O)。
[0285] 方案9B
[0286]
[0287] 方案9B描述化合物9-7的合成。将叔丁醇钾加至化合物9-1中。然后加入甲氧基甲基氯，导致形成MOM保护的化合物9-2。向2-氯-3-甲氧基甲氧基-吡啶9-2的溶液中加入硼酸三乙酯、K2CO3和Pd(PPh3)4，得到2-乙基-3-甲氧基甲氧基吡啶9-3。加入TMEDA，接着加入n-BuLi和DMF，得到2-乙基-3-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛9-4。使用3N HCl将化合物9-4脱保护，得到2-乙基-3-羟基吡啶-4-甲醛9-5。将化合物9-5用3-氯-4-氟苯胺3
处理，得到亚胺中间体9-6，在TMSCN存在下将其依次转化成N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺9-7。
处理，得到亚胺中间体9-6，在TMSCN存在下将其依次转化成N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺9-7。
[0288] 方案10
[0289]
[0290] 方案10描述化合物(I-S)的另一种合成。通过向化合物GG1中加入碱和甲氧基甲基氯，制备化合物HH1。在一个实施方案中，所述碱为叔丁醇钾、NaH或碳酸钾中的任一种。4
然后加入催化剂和R-取代的烷基化剂，得到化合物II1。在一个实施方案中，所述烷基化剂为丙基氯化镁。在其它实施方案中，所述烷基化剂为甲基溴化镁、乙基溴化镁或芳基溴化镁诸如苯基溴化镁中的任一种。在另一个实施方案中，所述催化剂WieNi(dppp)Cl2。然后将TMEDA或LTMP加至化合物II1中。接着将n-BuLi或s-BuLi加至反应混合物中。向锂化物中加入DMF，得到醛化合物JJ1。将醛化合物JJ1脱保护，得到化合物KK1。在一个实施方案中，使用酸进行脱保护。在另一个实施方案中，所述酸为HCl。在另一个实施方案中，所
5
述酸为TFA。然后将醛KK1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL1，使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将其转化成化合物(I-S)。
然后加入催化剂和R-取代的烷基化剂，得到化合物II1。在一个实施方案中，所述烷基化剂为丙基氯化镁。在其它实施方案中，所述烷基化剂为甲基溴化镁、乙基溴化镁或芳基溴化镁诸如苯基溴化镁中的任一种。在另一个实施方案中，所述催化剂WieNi(dppp)Cl2。然后将TMEDA或LTMP加至化合物II1中。接着将n-BuLi或s-BuLi加至反应混合物中。向锂化物中加入DMF，得到醛化合物JJ1。将醛化合物JJ1脱保护，得到化合物KK1。在一个实施方案中，使用酸进行脱保护。在另一个实施方案中，所述酸为HCl。在另一个实施方案中，所
5
述酸为TFA。然后将醛KK1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL1，使用三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN将其转化成化合物(I-S)。
[0291] 方案10A
[0292]
[0293] 方案10A描述(I-T)的合成。通过向化合物9-1的溶液中加入叔丁醇钾和甲氧基甲基氯，制备化合物9-2。向2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶9-2的溶液中加入Ni(dppp)Cl2和丙基氯化镁(2M溶液)，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶10-3。将TMEDA和n-BuLi加至化合物10-3。向所得锂化物中加入DMF，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-4。使用3N HCl将醛10-4脱保护，得到3-羟基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-5。然后将
5
醛10-5用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL2。使用TMSCN将化合物LL2转化成化合物(I-T)。
5
醛10-5用胺(R-NH2)处理，得到亚胺中间体LL2。使用TMSCN将化合物LL2转化成化合物(I-T)。
[0294] 方案10B
[0295]
[0296] 方案10B描述N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺10-7的合成。通过向化合物9-1的溶液中加入叔丁醇钾和甲氧基甲基氯，制备化合物
9-2。向2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶9-2的溶液中加入Ni(dppp)Cl2和丙基氯化镁(2M溶液)，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶10-3。将TMEDA加至化合物10-3中，然后加入n-BuLi。向锂化物中加入DMF，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-4。使用3N HCl将醛10-4脱保护，得到3-羟基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-5。然后将醛10-5用
3-氯-4-氟苯胺处理，得到亚胺中间体10-6。使用TMSCN将4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨
3
基]-甲基}-2-丙基-吡啶-3-醇10-6转化成N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃
并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺10-7。
9-2。向2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶9-2的溶液中加入Ni(dppp)Cl2和丙基氯化镁(2M溶液)，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶10-3。将TMEDA加至化合物10-3中，然后加入n-BuLi。向锂化物中加入DMF，得到3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-4。使用3N HCl将醛10-4脱保护，得到3-羟基-2-丙基吡啶-4-甲醛10-5。然后将醛10-5用
3-氯-4-氟苯胺处理，得到亚胺中间体10-6。使用TMSCN将4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨
3
基]-甲基}-2-丙基-吡啶-3-醇10-6转化成N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃
并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺10-7。
[0297] 方案11
[0298]
[0299] 方案11描述化合物(I-U)的合成。将碱加至化合物SS1的溶液中。在一个实施方案中，所述碱为K2CO3。然后将碘在甲醇中的溶液加至化合物SS1中，得到化合物TT1。向经搅拌的化合物TT1的溶液中加入甲氧基甲基氯或SEMCl，接着加入有机碱诸如DIPEA，得到化合物UU1。然后在CuBr存在下将化合物UU1用R2-取代的醇盐(alkoxide)或芳醚(aryloxide)处理，经I-取代基的替代得到化合物VV1。在一个实施方案中，所述R2-取代的醇盐为甲醇钠。将TMEDA或HMPA加至化合物VV1并加入n-BuLi或s-BuLi，得到锂化物。
然后加入DMF，得到醛WW1，使用酸将其脱保护，得到化合物XX1。在一个实施方案中，所述酸为HCl。化合物XX1与胺(R5-NH2)反应，得到亚胺中间体YY1。通过三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN与化合物YY1反应合成化合物(I-U)。
然后加入DMF，得到醛WW1，使用酸将其脱保护，得到化合物XX1。在一个实施方案中，所述酸为HCl。化合物XX1与胺(R5-NH2)反应，得到亚胺中间体YY1。通过三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN与化合物YY1反应合成化合物(I-U)。
[0300] 方案11A
[0301]
[0302] 方案11A描述化合物(I-V)的合成。将K2CO3加至化合物B2中。然后加入碘在甲醇中的溶液，得到化合物TT2。向化合物TT2的溶液中先后加入甲氧基甲基氯和DIPEA，得到化合物UU2。将化合物UU2的溶液加至新制的甲醇钠中，接着加入CuBr，得到化合物VV2。将TMEDA加至化合物VV2并加入n-BuLi。然后加入DMF，得到醛WW2，使用HCl将其脱保护，得到XX2。化合物XX2与胺(R5-NH2)反应，得到亚胺中间体YY2。通过向化合物YY2的溶液中加入TMSCN合成化合物(I-V)。
[0303] 方案11B
[0304]3
[0305] 方案11B描述N-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺11-8的合成。将K2CO3加至2-甲基-吡啶-3-醇11-1中。然后加入碘在甲醇中的溶液，得到6-碘-2-甲基吡啶-3-醇11-2。向化合物11-2中先后加入甲氧基甲基氯和DIPEA，得到6-碘-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶11-3。将化合物11-3加至新制的甲醇钠中，接着加入CuBr，得到化合物11-4。将TMEDA加至6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶11-4中并先后加入n-BuLi和DMF，合成醛11-5。然后将6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛11-5脱保护，得到3-羟基-6-甲氧基-2-甲基-吡啶-4-甲
醛11-6。然后化合物11-6与4-氟-3-氯苯胺反应，得到亚胺中间体11-7。通过向化合物
11-7的溶液中加入TMSCN合成产物11-8。
醛11-6。然后化合物11-6与4-氟-3-氯苯胺反应，得到亚胺中间体11-7。通过向化合物
11-7的溶液中加入TMSCN合成产物11-8。
[0306] 方案12
[0307]
[0308] 方案12描述化合物(I-W-1)的合成。将化合物ZZ12-1用碱如n-BuLi,LDA等处理，接着加入芳基腈或杂芳基腈。在另一个实施方案中，还可使用酰卤或Weinreb酰胺。然后将混合物用氯化铵淬灭并使用酸将pH调至约2至约4，得到化合物ZZ12-2。在一个实施方案中，将pH调至3。在另一个实施方案中，所述酸为6N HCl。参加Chubb et al.,J.Chem.Soc.,Perkin.Trans.,1853-1854(2001)，通过引用的方式将其并入本文。
[0309] 在高压釜中在100-140℃用氢氧化铵处理化合物ZZ12-2，得到化合物ZZ12-3。使用醇钾或醇钠诸如叔丁醇钾(tert-BuOK)和甲氧基甲基氯或SEMCl进行用MOM或SEM的化合物ZZ12-3中OH的保护，得到化合物ZZ12-4。用TMP或TMEDA和n-BuLi处理经保护的化合物ZZ12-4，接着加入DMF，生成经保护的醛ZZ12-5。用酸完成脱保护，得到化合物ZZ12-6。5
在一个实施方案中，所述酸为盐酸。用胺(R-NH2)处理醛ZZ12-6得到亚胺ZZ1，其进一步与TMSCN反应，得到目标化合物(I-W-1)。
在一个实施方案中，所述酸为盐酸。用胺(R-NH2)处理醛ZZ12-6得到亚胺ZZ1，其进一步与TMSCN反应，得到目标化合物(I-W-1)。
[0310] 方案12A
[0311]
[0312] 方案12描述化合物(I-W)的合成。将呋喃12-1用n-BuLi处理，接着加入3-氰基吡啶。然后将混合物用氯化铵淬灭并使用酸将pH调至约2至约4，得到化合物12-2。在一个实施方案中，将pH调至3。在另一个实施方案中，所述酸为6N HCl。参见Chubb et al.,J.Chem.Soc.,Perkin.Trans.,1853-1854(2001)，通过引用的方式将其并入本文。
[0313] 在高压釜中在140℃用氢氧化铵处理化合物12-2，得到化合物12-3。使用醇钾或醇钠诸如叔丁醇钾和甲氧基甲基氯或SEMCl进行用MOM或SEM的化合物12-3中OH的保护，得到化合物12-4。用TMP或TMEDA和n-BuLi处理经保护的化合物12-4，接着加入DMF，生成经保护的醛12-5。用酸完成脱保护，得到化合物12-6。在一个实施方案中，所述酸为盐5
酸。用胺(R-NH2)处理醛12-6得到亚胺中间体ZZ1，其进一步与TMSCN反应，得到目标化合物(I-W)。
酸。用胺(R-NH2)处理醛12-6得到亚胺中间体ZZ1，其进一步与TMSCN反应，得到目标化合物(I-W)。
[0314] 方案12B
[0315]
[0316] 方案12B描述化合物12-8的合成。将呋喃12-1用n-BuLi处理，接着就加入3-氰基吡啶。然后将混合物用氯化铵淬灭并使用6N HCl将pH调至3，得到化合物12-2。在高压釜中在140℃用氢氧化铵处理化合物12-2，得到化合物12-3。使用叔丁醇钾和甲氧基甲基氯进行用MOM保护化合物12-3中的c OH，得到化合物12-4。用TMP和n-BuLi处理经MOM保护的化合物12-4，接着加入DMF，生成经MOM保护的醛12-5。用3N HCl完成脱保护，得到化合物12-6。用4-氟-3-氯苯胺处理醛12-6得到亚胺12-7，其进一步与TMSCN反应，得到目标化合物12-8。
[0317] 方案13
[0318]
[0319] 方案13显示氰基取代的化合物(I-X-1)的制备。将化合物AAA1-1用碱处理，接着加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的产物BBB1-1。在一个实施方案中，所述碱为叔丁醇钠或叔丁醇钾。将化合物BBB1-1用TMP或LDA和n-BuLi处理，接着加入DMF或N-甲酰基哌5
啶，得到化合物CCC1-1。将化合物CCC1-1脱保护成DDD1-1，然后与胺(R-NH2)缩合，得到化合物EEE1-1。EEE1-1进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物(I-X-1)。
啶，得到化合物CCC1-1。将化合物CCC1-1脱保护成DDD1-1，然后与胺(R-NH2)缩合，得到化合物EEE1-1。EEE1-1进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物(I-X-1)。
[0320] 方案13A1
[0321]
[0322] 方案13A1显示氰基取代的化合物(I-X)的制备。将化合物AAA1用碱处理，接着加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的产物BBB1。在一个实施方案中，所述碱为叔丁醇钠或叔丁醇钾。将化合物BBB1用TMP或LDA和n-BuLi处理，接着加入DMF或N-甲酰基哌啶，得5
到化合物CCC1。将化合物CCC1脱保护并与胺(R-NH2)缩合，得到化合物EEE1，其进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物(I-X)。
到化合物CCC1。将化合物CCC1脱保护并与胺(R-NH2)缩合，得到化合物EEE1，其进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物(I-X)。
[0323] 方案13A2
[0324]
[0325] 方案13A2显示氰基取代的化合物(I-Y)的制备。将化合物AAA2用叔丁醇钾处理，接着加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的产物BBB2。将化合物BBB2用TMP和n-BuLi处理，接着加入DMF，得到化合物CCC2。将化合物CCC2脱保护并与胺(R5-NH2)缩合，得到化合物EEE2，其进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物(I-Y)。
[0326] 方案13B
[0327]
[0328] 方案13B显示氰基取代的化合物13-6的制备。将2-氰基-3-羟基吡啶13-1用叔丁醇钾处理，接着加入甲氧基甲基氯，得到MOM保护的产物13-2。将化合物13-2用TMP和n-BuLi处理，接着加入DMF，得到甲酰化的产物13-3。将化合物13-3脱保护并与3-氯-4-氟苯胺缩合，得到化合物13-5，其进一步与TMSCN在Strecker反应条件下反应，得到化合物13-6。
[0329] 方案14
[0330]
[0331] 方案14提供化合物(I-U)的制备。具体地，如上所述制备的化合物EEEE1-1与4
R-取代的硼酸和Pd催化剂反应。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。将产物SS1碘化得到化合物TT1。在一个实施方案中，使用碘进行碘化。将碘代化合物TT1通过MOMCl进行保护，然后在Pd催化剂或[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)存在下进行
2
R-取代，得到化合物VV1。在一个实施方案中，所述催化剂为[1,3-二(二苯基膦基)丙
2
烷]二氯化镍(II)。在另一个实施方案中，使用硼酸烷基酯诸如硼酸三乙酯进行R-取代。
使用n-BuLi将化合物VV1进行锂化并使用DMF调配，得到化合物XX1。在一个实施方案中，甲酰化在TMEDA中使用DMF作为甲酰化试剂进行。经由上述中间体YY1将甲酰化产物XX1转化成化合物(I-U)。
R-取代的硼酸和Pd催化剂反应。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。将产物SS1碘化得到化合物TT1。在一个实施方案中，使用碘进行碘化。将碘代化合物TT1通过MOMCl进行保护，然后在Pd催化剂或[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)存在下进行
2
R-取代，得到化合物VV1。在一个实施方案中，所述催化剂为[1,3-二(二苯基膦基)丙
2
烷]二氯化镍(II)。在另一个实施方案中，使用硼酸烷基酯诸如硼酸三乙酯进行R-取代。
使用n-BuLi将化合物VV1进行锂化并使用DMF调配，得到化合物XX1。在一个实施方案中，甲酰化在TMEDA中使用DMF作为甲酰化试剂进行。经由上述中间体YY1将甲酰化产物XX1转化成化合物(I-U)。
[0332] 方案14A1
[0333]
[0334] 方案14A1提供化合物(I-Z)的制备。具体地，如上所述制备的化合物EEEE1与4
R-取代的硼酸和Pd催化剂反应。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。将产物WWW1碘化得到化合物XXX1。在一个实施方案中，使用碘进行碘化。将碘代化合物XXX1保护成MOM醚，然后在Pd催化剂或[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)存在下进行
2
R-取代，得到化合物ZZZ1。在一个实施方案中，所述催化剂为[1,3-二(二苯基膦基)丙
2
烷]二氯化镍(II)。在另一个实施方案中，使用硼酸烷基酯诸如硼酸三乙酯进行R取代。
使用n-BuLi将化合物ZZZ1进行锂化并使用DMF调配，得到化合物BBBB1。在一个实施方案中，甲酰化在TMEDA中使用DMF作为甲酰化试剂进行。经由上述中间体YY2将甲酰化产物BBBB1转化成化合物(I-Z)。
R-取代的硼酸和Pd催化剂反应。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。将产物WWW1碘化得到化合物XXX1。在一个实施方案中，使用碘进行碘化。将碘代化合物XXX1保护成MOM醚，然后在Pd催化剂或[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)存在下进行
2
R-取代，得到化合物ZZZ1。在一个实施方案中，所述催化剂为[1,3-二(二苯基膦基)丙
2
烷]二氯化镍(II)。在另一个实施方案中，使用硼酸烷基酯诸如硼酸三乙酯进行R取代。
使用n-BuLi将化合物ZZZ1进行锂化并使用DMF调配，得到化合物BBBB1。在一个实施方案中，甲酰化在TMEDA中使用DMF作为甲酰化试剂进行。经由上述中间体YY2将甲酰化产物BBBB1转化成化合物(I-Z)。
[0335] 方案14A2
[0336]
[0337] 方案14A2提供化合物(I-V)的制备。具体地，如上所述制备的2-碘-3-羟基吡啶14-2与R4-取代的硼酸和催化剂反应。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。将产物B2用碘进行碘化得到化合物TT2。将化合物TT2经由偶联反应进行MOM保护，然后在催化剂存在下进行R2-取代，得到化合物VV2。在一个实施方案中，所述催化剂为[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)。在另一个实施方案中，使用硼酸三乙酯进行R2取代。通过与n-BuLi和DMF反应完成化合物VV2的甲酰化，得到化合物WW2。在一个实施方案中，甲酰化在TMEDA中使用N-甲酰基哌啶进行。经由上述中间体YY2将甲酰化产物WW2转化成化合物(I-V)。
[0338] 方案14B
[0339]
[0340] 方案14B提供化合物14-10的制备。具体地，如上所述制备的2-碘-3-羟基吡啶14-2与苯基硼酸和碳酸氢钠溶液在Pd(PPh3)4存在下催化剂反应。将产物14-3用碘在碳酸氢钠存在下进行碘化得到化合物14-4。将碘代化合物14-4进行MOM保护得到14-5，在[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)存在下经由与硼酸三乙酯的偶联反应将其转化成化合物14-6。化合物14-6与n-BuLi在TMEDA中反应，得到锂化物，使用DMF将其甲酰化。经由上述中间体14-9将甲酰化产物14-8转化成化合物14-10。
[0341] 方案15
[0342]
[0343] 方案15描述化合物(I-HH)的制备。在碳酸钾存在下，在DMF中将化合物JJJ1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物KKK1。在PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3存在下，将化合物KKK1回流，得到化合物LLL1。在一个实施方案中，该反应在高沸点芳族溶剂诸如氯苯、甲苯、二甲苯或二苯醚中进行。然后在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2或PdCl2(PPh3)2存在下，在碳酸钾存在下，在回流的二噁烷中，经由Suzuki-Miyaura交叉偶联反应，将化合2
物LLL1进行R-取代，得到化合物FFF1。将化合物FFF1进行溴化，得到化合物GGG1。在一个实施方案中，在氯仿和乙酸存在下使用NBS进行溴化。然后使用发烟硝酸和乙酸或发烟
5
硝酸和TFA或发烟硝酸和硫酸将化合物GGG1进行硝化，得到化合物HHH1。使用胺(R-NH2)
5
将化合物HHH1进行NHR-取代，形成化合物III1。然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物III1上完成催化氢化，得到化合物(I-HH)。
物LLL1进行R-取代，得到化合物FFF1。将化合物FFF1进行溴化，得到化合物GGG1。在一个实施方案中，在氯仿和乙酸存在下使用NBS进行溴化。然后使用发烟硝酸和乙酸或发烟
5
硝酸和TFA或发烟硝酸和硫酸将化合物GGG1进行硝化，得到化合物HHH1。使用胺(R-NH2)
5
将化合物HHH1进行NHR-取代，形成化合物III1。然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物III1上完成催化氢化，得到化合物(I-HH)。
[0344] 方案15A
[0345]
[0346] 方案15A描述化合物(I-II)的制备。在碳酸钾存在下，在DMF中将市售4-溴苯硫酚15-1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物15-2。在PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3存在下，将1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯15-2回流，得到5-溴-1-苯并噻吩15-3。在一个实施方案中，该反应在高沸点芳族溶剂诸如氯苯、甲苯、二甲苯或二苯醚中进行。然后在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2或PdCl2(PPh3)2存在下，在碳酸钾存在2
下，在回流的二噁烷中，经由Suzuki-Miyaura交叉偶联反应，将化合物15-3进行R-取代，得到化合物FFF2。将化合物FFF2进行溴化，得到化合物GGG2。在一个实施方案中，在氯仿和乙酸存在下使用NBS进行溴化。然后使用发烟硝酸和乙酸或发烟硝酸和TFA或发烟硝
5
酸和硫酸将化合物GGG2进行硝化，得到化合物HHH2。使用胺(R-NH2)将化合物HHH2进行
5
NHR-取代，形成化合物III2。然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物III2上完成催化氢化，得到化合物(I-II)。
下，在回流的二噁烷中，经由Suzuki-Miyaura交叉偶联反应，将化合物15-3进行R-取代，得到化合物FFF2。将化合物FFF2进行溴化，得到化合物GGG2。在一个实施方案中，在氯仿和乙酸存在下使用NBS进行溴化。然后使用发烟硝酸和乙酸或发烟硝酸和TFA或发烟硝
5
酸和硫酸将化合物GGG2进行硝化，得到化合物HHH2。使用胺(R-NH2)将化合物HHH2进行
5
NHR-取代，形成化合物III2。然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物III2上完成催化氢化，得到化合物(I-II)。
[0347] 方案15B
[0348]
[0349] 方案15B描述N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺15-8的制备。在碳酸钾存在下，在DMF中将4-溴苯硫酚15-1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物15-2。在PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3存在下，将1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯15-2回流，得到5-溴-1-苯并噻吩15-3。在一个实施方案中，该反应在高沸点芳族溶剂诸如氯苯、甲苯、二甲苯或二苯醚中进行。然后在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2或PdCl2(PPh3)2存在下，在碳酸钾存在下，在回流的二噁烷中，使化合物15-3经受Suzuki-Miyaura交叉偶联反应，得到5-苯基-1-苯并噻吩15-4。将化合物15-4进行溴化，得到3-溴-5-苯基-1-苯并噻吩15-5。在一个实施方案中，在氯仿或乙酸存在下使用NBS进行溴化。然后使用发烟硝酸和乙酸或发烟硝酸和TFA或发烟硝酸和硫酸将化合物15-5进行硝化，得到3-溴-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩15-6。化合物15-6与3-氯-4-氟苯胺在DMF中偶联，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩-3-胺15-7。
然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物15-7上完
3
成催化氢化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺15-8(I-II)。
然后在氢气下，在甲醇、乙醇、异丙醇或乙酸乙酯中，使用Pd/C(10％)，在化合物15-7上完
3
成催化氢化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺15-8(I-II)。
[0350] 方案16
[0351]
[0352] 方案16描述化合物(I-JJ-1)的合成。将化合物NNN1-1进行氯化，得到化合物OOO1-1。在一个实施方案中，使用六氯乙烷或N-氯代琥珀酰亚胺，使用n-BuLi、s-BuLi、LTMP、LDA、LTMS或LHMDS作为锂化剂，进行氯化。在碱诸如碳酸钾、TEA、NaH或叔丁醇钾存在下，将化合物OOO1-1用硫代乙醇酸甲酯处理，得到化合物PPP1-1。化合物PPP1-1与亚硝酸钠和氢溴酸经受重氮化作用，导致形成重氮盐，将其与溴化亚铜(copper bromide)反应，得到化合物QQQ1-1。在催化剂诸如Pd2(dba)3或Pd(dba)2和BINAP或XPhos存在下，化合物QQQ1-1与胺(R5-NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到化合物JJJ1-1。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物JJJ1-1与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物LLL1-1。在Curtius重排条件下，将化合物LLL1-1用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到化合物MMM1-1。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物MMM1-1上进行Boc脱保护，得到化合物(I-JJ-1)。
[0353] 方案16A1
[0354]
[0355] 方案16A1描述化合物(I-JJ)的合成。将化合物NNN1进行氯化，得到化合物OOO1。在一个实施方案中，使用六氯乙烷或N-氯代琥珀酰亚胺，使用n-BuLi、s-BuLi、LTMP、LDA、LTMS或LHMDS作为锂化剂，进行氯化。在碱诸如碳酸钾、TEA、NaH或叔丁醇钾存在下，将化合物OOO1用硫代乙醇酸甲酯处理，得到化合物PPP1。化合物PPP1与亚硝酸钠和氢溴酸经受重氮化作用，导致形成重氮盐，将其与溴化亚铜反应，得到化合物QQQ1。在催化5
剂诸如Pd2(dba)3或Pd(dba)2和BINAP或XPhos存在下，化合物QQQ1与胺(R -NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到化合物JJJ1。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物JJJ1与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物LLL1。在Curtius重排条件下，将化合物LLL1用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到化合物MMM1。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物MMM1上进行Boc脱保护，得到化合物(I-JJ)。
剂诸如Pd2(dba)3或Pd(dba)2和BINAP或XPhos存在下，化合物QQQ1与胺(R -NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到化合物JJJ1。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物JJJ1与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物LLL1。在Curtius重排条件下，将化合物LLL1用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到化合物MMM1。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物MMM1上进行Boc脱保护，得到化合物(I-JJ)。
[0356] 方案16A2
[0357]
[0358] 方案16A2描述化合物(I-EE)的合成。将4-氰基吡啶16-1进行氯化，得到3-氯吡啶-4-甲腈16-2。在一个实施方案中，使用六氯乙烷或N-氯代琥珀酰亚胺，使用n-BuLi、s-BuLi、LTMP、LDA、LTMS或LHMDS作为锂化剂，进行氯化。在碱诸如碳酸钾、TEA、NaH或叔丁醇钾存在下，将化合物16-2用硫代乙醇酸甲酯处理，得到3-溴噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-3。化合物16-3与亚硝酸钠和氢溴酸经受重氮化作用，导致形成重氮盐，将其与溴化亚铜反应，得到化合物16-4。在催化剂诸如Pd2(dba)3或Pd(dba)2和BINAP或XPhos存5
在下，3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-4与胺(R-NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到化合物JJJ2。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物JJJ2与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物LLL2。在Curtius重排条件下，将化合物LLL2用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到化合物MMM2。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物MMM2上进行Boc脱保护，得到化合物(I-EE)。
在下，3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-4与胺(R-NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到化合物JJJ2。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物JJJ2与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物LLL2。在Curtius重排条件下，将化合物LLL2用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到化合物MMM2。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物MMM2上进行Boc脱保护，得到化合物(I-EE)。
[0359] 方案16B
[0360]3
[0361] 方案16B描述N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺盐酸盐16-9的合成。将4-氰基吡啶16-1进行氯化，得到3-氯吡啶-4-甲腈16-2。在一个实施方案中，使用六氯乙烷或N-氯代琥珀酰亚胺，使用n-BuLi、s-BuLi、LTMP、LDA、LTMS或LHMDS作为锂化剂，进行氯化。在碱诸如碳酸钾、TEA、NaH或叔丁醇钾存在下，将化合物16-2用硫代乙醇酸甲酯处理，得到3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-3。化合物16-3与亚硝酸钠和氢溴酸经受重氮化作用，导致形成重氮盐，将其与溴化亚铜反应，得到化合物16-4。在催化剂诸如Pd2(dba)3或Pd(dba)2和BINAP或XPhos存在下，3-溴噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲5
酸甲酯16-4与胺(R-NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-5。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物16-5与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物16-7。在Curtius重排条件下，将3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸16-7用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸
叔丁酯16-8。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物16-8上进行
3
Boc脱保护，得到N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺盐酸盐16-9。
酸甲酯16-4与胺(R-NH2)经受Buchwald-Hertwig氨基化反应，得到3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯16-5。然后在碱诸如TEA、碳酸钾、DIPEA、碳酸钠、NaH、叔丁醇钠或叔丁醇钾存在下，化合物16-5与一缩二碳酸二叔丁酯经受Boc保护，接着水解，得到化合物16-7。在Curtius重排条件下，将3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸16-7用叠氮源诸如DPPA和DIPEA处理，得到(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸
叔丁酯16-8。然后在溶剂诸如二噁烷、THF或DCM中使用盐酸或TFA在化合物16-8上进行
3
Boc脱保护，得到N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺盐酸盐16-9。
[0362] 方案17
[0363]
[0364] 方案17描述化合物(I-KK)的合成。在碱诸如氢化钠、碳酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾或TEA存在下，在溶剂诸如DMF、THF、二噁烷或甲苯中，将化合物SSS1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物TTT1。将化合物TTT1加至PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3的回流溶液中并将所得反应混合物回流过夜，得到化合物UUU1和VVV1的混合物。在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(dba)2、Pd2(dba)3、Pd(OAc)2、PdCl2(PPh3)2存在下，在DMF、THF或MeCN中，将该混合物用氰化铜处理，得到化合物XXX1和WWW1的混合物。使用本领域已知的方法诸如柱色谱或制备型HPLC分离这些化合物。将化合物WWW1用NBS进行溴化，得到化合物FFFF1。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。然后化合物FFFF1经受硝化，得到化合物GGGG1。在一个实施方案中，使用硝酸钾/乙酸酐或硝酸钾/TFA进行硝化。化合物5
GGGG1与胺(R-NH2)偶联，得到化合物RRR1。然后在化合物RRR1上完成催化氢化，得到化合物(I-KK)。在一个实施方案中，在Zn粉/NH4Cl或Sn/乙酸存在下，在甲醇、乙醇或丁醇中，进行该反应。
GGGG1与胺(R-NH2)偶联，得到化合物RRR1。然后在化合物RRR1上完成催化氢化，得到化合物(I-KK)。在一个实施方案中，在Zn粉/NH4Cl或Sn/乙酸存在下，在甲醇、乙醇或丁醇中，进行该反应。
[0365] 方案17A
[0366]
[0367] 方案17A描述化合物(I-LL)的合成。在碱诸如氢化钠、碳酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾或TEA存在下，在溶剂诸如DMF、THF、二噁烷或甲苯中，将3-溴苯硫酚17-1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物17-2。将1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯17-2加至PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3的回流溶液中并将所得反应混合物回流过夜，得到6-溴苯并[b]噻吩17-3和4-溴苯并[b]噻吩17-4的混合物。在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(dba)2、Pd2(dba)3、Pd(OAc)2、PdCl2(PPh3)2存在下，在DMF、THF或MeCN中，将该混合物用氰化铜处理，得到苯并[b]噻吩-6-甲腈17-5和苯并[b]噻吩-4-甲腈17-6的混合物。使用本领域已知的方法诸如柱色谱或制备型HPLC分离这些化合物。将化合物17-5用NBS进行溴化，得到3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈17-7。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。然后化合物17-7经受硝化，得到3-溴-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈17-8。在一个实施方案中，使用硝酸钾/乙酸酐或硝酸钾/TFA进行硝化。化合物17-8与胺(R5-NH2)偶联，得到化合物RRR2。然后在化合物RRR2上完成催化氢化，得到化合物(I-LL)。在一个实施方案中，在Zn粉/NH4Cl或Sn/乙酸存在下，在甲醇、乙醇或丁醇中，进行该反应。
[0368] 方案17B
[0369]
[0370] 方案17B描述2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)-氨基)苯并[b]噻吩-6-甲腈17-10的合成。在碱诸如氢化钠、碳酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾或TEA存在下，在溶剂诸如DMF、THF、二噁烷或甲苯中，将3-溴苯硫酚17-1用溴乙醛缩二乙醇处理，得到化合物17-2。
将1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯17-2加至PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3的回流溶液中并将所得反应混合物回流过夜，得到6-溴苯并[b]噻吩17-3和4-溴苯并[b]噻吩17-4的混合物。在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(dba)2、Pd2(dba)3、Pd(OAc)2、PdCl2(PPh3)2存在下，在DMF、THF或MeCN中，将该混合物用氰化铜处理，得到苯并[b]噻吩-6-甲腈17-5和苯并[b]噻吩-4-甲腈17-6的混合物。使用本领域已知的方法诸如柱色谱或制备型HPLC分离这些化合物。将化合物17-5用NBS进行溴化，得到3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈17-7。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。然后化合物17-7经受硝化，得到3-溴-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈17-8。在一个实施方案中，使用硝酸钾/乙酸酐或硝酸钾/TFA进行硝化。化合物17-8与3-氯-4-氟苯胺在溶剂诸如DMF中偶联，得到3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈17-9。然后在化合物
17-9上完成催化氢化，得到2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-6-甲
腈17-10。在一个实施方案中，在Zn粉/NH4Cl或Sn/乙酸存在下，在甲醇、乙醇或丁醇中，进行该反应。
将1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯17-2加至PPA或路易斯酸诸如ZnCl2、AlCl3或AlBr3的回流溶液中并将所得反应混合物回流过夜，得到6-溴苯并[b]噻吩17-3和4-溴苯并[b]噻吩17-4的混合物。在催化剂诸如Pd(PPh3)4、Pd(dba)2、Pd2(dba)3、Pd(OAc)2、PdCl2(PPh3)2存在下，在DMF、THF或MeCN中，将该混合物用氰化铜处理，得到苯并[b]噻吩-6-甲腈17-5和苯并[b]噻吩-4-甲腈17-6的混合物。使用本领域已知的方法诸如柱色谱或制备型HPLC分离这些化合物。将化合物17-5用NBS进行溴化，得到3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈17-7。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。然后化合物17-7经受硝化，得到3-溴-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈17-8。在一个实施方案中，使用硝酸钾/乙酸酐或硝酸钾/TFA进行硝化。化合物17-8与3-氯-4-氟苯胺在溶剂诸如DMF中偶联，得到3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈17-9。然后在化合物
17-9上完成催化氢化，得到2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-6-甲
腈17-10。在一个实施方案中，在Zn粉/NH4Cl或Sn/乙酸存在下，在甲醇、乙醇或丁醇中，进行该反应。
[0371] 方案18
[0372]
[0373] 方案18描述化合物(I-B)的合成。将化合物IIII1进行溴化，导致形成化合物JJJJ1。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。化合物JJJJ1经受硝化，得到硝基化合物KKKK1。在一个实施方案中，使用发烟硝酸和TFA、发烟硝酸和乙酸或发烟硝酸和硫酸5
进行硝化。化合物KKKK1与R-SH反应，得到化合物GGGG1。将化合物GGGG1进行氢化，导致形成化合物HHHH1。在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物HHHH1经受盐酸盐形成，得到化合物(I-B)。在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
进行硝化。化合物KKKK1与R-SH反应，得到化合物GGGG1。将化合物GGGG1进行氢化，导致形成化合物HHHH1。在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物HHHH1经受盐酸盐形成，得到化合物(I-B)。在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
[0374] 方案18A
[0375]
[0376] 方案18A描述化合物(I-MM)的合成。将市售苯并噻吩18-1进行溴化，导致形成3-溴-苯并噻吩18-2。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。化合物18-2经受硝化，得到硝基化合物18-3。在一个实施方案中，使用发烟硝酸和TFA、发烟硝酸和乙酸或发
5
烟硝酸和硫酸进行硝化。3-溴-2-硝基苯并噻吩18-3与R-SH反应，得到化合物GGGG2。
将化合物GGGG2进行氢化，导致形成化合物HHHH2。在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物HHHH2经受盐酸盐形成，得到化合物(I-MM)。
在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
5
烟硝酸和硫酸进行硝化。3-溴-2-硝基苯并噻吩18-3与R-SH反应，得到化合物GGGG2。
将化合物GGGG2进行氢化，导致形成化合物HHHH2。在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物HHHH2经受盐酸盐形成，得到化合物(I-MM)。
在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
[0377] 方案18B
[0378]
[0379] 方案18B描述3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺盐酸盐18-6的合成。将市售苯并噻吩18-1进行溴化，导致形成3-溴-苯并噻吩18-2。在一个实施方案中，使用NBS或溴进行溴化。化合物18-2经受硝化，得到硝基化合物18-3。在一个实施方案中，使用发烟硝酸和TFA、发烟硝酸和乙酸或发烟硝酸和硫酸进行硝化。3-溴-2-硝基苯并噻吩18-3与3-氯苯硫酚在NaOH中反应，得到化合物18-4。将3-[(3-氯苯基)硫基]-2-硝基-1-苯并噻吩18-4进行氢化，导致形成3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺18-5。
在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物18-5经受盐酸盐形成，得到3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺盐酸盐18-6。在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
在一个实施方案中，使用活化的Pd/C在氢气下、Zn/甲醇或Sn/乙酸进行氢化。化合物18-5经受盐酸盐形成，得到3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺盐酸盐18-6。在一个实施方案中，使用吸收于乙醚中的氯化氢气体或吸收于醇诸如甲醇、乙醇或异丙醇、EtOAc或MTBE中的氯化氢气体进行盐形成。
[0380] 方案19
[0381]
[0382] 方案19描述化合物(I-C)或(I-C-1)的合成。化合物A1或LLLL1与胺(R5-NH2)反应，导致形成亚胺中间体，在三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯存在下，其与三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN或无机氰化物盐诸如NaCN、KCN或Zn(CN)2经受原位Strecker反应，接着经受不期望的分子内环化，得到化合物(I-C)或(I-C-1)。
[0383] 方案19A
[0384]5
[0385] 方案19A描述化合物(I-NN)的合成。4-甲酰基-3-羟基苯甲腈19-1与胺(R-NH2)反应，导致形成亚胺中间体，在三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯存在下，其与三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN或无机氰化物盐诸如NaCN、KCN或Zn(CN)2经受原位Strecker反应，接着经受不期望的分子内环化，得到化合物(I-NN)。
[0386] 方案19B
[0387]
[0388] 方案19B描述2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)-氨基)苯并呋喃-6-甲腈19-2的合成。4-甲酰基-3-羟基苯甲腈19-1与3-氯-4-氟苯胺反应，导致形成亚胺中间体，在三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯存在下，其与三烷基氰基甲硅烷诸如TMSCN或无机氰化物盐诸如NaCN、KCN或Zn(CN)2经受原位Strecker反应，接着经受不期望的分子内环化，得到
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈19-2。
2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈19-2。
[0389] 方案20
[0390]
[0391] 方案20描述化合物(ZZZ1A)和(ZZZ1B)的合成。在THF或DCM中，在吡啶或TEA存在下，将化合物YYY1用氯甲酸烷基酯处理，得到标题化合物。在一个实施方案中，所述氯甲酸烷基酯为氯甲酸乙酯。在其它实施方案中，所述氯甲酸烷基酯为氯甲酸甲酯或氯甲酸苄酯。
[0392] 方案20A
[0393]
[0394] 方案20A描述化合物(ZZZ2A)和(ZZZ2B)的合成。在THF或DCM中，在吡啶或TEA存在下，将化合物YYY2用氯甲酸烷基酯处理，得到标题化合物。在一个实施方案中，所述氯甲酸烷基酯为氯甲酸乙酯。在其它实施方案中，所述氯甲酸烷基酯为氯甲酸甲酯或氯甲酸苄酯。
[0395] 方案20B
[0396]
[0397] 方案20B描述单氨基甲酸酯(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯20-2和二氨基甲酸酯(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯20-3的合成。在THF或DCM中，在吡啶或
3
TEA存在下，将N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺20-1用氯甲酸烷基酯处理，得到单氨基甲酸酯20-2和二氨基甲酸酯20-3。需要时，为了制备单氨基甲酸酯、二氨基甲酸酯或其组合，本领域技术人员将能够改变反应时间和试剂的量。
3
TEA存在下，将N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺20-1用氯甲酸烷基酯处理，得到单氨基甲酸酯20-2和二氨基甲酸酯20-3。需要时，为了制备单氨基甲酸酯、二氨基甲酸酯或其组合，本领域技术人员将能够改变反应时间和试剂的量。
[0398] 方案21
[0399]
[0400] 方案21提供化合物(I-U)的制备。合成以羟基化合物MMMM1的碘化开始。在一个实施方案中，碘和碳酸钠用作碘化剂。在另一个实施方案中，在溶剂如四氢呋喃和水的混合物中进行碘化，得到化合物NNNN1。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，将所得化合物NNNN1向前进行MOM保护或SEM保护，得到产物OOOO1。化合物OOOO1经受金属催化的交叉偶联反应，得到化合物VV1。在一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd2(dba)3。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物VV1与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物WW1。在路易斯酸存在下，将化合物5
WW1脱保护，得到XX1。在一个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX1用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-U)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。
在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
WW1脱保护，得到XX1。在一个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX1用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-U)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。
在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0401] 方案21A
[0402]
[0403] 方案21A提供化合物(I-V)的制备。在溶剂如四氢呋喃和水的混合物中，使用碘和碳酸钠，将化合物羟基吡啶MMMM1进行碘化，得到化合物NNNN2。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，将所得化合物NNNN2向前进行MOM保护或SEM保护，得到产物OOOO2。化合物OOOO2经受金属催化的交叉偶联反应，得到化合物VV2。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd(PPh3)4。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd2(dba)3。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物VV2与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物WW2。在酸性条件下，将化合物WW2脱保护，得到XX2。在一个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX2用胺(R5NH2)、TMSCN和TMSOTf处理，经由一系列反应诸如亚胺形成、Strecker反应和分子内环化，得到化合物(I-V)。
[0404] 方案21B
[0405]
[0406] 方案21B提供化合物N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺21-7的制备。合成以碘化开始，在溶剂如四氢呋喃和水的混合物中，使用碘和碳酸钠，将2-氟-5-羟基吡啶21-1进行碘化，得到6-氟-3-羟基-2-碘吡啶
21-2。在叔丁醇钾存在下，使用MOMCl，将所得化合物21-2向前进行MOM保护，得到MOM保护的产物21-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3存在下，在二噁烷中，6-氟-2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶21-3与4-吡啶基硼酸经受Suzuki-Miyaura交叉偶联反应条件，得到
6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-2,4'-联吡啶21-4，其在n-BuLi存在下在-78℃与DMF经受甲酰化，得到甲酰化产物21-5。将化合物21-5用TFA-DCM溶液处理，得到脱除MOM的化合物
6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛21-6。将化合物21-6用3-氯-4-氟苯胺、TMSCN、TMSOTf和DCM以一釜在室温处理，经由一系列反应诸如亚胺形成、Strecker反应和分子内
3
环化，得到所期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺21-7，其为淡黄色固体。
21-2。在叔丁醇钾存在下，使用MOMCl，将所得化合物21-2向前进行MOM保护，得到MOM保护的产物21-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3存在下，在二噁烷中，6-氟-2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶21-3与4-吡啶基硼酸经受Suzuki-Miyaura交叉偶联反应条件，得到
6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-2,4'-联吡啶21-4，其在n-BuLi存在下在-78℃与DMF经受甲酰化，得到甲酰化产物21-5。将化合物21-5用TFA-DCM溶液处理，得到脱除MOM的化合物
6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛21-6。将化合物21-6用3-氯-4-氟苯胺、TMSCN、TMSOTf和DCM以一釜在室温处理，经由一系列反应诸如亚胺形成、Strecker反应和分子内
