内源胆碱能神经递质乙酰胆碱通过两种类型的胆碱能受体表现其 生物学作用，蕈毒碱乙酰胆碱受体(mAChR)和烟碱乙酰胆碱受体 (nAChR)。
完全确定的是蕈毒碱乙酰胆碱受体在对记忆和识别重要的大脑区 域在量上占优势，而且目标在于开发治疗与记忆相关的疾病的药物的 很多研究的焦点集中在蕈毒碱乙酰胆碱受体调节剂的合成。
但是，最近对开发nAChR调节剂的兴趣有所显现。一些疾病与胆碱 能系统变性有关，例如早老性痴呆型老年痴呆，血管痴呆以及直接与 酒精中毒相关的器质性脑损伤疾病引起的认知损伤。
WO 00/58311公开了用作烟碱α7受体亚型的抑制剂的1，4-二氮 杂双环[3.2.2]壬烷一4-羧酸和羧酰胺衍生物。没有公开其他1，4-二氮 杂双环[3.2.2]壬烷-4-甲酮衍生物。
发明概述
本发明涉及提供新的烟碱受体的调节剂，这些调节剂用于治疗与 胆碱能受体、特别是烟碱乙酰胆碱α7受体亚型相关的疾病或障碍。
本发明的化合物还可以用作各种诊断方法中的诊断工具或监测试 剂，特别是在体内受体成像(神经成像)中，并且它们可以以标记的 或没有标记的形式使用。
在其第一方面，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍生物

其对映异构体，或者其对映异构体的混合物，或者其前体药物， 或者其药学可接受的加成盐，其中，
n是1，2或3；和
X和Y彼此独立地代表CR2，CR3和/或N，其中R2和R3彼此独立地代 表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷 基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基，芳基 氧基，芳基-烷基，杂芳基和/或杂芳基氧基，其中芳基，芳基氧基，芳 基-烷基，杂芳基和杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代 烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次， 其中R′代表氢或烷基；和
R1代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基， 氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基， 或杂芳基，其中芳基或杂芳基可以任选地被烷基，卤原子，卤代烷基， 烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢，烷基，环烷基， 卤代烷基，链烯基，苯基或苄基；或者式芳基-烷基-，芳基-Z-(烷基)m-， 芳基-C≡C-，杂芳基-Z-(烷基)m-或杂芳基-C≡C-的基团，其中m是0 或1；并且Z代表O或S；并且其中芳基和杂芳基可以任选地被烷基，卤 原子，卤代烷基，羟基，烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/ 或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团取代一次或两次，其中R′ 代表氢或烷基；或者
R1和R2，或R1和R3和它们所键合的碳原子一起，形成苯并稠合的 芳香碳环，其中苯并稠合的芳香碳环可以任选地被烷基，环烷基，环 烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基， 卤代烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-的基团 取代一次或两次，其中R′代表氢或烷基。
第二方面，本发明提供含有治疗有效量的本发明的二氮杂双环芳 基衍生物或者其药学可接受的加成盐，和至少一种药学可接受载体或 稀释剂的药物组合物。
从另一方面来看，本发明涉及本发明的二氮杂双环芳基衍生物或 者其药学可接受的加成盐用于制备治疗、预防或减轻哺乳动物，包括 人的疾病或障碍或病症的药物组合物/药物中的用途，所述疾病、病 症或状况对胆碱能受体的调节有应答。
另一方面，本发明提供治疗、预防或减轻活动物体，包括人的疾 病、障碍或病症的方法，所述疾病、障碍或病症对胆碱能受体的调节 有应答，该方法包括对有此需要的活动物体施用治疗有效量的本发明 的二氮杂双环芳基衍生物的步骤。
从下面的详细描述和实施例，本发明的其他目的对于本领域技术 人员是显而易见的。
本发明的详细公开
二氮杂双环芳基衍生物
在第一方面，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍生物

其对映异构体，或者其对映异构体的混合物，或者其前体药物， 或者其药学可接受的加成盐，其中，
n是1，2或3；和
X和Y彼此独立地代表CR2，CR3和/或N，其中R2和R3彼此独立地代 表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷 基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基，芳基 氧基，芳基-烷基，杂芳基和/或杂芳基氧基，其中芳基，芳基氧基，芳 基-烷基，杂芳基和杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代 烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次， 其中R′代表氢或烷基；和
R1代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基， 氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基， 或杂芳基，其中芳基或杂芳基可以任选地被烷基，卤原子，卤代烷基， 烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢，烷基，环烷基， 卤代烷基，链烯基，苯基或苄基；或者式芳基-烷基-，芳基-Z-(烷基)m-， 芳基-C≡C-，杂芳基-Z-(烷基)m-或杂芳基-C≡C-的基团，其中m是0 或1；并且Z代表O或S；并且其中芳基和杂芳基可以任选地被烷基，卤 原子，卤代烷基，羟基，烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/ 或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团取代一次或两次，其中R′ 代表氢或烷基；或者
R1和R2，或R1和R3和它们所键合的碳原子一起，形成苯并稠合的 芳香碳环，其中苯并稠合的芳香碳环可以任选地被烷基，环烷基，环 烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基， 卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-的基团取代一次或 两次，其中R′代表氢或烷基。
在优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍生物， 其中
X代表CR3或N，其中R3代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，烷氧 基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，CF3，OCF3，CN，氨基，硝基，芳基，芳基 氧基，杂芳基或杂芳基氧基；
R1和R2各自独立地代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，烷氧基， 环烷氧基，氰基烷基，卤原子，CF3，OCF3，CN，氨基，硝基，芳基，芳基氧 基，杂芳基或杂芳基氧基；或者
R1和R2和它们所键合的碳原子一起形成苯并稠合的芳香碳环。
在优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍生物， 其中
X和Y各自独立地代表CR2或N，其中R2代表氢，烷基，环烷基， 环烷基-烷基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤 代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基， 其中芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤 代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，和/或式R′CONH-的基团取 代一次或两次，其中R′代表氢或烷基；和
R1代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，烷氧基，环烷氧基，氰基 烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基，芳 基氧基，杂芳基或杂芳基氧基，其中芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基 氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基， 和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢或烷基；或者
R1和R2和它们所键合的碳原子一起，形成苯并稠合的芳香碳环， 其中苯并稠合的芳香碳环可以任选地被烷基，环烷基，环烷基-烷基， 烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰 基，氨基，硝基和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次，其中R′代表 氢或烷基。
在更优选的实施方案中，芳基选自苯基、茚基和萘基；和
杂芳基代表芳香5-和6-元单环杂环基团，选自呋喃基，特别是呋 喃-2-或3-基；噻吩基，特别是噻吩-2-或3-基；吡咯基(azolyl)，特 别是吡咯-2-或3-基；噁唑基，特别是噁唑-2-，4-或5-基；咪唑基， 特别是咪唑-2-或4-基；吡唑基，特别是吡唑-1-，3-或4-基；异噁唑 基，特别是异噁唑-3-，4-或5-基；噻唑基，特别是噻唑-2-，4-或5- 基，噻二唑基，特别是1，3，4-噻二唑基-2-基，吡啶基，特别是吡啶 -2-，3-或4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-或4-基；嘧啶基，特别是嘧 啶-2-，4-或5-基；和吡嗪基，特别是吡嗪-2-或3-基或者芳香双环杂 环基团，选自吲哚基，特别是吲哚-2-，3-，5-或6-基，苯并[b]呋喃 基，特别是苯并呋喃-2-，5-或6-基；苯并[b]噻吩基，特别是苯并噻 吩-2-，5-或6-基；苯并咪唑基，特别是苯并咪唑-2-，5-或6-基；喹 啉基，特别是喹啉-2-，3-，6-或7-基；异喹啉基，特别是异喹啉-3-， 6-或7-基；和噌啉基，特别是噌啉-6-或7-基。
在更优选的实施方案中，芳基代表苯基；芳基-烷基代表苄基；和 杂芳基代表呋喃基，特别是呋喃-2-或3-基；咪唑基，特别是咪唑-2- 或4-基；异噁唑基，特别是异噁唑-3-，4-或5-基；噻唑基，特别 是噻唑-2-，4-或5-基，噻二唑基，特别是1，3，4-噻二唑-2-基，吡啶 基，特别是吡啶-2-，3-或4-基；或者吲哚基，特别是吲哚-2-，3-， 5-或6-基。
在第三优选的实施方案中，本发明提供式I，Ia，Ib，II或III 的二氮杂双环芳基衍生物，其中n是1，2或3。在更优选的实施方案 中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物是式I，Ia，Ib，II或III的二 氮杂双环芳基衍生物，其中n是2。
在第四优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍 生物，其中X和Y之中至少一个代表N；而X和Y的另一个代表CR2； 和n，R1和R2如上所述。
在第五优选的实施方案中，本发明提供式Ia或Ib的二氮杂双环 芳基衍生物，
 
其中，n和R1如上定义。
在第六优选的实施方案中，本发明提供式Ic或Id的二氮杂双环 芳基衍生物，
 
其中，R1如上定义。
在最优选的实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物为
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-噁唑基-5-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-(5-苯基-噁唑-5-基)-甲酮； 或
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基 -甲酮；
其对映异构体，或者其对映异构体的混合物，或者其药学可接受 的加成盐。
在第七优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍 生物，其中R2和R3中的一个或两个各自独立地代表氢和/或卤原子；并 且R1和R2和R3的其余部分各自独立地代表氢，烷基，环烷基，环烷基- 烷基，羟基，烷氧基，卤原子，CF3，OCF3，CN，硝基，苯基，2-硝基-苯 基，2-硝基-4-甲基-苯基，3-硝基-苯基，4-硝基-苯基，3-三氟甲基- 苯基，4-三氟甲基-苯基，2-卤代-5-三氟甲基-苯基，2-氨基-苯基，2- 氨基-4-甲基-苯基，3-氨基-苯基，4-氨基-苯基，2-氨基-4-甲基-苯 基，4-卤代-苯基，4-甲酰基氨基-苯基，2-乙酰基氨基-苯基，3-乙酰 基氨基-苯基，4-乙酰基氨基-苯基，N-3-苯基-乙酰胺，N-4-苯基-乙 酰胺，N-4-苯基-丙酰胺，N-4-苯基-异丁酰胺，N-4-苯基-丙烯酰胺， N-4-苯基-苯甲酰胺，4-(N，N-二甲基-磺酰基-氨基)-苯基，N-4-苯基 -2，2，2-三氟-乙酰胺三氟乙酸，4-苯基-环丙烷羧酸酰胺，4-苯氧基， 3，5-二卤代-苯氧基，苯基-乙炔基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基， 2-吡啶基-硫代甲基和/或5-三氟甲基-2-吡啶基-硫代甲基。
在第八优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍 生物，其中R1和R2中的一个代表苯基或萘基；而R1和R2中的另一个代 表氢。
在第九优选的实施方案中，本发明提供式I的二氮杂双环芳基衍 生物，其中X和Y两者代表CR2，CR3或N，其中R2和R3各自独立地代 表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷 基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳基，芳基 氧基，杂芳基或杂芳基氧基，其中芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧 基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基， 和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢或烷基；或者 X代表N或CR2，其中R2代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基， 烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基， 氨基，硝基，芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基，其中芳基，芳基 氧基，杂芳基或杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代烷 氧基，氰基，氨基，硝基，和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次， 其中R′代表氢或烷基；和Y代表N或CR3，其中R3与R1一起，与它们 所键合的碳原子一起，形成苯并稠合的芳香碳环，其中苯并稠合的芳 香碳环可以任选地被烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环 烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基， 硝基和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢或烷 基。
在第十优选的实施方案中，本发明提供式II的二氮杂双环芳基衍 生物，

其对映异构体或者其对映异构体的混合物，或者其前体药物，或 其药学可接受的加成盐，其中
n是1，2或3；和
X代表CR4或N，其中R4代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟 基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基， 氰基，氨基，硝基，芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基，其中芳基， 芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤 代烷氧基，氰基，氨基，硝基，和/或式R′CONH-的基团取代一次或两 次，其中R′代表氢或烷基；
R1和R2彼此独立地代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷 氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基， 氨基，硝基，苯基，苯基氧基，杂芳基和/或杂芳基氧基，其中苯基， 苯基氧基，杂芳基和杂芳基氧基可以任选地被烷基，卤原子，卤代烷 基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，式R′CONH-，R′SO2NH-和/或 (R′SO2)2N-的基团取代一次或两次，其中R′代表氢，烷基，环烷基，卤 代烷基，链烯基，苯基或苄基；