3
环化，得到所期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺21-7，其为淡黄色固体。
[0407] 方案22
[0408]
[0409] 方案22提供化合物(I-QQ)的制备。合成以羟基化合物SSSS1的碘化开始。在一个实施方案中，碘和碳酸钠用作碘化剂。在另一个实施方案中，在溶剂如四氢呋喃和水的混合物中进行碘化，得到化合物TTTT1。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，将所得化合物TTTT1向前进行MOM保护或SEM保护，得到产物UUUU1。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物UUUU1与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物VVVV1。在路易斯酸存在下，将化合物VVVV1脱保护，得到WWWW1。在一个实施方案中，所述酸为TFA。5
将化合物WWWW1用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物XXXX1。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。将化合物XXXX1转化成二氨基甲酸酯YYYY1。在一个实施方案中，在吡啶/THF存在下，使用氯甲酸乙酯形成单氨基甲酸酯或二氨基甲酸酯。在交叉偶联反应条件下，将二氨基甲酸酯YYYY1转化成产物(I-QQ)。
将化合物WWWW1用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物XXXX1。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。将化合物XXXX1转化成二氨基甲酸酯YYYY1。在一个实施方案中，在吡啶/THF存在下，使用氯甲酸乙酯形成单氨基甲酸酯或二氨基甲酸酯。在交叉偶联反应条件下，将二氨基甲酸酯YYYY1转化成产物(I-QQ)。
[0410] 方案22A
[0411]
[0412] 方案22A提供化合物(I-RR)的制备。合成以3-羟基吡啶22-1的碘化开始，将其在碳酸钠存在下，在水中用碘处理，得到2-碘-3-羟基吡啶22-2。在叔丁醇钾存在下，使用MOMCl，将所得化合物22-2向前进行MOM保护，得到产物22-3。在LDA存在下在-78℃将2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶22-3与DMF进行甲酰化，得到2-碘-3-(甲氧基甲氧基)-吡啶-4-甲醛22-4，将其用TFA-DCM经受MOM脱保护，得到3-羟基-2-碘吡啶-4-甲
5
醛22-5。将化合物22-5用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物XXXX2。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
将化合物XXXX2转化成二氨基甲酸酯YYYY2。在一个实施方案中，在吡啶/THF存在下，使用氯甲酸乙酯形成单氨基甲酸酯或二氨基甲酸酯。在交叉偶联反应条件下，将二氨基甲酸酯YYYY2转化成产物(I-RR)。
5
醛22-5。将化合物22-5用胺(RNH2)、氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物XXXX2。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
将化合物XXXX2转化成二氨基甲酸酯YYYY2。在一个实施方案中，在吡啶/THF存在下，使用氯甲酸乙酯形成单氨基甲酸酯或二氨基甲酸酯。在交叉偶联反应条件下，将二氨基甲酸酯YYYY2转化成产物(I-RR)。
[0413] 方案22B
[0414]
[0415] 方案22B描述(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯22-8的合成。合成以市售3-羟基吡啶14-1的碘化开始，将其在碳酸钠存在下，在水中用碘处理，得到2-碘-3-羟基吡啶14-2。在叔丁醇钾存在下，使用MOMCl，将所得化合物14-2向前进行MOM保护，得到产物22-3。在LDA存在下在THF中在-78℃将2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶22-3与DMF进行甲酰化，得到2-碘-3-(甲氧基甲氧基)-吡啶-4-甲醛22-4，将其用TFA-DCM经受MOM脱保护，得到
3-羟基-2-碘吡啶-4-甲醛22-5。将化合物22-5以一釜方式用3-氯-4-氟苯胺、TMSCN和TMSOTf在DCM中在室温处理，经由一系列反应诸如亚胺形成、Strecker反应和分子内环
3
化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺22-6。在吡啶存在下，在THF中，使用氯甲酸乙酯，化合物22-6经受二氨基甲酸酯，得到二氨基甲酸乙酯22-7。
在PdCl2(PPh3)2、CuI和三乙胺存在下，在Sonogashira反应条件下，将(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯22-7用4-乙炔基苯甲酰胺和三乙胺处理，得到所期望的产物(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯22-8，其为棕色固体。
3-羟基-2-碘吡啶-4-甲醛22-5。将化合物22-5以一釜方式用3-氯-4-氟苯胺、TMSCN和TMSOTf在DCM中在室温处理，经由一系列反应诸如亚胺形成、Strecker反应和分子内环
3
化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺22-6。在吡啶存在下，在THF中，使用氯甲酸乙酯，化合物22-6经受二氨基甲酸酯，得到二氨基甲酸乙酯22-7。
在PdCl2(PPh3)2、CuI和三乙胺存在下，在Sonogashira反应条件下，将(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯22-7用4-乙炔基苯甲酰胺和三乙胺处理，得到所期望的产物(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯22-8，其为棕色固体。
[0416] 方案23
[0417]
[0418] 方案23描述化合物(I-SS)的合成。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，使起始的溴羟基化合物ZZZZ1经受MOM保护或SEM保护，得到产物AAAAA1，然后在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，与DMF或N-甲酰基哌啶进行甲酰化，得到产物BBBBB1。在BBBBB1上与杂芳基硼酸或硼酸酯完成交叉偶联，得到化合物CCCCC1。在一个实施方案中，所述杂芳基硼为2-甲基吡啶-4-硼酸。在另一个实施方案中，在磷酸三钾和三环己基膦存在下，将Pd2(dba)3/二噁烷用作催化剂。在Lewis存在下，将产物CCCCC1脱5
保护，得到DDDDD1。在一个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物DDDDD1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺EEEEE1。在一个实施方案中，在TFE和MeCN的混合溶剂中完成亚胺形成。将亚胺EEEEE1与氰根离子源反应，得到产物(I-SS)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述溶剂为DCM-TFE的混合物。
保护，得到DDDDD1。在一个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物DDDDD1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺EEEEE1。在一个实施方案中，在TFE和MeCN的混合溶剂中完成亚胺形成。将亚胺EEEEE1与氰根离子源反应，得到产物(I-SS)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述溶剂为DCM-TFE的混合物。
[0419] 方案23A
[0420]
[0421] 方案23A描述化合物(I-TT)的合成。在t-BuOK存在下，在THF中将2-溴-3-羟基吡啶23-1用MOMCl处理，导致形成2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶23-2。然后在LDA存在下在-78℃，MOM保护的化合物与甲酸乙酯经受甲酰化，得到2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛23-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下，在23-3上与2-甲基吡啶-4-硼酸完成Suzuki交叉偶联，得到3-(甲氧基甲氧基)-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛23-4，将其用TFA-DCM溶剂处理，得到脱除MOM的化合物23-5。将化合物23-55
用胺(R-NH2)处理，得到亚胺EEEEE2。在一个实施方案中，在TFE和MeCN的混合溶剂中完成亚胺形成。将亚胺EEEEE2与氰根离子源反应，得到产物(I-TT)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述溶剂为DCM-TFE的混合物。
用胺(R-NH2)处理，得到亚胺EEEEE2。在一个实施方案中，在TFE和MeCN的混合溶剂中完成亚胺形成。将亚胺EEEEE2与氰根离子源反应，得到产物(I-TT)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述溶剂为DCM-TFE的混合物。
[0422] 方案23B
[0423]
[0424] 方案23B描述化合物N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺23-7的合成。在t-BuOK存在下，在THF中将2-溴-3-羟基吡
啶23-1用MOMCl处理，导致形成2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶23-2。然后在LDA存在下在-78℃，MOM保护的化合物与甲酸乙酯经受甲酰化，得到2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛23-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下，在23-3上与2-甲基吡啶-4-硼酸完成Suzuki交叉偶联，得到3-(甲氧基甲氧基)-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛23-4，将其用TFA-DCM溶剂处理，得到脱除MOM的化合物23-5。将化合物3-羟基-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛23-5用3-氯-4-氟苯胺在TFE和MeCN的混合溶
剂中处理，得到亚胺中间体23-6，其在DCM-TFE的混合溶剂中进一步与TMSCN反应，得到所
3
期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺23-7，其为固体。
啶23-1用MOMCl处理，导致形成2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶23-2。然后在LDA存在下在-78℃，MOM保护的化合物与甲酸乙酯经受甲酰化，得到2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛23-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下，在23-3上与2-甲基吡啶-4-硼酸完成Suzuki交叉偶联，得到3-(甲氧基甲氧基)-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛23-4，将其用TFA-DCM溶剂处理，得到脱除MOM的化合物23-5。将化合物3-羟基-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛23-5用3-氯-4-氟苯胺在TFE和MeCN的混合溶
剂中处理，得到亚胺中间体23-6，其在DCM-TFE的混合溶剂中进一步与TMSCN反应，得到所
3
期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺23-7，其为固体。
[0425] 方案24
[0426]
[0427] 方案24描述(I-UU)的合成。在交叉偶联反应条件下，将化合物BBBBB1与合适的取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯偶联，得到化合物FFFFF1。在一个实施方案中，所使用的硼酸酯为N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺。在另一个实施方案中，在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下完成偶联反应。在路易斯酸存在下，将化合物FFFFF1脱保护，得到GGGGG1。在一个实施方案中，所述酸5
为TFA。化合物GGGGG1接着与胺(R-NH2)、氰根离子源和路易斯酸在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中反应，得到化合物(I-UU)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
为TFA。化合物GGGGG1接着与胺(R-NH2)、氰根离子源和路易斯酸在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中反应，得到化合物(I-UU)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0428] 方案24A
[0429]
[0430] 方案24A描述(I-VV)的合成。在交叉偶联反应条件下，将化合物23-3与N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺偶联，得到化合物24-4。在一个实施方案中，在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下完成偶联反应。在路易斯酸存在下，将化合物24-4脱保护，得到24-5。在一个实施方案中，所述酸5
为TFA。化合物24-5接着用胺(R-NH2)、氰根离子源和路易斯酸在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中处理，得到化合物(I-VV)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
为TFA。化合物24-5接着用胺(R-NH2)、氰根离子源和路易斯酸在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中处理，得到化合物(I-VV)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0431] 方案24B
[0432]
[0433] 方案24B描述4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰胺24-6的合成。将市售4-氯-吡啶-2-甲酸24-1用亚
硫酰氯在回流下处理，得到中间体4-氯皮考林基氯，其与甲胺在THF中原位反应，得到酰胺
24-2。化合物4-氯-N-甲基吡啶-2-甲酰胺24-2与二(频哪醇合)二硼在钯催化剂下反应，得到N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺
24-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下，化合物24-3与2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛23-3(根据23B制备)偶联，得到4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺24-4，然后其与TFA-DCM经受MOM脱保护，形成
4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺24-5。化合物24-5与3-氯-4-氟苯胺偶联，形成中间体亚胺，将其用TMSCN、TMSOTf在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中处理原位处理，形成环化产物4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰胺24-6，其为固体。
硫酰氯在回流下处理，得到中间体4-氯皮考林基氯，其与甲胺在THF中原位反应，得到酰胺
24-2。化合物4-氯-N-甲基吡啶-2-甲酰胺24-2与二(频哪醇合)二硼在钯催化剂下反应，得到N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺
24-3。在磷酸三钾、三环己基膦和Pd2(dba)3/二噁烷存在下，化合物24-3与2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛23-3(根据23B制备)偶联，得到4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺24-4，然后其与TFA-DCM经受MOM脱保护，形成
4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺24-5。化合物24-5与3-氯-4-氟苯胺偶联，形成中间体亚胺，将其用TMSCN、TMSOTf在含有NH4OAc缓冲溶液的密封管中处理原位处理，形成环化产物4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰胺24-6，其为固体。
[0434] 方案25
[0435]
[0436] 方案25描述化合物(I-U)的合成。使用硼酸酯试剂和碱，将化合物HHHHH1转化成硼酸酯IIIII1。在一个实施方案中，所使用的硼酸酯为硼酸三异丙酯。在另一个实施方案中，所使用的碱为n-BuLi。在氧化试剂存在下，将硼酸酯IIIII1转化成羟基化合物JJJJJ1。在一个实施方案中，所使用的氧化试剂为四水合过硼酸钠/水。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，将所得化合物JJJJJ1向前进行MOM保护或SEM保护，得到产物VV1。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物VV1与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物WW1。在路易斯酸存在下，将化合物WW1脱保护，得到XX1。在一
5
个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX1用胺(RNH2)处理，得到亚胺YY1。将亚胺YY1用氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-U)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
5
个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX1用胺(RNH2)处理，得到亚胺YY1。将亚胺YY1用氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-U)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0437] 方案25A
[0438]
[0439] 方案25A描述化合物(I-V)的合成。使用硼酸酯试剂和碱，将化合物HHHHH2转化成硼酸酯IIIII2。在一个实施方案中，所使用的硼酸酯为硼酸三异丙酯。在另一个实施方案中，所使用的碱为n-BuLi。在氧化试剂存在下，将硼酸酯IIIII2转化成羟基化合物JJJJJ2。在一个实施方案中，所使用的氧化试剂为四水合过硼酸钠/水。在碱存在下，分别使用MOMCl或SEMCl，将所得化合物JJJJJ2向前进行MOM保护或SEM保护，得到产物VV2。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物VV2与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物WW2。在路易斯酸存在下，将化合物WW2脱保护，得到XX2。在一
5
个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX2用胺(RNH2)处理，得到亚胺YY2。将亚胺YY2用氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-V)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
5
个实施方案中，所述酸为TFA。将化合物XX2用胺(RNH2)处理，得到亚胺YY2。将亚胺YY2用氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-V)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0440] 方案25B
[0441]
[0442] 方案25B描述化合物N3-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺25-8的合成。在n-BuLi存在下，将2,6-二氟吡啶25-1用硼酸三异丙酯处理，得到2,6-二氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶25-2，其进一步与四水合过硼酸钠/水反应，得到2.6-二氟-3-羟基吡啶25-3。在二异丙胺存在下，使用MOMCl，使化合物25-3经受MOM保护，得到MOM保护的化合物25-4。在n-BuLi存在下，2,6-二氟-3-(甲氧基甲氧基)吡啶25-4与DMF进行甲酰化，得到2,6-二氟-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛25-5，通过TFA-DCM将其脱保护，得到25-6。2,6-二氟-3-羟基吡啶-4-甲醛25-6与3-氯-4-氟苯胺偶联，得到亚胺25-7，使其进一步与TMSCN和
3
TMSOTf反应，导致形成第一Strecker产物，其原位经受分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺25-8，其为棕色固体。
3
TMSOTf反应，导致形成第一Strecker产物，其原位经受分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺25-8，其为棕色固体。
[0443] 方案26
[0444]
[0445] 方案26描述化合物(I-YY)的合成。在交叉偶联反应条件下，使用烷基胺或芳族胺将化合物AAAAA1转化成OOOOO1。在一个实施方案中，Buchwald-Hartwig氨基化反应作为交叉偶联反应进行。在另一个实施方案中，使用二苯基胺作为芳基胺。在另一个实施方案中，所使用的催化剂为Pd2(dba)3和Dppf。在碱如n-BuLi、s-BuLi、LDA或LTMP存在下，在-78℃，化合物OOOOO1与DMF或N-甲酰基哌啶经受甲酰化，得到产物PPPPP1。在路易斯酸存在下，将化合物PPPPP1进行脱保护，得到亚胺QQQQQ1。在一个实施方案中，所述酸为5
TFA。将化合物QQQQQ1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺RRRRR1。将胺RRRRR1用氰根离子源和路易斯酸处理的，得到化合物(I-YY)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
TFA。将化合物QQQQQ1用胺(R-NH2)处理，得到亚胺RRRRR1。将胺RRRRR1用氰根离子源和路易斯酸处理的，得到化合物(I-YY)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0446] 方案26A
[0447]
[0448] 方案26A描述化合物(I-ZZ)的合成。在Pd2(dba)3和Dppf存在下，在2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶23-2上与二苯基胺完成Buchwald-Hartwig氨基化反应，得到3-(甲氧基甲氧基)-N,N-二苯基吡啶-2-胺26-1。在n-BuLi存在下，化合物26-1与DMF进行甲酰化，得到2-(二苯基氨基)-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛26-2，其经受MOM脱保护，得到2-(二苯基氨基)-3-羟基吡啶-4-甲醛26-3。将化合物26-3用胺(R5-NH2)处理，得到亚胺RRRRR2。将胺RRRRR2用氰根离子源和路易斯酸处理，得到化合物(I-ZZ)。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0449] 方案26B
[0450]
[0451] 方案26B描述N3-(3-氯-4-氟 苯基)-N7,N7- 二苯 基呋 喃并[2,3-c] 吡啶-2,3,7-三胺26-5的合成。在Pd2(dba)3和Dppf存在下，在2-溴-3-(甲氧基甲氧
基)吡啶23-2上与二苯基胺进行Buchwald-Hartwig氨基化反应，得到3-(甲氧基甲氧基)-N,N-二苯基吡啶-2-胺26-1。在n-BuLi存在下化合物26-1与DMF进行甲酰化，得到
2-(二苯基氨基)-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛26-2。化合物26-2经受MOM脱保护，得到2-(二苯基氨基)-3-羟基吡啶-4-甲醛26-3。将化合物26-3与3-氯-4-氟苯胺偶联，形成亚胺26-4。将亚胺26-4用TMSCN/TFE处理，导致形成第一Strecker产物，其原位经
3 7 7
受分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-N,N-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺26-5，其为固体。
基)吡啶23-2上与二苯基胺进行Buchwald-Hartwig氨基化反应，得到3-(甲氧基甲氧基)-N,N-二苯基吡啶-2-胺26-1。在n-BuLi存在下化合物26-1与DMF进行甲酰化，得到
2-(二苯基氨基)-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛26-2。化合物26-2经受MOM脱保护，得到2-(二苯基氨基)-3-羟基吡啶-4-甲醛26-3。将化合物26-3与3-氯-4-氟苯胺偶联，形成亚胺26-4。将亚胺26-4用TMSCN/TFE处理，导致形成第一Strecker产物，其原位经
3 7 7
受分子内环化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-N,N-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺26-5，其为固体。
[0452] 方案27
[0453]
[0454] 方案27描述化合物(I-CCC)的制备。将起始化合物SSSSS1用碱处理，然后与合适的烷基卤化物反应，形成化合物TTTTT1。在酸催化下，将化合物TTTTT1转化成化合物UUUUU1。在一个实施方案中，使用PPA/氯苯作为酸催化剂。将化合物UUUUU1进行卤化，得到化合物VVVVV1。在一个实施方案中，使用NBS在氯仿和乙酸的混合物中的溶液进行卤化。将化合物VVVVV1进行硝化，得到硝基化合物WWWWW1。在一个实施方案中，使用硝酸进行硝
5
化。将化合物WWWWW1用胺(R-NH2)处理，得到化合物XXXXX1。在交叉偶联反应条件下，将化合物XXXXX1与芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯反应，得到化合物YYYYY1。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3或CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述硼酸为2-甲基-4-吡啶基硼酸。随后，将硝基化合物YYYYY1还原成胺，得到化合物(I-CCC)。在一个实施方案中，使用Pd/C和氢气进行还原。
5
化。将化合物WWWWW1用胺(R-NH2)处理，得到化合物XXXXX1。在交叉偶联反应条件下，将化合物XXXXX1与芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯反应，得到化合物YYYYY1。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3或CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述硼酸为2-甲基-4-吡啶基硼酸。随后，将硝基化合物YYYYY1还原成胺，得到化合物(I-CCC)。在一个实施方案中，使用Pd/C和氢气进行还原。
[0455] 方案27A
[0456]
[0457] 方案27A描述化合物(I-DDD)的制备。将化合物2-溴苯硫酚在丙酮中用碳酸钾处理，然后与溴乙醛缩二乙醇反应，形成(2-溴苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷27-2。使化合物27-2与PPA在氯苯中反应，得到7-溴苯并[b]噻吩27-3。然后使用NBS在氯仿和乙酸的混合物中将化合物27-3进行溴化，得到3,7-二溴苯并[b]噻吩27-4。接着进行27-45
的硝化，得到3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩(27-5)。将化合物27-5用胺(R-NH2)处理，得到化合物XXXXX2。在交叉偶联反应条件下，将化合物XXXXX2与任选取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯反应，得到化合物YYYYY2。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3或CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述硼酸为
2-甲基-4-吡啶基硼酸。随后，将硝基化合物YYYYY2还原成胺，得到化合物(I-DDD)。在一个实施方案中，使用Pd/C和氢气进行还原。
的硝化，得到3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩(27-5)。将化合物27-5用胺(R-NH2)处理，得到化合物XXXXX2。在交叉偶联反应条件下，将化合物XXXXX2与任选取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯反应，得到化合物YYYYY2。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3或CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述硼酸为
2-甲基-4-吡啶基硼酸。随后，将硝基化合物YYYYY2还原成胺，得到化合物(I-DDD)。在一个实施方案中，使用Pd/C和氢气进行还原。
[0458] 方案27B
[0459]
[0460] 方案27B描述N3-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺27-8的制备。将化合物2-溴苯硫酚在丙酮中用碳酸钾处理，然后与溴乙醛缩二乙醇反应，形成(2-溴苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷27-2。使化合物27-2与PPA在氯苯中反应，得到7-溴苯并[b]噻吩27-3。然后使用NBS在氯仿和乙酸的混合物中将化合物27-3进行溴化，得到3,7-二溴苯并[b]噻吩27-4。接着进行27-4的硝化，得到3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩(27-5)。将化合物27-5用3-氯苯胺处理，得到7-溴-N-(3-氯苯基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺27-6。在K3PO4和Pd(PPh3)4存在下，使化合物27-6与2-甲基-4-吡啶基硼酸在DMF和水的混合物中反应，形成N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺27-7。随后，使用Pd/C和氢气将硝基化合物27-7还原成胺，形成N3-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺27-8。
[0461] 方案28
[0462]
[0463] 方案28描述化合物(I-U)的合成。化合物EEEE1-1与芳基硼酸在Suzuki交叉偶联反应条件下偶联，形成化合物SS1。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，所述溶剂为1,4-二噁烷。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd2(dba)3。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3、CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述芳基硼酸为苯基硼酸。将化合物SS1用碘在碱性介质中处理，得到化合物TT1。在一个实施方案中，所述碱为Na2CO3。在碱存在下，将化合物TT1用MOMCl进行MOM保护，形成MOM保护的化合物UU1。在一个实施方案中，所述碱为叔丁醇钾。将化合物UU1加至新制的醇钠或酚钠(sodium aryloxide)溶液中。随后，向所得混合物中加入CuBr，形成化合物VV1。在一个实施方案中，所述酚钠为苯酚钠。在n-BuLi、s-BuLi、LDA和TMEDA中的任意一种或多种存在下，将化合物VV1与DMF进行甲酰化，形成化合物WW1。随后化合物WW1在酸性条件下经受脱保护，得到化合物XX1。在一个实施方案中，所述酸为HCl。在另一个实施方案中，所5
述酸为TFA。化合物XX1首先与胺(R-NH2)偶联，然后用三烷基氰基甲硅烷处理。随后将所得混合物用路易斯酸处理，形成化合物(I-U)，其为固体。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述氰化物源为NaCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf、Sc(OTf)3、Fe(OTf)2、Ni(OTf)2或In(OTf)3中的任一种。
述酸为TFA。化合物XX1首先与胺(R-NH2)偶联，然后用三烷基氰基甲硅烷处理。随后将所得混合物用路易斯酸处理，形成化合物(I-U)，其为固体。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述氰化物源为NaCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf、Sc(OTf)3、Fe(OTf)2、Ni(OTf)2或In(OTf)3中的任一种。
[0464] 方案28A
[0465]
[0466] 方案28A描述化合物(I-V)的合成。2-碘-3-羟基吡啶14-2与芳基硼酸在Suzuki交叉偶联反应条件下偶联，形成化合物B2。在一个实施方案中，使用DMF和水的混合物作为溶剂。在另一个实施方案中，使用Pd(PPh3)4和无机碱作为催化剂。在另一个实施方案中，所述催化剂为Pd2(dba)3。在另一个实施方案中，所述无机碱为K2CO3、KHCO3、CsF或K3PO4中的任一种。在另一个实施方案中，所述芳基硼酸为苯基硼酸。将化合物B2用碘在碱性介质中处理，得到化合物TT2。在一个实施方案中，所述碱为Na2CO3。在叔丁醇钾存在下，将化合物TT2用MOMCl进行MOM保护，形成MOM保护的化合物UU2。将化合物UU2加至新制的芳基酚钠溶液中。随后，向所得混合物中加入CuBr，形成化合物VV2。在一个实施方案中，所述酚钠为苯酚钠。在n-BuLi、s-BuLi、LDA和TMEDA中的任意一种或多种存在下，将化合物VV2与DMF进行甲酰化，形成化合物WW2。随后化合物WW2在酸性条件下经受脱保护，得到5
化合物XX2。在一个实施方案中，所述酸为HCl。化合物XX2首先与胺(R-NH2)偶联，然后首先用三烷基氰基甲硅烷处理，然后与路易斯酸形成化合物(I-V)，其为固体。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
化合物XX2。在一个实施方案中，所述酸为HCl。化合物XX2首先与胺(R-NH2)偶联，然后首先用三烷基氰基甲硅烷处理，然后与路易斯酸形成化合物(I-V)，其为固体。在一个实施方案中，所述氰根离子源为TMSCN。在另一个实施方案中，所述路易斯酸为TMSOTf。
[0467] 方案28B
[0468]3
[0469] 方案28B描述化合物N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺28-4的合成。2-碘-3-羟基吡啶14-2与芳基硼酸在Suzuki交叉偶联反应条件下偶联，形成2-苯基-3-羟基吡啶14-3。将化合物14-3用碘在碱性介质中处理，得到6-碘-2-苯基吡啶-3-醇14-4，在叔丁醇钾存在下，使其与MOMCl经受MOM保护，形成MOM保护的化合物6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶14-5。将化合物14-5加至新制的苯酚钠溶液中，随后加入CuBr。将所得反应混合物回流16h，形成3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶28-1。在n-BuLi和TMEDA存在下，将化合物28-1与DMF进行甲酰化，形成3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛28-2。化合物28-2经受脱保护，得到3-羟基-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛28-3。化合物28-3首先与4-氟-3-氯苯
3
胺偶联，然后用TMSCN处理。随后将所得混合物用TMSOTf处理，导致形成N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺28-4，其为固体。
3
胺偶联，然后用TMSCN处理。随后将所得混合物用TMSOTf处理，导致形成N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺28-4，其为固体。
[0470] 因此，本发明还涉及制备式(I-C)化合物的方法，所述方法包括：
[0471]
[0472] 其中：1 1
[0473] X为CR 、N或NO；2 2
[0474] X为CR 、N或NO；3 3
[0475] X为CR 、N或NO；4 4
[0476] X为CR 、N或NO；且
[0477] R5选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基；
[0478] (i) 与胺(R5-NH2)反应；
[0479] (ii)步骤(i)的产物与氰化物盐反应；和
[0480] (iii)步骤(ii)的产物与路易斯酸反应。
[0481] 在另一个实施方案中，所述路易斯酸为三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯、Sc(OTf)3、Fe(OTf)2、Ni(OTf)2或In(OTf)3。在另一个实施方案中，所述氰化物盐选自三烷基氰基甲硅烷、NaCN、KCN和Zn(CN)2。在另一个实施方案中，所述三烷基氰基甲硅烷为TMSCN。在另一个实施方案中，在缓冲溶液存在下进行步骤(iii)的反应。在一个实施方案中，所述缓冲溶液为乙酸铵缓冲液。
[0482] 通过实践本文所披露的方法获得的化合物也落入本发明的范围内。在一个实施方案中，本发明涉及通过制备式(I-C)化合物的方法获得的化合物，所述方法包括：
[0483]
[0484] 其中：
[0485] X1为CR1、N或NO；
[0486] X2为CR2、N或NO；
[0487] X3为CR3、N或NO；
[0488] X4为CR4、N或NO；且
[0489] R5选自H、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的单环或二环的C6-C14芳基、任选取代的单环或二环的杂芳基、任选取代的(芳基)烷基、任选取代的单环或二环的环烷基、任选取代的单环或二环的杂环基、C1-C6卤代烷基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的杂芳基(烷基)、羟基烷基和全氟代烷基；5
[0490] (i) 与胺(R-NH2)反应；
[0491] (ii)步骤(i)的产物与氰化物盐反应；和
[0492] (iii)步骤(ii)的产物与路易斯酸反应。
[0493] 在另一个实施方案中，所述路易斯酸为三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯、Sc(OTf)3、Fe(OTf)2、Ni(OTf)2或In(OTf)3。在另一个实施方案中，所述氰化物盐选自三烷基氰基甲硅烷、NaCN、KCN和Zn(CN)2。在另一个实施方案中，所述三烷基氰基甲硅烷为TMSCN。在另一个实施方案中，在缓冲溶液存在下进行步骤(iii)的反应。在一个实施方案中，所述缓冲溶液为乙酸铵缓冲液。
[0494] 在另一个实施方案中，本发明涉及中间体化合物，其为制备式(I-C)化合物的方法的步骤(i)-(iii)中的一个或多个的产物。在一个实施方案中，步骤(i)的产物或中间体为亚胺。
[0495] 药物组合物
[0496] 本文使用的药物组合物含有在药物载体中式(I)化合物或其代谢物或前药(“本发明化合物”或“化合物”)以及任选地其它药用惰性或非活性成分。在另一个实施方案中，式(I)-(IV)化合物存在于单一组合物中。在另一个实施方案中，式(I)-(IV)化合物的代谢物存在于单一组合物中。在另一个实施方案中，式(I)化合物的前药存在于单一组合物中，所述式(I)化合物包括但不限于具有任一式(II)-(IV)的化合物。在另一个实施方案中，式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药与下文所述的一种或多种赋形剂和/或一种或多种其它治疗剂组合。
[0497] 药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或前药或药用盐，其对于调节吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种是有效的。药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其对于调节犬尿氨酸途径是有效的。本文使用的药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或前药或药用盐，其通过在受试者中抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种对于调节犬尿氨酸途径是有效的。药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其对于在受试者中调节吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种是有效的。在一个方面，药物组合物包含一定量的化合物或其代谢物或药用盐或前药，其对于在受试者中减少犬尿氨酸途径代谢物和/或改变(例如增加)色氨酸水平和/或减少犬尿氨酸/色氨酸比例是有效的。药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其对于在受试者中减少或消除自身免疫抗体是有效的。在另一个方面，药物组合物包含一定量的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其对于在受试者中减少免疫抑制是有效的。
[0498] 具体而言，为达到治疗效果，式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的剂量将取决于制剂、患者的年龄、体重和性别及递送的途径和频率。还可预期，可以单位剂量形式施用治疗和式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的剂量并且本领域技术人员将调整所述单位剂型以相应地反映活性的相对水平。对于所采用的具体剂量的决定(以及每天给药的次数)可由普通熟练医师判断，并且可通过对具体情况的剂量滴定而改变，以产生所期望的治疗效果。在一个实施方案中，所述治疗有效量为约0.01mg/kg至10mg/kg体重。在另一个实施方案中，所述治疗有效量低于约5g/kg、约500mg/kg、约400mg/kg、约300mg/kg、约200mg/kg、约100mg/kg、约50mg/kg、约25mg/kg、约10mg/kg、约1mg/kg、约0.5mg/kg、约0.25mg/kg、约0.1mg/kg、约100μg/kg、约75μg/kg、约50μg/kg、约25μg/kg、约10μg/kg或约1μg/kg。然而，式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的治疗有效量可由主治医师确定并取决于所治疗的病况或疾病、递送途径和频率、年龄、体重、患者症状的严重度和患者的响应方式。
[0499] 可按有规律的时间表(即每天、每周、每月或每年)或不规律的时间表(具有变化的给药天、周、月等)提供治疗有效量。可选择定，待施用的治疗有效量可变化。在一个实施方案中，首次剂量的治疗有效量高于一个或多个后续剂量的治疗有效量。在另一个实施方案中，首次剂量的治疗有效量低于一个或多个后续剂量的治疗有效量。等效剂量可历时多个时间段施用，所述时间段包括但不限于约每2小时、约每6小时、约每8小时、约每12小时、约每24小时、约每36小时、约每48小时、约每72小时、约每周、约每两周、约每三周、约每月、约每两个月、约每四个月、约每四个月、约每9个月和约每年。对应于完整治疗过程的给药数量和频率将根据保健医生的判断来决定。本文所述的治疗有效量是指给予给定时间段的总量；也就是说，如果给予一种以上的式(I)化合物或其代谢物或前药或药用盐，所述治疗有效量对应于所给予的总量。
[0500] 含有式(I)化合物的药物组合物可纯态配制或与一种或多种用于给药的药物载体配制。一种或多种药物载体的量由式(I)化合物或其代谢物或前药的溶解度和化学性质、选择的给药途径和标准药理学实践决定。所述一种或多种药物载体可为固体或液体且可掺入固体和液体载体。多种合适的液体载体是已知的且可容易由本领域技术人员选择。此类载体可包括例如DMSO、盐水、缓冲盐水、羟基丙基环糊精和它们的混合物。类似地，多种固体载体和赋形剂是本领域技术人员已知的。式(I)化合物可通过任何途径给药，考虑到对于其已被选择的特定病症或疾病。式(I)化合物或其代谢物或前药可通过口服、注射、吸入(包括口服、鼻内和气管内)、经眼、经皮、血管内、皮下、肌内、舌下、颅内、硬膜外、经直肠和阴道等递送。
[0501] 虽然式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药可单独给药，但也可在一种或多种生理学上相容的药物载体存在下给药。所述载体可呈干形式或液体形式，并且必须是药学可接受的。液体药物组合物通常为无菌溶液或悬浮液。当液体载体被用于胃肠外给药时，期望它们是无菌液体。液体载体通常用于制备溶液、悬浮液、乳液、糖浆和酏剂。在一个实施方案中，将式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药溶于液体载体中。在另一个实施方案中，将式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药悬浮在液体载体中。取决于给药途径，制剂领域的技术人员将能够选择合适的液体载体。可选择地，在固体载体中配制式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个实施方案中，可将组合物压成单位剂量形式，即片剂或囊片。在另一个实施方案中，可将组合物加至单位剂量形式中，即胶囊剂。在另一个实施方案中，为了给药可将组合物配制成粉末剂。固体载体可执行多种功能，即可执行两种或更多种下文所述赋形剂的功能。例如，固体载体还可作为矫味剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、填充剂、助流剂、压缩助剂、粘合剂或包囊材料起作用。
[0502] 组合物还可被细分为含有适宜量的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。例如，单位剂量可为包装组合物，例如，包装的粉剂、小瓶、安瓿、预填充注射器或含有液体的小袋。
[0503] 可与一种或多种式(I)化合物或其代谢物或前药组合的赋形剂的实例包括但不限于，助剂、抗氧化剂、粘合剂、缓冲剂、包衣剂、着色剂、压缩助剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂、润滑剂、包囊材料、填充剂、矫味剂、助流剂、制粒剂、润滑剂、金属螯合剂、渗透压调节剂(osmo-regulator)、pH调节剂、防腐剂、增溶剂、吸附剂、稳定剂、增甜剂、表面活性剂、悬浮th剂、糖浆、增稠剂或粘度调节剂。参见例如"Handbook of Pharmaceutical Excipients",5 Edition,Eds.:Rowe、Sheskey,and Owen,APhAPublications(Washington,DC),December
14,2005中所述的赋形剂，通过引用的方式将其并入本文。
14,2005中所述的赋形剂，通过引用的方式将其并入本文。
[0505] 在另一个实施方案中，可将组合物用作气雾剂，即口服或鼻内气雾剂。对于该给药途径，在加压气雾剂容器中将组合物与气态或液化的抛射剂配制使用，所述抛射剂例如二氯二氟甲烷、二氧化碳、氮气、丙烷等。本文还提供了以一个或多个致动(actuation)的计量剂量递送。
[0506] 在另一个实施方案中，组合物可通过持续递送装置给药。本文使用的“持续递送”是指延迟或以其它方式控制的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的递送。本领域技术人员知道合适的持续递送装置。用于这种持续传递装置时，如本文所述配制式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0507] 经标记的化合物和测定方法
[0508] 本发明的另一个方面涉及荧光染料、自旋标记、重金属或同位素标记或放射性标记的本发明化合物，其将不仅可用于成像，而且可用于体外和体内测定法，从而在哺乳动物的血液或组织样品中或细胞中定位和定量IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种，并且通过抑制经标记化合物的结合来鉴定或筛选IDO1或IDO2或TDO中的一种或多种的配体。本发明化合物也可缀合至其它治疗剂或测定试剂，例如，用于研究或测试目的或任何其它目的，缀合至生物治疗剂诸如靶向抗体或抗体片段，或药物靶标或抗体，作为试剂的抗体片段或蛋白质。因此，本发明包括IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种的酶测定，其包含这种经标记的化合物。测定法的实例包括但不限ELISA、RIA、ELISPOT等。
[0509] 本发明的一个方面包括同位素标记的化合物，它们与式(I)所示的化合物或其代谢物或药用盐或前药是相同的，但事实上，一个或多个原子被原子质量或质量数通常不同于在自然界通常发现的原子质量或质量数的原子取代。可掺入到本发明化合物中的同位素2 3 13 15 18 17 31 32
的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，诸如分别为 H、H、C、N、O、O、P、P、
35 18 36
S、F和 Cl。含有上述同位素和其它原子的其它同位素的本发明化合物在本发明的范围内。
的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，诸如分别为 H、H、C、N、O、O、P、P、
35 18 36
S、F和 Cl。含有上述同位素和其它原子的其它同位素的本发明化合物在本发明的范围内。
[0510] 将放射同位素掺入有机化合物中的合成方法适用于本发明化合物且是本领域公知的。掺入放射标记化合物中的放射性核素将取决于放射标记化合物的具体应用。应当理解的是，在其中进行此类同位素取代的化合物中，以下原子，当存在时可发生变化，从而使2 13 15
例如任意氢可为 H/D，任意碳可为 C，或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由
2 3 14
本领域技术人员确定。例如，对于IDO1、IDO2或TDO酶标记和竞争测定，掺入 H/D、H、C、
82 125 131 35
Br、I、 I、S的化合物通常是最有用的。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位
3 14
素 H和 C，可特别用于此目的。放射性同位素3H和14C，用于此目的，鉴于其易于掺入和现成的检测装置是特别有用的。
例如任意氢可为 H/D，任意碳可为 C，或任意氮可为 N，并且上述原子的存在和位置可由
2 3 14
本领域技术人员确定。例如，对于IDO1、IDO2或TDO酶标记和竞争测定，掺入 H/D、H、C、
82 125 131 35
Br、I、 I、S的化合物通常是最有用的。基于其易于掺入和检测手段易得，放射性同位
3 14
素 H和 C，可特别用于此目的。放射性同位素3H和14C，用于此目的，鉴于其易于掺入和现成的检测装置是特别有用的。
[0511] 同样，本发明化合物可包括用放射性同位素制备同位素变体，例如，其中所得化合11 18 125 123 124
物可用于药物和/或底物组织分布研究。例如，在放射成像应用中，C、F、 I、I、 I、
131 75 77
I、Br、Br通常是最有用的。此外，可制备这样的化合物，其取代有正电子发射同位素，
11 18 15 13
诸如 C、F、O和 N，并且将用于正电子发射断层(PET)研究，以检查底物受体占据。在一
3 14 125 35 82 3
些实施方案中，放射性核素选自 H、C、I、S、Br。由于易于制备和检测，优选氚 H和碳
14 2
14即 C。此外，用较重的同位素诸如氘，即 H/D，可得到源于更大代谢稳定性的某些治疗优点，例如，增加体内半衰期或降低剂量需求，并因此在某些情况下可为优选的。的本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论放射性与否，均旨在涵盖于本发明的范围内。
物可用于药物和/或底物组织分布研究。例如，在放射成像应用中，C、F、 I、I、 I、
131 75 77
I、Br、Br通常是最有用的。此外，可制备这样的化合物，其取代有正电子发射同位素，
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诸如 C、F、O和 N，并且将用于正电子发射断层(PET)研究，以检查底物受体占据。在一
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些实施方案中，放射性核素选自 H、C、I、S、Br。由于易于制备和检测，优选氚 H和碳
14 2
14即 C。此外，用较重的同位素诸如氘，即 H/D，可得到源于更大代谢稳定性的某些治疗优点，例如，增加体内半衰期或降低剂量需求，并因此在某些情况下可为优选的。的本文所提供的化合物的所有同位素变体，不论放射性与否，均旨在涵盖于本发明的范围内。
[0512] 同位素标记或放射性标记的化合物可用于筛选测定，以鉴定或评价化合物或药物靶标。一般而言，可评价新合成的或鉴定的化合物(即测试化合物)其减少放射性标记化合物与IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种结合的能力。因此，测试化合物与经标记化合物(诸如同位素标记包括放射标记的化合物或荧光素标记的化合物)竞争与IDO1、IDO2或TDO酶中的一种或多种结合的能力直接对应于其结合活性。
[0513] 制品
[0514] 本发明还提供含有本文所述式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药或组合物或组合物的药物制剂的试剂盒或包装。所述试剂盒可被组织以指示在每个期望的时间要服用的单一制剂或制剂的组合。
[0515] 适当地，试剂盒含有包含配制用于所需递送途径的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的包装或容器。适当地，试剂盒含有用药说明和有关活性剂的插页。任选地，试剂盒还可含有用于监测产品的循环水平的说明和用于实施此类测定法的材料，其包括例如试剂、孔板、容器、标记或标签等。这样的试剂盒可容易地以适于治疗所期望适应症的方式进行包装。例如，试剂盒还可含有喷雾泵或其它递送装置的使用说明。考虑到所期望的适应症和递送途径，包含在这样的试剂盒中的其它合适组分，将是本领域技术人员显而易见的。
[0516] 本文所述式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药或组合物可为单一剂量或用于连续或周期性不连续给药。对于连续给药，包装或试剂盒可包含式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，呈每个剂量单元(例如溶液、洗剂、片剂、丸剂或其它上述或用于药物递送的单元)形式，以及任选地用于每天、每周或每月给药的说明，持续预设时间长度或按处方。当式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药被以不连续的方式周期性地递送时，包装或试剂盒可包含当不递送式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药期间的安慰剂。当需要组合物的浓度、组合物的组分的浓度或组合物中式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药或治疗剂的相对比例随时间变化时，包装或试剂盒可含有一系列提供所期望的可变性的剂量单元。
[0517] 本领域已知许多包装或试剂盒用于分配周期性口服使用的药剂。在一个实施方案中，包装具有每个时期的指示物。在另一个实施方案中，包装为经标记的泡罩包装、标盘分配器(dial dispenser)包装或瓶。
[0518] 试剂盒的包装工具(means)本身可适应给药，诸如吸入剂、注射器、移液管、滴眼管或其它这样的装置，由此制剂可被施用至身体的患部诸如肺，注射至受试者，或者甚至应用于试剂盒或与试剂盒的其它组分混合。
[0519] 这些试剂盒的组合物还可以干燥或冻干形式提供。当试剂或组分以干燥形式提供时，一般是通过加入合适的溶剂进行复溶。可以设想的是，也可在另一包装中提供溶剂。
[0520] 本发明的试剂盒通常还包含含有严格限制用于商业销售的小瓶的工具，例如注射或吹塑模制的塑料容器，其中所期望的小瓶被保留。不管包装的数量或类型且如上文所讨论，所述试剂盒还可包括用于辅助在动物体内注射/施用或放置组合物的单独的仪器，或可用其进行包装。这种仪器可为吸入器、注射器、移液管、钳子、量匙、滴眼管或任何此类医学批准的递送工具。