其中R′代表氢或烷基；或者
R1和R2与它们所键合的碳原子一起，形成苯并稠合的芳香苯环， 其中苯环可以任意地被烷基，环烷基-烷基，羟基，烷氧基，环烷氧基， 氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基，氨基，硝基，芳 基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基取代一次或两次，其中芳基，芳 基氧基，杂芳基或杂芳基氧基可以任选地被卤原子，卤代烷基，卤代 烷氧基，氰基，氨基，硝基，和/或式R′CONH-的基团取代一次或两次， 其中R′代表氢或烷基。
在更优选的实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物是式II 的二氮杂双环芳基衍生物，其中
R1代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，烷氧基，卤原子，CF3，OCF3， CN，硝基，苯基，2-硝基-苯基，2-硝基-4-甲基-苯基，3-硝基-苯 基，4-硝基-苯基，3-三氟甲基-苯基，4-三氟甲基-苯基，2-卤-5-三氟 甲基-苯基，2-氨基-苯基，2-氨基-4-甲基-苯基，3-氨基-苯基，4-氨 基-苯基，2-氨基-4-甲基-苯基，4-卤代-苯基，4-甲酰胺基-苯基，2- 乙酰氨基-苯基，3-乙酰氨基-苯基，4-乙酰氨基-苯基，N-3-苯基-乙 酰胺，N-4-苯基-乙酰胺，N-4-苯基-丙酰胺，N-4-苯基-异丁酰胺， N-4-苯基-丙烯酰胺，N-4-苯基-苯甲酰胺，4-(N，N-二甲基-磺酰基-氨 基)-苯基，N-4-苯基-2，2，2-三氟-乙酰胺三氟乙酸，4-苯基-环丙烷甲 酸酰胺，4-苯基氧基，3，5-二卤-苯基氧基，苯基-乙炔基，2-吡啶基， 3-吡啶基，4-吡啶基，2-吡啶基-硫代甲基或5-三氟甲基-2-吡啶基- 硫代甲基；
R2代表氢或卤原子；和
R4代表氢，烷基或卤原子。
在第十一优选实施方案中，本发明提供式III的二氮杂双环芳基 衍生物，

其对映异构体或者其对映异构体的混合物，或者其前体药物，或 其药学可接受的加成盐，其中
n是1，2或3；和
X代表CR4或N，其中R4代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟 基，烷氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基， 氰基，氨基，硝基，芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基；
R5和R6彼此独立地代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，羟基，烷 氧基，环烷氧基，氰基烷基，卤原子，卤代烷基，卤代烷氧基，氰基， 氨基，硝基，芳基，芳基氧基，杂芳基或杂芳基氧基。
在更优选的实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物是式 III的二氮杂双环芳基衍生物，其中R4代表氢或烷基；R5代表氢，烷 基或烷氧基；和R6代表氢，烷基或烷氧基。
在最优选的实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物是(1，4- 二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-8-甲氧基-苯并呋喃-2-基-甲酮； (1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-苯并呋喃-2-基-甲酮；或(1，4- 二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-甲基-苯并呋喃-2-基-甲酮；(1，4- 二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-苯并噁唑-2-基-甲酮；其对映异构体 或者其对映异构体的混合物，或其药学可接受的加成盐。
在第十二优选实施方案中，本发明提供式I，Ia，Ib或II的二氮 杂双环芳基衍生物，其中
R1代表式-(烷基)m-Z-芳基，-(烷基)m-Z-杂芳基，或-C≡C-芳基 的基团，其中m是0或1；和Z代表O或S；并且其中芳基和杂芳基可以 任选地被烷基，卤原子，卤代烷基，烷氧基，卤代烷氧基，氰基，氨基， 硝基和/或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团取代一次或两次， 其中R′代表氢或烷基。
在第十三优选实施方案中，本发明提供式I，Ia，Ib或II的二氮 杂双环芳基衍生物，其中R1代表式-CH2-Z-苯基，-CH2-Z-吡啶基或-C ≡C-苯基的基团，其中m是0或1；并且Z代表O或S；并且其中苯基 和吡啶基可以任选地被烷基，卤原子，卤代烷基，烷氧基，卤代烷氧 基，氰基，氨基，硝基和/或式R′CONH-，R′SO2NH-或(R′SO2)2N-的基团 取代一次或两次，其中R′代表氢或烷基。
在最优选实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物为(1，4- 二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3，5-二氯苯氧基)-呋喃-2-基-甲 酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[5-(三氟甲基-2-吡啶 基)-硫代甲基]-呋喃-2-基-甲酮；或
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-苯基乙炔基-呋喃-2-基- 甲酮；其对映异构体或者其对映异构体的混合物，或其药学可接受的 加成盐。
在第十四优选实施方案中，本发明提供式I或II的二氮杂双环芳 基衍生物，其中R1代表氢，烷基，环烷基，环烷基-烷基，烷氧基，卤 原子，CF3，OCF3，CN，硝基，苯基，2-硝基-苯基，2-硝基-4-甲基-苯 基，3-硝基-苯基，4-硝基-苯基，3-三氟甲基-苯基，4-三氟甲基-苯 基，2-卤-5-三氟甲基-苯基，2-氨基-苯基，2-氨基-4-甲基-苯基，3- 氨基-苯基，4-氨基-苯基，2-氨基-4-甲基-苯基，4-卤代-苯基，4-甲 酰氨基-苯基，2-乙酰氨基-苯基，3-乙酰氨基-苯基，4-乙酰氨基-苯 基，N-3-苯基-乙酰胺，N-4-苯基-乙酰胺，N-4-苯基-丙酰胺，N-4- 苯基-异丁酰胺，N-4-苯基-丙烯酰胺，N-4-苯基-苯甲酰胺，4-(N，N- 二甲基-磺酰基-氨基)-苯基，N-4-苯基-2，2，2-三氟-乙酰胺三氟乙酸， 4-苯基-环丙烷甲酸酰胺，4-苯基氧基，3，5-二卤-苯基氧基，苯基-乙 炔基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-吡啶基-硫代甲基或5-三 氟甲基-2-吡啶基-硫代甲基；
R2代表氢，烷基或卤原子；和
R3代表氢，烷基或卤原子。
在最优选实施方案中，本发明的二氮杂双环芳基衍生物为
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-溴-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-硝基-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-(5-苯基-呋喃-2-基)-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-三氟甲基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氯苯基)-呋喃-2-基- 甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-乙酰氨基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-乙酰氨基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-甲基-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-4，5-二溴-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氯-5-三氟甲基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-硝基-4-甲基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基-4-甲基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[4-(N，N-二甲基磺酰基) 氨基苯基]-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-甲酰氨基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮；
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙酰胺；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3，5-二氯苯氧基)-呋喃 -2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[5-(三氟甲基-2-吡啶 基)-硫代甲基]-呋喃-2-基-甲酮；
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-2，2，2-三氟-乙酰胺三氟乙酸；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-溴-呋喃-2-基-甲酮；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-苯基乙炔基-呋喃 -2-基-甲酮；
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺；
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-苯甲酰胺；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[4-(N，N-二苯基磺酰基 氨基)苯基]-呋喃-2-基-甲酮；
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-异丁酰胺；
环丙烷羧酸{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃 -2-基]-苯基}-酰胺；
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮；
N-{-4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺N-氧化物；或
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺；
其对映异构体或者其对映异构体的混合物，或其药学可接受的加 成盐。
这里描述的两个或多个实施方案的任意组合认为是在本发明的范 围之内。
取代基的定义
在本发明的上下文中，烷基指一价饱和的，直链或支链的烃链。 烃链优选包含1-18个碳原子(C1-18-烷基)，更优选1-6个碳原子(C1-6- 烷基；低级烷基)，包括戊基，异戊基，新戊基，叔戊基，己基和异己基。 在优选的实施方案中，烷基代表C1-4-烷基，包括丁基，异丁基，仲丁基 和叔丁基。在本发明另一个优选的实施方案中，烷基代表C1-3-烷基， 其特别可以是甲基，乙基，丙基或异丙基。
在本发明的上下文中，环烷基指环状烷基，优选包含3-7个碳原 子(C1-7-环烷基)，包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。
在本发明的上下文中，环烷基-烷基指如上定义的环烷基，其中所 述环烷基在如上定义的烷基上被取代。本发明优选的环烷基-烷基的例 子包括环丙基甲基和环丙基乙基。
在本发明的上下文中，烷氧基指″烷基-O″基团，其中烷基如上定 义。本发明优选的烷氧基的例子包括甲氧基和乙氧基。
在本发明的上下文中，环烷氧基指″环烷基-O″基团，其中环烷基如 上定义。
在本发明的上下文中，氰基-烷基指被CN取代的烷基，其中烷基 如上定义。
在本发明的上下文中，卤原子代表氟，氯，溴或碘，卤代烷基指如 这里定义的烷基，其中烷基被卤原子取代一次或多次。因此三卤代甲基 代表例如三氟甲基，三氯甲基，和类似的三卤原子取代的甲基。本发 明优选的卤代烷基包括三卤代甲基，优选CF3。
在本发明的上下文中，卤代烷氧基指这里定义的烷氧基，其中烷 氧基被卤原子取代一次或多次。本发明优选的卤代烷氧基包括三卤代 甲氧基，优选CF3O-。
在本发明的上下文中，芳基指单环或多环芳香烃基。本发明优选 的芳基的例子包括苯基，茚基，萘基，薁基，芴基和蒽基。本发明最优 选的芳基是苯基。
在本发明的上下文中，芳基氧基指″芳基-O-″基团，其中芳基如上 定义。本发明最优选的芳基氧基是苯氧基。
在本发明的上下文中，杂芳基指芳香的单环或多环杂环基团，其环 结构中有一个或多个杂原子。优选的杂原子包括氮(N)，氧(O)和硫 (S)。
本发明优选的5-6元杂芳基包括呋喃基，特别是呋喃-2-或3-基； 噻吩基，特别是噻吩-2-或3-基；硒苯基，特别是硒苯-2-或3-基； 吡咯基(azolyl)，特别是吡咯-2-或3-基；噁唑基，特别是噁唑-2-，4- 或5-基；噻唑基，特别是噻唑-2-，4-或5-基；咪唑基，特别是咪唑 -2-或4-基；吡唑基，特别是吡唑-3-或4-基；异噁唑基，特别是异 噁唑-3-，4-或5-基；异噻唑基，特别是异噻唑-3-，4-或5-基；噁二 唑基，特别是1，2，3-噁二唑基-4-基或5-基，或1，3，4-戊二唑-2-基； 三唑基，特别是1，2，3-三唑-4-基或1，2，4-三唑-3-基；噻二唑基，特 别是1，2，3-噻二唑-4-或5-基，或1，3，4-噻二唑-2-基；吡啶基，特 别是吡啶-2-，3-或4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-或4-基；嘧啶基， 特别是嘧啶-2-，4-或5-基；吡嗪基，特别是吡嗪-2-或3-基；和三嗪 基，特别是1，2，4-或1，3，5-三嗪基。
本发明更优选的5元杂芳基包括呋喃基，特别是呋喃-2-或3-基； 噻吩基，特别是噻吩-2-或3-基；吡咯基(azolyl)，特别是吡咯-2-或 3-基；噁唑基，特别是噁唑-2-，4-或5-基；噻唑基，特别是噻唑-2-， 4-或5-基；异噁唑基，特别是异噁唑-3-，4-或5-基；异噻唑基，特 别是异噻唑-3-，4-或5-基；和噻二唑基，特别是1，2，3-噻二唑-4-或 5-基，或1，3，4-噻二唑-2-基。
本发明最优选的5元杂芳基包括呋喃基，特别是呋喃-2-或3-基； 和噻吩基，特别是噻吩-2-或3-基。
本发明更优选的6元杂芳基包括吡啶基，特别是吡啶-2-，3-或 4-基；和吡嗪基，特别是吡嗪-2-或3-基。
在本发明的上下文中，芳香双环杂环基团指在其环结构中有一个 或多个杂原子的双环杂环基团。在本发明的上下文中，术语“双环杂 环基团”包括包含一个或多个杂原子的苯并稠合的五-和六元杂环环。 优选的杂原子包括氮(N)，氧(O)和硫(S)。
本发明优选的双环杂芳基包括中氮茚基，特别是中氮茚-2-，5-或 6-基；吲哚基，特别是吲哚-2-，5-或6-基；异吲哚基，特别是异吲哚 -2-，5-或6-基；苯并[b]呋喃基，特别是苯并[b]呋喃-2-，5-或6- 基；苯并[b]噻吩基，特别是苯并噻吩-2-，5-或6-基；苯并咪唑基， 特别是苯并咪唑-2-，5-或6-基；苯并噻唑基，特别是苯并噻唑-5-或 6-基；嘌呤，特别是嘌呤-2-或8-基；喹啉基，特别是喹啉-2-，3-，6- 或7-基；异喹啉基，特别是异喹啉-3-，6-或7-基；噌啉基，特别是 噌啉-6-或7-基；2，3-二氮杂萘基，特别是2，3-二氮杂萘-6-或7- 基；喹唑啉基，特别是喹唑啉-2-，6-或7-基；喹喔啉基，特别是喹 喔啉-2-或6-基；1，8-萘啶基，特别是1，8-萘啶-2-，3-，6-或7-基； 和蝶啶基，特别是蝶啶-2-，6-或7-基。
本发明更优选的双环杂芳基包括吲哚基，特别是吲哚-2-，5-或6- 基；苯并[b]呋喃基，特别是苯并[b]呋喃-2-，5-或6-基；苯并[b] 噻吩基，特别是苯并噻吩-2-，5-或6-基；苯并咪唑基，特别是苯并 咪唑-2-，5-或6-基；和喹喔啉基，特别是喹喔啉-2-或6-基。
本发明最优选的双环杂芳基包括吲哚基，特别是吲哚-2-，5-或6- 基；苯并[b]呋喃基，特别是苯并[b]呋喃-2-，5-或6-基；苯并[b] 噻吩基，特别是苯并噻吩-2-，5-或6-基。
在本发明的上下文中，杂芳基氧基指″杂芳基-O-″基团，其中杂芳 基如上定义。
药学可接受盐
本发明的二氮杂双环芳基衍生物可以以适合想要的给药的任何形 式被提供。合适的形式包括本发明化合物的药学(即生理)可接受的 盐，和前体药物或药物前体形式。
药学可接受加成盐的例子包括但不限于，无毒无机酸和有机酸加 成盐，例如从盐酸衍生的盐酸盐，从氢溴酸衍生的氢溴酸盐，从硝酸 衍生的硝酸盐，从高氯酸衍生的高氯酸盐，从磷酸衍生的磷酸盐，从硫 酸衍生的硫酸盐，从甲酸衍生的甲酸盐，从乙酸衍生的乙酸盐，从乌 头酸衍生的乌头酸盐，从抗坏血酸衍生的抗坏血酸盐，从苯磺酸衍生 的苯磺酸盐，从苯甲酸衍生的苯甲酸盐，从肉桂酸衍生的肉桂酸盐， 从柠檬酸衍生的柠檬酸盐，从双羟萘酸衍生的双羟萘酸盐，从庚酸衍 生的庚酸盐，从富马酸衍生的富马酸盐，从谷氨酸衍生的谷氨酸盐， 从乙醇酸衍生的乙醇酸盐，从乳酸衍生的乳酸盐，从马来酸衍生的马 来酸盐，从丙二酸衍生的丙二酸盐，从杏仁酸衍生的杏仁酸盐，从 甲磺酸衍生的甲磺酸盐，从萘-2-磺酸衍生的萘-2-磺酸盐，从苯二甲 酸衍生的苯二甲酸盐，从唾液酸衍生的唾液酸盐，从山梨酸衍生的山 梨酸盐，从硬脂酸衍生的硬脂酸盐，从琥珀酸衍生的琥珀酸盐，从酒 石酸衍生的酒石酸盐，从对甲苯磺酸衍生的甲苯-对-磺酸盐，等等。 通过本领域公知的方法和本领域描述的方法可以形成这样的盐。