[0521] 在一个实施方案中，本发明提供试剂盒且含有式(I)化合物。在另一个实施方案中，试剂盒包含式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个实施方案中，试剂盒包含式(I)-(IV)化合物的代谢物。在另一个实施方案中，试剂盒含有式(I)-(IV)化合物的前药。式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药可存在或不存在一种或多种上述载体或赋形剂。在另一个实施方案中，试剂盒含有式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药，其可在本文所述的一种或多种其它治疗剂中。试剂盒可任选地含有向患有以下特征的疾病的受试者给予药物和式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的说明：(i)由失调的吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶活性引起的犬尿氨酸途径的失调，或(ii)免疫抑制或(iii)自身免疫，或(iv)犬尿氨酸代谢物增加或(v)色氨酸降低或(vi)犬尿氨酸/色氨酸比例增加或(vii)伴有炎症。
[0522] 在另一个实施方案中，本发明提供试剂盒且含有呈第二剂量单元形式的式(I)化合物或其代谢物或前药及呈第三剂量单元形式的一种或多种上述载体或赋形剂。试剂盒任选地含有向患有以下特征的疾病的受试者给予药物和式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的说明：(i)由犬尿氨酸途径的失调引起的异常免疫抑制，或(ii)自身免疫，或(iii)犬尿氨酸代谢物增加，或(iv)色氨酸降低，或(v)犬尿氨酸/色氨酸比例增加。
[0523] 在另一个实施方案中，本发明提供试剂盒且含有呈第二剂量单元形式的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药及呈第三剂量单元形式的一种或多种上述载体或赋形剂。试剂盒任选地含有向患有以下特征的疾病的受试者给予药物和式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药的说明：由吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶的酶活性引起的异常免疫抑制。
[0524] 用法
[0525] 本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药和药物组合物可用于治疗或调节与犬尿氨酸途径相关的疾病或病况。具体地，所述化合物可用于治疗或调节与犬尿氨酸途径代谢物增加相关的疾病或病况，例如犬尿氨酸或改变的(例如降低的)色氨酸水平。所述化合物可用于治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病或病况。本发明化合物可用于治疗免疫抑制。在一个方面，免疫抑制与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关。本文所述的化合物和药物组合物可用于调节与免疫抑制增强相关的疾病，所述免疫抑制由犬尿氨酸途径的失调引起，其起因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化。本发明化合物可用于治疗自身免疫。在一个方面，自身免疫与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关。
[0526] 本文使用的术语“调节”或其变化形式是指式(I)化合物抑制一种或多种生物学途径的组分的能力。在一个实施方案中，“调节”是指犬尿氨酸的血清和/或组织浓度降低。在另一个实施方案中，“调节”是指犬尿氨酸/色氨酸的血浆和/或组织浓度(kyn/trp)比例降低。在另一个实施方案中，“调节”是指色氨酸的血浆和/或组织浓度降低。在另一个实施方案中，“调节”是指(i)犬尿氨酸的浓度和/或kyn/trp的浓度比例降低，和/或(ii)体外测定中色氨酸浓度增加，例如使用细胞培养系统。
[0527] 在另一个实施方案中，“调节”是指抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1活性在另一个实施方案中，“调节”是指抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-2活性。在另一个实施方案中，“调节”是指抑制色氨酸2,3-双加氧酶活性。在另一个实施方案中，“调节”是指双重抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和色氨酸2,3-双加氧酶活性。在另一个实施方案中，“调节”是指双重抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-2和色氨酸2,3-双加氧酶活性。在另一个实施方案中，“调节”是指双重抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和吲哚胺2,3-双加氧酶-2活性。在另一个实施方案中，“调节”是指三重抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1、吲哚胺2,3-双加氧酶-2和色氨酸
2,3-双加氧酶活性。
2,3-双加氧酶活性。
[0528] 化合物的效用可例如通过它们在本领域已知的和如本文所述的体外和体内测定中活性来证明。式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药展现出吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶抑制活性，且减少犬尿氨酸途径代谢物的产生。因此，本发明化合物可用作治疗剂，其用于治疗直接或间接涉及犬尿氨酸途径代谢物和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-1、吲哚胺2,3-双加氧酶-2和色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种或与它们相关的疾病、病症或病况
[0529] 本文使用的“疾病”、“病症”和“病况”可互换使用，用于表示受试者中的异常状态。犬尿氨酸途径相关的疾病为可通过减少犬尿氨酸途径代谢物水平或增加色氨酸水平或两者治疗、预防、改善或治愈的疾病。IDO1-、IDO2-和/或TDO-相关的疾病可为任何可通过调节酶表达和/或活性治疗、预防、改善或治愈的疾病。所述关联可为直接或间接的。因此，本文所述化合物可用于治疗与IDO1、IDO2或TDO或这些酶的任意组合或与犬尿氨酸途径直接或间接相关的疾病。
[0530] 在一个实施方案中，此种疾病与异常细胞增殖相关。术语“异常细胞增殖”是指哺乳动物身体中天然存在的细胞的不受控制的生长。在一个实施方案中，特征在于异常细胞增殖的疾病为癌症，其包括但不限于，鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)、腹膜癌、前列腺癌、头癌、颈癌、眼癌、口癌、喉癌(throat)、食道癌、支气管癌、喉癌(larynx)、咽癌、甲状腺癌、胸癌、骨癌、肺癌(包括小细胞肺癌(“SCLC”)、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺瘤和肺鳞状细胞癌)、结肠癌、直肠癌、胃癌或胃部癌(包括胃肠癌)、膀胱癌、子宫癌、子宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌(包括子宫内膜癌或子宫瘤)、阴道癌、外阴癌、睾丸癌、阴茎癌、肛门癌、皮肤癌、甲状腺癌、血癌、淋巴结癌、肾癌或肾部癌、肝癌(包括肝细胞癌、肝瘤(hepatic carcinoma)和肝细胞瘤(hepatoma))、肠癌、唾液腺癌、胰腺癌、脑癌(包括成胶质细胞瘤)、中枢神经系统癌、肾上腺癌、皮肤癌或白血病。因此，本发明提供化合物用于治疗癌症的用途。本领域技术人员应当理解的是，需要在临床设置上建立犬尿氨酸水平降低与抗肿瘤活性之间的关联。
[0531] 如本文所述，用于治疗癌症时的化合物的治疗有效量是指可减少癌细胞的数量、减小肿瘤大小、抑制转移、抑制或减少肿瘤生长、减少肿瘤抗性，减少肿瘤逃逸和/或改善一种或多种癌症的症状的量。对于癌症治疗，疗效可例如通过评估疾病进展时间和/或确定响应率来测量。
[0532] 在一个实施方案中，所述病况为免疫抑制。本文使用的术语“免疫抑制(immune suppression或immunosuppression)”是指抑制身体的免疫系统及其抵抗感染和其它疾病的能力。免疫系统的抑制可为部分的或完全的。免疫抑制可产生于某些疾病，例如但不限于，异常细胞增殖或癌症；急性和慢性感染，包括但不限于细菌感染诸如肺结核，病毒感染诸如AIDS、HIV、HCV、HPV感染和寄生虫感染诸如疟疾和利什曼病。此外，免疫抑制可产生于疾病治疗，例如，来自用抗癌药物诸如四环素或其类似物治疗。本文所述化合物用于治疗免疫抑制。更具体地，可使用所述化合物以减少与异常细胞生长相关的免疫抑制，其中吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一个或多个发挥作用。因此，所述化合物可有效地治疗疾病、病症或病况诸如癌症，其与犬尿氨酸水平增加相关，起因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚的动作相关联胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶的作用。
[0533] 当病症或疾病的治疗或诸如准备用于骨髓或其它器官移植的过程需要免疫抑制时，通常用药物诱导免疫抑制以防止供体组织的排斥。实例包括但不限于同种异体造血干细胞移植(HSCT)、移植物抗宿主病(GVHD)、器官移植等。本发明还提供了使用本发明化合物和药物组合物诱导从骨髓治疗或其它器官移植后的免疫抑制中快速恢复免疫以对抗感染后程序。使用化合物的时机由保健专家或医师确定。所述化合物还可用作骨髓移植或外周血干细胞移植后的佐剂并用于通过过继转移的免疫治疗中。因此，本发明提供本文所述化合物用于治疗具有免疫抑制的病况的用途。
[0534] 在另一个实施方案中，所述疾病为传染性疾病。在一个实施方案中，传染性疾病为细菌感染。可治疗的细菌感染的实例包括但不限于分枝杆菌(Mycobacteria)感染及链球菌(Streptococcus)热原感染。具体的细胞内细菌感染可选自麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、李斯特菌(Listeria monocytogens)和弓形虫(Toxoplasma gondii)。因此，本文提供化合物用于治疗细菌感染的用途。
[0535] 在另一个实施方案中，所述疾病为病毒感染(例如HIV、HPV或HCV感染)。可使用本发明化合物治疗的病毒感染的实例包括但不限于人类免疫缺陷(HIV)/AIDS病毒、人副流感病毒、人乳头状瘤病毒、丙型肝炎、乙型肝炎、流感、SARS、巨细胞病毒、病毒性出血热(埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙和黄热病病毒)、脊髓灰质炎病毒、EB病毒、水痘带状疱疹病毒和柯萨奇病毒。在另一个实施方案中，病毒感染为HCV感染。在另一个实施方案中，病毒感染为HIV感染。因此，本发明提供本文所述化合物用于治疗病毒感染诸如HIV、HPV或HCV感染的用途。
[0536] 在另一个实施方案中，所述疾病为寄生虫病。可使用本发明化合物治疗寄生虫病的实例包括但不限于利什曼病和疟疾。本发明化合物和药物组合物可用于抗寄生虫治疗，所述寄生虫包括但不限于杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)，热带利什曼原虫(Leishmania tropica)，硕大利什曼原虫(Leishmania major)，俄塞俄比亚利什曼原虫(Leishmania aethiopica)，墨西哥利什曼原虫(Leishmania maxicana)，恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)，间日疟原虫(Plasmodium vivax)，卵形疟原虫(Plasmodium ovale)和三日疟原虫(Plasmodium malariae)。因此，本发明提供本文所述的化合物用于治疗寄生虫病诸如利什曼病和疟疾的用途。
[0537] 在另一个实施方案中，所述疾病为免疫介导的病症(例如B细胞介导的病症或巨噬细胞介导的病症，或T细胞介导的免疫疾病)。IDO1，例如，通过促炎细胞因子诸如干扰素γ和在较小程度上通过TNF-α、IL-1、IFN-α和-β诱导。IDO2为在自身免疫性关节炎的炎症发病机理和自身反应性应答的关键调解物。因此，在一个实施方案中，所述疾病为炎性疾病。炎性病症或病况的实例包括但不限于关节炎、肺病、过敏性气道疾病、哮喘、心血管疾病和神经肌肉疾病诸如动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、外周动脉疾病、缺血、阿尔茨海默病和中风、肠易激综合症、克罗恩病和盆腔炎性病症。在一个实施方案中，所述疾病为关节炎。在另一个实施方案中，关节炎选自骨关节炎、类风湿性关节炎、幼年型关节炎、强直性脊柱炎、痛风和牛皮癣关节炎。本领域技术人员将认识到，抑制IDO1活性降低患有炎性病症的受试者的循环T-regs和效应器T细胞凋亡并促进免疫耐受。因此，本文所述的化合物可用于治疗或调节与IDO1或IDO2或TDO中的一种或多种相关的炎性病症。所述化合物可用于治疗或调节与犬尿氨酸途径代谢物相关的炎症病症。在一个实施方案中，所述化合物可用于治疗IDO1相关性免疫介导疾病。在另一个实施方案中，所述化合物可用于治疗IDO2相关性免疫介导病症。在另一个实施方案中，所述化合物可用于治疗或调节IDO2相关性炎性疾病。在另一个实施方案中，所述化合物可用于治疗TDO相关性免疫介导病症。在另一个实施方案中，所述化合物可用于治疗或调节一种或多种以下病症：(i)T细胞介导的免疫病症，或(ii)B细胞介导的免疫病症，或(iii)巨噬细胞或肥大细胞介导的免疫病症。因此，本发明提供本文所述的化合物用于治疗免疫介导的疾病的用途。在一个实施方案中，所述化合物可用于治疗或调节骨关节炎、类风湿性关节炎、幼年型关节炎，强直性脊柱炎和牛皮癣关节炎。在另一个实施方案中，化合物可用于治疗或调节阿尔茨海默病。
[0538] 已显示IDO2抑制自身免疫性关节炎的小鼠模型中自身抗体的产生(Merlo et al.J.Immunol.(2014),192(5),2082-2090)。因此，在一个实施方案中，所述疾病为自身免疫性病症。可使用本发明化合物治疗的自身免疫性病症的实例包括但不限于多发性硬化症、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、哮喘、牛皮癣、炎性肠病、原发性硬化性胆管炎、桥本甲状腺炎、舍格伦综合征、系统性红斑狼疮、抗磷脂综合征—原发性和继发性、原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎、脑脊髓炎、格雷夫斯病、自身免疫性视网膜病—也称为恢复蛋白(recoverin)相关性视网膜病、硬皮病、自身免疫性血小板减少性紫癜、艾迪生病、乳糜泻(celiac disease)—口炎性腹泻(sprue)、皮肌炎、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病、急性炎性脱髓鞘性多发性神经病、艾萨克综合征、Moersch-Woltmann综合征，兰伯特-伊顿肌无力综合征和重症肌无力症。在一个实施方案中，所述疾病为类风湿性关节炎。在另一个实施方案中，所述疾病为多发性硬化症。在另一个实施方案中，所述疾病为狼疮性红细胞增多症。因此，本发明提供本文所述的化合物用于治疗自身免疫性疾病的用途。在一个方面，本发明提供本文所述的化合物治疗多发性硬化症的用途。在另一个方面，本发明提供本文述的化合物用于治疗性类风湿性关节炎的用途。
[0539] IDO1和TDO都表达于脑中且高表达于脑肿瘤中。脑肿瘤中的IDO1活性负面影响生存(Wainright,et al.Clin Cancer Res.2012Nov15；18(22):6110-21)。脑IDO1有助于疼痛和抑郁的共病(comorbidity)(Kim et al.J Clin Invest.2012；122(8):2940–2954)。因此，在另一个实施方案中，所述疾病为神经系统疾病。可使用本发明化合物治疗的中枢和外周神经系统疾病的实例包括但不限于脑肿瘤诸如神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、神经瘤，神经炎性疾病和神经变性疾病诸如阿尔茨海默病、亨廷顿病、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化症和帕金森病，莱姆神经包柔氏螺旋体疾病(lyme neuroborreliosis)、晚期莱姆病脑病、图雷特综合征、系统性硬化症、格林-巴利综合症、肌营养不良、急性播散性脑脊髓炎和视神经炎、横贯性脊髓炎、视神经脊髓炎。疾病的实例还包括但不限于神经精神疾病，其包括心境障碍和睡眠障碍。在另一个实施方案中，所述疾病为抑郁。在另一个实施方案中，所述疾病为精神分裂症。在另一个实施方案中，所述睡眠障碍为失眠症。在另一个实施方案中，所述睡眠障碍为睡眠呼吸暂停。因此，本发明提供本文所述的化合物用于治疗神经系统疾病的用途。在一个方面，本发明提供本文所述的化合物用于治疗多发性硬化症的用途。在一个方面，本发明提供本文所述的化合物用于治疗阿尔茨海默病的用途。在另一个方面，本发明提供本文所述的化合物用于治疗抑郁的用途。在另一个方面，本发明提供本文所述的化合物用于治疗精神分裂症或睡眠障碍的用途。
[0540] 在另一个方面，本发明提供用于调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个方面，所述疾病为任何可通过给予本发明提供的化合物或其代谢物或药用盐或前药治疗的疾病。在另一个方面，本发明提供用于可通过抑制犬尿氨酸途径治疗的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予化合物、代谢物或药用盐或前药。
[0541] 在另一个方面，本发明提供调节吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的任意一种或多种的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)-(IV)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0542] 在另一个方面，所述调节为抑制犬尿氨酸途径或一种或多种所述酶。
[0543] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或色氨酸2,3-双加氧酶调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物。
[0544] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物。
[0545] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物。
[0546] 在一个方面，本发明提供减少犬尿氨酸途径代谢物的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0547] 在另一个方面，本发明提供改变受试者中色氨酸水平的方法且包括给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个方面，色氨酸水平增加。在另一个方面，犬尿氨酸/色氨酸比例降低。
[0548] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种增加色氨酸水平的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物。
[0549] 在一个方面，本发明提供治疗与犬尿氨酸途径的失调相关或由此产生的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0550] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1和/或吲哚胺2,3-双加氧酶-2和/或色氨酸2,3-双加氧酶治疗由犬尿氨酸途径的失调引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述化合物或其前药。
[0551] 在另一个方面，本发明提供治疗由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或色氨酸2,3-双加氧酶或此两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0552] 在另一个方面，本发明提供由吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶或此两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0553] 在另一个方面，本发明提供由吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或此两种酶的活化引起的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0554] 在另一个方面，本发明提供抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0555] 在另一个方面，本发明提供治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的任意一种或多种相关的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0556] 在另一个方面，本发明提供治疗特征在于异常免疫抑制例如由犬尿氨酸途径的失调导致的免疫抑制增强的疾病的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0557] 在另一个方面，本发明提供调节特征在于由失调的犬尿氨酸(归因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化)导致的异常免疫抑制的疾病且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0558] 在一个方面，本发明提供治疗免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，免疫抑制与犬尿氨酸代谢物水平增加或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的酶活性相关。在另一个方面，本发明提供用于治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。因此，在一个方面，本发明提供本发明化合物在治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的免疫抑制中的用途。
[0559] 在另一个方面，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶和/或色氨酸2,3-双加氧酶的酶活性治疗免疫抑制的方法且包括向有此需要的受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0560] 在另一个方面，本发明提供减少或消除免疫介导的病症的方法且包括向患者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0561] 在另一个方面，本发明提供抑制受试者中自身免疫反应或自身免疫抗体产生的方法且包括向有此需要的受试者给予所述化合物或其代谢物或药用盐或前药。在另一个方面，本发明提供抑制自身免疫反应或自身免疫抗体产生的方法，其中(i)吲哚胺2,3-双加氧酶-2被抑制或(ii)犬尿氨酸代谢物减少，且包括向有此需要的受试者给予所述化合物或其代谢物或药用盐或前药。在一个方面，前述自身免疫反应或自身免疫抗体产生的减少与炎性疾病、癌症或自身免疫病症相关。
[0562] 在一个方面，可使用本发明化合物治疗的疾病包括癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。在另一个方面，所有前述方法包括施用一种或多种其它药物或治疗剂或疗法。在一个方面，治疗剂为选自还包括以下的化疗剂：癌症疫苗、靶向药物、靶向抗体、抗体片段、抗代谢物、抗肿瘤药、抗叶酸剂、毒素、烷化剂、DNA链破坏剂、DNA小沟结合剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物、核苷酸还原酶抑制剂、微管蛋白相互作用剂、抗激素剂、免疫调节剂、抗肾上腺剂、细胞因子、放射疗法、细胞耗竭疗法诸如B细胞耗竭疗法或激素疗法。
[0563] 在另一个方面，本发明提供治疗抑郁、阿尔茨海默病、痴呆、多发性硬化症、精神分裂症，HIV感染、疟疾、类风湿性关节炎或失眠的方法且包括向患者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐。
[0564] 在一个方面，所述疾病为癌症。在另一个方面，癌症疾病为鳞状细胞癌、腹膜癌、前列腺癌、头癌、颈癌、眼癌、口癌、喉癌(throat)、食道癌、支气管癌、喉癌(larynx)、咽癌、甲状腺癌、胸癌、骨癌、肺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、子宫癌、宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、睾丸癌、阴茎癌、肛门癌、皮肤癌、甲状腺癌、血癌、淋巴结癌、肾癌、肝癌、肠癌、唾液腺癌、胰腺癌、脑癌、脊柱癌、肾上腺癌、皮肤癌或白血病。在另一个方面，本发明提供治疗肿瘤抗性的方法，其包括向患者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0565] 在另一个方面，所述病毒感染为HIV感染。在另一个方面，寄生虫感染为疟疾或利什曼病。
[0566] 在另一个方面，本发明提供治疗病毒感染的方法且包括向患者给予本文所述的化合物。
[0567] 在另一个方面，本发明提供治疗抑郁的方法且包括向患者给予本文所述的化合物。
[0568] 在另一个方面，本发明提供治疗精神分裂症的方法且包括向患者给予本文所述的化合物。
[0569] 在另一个方面，本发明提供治疗阿尔茨海默病的方法且包括向患者给予本文所述的化合物。
[0570] 在一个实施方案中，本发明提供通过抑制吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶调节犬尿氨酸途径的方法且包括向有此需要的患者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0571] 在另一个实施方案中，本发明提供治疗特征在于由失调的犬尿氨酸途径(归因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶的活化)导致的异常免疫抑制的疾病的方法且包括向有此需要的患者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药.
[0572] 在另一个实施方案中，本发明提供治疗特征在于由失调的犬尿氨酸途径(归因于吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种的活化)导致的异常免疫抑制的疾病的方法且包括向有此需要的患者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0573] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗受试者中与犬尿氨酸途径或或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的任意一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)测定来自受试者的血液和/或组织样品；(ii)确定样品中受试者的血液和/或组织色氨酸或犬尿氨酸浓度或此两者；(iii)任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例；和(iv)向受试者给予本文所述的化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0574] 在另一个方面，本发明提供监测受试者中与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)向患有与犬尿氨酸途径相关的疾病的受试者投予化合物或其代谢物或药用盐或前药，(ii)在一个或多个时间点或在治疗方案过程中持续分析血液或组织样品或此两者，(iii)确定血液或组织样品或此两者中色氨酸和犬尿氨酸浓度，(iv)任选地确定受试者的犬尿氨酸/色氨酸比例，和(v)调整治疗方案或化合物的剂量。
[0575] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗患者中与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)分析患者样品存在或不存在改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，其中如果检测到改变的犬尿氨酸/色氨酸比例，则所述患者诊断有与犬尿氨酸途径相关的疾病，和(ii)向经诊断的患者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0576] 在另一个方面，本发明提供治疗与犬尿氨酸途径或吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中一种或多种相关的疾病的方法且包括：(i)需要测试提供分析结果以确定患者的犬尿氨酸水平是否改变，和(ii)如果患者的犬尿氨酸水平改变，则向患者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0577] 在另一个方面，本发明提供用于受试者中与犬尿氨酸途径相关的疾病的化合物，包括：测定来自患者的血液样品；确定患者是否具有高的血液和/或组织犬尿氨酸水平；和如果具有高的血液和/或组织犬尿氨酸水平，向患者给予本文所述的化合物。
[0578] 在一个方面，本发明提供用于治疗患者中与犬尿氨酸途径相关的疾病的化合物，包括：测定来自患者的血液样品；确定患者是否具有高的血液和/或组织色氨酸水平；和如果具有低的血液和/或组织色氨酸水平，向患者给予本文所述的化合物。
[0579] 在一个方面，本发明提供用于治疗患者中与吲哚胺2,3-双加氧酶-1或吲哚胺2,3-双加氧酶-2或色氨酸2,3-双加氧酶中的一种或多种相关的疾病的化合物，包括：测定来自患者的血液样品；确定患者是否具有高的血液和/或组织色氨酸水平；和如果具有高的血液和/或组织犬尿氨酸水平或低的血液和/或组织色氨酸水平，向患者给予本文所述的化合物。
[0580] 在另一个方面，本发明提供前述方法的用途，其中所述疾病为癌症、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、免疫介导的病症、自身免疫性病症、炎性疾病、中枢神经系统疾病、外周神经系统疾病、神经变性疾病、心境障碍、睡眠障碍、脑血管疾病、外周动脉疾病或心血管疾病。
[0581] 在一个方面，本发明提供用于治疗患者中免疫抑制的化合物，包括：测定来自患者的血液样品；确定患者是否具有高的血液和/或组织犬尿氨酸水平和/或低的血液和/或组织色氨酸水平；如果具有高的血液和/或组织犬尿氨酸水平和/或低的血液和/或组织色氨酸水平，向患者给予本文所述的化合物。
[0582] 在另一个方面，本发明提供治疗哺乳动物中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，所述方法包括：测定来自哺乳动物的血液和/或组织样品；确定哺乳动物的血液和/或组织色氨酸和犬尿氨酸浓度；任选地确定哺乳动物的犬尿氨酸/色氨酸比例；和给药一定量的本文所述的化合物。
[0583] 在一个方面，本发明提供治疗哺乳动物中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，所述方法包括：测定来自受试者的血液和/或组织样品；确定患者的组织样品中IDO1和/或IDO2和/或TDO表达和/或活性；和给药一定量的本文所述的化合物。
[0584] 在另一个方面，本发明提供检测或示踪哺乳动物中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，所述方法包括：向患有与犬尿氨酸途径相关的疾病的哺乳动物投予化合物与一种或多种治疗剂的组合；在一个或多个时间点或在治疗方案过程中持续分析血液和/或组织样品；确定哺乳动物的血液和/或组织样品色氨酸和犬尿氨酸浓度和/或确定犬尿氨酸/色氨酸比例；调整治疗方案或化合物或第二治疗剂的剂量。
[0585] 在另一个方面，本发明提供检测或示踪哺乳动物中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，所述方法包括：向患有与犬尿氨酸途径相关的疾病的哺乳动物投予本文所述的化合物；在一个或多个时间点或在治疗方案过程中持续分析血液和/或组织样品；确定血液和/或组织投予化合物的代谢物浓度；和调整治疗方案或治疗剂量。
[0586] 本发明化合物可用于与本文所述的一种或多种治疗剂组合。因此本发明化合物可用于治疗和检测与犬尿氨酸途径相关的疾病的进展。
[0587] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗患者中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，包括：分析患者样品存在或不存在改变的犬尿氨酸和/或色氨酸和/或犬尿氨酸/色氨酸比例，其中如果检测到改变的犬尿氨酸和/或色氨酸和/或犬尿氨酸/色氨酸比例，则所述患者诊断有与犬尿氨酸途径相关的疾病，和向经诊断的患者给予治疗有效量的化合物。
[0588] 在另一个方面，本发明提供治疗患者中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，包括：需要测试提供分析结果以确定患者的犬尿氨酸和/或色氨酸水平和/或犬尿氨酸/色氨酸比例是否改变，和如果患者的犬尿氨酸和/或色氨酸水平和/或犬尿氨酸/色氨酸比例改变，则向患者给予治疗有效量的化合物。
[0589] 在另一个方面，本发明提供诊断和治疗受试者中与IDO1或IDO2或TDO相关的癌症的方法，其中所述癌症特征在于IDO1或IDO2或TDO生物标志物中的一种或多种的表达和/或活性增强，所述方法包括：i)从受试者获得生物学样品；ii)向样品施用特异性针对IDO1或IDO2或TDO的单克隆抗体，其中IDO1或IDO2或TDO的存在产生抗体-IDO1或抗体-IDO2或抗体-TDO生物标志物复合物；iii)施用检测抗体-生物标志物复合物的检测剂；iv)诊断与IDO1或IDO2或TDO中一种或多种相关的癌症，其中检测步骤iii)的检测剂；和v)向受试者给予化合物或其代谢物或药用盐或前药。
[0590] 在另一个方面，本发明提供治疗患者中与犬尿氨酸途径相关的疾病的方法，包括：需要测试提供分析结果以确定患者的IDO1和/或IDO2和/或TDO表达和/或活性增强，和如果患者的IDO1和/或IDO2和/或TDO表达和/或活性增强，则向患者给予治疗有效量的化合物。色氨酸、犬尿氨酸途径代谢物诸如犬尿氨酸和/或本发明化合物的代谢物的测量可使用本领域已知的方法在体内或体外完成，所述方法包括但不限于HPLC、LC/MS/MS、荧光、ELISA、RIA技术和使用置于皮肤或眼上或插入到皮肤或组织中的装置的连续监测传感器技术。IDO1和/或IDO2和/或TDO表达和/或活性的测量可使用本领域已知的体外测定诸如PCR、ELISA、酶测定作为非限制性实例且如本文所述来完成。
[0591] 因此，本发明还提供化合物和在无细胞系统或含有表达IDO1和/或IDO2和/或TDO的系统(诸如细胞培养系统、组织、活有机体诸如哺乳动物，或在血浆或血清中)测定IDO1和/或IDO2和/或TDO活性的方法，其包括使测试化合物与本发明化合物接触和测量色氨酸降解或分解代谢的抑制和与对照处理样品相比犬尿氨酸途径代谢物水平的减少。
[0592] 组合疗法
[0593] 一种或多种式(I)-(IV)化合物与一种或多种式(I)-(IV)化合物的代谢物和/或与一种或多种式(I)化合物的前药的组合在本发明的范围内。除了组合物和式(I)化合物或其代谢物或药用盐或前药中使用的上述组分之外，所述组合物可含有一种或多种用于治疗实体瘤和本文所述的其它疾病的药物或治疗剂。一种或多种其它药物或治疗剂的治疗有效量是本领域技术人员公知的。然而，主治医师或保健医生容易确定要递送的其它药物的量。
[0594] 治疗癌症的组合疗法
[0595] 在一个实施方案中，所述其它药物为化疗剂。化疗剂的实例包括"Physician's thDesk Reference",64 Edition,Thomson Reuters,2010中所述的那些，通过引用的方式将其并入本文。大部分这些化疗剂的安全和有效给药的方法是本领域技术人员已知的。
此外，它们给药在标准文献中有描述。例如，许多化疗剂的给药述于“Physician’s Desk Reference”(PDR,e.g.,2010edition,PDR Network,Montvale,N.J.)中，通过引用的方式将其公开内容整体并入本文。在一个方面，所述化疗剂为多柔比星、多西他赛或其衍生物、
5-FU和卡铂或其衍生物。
此外，它们给药在标准文献中有描述。例如，许多化疗剂的给药述于“Physician’s Desk Reference”(PDR,e.g.,2010edition,PDR Network,Montvale,N.J.)中，通过引用的方式将其公开内容整体并入本文。在一个方面，所述化疗剂为多柔比星、多西他赛或其衍生物、
5-FU和卡铂或其衍生物。
[0596] 可与本发明化合物组合给药的合适的抗肿瘤化疗剂可包括，例如但不限于，烷化剂(包括但不限于氮芥(nitrogen mustard)、乙烯亚胺衍生物、烷基磺酸盐、亚硝基脲和三TM嗪)、尿嘧啶氮芥、环磷酰胺(Cytoxan )、氮芥(chlormethine)，异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷(pipobroman)、三亚乙基蜜胺、四亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、替莫唑胺及其组合。
[0597] 其它化疗剂或抗癌剂包括，例如但不限于，抗代谢物(包括但不限于叶酸拮抗剂或抗叶酸剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和腺苷脱氨酶抑制剂)，诸如甲氨蝶呤(methotrexate)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)及它们的组合。合适的化疗剂或抗癌药还包括某些天然产物及其衍生物，例如但不限于，长春花生物碱、抗肿瘤抗生素、酶、淋巴因子和表鬼臼毒素(epipodohyllotoxin)，诸如长春碱(vinblastine)、多柔比星、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)、博来霉素(bleomycin)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星TM(idarubicin)、阿糖胞苷(ara-C)、紫杉醇(paclitaxel)(TAXOL )、(deoxycoformycin)、丝裂霉素-C(mitomycin-C)、光神霉素(mithramycin)、L-天冬酰胺、干扰素(具体为IFN-a)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)和它们的组合。
[0598] 所述化合物可用于增强对各种肿瘤治疗性疫苗接种的效果。当所述化合物组合使用时，则至少一种其它治疗剂可为疫苗。上述疫苗也可为肿瘤疫苗或黑素瘤疫苗。优选地，所述肿瘤疫苗包含遗传修饰的肿瘤细胞或遗传修饰的肿瘤细胞系。在这样的情况下，优选遗传修饰的肿瘤细胞或遗传修饰的细胞系已经转染以表达粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)。可选择地，所述疫苗可包含一种或多种免疫原性肽，优选睾丸癌抗原(CTAg)的免疫原性肽。此种CTAg及其免疫原性肽是本领域公知的。CTAg蛋白包括MAGE、BAGE、GAGE、SSX、NY-ESO-1、LAGE、SCP、CTSP、CT7、CT8、CT9、CT10、CT11、SAGE、OY-TES-1、NY-SAR-35和NY-BR-1。几种MAGe蛋白是已知的，包括MAGE-A1、A3、A4、A5、A6、A8、A10、A12、B1、B2、B2、B4、C1、C2和C3蛋白。存在几种SSX蛋白，包括SSX1和SSX2、SSX3和SSX5。疫苗可包括一种或多种DNA疫苗和重组病毒。此外，肿瘤疫苗可包含树突细胞。在另一个实施方案中，所述其它药物为癌症疫苗。在一个方面，所述癌症疫苗为基于树突细胞的疫苗。在一个方面，所述癌症疫苗为 疫苗(Dendreon Corp)。
[0599] 本发明还涵盖本发明化合物可与其它抗癌药诸如抗体疗法组合使用。在另一个实施方案中，其它药物为靶向抗体，即靶向特定肿瘤类型的抗体。术语“抗体”最广义地使用且明确涵盖完整的单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、由至少两种完整抗体形成的多特异性抗体(例如双特异性抗体)和抗体片段，只要它们展现出所期望的生物学活性。术语“抗体片段”包括完整抗体的一个部分，优选完整抗体的抗原结合区或可变区。抗体片段的实例包括Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；双抗体(diabodies)；线性抗体(Zapata et al.Protein Eng.8(10):1057-1062,1995)；单链抗体分子；和由抗体片段形成的多特异性抗体。所述靶向抗体可为单克隆或多克隆抗体且可选自Pasquetto et al.,"Targeted Drug Delivery Using Immunoconjugates:Principles and Applications",J.Immunother.,34(9):611-628(Nov-Dec 2011)中描述的那些，通过引用的方式将其并入本文。
[0600] 在一个方面，所述靶向抗体为一种或多种以下抗体：吉妥珠单抗(gemtuzumab)(Mylotarg)、阿 仑 珠 单 抗 (alemtuzmab)(CAMPATHTM)、利妥 昔 单 抗(rituximab)(Rituxin,Mabthera)、曲 妥 珠 单 抗(trastuzumab)(HerceptinTM)、尼 妥珠单抗(nimotuxumab)、西妥昔单抗(cetuximab)(Erbitux)、厄洛替尼(erlotinib)(TARCEVA.RTM.,Genentech/OSI Pharm.)、贝 伐 珠 单 抗 (bevacizumab)(AvastinTM)、帕 妥 珠 单 抗 (pertuzumab)(OMNITARG.RTM.,rhuMab 2C4,Genentech)、Brentuximab vedotin(AdcetrisTM)、易普利单抗(Ipilimumab)(MDX-101，也称为Yervoy)、奥法木单抗(Ofatumumab)(Arzerra)、帕尼珠单抗(Panitumumab)(Vectibix)和托西莫单抗(Tositumomab)(Bexxar)等。在另一个方面，所述靶向抗体为一种或多种以下抗体：阿仑珠单抗(alemtuzumab)、阿泊珠单抗(apolizumab)、阿塞珠单抗(aselizumab)、atlizumab、bapineuzumab、贝伐珠单抗(bevacizumab)、莫比伐珠单抗(bivatuzumab mertansine)、莫坎妥珠单抗(cantuzumab mertansine)、西利珠单抗(cedelizumab)、赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、cidfusituzumab、cidtuzumab、达克珠单抗(daclizumab)、依库珠单抗(eculizumab)、依法珠单抗(efalizumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、厄利珠单抗(erlizumab)、泛维珠单抗(felvizumab)、芳妥珠单抗(fontolizumab)、奥吉妥珠单抗(gemtuzumab ozogamicin)、奥英妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)、ipilimumab、拉贝珠单抗(labetuzumab)、林妥珠单抗(lintuzumab)、马妥珠单抗(matuzumab)、美泊珠单抗(mepolizumab)、莫维珠单抗(motavizumab)、motovizumab、那他珠单抗(natalizumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、nolovizumab、numavizumab、ocrelizumab、奥马珠单抗(omalizumab)、帕利珠单抗(palivizumab)、帕考珠单抗(pascolizumab)、pecfusituzumab、pectuzumab、培妥珠单抗(pertuzumab)、培克珠单抗(pexelizumab)、ralivizumab、雷珠单抗(ranibizumab)、瑞利珠单抗(reslivizumab)、瑞利珠单抗(reslizumab)、resyvizumab、罗维珠单抗(rovelizumab)、卢利珠单抗(ruplizumab)、西罗珠单抗(sibrotuzumab)、西利珠单抗(siplizumab)、索土珠单抗(sontuzumab)、他珠单抗(tacatuzumab tetraxetan)、tadocizumab、他利珠单抗(talizumab)、特非珠单抗(tefibazumab)、托珠单抗(tocilizumab)、托利珠单抗(toralizumab)、曲司珠单抗(trastuzumab)、tucotuzumab西莫白介素(tucotuzumab celmoleukin)、tucusituzumab、umavizumab、乌珠单抗(urtoxazumab)和维西珠单抗(visilizumab)。在另一个实施方案中，其它药物包括抗免疫共刺激分子(包括但不限于CTLA-4、4-1BB和PD-1)的抗体、抗细胞因子(包括但不限于IL-10、TGF-β测试等)和趋化因子受体(包括但不限于CCR2、CCR4等)的抗体等。在另一个实施方案中，其它药物为靶向药物。本文使用的术语“靶向药物”是指通过干扰肿瘤生长必需的特定“目标”分子阻断癌细胞生长的药物。参见上文引用的Pasquetto，通过引用的方式将其并入本文。在一个方面，所述靶向药物包括但不限于达沙替尼(dasatnib)、伊马替尼(imatinib)、尼洛替尼(nilotinib)、博舒替尼(bosutnib)、来他替尼(lestaurtinib)、鲁索替尼(ruxolitinib)、克唑替尼(crizotinib)、凡德他尼(vandetabib)、卡博替尼(cabozantinib)、阿伯西普(aflibercept)、adipotide、地尼白介素(denileukin diftitox)、依维莫司(everolimus)和西罗莫司(temosirolimus)等。
[0601] 其它化疗剂或抗癌剂包括，例如，细胞毒剂诸如铂配位剂(例如，顺铂和卡铂)、抗肿瘤酶抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物学响应修饰剂、生长抑制剂、造血生长因子、免疫调节剂、趋化因子、细胞因子(例如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)或FLT3配体)、细胞迁移阻断剂和血管生成抑制剂。血管生成抑制剂包括但不限于，血管抑素(angiostatin)、内皮抑素(endostatin)、血小板反应素(thrombospondin)、血小板因子4、软骨衍生抑制剂(CDI)、类视色素(retinoid)、白细胞介素-12、金属蛋白酶1、2和3(TIMP-1、TIMP-2和T1MP-3)的组织抑制剂和阻断血管生成信号级联的蛋白，诸如抗VEGF(血管内皮生长因子)和IFN-α的蛋白。
[0602] 可选择地，所述化合物可用于增强放射疗法的效果，其可被局部递送至肿瘤或全身。在另一个实施方案中，其它药物为激素疗法。本文使用的术语“激素治疗”是指一种通过用特定激素诸如雌激素、睾酮或二氢睾酮的活性干扰阻断癌细胞生长的药物。
[0603] 用于病毒感染的组合疗法
[0604] 当所述化合物组合使用时，则至少一种其它治疗剂可为抗病毒疫苗，例如但不限于，抗HIV-疫苗、抗HCV疫苗和抗HPV疫苗。意欲与本发明化合物组合使用的其它合适的抗病毒剂包括核苷和核苷酸逆转录酶抑制剂(NRTI)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTI)，蛋白酶抑制剂和其它抗病毒药物。NRTI的实例包括齐多夫定(zidovudine)(AZT)；地丹诺辛(didanosine)(ddI)；扎西他滨(zalcitabine)(ddC)；司他夫定(stavudine)(d4T)；拉米夫定(lamivudine)(3TC)；阿巴卡韦(abacavir)(1592U89)；阿德福韦二匹伏酯(adefovir diplovixil)[二(POM)-PMEA]；洛布卡韦(lobucavir)(BMS-180194)；BCH-10652；恩曲他 滨(emitricitabine)[(-)-FTC]；β-L-FD4( 也 称 为β-L-D4C 和 β-L-2’,3’- 二脱氧-5-氟-胞苷)；DAPD((-)0β-D-2,6-二氨基-嘌呤二氧杂环戊烷)；和洛德腺苷(lodenosine)(FddA)。典型的合适NNRTI包括奈韦拉平(nevirpine)(BI-RG-587)；地拉夫定(delaviradine)(BHAP,U-90152)；依法韦仑(efavirnz)(DP-266)；PNU-142721；AG-1549；MKC-442(1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮)；和(+)-calanolide A(NSC-675451)和B。典型的合适蛋白酶抑制剂包括沙奎那韦(saquinavir)(Ro31-8959)；利托那韦(ritonavir)(ABT-538)；茚地那韦(indinavir)(MK-639)；那非那韦(nelfnavir)(AG-1343)；安泼那韦(amprenavir)(141W94)；拉西那韦(lasinavir)(BMS-234475)；DMP-450；BMS-2322623；ABT-378；和AG-1549。其它抗病毒剂包括羟基脲、利巴韦林、IL-2、IL12、perntasufide和Yissum计划编号11607。在一个方面，所述病毒疫苗为抗HPV疫苗。
[0605] 用于细菌和寄生虫感染的组合疗法
[0606] 当所述化合物组合使用时，则至少一种其它治疗剂可为抗菌剂(包括但不限于，抗结核病疫苗或抗生素)或抗寄生虫治疗剂，诸如抗寄生虫疫苗，例如但不限于针对疟疾的疫苗。可本发明化合物组合使用的其它化合物包括但不限于氯喹、羟氯喹、奎宁铁(ferroquinine)、青蒿素(Artemisinin)、阿托伐酮(Atovaquone)/氯胍(Proguanil)、多西环素、甲氟喹(Mefloquine)(Lariam)和伯氨喹(Primaquine)。抗疟疾疫苗包括但不限于RTS,S疟疾疫苗、RTS,S-AS01延迟的分次第三剂量、异种初免-加强方案(heterologous prime-boost regimen)中的腺病毒(Ad35)运载的CS和RTS,S-AS01、ChAd63/MVAME-TRAP、TMChAd63/MVAME-TRAP+Matrix M 、PfSPZ、多表 位 DNAEP1300、PfCelTOS FMP012、CSVAC、ChAd63/MVA(CS；ME-TRAP)、ChAd63/MVA(CS；ME-TRAP、AMA-1)、RTS,S/AS01B+ChAd63 和MVA编码的ME-TRAP、EBA175RII、FMP2.1/AS01B(在ASO1B佐剂中表达的AMA-13D7大肠 杆 菌 )、GMZ2、pfAMA1-DiCo、P27A、MSP3[181-276] 区、SE36、ChAd63AMA1/MVAAMA1、NMRC-M3V-Ad-PfCA、NMRC-M3V-D/Ad-PfCA Prime/Boost、PfPEBS、ChAd63/AMAMVA/AMA1+铝胶/CPG7909、ChAd63MSP1/MVAMSP1、Pfs25-EPA、Pfs25VLP、ChAd63/MVAPvDBP。抗结核疫苗包括但不限于结核菌苗(bacilli Calmetter-Guérin)(BCG)、MVA85A、rBCG30、72F融合蛋白、ESAT6-Ag85b融合蛋白、肺结核(M.tuberculosis)抗原—抗原85A、85B和TB10.4。在一个方面，所述抗寄生虫疫苗为抗疟疾疫苗。
[0607] 组合疗法-其它疾病
[0608] 本发明还涉及要与一种或多种药物或疗法使用的本发明化合物用于治疗可使用本发明化合物治疗的任何疾病的用途。例如，所述化合物可与B细胞耗竭疗法、靶向药物、靶向抗体、疫苗或用于炎性疾病的其它治疗剂组合使用，所述炎性疾病包括但不限于关节炎、骨关节炎、类风湿关节炎、幼年型关节炎、脊柱关节炎、牛皮癣关节炎、强直性脊柱炎、纤维肌痛、痛风等。与本发明化合物组合使用的非限制性的实例包括类固醇(如泼尼松，地塞米松)、NSAIDS(如西乐葆(Celebrex)、美洛昔康，布洛芬)、靶向抗体或抗体片段诸如(Enbrel、Remicade/英利昔单抗、Humira、利妥昔单抗/抗CD20)、抗代谢物和抗叶酸剂(诸如甲氨蝶呤)等。本发明化合物也可与组合使用用于治疗自身免疫性疾病(例如阿尔茨海默病、亨廷顿病、帕金森病、多发性硬化症等)、心血管疾病(例如冠状动脉疾病、外周动脉疾病、动脉粥样硬化和缺血)和肾病(诸如终末期肾脏疾病)。本文意图是，在适当情况下，在说明书他处描述的组合疗法将用于组合或治疗本文列出的疾病。
[0609] 所述化合物或其代谢物或药用盐或前药和/或一种或多种其它药物或治疗剂可以单一组合物给药。然而，本发明并不局限于此。本发明化合物可依序、连续、交替或以保健医生或医师认为适当的任何方式给药。在其它实施方案中，所述化合物或其代谢物或药用盐或前药可以单独制剂形式给药，所述制剂选自其它本发明化合物或化疗剂、癌症疫苗、靶向药物、靶向抗体、激素疗法或其它所期望的药剂。
[0610] 可详细参考本发明的某些实施方案，其实例示于所附结构和化学式中。本发明意在公开的任何部分可与结合本公开的任何其它部分组合阅读，除非从文本另外显而易见。虽然用所列举的实施方案结合描述本发明，但应当理解的是，它们并非意在将本发明限制在那些实施方案。本发明明确旨在涵盖所有备选方案、修改和等同物，其可包括在由权利要求书所限定的本发明的范围内。在本说明书中各个地方，本发明化合物的取代基可以组形式披露。本发明明确意在包括每个和每一个此种组的成员的单独亚组合。
[0611] 还应当理解的是，本发明的某些特征，为了清楚而在单独实施例的上下文中描述，还可以单个实施例中的组合形式提供。本发明的相反的各种特征，为了简洁而在单个实施例的上下文中描述，还可单独或以任何合适的亚组合提供。
[0612] 此外，当权利要求书详述组合物，应当理解的是，本发明包括为了任何本文公开的目的使用所述组合物的方法，以及按照本文所公开的制备方法或本领域已知的其它方法制备组合物的方法，除非另有说明或除非这对于本领域普通技术人员是明显的，即会出现矛盾或不一致。此外，本发明涵盖按照任意本文所公开的制备化合物和组合物的方法所制备的组合物。
[0613] 实施例
[0614] 以下实施例仅是说明性的并且不旨在限制本发明。以下实施例只是意在提出实践本发明的方法。本领域技术人员将认识到，可容易地适用所述化学反应制备许多其它本发明化合物，并且用于制备本发明化合物的替代方法中的被认为在本发明的范围内。例如，根据本发明的非示例性化合物的合成可成功地通过本领域技术人员显而易见的修改实施，例如，通过适当保护干扰基团，通过利用本领域已知的比所描述的那些合适的其它试剂和/或对反应条件进行常规修改。可选择地，本文披露的或本领域中已知的其它反应将被识别为具有用于制备其它本发明化合物的适用性。
[0615]
[0616]
[0617]
[0618]
[0619] 通用合成程序
[0620] 程序A：
[0621]
[0622] 将化合物A1(1.0mmol当量)和 胺(R5-NH2)(1.0mmol当量)的混合物 在TFE(20mL):MeCN(20mL))的混合溶剂中组合并在25℃搅拌1小时。最后，将反应混合物浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到化合物E1。
[0623] 在25℃向E1(1.0mmol当量)在混合溶剂[DCM(10mL):TFE(10mL)]中的经搅拌溶液加入TMSCN(3.4mmol当量)。将反应混合物在25℃搅拌3h并浓缩。用正戊烷研磨粗物质，得到(I-C)，其为固体。可按照类似的程序由任选取代的胺(R5-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
[0624]
[0625] 将3-羟基吡啶-4-甲醛(3g,24.39mmol)和4-氟-3-氯苯胺(3.55g,24.39mmol)的混合物在TFE(20mL):MeCN(20mL)的混合溶剂中组合并在25℃搅拌1小时。最后，将反应混合物浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到6g的4-{[3-氯-4-氟苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇。
[0626]
[0627] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇(6g,24mmol)在混合溶剂[DCM(10mL):TFE(10mL)]中的经搅拌溶液加入TMSCN(10.5mL,84mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时并浓缩。用正戊烷研磨粗物质，得到4.9g N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为淡粉色固体。可按照类似的程序由任选取代的胺(R5-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
[0628] 程序B：
[0629]5
[0630] 将化合物A1(1.0mmol当量)和 胺(R-NH2)(1.0mmol当量)的混合物 在TFE(20mL):MeCN(20mL)的混合溶剂中组合并在25℃搅拌2h。通过TLC SiO2监测反应。最后，将反应混合物用DCM(10mL)稀释且加入TMSCN(3.4mmol)，将所得反应混合物搅拌12h并浓缩且用EtOAc/戊烷研磨，得到化合物(I-C)，其为固体。可按照类似的程序由任选取代的
5
胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
5
胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
[0631]
[0632] 将 3- 羟 基 吡 啶 -2- 甲 醛 (500mg,4.065mmol) 和 3- 氯 -4- 氟 苯 胺(591mg,4.065mmol)的混合物在TFE(10mL):MeCN(10mL)中组合并在25℃搅拌2小时。通过TLC SiO2监测反应。最后，将反应混合物用DCM稀释并加入TMSCN(2.6mL,21.78mmol)。3
将所得反应混合物搅拌12小时并浓缩且用EtOAc/戊烷研磨，得到450mg N-(3-氯-4-氟
5
苯基)-呋喃并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺。可按照类似的程序由任选取代的胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
将所得反应混合物搅拌12小时并浓缩且用EtOAc/戊烷研磨，得到450mg N-(3-氯-4-氟
5
苯基)-呋喃并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺。可按照类似的程序由任选取代的胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
[0633] 程序C：
[0634]
[0635] 将 化 合 物A1(1.0mmol 当 量)和 胺(R5-NH2)(1mmol当 量 )的 混 合 物 在TFE(20mL):MeCN(20mL))的溶剂混合物中组合并在25℃搅拌2h。通过TLC监测反应。反应后期，将反应混合物用DCM(10mL)稀释。随后，先后将TMSCN(3.4mmol当量)和TMSOTf(0.2mmol当量)加至所得反应混合物中。将反应混合物搅拌12h并减压浓缩得到粗物料，通过用EtOAc/戊烷研磨来纯化，形成化合物(I-C)。可按照类似的程序由任选取代的