其他可能不被认为是药学可接受的酸例如草酸，在制备用作获得 本发明的化合物及其药学可接受酸加成盐中的中间体的制备中可能是 有用的。
本发明的化合物的金属盐包括碱金属盐，例如包含羧基的本发明 化合物的钠盐。
本发明的化合物的药学可接受阳离子盐的例子包括但不限于包含 阴离子的本发明化合物的钠，钾，钙，镁，锌，铝，锂，胆碱，赖氨酸， 和铵盐等。这样的阳离子可以通过本领域公知的方法和本领域描述的 方法形成。
在本发明的上下文中，包含N的化合物的″鎓盐″也包括在药学可 接受盐中(氮杂-鎓盐)。优选的氮杂-鎓盐包括烷基-鎓盐，特别是甲基 -和乙基-鎓盐；环烷基-鎓盐，特别是环丙基-鎓盐；和环烷基烷基- 鎓盐，特别是环丙基-甲基-鎓盐。
本发明特别优选的鎓盐包括根据下式I′在N′位产生的那些，

立体异构体
本发明的化合物可以以(+)和(-)形式以及外消旋形式存在。这些 异构体的外消旋体和各异构体本身在本发明的范围之内。
通过已知方法和技术能将外消旋形式拆分为旋光对映体。分离非 对映形盐的一条途径是通过利用光活性酸，和通过用碱处理来释放光 学活性胺化合物。将外消旋体拆分为旋光对映体的另一种方法是以光 学活性基质上的色谱法为基础。因此能将本发明的外消旋化合物拆分 成它们的旋光对映体，例如，通过例如d-或I-(酒石酸盐，扁桃酸盐， 或樟脑磺酸盐)盐的分级结晶。
也可以通过本发明的化合物与光学活性活化羧酸例如从(+)或(-) 苯丙氨酸，(+)或(-)苯基甘氨酸，(+)或(-)樟脑酸衍生的那些光学活 性活化羧酸反应而形成非对映形酰胺，或者通过本发明的化合物与光 学活性氯甲酸酯反应形成非对映形氨基甲酸酯等来拆分本发明的化合 物。
拆分光学异构体的其他方法是本领域公知的。这样的方法包括 Jaques J，Collet A，& Wilen S在″Enantiomers.Racemates.and Resolutions″，John Wiley and Sons，New York(1981)中描述的那 些。
从光学活性起始物也能制备光学活性化合物。
二氮杂双环芳基衍生物的制备方法
通过化学合成的常规方法，例如操作实施例中描述的那些方法， 可以制备本发明的二氮杂双环芳基衍生物。本申请中描述的方法的起 始物是公知的或者通过常规方法从商业上可获得的化学品可以容易地 制备。
利用常规方法也能将本发明的一种化合物转化为本发明的另一种 化合物。
通过常规方法可以分离这里描述的反应的终产物，例如通过萃取， 结晶，蒸馏，色谱法等。
生物学活性
本发明在于提供烟碱受体的新的配体和调节剂，所述配体和调节 剂用于治疗与胆碱能受体相关的疾病或障碍，特别是烟碱乙酰胆碱受 体(nAChR)。本发明优选的化合物表现出出色的烟碱乙酰胆碱α7受体 亚型选择性。
本发明的化合物可以特别是烟碱乙酰胆碱受体的激动剂、部分激 动剂、拮抗剂和/或变构调节剂。
由于它们的药学性质，本发明的化合物可以用于治疗许多与中枢 神经系统(CNS)的胆碱能系统，外周神经系统(PNS)相关的疾病或 障碍，与平滑肌收缩相关的疾病或障碍，内分泌疾病或障碍，与神经 退化相关的疾病或障碍，与炎症相关的疾病或障碍，疼痛，和终止化 学物质滥用引起的脱瘾症状诸多疾病或病症。
本发明的化合物还可以在各种诊断方法中用作诊断工具或检测试 剂，并且特别用于体内受体成像(神经成像)，并且它们可以是标记或 没有标记的形式。
在优选的实施方案中，本发明的化合物用于治疗与中枢神经系统 相关的疾病、障碍或病症。这样的疾病或障碍包括焦虑，认知障碍， 学习缺陷，记忆缺陷和机能障碍，早老性痴呆，注意力缺陷，注意力 缺陷多动症(ADHD)，帕金森病，亨廷顿舞蹈症，肌萎缩侧索硬化， 图雷特综合征，精神病，抑郁症，躁狂，躁狂抑郁症，精神分裂症， 强迫观念与行为障碍(OCD)，恐慌，进食障碍例如神经性食欲缺乏， 食欲过盛和肥胖，发作性睡眠，伤害性知觉，AIDS-痴呆，老年痴呆， periferic神经病，孤独症，诵读困难，迟发性运动障碍，运动过度， 癫痫，食欲过盛，创伤后综合征，社交恐怖症，睡眠障碍，假性痴呆， 急性幻觉性躁狂，月经前综合征，晚黄体期综合征，慢性疲劳综合征， 缄默症，拔毛发癖和飞行时差。
在优选的实施方案中，对其使用本发明的化合物的与中枢神经系 统相关的疾病、障碍或病症是认知障碍，精神病，精神分裂症和/或 抑郁症。
在另一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗与平 滑肌收缩相关的疾病、障碍或病症，包括惊厥性疾患，心绞痛，早产， 抽搐，腹泻，哮喘，癫痫，迟发性运动障碍，运动过度，早泄和勃起 困难。
在另一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗内分 泌障碍，例如甲状腺毒症，嗜铬细胞瘤，高血压和心律不齐。
在另一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗神经 变性障碍，包括短暂缺氧症和诱发性神经变性。
在另一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗炎性 疾病，失调，或病症，包括炎性皮肤疾患例如粉刺和酒渣鼻，克罗恩 病，炎性肠病，溃疡性结肠炎和腹泻。
在另一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以用于治疗急性， 慢性或复发性轻度，中度甚至严重疼痛，以及由偏头痛、手术后疼痛 和幻肢疼痛引起的疼痛。所述疼痛可以特别是神经病理性疼痛，慢性 头痛，中枢疼痛，与糖尿病性神经病、治疗后神经痛或与外周神经损 伤相关的疼痛。
最后，本发明的化合物可以用于治疗终止成瘾物质的使用引起的 脱瘾综合征。这样的成瘾物质包括含有烟碱的产物例如烟草，阿片样 物质例如海洛因、可卡因和吗啡，苯并二氮杂和苯并二氮杂样药 物以及酒精。戒除成瘾物质一般是创伤体验，特征在于焦虑和挫折， 愤怒，焦虑，难以集中精力，不安宁，心律减慢和食欲增大以及体重 增加。
在上下文中，“治疗”包括戒断症状的治疗、防止、预防和减轻， 戒酒以及导致成瘾物质的自主减少摄入的治疗。
另一方面，本发明的化合物用作诊断剂，例如用于对各种组织中 烟碱受体的鉴定和定位。
药物组合物
另一方面，本发明提供含有治疗有效量的本发明的二氮杂双环芳 基衍生物的新的药物组合物。
在治疗中使用的本发明的化合物可以以单纯的(raw)化合物形式 施用，但是优选在与一种或几种佐剂，赋形剂，载体，缓冲剂，稀释剂， 和/或其他常规制药助剂一起的药物组合物中引入任选以药学可接受 盐形式存在的活性成分。
在优选的实施方案中，本发明提供含有本发明的二氮杂双环芳基 衍生物，或者其药学可接受盐或其衍生物和一种或几种药学可接受载 体，和任选的在本领域公知和使用的其他治疗和/或预防性成分的药 物组合物。载体必须与制剂的其他成分相容的意义上是″可接受的″， 并且对其接受者是没有害的。
本发明的药物组合物可以通过适合期望的治疗法的任何常规途径 施用。优选的给药途径包括口服，特别是以片剂，胶囊，糖衣丸，粉 末剂，或液体形式，和肠胃外给药，特别是皮，皮下，肌内，或静脉 内注射。本发明的药物组合物通过本领域技术人员利用适合期望的制 剂的标准方法和常规技术能制备。期望时，可以施用适合活性成分持 续释放的组合物。
本发明的二氮杂双环芳基衍生物能以各种各样的口服和肠胃外剂 型给药。对本领域技术人员显而易见的是，下面的剂型可以包括作为 活性成分的本发明的化合物或者本发明的化合物的药学可接受的盐。
期望时，可以施用适合活性成分持续释放的组合物。
药物制剂优选是单位剂型。在这样的剂型中，制剂被分为含有合 适量的活性成分的单位剂量。单位剂型可以是包装制剂，含有不连续 量制剂的包装，例如包装的片剂、胶囊和小瓶或安瓿中的粉末。还有， 单位剂型可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它可以是合适 数量的包装形式。
口服施用的片剂或胶囊和静脉给药和连续输注的液体是优选的组 合物。
配制和给药技术的进一步详细说明可以参见最新版的 Remington′s Pharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co.， Easton，PA)。
治疗有效剂量指减轻症状或状况的活性成分的量。治疗效力和毒 性，例如ED50和LD50，可以通过细胞培养物或实验动物标准药学方法 来测定。治疗和毒性作用之间的剂量之比是治疗指数，并且可以用 LD50/ED50之比来表示。具有大治疗指数的药物组合物是优选的。
给药剂量当然必须仔细考虑要治疗的个体的年龄，体重和状况， 以及给药途径，剂型和给药方案和期望的结果来调节。精确剂量当然 应该由医师确定。
实际剂量取决于要治疗的疾病的性质和严重程度，并且在医师的 决定权限内，并且可以随着剂量与本发明的特定环境的因素而不同，产 生期望的治疗效果。然而，目前想到每个剂量含有大约0.1至大约500 毫克，优选大约1至大约100毫克，最优选大约1至大约10毫克活性 成分的药物组合物适合治疗处理。
活性成分可以以每天一次剂量或几次剂量给药。在某些情况下， 以0.1微克/千克i.v.和1微克/千克p.o.这样低的一次剂量能得到 令人满意的结果。目前认为该剂量范围的上限是大约10毫克/千克 i.v.和100毫克/千克p.o.。优选的范围是大约0.1微克/千克至大 约10毫克/千克/天i.v.，和大约1微克/千克至大约100毫克/千 克/天p.o.。
治疗方法
本发明的二氮杂双环芳基衍生物是有价值的烟碱受体调节剂，因 此可用于治疗涉及胆碱能机能障碍的疾病以及对nAChR调节剂作用有 应答的疾病。
本发明另一方面提供用于治疗、防止或减轻活动物体包括人的疾 病或障碍或病症的方法，所述疾病，障碍或病症对胆碱能受体的调节 作用有应答，所述方法包括对有此需要的活动物体包括人施用有效量 的本发明的二氮杂双环芳基衍生物。
本发明的上下文中，术语“治疗”覆盖治疗、防止、预防或减轻， 术语“疾病”覆盖与讨论的疾病相关的病、疾病、障碍和病症。
本发明涉及的优选适应症是上述的那些。
本发明现在涉及的是合适的剂量范围是每天0.1至1000毫克活性 成分，更优选每天10至500毫克活性成分，特别是每天30至100毫克， 通常取决于精确的给药方式，给药的形式，指导给药的说明，涉及的受 试者和涉及的受试者的体重，还有主管医师或兽医的偏好和经验。
在某些情况下，以0.005毫克/千克i.v.和0.01毫克/千克p.o. 这样低的剂量能获得令人满意的结果。剂量范围的上限是大约10毫 克/千克i.v.和100毫克/千克p.o.。优选范围是大约0.001至大 约1毫克/千克i.v.，和大约0.1至大约10毫克/千克p.o.。
实施例
参照下面的实施例进一步详细说明本发明，但是无论如何不是要 限制权利要求书要求的本发明的范围。
实施例1
制备实施例
涉及空气灵敏试剂或中间体的所有反应都在氮气和无水溶剂中进 行。
1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-酮(中间体化合物)
32.33克(200毫摩尔)的3-奎宁环酮盐酸盐溶解于75毫升的水 中，并且向该溶液加入盐酸羟胺(16.4克；236毫摩尔)和 CH3CO2Na·3H2O(80克；588毫摩尔)。将混合物在70℃下搅拌1小 时。然后NaCl(10克)溶解于混合物并且冷却至0℃。将分离的晶体 过滤并且小心干燥。获得的粗产物3-奎宁环酮肟(大约30克)不用进 一步纯化即可在下面的合成步骤中使用。
将多磷酸(180克)加热至100℃，并且分步加入粗3-奎宁环酮肟 (30克)。反应混合物在30℃加热20分钟。混合物冷却至室温，并且 加入50毫升水。小心将物质均匀化，将混合物倒入冰中(100克)。通 过加入氢氧化钠使混合物呈碱性(pH12)。用氯仿萃取混合物(2×400 毫升)。萃取液用硫酸钠干燥并且减压去除溶剂。
产物1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-酮和1，3-二氮杂双环 [3.2.2]壬烷-4-酮混合物的产率是19.02克(68％)。从80毫升二噁 烷中结晶出异构体的混合物，得到1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-酮 (5.12克；18％)。从滤液中蒸馏掉溶剂，将残余物经急骤层析(用丙 酮)，得到1，3-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-4-酮(8.91克32％)。
1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷[J.Med.Chem.1993362311-2320]
(中间体化合物)
1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-酮(5.12克；36毫摩尔)溶解 于四氢呋喃(50毫升)，向溶液中加入氢化铝锂2.28克(60毫摩 尔)，并且将反应混合物回流36小时。将反应混合物冷却至室温之后， 滴加水(2.3毫升)并且过滤混合物。通过减压蒸馏从滤液中去除溶剂。 用Kugelrohr(0.5mBar，70℃)蒸馏形成的物质。标题化合物的产率是 3.11克(68％)。
3-溴-2-糠酸(中间体化合物)
-70℃下，向3-溴呋喃(51.0克；0.347摩尔)和THF(250毫升) 的混合物加入二异丙基氨基锂(191毫升；0.382摩尔；2M庚烷 /THF/乙基苯溶液)。混合物在-70℃下搅拌1小时。加入固体二氧化碳 (100.3克；2.28mol)，并且搅拌混合物，直到二氧化碳逸出。加入 水(50毫升)之后加入盐酸水溶液(380毫升；2M)。蒸发四氢呋喃。用 乙醚萃取混合物(3×100毫升)。用氢氧化钠水溶液萃取合并的乙醚 相(3×100毫升；2M)。水相在冰上冷却并且用盐酸水溶液(100毫 升；10M)酸化。用乙醚萃取混合物(3×100毫升)。蒸发合并的乙醚 相。产率36克(54％)。
Mp.118.5℃。
方法A
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-呋喃-2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A1)
室温下，将1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷(0.50克；4.0毫摩 尔)，2-糠酰氯(0.52毫克；4.0毫摩尔)，二异丙基乙胺(1.02克； 7.9毫摩尔)和1，2-二甲氧基乙烷(25毫升)的混合物搅拌过夜。产物 沉淀成盐酸盐并过滤，并且用1，2-二甲氧基乙烷(5毫升)洗涤。产率 0.84克(82％)。Mp.279-283℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-溴-呋喃-2-基-甲酮富马 酸盐
(化合物A2)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-溴-2-糠酰氯制备标题化 合物(方法B)。加入氢氧化钠水溶液(10毫升；1M)。用二氯甲 烷萃取混合物(3×10毫升)。使用二氯甲烷，甲醇和浓氨水(89∶10∶ 1)，在硅胶上进行色谱法，得到标题化合物。通过加入用富马酸饱和 的乙醚和甲醇混合物(9∶1)获得相应的盐。Mp.192.7-196.4℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-硝基-呋喃-2-基-甲酮盐 酸盐
(化合物A3)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-硝基-2-糠酰氯制备标题 化合物(方法B)。Mp.242.6-251.0℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮盐酸盐
(化合物A4)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(4-硝基苯基)-2-糠酰氯 制备标题化合物(方法B)。Mp.298.2℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-三氟甲基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A5)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(3-三氟甲基苯基)-2- 糠酰氯制备标题化合物(方法B)。Mp.236.9℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氯苯基)-呋喃-2-基- 甲酮盐酸盐
(化合物A6)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(4-氯苯基)-2-糠酰氯制 备标题化合物(方法B)。Mp.272.5-274.7℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮盐酸盐
(化合物A7)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(2-硝基苯基)-2-糠酰氯 制备标题化合物(方法B)。Mp.216.3-219.9℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-硝基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮盐酸盐
(化合物A8)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(3-硝基苯基)-2-糠酰氯 制备标题化合物(方法B)。Mp.224-230℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-8-甲氧基-苯并呋喃-2-基- 甲酮盐酸盐
(化合物A9)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从8-甲氧基-2-苯并糠酰氯制 备标题化合物(方法B)。Mp.241-246℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-噁唑基-5-基-甲酮盐酸盐