5
胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
5
胺(R-NH2)和/或吡啶衍生物起始制备式(I)的目标分子，其中羟基和醛官能团彼此相邻。
[0636] 程序D：
[0637]
[0638] 按照方案16(European Journal of Medicinal Chemistry,2009,44,1893–1899)制备化合物QQQ1。向溴-酯化合物QQQ1(1.0mmol当量)溶于甲苯(5mL)中的经搅拌溶液5
中加入胺(R-NH2)(1.4mmol当量)、Cs2CO3(1.5mmol当量)、BINAP(0.2mmol当量)并脱气
20min。随后，将Pd2(dba)3(0.048mmol当量)加至反应混合物中。将反应混合物在100-105℃加热16h。将反应混合物经由硅藻土(Celite)床过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥并进一步减压浓缩，导致形成粗物料。所得物料通过使用EtOAc和己烷的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶色谱来纯化，导致形成化合物JJJ1，其为固体。
中加入胺(R-NH2)(1.4mmol当量)、Cs2CO3(1.5mmol当量)、BINAP(0.2mmol当量)并脱气
20min。随后，将Pd2(dba)3(0.048mmol当量)加至反应混合物中。将反应混合物在100-105℃加热16h。将反应混合物经由硅藻土(Celite)床过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥并进一步减压浓缩，导致形成粗物料。所得物料通过使用EtOAc和己烷的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶色谱来纯化，导致形成化合物JJJ1，其为固体。
[0639] 随后，在0℃-5℃将化合物JJJ1溶于THF(10mL)、TEA(2.5mmol当量)和DMAP(0.6mmol当量)中。10分钟后，将Boc酐(2.2mmol当量)滴至反应混合物中并在
50℃-60℃加热4h。反应完成后，将水加至反应混合物中。将反应混合物进一步用EtOAc萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩导致形成粗物料将其通过使用EtOAc和己烷的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，形成Boc保护的化合物。
50℃-60℃加热4h。反应完成后，将水加至反应混合物中。将反应混合物进一步用EtOAc萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩导致形成粗物料将其通过使用EtOAc和己烷的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，形成Boc保护的化合物。
[0640] 将Boc保护的化合物溶于THF(15mL):MeOH(9mL):H2O(3mL)的溶剂混合物中，在0℃-5℃向其中加入LiOH(2.0mmol当量)。将反应混合物在0℃-5℃持续搅拌16h。随后，将反应混合物减压浓缩。将所得残余物用水稀释并用5％柠檬酸溶液(pH＝4.0)酸化。将所得固体析出物过滤，用水洗涤并真空干燥，形成相应的羧酸。
[0641] 将所得羧酸溶于叔丁醇(tert-BuOH)(10mL)中。随后在室温将DPPA(1.2mmol当量)和DIPEA(1.1mmol当量)加至前述溶液中并将所得反应混合物在100℃加热2h。反应完成后，将混合物减压浓缩，形成残余物，将其用水稀释，用饱和NaHCO3溶液中和并用EtOAc萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩，导致形成粗物料。将物料通过使用MeOH和DCM的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶色谱来纯化，形成相应的氨基甲酸酯。
[0642] 将所得氨基甲酸酯溶于二噁烷中，在0℃-5℃向其中加入二噁烷-HCl溶液(4M；9.0mmol当量)。将所得混合物在25℃搅拌8h。反应完成后，将反应物料减压浓缩，导致形成残余物，将其用DCM稀释并用液NH3碱化。将DCM层以硫酸钠干燥，减压浓缩，形成粗物料，随后将其通过使用MeOH和DCM的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，导致形成化合物(I-JJ)，其为固体。
[0643] 程序E：
[0644]
[0645] 按照方案15制备化合物LLL1。将化合物LLL1(1.0mmol当量)、R2-取代的芳基/杂芳基硼酸/硼酸酯(1.05mmol当量)、Pd(PPh3)4、(0.05mmol当量)、碳酸钾(1.5mmol当量)在甲苯:水(1:1mL)化合物中的溶液在100℃回流过夜。反应完成后，将混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，经硅藻土床过滤，并用乙酸乙酯洗涤。将合并的滤液用水和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，形成化合物FFF1，其为固体。
[0646] 将化合物FFF1溶于氯仿:乙酸(1:1mL)的混合物中并冷却至0℃-5℃。向上述溶液中按份加入NBS(1.26mmol当量)。将反应混合物在室温搅拌48h。反应完成后，将物料用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭并用氯仿萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，形成残余物。将残余物通过使用己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，形成相应的3-溴-化合物。
[0647] 将所得3-溴-化合物溶于乙酸酐(12.7mmol当量)中，将溶液冷却至0℃。将发烟硝酸(6.8mmol当量)在乙酸(3.4mmol当量)中的混合物加至上述溶液中并将所得物料搅拌2h。反应完成后，将混合物用冰-冷水淬灭，用DCM萃取，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩并形成残余物。将所得残余物通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到相应的2-溴-3-硝基化合物，其为固体。
[0648] 随后，将2-溴-3-硝基化合物溶于DMF(10mL)，向其中加入胺(R5-NH2)(2.0mmol当量)。将反应混合物在120℃加热1h。反应完成后，将混合物倾入冰-冷水中，同时搅拌，导致析出固体。将固体析出物过滤并用水洗涤。然后将析出物真空干燥并用DCM和己烷的混合物重结晶，导致形成化合物III1。
[0649] 在氮气下在室温将活性10％Pd/C加至化合物III1在甲醇中的溶液中。将反应物料在氢气(气球)下搅拌3-4h。在氮气下将反应混合物经硅藻土床过滤并用甲醇洗涤。将滤液蒸馏，得到残余物，然后用DCM和己烷混合物将其结晶，形成化合物(I-HH)，其为固体。
[0650] 程序F：
[0651]
[0652] 在室温向化合物RRR1(1.0mmol当量)在THF(2mL)和甲醇(2mL)中的经搅拌溶液中加入锌粉(2.0mmol当量)和NH4Cl(1.0mmol当量)。将混合物搅拌3h。将混合物经硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用EtOAc稀释，然后用水和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗物料。将物料通过用MTBE和戊烷研磨来纯化，形成化合物(I-KK)，其为固体。
[0653] 程序G
[0654]
[0655] 在25℃向化合物YYY1(1.0mmol当量)在THF中的经搅拌溶液中先后加入吡啶(1.3mmol当量)和氯甲酸乙酯(1.1mmol当量)。将反应混合物在25℃搅拌3-10h并浓缩。将粗物料溶于EtOAc中，首先用水洗涤，接着用盐水洗涤。随后将物料以Na2SO4干燥并浓缩。使物料经受制备型TLC/研磨，形成具有痕量二氨基甲酸酯的固体单氨基甲酸酯化合物ZZZ1A。
[0656] 程序H：
[0657]
[0658] 在25℃向溶于THF中化合物YYY1(1.0mmol当量)的搅拌溶液中先后加入吡啶(10.0mmol当量)和氯甲酸乙酯(8.0mmol当量)。将反应混合物在25℃搅拌20h并浓缩。将粗物质溶于EtOAc，先后用水和盐水彻底洗涤，以Na2SO4干燥并浓缩。使粗物质经受制备型TLC/研磨，得到主要的所期望的二氨基甲酸酯化合物ZZZ1B以及单氨基甲酸酯，其为固体。
[0659] 程序I：
[0660]
[0661] 按照方案27制备化合物WWWWW1。简言之，在室温向化合物WWWWW1(1.0mmol当量)5
在DMF(5mL)中的经搅拌溶液中加入胺(R-NH2)(3.0mmol当量)(0.672g,4.62mmol)。将反应物料在100-120℃加热并继续搅拌12h。反应完成后，将反应物料用冰-水淬灭。固体析出，过滤并用水洗涤，得到湿固体，将其在热风炉下干燥，得到化合物XXXXX1，其为固体。
在DMF(5mL)中的经搅拌溶液中加入胺(R-NH2)(3.0mmol当量)(0.672g,4.62mmol)。将反应物料在100-120℃加热并继续搅拌12h。反应完成后，将反应物料用冰-水淬灭。固体析出，过滤并用水洗涤，得到湿固体，将其在热风炉下干燥，得到化合物XXXXX1，其为固体。
[0662] 将化合物XXXXX1溶于DMF(5mL)和H2O(1mL)的混合物中。在室温将R4-取代的芳基/杂芳基硼酸/硼酸酯(1.3mmol当量)、K3PO4(3.0mmol当量)和Pd(PPh3)4(0.09mmol当量)加至XXXXX1。将所得反应混合物在100-120℃搅拌2h。通过TLC监测反应的完成。反应完成后，将反应物料冷却至室温并经硅藻土床过滤。将滤液用乙酸乙酯萃取。将萃取物用盐水洗涤并以硫酸钠干燥除去水分。将萃取物进一步减压浓缩除去溶剂，得到粗物料，将其通过使用EtOAc/己烷的溶剂混合物作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，形成YYYYY1，其为固体。
[0663] 在氮气下在室温将10％Pd/C加至溶于甲醇(8mL)中的化合物YYYYY1(1.0mmol当量)的搅拌溶液中。然后用氢气气球替换氮气并在环境温度再继续搅拌3-4h。反应完成后，经Hyflo床过滤反应混合物并用甲醇洗涤。减压蒸发滤液，得到粗物料，将其通过使用戊烷来纯化，形成化合物(I-CCC)，其为固体。
[0664] 程序J:
[0665]5
[0666] 在室温在密封管中将胺(R-NH2)(1mmol当量)、TMSCN(5.2mmol当量)和TMSOTf(0.2mmol当量)加至化合物GGGGG1(1mmol当量)在DCM(6.0mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在40℃搅拌1h，接着加入10mmol NH4OAc缓冲液(3.0mL)。将反应混合物搅拌12h并经垂熔漏斗过滤。将过滤固体用MTBE、己烷、乙酸乙酯或它们的混合物洗涤除去痕量杂质，得到化合物(I-UU)，其为固体。
[0667] 程序K：
[0668]
[0669] 按照方案18制备化合物KKKK1。简言之，在0℃向KKKK1(1.0mmol当量)在二噁5
烷(1mL)中的经搅拌溶液中滴加R-取代的苯硫酚或苯酚在NaOH溶液(1.1mmol当量)、H2O(1mL)和二噁烷(10mL)的混合物中的溶液，将反应混合物搅拌1-2h。将反应物料用水稀释，用乙酸乙酯萃取并用盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩，得到残余物，将其通过使用合适的溶剂混合物的硅胶色谱来纯化，得到GGGG1，其为固体。
烷(1mL)中的经搅拌溶液中滴加R-取代的苯硫酚或苯酚在NaOH溶液(1.1mmol当量)、H2O(1mL)和二噁烷(10mL)的混合物中的溶液，将反应混合物搅拌1-2h。将反应物料用水稀释，用乙酸乙酯萃取并用盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩，得到残余物，将其通过使用合适的溶剂混合物的硅胶色谱来纯化，得到GGGG1，其为固体。
[0670] 在氮气下在室温将10％Pd/C加至溶于乙酸乙酯(8mL)的化合物GGGG1(1.0mmol当量)的搅拌溶液中。然后，用氢气气球替换氮气并在环境温度再继续搅拌10-12h。反应完成后，将反应混合物经Hyflo床过滤并用甲醇洗涤。将减压蒸发滤液，形成粗物料，将其通过使用溶剂混合物的硅胶柱色谱来纯化，形成胺化合物。将胺化合物溶于乙醚(5mL)中。向该溶液中加入HCl在乙醚中的饱和溶液(10mL)。将反应物料在室温搅拌，导致析出固体。
通过倾析分离析出物并将固体析出物真空干燥，形成化合物(I-B)。
通过倾析分离析出物并将固体析出物真空干燥，形成化合物(I-B)。
[0671] 实施例1
[0672] N3-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺(化合物1)的合成
[0673]
[0674] 在25℃将 3-羟基吡 啶-2-甲醛(500mg,4.065mmol)吸 收于 混合溶 剂(TFE(10mL):MeCN(10mL))中并向其中加入3-氯-4-氟苯胺(591mg,4.065mmol)，将所得混合物在该温度搅拌2小时。TLC表明无起始原料(SM)剩余，在25℃向该亚胺中加入TMSCN(2.6mL,21.138mmol)。在25℃搅拌反应混合物12小时后，将其浓缩并用EtOAc/戊烷研磨，得到450mg N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[3,2-b]吡啶-2,3-二胺(39％
产 率 )LCMS:278(M+H),HPLC:98.64 ％ ,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.07(d,1H,J ＝
4.8Hz),7.52(d,1H,J＝ 7.8Hz),7.12-7.07(m,2H,),6.87-6.85(m,1H),6.77(s,2H),6.56-
6.55(m,1H),6.51-6.49(m,1H)。
产 率 )LCMS:278(M+H),HPLC:98.64 ％ ,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.07(d,1H,J ＝
4.8Hz),7.52(d,1H,J＝ 7.8Hz),7.12-7.07(m,2H,),6.87-6.85(m,1H),6.77(s,2H),6.56-
6.55(m,1H),6.51-6.49(m,1H)。
[0675] 实施例2
[0676] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物2)的合成
[0677]
[0678] 步骤1：3-甲氧基甲氧基-吡啶
[0679]
[0680] 在0℃向3-羟基吡啶(60g,662.9mmol)在THF:DMF(120:280mL)中的经搅拌溶液按份加入t-BuOK(81.8gm,729.28mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(52mL,696.13mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(4 x 500mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥,减压浓缩，得到100g粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-甲氧基甲氧基-吡啶(54g)，其为淡棕色液体。LCMS:140(M+H)。
[0681] 步骤2：3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0682]
[0683] 在25℃向3-甲氧基甲氧基吡啶(2g,14.3885mmol)在无水THF(40mL)中的经搅拌溶液加入TMEDA(1.83g,15.82mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，滴加
n-BuLi(7.3mL,15.82mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度-78℃。在-78℃搅拌2小时后，向其中加入DMF(1.52g,20.86mmol)并在25℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(250mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到3g粗产物，将其使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂经硅胶垫(100-200目)，得到1.6g 3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GC-MS:167(m/z)。
n-BuLi(7.3mL,15.82mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度-78℃。在-78℃搅拌2小时后，向其中加入DMF(1.52g,20.86mmol)并在25℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(250mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到3g粗产物，将其使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂经硅胶垫(100-200目)，得到1.6g 3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GC-MS:167(m/z)。
[0684] 步骤3：3-羟基-吡啶-4-甲醛
[0685]
[0686] 向3-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛(11g,65.83mmol)在THF(50mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(100mL)并在60℃搅拌1小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(250mL x 5)萃取。将有机层以硫酸钠干燥,减压浓缩，得到15g粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和23％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯1
化，得到4g 3-羟基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GC-MS:123(m/z),H-NMR(DMSO-d6,40
0MHz):δ11.04(bs,1H),10.37(s,1H),8.46(s,1H),8.20(d,1H,J＝ 4.88Hz),7.46(d,1H,J＝4.88Hz)。GC-FID:99.51％。
化，得到4g 3-羟基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GC-MS:123(m/z),H-NMR(DMSO-d6,40
0MHz):δ11.04(bs,1H),10.37(s,1H),8.46(s,1H),8.20(d,1H,J＝ 4.88Hz),7.46(d,1H,J＝4.88Hz)。GC-FID:99.51％。
[0687] 步骤4：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇
[0688]
[0689] 在25 ℃ 将 3-羟 基 吡 啶 -4-甲 醛(3g,24.39mmol) 吸 收 于 混 合 溶 剂(TFE(20mL):MeCN(20mL))中并向其中加入4-氟-3-氯苯胺(3.55g,24.39mmol)。将所得混合物在该温度搅拌1小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到6g4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇)。LCMS:251.2(M+H)。
[0690] 步骤5：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0691]
[0692] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇(6g,24mmol)在混合溶剂[DCM(10mL):TFE(10mL)]中的经搅拌溶液中加入TMSCN(10.5mL,84mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用正戊烷研磨，得到4.9g(73％产率)N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为淡粉色固体。LCMS:278(M+H),HPLC:98.65％,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.41(s,1H),8.06(d,1H,J＝5.08Hz),7.14-7.10(m,2H),6.91(s,2H),6.86(d,1H,J＝5.08Hz),6.56-6.54(m,1H),6.48-6.45(m,1H)。
[0693] 实施例3
[0694] (2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇(化合物56)的合成
[0695]
[0696] 步骤1：4-{[(E)-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-5-羟基甲基-2-甲基-吡啶-3-醇
[0697]
[0698] 在25℃将 3-羟基-5- 羟基甲基-2- 甲基 -吡啶-4- 甲醛盐酸盐(250mg,1.2277mmol)吸收于混合溶剂(TFE(3mL):MeCN(3mL))，向其中加入4-氟-3-氯苯胺(178mg,1.2277mmol)，并将所得混合物在该温度搅拌3小时。将所得物料浓缩，溶于EtOAc中，用碳酸氢钠溶液洗涤，以Na2SO4干燥并浓缩，得到100mg 4-{[(E)-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-5-羟基甲基-2-甲基-吡啶-3-醇。LCMS:295(M+H)
[0699] 步骤2：(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇
[0700]
[0701] 在25℃向4-{[(E)-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-5-羟基甲基-2-甲基-吡啶-3-醇(100mg,0.3401mmol)在混合溶剂[DCM(2mL):TFE(2mL)]中的经搅拌溶液中加入TMSCN(0.149mL,1.19mmol)。将反应混合物在2℃搅拌4小时并浓缩。将粗物质先后用正戊烷和MTBE研磨，得到30mg(27％产率)[2-氨基-3-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲基-呋1
喃并[2,3-c]吡啶-4-基]-甲醇。LCMS:322(M+H),HPLC:98.82％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.94(s,1H),7.12(t,1H,J＝9Hz),6.89(s,1H),6.78(s,2H),6.54-6.53(m,1H),6.45-
6.43(m,1H),4.92(s,1H),4.45(s,2H),2.46(s,3H)。
喃并[2,3-c]吡啶-4-基]-甲醇。LCMS:322(M+H),HPLC:98.82％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.94(s,1H),7.12(t,1H,J＝9Hz),6.89(s,1H),6.78(s,2H),6.54-6.53(m,1H),6.45-
6.43(m,1H),4.92(s,1H),4.45(s,2H),2.46(s,3H)。
[0702] 实施例43
[0703] 4-氯-N-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物57)的合成
[0704]
[0705] 步骤1：3-氯-5-甲氧基甲氧基-吡啶
[0706]
[0707] 在0℃向3-氯-5-羟基吡啶(500mg,3.86mmol)在THF:DMF(1mL:2.3mL)中的经搅拌溶液中按份加入tBuOK(480mg,4.24mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(320mg,4.05mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌0.5小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(2 x 50mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-氯-5-甲氧基甲氧基-吡啶(200mg)，其为淡棕色液体。
[0708] 步骤2：3-氯-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0709]
[0710] 在-78℃向3-氯-5-甲氧基甲氧基吡啶(500mg,2.89mmol)在无水THF(5mL)中的经搅拌溶液中加入LDA(1M soln,4.05mL)。在-78℃搅拌30min后，向其中加入N-甲酰基-哌啶(650mg,5.78mmol)并在-78℃搅拌2小时。将反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗品，使其通过使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到250mg粗制的3-氯-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:201(m/z)。
[0711] 步骤3：3-氯-5-羟基-吡啶-4-甲醛
[0712]
[0713] 向3-氯-5-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛(450mg,2.2388mmol)在THF(4mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(4mL)并在60℃搅拌2小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机层以硫酸钠干燥,减压浓缩，得到粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和7％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到110mg 3-氯-5-羟基-吡啶-4-甲醛。LCMS:156(M-H)。
[0714] 步骤4：5-氯-4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇
[0715]
[0716] 在25℃将3-氯-5-羟基-吡啶-4-甲醛(110mg,0.69mmol)吸收于混合溶剂[TFE(1.5mL):MeCN(1.5mL)]并向其中4-氟-3-氯苯胺(100mg,0.69mmol)且将所得混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到100mg
5-氯-4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇。LCMS:285(M+H)。
5-氯-4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡啶-3-醇。LCMS:285(M+H)。
[0717] 步骤5：4-氯-N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0718]
[0719] 在25℃向5-氯-4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-吡 啶-3-醇(100mg,0.35mmol)在混合溶剂[DCM(1.5mL):TFE(1.5mL)]中的经搅拌溶液中加入
TMSCN(120mg,1.23mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用DCM/MeCN研磨，得到20mg(18％产率)4-氯-N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为灰白色固体。LCMS:312(M+H),HPLC:97.01％,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.37(s,
1H),8.03(s,1H),7.25(s,2H),7.11(t,1H,J＝9.04Hz),7.06(s,1H),6.58-6.57(m,1H),6.4
7-6.45(m,1H)。
TMSCN(120mg,1.23mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用DCM/MeCN研磨，得到20mg(18％产率)4-氯-N3-(3-氯-4-氟-苯基)-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为灰白色固体。LCMS:312(M+H),HPLC:97.01％,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.37(s,
1H),8.03(s,1H),7.25(s,2H),7.11(t,1H,J＝9.04Hz),7.06(s,1H),6.58-6.57(m,1H),6.4
7-6.45(m,1H)。
[0720] 实施例5
[0721] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物64)的合成
[0722]
[0723] 步骤1：5-溴-2-甲氧基-吡啶
[0724]
[0725] 在0℃向2-甲氧基吡啶(2g,18.33mmol)在MeCN(54mL)中的经搅拌溶液中加入NBS(3.9g,21.998mmol)。将反应混合物搅拌16小时。将反应物料经硅胶垫过滤并将滤液蒸发，得到粗产物。柱色谱纯化，得到2g 5-溴-2-甲氧基吡啶。
[0726] 步骤2：2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶[0727]
[0728] 将5- 溴-2- 甲 氧 基 吡 啶 (5g,26.59mmol)、二 ( 频 哪 醇 合) 二 硼 烷(10.13g,39.89mmol)和乙酸钾(10.44g,106mmol)吸收在无水甲苯(60mL)中并用氮气脱气20min。在氮气气氛下将Pd(dppf)Cl2.DCM(2.17g,2.66mmol)加至反应混合物中并将所得混合物回流2小时。通过TLC监测反应进展。反应完成后，将混合物冷却至25℃并经
试剂垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(200mL)稀释，先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗品，将其通过使用10％EtOAc/己烷作为洗脱剂的来硅胶(100-200目)柱色谱纯化，得到3.6g 2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶。
试剂垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(200mL)稀释，先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗品，将其通过使用10％EtOAc/己烷作为洗脱剂的来硅胶(100-200目)柱色谱纯化，得到3.6g 2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶。
[0729] 步骤3：6-甲氧基-吡啶-3-醇
[0730]
[0731] 在室温向四水合过硼酸钠(6.87g,44.68mmol)在水中的经搅拌悬浮液中加入2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶(3.5g,14.68mmol)在THF(70mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温搅拌2小时。将反应物料用乙酸乙酯(200mL)萃取，用盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗品，将其通过使用20％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到2.4g 6-甲氧基-吡啶-3-醇。
LCMS:126(M+H)。
LCMS:126(M+H)。
[0732] 步骤4：2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶
[0733]
[0734] 在0℃向6-甲氧基吡啶-3-醇(2.4g,19.20mmol)在THF:DMF(4mL:9mL)中的经搅拌溶液中加入叔丁醇钾(2.37g,21.12mmol)。将反应混合物在0℃搅拌15min并在0℃滴加甲氧基亚甲基氯(1.6g,20.16mmol)。将反应混合物在室温搅拌40min。将反应物料用乙酸乙酯(100mL)稀释，先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗品，将其通过使用10％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到2g 2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基吡啶。LCMS:170(M+H)。
[0735] 步骤5：2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0736]
[0737] 向2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基吡啶(1.7g,10.05mmol)在THF(17mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(1.65mL,11.05mmol)并将反应混合物冷却至-78℃。然后在-78℃滴加n-BuLi(2.17M,5.09mL)。然后将反应混合物在-78℃搅拌1小时。然后在-78℃滴加DMF(1.2mL,14.57mmol)。然后将反应混合物在-78℃搅拌1小时。通过TLC监测反应进展。将反应混合物冷却至室温并用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗物质。将粗物质通过用8％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化。将收集的级分蒸发，得到1.4g 2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛。GCMS:197(m/z)。
[0738] 步骤6：5-羟基-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0739]
[0740] 在室温向2-甲氧基-5-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛(1.5g,7.61mmol)在THF(3mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(15mL)并将反应混合物加热至70℃且保持2小时。将反应混合物在冰浴下冷却，用K2CO3中和并用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。将合并的有机层以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗产物，将其通过柱色谱来纯化，得到600mg 5-羟基-2-甲氧基-吡1
啶-4-甲醛。H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ10.33(s,1H),10.30(s,1H),8.02(s,1H),6.88(s,1H),3.79(s,3H)。
啶-4-甲醛。H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ10.33(s,1H),10.30(s,1H),8.02(s,1H),6.88(s,1H),3.79(s,3H)。
[0741] 步骤7：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-吡啶-3-醇
[0742]
[0743] 在25℃将5-羟基-2-甲氧基吡啶-4-甲醛(250mg,1.63mmol)吸收于混合溶剂(TFE(2.5mL):MeCN(2.5mL))中并向其中加入4-氟-3-氯苯胺(240mg,1.63mmol)且将所得混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到350mg4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-吡啶-3-醇。LCMS:281(M+H)。
[0744] 步骤8：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0745]
[0746] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-吡啶-3-醇(350mg,1.25mmol)在混合溶剂[DCM(3.5mL):TFE(3.5mL)]中的经搅拌溶液中加入
TMSCN(0.6mL,4.37mmol)。将反应混合物在25℃搅拌8小时，浓缩，并将粗物质用正戊烷研磨，得到70mg(18％产率)N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为灰白色固体。LCMS:308(M+H),HPLC:99.02％,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.97(s,
1H),7.12(t,1H,J＝9.1Hz),7.02(s,1H),6.93(s,2H),6.55-6.53(m,1H),6.47-6.44(m,1H),6.06(s,1H),3.75(s,3H)。
TMSCN(0.6mL,4.37mmol)。将反应混合物在25℃搅拌8小时，浓缩，并将粗物质用正戊烷研磨，得到70mg(18％产率)N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为灰白色固体。LCMS:308(M+H),HPLC:99.02％,1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.97(s,
1H),7.12(t,1H,J＝9.1Hz),7.02(s,1H),6.93(s,2H),6.55-6.53(m,1H),6.47-6.44(m,1H),6.06(s,1H),3.75(s,3H)。
[0747] 实施例6
[0748] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物66)的合成
[0749]
[0750] 步骤1：3-甲氧基甲氧基-2-甲基-吡啶
[0751]
[0752] 在0℃向3-羟基-2-甲基吡啶(1.5g,13.745mmol)在DCM(20mL)中的经搅拌溶液中加入DIPEA(2.8mL,16.494mmol)。搅拌反应混合物10min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(1.2mL,16.494mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌16小时。将反应混合物用水稀释并用DCM(2 x 50mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-甲氧基甲氧基-2-甲基-吡啶(1.1g)，其为淡黄色液体。LCMS:154(M+H)。
[0753] 步骤2：3-甲氧基甲氧基-2-甲基-吡啶-4-甲醛
[0754]
[0755] 在25℃向3-甲氧基甲氧基-2-甲基-吡啶(1.1g,7.1895mmol)在无水THF(20mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(1.1mL,7.9084mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，滴加n-BuLi(3.6mL,7.9084mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度-78℃。在-78℃搅拌2小时后，向其中加入DMF(0.80mL,10.4247mmol)并在-78℃搅拌1小时。然后将温度慢慢升至25℃.将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其经使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到250mg粗制的3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:181(m/z)。
[0756] 步骤3：3-羟基-2-甲基吡啶-4-甲醛
[0757]
[0758] 向3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛(250mg,1.3812mmol)在THF(0.5mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(2.5mL)并在60℃搅拌2小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(20mL x 2)萃取。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其使用硅胶(100-200目)和23％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到100mg3-羟基-2-甲基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GCMS:137(m/z)。
[0759] 步骤4：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-甲基-吡啶-3-醇
[0760]
[0761] 在25℃将3-羟基-2-甲基吡啶-4-甲醛(100mg,0.7299mmol)吸收于混合溶剂[TFE(1mL):MeCN(1mL)]中并向其中加入4-氟-3-氯苯胺(106mg,0.7299mmol)。将所得混合物在该温度搅拌3小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到150mg
4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-甲基-吡啶-3-醇。LCMS:262.8(M-H)。
4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-甲基-吡啶-3-醇。LCMS:262.8(M-H)。
[0762] 步骤5：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0763]
[0764] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-甲基-吡啶-3-醇(150mg,0.5681mmol)在混合溶剂[DCM(2mL):TFE(2mL)]中的经搅拌溶液中加入
TMSCN(0.25mL,1.989mmol)。将反应混合物在25℃搅拌5小时，浓缩，并将粗物质用MeCN/
3
戊烷研磨，得到40mg(24％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为淡红棕色固体。LCMS:292(M+H),HPLC:99.06％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.93(d,1H,J＝5.1Hz),7.13-7.08(m,2H),6.82(s,2H),6.71(d,1H,J＝5.1Hz),6.54-6.52(m,1H),6.48-6.45(m,1H),2.49(s,3H)。
TMSCN(0.25mL,1.989mmol)。将反应混合物在25℃搅拌5小时，浓缩，并将粗物质用MeCN/
3
戊烷研磨，得到40mg(24％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为淡红棕色固体。LCMS:292(M+H),HPLC:99.06％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.93(d,1H,J＝5.1Hz),7.13-7.08(m,2H),6.82(s,2H),6.71(d,1H,J＝5.1Hz),6.54-6.52(m,1H),6.48-6.45(m,1H),2.49(s,3H)。
[0765] 实施例73
[0766] N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物67)的合成
[0767]
[0768] 步骤1：3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶[0769]
[0770] 将3- 溴-5- 甲 氧 基 吡 啶 (2g,10.63mmol)、二 ( 频 哪 醇 合) 二 硼 烷(4.05g,15.98mmol)和乙酸钾(4.78g,42.55mmol)吸收于无水甲苯(25mL)中并用氮气脱气20min。在氮气气氛下将Pd(dppf)Cl2.DCM(0.87g,0.10mmol)加至反应混合物中并将所得混合物回流2小时。通过TLC监测反应进展。反应完成后，将反应混合物冷却至25℃并经 试剂垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(100mL)稀释，先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗品，将其使用10％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到2.6g 3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶。LCMS:236(M+H)。
[0771] 步骤2：5-甲氧基-吡啶-3-醇
[0772]
[0773] 在室温向四水合过硼酸钠(7.86g,51.06mmol)在水中的经搅拌悬浮液中加入3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶(4g,17.02mmol)在THF/H2O(80mL:80mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温搅拌2小时。将反应物料用乙酸乙酯(200mL)萃取，用盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗产物，将其通过使用
20％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到1.5g 5-甲氧基吡啶-3-醇。LCMS:126(M+H)。
20％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到1.5g 5-甲氧基吡啶-3-醇。LCMS:126(M+H)。
[0774] 步骤3：3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶
[0775]
[0776] 在0℃向5-甲氧基吡啶-3-醇(1.9g,15.20mmol)在THF:DMF(4mL:9mL)中的经搅拌溶液中加入叔丁醇钾(1.86g,16.72mmol)。将反应混合物在0℃搅拌15min并滴加甲氧基亚甲基氯(1.28g,15.96mmol)。将反应混合物在室温搅拌40min。将反应物料用乙酸乙酯(100mL)稀释，先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗产物，将其通过使用10％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到1.5g 3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基吡啶。LCMS:170(M+H)。
[0777] 步骤4：3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0778]
[0779] 向3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶(1.5g,8.86mmol)in THF(15mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(1.45mL,9.75mmol)并将反应混合物冷却至-78℃。然后在-78℃滴加n-BuLi(2.17M,4.49mL)并将反应混合物在该温度搅拌1小时。然后在-78℃加入DMF(1mL,12.85mmol)并将所得反应混合物在相同温度搅拌1小时。将反应物料用饱和NH4Cl溶液淬灭，用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将合并的有机层以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗产物，将其通过用8％EtOAc/己烷洗脱的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到0.7g 3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛。GCMS:197(m/z)。
[0780] 步骤5：3-羟基-5-甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0781]
[0782] 在室温向3-甲氧基-5-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛(0.7g,3.55mmol)在THF(3mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(7mL)并将反应混合物加热至70℃且保持2小时。将反应混合物在冰浴下冷却，用K2CO3中和并用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。将合并的有机层以Na2SO4干燥并减压浓缩得到粗产物，将其通过柱色谱来纯化，得到300mg 3-羟基-5-甲氧基吡啶-4-甲醛。GCMS:153(m/z)。
[0783] 步骤6：4-{[-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-4-甲氧基-吡啶-3-醇
[0784]
[0785] 在25℃将3-羟基-5-甲氧基吡啶-4-甲醛(100mg,0.65mmol)吸收于混合溶剂[TFE(1.0mL):MeCN(1.0mL)]中并加入4-氟-3-氯苯胺(95mg,0.65mmol)。将所得
混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到150mg
4-{[-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-4-甲氧基-吡啶-3-醇。LCMS:281(M+H)。
混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到150mg
4-{[-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-4-甲氧基-吡啶-3-醇。LCMS:281(M+H)。
[0786] 步骤6：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0787]
[0788] 在25℃向4-{[-3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-4-甲氧基-吡啶-3-醇(150mg,0.53mmol)在混合溶剂[DCM(1.5mL):TFE(1.5mL)]中的经搅拌溶液中加入
TMSCN(0.25mL,1.87mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用DCM/
3
MeCN研磨，得到60mg(37％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为淡黄色固体。LCMS:308(M+H),HPLC:98.47％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.18(s,1H),7.86(s,1H),7.09(t,1H,J＝9.1Hz),6.99(s,1H),6.68(s,2H),6.55-6.52(m,1H),6.47-6.44(m,1H),3.68(s,3H)。
TMSCN(0.25mL,1.87mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用DCM/
3
MeCN研磨，得到60mg(37％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-甲氧基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为淡黄色固体。LCMS:308(M+H),HPLC:98.47％,H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ8.18(s,1H),7.86(s,1H),7.09(t,1H,J＝9.1Hz),6.99(s,1H),6.68(s,2H),6.55-6.52(m,1H),6.47-6.44(m,1H),3.68(s,3H)。
[0789] 实施例8
[0790] N3-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物72)的合成
[0791]
[0792] 步骤1：2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶-5-基)甲醇盐酸盐
[0793]
[0794] 将干燥的HCl鼓入吡哆醇盐酸盐(4.0g)在无水丙酮(100mL)中的经冷却的悬浮液中且保持1.5小时。将该溶液再搅拌1小时，然后保持在冷条件过夜。在该阶段出现白色晶体，将其分出并在EtOH中重结晶，得到2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶-5-基)甲醇盐酸盐(3.70g,产率90.9％.)，其为白色固体。HRMS[M+H]:210.113；1
H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.90(s,1H),5.13(t,J＝5.4Hz,1H),4.86(s,2H),4.40(d,J＝
5.4Hz,2H),2.26(s,3H),1.47(s,6H)。
H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.90(s,1H),5.13(t,J＝5.4Hz,1H),4.86(s,2H),4.40(d,J＝
5.4Hz,2H),2.26(s,3H),1.47(s,6H)。
[0795] 步骤2：5-(氯甲基)-2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶盐酸盐
[0796]
[0797] 在0℃将亚硫酰氯(9mL)加至(3.7g,17.683mmol)2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶-5-基)甲醇盐酸盐在无水乙醚(ether)(250mL)中的经搅拌悬浮液中。回流5小时后，将析出物过滤，用乙醚洗涤并真空干燥。将粗产物用沸腾的无水乙醇重结晶，得到5-(氯甲基)-2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶盐酸盐1
(2.5g,产率80％)，其为白色固体。HRMS[M+H]228.079；H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.97(s,
1H),4.92(s,2H),4.45(s,2H),2.39(s,3H),1.54(s,6H)。
(2.5g,产率80％)，其为白色固体。HRMS[M+H]228.079；H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.97(s,
1H),4.92(s,2H),4.45(s,2H),2.39(s,3H),1.54(s,6H)。
[0798] 步骤3：4-(羟基甲基)-2,5-二甲基吡啶-3-醇
[0799]
[0800] 在Pd/C(100mg)和无水NaOAc(366mg,4.403mmol)存在下，在室温在氢 气下，将5-(氯甲基)-2,2-二甲基-4H-[1,3]二氧杂环己烯并[4,5-c]吡啶盐酸盐
(1.0g,4.403mmol)在MeOH(10mL)中的溶液氢化2小时。反应完成后，将混合物经
试剂床滤出并将床用甲醇洗涤。收集滤液并减压浓缩，得到粗物料，将其用1N HCl(20mL)稀释并在室温保持过夜。滤出少许析出物后，将溶液在80℃加热15min并减压浓缩直至干燥。将残余物用乙醇研磨并通过向乙醇萃取物中加入乙醚使产物结晶。将固体滤出并通过饱和碳酸氢钠溶液碱化。将碱性含水物料用乙酸乙酯萃取，用水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用乙酸乙酯的硅胶柱色谱来纯化，得到4-(羟基甲基)-2,5-二甲基吡啶-3-醇(470mg,产率69.77％)，其为白色固体。HRMS[M+H]154.086；
1
H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.10(s,1H),7.68(s,1H),5.65(s,2H),2.26(s,3H),2.12(s,
3H)。
(1.0g,4.403mmol)在MeOH(10mL)中的溶液氢化2小时。反应完成后，将混合物经
试剂床滤出并将床用甲醇洗涤。收集滤液并减压浓缩，得到粗物料，将其用1N HCl(20mL)稀释并在室温保持过夜。滤出少许析出物后，将溶液在80℃加热15min并减压浓缩直至干燥。将残余物用乙醇研磨并通过向乙醇萃取物中加入乙醚使产物结晶。将固体滤出并通过饱和碳酸氢钠溶液碱化。将碱性含水物料用乙酸乙酯萃取，用水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用乙酸乙酯的硅胶柱色谱来纯化，得到4-(羟基甲基)-2,5-二甲基吡啶-3-醇(470mg,产率69.77％)，其为白色固体。HRMS[M+H]154.086；
1
H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.10(s,1H),7.68(s,1H),5.65(s,2H),2.26(s,3H),2.12(s,
3H)。
[0801] 步骤4：3-羟基-2,5-二甲基吡啶-4-甲醛
[0802]