(化合物A10)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-噁唑酰氯制备标题化合 物(方法B)。Mp.＞160℃(分解)。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-苯并呋喃-2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A11)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从2-苯并糠酰氯制备标题化 合物(方法B)。Mp.264℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-甲基-呋喃-2-基-甲酮盐 酸盐
(化合物A12)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从3-甲基-2-糠酰氯制备标题 化合物(方法B)。Mp.225.8-227.2℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-4，5-二溴-呋喃-2-基-甲酮 富马酸盐
(化合物A13)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从4，5-二溴-2-糠酰氯制备标 题化合物(方法B)。Mp.250.9-254.3℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氯-5-三氟甲基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A14)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(2-氯-5-三氟甲基苯 基)-2-糠酰氯制备标题化合物(方法B)。Mp.201℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-硝基-4-甲基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A15)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(2-硝基-4-甲基苯基)-2- 糠酰氯制备标题化合物(方法B)。Mp.199℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-甲基-苯并呋喃-2-基-甲 酮盐酸盐
(化合物A16)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从3-甲基-2-苯并糠酰氯制备 标题化合物(方法B)。Mp.260-276℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基 -甲酮盐酸盐
(化合物A17)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-甲基-1，3，4-噁二唑-2- 碳酰氯制备标题化合物。Mp.280-290℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3，5-二氯苯氧基)-呋喃 -2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A18)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-(3，5-二氯苯氧基)-呋喃 -2-碳酰氯制备标题化合物。Mp.124℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[5-(三氟甲基-2-吡啶 基)-硫代甲基]-呋喃-2-基-甲酮盐酸盐
(化合物A19)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从5-[5-(三氟甲基-2-吡啶 基)-硫代甲基]-呋喃-2-碳酰氯制备标题化合物。Mp.176℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-3-溴-呋喃-2-基-甲酮富马 酸盐
(化合物A20)
根据方法A，不使用二异丙基乙胺，从3-溴-2-糠酰氯制备标题化 合物(方法B，从3-溴-2-糠酸制备)。Mp.157.4-159.9℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-苯基乙炔基-呋喃-2-基- 甲酮富马酸盐
(化合物A21)
根据方法A，从5-(2-苯基乙炔基)-2-糠酰氯制备标题化合物。Mp. 166.3-168.3℃。
方法B
3-溴-2-糠酸(中间体化合物)
-70℃下，向3-溴呋喃(51.0克；0.347摩尔)和THF(250毫升) 的混合物加入二异丙基氨基锂(191毫升；0.382摩尔；2M庚烷 /THF/乙基苯溶液)。混合物在-70℃下搅拌1小时。加入固体二氧化碳 (100.3克；2.28摩尔)，并且搅拌混合物，直到二氧化碳逸出。加入 水(50毫升)之后加入盐酸水溶液(380毫升；2M)。蒸发四氢呋喃。用 乙醚萃取混合物(3×100毫升)。用氢氧化钠水溶液萃取合并的乙醚 相(3×100毫升；2M)。水相在冰上冷却并且用盐酸水溶液(100毫 升；10M)酸化。用乙醚萃取混合物(3×100毫升)。蒸发合并的乙醚 相。产率36克(54％)。
Mp.118.5℃。
5-(4-硝基苯基)-2-糠酰氯(中间体化合物)
通过将5-(4-硝基苯基)-2-糠酸(1.0克；4.3毫摩尔)和亚硫 酰氯(10毫升)的混合物搅拌回流2小时来制备标题化合物。将混合 物蒸发并且用无水甲苯共蒸发。酰氯不用进一步纯化即可使用。
方法C
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮富马酸盐
(化合物C1)
氢气下，将(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-硝基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮(0.70克；1.9毫摩尔)，披钯炭(400毫克；5％)和 乙醇(30毫升)的混合物搅拌24小时。混合物通过硅藻土过滤并蒸 发。产率0.44克(74％)。通过加入富马酸饱和的乙醚和甲醇混合物 (9∶1)获得相应的盐。Mp.227.8℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮富马酸盐
(化合物C2)
根据方法C，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-硝基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。Mp.201.1-207.3℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮富马酸盐
(化合物C3)
根据方法C，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-硝基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。Mp.184.9-188.2℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基-4-甲基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮富马酸盐
(化合物C4)
根据方法C，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基 -4-甲基苯基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。Mp.179℃。
方法D
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-乙酰基氨基苯基)-呋 喃-2-基-甲酮
(化合物D1)
室温下，向(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮和二氯甲烷(10毫升)的混合物滴加溶解于二氯甲烷 (2毫升)的乙酸酐(133毫克；1.3毫摩尔)。将混合物搅拌4小时。 加入氢氧化钠水溶液(20毫升；1M)之后用二氯甲烷萃取(3×20毫 升)。使用二氯甲烷∶甲醇(4∶1)的混合物和2％甲醇为洗脱剂，通 过硅胶色谱法纯化粗混合物。分离产物，其为游离碱。Mp.113℃(分 解)。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-乙酰基氨基苯基)-呋 喃-2-基-甲酮富马酸盐
(化合物D2)