[0803] 在室温在氮气下向4-(羟基甲基)-2,5-二甲基吡啶-3-醇(470mg,3.070mmol)在氯仿(20mL)中的经搅拌溶液中加入MnO2(5.338g,61.406mmol)。将反应混合物在室温在氮气下搅拌20小时。将催化剂经 试剂床滤出并用氯仿洗涤。真空浓缩滤液。将粗产物通过使用50％乙酸乙酯和己烷混合物的硅胶柱色谱来纯化，得到3-羟基-2,5-二甲基吡啶-4-甲醛(200mg,44.1％)，其为白色固体，并将其直接用于下一步。
[0804] 步骤5：N3-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0805]
[0806] 在室温在氮气下向3-羟基-2,5-二甲基吡啶-4-甲醛(200mg,1.323mmol)在MeOH(2mL)中的经搅拌溶液中加入3-氯-4-氟苯胺(193mg,1.323mmol)和两滴乙酸。将所得反应混合物在50℃搅拌15min。通过TLC监测反应的进展。消耗醛后，在50℃滴加TMSCN(263mg,2.646mmol)并将反应物料再搅拌20min。将反应物料冷却至室温并真空蒸馏除去溶剂。将粗物料用乙酸乙酯稀释，经棉花塞过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其用乙3
酸乙酯和己烷混合物重结晶，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺(80mg,产率25％)，其为灰白色固体。HRMS[M+H]306.080；H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.67(s,1H),7.08(t,J＝9.0Hz,1H),7.03(s,1H),6.73(bs,2H),6.50-6.48(m,1H),6.42-6.40(m,1H),2.41(s,3H),2.06(s,3H)。
酸乙酯和己烷混合物重结晶，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-二甲基呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺(80mg,产率25％)，其为灰白色固体。HRMS[M+H]306.080；H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.67(s,1H),7.08(t,J＝9.0Hz,1H),7.03(s,1H),6.73(bs,2H),6.50-6.48(m,1H),6.42-6.40(m,1H),2.41(s,3H),2.06(s,3H)。
[0807] 实施例9
[0808] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物73)的合成
[0809]
[0810] 步骤1：2-氯-3-甲氧基甲氧基-吡啶
[0811]
[0812] 在0℃向2-氯-3-羟基-吡啶(5g,38.59mmol)在THF:DMF(10:25mL)中的经搅拌溶液中按份加入t-BuOK(4.763g,42.45mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(3.062mL,40.5mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3 x 150mL)萃取。将合并的有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶(5.4g)，其为淡棕色液体。LCMS:174(M+H)。
[0813] 步骤2：2-乙基-3-甲氧基甲氧基-吡啶
[0814]
[0815] 向2-氯-3-甲氧基甲氧基-吡啶(3g,17.341mmol)在DMF(10mL)中的经搅拌溶液中加入硼酸三乙酯(1.78g,18.208mmol)和K2CO3(3.58g,26.011mmol)，将反应物料用氩气脱气，然后加入Pd(PPh3)4(0.5g,0.4336mmol)并在80℃加热3小时。将反应物料经试剂过滤，将滤液用水稀释并使用1N HCl酸化至pH 4，并将所得反应混合物搅拌15min。向该悬浮液中加入饱和NaHCO3溶液使pH为9。将溶液用MTBE(200mL x 2)萃取。将合并的有机部分以Na2SO4干燥，蒸发至干，并将粗产物通过柱色谱来纯化，得到1.3g 2-乙基-3-甲氧基甲氧基-吡啶。LCMS:168(M+H)。
[0816] 步骤3：2-乙基-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0817]
[0818] 在25℃向2-乙基-3-甲氧基甲氧基吡啶(1g,5.988mmol)在无水THF(10mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(1mL,6.58mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，滴加n-BuLi(2.17M在己烷中的溶液；3.03mL,6.58mmol)，保持温度在-78℃。在-78℃搅拌2小时后，加入DMF(0.67mL,8.68mmol)，将溶液在-78℃搅拌1小时并将温度慢慢升至25℃。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，使其通过使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到900mg粗制的2-乙基-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛。GCMS:195(m/z)。
[0819] 步骤4：2-乙基-3-羟基-吡啶-4-甲醛
[0820]
[0821] 向2-乙基-3-甲氧基甲氧基吡啶-4-甲醛(900mg,4.615mmol)在THF(3mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(5mL)并在60℃搅拌2小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将通过使用硅胶(100-200目)和5％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到300mg 2-乙基-3-羟基吡啶-4-甲醛。GCMS:151(m/z)。
[0822] 步骤5：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-乙基-吡啶-3-醇
[0823]
[0824] 在25℃将2-乙基-3-羟基-吡啶-4-甲醛(200mg,1.3245mmol)吸收于混合溶剂[TFE(2mL):MeCN(2mL)]并加入4-氟-3-氯苯胺(192mg,1.3245mmol)。将所得混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩，得到350mg of 4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-乙基-吡啶-3-醇(粗品)。LCMS:279(M+H)。
[0825] 步骤6：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0826]
[0827] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-乙基-吡啶-3-醇(粗)(300mg,1.0701mmol)在混合溶剂[DCM(2mL):TFE(2mL)]中的经搅拌溶液中加入TMSCN(0.5mL,3.777mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时，浓缩，并将粗物质通过柱色
3
谱来纯化，得到80mg(24％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为浅棕色固体。HPLC:95.02％,LCMS:306(M+H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.97(d,1H,J＝5.1Hz),7.14-7.08(m,2H),6.81(s,2H),6.72(d,1H,J＝5.1Hz),6.55-6.53(m,1H),6.48-6.44(m,1H),2.88-2.83(q,2H),1.28(t,3H,J＝7.6Hz)。
3
谱来纯化，得到80mg(24％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-乙基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为浅棕色固体。HPLC:95.02％,LCMS:306(M+H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.97(d,1H,J＝5.1Hz),7.14-7.08(m,2H),6.81(s,2H),6.72(d,1H,J＝5.1Hz),6.55-6.53(m,1H),6.48-6.44(m,1H),2.88-2.83(q,2H),1.28(t,3H,J＝7.6Hz)。
[0828] 实施例10
[0829] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物77)的合成
[0830]
[0831] 步骤1：2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶
[0832]
[0833] 在0℃向2-氯-3-羟基吡啶(5g,38.59mmol)在THF:DMF(10:25mL)中的经搅拌溶液中按份加入t-BuOK(4.763g,42.45mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(3.062mL,40.5mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3 x 150mL)萃取。将合并的有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶(5.4g)，其为淡棕色液体。LCMS:174(M+H)。
[0834] 步骤2：3-甲氧基甲氧基-2-丙基-吡啶
[0835]
[0836] 向2-氯-3-甲氧基甲氧基吡啶(500mg,2.89mmol)在Et2O(5mL)中的经搅拌溶液中加入Ni(dppp)Cl2(15mg,0.028mmol)。将反应混合物冷却至0℃，加入丙基氯化镁(2M,4.3mL,8.6mmol)并将所得混合物回流3小时。使反应物料回至室温(25℃)，用2N HCl酸化，并用MTBE洗涤。将含水部分用固体K2CO3碱化，用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机部分先后用水和盐水洗涤，以Na2SO4干燥，并蒸发至干，得到粗制的3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶(430mg)。LCMS:182(M+H)。
[0837] 步骤3：3-甲氧基甲氧基-2-丙基-吡啶-4-甲醛
[0838]
[0839] 在25℃向3-甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶(650mg,3.591mmol)在无水THF(6mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(0.6mL,3.95mmol)。将反应混合物冷却至-78℃并在-78℃滴加n-BuLi(2.17M在己烷中的溶液；1.82mL,3.95mmol)，保持温度。在-78℃搅拌2小时后，加入DMF(0.4mL,5.207mmol)，将反应混合物在-78℃搅拌1小时，并将温度慢慢升至25℃。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过柱色谱来纯化，得到480mg
3-甲氧基甲氧基-2-丙基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:209(m/z)。
3-甲氧基甲氧基-2-丙基-吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:209(m/z)。
[0840] 步骤4：3-羟基-2-丙基-吡啶-4-甲醛
[0841]
[0842] 向甲氧基甲氧基-2-丙基吡啶-4-甲醛(450mg,2.153mmol)在THF(5mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(6mL)并将混合物在60℃搅拌2小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(25mL x 2)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产物，将其通过使用硅胶(100-200目)和EtOAc/己烷作为洗脱1
剂的柱色谱来纯化，得到285mg 3-羟基-2-丙基-吡啶-4-甲醛。H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ10.34(bs,1H),10.24(s,1H),8.17(d,1H),4.43(d,1H),2.80(t,2H),1.69(m,2H),0.9
2(t,3H)。
剂的柱色谱来纯化，得到285mg 3-羟基-2-丙基-吡啶-4-甲醛。H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ10.34(bs,1H),10.24(s,1H),8.17(d,1H),4.43(d,1H),2.80(t,2H),1.69(m,2H),0.9
2(t,3H)。
[0843] 步骤5：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-丙基-吡啶-3-醇
[0844]
[0845] 将3-羟基-2-丙 基吡 啶-4-甲醛(274mg,1.66mmol)吸 收于混 合溶 剂[TFE(2mL):MeCN(2mL)]中，在25℃加入4-氟-3-氯苯胺(265mg,1.82mmol)，并将所得混合物在该温度搅拌2小时。将所得物料浓缩得到520mg 4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-丙基吡啶-3-醇。LCMS:292.8(M+H)。
3
3
[0846] 步骤6：N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0847]
[0848] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2-丙基-吡啶-3-醇(492mg,1.684mmol)在混合 溶剂[DCM(4mL):TFE(4mL)]中 的经搅 拌溶 液中加 入TMSCN(1.09mL,8.76mmol)。将反应混合物在25℃搅拌4小时，浓缩，并将粗物质用MTBE/
3
戊烷研磨，得到120mg(22％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:96.27％,LCMS:320(M+H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):
δ7.96(d,1H,J ＝ 51Hz),7.14-7.07(m,2H),6.81(s,2H),6.71(d,1H,J ＝ 5.1Hz),6.55-6.53(m,1H),6.47-6.44(m,1H),2.81(t,2H,J ＝ 7.4Hz),1.79-1.71(m,2H),0.94(t,3H,J ＝
7.4Hz)。
3
戊烷研磨，得到120mg(22％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-丙基-呋喃并[2,3-c]吡
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啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:96.27％,LCMS:320(M+H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):
δ7.96(d,1H,J ＝ 51Hz),7.14-7.07(m,2H),6.81(s,2H),6.71(d,1H,J ＝ 5.1Hz),6.55-6.53(m,1H),6.47-6.44(m,1H),2.81(t,2H,J ＝ 7.4Hz),1.79-1.71(m,2H),0.94(t,3H,J ＝
7.4Hz)。
[0849] 实施例11
[0850] N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物85)的合成
[0851]
[0852] 步骤1：6-碘-2-甲基-吡啶-3-醇
[0853]
[0854] 向2-甲基吡啶-3-醇(500mg,4.5816mmol)在水(10mL)中的经搅拌溶液中加入K2CO3(2.2g,16.0359mmol)并将混合物在室温搅拌10min。将反应物料在冰浴中冷却，滴加碘(1.4g,5.4980mmol,溶于甲醇(3mL)中)并将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应物料在冰浴下冷却，加入硫代硫酸钠并将混合物搅拌5min。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(4 x 50mL)萃取。将合并的有机部分以无水硫酸钠干燥，并减压浓缩，得到400mg粗产物。使用DCM:戊烷(1:1)析出/研磨，得到6-碘-2-甲基吡啶-3-醇200mg，其为白色固体。LCMS:234(M-H)。
[0855] 步骤2：6-碘-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶
[0856]
[0857] 在氮气气氛下在-78℃向6-碘-2-甲基吡啶-3-醇(200mg,0.851mmol)在DCM(5mL)中的经搅拌溶液中先后滴加甲氧基甲基氯(0.077mL,1.0212mmol)和
DIPEA(0.218mL,1.2765mmol)并将混合物搅拌3小时。将反应混合物用水稀释并用DCM(4 x 20mL)萃取。将合并的有机部分以无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到250mg粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到6-碘-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶(200mg)，其为无色液体。GCMS:279(m/z)。
DIPEA(0.218mL,1.2765mmol)并将混合物搅拌3小时。将反应混合物用水稀释并用DCM(4 x 20mL)萃取。将合并的有机部分以无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到250mg粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到6-碘-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶(200mg)，其为无色液体。GCMS:279(m/z)。
[0858] 步骤3：2-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛
[0859]
[0860] 在0℃将Na金属(86mg,3.5842mmol)按份加至甲醇(5mL)中并将溶液搅拌30min。将6-碘-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶(200mg,0.7168mmol)在甲醇(5mL)中的溶液加至反应混合物中，接着加入CuBr(20.5mg,0.1433mmol)，并将所得混合物回流16小时。将反应混合物冷却至室温，经 试剂床过滤并将滤液浓缩。将残余物用EtOAc(20mL x 5)萃取，先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到200mg粗品，将其通过柱色谱来纯化，得到80mg 6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶，其为无色液体。GCMS:183(m/z)。
[0861] 步骤4：6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛
[0862]
[0863] 在25℃向6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶(1g,5.4644mmol)在无水THF(20mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(0.9mL,6.0109mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，并滴加n-BuLi(2.7mL,6.0109mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度在-78℃。
在-78℃搅拌2小时后，加入DMF(0.6mL,7.9233mmol)并将混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤,以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到1.5g粗产物，使其通过使用5％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到1g粗制的6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:211(m/z)。
在-78℃搅拌2小时后，加入DMF(0.6mL,7.9233mmol)并将混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤,以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到1.5g粗产物，使其通过使用5％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到1g粗制的6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。GCMS:211(m/z)。
[0864] 步骤5：3-羟基-6-甲氧基-2-甲基-吡啶-4-甲醛
[0865]
[0866] 向6-甲氧基-3-甲氧基甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛(1g,4.7393mmol)在THF(3mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(10mL)并将混合物在60℃搅拌1小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(50mL x 5)萃取。
将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到700mg粗产物，将其通过使用硅胶(100-200目)和
5％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到350mg 3-羟基-6-甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GCMS:167(m/z)。
将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到700mg粗产物，将其通过使用硅胶(100-200目)和
5％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到350mg 3-羟基-6-甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GCMS:167(m/z)。
[0867] 步骤6：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-2-甲基-吡啶-3-醇[0868]
[0869] 在25℃向3-羟基-6-甲氧基-2-甲基吡啶-4-甲醛(150mg,0.8982mmol)吸收于混合溶剂[TFE(2mL):MeCN(2mL)]中的经搅拌溶液加入4-氟-3-氯苯胺
(130mg,0.8982mmol)，并将所得混合物在该温度搅拌1小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到200mg 4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-2-甲基-吡啶-3-醇，其为黄色固体。LCMS:293(M-H)。
(130mg,0.8982mmol)，并将所得混合物在该温度搅拌1小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到200mg 4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-2-甲基-吡啶-3-醇，其为黄色固体。LCMS:293(M-H)。
[0870] 步骤7：N3-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-7-甲基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0871]
[0872] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-6-甲氧基-2-甲基吡啶-3-醇(200mg,0.6802mmol)在混合溶剂[DCM(2mL):TFE(2mL)]中的经搅拌溶液中加入TMSCN(0.297mL,2.3809mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，并将粗物质用正戊
3
烷研磨，得到80mg(36％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-7-甲基-呋喃并[2,3-c]
1
吡啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:98.54％,LCMS:320(M-H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.11(t,1H,J＝9.04Hz),7.01(bs,1H),6.84(bs,2H),6.54-6.51(m,1H),6.47-6.43(m,1H),5.92(s,1H),3.73(s,3H),2.40(s,3H)。
3
烷研磨，得到80mg(36％产率)N-(3-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基-7-甲基-呋喃并[2,3-c]
1
吡啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:98.54％,LCMS:320(M-H),H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.11(t,1H,J＝9.04Hz),7.01(bs,1H),6.84(bs,2H),6.54-6.51(m,1H),6.47-6.43(m,1H),5.92(s,1H),3.73(s,3H),2.40(s,3H)。
[0873] 实施例123
[0874] N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(吡啶-3-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物94)的合成
[0875]
[0876] 步骤1：呋喃-2-基吡啶-3-基甲酮
[0877]
[0878] 在-78℃向呋喃(5g,5.37mL,73.44mmol)在无水THF(80mL)中的经搅拌溶液中滴加n-BuLi(37.2mL,80.79mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度。在-78℃搅拌20min后，滴加3-氰基吡啶(7.64g,73.44mmol)在THF(20mL)中的溶液并将混合物在-78℃搅拌1小时。将氯化铵滴加至反应混合物中并用6N HCl酸化至pH 3。将反应物料用乙酸乙酯(150mL x 4)萃取，将EtOAc部分以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，使其通过使用10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到5.2g呋喃-2-基吡啶-3-基-甲酮，其为淡黄色固体。LCMS:174.1(M+H)。
[0879] 步骤2：[2,3']联吡啶-3-醇
[0880]
[0881] 将呋喃-2-基吡啶-3-基甲酮(4.7g,27.167mmol)在CH3OH(15mL)和NH4OH(40mL)中的溶液装入高压釜室中并在140℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至25℃，减压浓缩，将粗残余物吸收于DCM中并用8N NaOH溶液(40mL x 2)洗涤。将含水部分用6N HCl溶液中和至pH 7并用乙酸乙酯(100mL x 5)萃取。将EtOAc部分以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到2.6g粗制的[2,3']联吡啶-3-醇，其为淡黄色固体。LCMS:173(M+H)。
[0882] 步骤3：3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶
[0883]
[0884] 在0℃向[2,3']联吡啶-3-醇(0.5g,2.906mmol)在THF(10mL)中的经搅拌溶液中按份加入t-BuOK(0.358g,3.197mmol)。搅拌反应混合物20min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(0.23mL,3.052mmol)并将所得反应混合物在在25℃搅拌2小时。将反应物料减压浓缩并将粗残余物吸收于10％IPA/DCM(50mL)中且用NH4OH溶液碱化。将有机部分分出，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过使用硅胶(100-200目)和30％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶(0.3g)，其为淡黄色液体。LCMS:217(M+H)。
[0885] 步骤4：3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶-4-甲醛
[0886]
[0887] 向TMP(0.33mL,1.944mmol)在 无 水THF(4mL)中 的 经 搅 拌 溶 液 中 滴 加n-BuLi(0.85mL,1.85mmol,2.17M在己烷中的溶液)，保持温度-30℃，并将温度慢慢升至0℃。在0℃搅拌混合物30min后，滴加3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶(0.2g,0.925mmol)在无水THF(2mL)中的溶液，保持温度-78℃。将混合物在-78℃搅拌1小时，加入
DMF(0.149mL,1.944mmol)并将混合物在-78℃搅拌30min。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(5 x 25mL)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到150mg粗制的3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。使用粗产物而无需进一步纯化。
DMF(0.149mL,1.944mmol)并将混合物在-78℃搅拌30min。将反应混合物冷却至-40℃并滴加饱和氯化铵溶液。将反应物料用乙酸乙酯(5 x 25mL)萃取，将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到150mg粗制的3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶-4-甲醛，其为淡黄色液体。使用粗产物而无需进一步纯化。
[0888] 步骤5：3-羟基-[2,3']联吡啶-4-甲醛
[0889]
[0890] 向3-甲氧基甲氧基-[2,3']联吡啶-4-甲醛(0.15g,0.614mmol)在THF(1mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(2mL)并将混合物在50℃搅拌1小时。将反应混合物在冰浴中冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc(25mL x 5)萃取。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗产物，将其通过使用硅胶(100-200目)和5％甲醇/DCM作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到70mg 3-羟基-[2,3']联吡啶-4-甲醛，其为淡黄色固体。GCMS:201.2(M+H)。
[0891] 步骤6：4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-[2,3']联吡啶-3-醇
[0892]
[0893] 将3-羟基-[2,3']联吡 啶-4-甲醛(70mg,0.35mmol)吸收 于混合溶 剂[TFE(1mL):MeCN(1mL)]，在25℃加入4-氟-3-氯苯胺(50mg,0.35mmol)，并将所得
混合物在温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到50mg
4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-[2,3']联吡啶-3-醇，其为黄色固体。
LCMS:328(M+H)。
3
混合物在温度搅拌2小时。将所得物料浓缩并通过用正戊烷研磨来纯化，得到50mg
4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-[2,3']联吡啶-3-醇，其为黄色固体。
LCMS:328(M+H)。
3
[0894] 步骤7：N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-吡啶-3-基-呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0895]
[0896] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-[2,3']联吡啶-3-醇(50mg,0.1529mmol)在混合 溶剂[DCM(1mL):TFE(1mL)]中 的经搅 拌溶 液中加 入TMSCN(0.065mL,0.519mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，浓缩，将粗物质用正戊烷
3
和CH3CN研磨，得到25mg(产率：46％)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-吡啶-3-基-呋喃并
1
[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:99.46％。LCMS:355(M+H)。H-NMR(CD3CN,
400MHz):δ9.51(s,1H),8.63(m,2H),8.25(m,1H),7.51(m,1H),7.03-6.99(m,2H),6.66-6.
59(m,2H),5.73(s,1H),5.51(s,2H)。
3
和CH3CN研磨，得到25mg(产率：46％)N-(3-氯-4-氟-苯基)-7-吡啶-3-基-呋喃并
1
[2,3-c]吡啶-2,3-二胺，其为棕色固体。HPLC:99.46％。LCMS:355(M+H)。H-NMR(CD3CN,
400MHz):δ9.51(s,1H),8.63(m,2H),8.25(m,1H),7.51(m,1H),7.03-6.99(m,2H),6.66-6.
59(m,2H),5.73(s,1H),5.51(s,2H)。
[0897] 实施例13
[0898] 2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈(化合物106)的合成
[0899]
[0900] 步骤1：3-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-甲腈
[0901]
[0902] 在0℃向2-氰基-3-羟基吡啶(500mg,4.162mmol,1当量)在THF:DMF(1:3；2mL/mmol)中的经搅拌溶液中按份加入tBuOK(510mg,4.579mmol,1.1当量)。搅拌反应混合物15min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(0.33mL,4.37mmol,1.05当量)并将所得混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3 x 30mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗混合物，将其通过柱色谱来纯化，得到400mg产物。产率＝58％。
LCMS:165.4(M+H)。
LCMS:165.4(M+H)。
[0903] 步骤2：4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-甲腈
[0904]
[0905] 在-40℃向TMP(0.43mL,2.50mmol,2.05当量)在无水THF(3mL/mmol)中的经搅拌溶液中滴加n-BuLi(1.12mL,2.43mmol,2当量,2.17M在己烷中的溶液)。在-40℃搅拌10min后，将反应混合物温热至0℃并搅拌20min。将反应混合物冷却至-78℃并慢慢加入
3-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-甲腈(200mg,1.219mmol,1当量)在THF(2.5mL/mmol)中的溶液。在-78℃搅拌30min后，加入DMF(0.19mL,2.50mmol,2.05当量)并在-78℃再搅拌
30min。然后在低于-50℃滴加饱和氯化铵溶液并将反应物料冷却至0℃。将反应物料用乙酸乙酯(3 x 30mL)萃取。将有机层先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，将其用于下一步而无需进一步纯化。
3-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-甲腈(200mg,1.219mmol,1当量)在THF(2.5mL/mmol)中的溶液。在-78℃搅拌30min后，加入DMF(0.19mL,2.50mmol,2.05当量)并在-78℃再搅拌
30min。然后在低于-50℃滴加饱和氯化铵溶液并将反应物料冷却至0℃。将反应物料用乙酸乙酯(3 x 30mL)萃取。将有机层先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，将其用于下一步而无需进一步纯化。
[0906] 步骤3：4-甲酰基-3-羟基吡啶-2-甲腈
[0907]
[0908] 向粗制的4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-甲腈(200mg,1当量)在THF(3mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(2mL)并将混合物在60℃搅拌1小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用K2CO3固体将pH调至7。将所得混合物用乙酸乙酯(2 x 50mL)萃取。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗品，将其通过柱色谱来纯化，得到80mg粗产物。
[0909] 步骤4：(E)-4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-3-羟基吡啶-2-甲腈
[0910]
[0911] 该化合物按照程序A来制备并如此向前进行下一步而无需进一步纯化。
[0912] 步骤5：2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-甲腈
[0913]
[0914] 按照通用程序A，制备2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡1
啶-7-甲腈(7mg)。HPLC:95.29％；LCMS:303(M+H)；H-NMR(CD3CN,400MHz):δ8.19(d,1H),7.15(d,1H),7.03(t,1H),6.63-6.61(m,1H),6.56-6.52(m,1H),5.81(s,2H),5.71(s,1H)。
啶-7-甲腈(7mg)。HPLC:95.29％；LCMS:303(M+H)；H-NMR(CD3CN,400MHz):δ8.19(d,1H),7.15(d,1H),7.03(t,1H),6.63-6.61(m,1H),6.56-6.52(m,1H),5.81(s,2H),5.71(s,1H)。
[0915] 实施例14
[0916] N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物104)的合成
[0917]
[0918] 步骤1：2-苯基吡啶-3-醇
[0919]
[0920] 在25℃向2-碘-3-羟基吡啶(5.0g,22.624mmol)在苯(50ml)中的经搅拌溶液中加入苯基硼酸(3.03g,24.85mmol)和2M Na2CO3溶液(20mL)并将反应混合物用氩气脱气15min。然后加入Pd(PPh3)4(1.3g,5mol％)并再脱气10min。将所得反应混合物回流4h。
反应完成后，将反应混合物冷却至室温，向其中加入水并用EtOAc萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过用MTBE/DCM研磨来纯化，得到2-苯基吡啶-3-醇(3.2g)。LCMS:172(M+H)。
反应完成后，将反应混合物冷却至室温，向其中加入水并用EtOAc萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过用MTBE/DCM研磨来纯化，得到2-苯基吡啶-3-醇(3.2g)。LCMS:172(M+H)。
[0921] 步骤2：6-碘-2-苯基吡啶-3-醇
[0922]
[0923] 向2-苯基吡啶-3-醇(3.0g,17.524mmol)在THF(75mL)中的经搅拌溶液中加入Na2CO3(3.9g,36.792mmol)在75ml水中的溶液并在室温搅拌10min。将反应物料在冰浴下冷却，然后按份加入碘(4.45g,35.066mmol)并将所得混合物在室温搅拌16h。将反应物料在冰浴下冷却并向其中加入硫酸钠溶液且搅拌5min。将反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机部分以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过柱色谱来纯化，得到6-碘-2-苯基吡啶-3-醇(1.6g)。LCMS:297.8(M+H)。
[0924] 步骤3：6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶
[0925]
[0926] 在 0 ℃ 向 6- 碘 -2- 苯 基 吡 啶 -3- 醇 (3.3g,11.107mmol) 在 溶 剂THF(6mL):DMF(15mL)的混合物中的经搅拌溶液中按份加入t-BuOK(1.5g,13.368mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(0.98mL,12.173mmol)并将所得反应混合物在25℃搅拌1h。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过柱色谱来纯化，得到6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(2.4g)。LCMS:341.8(M+H)。
[0927] 步骤4：3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶
[0928]
[0929] 在0℃将Na金属(0.38g,17.272nmmol)按份加至苯酚(20mL)并在室温搅拌30min，然后先后加入6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(1.2g,3.517mmol)和CuBr(0.096g,0.669mmol)，将所得反应混合物回流16h，在反应完成后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土床过滤且将滤液浓缩。将残余物用EtOAc萃取，先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过柱色谱来纯化，得到3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶(0.8g)。LCMS:308(M+H)。
[0930] 步骤5：3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛
[0931]
[0932] 在25℃向3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶(0.2g,0.65mmol)在无水THF(3mL)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(0.107mL,0.920mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，然后在-78℃滴加n-BuLi(0.3mL,2.2M)并在-78℃搅拌1h。在-78℃向其中加入DMF(0.072mL)并将所得混合物在-78℃搅拌1h。然后在低于-50℃滴加饱和氯化铵溶液并将反应物料用乙酸乙酯稀释，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤并以硫酸钠干燥且浓缩，得到粗制的3-(甲氧基甲氧基)-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛(0.15g)，将其用于下一步而无需纯化。LCMS:336.2(M+H)。
[0933] 步骤6：3-羟基-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛
[0934]
[0935] 向 粗 制 的3-( 甲 氧 基 甲 氧 基)-6- 苯 氧 基 -2-苯 基 吡 啶 -4-甲 醛(0.15g,0.447mmol)在THF(2mL)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(3mL)并在60℃搅拌1h。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过柱色谱来纯化，得到3-羟基-6-苯氧基-2-苯基吡啶-4-甲醛(0.055g)。LCMS:289.6(M-H)。
[0936] 步骤7：N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯氧基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(程序C)
[0937]
[0938] 向3-羟基-6-苯氧基-2-苯基-吡啶-4-甲醛(0.050g,0.171mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入4-氟-3-氯苯胺(0.025g,0.171mmol)、TMSOTf(0.006mL,0.0343mmol)和TMSCN(0.11mL,0.893mmol)。将所得混合物在室温搅拌6h。反应完成后，将反应物料用DCM稀释，先后用水和盐水洗涤并以无水Na2SO4干燥且蒸发，得到棕色粗物质，将其通过柱色谱3
/研磨来进一步纯化，得到N-(3-氯-4-氟-苯基)-5-苯氧基-7-苯基-呋喃并[2,3-c]
1
吡啶-2,3-二胺(0.015g,0.033mmol,产率20％)。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.11(d,J＝
6.6Hz,2H),7.47-7.37(m,5H),7.15-7.11(m,7H),6.60(bs,1H),6.52(bs,1H),6.26(s,1H)；
LCMS:444.2(M+H)。
/研磨来进一步纯化，得到N-(3-氯-4-氟-苯基)-5-苯氧基-7-苯基-呋喃并[2,3-c]
1
吡啶-2,3-二胺(0.015g,0.033mmol,产率20％)。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.11(d,J＝
6.6Hz,2H),7.47-7.37(m,5H),7.15-7.11(m,7H),6.60(bs,1H),6.52(bs,1H),6.26(s,1H)；
LCMS:444.2(M+H)。
[0939] 实施例15
[0940] N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-乙基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物109)的合成
[0941]
[0942] 步骤1：2-苯基吡啶-3-醇
[0943]
[0944] 在25℃向如上所述制备的2-碘-3-羟基吡啶(5g,22.62mmol,1当量)在DME(2mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入苯基硼酸(3.03g,24.88mmol,1.1当量)和2M Na2CO3溶液(20mL,1.7当量)并将反应混合物用氩气脱气15min。然后加入Pd(PPh3)4(1.3g,5mol％)，将混合物再脱气10min，并将反应混合物回流4小时。将反应混合物冷却至室温，经试剂垫过滤并将滤液浓缩。将残余物用乙酸乙酯(2 x 50mL)稀释并用水和盐水洗涤。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品，将其通过柱色谱来纯化，得到1.6g 2-苯基吡啶-3-醇(产率：41％)。LCMS:172(M+H)。
[0945] 步骤2：6-碘-2-苯基吡啶-3-醇
[0946]
[0947] 向2-苯基吡啶-3-醇(3g,17.54mmol,1当量)在THF(4mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入Na2CO3(3.9g,36.83mmol,2.1当量；0.5M在水中的溶液)并在室温搅拌10min。将反应物料在冰浴下冷却。按份加入碘(4.45g,17.54mmol,1当量)并将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应物料在冰浴下冷却，向其中加入硫代硫酸钠并搅拌5min。将反应混合物用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机部分以无水硫酸钠干燥，并减压浓缩，得到粗产物。通过柱色谱纯化粗物质，得到1.6g 6-碘-2-苯基吡啶-3-醇(产率：31％)。LCMS:297.8(M+H)。
[0948] 步骤3：6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶
[0949]
[0950] 在 0 ℃ 向 6- 碘 -2- 苯 基 吡 啶 -3- 醇 (3.3g,11.11mmol,1 当 量 ) 在THF:DMF(1:3,2mL/mmol)中的经搅拌溶液中按份加入t-BuOK(1.5g,13.33mmol,1.2当量)。搅拌反应混合物15min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(0.91mL,12.17mL,1.1当量)并将所得反应混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(2 x 100mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产物，将其通过柱色谱来纯化，得到2.4g
6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(产率：63％)。LCMS:341.8(M+H)。
6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(产率：63％)。LCMS:341.8(M+H)。
[0951] 步骤4：6-乙基-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶
[0952]
[0953] 在0℃向6-碘-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(900mg,2.63mmol,1当量)在DMF(10mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入硼酸三乙酯(5.27mL,5.27mmol,1M in THF,2当量)和K2CO3(546mg,3.95mmol,1.5当量)。将反应混合物用氩气脱气并加入[1,3-二(二苯基膦基)丙烷]二氯化镍(II)(76mg,0.0659mmol,2.5mol％)。将反应混合物在80℃加热16小时。将反应物料冷却至室温，经 试剂过滤，将滤液用水稀释并使用1N HCl酸化(pH 4)且搅拌15min。向该悬浮液中加入饱和NaHCO3溶液使pH 9，用MTBE萃取，将有机部分以Na2SO4干燥，蒸发至干并将粗产物通过柱色谱来纯化，得到500mg 6-乙基-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(产率：77％)。LCMS:243.8(M+H)。
[0954] 步骤5：6-乙基-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶-4-甲醛
[0955]
[0956] 在25℃向6-乙基-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶(200mg,0.8230mmol,1当量)在无水THF(3mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入TMEDA(0.135mL,0.9053mmol,1.1当量)。将反应混合物冷却至-78℃，在-78℃滴加n-BuLi(0.417mL,0.9053mmol,2.17M,1.1当量)并在-78℃搅拌1小时。在-78℃向其中加入DMF(0.091mL,1.1934mmol,1.45当量)并将所得混合物在-78℃搅拌1小时。然后在-50℃以下滴加饱和氯化铵溶液并将反应物料用乙酸乙酯稀释。将有机层分开，用盐水洗涤并以硫酸钠干燥。将有机层过滤并浓缩，得到200mg粗制的6-乙基-3-(甲氧基甲氧基)-2-苯基吡啶-4-甲醛，将其用于下一步而无需纯化。LCMS:271.8(M+H)。
[0957] 步骤6：6-乙基-3-羟基-2-苯基吡啶-4-甲醛
[0958]
[0959] 向粗制的 6- 乙基 -3-( 甲氧基甲氧基)-2- 苯基吡啶-4- 甲醛(200mg,0.7380mmol,1当量)在THF(3mL/mmol)中的经搅拌溶液中加入3N HCl(6mL/mmol)并在60℃搅拌1小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用固体K2CO3将pH调至7。将所得混合物用乙酸乙酯(2 x 50mL)萃取。将有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱来纯化，得到120mg 6-乙基-3-羟基-2-苯基吡啶-4-甲醛(两步后产率：
64％)。LCMS:226.2(M-H)。
64％)。LCMS:226.2(M-H)。
[0960] 步骤7：(E)-4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-6-乙基-2-苯基吡啶-3-醇[0961]
[0962] 按照通用程序A制备(E)-4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-6-乙基-2-苯基吡啶-3-醇(50mg)。LCMS:355.0(M+H)。
[0963] 步骤8：N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-乙基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺[0964]
[0965] 按照通用程序A制备N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-乙基-7-苯基呋喃并[2,3-c]吡1
啶-2,3-二胺(15mg)。HPLC:97.61％；LCMS:382(M+H)；H-NMR(CDCl3,400MHz):δ8.25(d,
2H),7.50(t,2H),7.42(m,1H),6.96(t,1H),6.81(s,1H),6.65(m,1H),6.51(m,1H),4.74(s,
1H),4.49(s,2H),2.84(q,2H),1.32(t,3H)。
啶-2,3-二胺(15mg)。HPLC:97.61％；LCMS:382(M+H)；H-NMR(CDCl3,400MHz):δ8.25(d,
2H),7.50(t,2H),7.42(m,1H),6.96(t,1H),6.81(s,1H),6.65(m,1H),6.51(m,1H),4.74(s,
1H),4.49(s,2H),2.84(q,2H),1.32(t,3H)。
[0966] 实施例16
[0967] 2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并呋喃-6-甲腈(化合物112)(程序A、B)的合成
[0968]
[0969] 向4-甲酰基-3-羟基苯甲腈(0.2g,1.36mmol)在DCM(4mL)中的经搅拌溶液中先后 加入3-氯-4-氟苯胺 (0.198g,1.36mmol)、TMSCN(0.89mL,7.074mmol)和TMS-OTf(0.049mL,0.272mmol)。将所得混合物在密封管中在25℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用乙醚稀释，用水洗涤，以硫酸钠干燥并在减压下蒸发，得到粗物质，将其通过使用丙酮/己烷作为洗脱剂的氧化铝柱色谱来纯化，得到2-氨基-3-(3-氯-4-氟-苯
1
基氨基)-苯并呋喃-6-甲腈(0.03g,0.103mmol,8％)，其为淡红棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.75(s,1H),7.39(d,J ＝ 8.1Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),6.96(bs,2H),6.
92(d,J＝8.0Hz,1H),6.56(dd,J'＝6.3Hz,J"＝2.7Hz,1H),6.47(dt,J'＝8.8Hz,J"＝
6.6Hz,J"'＝3.2Hz,1H)；LCMS:300(M-H)。
1
基氨基)-苯并呋喃-6-甲腈(0.03g,0.103mmol,8％)，其为淡红棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.75(s,1H),7.39(d,J ＝ 8.1Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),6.96(bs,2H),6.
92(d,J＝8.0Hz,1H),6.56(dd,J'＝6.3Hz,J"＝2.7Hz,1H),6.47(dt,J'＝8.8Hz,J"＝
6.6Hz,J"'＝3.2Hz,1H)；LCMS:300(M-H)。
[0970] 实施例17
[0971] N3-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物121)的合成
[0972]
[0973] 步骤1：3-氯吡啶-4-甲腈
[0974]
[0975] 在-30℃向2,2,6,6-四甲基哌啶(17.16mL,100.854mmol)在THF(100mL)中的经搅拌溶液中加入n-BuLi(2.17M,44.26mL,96.052mmol)。在25℃搅拌混合物15min后，将其冷却至-78℃并滴加4-氰基吡啶(5g,48.026mmol)在THF(40mL)中的溶液。在-78℃搅拌反应混合物30min后，在-78℃加入六氯乙烷(23.87g,100.854mmol)在THF(50mL)中的溶液。将所得混合物在在-78℃搅拌30min并用饱和NH4Cl溶液淬灭。将水(100mL)加至反应混合物中并用乙酸乙酯(4 x 300mL)萃取。将合并的有机层以无水硫酸钠干燥,减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和5％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-氯吡啶-4-甲腈(3.5g,25.261mmol,53％)，其为灰白色固体。GCMS:138(m/z)。
[0976] 步骤2：3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
[0977]
[0978] 在25℃向3-氯吡啶-4-甲腈(6.2g,44.92mmol)在MeCN(60mL)中的经搅拌溶液中加入巯基-乙酸甲酯(4.26mL,47.173mmol)和K2CO3(12.4g,89.855mmol)。将反应混合物回流3小时并减压浓缩。将所得残余物用水(100mL)稀释并用EtOAc(4 x 200mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过用正戊烷研磨来纯化，得到3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(7.5g,36.016mmol,80％)，其为淡黄色固体。
LCMS:209(M+H)。
LCMS:209(M+H)。
[0979] 步骤3：3-溴噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
[0980]
[0981] 在-10℃向CuBr(2.71g,18.930mmol)在HBr水溶液(46mL,48％)中的经搅拌溶液中加入3-氨基噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(3.75g,18.028mmol)。在-10℃滴加NaNO2(1.49g,21.634mmol)在水(43mL)中的溶液并将所得反应混合物在-10℃搅拌30min。然后在-10℃将固体NaNO2(0.149g,2.163mmol)加至反应物料中。在-10℃搅拌30min后，加入另一部分固体NaNO2(0.149g,2.163mmol)。然后将反应混合物慢慢倾入饱和NaHCO3溶液(pH＝7)中并用DCM(4 x 200mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将通过使用硅胶(100-200目)和5％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-溴噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(1.5g,5.512mmol,31％)，其为灰白色固体。
LCMS:271.8(M+H)。
LCMS:271.8(M+H)。
[0982] 步骤4：3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
[0983]
[0984] 向3-溴噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(0.2g,0.735mmol)在甲苯(5mL)中的经搅拌溶液中加入3-氯-4-氟苯胺(0.149g,1.029mmol)、Cs2CO3(0.337g,1.102mmol)、BINAP(0.091g,0.147mmol)并脱气20min。然后加入Pd2(dba)3(0.038g,0.036mmol)并将反应混合物在100℃加热16小时。将反应混合物经 试剂床过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用水(50mL)洗涤并用EtOAc(4 x 50mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和5％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-((3-氯-4-氟苯基)-氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(0.1g,0.296mmol,40％)，其为淡黄色固体。LCMS:336.8(M+H)。
[0985] 步骤5：3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并-[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
[0986]
[0987] 在0℃向3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(0.9g,2.678mmol)在THF(10mL)中的经搅拌溶液中加入TEA(0.93mL,6.696mmol)
和DMAP(0.196g,1.607mmol)。将所得混合物在0℃搅拌10min，然后滴加Boc酐
(1.31mL,5.892mmol)。将反应混合物在60℃加热4小时。反应完成后，将水(100mL)加至反应混合物种并用EtOAc(4 x 70mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将通过使用硅胶(100-200目)和15％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)-噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
(0.8g,1.831mmol,69％)。LCMS:436.8(M+H)。
和DMAP(0.196g,1.607mmol)。将所得混合物在0℃搅拌10min，然后滴加Boc酐
(1.31mL,5.892mmol)。将反应混合物在60℃加热4小时。反应完成后，将水(100mL)加至反应混合物种并用EtOAc(4 x 70mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将通过使用硅胶(100-200目)和15％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)-噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯
(0.8g,1.831mmol,69％)。LCMS:436.8(M+H)。
[0988] 步骤6：3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸
[0989]
[0990] 在0℃向3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)-氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸甲酯(0.8g,1.831mmol)在THF:MeOH:H2O的混合物(15:9:3mL)中的经搅拌溶液中加入LiOH(0.088g,3.669mmol)并将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩并将所残余物用水(5mL)稀释并用5％柠檬酸溶液酸化(pH＝4)。将所得固体析出物过滤，用水洗涤并真空干燥，得到3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸(0.7g,1.655mmol,90％)，其为淡黄色固体。LCMS:423(M+)。
[0991] 步骤7：(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯
[0992]
[0993] 在25℃向3-((叔丁氧基羰基)(3-氯-4-氟苯基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2-甲酸(0.3g,0.710mmol)在叔丁醇(tert-BuOH)(10mL)中的经搅拌溶液中加入
DPPA(0.18mL,0.853mmol)和DIPEA(0.13mL,0.782mmol).将所得反应混合物加热至100℃且保持2小时，反应完成后，将混合物减压浓缩得到残余物，将其用水(30mL)稀释，用饱和NaHCO3溶液中和并用EtOAc(4 x 70mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％MeOH/DCM作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基
甲酸叔丁酯(0.15g,0.303mmol,43％)，其为灰白色固体。LCMS:494(M+H)。
DPPA(0.18mL,0.853mmol)和DIPEA(0.13mL,0.782mmol).将所得反应混合物加热至100℃且保持2小时，反应完成后，将混合物减压浓缩得到残余物，将其用水(30mL)稀释，用饱和NaHCO3溶液中和并用EtOAc(4 x 70mL)萃取。将合并的有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％MeOH/DCM作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基
甲酸叔丁酯(0.15g,0.303mmol,43％)，其为灰白色固体。LCMS:494(M+H)。
[0994] 步骤8：N3-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[0995]
[0996] 在0℃向(2-((叔丁氧基羰基)氨基)噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.13g,0.263mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的经搅拌溶液中加入4M二噁烷.HCl溶液(0.59mL,2.373mmol)。将所得混合物在25℃搅拌8小时，反应完成后，将反应物料减压浓缩，得到残余物，将其用DCM(70mL)稀释并用液NH3碱化。
将DCM层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％
3
MeOH/DCM作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺(0.015g,0.051mmol,20％)，其为灰白色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.66(s,1H),8.13(d,J ＝ 5.4Hz,1H),7.27(s,1H),7.11(t,J ＝ 9.1Hz,1H),6.86(d,J＝ 5.3Hz,1H),6.72(bs,2H),6.50(dd,J' ＝ 6.2Hz,J" ＝ 2.4Hz,1H),6.42-6.40(m,1H)；
LCMS:294(M+H)。
将DCM层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％
3
MeOH/DCM作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)噻吩并[2,3-c]吡
1
啶-2,3-二胺(0.015g,0.051mmol,20％)，其为灰白色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.66(s,1H),8.13(d,J ＝ 5.4Hz,1H),7.27(s,1H),7.11(t,J ＝ 9.1Hz,1H),6.86(d,J＝ 5.3Hz,1H),6.72(bs,2H),6.50(dd,J' ＝ 6.2Hz,J" ＝ 2.4Hz,1H),6.42-6.40(m,1H)；
LCMS:294(M+H)。
[0997] 实施例18
[0998] 3-((3-氯苯基)硫基)苯并[b]噻吩-2-胺盐酸盐(化合物125)的合成
[0999]
[1000] 步骤1：3-溴-1-苯并噻吩
[1001]
[1002] 在0℃历时4小时向苯并[b]噻吩(10g,74.516mmol)在氯仿(75mL)和乙酸(75mL)中的溶液中滴加NBS(16.6g,93.268mmol)并将混合物在室温搅拌48小时。通过TLC监测反应的进展，反应完成后，将反应物料用氯仿(200mL)稀释并将所得混合物先后用饱和硫代硫酸钠溶液(200mL)、碳酸钠(200mL)和盐水(150mL)洗涤。然后将经萃取的有机层以硫酸干燥，过滤并减压蒸发。然后将所得红色液体经用己烷洗脱的硅胶垫过滤，得到
1
3-溴-1-苯并噻吩(15.87g,74.474mmol,100％)，其为黄色油状物。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
1
3-溴-1-苯并噻吩(15.87g,74.474mmol,100％)，其为黄色油状物。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
[1003] 步骤2：3-溴-2-硝基-1-苯并噻吩
[1004]
[1005] 在0℃将发烟硝酸(8.6mL)滴加至3-溴苯并噻吩(3g,14.155mmol)在TFA(7.5mL)和DCM(15mL)中的混合物中。反应混合物变成浅绿色并析出黄色固体。向该反应混合物中加入DCM(10mL)并将混合物在0℃搅拌30min。将反应物料倾入冰-水(500mL)中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，以硫酸钠干燥并在减压下蒸发，得到黄色固体。将所得黄色固体用DCM和己烷混合物结晶，得到3-溴-2-硝基-1-苯并噻吩1
(1.5g,5.811mmol,41％)，其为黄色固体。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
(1.5g,5.811mmol,41％)，其为黄色固体。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
[1006] 步骤3：3-[(3-氯苯基)硫基]-2-硝基-1-苯并噻吩
[1007]
[1008] 在0℃将3-氯苯硫酚加至氢氧化钠(0.085g,2.139mmol)在水(2mL)和二噁烷(18mL)混合物中的溶液中。滴加3-溴-2-硝基-1-苯并噻吩(0.5g,1.945mmol)在二噁烷(2mL)中的溶液并将反应混合物在相同温度搅拌1h。反应完成后，将反应物料用水稀释，用乙酸乙酯萃取并用盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到残余物，将其通过使用4％乙酸乙酯和己烷混合物的硅胶柱色谱来纯化，得到3-[(3-氯苯基)硫基]-2-硝1
基-1-苯并噻吩(0.375g,1.165mmol,60％)，其为黄色固体。H-NMR(500MHz,CDCl3):δ7.
83(d,J＝8.3Hz,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,1H),7.58-7.55(m,1H),7.38-7.35(m,1H),7.30-7.29(m,1H),7.22-7.21(m,1H),7.20(s,1H),7.18-7.17(m,1H)。
基-1-苯并噻吩(0.375g,1.165mmol,60％)，其为黄色固体。H-NMR(500MHz,CDCl3):δ7.
83(d,J＝8.3Hz,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,1H),7.58-7.55(m,1H),7.38-7.35(m,1H),7.30-7.29(m,1H),7.22-7.21(m,1H),7.20(s,1H),7.18-7.17(m,1H)。
[1009] 步骤4：3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺
[1010]
[1011] 在氢气(气球)下在室温向3-[(3-氯苯基)硫基]-2-硝基-1-苯并噻吩(0.3g,0.932mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的溶液中加入活性Pd/C(0.02g,10％)并将反应物料搅拌12小时。将反应混合物经 试剂床过滤，用乙酸乙酯洗涤，将滤液蒸馏出来得到残余物。将残余物通过使用6％乙酸乙酯和己烷混合物的硅胶柱色谱来纯化，得到
3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺(0.15g,0.514mmol,55％)，其为淡红色粘性液体，将其用于下一阶段而无需进一步纯化。
3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺(0.15g,0.514mmol,55％)，其为淡红色粘性液体，将其用于下一阶段而无需进一步纯化。
[1012] 步骤5：3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺盐酸盐
[1013]
[1014] 向3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺(0.15g,0.514mmol)在乙醚(5mL)中的溶液中加入吸收于乙醚中的氯化氢气体溶液(10mL)。将反应物料在室温搅拌30min，出现棕色固体，倾析溶剂并将固体真空干燥，得到3-[(3-氯苯基)硫基]-1-苯并噻吩-2-胺盐酸盐(0.1g,0.304,60％)，其为浅棕色固体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.65(d,J＝7.8Hz,1H),7.24(t,J＝ 7.9Hz,1H),7.20-7.17(m,2H),7.15-7.12(m,1H),7.05-7.01(m,1H),6.97(d,J＝7.8Hz,1H),6.94-6.93(m,1H),6.45(bh,2H)；HRMS:290.9949(M-HCl)+。
[1015] 实施例19
[1016] N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基苯并[b]噻吩-2,3-二胺(化合物134)的合成
[1017]
[1018] 步骤1：1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯
[1019]
[1020] 在0℃将4-溴苯硫酚(10g,52.890mmol)溶于DMF(25mL)中并加入碳酸钾，接着加入溴乙醛缩二乙醇(8.9mL,68.750mmol)在DMF(25mL)中的溶液。将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。通过TLC监测反应的进展，反应完成后，将混合物用水洗涤并使用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压蒸发溶剂至干，得到残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)1
硫基]苯(14g,52.288mmol,99％)，其为黄色液体。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
硫基]苯(14g,52.288mmol,99％)，其为黄色液体。H NMR和质谱通过报道的文献确证。
[1021] 步骤2：5-溴-1-苯并噻吩
[1022]
[1023] 在125℃将多聚磷酸(28g)溶于氯苯(25mL)中并在氮气下加入1-溴-4-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯(14g,55.288mmol)在氯苯(28mL)中的溶液。将反应混合物在125℃回流过夜。通过TLC监测反应的进展，反应完成后，将混合物用水稀释并使用甲苯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压蒸发溶剂，得到残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到5-溴-1-苯并噻吩(5g,45.867mmol,51％)，其1
为白色固体。The H NMR和质谱通过报道的文献确证。
为白色固体。The H NMR和质谱通过报道的文献确证。
[1024] 步骤3：5-苯基-1-苯并噻吩
[1025]
[1026] 将5-溴-1-苯并噻吩(2g,9.385mmol)、苯基硼酸(1.2g,9.841mmol)、Pd(PPh3)4、(544g,0.471mmol)、碳酸钾(1.9g,13.747mmol)在甲苯和水(20+20mL)混合物中的溶液在100℃回流过夜。反应完成后，将混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，经 床过滤，并用乙酸乙酯洗涤。将合并的滤液用水和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩，德奥残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到5-苯基-1-苯1
并噻吩(1.7g,8.084mmol,86％)，其为白色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.95(d,J＝ 1.5Hz,1H),7.86(dd,J' ＝ 8.5Hz,J" ＝ 0.7Hz,1H),7.60-7.58(m,2H),7.52(dd,J' ＝
8.3Hz,J"＝1.7Hz,1H),7.41-7.37(m,3H),7.32-7.27(m,2H)。
并噻吩(1.7g,8.084mmol,86％)，其为白色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.95(d,J＝ 1.5Hz,1H),7.86(dd,J' ＝ 8.5Hz,J" ＝ 0.7Hz,1H),7.60-7.58(m,2H),7.52(dd,J' ＝
8.3Hz,J"＝1.7Hz,1H),7.41-7.37(m,3H),7.32-7.27(m,2H)。
[1027] 步骤4：3-溴-5-苯基-1-苯并噻吩
[1028]
[1029] 将5-苯基-1-苯并噻吩(1.5g,7.132mmol)溶于氯仿(15mL)和乙酸(15mL)的混合物中并冷却至0℃，然后滴加NBS(1.6g,8.989mmol)。将反应混合物在室温搅拌48小时。反应完成后，将物料用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭并用氯仿萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到3-溴-5-苯基-1-苯并噻吩(1.9g,6.570mmol,92％)，其
1
为黄色液体。H-NMR(500MHz,CDCl3):δ8.04(s,1H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(dd,J'＝
8.3Hz,J"＝1.5Hz,2H),7.67(dd,J'＝8.3Hz,J"＝1.5Hz,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,2H),7.
48(s,1H),7.42-7.39(m,1H)。
1
为黄色液体。H-NMR(500MHz,CDCl3):δ8.04(s,1H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(dd,J'＝
8.3Hz,J"＝1.5Hz,2H),7.67(dd,J'＝8.3Hz,J"＝1.5Hz,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,2H),7.
48(s,1H),7.42-7.39(m,1H)。
[1030] 步骤5：3-溴-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩
[1031]
[1032] 将3-溴-5-苯基-1-苯并噻吩(0.55g,1.901mol)在乙酸酐(2.28mL)中的溶液冷却至0℃并加入发烟硝酸(0.54mL)在乙酸(0.37mL)中的混合物且将物料搅拌2小时。通过TLC监测反应的进展。反应完成后，将混合物在冰-冷水中淬灭，用DCM萃取，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到残余物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，
1
得到3-溴-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩(0.15g,0.448mmol,34％)，其为黄色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ8.18(s,1H),7.86(s,2H),7.66-7.63(m,2H),7.51-7.47(m,2H),7.4
3-7.39(m,1H)。
1
得到3-溴-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩(0.15g,0.448mmol,34％)，其为黄色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ8.18(s,1H),7.86(s,2H),7.66-7.63(m,2H),7.51-7.47(m,2H),7.4
3-7.39(m,1H)。
[1033] 步骤6：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩-3-胺
[1034]
[1035] 将3-溴-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩(0.07g,0.209mmol)和3-氯-4-氟苯胺(0.061g,0.419mmol)在DMF(1mL)中的溶液加热至120℃且保持1小时。反应完
成后，在搅拌下将混合物倾入冰-冷水中，析出固体，过滤，用水洗涤，真空干燥并用DCM和己烷重结晶，得到纯的N-(3-氯-4-氟苯基)-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩-3-胺
1
(0.05g,0.125mmol,60％)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ10.03(s,1H),7.74(s,2H),7.46-7.44(m,1H),7.38-7.35(m,2H),7.33-7.31(m,2H),7.28-7.25(m,2H),7.24-7.2
2(m,2H)。
3
成后，在搅拌下将混合物倾入冰-冷水中，析出固体，过滤，用水洗涤，真空干燥并用DCM和己烷重结晶，得到纯的N-(3-氯-4-氟苯基)-2-硝基-5-苯基-1-苯并噻吩-3-胺
1
(0.05g,0.125mmol,60％)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ10.03(s,1H),7.74(s,2H),7.46-7.44(m,1H),7.38-7.35(m,2H),7.33-7.31(m,2H),7.28-7.25(m,2H),7.24-7.2
2(m,2H)。
3
[1036] 步骤7：N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺(程序E)
[1037]
[1038] 在 氢 气(气 球)下 在 室 温 向N-(3-氯-4-氟 苯 基)-2-硝 基-5-苯基-1-苯并噻吩-3-胺(0.05g,0.125mmol)在甲醇(3mL)中的溶液中加入活性Pd/
C(0.005g,10％)并将反应物料搅拌3小时。将反应混合物在氮气下经 床过滤，
3
用甲醇洗涤，将滤液蒸馏，得到残余物，将其用DCM和己烷结晶，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺(0.027g,0.073mmol,58％)，其为棕色固体。
1
H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.65(d,J＝8.3Hz,1H),7.50(d,J＝7.4Hz,2H),7.39-7.35(m,3H),7.28-7.23(m,2H),7.18(s,1H),7.07(t,J＝ 9.0Hz,1H),6.54-6.52(m,1H),6.47-6.4
4(m,1H),5.94(bs,2H)；HRMS:367.0471[M-H]。
C(0.005g,10％)并将反应物料搅拌3小时。将反应混合物在氮气下经 床过滤，
3
用甲醇洗涤，将滤液蒸馏，得到残余物，将其用DCM和己烷结晶，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5-苯基-1-苯并噻吩-2,3-二胺(0.027g,0.073mmol,58％)，其为棕色固体。
1
H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.65(d,J＝8.3Hz,1H),7.50(d,J＝7.4Hz,2H),7.39-7.35(m,3H),7.28-7.23(m,2H),7.18(s,1H),7.07(t,J＝ 9.0Hz,1H),6.54-6.52(m,1H),6.47-6.4
4(m,1H),5.94(bs,2H)；HRMS:367.0471[M-H]。
[1039] 实施例20
[1040] 2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-6-甲腈(化合物136)的合成
[1041]
[1042] 步骤1：1-溴-3-[(2,2-二乙氧基乙基)硫基]苯
[1043]
[1044] 在0℃向3-溴苯硫酚(10.0g,52.88mmol)在DMF(180mL)中的经搅拌溶液中按份加入NaH(3.0g,63.45mmol)。加入后，将反应混合物在室温搅拌30min。滴加溴乙醛缩二甲醇(6.85mL,58.17mmol)并将所得混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(250mL)稀释并用冷水和盐水溶液洗涤。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到1-溴-3-(2,2-二甲氧基-乙基硫基)-苯(11.0g,36.038mmol,68％)，其为无色液体。
GCMS:277(m/z)。
GCMS:277(m/z)。
[1045] 步骤2：6-溴苯并[b]噻吩和4-溴苯并[b]噻吩
[1046]
[1047] 将PPA(40.0g)与氯苯(110mL)组合并回流1小时。将1-溴-3-(2,2-二甲氧基-乙基硫基)-苯(11.0g,36.038mmol)在氯苯(40mL)中的溶液滴加至回流的反应混合物中并继续回流12小时。将反应混合物冷却至室温，分出上层，将底层用水(200mL)稀释，然后用DCM(2 x 200mL)萃取。将合并的有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到6-溴苯并[b]噻吩和4-溴-苯并[b]噻吩的混合物(7.0g,32.849mmol,91％)，其为淡黄色液体。GCMS:213(m/z)。
[1048] 步骤3：苯并[b]噻吩-6-甲腈
[1049]
[1050] 将6-溴苯并[b]噻吩和4-溴苯并[b]噻吩(5.0g,23.46mmol)在DMF(90mL)中的混合物用氩气脱气15min。然后加入Pd(PPh3)4(1.35g,1.173mmol)并将混合物再脱气10min。然后加入Zn(CN)2(2.75g,23.46mmol)并将混合物回流3小时。将混合
物冷却至室温并经 试剂床过滤。将滤液浓缩，用MTBE(150mL)稀释，先后用冷
水和盐水洗涤。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到苯并[b]噻吩-6-甲腈
1
(1.2g,7.537mmol,32％)，其为黄色液体。H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.19(s,1H),7.88(d,1H),7.70(d,1H),7.60-7.56(m,1H),7.41(d,1H)；GCMS:159(m/z)。
物冷却至室温并经 试剂床过滤。将滤液浓缩，用MTBE(150mL)稀释，先后用冷
水和盐水洗涤。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到苯并[b]噻吩-6-甲腈
1
(1.2g,7.537mmol,32％)，其为黄色液体。H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.19(s,1H),7.88(d,1H),7.70(d,1H),7.60-7.56(m,1H),7.41(d,1H)；GCMS:159(m/z)。
[1051] 步骤4：3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈
[1052]
[1053] 在0℃向苯并[b]噻吩-6-甲腈(1.0g,6.289mmol)在CHCl3(7mL)和乙酸(7mL)中的经搅拌溶液中按份加入NBS(1.34g,7.547mmol)并将混合物在室温搅拌48小时。将反应混合物用DCM(60mL)稀释并用饱和硫代硫酸钠溶液、NaHCO3和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和2％EtOAc/己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈(0.8g,3.359mmol,53％)，其为灰白色固体。GCMS:238(m/z)。
[1054] 步骤5：3-溴-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈
[1055]
[1056] 在0℃向3-溴苯并[b]噻吩-6-甲腈(0.5g,2.10mmol)在DCM(3mL)中的经搅拌溶液中加入三氟乙酸酐(3.87mL,27.30mmol)并将混合物搅拌30min。然后在0℃按份加入KNO3(0.23g,2.310mmol)并将混合物再搅拌30min。将混合物用DCM(25mL)稀释并用水和盐水溶液洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过用50％MTBE和DCM研磨来纯化，得到3-溴-2-硝基-苯并[b]噻吩-6-甲腈(0.25g,0.883mmol,42％)，其为黄色固体。LCMS:281(M-H)。
[1057] 步骤6：3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈
[1058]
[1059] 将3-溴-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈(0.8g,2.826mmol)和4-氟-3-氯苯胺(0.41g,2.826mmol)在DMF(8mL)中的溶液在100℃在密封管中加热12小时。将混合物用MTBE(25mL)稀释并用冷水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过用MTBE和戊烷研磨来纯化，得到3-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-2-硝基苯并[b]噻吩-6-甲腈(0.45g,1.294mmol,46％)，其为黄色固体。LCMS:346.2(M-H)。
[1060] 步骤7：2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)苯并[b]噻吩-6-甲腈(程序F)
[1061]
[1062] 在室温向3-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-2-硝基-苯并[b]噻 吩-6-甲腈(0.2g,0.575mmol)在THF(2mL)和 甲 醇(2mL)中 的 经 搅拌 溶 液 中加 入 锌 粉(0.075g,1.150mmol)和NH4Cl(0.062g,0.575mmol)并 将混合 物搅拌 3小时。将 混合物经 试剂垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用EtOAc(30mL)稀释并用水
和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过用MTBE和戊烷研磨来纯化，得到2-氨基-3-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-苯并(b)噻吩-6-甲
1
腈(0.08g,0.251mmol,44 ％)，其 为 淡 棕 色 固 体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.11(s,1H),7.47(d,J ＝ 8.3Hz,1H),7.32(s,1H),7.11(t,J ＝ 9.1Hz,1H),7.01(d,J ＝
8.2Hz,1H),6.63(bs,2H),6.51(dd,J' ＝ 6.2Hz,J" ＝ 2.6Hz,1H),6.43-6.40(m,1H)；
LCMS:316(M-H)。
和盐水洗涤。将有机层以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过用MTBE和戊烷研磨来纯化，得到2-氨基-3-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-苯并(b)噻吩-6-甲
1
腈(0.08g,0.251mmol,44 ％)，其 为 淡 棕 色 固 体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.11(s,1H),7.47(d,J ＝ 8.3Hz,1H),7.32(s,1H),7.11(t,J ＝ 9.1Hz,1H),7.01(d,J ＝
8.2Hz,1H),6.63(bs,2H),6.51(dd,J' ＝ 6.2Hz,J" ＝ 2.6Hz,1H),6.43-6.40(m,1H)；
LCMS:316(M-H)。
[1063] 实施例21
[1064] (3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)-氨基甲酸乙酯(化合物141)的合成(程序G)
[1065]
[1066] 在25℃向N3-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(1.0当量)在THF中的经搅拌溶液中先后加入吡啶(1.3当量)和氯甲酸乙酯(1.1当量)。将反应混合物在25℃搅拌3-10小时并浓缩。将粗物质溶于EtOAc，先后用水和盐水彻底洗涤，以Na2SO4干燥并浓缩。粗物料经受制备型TLC/研磨，得到主要的所期望的单氨基甲酸酯(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯(45-50％)
以及痕量二氨基甲酸酯(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯，其为固体。
以及痕量二氨基甲酸酯(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯，其为固体。
[1067] 实施例22
[1068] (3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并-[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(化合物142)的合成(程序H)
[1069]3
[1070] 在25℃向N-(3-氯-4-氟苯基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺在THF中的经搅拌溶液中先后加入吡啶(10.0当量)和氯甲酸乙酯(8.0当量)。将反应混合物在25℃搅拌20小时并浓缩，将粗物质溶于EtOAc中，先后用水和盐水彻底洗涤，以Na2SO4干燥并浓缩。粗物质经受制备型TLC/研磨，得到所期望的二氨基甲酸酯(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(50-55％)以及单氨基甲酸酯(3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯(20-25％)，其为固体。
[1071] 实施例23
[1072] N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物158)的合成
[1073]
[1074] 步骤1：2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶
[1075]
[1076] 在0℃向2-溴-3-羟基吡啶(50g,287.356mmol)在THF中的经搅拌溶液中按份加入t-BuO-K(51.49g,459.7mmol)。搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(34.473mL,459.77mmol)并将所得混合物在25℃搅拌12h。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(4×500mL)萃取。将有机层以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用硅胶(100-200目)和10％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到2-溴-3-甲1
氧基甲氧基-吡啶(45g)，其为淡棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.03(dd,J’＝
4.5Hz,J”＝1.3Hz,1H),7.60(dd,J’＝8.1Hz,J”＝1.1Hz,1H),7.40(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
4.5Hz,1H),5.35(s,2H),3.41(s,3H)。
氧基甲氧基-吡啶(45g)，其为淡棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.03(dd,J’＝
4.5Hz,J”＝1.3Hz,1H),7.60(dd,J’＝8.1Hz,J”＝1.1Hz,1H),7.40(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
4.5Hz,1H),5.35(s,2H),3.41(s,3H)。
[1077] 步骤2：2-溴-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛
[1078]
[1079] 在-78℃向2-溴-3-甲氧基甲氧基吡啶(10.0g,45.872mmol)在无水THF(140mL)中的经搅拌溶液中加入LDA(79.5mL,59.633mmol,0.75M在THF中的溶液)。在-78℃搅拌1小时后，向其中加入甲酸乙酯(5.559mL,68.807mmol)并在-78℃搅拌30min。移开冷浴并将反应混合物保持在-10℃且用NH4Cl水溶液(50mL)淬灭。将反应物料用乙酸乙酯(3×150mL)萃取，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，使其通过使用4％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的小的硅胶(100-200目)垫，得到2-溴-3-甲氧基甲氧基-吡1
啶-4-甲醛(5.0g)，其为淡黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.2(s,1H),8.40(d,J＝4.8Hz,1H),7.67(d,J＝4.8Hz,1H),5.25(s,2H),3.55(s,3H))。
啶-4-甲醛(5.0g)，其为淡黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.2(s,1H),8.40(d,J＝4.8Hz,1H),7.67(d,J＝4.8Hz,1H),5.25(s,2H),3.55(s,3H))。
[1080] 步骤3：3-(甲氧基甲氧基)-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛
[1081]
[1082] 在氩气气氛下向2-溴-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(8.0g,32.52mmol)、2-甲基吡啶-4-硼酸(4.455g,32.52mmol)和三环己基膦(0.547g,1.951mmol)在无
水1,4-二噁烷(500mL)中的经搅拌溶液中加入K3PO4(55mL,1.27M)、MeOH(50mL)和
Pd2(dba)3(0.893g,0.976mmol)。将所得混合物用氩气脱气5min，然后将反应混合物慢慢加热至回流且保持约4小时。反应完成后，将反应物料冷却至室温，经硅藻土床过滤，用乙酸乙酯洗涤，将滤液减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用60％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到3-甲氧基甲氧基-2’-甲基-[2,4’]联吡
1
啶-4-甲醛(6.0g)，其为棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.34(s,1H),8.72(d,J＝4.7Hz,1H),8.58(d,J ＝5.1Hz,1H),7.73(d,J ＝4.8Hz,1H),7.69(s,1H),7.63(d,J ＝
4.2Hz,1H),4.96(s,2H),3.20(s,3H),2.56(s,3H)。
水1,4-二噁烷(500mL)中的经搅拌溶液中加入K3PO4(55mL,1.27M)、MeOH(50mL)和
Pd2(dba)3(0.893g,0.976mmol)。将所得混合物用氩气脱气5min，然后将反应混合物慢慢加热至回流且保持约4小时。反应完成后，将反应物料冷却至室温，经硅藻土床过滤，用乙酸乙酯洗涤，将滤液减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用60％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到3-甲氧基甲氧基-2’-甲基-[2,4’]联吡
1
啶-4-甲醛(6.0g)，其为棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.34(s,1H),8.72(d,J＝4.7Hz,1H),8.58(d,J ＝5.1Hz,1H),7.73(d,J ＝4.8Hz,1H),7.69(s,1H),7.63(d,J ＝
4.2Hz,1H),4.96(s,2H),3.20(s,3H),2.56(s,3H)。
[1083] 步骤4：3-羟基-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛
[1084]
[1085] 在冰浴下将3-甲氧基甲氧基-2’- 甲基-[2,4’]联吡啶-4- 甲醛(6.0g,65.83mmol)吸收于DCM(10mL)中并慢慢加入10％TFA-DCM(60mL)，将所得混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物在冰浴下冷却并用碳酸钾碱化(pH10)，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，将含水部分用柠檬酸中和并用10％IPA-DCM(5×50mL)萃取。将合并的有机部分以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用溶剂MTBE-戊烷的混合物研
1
磨来纯化，得到3-羟基-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(4.0g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.25(bh,1H),10.29(s,1H),8.55(d,J ＝ 5.2Hz,1H),8.42(d,J＝4.7Hz,1H),7.86(s,1H),7.81(d,J＝5.1Hz,1H),7.69(d,J＝ 4.8Hz,1H),2.55(s,3H)；
LCMS:315.3(M+H)。
1
磨来纯化，得到3-羟基-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(4.0g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.25(bh,1H),10.29(s,1H),8.55(d,J ＝ 5.2Hz,1H),8.42(d,J＝4.7Hz,1H),7.86(s,1H),7.81(d,J＝5.1Hz,1H),7.69(d,J＝ 4.8Hz,1H),2.55(s,3H)；
LCMS:315.3(M+H)。
[1086] 步骤5：4-(3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2'-甲基-[2,4'-联吡啶]-3-醇[1087]
[1088] 在25℃将3-羟基-2’-甲基-[2,4’]联吡啶-4-甲醛(5.0g,23.364mmol)吸收于的混合溶剂TFE(30mL)和MeCN(30mL)中并加入4-氟-3-氯苯胺(3.4g,23.364mmol)，将所得混合物在该温度搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，得到粗物料，将其用正戊烷研磨来纯化，得到4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2’-甲基[2,4’]联吡啶-3-醇(6.0g)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.22(s,1H),8.78(d,J ＝ 5.9Hz,1H),8.52(d,J＝ 4.7Hz,1H),8.39(s,1H),8.32(d,J ＝ 5.0Hz,1H),7.95(dd,J’ ＝ 6.7Hz,J” ＝2.3Hz,1H),7.80(d,J＝4.6Hz,1H),7.65-7.57(m,2H),2.71(s,3H)；LCMS:341.9(M+H)。
[1089] 步骤6：N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[1090]
[1091] 在25℃向4-{[3-氯-4-氟-苯基亚氨基]-甲基}-2'-甲基-[2,4']联吡啶-3-醇(6.0g,17.595mmol)在DCM(36mL)和TFE(36mL)的混合溶剂中的经搅拌溶液中加入TMSCN(8.805mL,70.381mmol)。将反应混合物在25℃搅拌12h。反应完成后，除去
3
挥发物并将粗物质通过用MTBE/戊烷研磨来纯化，得到所期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(3.0g)，其为淡棕色固体。
1
H-NMR(400MHz,CD3CN):δ8.65(s,1H),8.29-8.13(m,3H),7.03(bs,2H),6.66(s,1H),6,60(s,1H),5.94(s,1H),5.78(bs,2H),2.66(s,3H)；LCMS:369(M+H)。
3
挥发物并将粗物质通过用MTBE/戊烷研磨来纯化，得到所期望的产物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(3.0g)，其为淡棕色固体。
1
H-NMR(400MHz,CD3CN):δ8.65(s,1H),8.29-8.13(m,3H),7.03(bs,2H),6.66(s,1H),6,60(s,1H),5.94(s,1H),5.78(bs,2H),2.66(s,3H)；LCMS:369(M+H)。
[1092] 实施例24
[1093] (7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯(化合物160)的合成
[1094]
[1095] 步骤1：3-羟基-2-碘吡啶
[1096]
[1097] 在0℃向3-羟基吡啶-(30g,315.78mmol)在水(3000mL)中的搅拌溶液中先后按份加入Na2CO3(70g,663.15mmol)和碘(80g,315.78mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应物料用1N HCl酸化至pH-4，得到固体，将其滤出，先后用冷冻水和MTBE-己烷洗涤，得到所期望的3-羟基-2-碘吡啶(45g)，其为灰白色固体。
[1098] 步骤2：2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶
[1099]
[1100] 在0℃向3-羟基-2-碘吡啶(10g,45.24mmol)在THF:DMF(10mL:20mL)中的经搅拌溶液中按份加入叔丁醇钾(tert-BuO-K)(6g,54.3mmol)。搅拌反应混合物30min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(4mL,50mmol)并将所得混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物用盐水稀释并用EtOAc(3×150mL)萃取。将EtOAc部分以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用硅胶(100-200目)和EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到
2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶(6.0g)，其为灰白色固体。
2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶(6.0g)，其为灰白色固体。
[1101] 步骤3：2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛
[1102]
[1103] 在-78℃向2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶(4.0g,15.094mmol)在无水THF(60mL)中的经搅拌溶液中滴加LDA(24.15mL,18.113mmol,0.75M in THF)。在-78℃搅拌反应混合物1小时后，向其中加入DMF(1.74mL,22.642mmol)并在-78℃搅拌15min。在-78℃将饱和氯化铵溶液滴加至反应物料中并温热至室温。将所得淬灭的物料用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将EtOAc部分先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，使其通过使用3％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶垫(100-200目)，得到2-碘-3-(甲氧基甲氧1
基)-吡啶-4-甲醛(2.2g)，其为淡黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.14(s,1H),8.39(d,J＝4.7Hz,1H),7.60(d,J＝4.8Hz,1H),5,22(s,2H),3.55(s,3H)。
基)-吡啶-4-甲醛(2.2g)，其为淡黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.14(s,1H),8.39(d,J＝4.7Hz,1H),7.60(d,J＝4.8Hz,1H),5,22(s,2H),3.55(s,3H)。
[1104] 步骤4：3-羟基-2-碘吡啶-4-甲醛
[1105]
[1106] 在0℃向2-碘-3-(甲氧基甲氧基)-吡啶-4-甲醛(1.2g,4.096mmol)在DCM(3mL)中的经搅拌溶液中加入10％TFA-DCM(10mL)并在室温搅拌3小时。将反应物料减压浓缩，将粗品吸收于水(20mL)中并用碳酸钾碱化(pH-10)且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，将含水部分用柠檬酸中和并用10％IPA-DCM(5×50mL)萃取。将合并的有机部分以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物质，将其通过使用MTBE-戊烷研磨来纯化，得到3-羟基-2-碘吡啶-4-甲醛(0.75g)，其为黄色固体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.45(bh,1H),10.16(s,1H),8.10(d,J＝3.7Hz,1H),7.53(d,J＝3.4Hz,1H)；LCMS:249.5(M+H)。
[1107] 步骤5：N3-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[1108]
[1109] 向3-羟基-2-碘吡啶-4-甲醛(4.5g,18.072mmol)在无水DCM(70mL)中的经搅拌溶液中先后加入3-氯-4-氟苯胺(2.63g,18.072mmol)、TMSCN(11.305mL,90.361mmol)和TMSOTf(0.653mL,3.614mmol)并将反应物料在室温搅拌5小时。反应完成后，将水加至反应物料中并用DCM(2×250mL)萃取。将合并的有机层先后用水、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并在减压下蒸发，得到粗物料，将其通过用MTBE/戊烷研磨来纯化，得到3
所期望的化合物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(5.0g)，其
1
为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.83(d,J＝5.0Hz,1H),7.21(s,2H),7.15-7.09(m,2H),6.83(d,J＝5.0Hz,1H),6.57-6.56(m,1H),6.47-6.45(m,1H)；LCMS:404.0(M+H)。
所期望的化合物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(5.0g)，其
1
为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.83(d,J＝5.0Hz,1H),7.21(s,2H),7.15-7.09(m,2H),6.83(d,J＝5.0Hz,1H),6.57-6.56(m,1H),6.47-6.45(m,1H)；LCMS:404.0(M+H)。
[1110] 步骤6：(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯
[1111]
[1112] 向N3-(3- 氯 -4- 氟 苯 基 )-7- 碘 呋 喃 并 [2,3-c] 吡 啶 -2,3- 二 胺(5.0g,12.407mmol)在无水THF(50mL)中的经搅拌溶液中加入吡啶(8.011mL,99.256mmol)并将反应物料搅拌15min，然后向其中加入氯甲酸乙酯(11.811mL,124.069mmol)。将反应物料在室温搅拌4小时。反应完成后，将反应用水稀释并用EtOAc(2×100mL)萃取。将有机层先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并在减压下蒸发，得到粗物质，将通过用MTBE/戊烷研磨来纯化，得到所期望的化合物(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(95.5g)，其为棕色固体。1
H-NMR(400MHz,CD3CN):δ8.20(d,J ＝ 5.2Hz,1H),7.32(d,J ＝ 5.1Hz,1H),7.10(t,J ＝
9.0Hz,1H),6.84(dd,J’＝6.2Hz,J”＝2.8Hz,1H),6.75(dt,J’＝8.8Hz,J”＝6.8Hz,J’”＝
3.1Hz,1H),6.56(s,1H),4.21(q,J＝7.1Hz,4H),1.17(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS:548(M+H)。
H-NMR(400MHz,CD3CN):δ8.20(d,J ＝ 5.2Hz,1H),7.32(d,J ＝ 5.1Hz,1H),7.10(t,J ＝
9.0Hz,1H),6.84(dd,J’＝6.2Hz,J”＝2.8Hz,1H),6.75(dt,J’＝8.8Hz,J”＝6.8Hz,J’”＝
3.1Hz,1H),6.56(s,1H),4.21(q,J＝7.1Hz,4H),1.17(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS:548(M+H)。
[1113] 步骤7：(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸乙酯
[1114]
[1115] 向(3-氯-4-氟苯基)(2-((乙氧基羰基)氨基)-7-碘呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(0.2g,0.366mmol)在三乙胺(5mL)和THF(2mL)中的经搅拌溶液中加入4-乙炔基苯甲酰胺(0.058g,0.402mmol)、CuI(0.003g,0.018mmol)，将所得物料脱气20min，然后加入PdCl2(PPh3)2(0.013g,0.018mmol)并再脱气10min。将反应物料加热至50℃且保持3小时。反应完成后，将反应物料冷却至室温并经硅藻土床过滤。将滤液减压浓缩得到残余物，将其用水稀释并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，将EtOAc部分用盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，将其通过使用乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到所得产物(7-((4-氨甲酰基苯基)乙炔基)-2-((乙氧基羰基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-3-基)(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸
乙酯(60mg)，其为棕色固体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.47(d,J＝5.1Hz,1H),8.36(s,1H),8.12(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.52(s,1H),7.49(d,J＝5.1Hz,1H),7.26(t,J＝9.0Hz,1H),6.82(dd,J’＝6.2Hz,J”＝2.5Hz,1H),6.75-6.71(m,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,4H),1.11(t,J＝7.0Hz,6H)；LCMS:563.2(M-H)。
乙酯(60mg)，其为棕色固体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.47(d,J＝5.1Hz,1H),8.36(s,1H),8.12(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.52(s,1H),7.49(d,J＝5.1Hz,1H),7.26(t,J＝9.0Hz,1H),6.82(dd,J’＝6.2Hz,J”＝2.5Hz,1H),6.75-6.71(m,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,4H),1.11(t,J＝7.0Hz,6H)；LCMS:563.2(M-H)。
[1116] 实施例25
[1117] N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物180)的合成
[1118]
[1119] 步骤1：6-氟-3-羟基-2-碘吡啶
[1120]
[1121] 在0℃向6-氟-3-羟基吡啶(10g,88.496mmol)在THF(300mL)中的搅拌溶液中慢慢加入Na2CO3(19.697g,185.841mmol)在水(300mL)中的溶液并搅拌20min。在0℃按份加入碘(22.461g,88.496mmol)并将反应物料在室温搅拌过夜。蒸发溶剂；将含水部分用1N HCl中和，用乙酸乙酯萃取。将有机层分出，以无水Na2SO4干燥并减压蒸发，得到粗物料，将1
其用DCM/戊烷研磨，得到6-氟-3-羟基-2-碘吡啶(19.8g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ10.79(s,1H),7.31-7.27(m,1H),7.03-7.00(m,1H)；LCMS:239.8(M+H)。
其用DCM/戊烷研磨，得到6-氟-3-羟基-2-碘吡啶(19.8g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ10.79(s,1H),7.31-7.27(m,1H),7.03-7.00(m,1H)；LCMS:239.8(M+H)。
[1122] 步骤2：6-氟-2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶
[1123]
[1124] 在0℃向6-氟-3-羟基-2-碘吡啶(9.0g,37.657mmol)在THF(180mL)中的经搅拌溶液中按份加入叔丁醇钾(tert-BuO-K)(6.76g,60.251mmol)。搅拌反应混合物30min后，在0℃加入甲氧基甲基氯(4.55mL,60.251mmol)并将所得反应混合物在室温搅拌2小时。反应完成后，将反应物料用盐水稀释并用EtOAc(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥,减压浓缩得到粗物料(9.6g)，将其通过使用硅胶(100-200目)和5％EtOAc-己烷作为洗脱剂的柱色谱来纯化，得到6-氟-2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶(8.0g)，其为黄色固体。LCMS:284(M+H)。
[1125] 步骤3：6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-2,4'-联吡啶
[1126]
[1127] 向6-氟-2-碘-3-(甲氧基甲氧基)吡啶(3.5g,12.367mmol)在二噁烷(120mL)中的经搅拌溶液中加入4-吡啶基硼酸(1.67g,13.6mmol)、K3PO4(16.5mL,21.02mmol,1.27M在水中的溶液)、P(Cy)3(0.7g,2.47mmol)。将反应物料用氩气脱气20min，然后加入Pd2(dba)3(1.13g,1.24mmol)并再脱气10min。将所得混合物加热至100℃且保持2小时。将反应物料冷却至室温并经硅藻土床过滤，将滤液减压浓缩，得到粗物料，将其通过柱色谱来纯化，得到6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-2,4'-联吡啶(2.8g)，其为淡黄色固1
体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ8.69(d,J ＝ 5.0Hz,2H),7.94-7.89(m,3H),7.28(dd,J’ ＝
3.7Hz,J”＝8.9Hz,1H),5.33(s,2H),3.34(s,3H)；LCMS:235.2(M+H)。
体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ8.69(d,J ＝ 5.0Hz,2H),7.94-7.89(m,3H),7.28(dd,J’ ＝
3.7Hz,J”＝8.9Hz,1H),5.33(s,2H),3.34(s,3H)；LCMS:235.2(M+H)。
[1128] 步骤4：6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛
[1129]
[1130] 在-78℃向6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-2,4'-联吡啶(3.0g,12.8mmol)在无水THF(40.0mL)中的经搅拌溶液中滴加n-BuLi(7mL,14.1mmol,2.0M在己烷中的溶液)。
在-78℃搅拌1小时后，向其中加入DMF(1.5mL,19.2mmol)并在-78℃搅拌15min。在-78℃将饱和氯化铵溶液滴加至反应物料中并温热至室温。将反应物料用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机层先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料
6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(3.5g)，将其如此用于下一步。
在-78℃搅拌1小时后，向其中加入DMF(1.5mL,19.2mmol)并在-78℃搅拌15min。在-78℃将饱和氯化铵溶液滴加至反应物料中并温热至室温。将反应物料用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机层先后用水和盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料
6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(3.5g)，将其如此用于下一步。
[1131] 步骤5：6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛
[1132]
[1133] 在0℃向粗制的6-氟-3-(甲氧基甲氧基)-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(3.5g,13.35mmol)在DCM(5.0mL)中的经搅拌溶液中加入10％TFA-DCM溶液(50.0mL)。
将反应物料在室温搅拌5小时。蒸发挥发物，将残余物用水(20mL)稀释并用碳酸
钾碱化(pH-10)且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，将含水部分用柠檬酸中和并用10％
IPA-DCM(5×150mL)萃取，将合并的有机部分以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用MTBE-戊烷研磨来纯化，得到6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(1.5g)，
1
其为黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ11.15(bh,1H),10.27(s,1H),8.72(d,J ＝
5.3Hz,2H),8.01(d,J＝4.9Hz,2H),7.49(d,J＝3.6Hz,2H)。
将反应物料在室温搅拌5小时。蒸发挥发物，将残余物用水(20mL)稀释并用碳酸
钾碱化(pH-10)且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取，将含水部分用柠檬酸中和并用10％
IPA-DCM(5×150mL)萃取，将合并的有机部分以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用MTBE-戊烷研磨来纯化，得到6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(1.5g)，
1
其为黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO):δ11.15(bh,1H),10.27(s,1H),8.72(d,J ＝
5.3Hz,2H),8.01(d,J＝4.9Hz,2H),7.49(d,J＝3.6Hz,2H)。
[1134] 步骤6：N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[1135]
[1136] 在25℃向6-氟-3-羟基-[2,4'-联吡啶]-4-甲醛(0.5g,0.23mmol)在DCM(7mL)中的经搅拌溶液中加入4-氟-3-氯苯胺(0.333g,0.2.3mmol)、TMS-CN(1.5mL,12mmol)和TMS-OTf(0.08mL,0.45mmol)。将所得反应混合物在该温度搅拌20小时。将反应物料浓缩并用乙酸乙酯(25mL)稀释，先后用水(2×25mL)和盐水溶液稀释并以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其吸收于DCM(2mL)中，加入TMSCN(0.5mL)、TMSOTf(0.02mL)并将所得混合物在冰箱中保持16小时。除去挥发物并用乙酸乙酯(25mL)稀释，用水(2×25mL)和盐水溶液洗涤并以硫酸钠干燥，浓度并通过使用乙酸乙酯/DCM研磨来纯化，得到N3-(3-氯-4-氟苯基)-5-氟-7-(吡啶-4-基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(210mg)，其为淡黄色固 体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.76(d,J ＝ 5.8Hz,2H),8.15(d,J ＝ 5.8Hz,2H),7.