根据方法D，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(2-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。通过加入用富马酸饱和的乙醚 和甲醇的混合物(9∶1)获得相应的盐。Mp.178.9-185.0℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-乙酰基氨基苯基)-呋 喃-2-基-甲酮富马酸盐
(化合物D3)
根据方法D，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(3-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。通过加入用富马酸饱和的乙醚 和甲醇的混合物(9∶1)获得相应的盐。Mp.216℃。
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙酰胺游离碱
(化合物D4)
根据方法D，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮制备标题化合物。Mp.264℃。
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺三氟乙酸盐
(化合物D5)
根据方法D，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮和三氟乙酸酐制备标题化合物。Mp.219℃。
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-异丁酰胺富马酸盐
(化合物D6)
根据方法D，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮和异丁酸酐制备标题化合物。Mp.223℃。
方法E
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[4-(N，N-二甲基磺酰基) 氨基苯基]-呋喃-2-基-甲酮游离碱
(化合物E1)
室温下，向(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮(0.5克；1.6毫摩尔)和二氯甲烷(5毫升)，甲磺 酰氯(2.12克；18.4毫摩尔)和二氯甲烷(5毫升)的混合物搅拌15 小时。加入氢氧化钠水溶液(5毫升；1M)之后用二氯甲烷萃取(3×5 毫升)。使用二氯甲烷∶甲醇(9∶1)的混合物和1％甲醇为洗脱剂， 通过硅胶色谱法纯化粗混合物。分离产物，是游离碱。产率20毫克 (3％)。Mp.189℃。
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺富马酸盐
(化合物E2)
根据方法E，从(1，4-二氮杂-双环3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮和丙烯酰氯(1.6当量)制备标题化合物。Mp.220 ℃。
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-苯甲酰胺富马酸盐
(化合物E3)
根据方法E，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮，二异丙基乙胺(2当量)和苯甲酰氯(1.5当量) 制备标题化合物。Mp.254℃。
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-[4-(N，N-二苯基磺酰基 氨基)苯基]-呋喃-2-基-甲酮富马酸盐(化合物E4)
根据方法E，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮，二异丙基乙胺(2当量)和苯磺酰氯(1.5当量) 制备标题化合物。Mp.201-203℃。
环丙烷羧酸{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃 -2-基]-苯基}-酰胺富马酸盐
(化合物E5)
根据方法E，从(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯 基)-呋喃-2-基-甲酮，环丙烷羰基氯制备标题化合物。Mp.254℃。
方法F
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-甲酰基氨基苯基)-呋 喃-2-基-甲酮
(化合物F1)
将(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)-呋喃 -2-基-甲酮(0.50克；1.6毫摩尔)和甲酸乙酯(30毫升)的混合物搅 拌回流9天。将混合物蒸发。加入氢氧化钠水溶液(20毫升；1M)之 后用二氯甲烷萃取(3×20毫升)。使用二氯甲烷∶甲醇(9∶1)的混 合物和1％甲醇为洗脱剂，通过硅胶色谱法纯化粗混合物。分离产物， 是游离碱。产率0.29克(53％)。Mp.236℃。
方法G
(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)-呋喃-2- 基-甲酮氯甲基鎓氯化物盐
(化合物G1)
5℃下，向(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬-4-基)-5-(4-氨基苯基)- 呋喃-2-基-甲酮和二氯甲烷(10毫升)的混合物滴加溶解于二氯甲烷 (20毫升)中的异硫代氰酸乙酯(182毫克；2.09毫摩尔)。将混合物 在5℃下搅拌4小时并且在室温下搅拌11小时。将溶剂体积减小至三 分之一，并过滤分离固体产物。Mp.＞300℃。
方法H
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺甲基鎓碘化物
(化合物H1)
-70℃下，将N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)- 呋喃-2-基]-苯基}-丙烯酰胺(175毫克；0.479毫摩尔)和二氯甲烷 (10毫升)的混合物搅拌。加入溶解于二氯甲烷(5毫升)中的碘甲烷 (68毫克(0.479毫摩尔)。混合物在-70℃下搅拌1小时。让混合物 升至室温并且蒸发，用乙醚研制。产率0.15克(62％)。Mp.230-246 ℃。
方法I
N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋喃-2-基]- 苯基}-丙烯酰胺N-氧化物
(化合物I1)
室温下，将N-{4-[5-(1，4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-羰基)-呋 喃-2-基]-苯基}-丙烯酰胺(175毫克；0.479毫摩尔)和间-氯过氧苯 甲酸(165毫克；0.958毫摩尔)和二氯甲烷(5毫升)的混合物搅拌 15小时。将粗混合物蒸发。使用二氯甲烷，甲醇和浓氨水(89∶10∶1) 在硅胶上进行色谱法，得到标题化合物。
产率180毫克(99％)。Mp.162℃。
实施例2
大鼠脑内3H-α-环蛇毒素结合的体内抑制
在这个实施例中，测定本发明的化合物与烟碱受体α7-亚型结合 的亲和性。
α-环蛇毒素是从眼镜蛇科Bungarus multicinctus蛇毒液中分离 的一种肽。它对神经元和神经肌肉烟碱受体有高亲和性，其中它起着 有效拮抗剂作用。3H-α-环蛇毒素标记脑中发现的α7-亚型异构型和神 经肌肉接合处中的α1异构型形成的烟碱乙酰胆碱受体。
组织制备
在0-4℃下进行制备。使用Ultra-Turrax匀浆器，在15毫升含 有118mM NaCl，4.8mM KCl，1.2mM MgSO4和2.5mM CaCl2(pH7.5) 的20mM Hepes缓冲液中将来自雄性Wistar大鼠(150-250克)的 大脑皮质匀化10秒种。将组织悬浮液以27,000x克离心10分钟。 弃除上清液，并且通过在20毫升新鲜缓冲液中以27,000x克离心 10分钟将沉淀洗涤两次，然后将最后的沉淀重新悬浮于含有0.01％BSA (每克原始组织35毫升)的新鲜缓冲液中，并且用于结合分析。
分析
向25微升分析溶液和25微升3H-α-环蛇毒素(2nM，最终浓度) 加入500微升等份的匀浆，混合，并且在37℃下温育2小时。使用 (-)-烟碱(1mM，最终浓度)测定非特异性结合。温育之后，向样品加入 5毫升含有0.05％PEI的冰冷却Hepes缓冲液，并且直接倒入Whatman GF/C玻璃纤维过滤器(预先在0.1％PEI中浸透至少6小时)抽吸，并 且立刻用2×5毫升冰冷却缓冲液洗涤。
通过常规液体闪烁计数法测定过滤器上放射性的量。特异性结合 是总结合减去非特异性结合。
IC50(将3H-α-环蛇毒素的特异性结合抑制50％时的被分析物质 的浓度)给出实验值。
下面表1中给出这些实验的结果。
表1
3 H-α-环蛇毒素结合的抑制   化合物序号   IC50   (μM)   A1   0.54   A5   0.051   C3   0.080   F1   0.017