50(s,2H),7.17-7.12(m,2H),6.63(dd,J’＝6.1Hz,J”＝ 2.5Hz,1H),6.53-6.49(m,2H)；
LCMS:373.1(M+H)。
50(s,2H),7.17-7.12(m,2H),6.63(dd,J’＝6.1Hz,J”＝ 2.5Hz,1H),6.53-6.49(m,2H)；
LCMS:373.1(M+H)。
[1137] 实施例26
[1138] N3-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(化合物190)的合成
[1139]
[1140] 步骤1：2,6-二氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶[1141]
[1142] 在氮气气氛下将2,6二氟吡啶(5.0g,43.44mmol)吸收于无水THF(60mL)中并冷却至-78℃，然后历时30min滴加n-BuLi(26.06mL,52.1739mmol2.0M在己烷中的溶液)，接i着在相同温度加入B(OPr)3(11.095mL,47.785mmol)并保持20min。将所得反应混合物温热至室温并加入频哪醇(5.647g,47.785mmol)和乙酸(4.969mL,86.881mmol)。将所得反应混合物在室温搅拌3h。反应完成后，将饱和NH4Cl水溶液(100mL)倾入反应物料中并用乙酸乙酯(3×150mL)洗涤。将合并的有机层先后用饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水溶液(2×50mL)洗涤，以无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗物料，将其通过硅胶垫，得到2,6-二氟-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶(9.0g)，其为棕色胶粘性固体并如此用于下一步。
[1143] 步骤2：2,6-二氟-3-羟基吡啶
[1144]
[1145] 在0℃向四水合过硼酸钠(17.2g,112.03mmol)在水(130mL)中的经搅拌溶液中加入THF(130mL)和2,6-二氟-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊-2-基)-吡啶(9.0g,37.344mmol)。将所得反应混合物在室温搅拌3h。将反应混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取，用盐水(150mL)洗涤并以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用30％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到2,6-二氟-3-羟基吡啶(4.0g)，其为白色固体。LCMS:130(M-H)。
[1146] 步骤3：2,6-二氟-3-(甲氧基甲氧基)吡啶
[1147]
[1148] 在0℃向2,6-二氟-3-羟基吡啶(4.0g,30.534mmol)在DCM(80mL)中的经搅拌溶液中加入DIPEA(10.6mL,61.069mmol)，搅拌反应混合物15min后，在0℃向其中加入甲氧基甲基氯(3.46mL,45.802mmol)并将所得反应混合物在室温搅拌3h。将水加至反应混合物中并用DCM(2×50mL)萃取。将组合的有机部分用盐水(150mL)洗涤并以硫酸钠干燥且减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用5％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目硅胶)柱色谱来纯化，得到2,6-二氟-3-甲氧基甲氧基-吡啶(3.2g)，其为棕色液体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.94(m,1H),7.13(dd,J’＝8.5Hz,J”＝2.8Hz,1H),5.27(s,2H),3.41(s,3H)。
[1149] 步骤3：2,6-二氟-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛
[1150]
[1151] 将2,6-二氟-3-甲氧基甲氧基-吡啶(3.5g,20.0mmol)在无水THF(60mL)中的经搅拌溶液冷却至-78℃，然后滴加n-BuLi(11mL,22mmol,2.0M在己烷中的溶液)，保持温度-78℃。在-78℃搅拌1h后，加入DMF(2.3mL,30mmol)并在-78℃搅拌30min。将反应混合物温热至-10℃并通过滴加饱和NH4Cl溶液(30mL)淬灭。将反应物料用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，用盐水洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到2,6-二氟-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(4.0g)，其为棕色液体，将其如此用于下一步。
[1152] 步骤4：2,6-二氟-3-羟基吡啶-4-甲醛
[1153]
[1154] 在0℃向2,6-二氟-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(4.0g,19.704mmol)在DCM(10mL)中的经搅拌溶液中加入10％TFA-DCM溶液(100mL)并在室温搅拌5h。将反应混合物浓缩，用水稀释并通过固体K2CO3(pH～7)中和，用5％IPA-DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机层先后用水和盐水溶液洗涤，以无水Na2SO4干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用30％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目硅胶)柱色谱来纯化，得到2,6-二氟-3-羟基吡啶-4-甲醛(1.5g)，其为棕色液体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.45(bh,1H),10.31(d,J＝2.6Hz,1H),7.19(dd,J’＝8.0Hz,J”＝2.6Hz,1H)。
[1155] 步骤5：4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2,6-二氟吡啶-3-醇
[1156]
[1157] 在室温向2,6-二氟-3-羟基吡啶-4-甲醛(1.0g,6.289mmol)在混合溶剂[TFE(5mL):MeCN(5mL)]中的经搅拌溶液中加入4-氟-3-氯苯胺(0.915g,6.289mmol)，将所得反应混合物在室温搅拌2h。反应完成后，将所得物料浓缩并用正戊烷研磨，得到
1
4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2,6-二氟吡啶-3-醇(1.3g)，其为黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.93(s,1H),9.00(s,1H),7.79(d,J＝6.4Hz,1H),7.57-7.53(M,
2H),7.39(s,1H)。
1
4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2,6-二氟吡啶-3-醇(1.3g)，其为黄色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.93(s,1H),9.00(s,1H),7.79(d,J＝6.4Hz,1H),7.57-7.53(M,
2H),7.39(s,1H)。
[1158] 步骤6：N3-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺
[1159]
[1160] 在室温向4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2,6-二氟吡啶-3-醇(1.3g,4.545mmol)在混合溶剂[TFE(5mL):DCM(5mL)]中的经搅拌溶液中先后加入
TMSCN(2.95mL,23.636mmol)和TMSOTf(0.164mL,0.909mmol)并在室温搅拌16h。将反应物料浓缩并将残余物吸收于DCM中，用NaHCO3溶液和盐水溶液洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用30％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色
3
谱来纯化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(0.4g)，
1
其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.46(s,2H),7.16-7.11(m,2H),6.60(dd,J’＝
6.2Hz,J”＝2.7Hz,1H),6.48(dt,J’＝8.8Hz,J”＝6.8Hz,J’”＝3.4Hz,1H),6.42(s,1H)；
LCMS:314(M+H)。
TMSCN(2.95mL,23.636mmol)和TMSOTf(0.164mL,0.909mmol)并在室温搅拌16h。将反应物料浓缩并将残余物吸收于DCM中，用NaHCO3溶液和盐水溶液洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物质，将其通过使用30％EtOAc-己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色
3
谱来纯化，得到N-(3-氯-4-氟苯基)-5,7-二氟呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3-二胺(0.4g)，
1
其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.46(s,2H),7.16-7.11(m,2H),6.60(dd,J’＝
6.2Hz,J”＝2.7Hz,1H),6.48(dt,J’＝8.8Hz,J”＝6.8Hz,J’”＝3.4Hz,1H),6.42(s,1H)；
LCMS:314(M+H)。
[1161] 实施例27
[1162] 4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰胺(化合物195)的合成
[1163]
[1164] 步骤1：4-氯-N-甲基吡啶-2-甲酰胺
[1165]
[1166] 向4-氯-吡啶-2-甲酸(5.0g,31.847mmol)中加入SOCl2(15mL)并回流3h。除去挥发物并将反应混合物用THF(220mL)稀释，在0℃加入Et3N(13.42mL,95.541mmol)和MeNH2(19.1mL,2M在THF中)。将反应混合物在室温搅拌12h。反应完成后，除去挥发物得到残余物，将其用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。将有机层以无水Na2SO4干燥并1
减压蒸发，得到4-氯-吡啶-2-甲酰胺(4.6g)，其为棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):
δ8.83(bs,1H),8.62(d,J＝5.2Hz,1H),8.01(d,J＝2.0Hz,1H),7.75(dd,J’＝5.3Hz,J”＝2.0Hz,1H),2.82(d,J＝4.8Hz,3H)；LCMS:171(M+H)。
减压蒸发，得到4-氯-吡啶-2-甲酰胺(4.6g)，其为棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):
δ8.83(bs,1H),8.62(d,J＝5.2Hz,1H),8.01(d,J＝2.0Hz,1H),7.75(dd,J’＝5.3Hz,J”＝2.0Hz,1H),2.82(d,J＝4.8Hz,3H)；LCMS:171(M+H)。
[1167] 步骤2：N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺
[1168]
[1169] 在100℃在氮气下将4-氯吡啶-2-甲酰胺(4.6g,27.059mmol),二(频哪醇合)二 硼(8.246g,32.471mmol)、Pd(OAC)2(0.243g,1.082mmol)、PCy3(0.379g,1.353mmol) 和乙酸钾(3.983g,40.588mmol)在1,4-二噁烷(215mL)中的经脱气的混合物加热4h。将反应混合物经硅藻土过滤并将滤液真空浓缩，得到粗物料N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺(6.2g)，其为淡棕色液体将其如此用于1
下一步而无需进一步纯化。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.75(d,J＝4.4Hz,1H),8.61(d,J＝4.5Hz,1H),8.20(s,1H),7.71(d,J＝4.4Hz,1H),2.82(d,J＝4.8Hz,3H),1.28(s,12H)。
下一步而无需进一步纯化。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.75(d,J＝4.4Hz,1H),8.61(d,J＝4.5Hz,1H),8.20(s,1H),7.71(d,J＝4.4Hz,1H),2.82(d,J＝4.8Hz,3H),1.28(s,12H)。
[1170] 步骤3：4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺[1171]
[1172] 向2-溴-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(5.0g,20.325mmol)在1,4-二噁烷(250mL)中的经搅拌溶液中加入粗制的N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-甲酰胺(3.659g,20.325mmol)、K3PO4(27.2mL,34.553mmol,1.27M在水中的溶液)和P(Cy)3(1.14g,4.065mmol)。将反应混合物用氩气脱气20min，然后加入Pd2(dba)3(1.86g,2.033mmol)并再脱气5min。将反应混合物加热至100℃且保持2h。
反应完成后，将反应混合物冷却至室温，将挥发物减压除去，得到粗制的4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(6.3g)，将其如此先前进行下一步。
LCMS:302(M+H)。
反应完成后，将反应混合物冷却至室温，将挥发物减压除去，得到粗制的4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(6.3g)，将其如此先前进行下一步。
LCMS:302(M+H)。
[1173] 步骤4：4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺
[1174]
[1175] 在0℃将10％TFA-DCM(60mL)溶液加至粗制的4-甲酰基-3-(甲氧基甲氧基)-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(6.1g,20.266mmol)在DCM(6mL)中的溶液中。
在室温搅拌反应混合物3h后，减压浓缩，用水稀释并使用固体碳酸钾碱化，用乙酸乙酯洗涤并使用柠檬酸将含水部分酸化至pH-6且用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用DCM/Et2O/戊烷研磨来纯化，得到纯的4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(2.8g)，其为淡棕色固体。
1
H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.26(s,1H),10.31(s,1H),8.84(d,J＝4.6Hz,1H),8.75(d,J＝ 5.0Hz,1H),8.67(s,1H),8.51(d,J ＝ 4.7Hz,1H),8.17(dd,J’ ＝ 5.0Hz,J” ＝
1.6Hz,1H),7.76(d,J＝4.8Hz,1H),2.85(d,J＝4.8Hz,3H)；LCMS:258.2(M+H)。
在室温搅拌反应混合物3h后，减压浓缩，用水稀释并使用固体碳酸钾碱化，用乙酸乙酯洗涤并使用柠檬酸将含水部分酸化至pH-6且用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用DCM/Et2O/戊烷研磨来纯化，得到纯的4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(2.8g)，其为淡棕色固体。
1
H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.26(s,1H),10.31(s,1H),8.84(d,J＝4.6Hz,1H),8.75(d,J＝ 5.0Hz,1H),8.67(s,1H),8.51(d,J ＝ 4.7Hz,1H),8.17(dd,J’ ＝ 5.0Hz,J” ＝
1.6Hz,1H),7.76(d,J＝4.8Hz,1H),2.85(d,J＝4.8Hz,3H)；LCMS:258.2(M+H)。
[1176] 步 骤 5：4-(2- 氨 基-3-((3- 氯-4- 氟 苯 基)氨 基) 呋 喃 并[2,3-c] 吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲酰胺
[1177]
[1178] 在室温在密封管中向4-甲酰基-3-羟基-N-甲基-[2,4'-联吡啶]-2'-甲酰胺(0.5g,1.946mmol)在DCM(6.0mL)中的经搅拌溶液中加入3-氯-4-氟苯胺(0.283g,1.946mmol),TMSCN(1.268mL,10.117mmol)、TMSOTf(0.071mL,0.389mmol)。将反应混合物在40℃搅拌1小时，接着加入10mmol NH4OAc缓冲液(3.0mL)并搅拌12h。将反应混合物经垂熔漏斗过滤并用MTBE/己烷/10-20％EA-己烷洗涤固体除去痕量杂志，得到所期望的化合物4-(2-氨基-3-((3-氯-4-氟苯基)氨基)呋喃并[2,3-c]吡啶-7-基)-N-甲基吡啶-2-甲
1
酰胺(0.450g)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.88(s,1H),8.83-8.78(m,2H),8.40(d,J＝4.4Hz,1H),8.25(d,J＝4.9Hz,1H),7.18-7.11(m,4H),6.98(d,J＝4.9Hz,1H),6.62-6.60(m,1H),6.53-6.51(m,1H),2.88(d,J＝4.6Hz,3H)；LCMS:412(M+H)。
1
酰胺(0.450g)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.88(s,1H),8.83-8.78(m,2H),8.40(d,J＝4.4Hz,1H),8.25(d,J＝4.9Hz,1H),7.18-7.11(m,4H),6.98(d,J＝4.9Hz,1H),6.62-6.60(m,1H),6.53-6.51(m,1H),2.88(d,J＝4.6Hz,3H)；LCMS:412(M+H)。
[1179] 实施例28
[1180] N3-(3-氯-4-氟苯基)-N7,N7-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺(化合物200)的合成
[1181]
[1182] 步骤1：3-(甲氧基甲氧基)-N,N-二苯基吡啶-2-胺
[1183]
[1184] 将 2- 溴 -3- 甲 氧 基 甲 氧 基 - 吡 啶 (2.0g,9.174mmol)、二 苯 基胺 (2.018g,11.927mmol)、 叔 丁 醇 钠 (ter-BuONa)(1.763g,18.349mmol) 和Dppf(0.305g,0.55mmol)在甲苯(27.5mL)中的溶液脱气20min并向该经脱气的反应混合物中加入Pd2(dba)3(0.168g,0.183mmol)。将所得反应混合物再脱气10min并在80℃加热
16h。反应完成后，将反应物料经硅藻土床过滤并将滤液减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用20％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到(3-甲氧基甲氧
1
基-吡啶-2-基)-二苯基-胺(2.0g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.99(dd,J’＝4.7Hz,J”＝1.4Hz,1H),7.53(dd,J’＝4.7Hz,J”＝1.4Hz,1H),8.1Hz,J”＝1.4Hz,1H),7.26-7.19(m,5H),6.98(t,J＝7.3Hz,2H),6.85(d,J＝7.6Hz,4H),5.01(s,2H),3.01(s,3H)。
16h。反应完成后，将反应物料经硅藻土床过滤并将滤液减压浓缩，得到粗物料，将其通过使用20％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶(100-200目)柱色谱来纯化，得到(3-甲氧基甲氧
1
基-吡啶-2-基)-二苯基-胺(2.0g)，其为棕色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.99(dd,J’＝4.7Hz,J”＝1.4Hz,1H),7.53(dd,J’＝4.7Hz,J”＝1.4Hz,1H),8.1Hz,J”＝1.4Hz,1H),7.26-7.19(m,5H),6.98(t,J＝7.3Hz,2H),6.85(d,J＝7.6Hz,4H),5.01(s,2H),3.01(s,3H)。
[1185] 步骤2：2-(二苯基氨基)-3-(甲氧基甲氧基)吡啶-4-甲醛
[1186]
[1187] 在-78℃向(3-甲氧基甲氧基-吡啶-2-基)-二苯基-胺(1.0g,3.264mmol)在THF(13mL)中的经搅拌溶液中滴加n-BuLi(1.8mL,3.6mmol,2M在己烷中的溶液)。在-78℃搅拌反应混合物1h后，加入DMF(0.377mL,4.896mmol)并在-78℃搅拌15min。将反应物料用饱和NH4Cl溶液淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗制的2-二苯基氨基-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(1.0g)，将其向前进行下一步而无需进一步纯化。LCMS:335(M+H)。
[1188] 步骤3：2-(二苯基氨基)-3-羟基吡啶-4-甲醛
[1189]
[1190] 在0℃向粗制的2-二苯基氨基-3-甲氧基甲氧基-吡啶-4-甲醛(1.0g,2.991mmol)在DCM(5mL)中的经搅拌溶液中加入10％TFA-DCM(15mL)。在室温搅拌反应混合物1h后，减压蒸发挥发物。将由此得到的粗品用水(15mL)稀释并用碳酸钾碱化至pH约10且用MTBE洗涤。将含水部分用柠檬酸中和并用10％IPA-DCM(2×100mL)
萃取。将有机层分出，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到2-二苯基氨基-3-羟基-吡
1
啶-4-甲醛(0.5g)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.56(s,1H),10.27(s,1H),8.02(d,J＝4.8Hz,1H),7.42(d,J＝4.9Hz,1H),7.26(t,J＝7.8Hz,4H),7.02(t,J＝
7.2Hz,2H),6.90(d,J＝7.9Hz,4H)；LCMS:291(M+H)。
萃取。将有机层分出，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到2-二苯基氨基-3-羟基-吡
1
啶-4-甲醛(0.5g)，其为橙色固体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.56(s,1H),10.27(s,1H),8.02(d,J＝4.8Hz,1H),7.42(d,J＝4.9Hz,1H),7.26(t,J＝7.8Hz,4H),7.02(t,J＝
7.2Hz,2H),6.90(d,J＝7.9Hz,4H)；LCMS:291(M+H)。
[1191] 步骤4：4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2-(二苯基氨基)吡啶-3-醇
[1192]
[1193] 向2-二苯基氨基-3-羟基-吡啶-4-甲醛(0.5g,1.722mmol)在三氟乙醇(4mL)和乙腈(4mL)的混合溶剂中的溶液中加入3-氯-4-氟苯胺(0.25g,1.722mmol)并将混合物在室温搅拌5h。将反应物料减压蒸发至干，得到4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲1
基)-2-(二苯基氨基)吡啶-3-醇(0.7g)，其为淡红棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.74(s,1H),9.06(s,1H),8.02(d,J ＝ 4.9Hz,1H),7.86-7.84(m,1H),7.53-7.49(m,2H),7.47(d,J＝5.0Hz,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,4H),7.00(t,J＝7.3Hz,2H),6.89(d,J＝
7.9Hz,4H)。
基)-2-(二苯基氨基)吡啶-3-醇(0.7g)，其为淡红棕色液体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.74(s,1H),9.06(s,1H),8.02(d,J ＝ 4.9Hz,1H),7.86-7.84(m,1H),7.53-7.49(m,2H),7.47(d,J＝5.0Hz,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,4H),7.00(t,J＝7.3Hz,2H),6.89(d,J＝
7.9Hz,4H)。
[1194] 步骤5：N3-(3-氯-4-氟苯基)-N7,N7-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺[1195]
[1196] 在室温向4-(((3-氯-4-氟苯基)亚氨基)甲基)-2-(二苯基氨基)吡啶-3-醇(0.7g,1.675mmol)在三氟乙醇(5mL)和二氯甲烷(5mL)的混合溶剂中的
经搅拌溶液中加入TMSCN(1.09mL,8.711mmol)并在环境温度搅拌16h。反应完成后，蒸发溶剂并将由此得到物质先后通过柱色谱和用乙醚(ether)/戊烷研磨来纯化，得
3 7 7
到N-(3-氯-4-氟苯基)-N,N-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺(0.15g)，
1
其 为 棕 色固 体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.82(d,J ＝ 5.1Hz,1H),7.27(t,J ＝
7.8Hz,4H),7.14(t,J ＝ 9.0Hz,1H),7.05-7.01(m,3H),6.93(d,J ＝ 7.8Hz,4H),6.72(d,J＝5.0Hz,1H),6.67(bs,2H),6.59(dd,J’＝6.3Hz,J”＝ 2.5Hz,1H),6.49-6.44(m,1H)；
LCMS:445(M+H)。
经搅拌溶液中加入TMSCN(1.09mL,8.711mmol)并在环境温度搅拌16h。反应完成后，蒸发溶剂并将由此得到物质先后通过柱色谱和用乙醚(ether)/戊烷研磨来纯化，得
3 7 7
到N-(3-氯-4-氟苯基)-N,N-二苯基呋喃并[2,3-c]吡啶-2,3,7-三胺(0.15g)，
1
其 为 棕 色固 体。H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.82(d,J ＝ 5.1Hz,1H),7.27(t,J ＝
7.8Hz,4H),7.14(t,J ＝ 9.0Hz,1H),7.05-7.01(m,3H),6.93(d,J ＝ 7.8Hz,4H),6.72(d,J＝5.0Hz,1H),6.67(bs,2H),6.59(dd,J’＝6.3Hz,J”＝ 2.5Hz,1H),6.49-6.44(m,1H)；
LCMS:445(M+H)。
[1197] 实施例29
[1198] N3-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺(化合物248)的合成
[1199]
[1200] 步骤1：(2-溴苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷
[1201]
[1202] 在0℃向K2CO3(9.56g,69.17mmol)在丙酮(40mL)中的经搅拌悬浮液中加入2-溴苯硫酚(10.0g,53.21mmol)并将反应混合物在相同温度搅拌20-30min，然后滴加溴乙醛缩二乙醇(11.5g,58.33mmol)并将反应物料在25℃搅拌18h。通过TLC监测反应，反应完成后，减压除去挥发物得到浓缩的物料，将其用水稀释，用乙酸乙酯(3×150mL)萃取，将合并的有机层先后用水和盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用5％乙酸乙酯/己烷混合物作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到(2-溴
1
苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷(15.6g)，其为淡黄色油状物。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.49(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.32(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.21(t,J ＝ 7.6Hz,1H),6.98(t,J＝ 7.6Hz,1H),4.67(t,J ＝ 5.5Hz,1H),3.65(q,J ＝ 6.9Hz,2H),3.52(q,J ＝
6.8Hz,2H),3.12(d,J＝6.0Hz,2H),1.17(t,J＝6.9Hz,6H)。
1
苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷(15.6g)，其为淡黄色油状物。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.49(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.32(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.21(t,J ＝ 7.6Hz,1H),6.98(t,J＝ 7.6Hz,1H),4.67(t,J ＝ 5.5Hz,1H),3.65(q,J ＝ 6.9Hz,2H),3.52(q,J ＝
6.8Hz,2H),3.12(d,J＝6.0Hz,2H),1.17(t,J＝6.9Hz,6H)。
[1203] 步骤2：7-溴苯并[b]噻吩
[1204]
[1205] 在130℃向PPA(42.22g)在氯苯(100mL)中的经搅拌溶液中滴加(2-溴苯基)(2,2-二乙氧基乙基)硫烷(26.2g,86.185mmol)在氯苯(20mL)中的溶液并将反应物料搅拌4h。反应完成后，将反应混合物冷却下来至室温并倾析有机溶剂且将其放在一边。将残余物用甲苯(3×100mL)萃取并将合并的有机层减压蒸发，得到粗物料，将其通过使用2％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到7-溴苯并[b]噻吩
1
(12.7g,59.62mmol)，其为无色液体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.76(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
0.9Hz,1H),7.50-7.47(m,2H),7.42(d,J＝5.5Hz,1H),7.23(t,J＝7.8Hz,1H)。
1
(12.7g,59.62mmol)，其为无色液体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.76(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
0.9Hz,1H),7.50-7.47(m,2H),7.42(d,J＝5.5Hz,1H),7.23(t,J＝7.8Hz,1H)。
[1206] 步骤3：3,7-二溴苯并[b]噻吩
[1207]
[1208] 在0℃将N-溴代琥珀酰亚胺(5.73g.32.2mmol)慢慢加至7-溴苯并[b]噻吩(5.28g,24.78mmol)在氯仿(25mL)和乙酸(25mL)中的经搅拌溶液中。将所得反应混合物在25℃搅拌24h。通过TLC监测反应，反应完成后，将反应混合物用饱和Na2S2O3溶液(20mL)、NaHCO3(20mL)和水(10mL)洗涤。将有机部分以无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，将其通过使用己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到3,7-二溴苯并[b]噻吩
1
(4.7g,16.135mmol)，其为白色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.80(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
0.9Hz,1H),7.57(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(s,1H),7.36(t,J＝7.8Hz,1H)。
1
(4.7g,16.135mmol)，其为白色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.80(dd,J’＝8.2Hz,J”＝
0.9Hz,1H),7.57(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(s,1H),7.36(t,J＝7.8Hz,1H)。
[1209] 步骤4：3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩
[1210]
[1211] 在5-10℃向3,7-二溴苯并[b]噻吩(4.7g,16.09mmol)在乙酸酐(30mL)中的经搅拌溶液中先后滴加发烟HNO3和乙酸(3.2g,53.9mmol)。将反应混合物在相同温度搅拌2h，然后用冰-水淬灭，固体析出，过滤并用水洗涤，真空干燥，得到粗物料，将其通过使用DCM/己烷的重结晶来纯化，得到3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩(1.63g,4.839mmol),，
1
其为黄色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ8.02(d,J ＝ 8.2Hz,1H),7.79(d,J ＝
7.8Hz,1H),7.49(t,J＝8.0Hz,1H)。
1
其为黄色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ8.02(d,J ＝ 8.2Hz,1H),7.79(d,J ＝
7.8Hz,1H),7.49(t,J＝8.0Hz,1H)。
[1212] 步骤4：7-溴-N-(3-氯苯基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺
[1213]
[1214] 在室温向3,7-二溴-2-硝基苯并[b]噻吩(0.6g,1.78mmol)在DMF(5mL)中的经搅拌溶液中加入3-氯苯胺(0.681g,5.34mmol)。将反应混合物在80℃搅拌
2h.反应完成后，将反应物料用冰-水淬灭，固体析出，过滤并用水洗涤，得到湿固体，将其在热风炉下干燥，得到所期望的产物7-溴-N-(3-氯苯基)-2-硝基苯并[b]噻
吩-3-胺(0.250g,0.652mmol)，其为黄色固体。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ9.88(s,1H),
7.65(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.38-7.29(m,3H),7.18-7.15(m,2H),7.04(t,J ＝ 8.0Hz,1H)；
HRMS:380.910(M-H)。
2h.反应完成后，将反应物料用冰-水淬灭，固体析出，过滤并用水洗涤，得到湿固体，将其在热风炉下干燥，得到所期望的产物7-溴-N-(3-氯苯基)-2-硝基苯并[b]噻
吩-3-胺(0.250g,0.652mmol)，其为黄色固体。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ9.88(s,1H),
7.65(d,J ＝ 7.8Hz,1H),7.38-7.29(m,3H),7.18-7.15(m,2H),7.04(t,J ＝ 8.0Hz,1H)；
HRMS:380.910(M-H)。
[1215] 步骤5：N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺
[1216]
[1217] 在室温向7-溴-N-(3-氯苯基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺(0.25g,0.651mmol)和2-甲基-4-吡啶基硼酸(0.116g,0.847mmol)在DMF(5mL)和H2O(1mL)混合物中的经搅拌溶液中加入K3PO4(0.415g,1.955mmol)和Pd(PPh3)4(0.075g,0.065mmol,10mol％)。将所得反应混合物在100℃搅拌2h，通过TLC监测反应的完成。反应完成后，将反应物料冷却至室温，经硅藻土床过滤并将滤液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，用盐水洗涤，以硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗物料，将其通过使用15％EtOAc/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱来纯化，得到N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺(0.07g,0.176mmol)，1
其为淡红色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ9.93(s,1H),8.67(d,J＝5.3Hz,1H),7.56-
7.51(m,2H),7.48(d,J ＝ 5.0Hz,1H),7.40-7.34(m,2H),7.32-7.28(m,3H),7.19(d,J ＝
7.6Hz,1H),2.75(s,3H)；HRMS:396.057(M+H)。
3
其为淡红色固体。H-NMR(400MHz,CDCl3):δ9.93(s,1H),8.67(d,J＝5.3Hz,1H),7.56-
7.51(m,2H),7.48(d,J ＝ 5.0Hz,1H),7.40-7.34(m,2H),7.32-7.28(m,3H),7.19(d,J ＝
7.6Hz,1H),2.75(s,3H)；HRMS:396.057(M+H)。
3
[1218] 步骤6：N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺
[1219]
[1220] 在氮气下在室温向N-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯并[b]噻吩-3-胺(0.06g,0.152mmol)在甲醇(5mL)中的经搅拌溶液中加入活性Pd/C(0.02g,10％Pd/炭)，然后用氢气气球替代氮气并在环境温度继续搅拌2h。反应完成后，将反应混合物经硅藻土床过滤，用甲醇洗涤并将滤液减压蒸发，得到粗物料，将其通过使用戊烷研磨来纯化，得到N3-(3-氯苯基)-7-(2-甲基吡啶-4-基)苯并[b]噻吩-2,3-二胺(0.02g,0.054mmol,36％)，其为灰白色固体。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.53(d,J＝
5.3Hz,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝4.8Hz,1H),7.40(s,1H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),7.10-7.06(m,1H),7.04-6.99(m,2H),6.55(d,J＝7.8Hz,1H),6.45(d,J＝8.0Hz,1H),6.42(s,1H),5.98(s,2H),2.52(s,3H)；HRMS:366.08(M+H)。
5.3Hz,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝4.8Hz,1H),7.40(s,1H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),7.10-7.06(m,1H),7.04-6.99(m,2H),6.55(d,J＝7.8Hz,1H),6.45(d,J＝8.0Hz,1H),6.42(s,1H),5.98(s,2H),2.52(s,3H)；HRMS:366.08(M+H)。
[1221] 按照程序A-K制备本发明化合物且本文所述的实施例1-29列于下文表1中。
[1222] 表1
[1223]
[1224]
[1225]
[1226]
[1227]
[1228]
[1229]
[1230]
[1231]
[1232]
[1233]
[1234]
[1235]
[1236]
[1237]
[1238]
[1239]
[1240]
[1241]
[1242]
[1243]
[1244]
[1245]
[1246]
[1247]
[1248]
[1249]
[1250]
[1251]
[1252]
[1253]
[1254]
[1255]
[1256]
[1257]
[1258]
[1259]
[1260]
[1261]
[1262]
[1263]
[1264]
[1265]
[1266]
[1267]
[1268]
[1269] 表2为可按照本文所述程序制备的本发明化合物的非详尽名单。
[1270] 表2
[1271]
[1272]
[1273]
[1274]
[1275]
[1276]
[1277]
[1278]
[1279]
[1280]
[1281]
[1282]
[1283]
[1284]
[1285]
[1286]
[1287]
[1288]
[1289]
[1290]
[1291]
[1292]
[1293]
[1294]
[1295] 本领域技术人员将会认识到可如本文所述并通过本领域已知的方法制备本发明化合物
[1296] 实施例30
[1297] A.体外IDO1酶(吲哚胺2,3-双加氧酶)测定
[1298] 人吲哚胺2,3-双加氧酶1(hIDO1)催化色氨酸的吲哚核的吡咯环的氧化裂解，得到N-甲酰基犬尿氨酸，通过甲酰化可将其转化成犬尿氨酸(KYN)。从大肠杆菌细胞表达和纯化的具有N末端组氨酸标签(His tag)的hIDO1得自Enzo LifeSciences,NY,USA。除非另有说明，否则所有材料均得自Sigma Aldrich,MO,USA。
[1299] 监测L-色氨酸转化成KYN的测定法如下进行。在抗坏血酸(20mM)、亚甲基蓝(10μM)和过氧化氢酶(100μg/mL)存在下，将hIDO1(10nM)与色氨酸(30μM)在磷酸钾缓冲液(50mM；pH 6.5)中在37℃温育30min。用30％三氯乙酸(TCA)终止反应并在65℃再温育15min以使N-甲酰基犬尿氨酸完全转化成KYN。然后将反应混合物离心除去沉积物并通过使用配有C-18柱的Waters HPLC系统在360nm的紫外-可见吸收光谱或者通过LC/MS/MS估计上清液中的KYN。参见Sono,1980,J.Biol.Chem.,255:1339-1345，通过引用的方式将其并入本文。
[1300] 通过参照具有1％DMSO媒介物的反应对照估计KYN的减少来确定在测试化合物的各浓度的抑制百分比。使用非线性回归分析数据以使用Graph Pad 5产生IC50值。测试化合物抑制IDO1活性并降低如下表3所示的犬尿氨酸途径代谢物KYN的水平。
[1301] B.基于HeLa细胞的IDO1(吲哚胺2,3-双加氧酶)测定
[1302] HeLa细胞得自ATCC并保存在补充有碳酸氢钠(2.1g/L)、HEPES(4.1g/L)、L-谷氨酰胺(2mM)、非必需氨基酸(84mg/L)和胎牛血清(10％FBS)的DMEM中且在95％湿度和5％CO2在37℃温育器中保存。除非另有说明，否则所有材料均得自Sigma。一旦用γ-干扰素(IFNγ)温育后，HeLa细胞表达IDO1，其催化由生长介质中存在的色氨酸形成N-甲酰基犬尿氨酸。所述测定如下进行：
[1303] 以密度为10万个/孔共计48孔板，将细胞置于培养基(300μL)中，并通过用IFNγ(50ng/mL)(Peprotech,USA)过夜处理诱导hIDO1。翌日，洗涤细胞除去IFNγ并在含有80μM L-色氨酸的汉克平衡盐溶液(HBSS)中与特定浓度的测试化合物(通常10μM至1nM，最终体积300μL)温育。温育后，将上清液(150μL)转移至96孔板中，向其中加入30％TCA(30μL)并将内容物在65℃再温育15min以使N-甲酰基犬尿氨酸完全转化成犬尿氨酸。然后将反应混合物离心除去沉积物并通过使用配有C-18柱的Waters HPLC系统在360nm的紫外-可见吸收光谱估计上清液中的KYN。(Xiangdong Liu et al.Blood2010,Vol-117,3520-30；上文所述Sono)。
[1304] 通过参照具有1％DMSO媒介物的反应对照估计KYN的减少来确定在测试化合物的各浓度的抑制百分比。使用非线性回归分析数据以使用Graph Pad 5产生IC50值。测试化合物抑制IDO1并降低犬尿氨酸途径代谢物KYN(表3)。
[1305] 表3
[1306] A:IC50<200nM；B:IC50＝200至1000nM；C:IC50>1000nM。
[1307] 酶(Enz)＝IDO1酶测定，细胞(Cell)＝HeLa细胞测定
[1308]
[1309]
[1310] C.基于CHO-K1细胞的TDO(色氨酸2,3-双加氧酶)测定
[1311] 人TDO(hTDO)转染的CHO-K1细胞用于鉴定抑制TDO活性并减少犬尿氨酸产生的测试化合物。将CHO-K1细胞(ATCC)在补充有碳酸氢钠(2.1g/L)、HEPES(4.1g/L)、L-谷氨酰胺(2mM)、非必需氨基酸(84mg/L)和胎牛血清(10％)的DMEM中培养并在95％湿度和5％CO2在37℃温育器中保存。TDO基因(TDO2)(登录号Accession number NM_005651.1)购自Origene(USA)且使用表达载体pcDNA4/Myc-HisB Hygro(Life Technologies,USA)稳定地表达于CHO-K1细胞中。基于由细胞产生的犬尿氨酸鉴定表达TDO的克隆。扩大的克隆用于如下所述的测定。除非另有说明，否则所有材料均得自Sigma。
[1312] 将hTDO转染的CHO-K1细胞(5万个/孔)接种于96孔板中并在含有10％FBS(200μL)的DMEM中在95％湿度和5％CO2在37℃温育器中保存过夜。翌日，洗涤细胞并在含有80μM L-色氨酸的汉克平衡盐溶液(HBSS)中与测试化合物(通常31μM至10nM，最终体积150μL)温育2小时。将来自细胞的上清液(150μL)用30％TCA(30μL)处理以析出蛋白质。将上清液在65℃再温育15min以使N-甲酰基犬尿氨酸转化成犬尿氨酸。
通过使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS测量上清液中的KYN。
通过使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS测量上清液中的KYN。
[1313] 通过与反应对照(DMSO媒介物)相比测量KYN的减少来确定测试化合物的抑制百分比。如上所述使用Graph Pad 5计算IC50值。化合物抑制细胞培养系统中的TDO活性并降低犬尿氨酸途径代谢物KYN的水平，如下表4所示。
[1314] 表4
[1315] A:IC50<500nM；B:IC50＝500至2000nM；C:IC50>2000nM_hTDO细胞测定
[1316]
[1317]
[1318] D.体外IDO2酶(吲哚胺2,3-双加氧酶2)测定
[1319] 人吲哚胺2,3-双加氧酶-21(hIDO2)催化色氨酸的吲哚核的吡咯环的氧化裂解，得到N-甲酰基犬尿氨酸，通过甲酰化可将其转化成犬尿氨酸(KYN)。具有C末端组氨酸标签的hIDO2(Sino Biological Inc(China))在大肠杆菌细胞中表达并使用本领域公知的标准方法纯化蛋白质。除非另有说明，否则所有材料均得自Sigma Aldrich,MO,USA。
[1320] 监测L-色氨酸转化成KYN的测定法如下进行。在抗坏血酸(20mM)、亚甲基蓝(10μM)和过氧化氢酶(100μg/mL)存在下，将hIDO2(160nM)与色氨酸(5000μM)在磷酸钾缓冲液(100mM；pH 7.5)中在37℃温育30min。用30％三氯乙酸(TCA)终止反应并在65℃再温育15min以使N-甲酰基犬尿氨酸完全转化成KYN。然后将反应混合物离心除去沉积物，并通过使用配有C-18柱的Waters HPLC系统在360nm的紫外-可见吸收光谱或者通过LC/MS/MS估计上清液中的KYN(C.J.D Austin et.al,Amino Acid 2009,565-578)。
[1321] 通过参照具有1％DMSO媒介物的反应对照确定KYN的减少来确定在测试化合物的各浓度的抑制百分比。使用非线性回归分析数据以使用Graph Pad 5产生IC50值。化合物2和184如上所述进行测试。化合物2和184抑制IDO2活性，IC50小于1uM，并降低犬尿氨酸途径代谢物KYN的水平(表5)。
[1322] 表5
[1323] A:IC50<1000nM；B:IC50＝1000至2000nM；C:IC50>2000nM
[1324] IDO2酶测定
[1325]
[1326] 如本文实施例30和表3-5所述，本发明化合物抑制IDO1或IDO2或TDO中的一种或多种。
[1327] 实施例31
[1328] C57BL/6小鼠中LPS诱导的血浆犬尿氨酸水平的降低
[1329] 炎性介质诸如脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFNg)为公认的IDO1表达的诱导物。腹膜内(i.p.)给予细菌脂多糖(LPS)在LPS给药后一天内诱导多个组织中的峰IDO1活性，导致犬尿氨酸产生并释放至血流(Takikawa,O.,et al.(1986)J.Biol.Chem.261:3648-53；Yoshida,H.,et al.(1998)Cell 94:739-750)。注射LPS的小鼠已被用作研究IDO1表达和活性的模型。以6mg/kg浓度向3-8只进食的C57BL/6小鼠(7-8周龄，重量：约20-22g)腹膜内注射细菌脂多糖(LPS；26:B6Sigma)。然后将动物安置在正常条件中20小时，此时以在生理盐水(投药量10mL/kg)中含有30％聚乙二醇400(PEG 400)和20％丙二醇(PG)的制剂形式口服给予测试化合物。在以下时间经眼眶后采血流入含有100mM EDTA的血浆采集管中：正要LPS处理之前，正要投予测试化合物之前(0小时)，然后在投予测试化合物后2小时、4小时、6小时、8小时、24小时和48小时。使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS确定血浆KYN和药物水平。
[1330] 如上所述测试化合物且数据示于表6中。使用注射LPS的小鼠模型的体内药效学研究显示本发明化合物在体内抑制IDO1的活性并降低血浆犬尿氨酸代谢物KYN水平。
[1331] 表6
[1332] A>50％，B>25％<50％，C<25％
[1333]编号 活性 生理盐水(NS)中的配方
2 A 30％PEG&30％PG
26 A 25％DACM&37.5％PG
58 A 30％PEG&20％PG
59 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
92 A 30％PEG&20％PG
95 B 30％PEG&30％PG
96 A 30％PEG&20％PG
97 A 30％PEG&20％PG
101 A 30％PEG&20％PG
103 A 30％PEG&30％PG
117 B 30％PEG&20％PG
121 C 40％PEG&20％PG
140 A 30％PEG&30％PG
142 A 30％PEG&30％PG
147 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
149 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
154 A 15％CrEL,&15％EtOH
158 A 30％PEG&20％PG
164 A 30％PEG&20％PG
166 A 30％PEG&20％PG
169 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
170 B 40％PEG,20％PG&10％DACM
171 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
171 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
177 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
180 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
181 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
183 A 15％CrEL&15％EtOH
184 A 30％PEG&20％PG
188 A 30％PEG&20％PG
190 B 30％PEG&20％PG
192 A 40％PEG&20％PG
198 A 40％PEG&20％PG
204 B 40％PEG&20％PG
207 A 40％PEG&20％PG
208 A 40％PEG&20％PG
213 B 40％PEG&20％PG
234 B 30％PEG&20％PG
240 A 30％PEG&20％PG
2 A 30％PEG&30％PG
26 A 25％DACM&37.5％PG
58 A 30％PEG&20％PG
59 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
92 A 30％PEG&20％PG
95 B 30％PEG&30％PG
96 A 30％PEG&20％PG
97 A 30％PEG&20％PG
101 A 30％PEG&20％PG
103 A 30％PEG&30％PG
117 B 30％PEG&20％PG
121 C 40％PEG&20％PG
140 A 30％PEG&30％PG
142 A 30％PEG&30％PG
147 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
149 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
154 A 15％CrEL,&15％EtOH
158 A 30％PEG&20％PG
164 A 30％PEG&20％PG
166 A 30％PEG&20％PG
169 A 10％CrEL,10％EtOH&20％PG
170 B 40％PEG,20％PG&10％DACM
171 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
171 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
177 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
180 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
181 A 40％PEG,20％PG&10％DACM
183 A 15％CrEL&15％EtOH
184 A 30％PEG&20％PG
188 A 30％PEG&20％PG
190 B 30％PEG&20％PG
192 A 40％PEG&20％PG
198 A 40％PEG&20％PG
204 B 40％PEG&20％PG
207 A 40％PEG&20％PG
208 A 40％PEG&20％PG
213 B 40％PEG&20％PG
234 B 30％PEG&20％PG
240 A 30％PEG&20％PG
[1334] 实施例32
[1335] A.体内测试KYN途径抑制剂的抗肿瘤活性
[1336] 如下所述，在同系CT26/Balb/C肿瘤模型中评价由测试化合物引起的肿瘤体积减小。Balb/c小鼠购自Vivo Bio Tech,Hyderabad,India，并使用由Citizen Industries Limited,Ahmedabad,India生产的单独通风笼系统安置于无菌条件中。实验前将小鼠检疫隔离至少7天。
[1337] 将小鼠结直肠肿瘤形成细胞，即CT-26细胞(ATCC,USA)，在补充有1X非必需氨基酸(HiMedia)的DMEM和10％FBS培养基中在37℃以95％湿度和5％CO2培养。在第1天将悬浮于0.2ml 1X FBS中的100万(1X 106)活的同系CT-26细胞皮下注射于处于麻醉下的每个Balb/c小鼠(6-8周龄，重量：约18-20g)的右胁腹。每个实验组使用8-10只小鼠。皮下细胞形成局部肿瘤。每天两次目视检查动物。使用游标卡尺在注射后7天开始肿瘤测量。第7天的肿瘤大小范围通常为80-150mm3。随后每3至4天测量肿瘤尺寸并确定肿瘤大小。假设肿瘤为椭球体，使用下式计算肿瘤体积：
[1338] V＝(D x d x d)/2
[1339] 其中D为以mm计的最长直径，而d为以mm计的最短直径。
[1340] 当小鼠的平均肿瘤体积达到100-120mm3时，将荷瘤小鼠随机用测试化合物或媒介物单独处理。测试化合物通常在pH 4.5-5.0含有聚乙二醇(PEG400)、丙二醇(PG)和二甲基乙酰胺(DACM)的生理盐水中配制并以40-75mg/kg范围(投药体积-5mL/kg)每天两次投予。在向动物投药之前立即制备化合物的溶液。通常，从第1天至第34天在投药后的不同时间测量肿瘤体积。
[1341] 本发明提供了非限制性实例。将荷瘤小鼠以40mg/kg体重每天两次口服投予媒介物对照或在30％聚乙二醇(PEG-400)、20％丙二醇(PG)在生理盐水中配制的测试化合物2。在如上所述第一次投药后第1、4、6、9、11和14天测量肿瘤并确定肿瘤体积。在第14天处死动物。收获肿瘤和血液样品用于进一步分析。正要处死动物之前，眼眶后采血至含有
0.2％EDTA的血浆采集管中。将收获的肿瘤称重并立即速冻在液氮中。使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS测量血浆KYN浓度的药物动力学分析。
0.2％EDTA的血浆采集管中。将收获的肿瘤称重并立即速冻在液氮中。使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS测量血浆KYN浓度的药物动力学分析。
[1342] 与对照媒介物处理的动物相比，历时14天，在化合物2处理的动物中，化合物2显著降低肿瘤生长(图1(a))。类似地，与对照动物相比，投予化合物97、166和184的小鼠肿瘤生长下降26％-38％(图1(b)-1(d))。与对照动物相比，在化合物处理的动物中，血浆KYN水平下降40-50％(数据未示出)。
[1343] B.与化疗的组合疗法
[1344] 在上述小鼠同系肿瘤模型中评价测试化合物在与化疗剂多柔比星(DOXO、Sterling Biotech,India)的组合疗法中的效能。
[1345] 如较早所述，荷瘤Balb/c小鼠随机接受单独的媒介物、单独的测试化合物、单独的DOXO或测试化合物与DOXO的组合。在第1天将DOXO处理上肢的动物腹膜内注射在生理盐水中配制的DOXO(7.5mg/kg)。5天后，在测试时段直至实验结束期间，对动物每天两次口服单独投予测试化合物或媒介物。在第一次投予DOXO后约3周向DOXO处理的动物给予第二次较小剂量的3或4mg/Kg的DOXO。如上所述在动物中测量肿瘤体积。
[1346] 非限制性实例如下。测试化合物97在40％PEG、20％PG、10％DACM在生理盐水中配制。从给予第一DOXO剂量后第5天直至第35天研究结束，动物每天两次口服投予化合物97(75mg/kg)。3周后，DOXO处理的动物腹膜内注射第二剂量DOXO(3mg/kg)。如上所述监测肿瘤体积。最终测试化合物剂量后4小时从小鼠中收获肿瘤组织和最终血液样品。如前所述将肿瘤样品称重并速冻。与单独DOXO或测试化合物相比，用化合物97与DOXO的组合处理的动物显示肿瘤体积减小更多(图2(a))。
[1347] 类似地，第二组实验用在40％PEG、20％PG、10％DACM在生理盐水中配制的测试化合物184进行。如上所述，在研究期间以50mg/kg每天两次对动物口服投予测试化合物184。与单独DOXO或测试化合物相比，用化合物184和DOXO的组合处理的动物显示肿瘤体积减小更多(图2(b))。因此，通过用本发明化合物处理减少肿瘤进展的时间。
[1348] C.组织渗透测定
[1349] i.小鼠中的肿瘤渗透：在同系CT26/Balb/C肿瘤模型中确定测试化合物的肿瘤渗透及经处理的动物的肿瘤和血浆中的KYN水平。简言之，对3-4只荷瘤Balb/c小鼠(肿瘤3
大小＝150-200mm)每天两次口服投予以50mg/kg在羧甲基纤维素(CMC)中配制的测试化合物(例如化合物2)且持续4天。媒介物对照与测试化合物一起包括在内。在正要最终投药之前和最终投药后2小时，经眼眶后或心脏末端采集血液样品至含肝素的管中。最终投药后2小时处死动物。收获肿瘤并立即称重。然后将肿瘤速冻在液氮中，粉碎并溶于均质缓冲液(冷冻的乙腈/水/甲酸(10:90:0.1v/v/v)中以提取测试化合物和犬尿氨酸，即KYN。
大小＝150-200mm)每天两次口服投予以50mg/kg在羧甲基纤维素(CMC)中配制的测试化合物(例如化合物2)且持续4天。媒介物对照与测试化合物一起包括在内。在正要最终投药之前和最终投药后2小时，经眼眶后或心脏末端采集血液样品至含肝素的管中。最终投药后2小时处死动物。收获肿瘤并立即称重。然后将肿瘤速冻在液氮中，粉碎并溶于均质缓冲液(冷冻的乙腈/水/甲酸(10:90:0.1v/v/v)中以提取测试化合物和犬尿氨酸，即KYN。
[1350] 与对照媒介物处理的动物相比，测试化合物处理的动物中的血浆和肿瘤组织KYN水平下降(表7)。例如，化合物2和97各自使肿瘤KYN水平下降81％。投药后2小时，与单独投予媒介物的对照动物相比，用化合物2或97处理的动物中的血浆KYN水平分别下降62％和67％。通过使用API 4000或API5500Qtrap质谱的LC/MS/MS确定肿瘤组织提取物中测试化合物的浓度。
[1351] 表7
[1352]
[1353] ii.大鼠中的脑渗透：血脑屏障的药物渗透的早期和准确的预测对开发靶向中枢神经系统的药物至关重要。因此，按照本领域公认的方法测试本发明化合物穿透血脑屏障的能力(Giorgetti et al.,(2010)JPET 333:748–757,2010)。简言之，对Sprague-Dawley大鼠(n＝3只/研究时间点)给予单一静脉剂量的在40％PEG和20％PG中以10mg/kg配制的测试化合物2或97。3只大鼠各自用于以下投药后的时间点：0.5小时、1.5小时和3.0小时。首先，在深度麻醉过程中采集血液至肝素化管中，然后处死动物并收获它们的脑。然后将脑在液氮中粉碎并在固定体积的冰冷的均质缓冲液(10％乙腈、0.1％甲酸在水中)中匀浆。使用标准程序从血液中分出血浆。通过使用API 4000或API5500Qtrap质谱的LC/MS/MS确定测试化合物的血浆和脑浓度。将脑重量和缓冲液体积归一化后确定测试化合物2和97的脑/血浆比例。
[1354] 化合物2和97能够穿透血脑屏障进入脑组织(表8)。因此，本发明化合物可用于治疗犬尿氨酸途径-和/或IDO1-和/或IDO2-和/或TDO-相关的脑病。
[1355] 表8
[1356]
[1357] 实施例33
[1358] 诱导T细胞增殖
[1359] 从概念上讲，犬尿氨酸途径代谢物或IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种的免疫抑制效果的降低可导致肿瘤特异性免疫细胞的数量或反应性增加。此外，当与其它治疗剂例如化疗剂(例如多柔比星)和/或免疫调节剂(例如抗CTLA4和/或抗PD-L1和/或抗PD1抗体)组合时，抑制IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种可进一步增加肿瘤反应性免疫细胞的数量或反应性。在下述动物模型中，也可直接和/或间接测量肿瘤反应性免疫细胞的数量和/或活性。测量肿瘤反应性免疫细胞的数量和/或活性的方法是公认的并且可使用本领域技术人员熟悉的技术进行(Current Protocols in Immunology,vol
4,Coligan,J.E.,et al；Immunotherapy of Cancer,Human Press,2006,Disis,M.L.和其中的文献)。以下实验涉及本发明化合物诱导T细胞增殖且降低犬尿氨酸途径代谢物的免疫抑制作用或IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种的活性的能力。
4,Coligan,J.E.,et al；Immunotherapy of Cancer,Human Press,2006,Disis,M.L.和其中的文献)。以下实验涉及本发明化合物诱导T细胞增殖且降低犬尿氨酸途径代谢物的免疫抑制作用或IDO1或IDO2或TDO酶中的一种或多种的活性的能力。
[1360] 通过表达IDO1的树突细胞进行抑制的犬尿氨酸途径抑制剂对T细胞增殖的作用[1361] 通过白细胞除去法从人外周血单核细胞采集单核细胞。然后使用补充有10％FBS6
和2mM的L-谷氨酰胺的RPMI 1640培养基(均来自Invitrogen)以1X10细胞/孔的密
度将单核细胞接种在96孔板中。在37℃过夜培养后贴壁细胞保留在板上。然后将粘附单核细胞用100ng/ml GM-CSF(PeproTech)和(250ng/ml L4(PeproTech)刺激5-7天，随后用来自Salmonella typhimurium(Sigma)的0.5ug/ml LPS和50ng/mL IFNγ(R&D systems)再活化2天与以诱导树突细胞成熟。
和2mM的L-谷氨酰胺的RPMI 1640培养基(均来自Invitrogen)以1X10细胞/孔的密
度将单核细胞接种在96孔板中。在37℃过夜培养后贴壁细胞保留在板上。然后将粘附单核细胞用100ng/ml GM-CSF(PeproTech)和(250ng/ml L4(PeproTech)刺激5-7天，随后用来自Salmonella typhimurium(Sigma)的0.5ug/ml LPS和50ng/mL IFNγ(R&D systems)再活化2天与以诱导树突细胞成熟。
[1362] 树突细胞活化后，将培养基替换为补充有100-200U/ml L-2(ProSpec-Tany5
Technogene)和100ng/mL抗-CD3抗体(PharMingen)、T细胞(-3倍.10细胞/孔)和
测试化合物的连续稀释液的完全的RPMI 1640。再温育2天后，依照制造商的说明书使用比色细胞增殖ELISA试剂盒(Roche Molecular Biochemicals)，通过BrdU掺入测定法测量T细胞增殖。在10μM BrdU标记溶液的存在下将细胞连续培养16-18小时。除去FixDenat溶液并加入100ul/孔抗-BrdU-POD抗体结合物工作溶液。反应在室温进行。然后除去抗体结合物并将细胞用200ul/孔洗涤溶液淋洗3次。最后，加入100ul/孔底物溶液，并在显色(color development)过程中使用显微阅读器(microreader)(Spectra Max Plus,Molecular Devices)获得结果。在不同时间点获得多个读数以确保数据在线性范围内。定期从复制实验中得到数据，并且包括适当的对照。(Terness P,et al.(2002)J.Exp.Med.196(4):447-57；和Hwu P,et al.(2000)J.Immunol.164(7):3596-9)。
Technogene)和100ng/mL抗-CD3抗体(PharMingen)、T细胞(-3倍.10细胞/孔)和
测试化合物的连续稀释液的完全的RPMI 1640。再温育2天后，依照制造商的说明书使用比色细胞增殖ELISA试剂盒(Roche Molecular Biochemicals)，通过BrdU掺入测定法测量T细胞增殖。在10μM BrdU标记溶液的存在下将细胞连续培养16-18小时。除去FixDenat溶液并加入100ul/孔抗-BrdU-POD抗体结合物工作溶液。反应在室温进行。然后除去抗体结合物并将细胞用200ul/孔洗涤溶液淋洗3次。最后，加入100ul/孔底物溶液，并在显色(color development)过程中使用显微阅读器(microreader)(Spectra Max Plus,Molecular Devices)获得结果。在不同时间点获得多个读数以确保数据在线性范围内。定期从复制实验中得到数据，并且包括适当的对照。(Terness P,et al.(2002)J.Exp.Med.196(4):447-57；和Hwu P,et al.(2000)J.Immunol.164(7):3596-9)。
[1363] 实施例34
[1364] 体内TDO测定
[1365] 可使用P815小鼠肿瘤模型确定测试化合物在体内抑制肿瘤内TDO活性的能力(Uyttenhove C,et al.(2003)Nat Med 9:1269–1274；Pilotte L,et al.PNAS 2012)。简言之，P815肿瘤细胞用TDO cDNA转染。将表达TDO的肿瘤细胞腹膜内注射至幼稚同系DBA/2小鼠(Harlan,USA)，从而导致肿瘤生长。如上所述测量肿瘤体积。当在小鼠的平均肿瘤体积3
达到100-120mm时，将荷瘤小鼠随机用测试化合物或媒介物单独处理。测试化合物通常在包含聚乙二醇(PEG400)，丙二醇(PG)和二甲基乙酰胺(DACM)的生理盐水中在pH 4.5-5.0配制，并且每天两次在40-75mg/kg范围(投药体积-5mL/kg)口服给药。在对动物投药之前立即制备化合物的溶液。通常，从投药后第1天至第34天在不同的时间测量肿瘤体积。
如上所述确定肿瘤进展和血浆Kyn水平的下降。
达到100-120mm时，将荷瘤小鼠随机用测试化合物或媒介物单独处理。测试化合物通常在包含聚乙二醇(PEG400)，丙二醇(PG)和二甲基乙酰胺(DACM)的生理盐水中在pH 4.5-5.0配制，并且每天两次在40-75mg/kg范围(投药体积-5mL/kg)口服给药。在对动物投药之前立即制备化合物的溶液。通常，从投药后第1天至第34天在不同的时间测量肿瘤体积。
如上所述确定肿瘤进展和血浆Kyn水平的下降。
[1366] 肝和肿瘤组织匀浆得自用测试化合物或媒介物处理的小鼠。如先前所述使用L-Trp作为底物测定肝和肿瘤TDO活性(Pilotte L,et al.PNAS 2012)，其中活性表示为μmol的每克湿肝重每小时形成的KYN。简言之，肝和肿瘤组织干粒料在50mM磷酸钾缓冲液(pH 7.5)中裂解。150mM KCL、250mM蔗糖、1mM L-色氨酸、10uM牛血红素和蛋白酶抑制剂(完全无EDTA,Roche Applied Science)。首先将提取物在4℃在700 x g离心5min并将上清液在20,000 x g离心15min。然后使用HiTrap脱盐柱(GE Healthcare)将澄清提取物的缓冲液交换成50mM磷酸钾缓冲液(pH 7.5)，并将等分试样在液氮中冷冻且保存在-80℃直至进一步使用。
[1367] 如下测量TDO活性：在测试化合物的存在或不存在下，反应混合物含有(终浓度)50mM磷酸钾缓冲液(pH 7.5)、蛋白酶抑制剂、20mM抗坏血酸，10uM亚甲基蓝、500单位/ml过氧化氢酶(牛肝，Sigma)和L-色氨酸。通过将100ul细胞/组织提取物加至在37℃预热的100ul反应混合物中启动反应。反应在37℃进行10、30、60min，然后通过加入40ul TCA 30％(重量/体积)停止。为了将N-甲酰基犬尿氨酸转化成犬尿氨酸，将反应混合物与125ul 2％(重量/体积)4-(二甲基氨基)苯甲醛在乙酸中的溶液混合，并在室温温育10min。然后将反应混合物离心以除去沉积物，并使用与配有C18柱的Shimadzu Prominence LC系统偶联的API4000质谱(Applied Biosystems)的LC/MS/MS监测上清液。通过估计KYN的减少确定在测试化合物的各浓度的抑制百分比。使用非线性回归分析数据以使用Graph Pad 5产生IC50值。
[1368] 实施例35
[1369] 小鼠模型中LPS诱导的抑郁样行为的抑制剂的体内测试
[1370] 犬尿氨酸途径代谢物的水平增加，独立于免疫活化或IDO1活化，能够在给予增加剂量的外源性L-犬尿氨酸的小鼠中诱导抑郁样行为。已知LPS给药活化IDO1，并最终导致抑郁样行为综合征。在注射LPS的小鼠中，小鼠的抑郁行为特征在于强迫游泳和悬尾测试两者中不动性的持续时间增加。本发明化合物降低血浆KYN水平(实施例31和32；表6和7)。按照本领域公知的方法，在注射LPS的小鼠中测试本发明化合物降低抑郁样行为的能力，显示KYN水平增加和IDO1和/或TDO活性增强(O’Connor et al.Mol.Psychiatry.2009May；14(5):511-522；Porsolt、R.D.Rev Neurosci.2000；11(1):53-8)。
[1371] 行为实验-运动活性(locomotor activity)
[1372] 在单独置于与家笼类似但缺乏垫草或褥草的干净、新的笼中的小鼠中评估LPS对运动活性(LMA)的影响。将笼分成四个虚拟象限，并通过计数线交叉点的数量并饲养5min测量LMA。计数由对治疗/处理不了解的训练有素的观察员完成。
[1373] 行为实验-强迫游泳测试
[1374] 按照本领域公认且已知的方法进行强迫游泳测试(FST)(Porsolt、R.D.Rev Neurosci.2000；11(1):53-8)。简言之，将每只小鼠单独置于含有15cm保持在23+/-1℃的水的圆筒(直径23cm；高31cm)中。在测试期之间换水。将小鼠置于水中6min，然后返回到它们的家笼中。测试期间，从上面视频记录小鼠，并且使用“Observer Basic”软件(Nolus,Netherlands)的可移动性功能，历时测试的最后5min确定不动性的持续时间。简言之，从它们的背景对比识别小鼠并在2个不同的维度进行跟踪，所述表面为可检测对象(小鼠)在预定区域内移动的表面。可移动性被定义为可检测的表面积(小鼠)随时间的位移且以3个采样间隔计算平均值以减少由数字记录中的剧烈运动或丢失帧产生的误差。程序分析设置可为：采样率＝3/s；检测方法＝低阈值为20而高阈值为255且可检测的最小对象大小为200像素的底物化(substration)；图像过滤＝2像素腐蚀和膨胀；3个间隔平均化的可移动性阈值为20％。很好理解的是，本领域技术人员可使用其它设置。
[1375] 行为实验-悬尾测试
[1376] 将小鼠从它们的家笼中取出并将一小片胶带置于靠近尾尖约2厘米。在带上打单孔并将小鼠在与应变仪连接的钩上单独地挂10min的时段。用于处理施加在应变仪上的力的计算机化系统(Mouse Tail Suspension Package,MED-TSS-MS,Med Associates、St.Albans,VT)自动收集并分析每个单独小鼠的移动。在建立每个单独小鼠在活性水平(排除移动而只包括不动)精确设置的阈值之后确定不动的时间。低于阈值的时间表示不动的时间。程序分析设置为：整合(integration)＝开(on)；分辨率(resolution)＝0.1；增益(gain)＝4；启动触发(start rigger)＝20。
[1377] 如下分析行为数据：适当时使用单因素(处理)、双因素(预处理X治疗)或三因素(预处理X处理X时间)ANOVA与对时间因素的重复测量，随后如果相互作用显著，使用Fisher’s LSD方法进行事后成对多重比较法。
[1378] 实施例36
[1379] 人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)脑炎模型中抑制剂的体内测试
[1380] 已知抑制IDO1增强人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)脑炎的动物模型的中枢神经系统中HIV-1病毒感染的巨噬细胞的消除(Potula et al.Blood.(2005)106:2382-2390)。使用此种公认的模型可测试所述测试化合物在神经系统中有效地消除感染的HIV-1巨噬细胞的能力。
[1381] 细胞分离和病毒感染
[1382] 单核细胞和PBL可通过白细胞除去法包(leukopheresis pack)的逆流离心洗脱法(counter current centrifugal elutriation)从补充有10％热灭活的汇集的人血清、1％谷氨酰胺、50ug/ml庆大霉素、10ug/ml环丙沙星(Sigma)和1000U/ml高度纯化的重组人巨噬细胞集落刺激因子的Dulbecco改良的Eagle’s培养基(DMEM,Sigma-Aldrich)中获得。培养7天后，以0.01的感染复数将MDM用HIV-1ADA感染。
[1383] Hu-PBL-NOD/SCID HIVE小鼠
[1384] 4周龄的雄性NOD/C.B-17SCID小鼠可购自诸如Jackson Laboratory(BarHarbor,MN,USA)的来源。动物保持在无病原体条件下无菌微型隔离笼中。所有动物均在PBL移植前3天腹膜内注射大鼠抗-CD122(0.25mg/小鼠)且在PBL注射前1天和注射后3
6
天(20X 10细胞/小鼠)用兔无唾液酸-GM1抗体(0.2mg/小鼠)(Wako)给予两次。PBL
5
重建8天后颅内注射(i.c.)HIV-1ADA感染的MDM(3X10 细胞在10ul)，产生hu-PBL-NOD/SCID HIVE小鼠。紧接着颅内注射HIV-1感染的MDM的hu-NOD/SCID小鼠皮下(s.c.)植入对照(媒介物)或化合物颗粒(14-28天缓慢释放,Innovative research)。设计实验确认通过四聚体染色和脑组织的MDM消除的神经病理性分析在hu-NOD/SCID小鼠中诱导病毒特异性CTL。然后，设计实验分析人淋巴细胞重建、体液免疫应答和神经病理学改变。在这些实验中，在第7天将动物放血，并在颅内注射人MDM后第14天和第21天处死动物。将收集在含EDTA的管中的血液用于流式细胞仪并将血浆用于使用ELISA(Beckman Coulter)检测HIV-1p24。按照制造商的说明(Cambridge Biotech HIV-1Western Blot kit,Calypte Biomedical)通过Western印迹测试检测HIV-1特异性抗体。在对照和化合物处理的动物中检测病毒特异性抗体的相似量。总共3个独立的实验可使用3种不同的人类白细胞供体进行。
6
天(20X 10细胞/小鼠)用兔无唾液酸-GM1抗体(0.2mg/小鼠)(Wako)给予两次。PBL
5
重建8天后颅内注射(i.c.)HIV-1ADA感染的MDM(3X10 细胞在10ul)，产生hu-PBL-NOD/SCID HIVE小鼠。紧接着颅内注射HIV-1感染的MDM的hu-NOD/SCID小鼠皮下(s.c.)植入对照(媒介物)或化合物颗粒(14-28天缓慢释放,Innovative research)。设计实验确认通过四聚体染色和脑组织的MDM消除的神经病理性分析在hu-NOD/SCID小鼠中诱导病毒特异性CTL。然后，设计实验分析人淋巴细胞重建、体液免疫应答和神经病理学改变。在这些实验中，在第7天将动物放血，并在颅内注射人MDM后第14天和第21天处死动物。将收集在含EDTA的管中的血液用于流式细胞仪并将血浆用于使用ELISA(Beckman Coulter)检测HIV-1p24。按照制造商的说明(Cambridge Biotech HIV-1Western Blot kit,Calypte Biomedical)通过Western印迹测试检测HIV-1特异性抗体。在对照和化合物处理的动物中检测病毒特异性抗体的相似量。总共3个独立的实验可使用3种不同的人类白细胞供体进行。
[1385] hu PBL-NOD/SCID HIVE小鼠中外周血和脾的FACScan
[1386] 在颅内注射人MDM后第1-3周可对外周血进行双色FACS分析且在颅内注射人MDM后第2和3周可对脾细胞进行双色FACS分析。将细胞在4℃与对抗CD4、CD、CD56、CD3、IFN-γ的荧光色素结合的单克隆抗体(mAb)(Bioscience)温育30min。为了评价细胞反应，IFN-γ细胞内染色与抗人CD8和结合FITC的抗小鼠CD45组合进行以排除鼠细胞。为了确定抗原特异性CTL，经植物血凝素/IL2(PHA/IL2)刺激的脾细胞进行针对HIV-1gag(p17(aa77-85)SLYNTVATL、SL-9)和HIV-1pol[(a476-485)ILKEPVHGV,L-9]的别藻蓝蛋白结合的四聚体染色。按照NIH/NIAID,National Tetramer Core Facilities的建议，将细胞染色。以使用CellQuest软件(Becton Dickinson Immunocytometry System)的FACS Calibor分析数据。
[1388] 颅内注射MDM后第14天和第21天采集脑组织，固定在4％磷酸盐缓冲的多聚甲醛中并包埋在石蜡中或在-80℃冷冻供以后使用。切割包埋块的冠状面，以便辨别注射部位。对于每个小鼠，从人MDM注射部位切割30-100个(5um厚)连续切片并对3-7片载玻片(10个切片分开)进行分析。将脑切片用二甲苯进行脱蜡并在梯度醇中进行水合。免疫组织化学染色遵循基本的间接实验方案，使用为了抗原修复通过在0.01mol/L柠檬酸缓冲液中加热至95℃且保持30min的抗原修复。要鉴定小鼠脑中人细胞，对抗波形蛋白(Vimentin)的mAb(1:50,克隆3B4,Dako Corp.)，其鉴定所有使用的人白细胞。分别用CD68(1:50稀释，克隆KP 1)和CD8(1:50稀释，克隆144B)抗体检测人MDM和CD8+淋巴细胞。被用对HIV-1p24的mAb(1:10,克隆Kal-1,均来自DAKO)标记病毒感染的细胞。用Iba-1抗体(1:500,Wako)检测反应性鼠小神经胶质细胞。用得自Enzo Lifesciences(USA)和Abcam(USA)的抗体(Ab)使人IDO1(huIDO1)和/或人TDO(huTDO)的表达可视。用适当的生物素化的二级抗体检测一级抗体并用可视化处理抗生物素蛋白-生物素复合物(Vectastain Elite ABC kit,Vector Laboratories)或辣根过氧化酶(HRP)-偶联的葡聚糖聚合物(EnVision,DAKO)使其可见。用苏木紫(Mayer’s hemotoxylin)将免疫染色的切片进行复染。将从其中删除一级抗体或掺入不相关IgG同型的切片用作对照。两个独立观8+ 68+
察者以盲方式计数来自每只小鼠的每个切片的CD 淋巴细胞、CD MDM和HV-1p24细胞的数量。用Nikon Eclipse 800显微镜(Nikon Instruments Inc.)进行光学显微镜检查。半定量分析Iba1(由免疫染色占据的面积的百分比)通过计算机辅助图像分析(Image-Pro.RTM.Plus,Media Cybernetics)进行。
察者以盲方式计数来自每只小鼠的每个切片的CD 淋巴细胞、CD MDM和HV-1p24细胞的数量。用Nikon Eclipse 800显微镜(Nikon Instruments Inc.)进行光学显微镜检查。半定量分析Iba1(由免疫染色占据的面积的百分比)通过计算机辅助图像分析(Image-Pro.RTM.Plus,Media Cybernetics)进行。
[1389] 相比之下，使用Prism(Graph Pad)以斯氏t-检验和ANOVA分析数据。P值<0.5被视为具有显著性。(Potula et al.Blood October 1,2005,vol:106(7)2382-2390)。
[1390] 实施例37
[1391] 已经在阿尔茨海默病受试者的脑的尸体解剖脑切片中观察到IDO1和犬尿氨酸途径代谢物水平增加(Bonda et al.Redox Rep.2010；15(4):161–168)，并也已鉴定出对犬尿氨酸代谢物的循环抗体(Duleu et al.International Journal of Alzheimer’s Disease,vol.2010,Article ID 501541,6pages,2010.doi:10.4061/2010/501541)。使用阿尔茨海默病的动物模型测试所述测试化合物通过抑制犬尿氨酸途径或IDO1或IDO2或TDO中的一种或多种来减少脑中犬尿氨酸途径代谢物的能力。
[1392] 各 种 阿 尔 茨 海 默 病 小 鼠 模 型 动 物 ( 例 如，B6；129-Psen1tm1Mpm Tg(APPSwe,tauP301L)1Lfa/Mmjax、B6C3-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/Mmjax、B6.Cg-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/Mmjax、B6.129-Tg(APPSw)40Btla/
Mmjax、B6.Cg-Nos2tm1Lau Tg(Thy1APPSwDutIowa)BWevn/Mmjax) 可 购 自
Jackson Laboratories,USA。 作 为 非 限 制 性 实 例，可 购 买B6；129-Psen1tm1Mpm Tg(APPSwe,tauP301L)1Lfa/Mmjax小鼠并安置在前述无菌条件中。在约6个月后小鼠发展海马中的神经原纤维缠结并在随后发展皮层的其余神经原纤维缠结。虽然在这些小鼠中尚未报道神经元损失，但是小鼠的认知缺陷在约4月龄显现。
Mmjax、B6.Cg-Nos2tm1Lau Tg(Thy1APPSwDutIowa)BWevn/Mmjax) 可 购 自
Jackson Laboratories,USA。 作 为 非 限 制 性 实 例，可 购 买B6；129-Psen1tm1Mpm Tg(APPSwe,tauP301L)1Lfa/Mmjax小鼠并安置在前述无菌条件中。在约6个月后小鼠发展海马中的神经原纤维缠结并在随后发展皮层的其余神经原纤维缠结。虽然在这些小鼠中尚未报道神经元损失，但是小鼠的认知缺陷在约4月龄显现。
[1393] 如较早实施例所述，以10mg/kg对约6月龄的小鼠随机投予单一静脉内剂量的媒介物对照或在PEG和PG在生理盐水中配制的测试化合物。在一组实验中，测试化合物穿透血脑屏障并通过测试化合物减少血浆犬尿氨酸代谢物的能力。3只大鼠各自用于以下投药后的时间点：0.5小时、1.5小时和3.0小时。如先前所述，在动物中确定脑和血浆药物和KYN水平。确定对犬尿氨酸途径代谢物的循环抗体存在和减少(Duleu et al.International Journal of Alzheimer’s Disease,vol.2010,Article ID501541,6pages,2010.doi:10.4061/2010/501541)。
[1394] 在第二组实验中，测试所述测试化合物对小鼠的认知功能的作用。如先前所述，将经测试化合物和媒介物对照处理的动物均每天两次口服投药且持续8天并进行本领域公知的行为测试(Choi et al.J.Neurochem.2013,124(1)59–68)。
[1395] 简言之，如先前所述，在用测试化合物或媒介物对照处理的小鼠中，使用Morris水迷宫评估空间学习和记忆(McKee et al.Brain Res.2008,1207,225–236)，其与任一的车辆控制或测试化合物处理的小鼠。简言之，将圆形塑料池充满水(22℃)，将水池用无毒白色油漆涂色以掩盖浸没平台的位置。将3个视觉线索(visual cue)置于水箱周围以定向小鼠，其中平台仍保持在固定位置。在训练期间每只小鼠的平台位置保持恒定，并且它在水的表面之下1.5cm。在每一天，训练由五个试验构成。对于每一个试验，将小鼠置于面向来自四个随机变化开始位置中的一个壁的水池中，并使其游泳直至找到平台。如果鼠标未能在60s内找到平台，将小鼠手动引导至隐藏的平台并允许在平台上停留30s。最后一次训练试验后1.5h和24h进行保留空间训练的探测试验。在探测试验期间，移开平台并使小鼠在水池中自由游泳60s。用安装在水池正上方天花板上的照相机监视并记录小鼠用于后续分析。记录越过平台位置的逃避潜伏期，平台的位置交叉的数量和路径长度。确定测试化合物改善认知功能并降低血浆和脑犬尿氨酸代谢物水平的能力。
[1396] 实施例38
[1397] 测试化合物的代谢物的鉴定
[1398] 使用本领域已知的常规技术可鉴定本发明的前药和代谢物。参见例如Bertolini et al.,J.Med.Chem.,40,2011-2016(1997)；Shan,et al.,J.Pharm.
Sci.,86(7),765-767；Bagshawe,Drug Dev.Res.,34,220-230(1995)；Bodor,Advances in Drug Res.,13,224-331(1984)；Bundgaard,Design of Prodrugs(Elsevier
Press 1985)；Larsen,Design and Application of Prodrugs,Drug Design
and Development(Krogsgaard-Larsen et al.,eds.,Harwood Academic
Publishers,1991)；Dear et al.,J.Chromatogr.B,748,281-293(2000)；Spraul et al.,J.Pharmaceutical&Biomedical Analysis,10,601-605(1992)； 和 Prox et al.,Xenobiol.,3,103-112(1992)。
Sci.,86(7),765-767；Bagshawe,Drug Dev.Res.,34,220-230(1995)；Bodor,Advances in Drug Res.,13,224-331(1984)；Bundgaard,Design of Prodrugs(Elsevier
Press 1985)；Larsen,Design and Application of Prodrugs,Drug Design
and Development(Krogsgaard-Larsen et al.,eds.,Harwood Academic
Publishers,1991)；Dear et al.,J.Chromatogr.B,748,281-293(2000)；Spraul et al.,J.Pharmaceutical&Biomedical Analysis,10,601-605(1992)； 和 Prox et al.,Xenobiol.,3,103-112(1992)。
[1399] 通过用冷的或14C标记的化合物与肝微粒体、肝S9部分和肝细胞体外温育鉴定测试化合物的代谢物。使用基于保留时间的HPLC、MS和MS/MS碎片次数和NMR分析鉴定它们。
[1400] A.肝微粒体
[1401] 将测试化合物与来自小鼠的汇集的肝微粒体一起温育。在振荡水浴中在37℃进行温育。温育混合物由以下物质组成：0.1M磷酸钾缓冲液(pH7.4)、0.5mM NADPH、0.5mg/ml肝微粒体蛋白质和20uM测试化合物。在37℃预温育5min后，向温育物中加入测试化合物和NADPH启动温育。60min后，通过加入一体积的冷乙腈将混合物淬灭。将样品涡旋并在14000rpm离心10min。上清液(200ul)的等分试样用于LC/MS/MS分析。
[1402] B.肝S9部分
[1403] 将测试化合物与来自人的汇集的肝S9部分在振荡水浴中在37℃一起温育。温育混合物由以下物质组成：0.1M磷酸钾缓冲液(pH7.4)、0.5mM NADPH、0.5mg/ml肝微粒体蛋白质和20uM测试化合物。在37℃预温育5min后，向温育物中加入测试化合物和NADPH启动温育。2小时后，通过加入一体积的冷乙腈将混合物淬灭。将样品涡旋并在14000rpm离心10min。上清液(200ul)的等分试样用于LC/MS/MS分析。
[1404] C.肝细胞
[1405] 将测试化合物与来自小鼠的汇集的肝细胞在3uM至30uM的浓度温育。温育混合6
物通过以下方式制备：对于在含有10细胞/ml的适量介质(2至5ml)的3uM至30uM温育，
14
分别加入4.5ul/ml 0.67和6.7uM的 C-标记化合物在乙腈中的储备溶液。所有样品在定轨振荡器上在5％CO2气氛下在温育器中在37℃温育3小时。通过加入一体积的冷乙腈将混合物淬灭。将样品涡旋并在14000rpm离心10min。通过液体闪烁法在20ul上清液中测量放射性并将20ul上清液注入HPLC用于代谢物分析(profiling)。
物通过以下方式制备：对于在含有10细胞/ml的适量介质(2至5ml)的3uM至30uM温育，
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分别加入4.5ul/ml 0.67和6.7uM的 C-标记化合物在乙腈中的储备溶液。所有样品在定轨振荡器上在5％CO2气氛下在温育器中在37℃温育3小时。通过加入一体积的冷乙腈将混合物淬灭。将样品涡旋并在14000rpm离心10min。通过液体闪烁法在20ul上清液中测量放射性并将20ul上清液注入HPLC用于代谢物分析(profiling)。
[1406] 还可使用14C标记的测试化合物从来自哺乳动物(包括人)的体内尿液、胆汁、粪便和血浆样品鉴定测试化合物的代谢物。代表性研究述于下文。
[1407] 以100mg/kg，100uCi/kg的目标剂量对6只小鼠口服给予14C标记的测试化合物。在投药前夜在50mM柠檬酸盐缓冲夜中制备投药溶剂并在黑暗中在室温储存。历经投药后
48小时的间隔获得胆汁、尿液和粪便。在投药前并在投药后0.5、1、2、4、8、12、24和48小时采集血液。通过在1000g离心15分钟从血液样品制备血浆。
48小时的间隔获得胆汁、尿液和粪便。在投药前并在投药后0.5、1、2、4、8、12、24和48小时采集血液。通过在1000g离心15分钟从血液样品制备血浆。
[1408] D.胆汁
[1409] 通过合并历时48小时收集的各胆汁样品/小鼠的体积的5％部分制备代表性汇集的胆汁样品。通过向胆汁中加水将汇集的胆汁样品1:1(体积:体积)稀释。将稀释的胆汁在14000离心10min。通过LC/MS/MS分析上清液(20ul等分试样)用于代谢物鉴定。
[1410] E.尿
[1411] 通过合并历时48小时收集的各尿液样品/小鼠的体积的20％部分制备代表性汇集的尿液样品。通过向尿液中加水将汇集的尿液样品1:1(体积:体积)稀释。将稀释的尿液在14600离心10min。通过LC/MS/MS分析上清液(30ul等分试样)用于代谢物鉴定。
[1412] F.血浆
[1413] 通过合并等体积的各时间点收集的来自每只小鼠的血浆样品制备两个汇集的样品(1h和4h)。将汇集的样品各用5ml乙腈/甲醇(50:50，体积)萃取一次并用3ml乙腈/乙醇再萃取两次。用有机溶剂提取后，将提取的样品在5℃以4000rpm离心10min并将来自每个离心步骤的上清液合并。将上清液在室温在N2下蒸发至干。将干燥的残余物重新溶解在350ul 80％/20％含乙腈的水的流动相中。将样品在14000rpm在5℃再次离心10min，将100ul上清液注入LC/MS/MS中用于代谢物鉴定。
[1414] G.粪便
[1415] 通过合并历时48小时收集的各粪便样品/小鼠的体积的5％部分制备代表性汇集的粪便样品。将汇集的粪便样品(1ml)用2ml甲醇/乙腈(50:50体积/体积)萃取。将混合物涡旋，超声处理并在4000rpm离心15min。收集上清液并将粒料用甲醇/乙腈/水(1:1:1v/v/v)再提取两次，合并上清液并在N2下蒸发至干。将干燥的残余物悬浮于0.5ml甲醇/水1:1(v/v)中并在14000rpm离心10min。通过LC/MS/MS分析上清液(60ul等分试样)用于代谢物鉴定。
[1416] 不希望受限于上述示例，但是应当理解的是，在本文所述的方法中，共同给予、组合的各组分可通过任何合适的手段给予，同时(contemporaneously)、同时(simultaneously)、依序、分别、交替或以单一药物制剂形式给予。当共同给予的化合物或组合物以分开的剂型给予时，剂量水平、每天给予每种化合物的剂量的数量可相同或不同。化合物或组合物可通过相同或不同的给药途径给予。化合物或组合物可按照同时或交替方案，在治疗过程中在相同或不同的时间，以分开或单一形式同时给药。
[1417] 本说明书中引用的所有出版物均通过引用的方式并入本文。虽然本发明已经参照具体的实施方案进行描述，应该理解的是，可进行修改而不脱离本发明的精神。这些修改旨在落入所附权利要求的范围之内。
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