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蛹虫草液体静置培养方法

阅读:1031发布:2020-08-12

专利汇可以提供蛹虫草液体静置培养方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且蛹虫草液体静置培养方法,其工艺流程包括液体培养基配制,培养基的分装、灭菌、接菌,菌丝体培养,菌丝体转色、原基分化,子实体生长、采收、干制。装有液体培养基的菌瓶接菌后,放入遮光、18~20℃养菌室内静置培养,7~10天菌丝长满液面,即得蛹虫草菌;提高 温度 至20~22℃,加强光照,8~10天后菌丝由白色转为桔黄色,菌丝扭结形成瘤突起物,分化形成原基;在 封口膜 上开透气小孔,增大透气量,蛹虫草子实体逐渐伸长,顶部膨大,少量子囊孢子开始出,开始采收;及时放入恒温箱中,烘干即可。具有节约大量粮食,降低生产成本,生产工艺简单,有利于工厂化生产;生产周期短的优点。,下面是蛹虫草液体静置培养方法专利的具体信息内容。

1、蛹虫草液体静置培养方法,其工艺流程包括液体培养基配制,培养基的分 装、灭菌、接菌,菌丝体培养,菌丝体转色、原基分化,子实体生长、采收、 干制,其特征在于,(a)液体培养基配制:配制1000毫升的液体培养基,用 去皮铃薯190~220g切片,加入10~15g蚕蛹粉、800~1000毫升沸腾后 煮20~30分钟,用纱布过滤取汁,然后加入蔗糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢 3g、硫酸镁1.5g,再加水至1000毫升,pH7;(b)液体培养基的分装、灭菌、 接菌:选择透明的玻璃瓶或塑料瓶250毫升,每瓶放入100~120毫升的培养基, 用皮纸或聚丙烯膜封口,在高压灭菌器中,压1.2~1.3kg/cm2,温度121~ 122℃下灭菌30分钟,待菌瓶冷却后,在无菌条件下接入蛹虫草菌,每瓶接入 量1~2毫升;(c)菌丝体培养:菌瓶接菌后,放入遮光、18~20℃养菌室内静 置培养,室内湿度保持在55~60%,7~10天菌丝长满液面,即得蛹虫草菌;(d) 菌丝体转色、原基分化:提高温度至20~22℃,加强光照,光照强度在500~ 6001ux,每天光照10h,8~10天后菌丝由白色转为桔黄色,菌丝扭结形成瘤突 起物,分化形成原基;(e)子实体生长、采收:形成原基后,在封口膜上开透 气小孔,增大透气量,室内湿度80~85%,光照强度控制在800~10001ux,温 度在20~22℃,蛹虫草子实体逐渐伸长,长至6~8cm时,顶部膨大,少量子囊 孢子开始出,开始采收;采收时,用剪刀从子实体根部剪取,清除杂质,并在1 小时内及时放入恒温箱中,温度控制在30~45℃,6~8小时,烘干即可。

说明书全文

技术领域

发明生物技术领域,具体涉及蛹虫草的培养技术。

背景技术

蛹虫草,俗称北虫草,属子囊菌纲、肉座目、麦菌科虫草属,广泛分布 世界各地,在我国主要分布于北方,以东北三省为主。蛹虫草具有与冬虫夏草 相似的药用价值,故药典中又记载为“北冬虫夏草”,具有滋补肾、止血化痰 的功效,用于调补身体,治疗贫血、肺结核、肺气肿、肾功能衰竭,神经衰弱 等多种疾病,近年来通过大量药理试验证明,还有降压、降脂的作用,临床常 用于心律失常,此外蛹虫草中的有效成分虫草素具有抗癌、抑菌、增强免疫 的功能,因此倍受国内研究人员的关注。由于生态环境的破坏及人们无节制的 采挖,野生资源越来越少,目前已濒临灭绝边缘,为实现该物种的可持续利用, 开展人工培育迫在眉睫。蛹虫草菌为兼性寄生菌,其生长基质及生态环境较一 般食用菌特殊,在自然条件下是由蛹虫草菌以子囊孢子或菌丝体侵染鳞翅目、 鞘翅目或半翅目蛹或虫体,借助虫体内营养萌发生长,在蛹或虫体内形成菌核, 地下越冬,每年8-9月,气温稳定,降量充足,光照适宜时,在虫体胸部发 育长出棍棒状桔红色的子实体伸出地表,是一种虫与菌的结合体。经过多年研 究,我国学者首先对蛹虫草进行分离,获得了成功,并利用桑蚕、柞蚕及黄粉 虫为寄主,实现了人工繁育,以后又在米饭培养基上获得人工繁育的成功。目 前对蛹草虫实行人工栽培的方式有二种,一种是从野外采集桑蚕、柞蚕的活蛹, 经表面消毒后进行人为创伤,并立即将创伤的活蛹在无菌环境中移入长满蛹虫 草菌丝体的瓶内,在20℃左右条件下全黑暗培养28天,待感染菌丝的蛹长满菌 丝后进行散射光刺激,菌丝转色,60天后长出子座,整个生长过程近90天;另 一种是应用大米、蚕蛹粉、营养液进行灭菌、接菌、黑暗培养25天,然后进行 散射光刺激,3-10天后菌丝体完成转色,10-15天后形成原基长出子座,整个 生长过程近60天。这两种培育方法前者由于是使用活蛹作为培养基,蛹在培养 过程中感染率比较低,30%左右,产量低下。后者采用米饭作为培养基质进行培 养则需大量粮食,生产成本较高,且产量、质量不稳定。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产成本低,生产工艺简单,生产周期短,产量、 质量稳定的蛹虫草液体静置培养方法
本发明的目的通过以下技术方案来实现:
其工艺流程如下:
1、液体培养基配制:去皮铃薯190~220g切片,加入10~15g蚕蛹粉、 800~1000毫升水,沸腾后煮20~30分钟,用纱布过滤取汁,然后加入蔗糖20g、 蛋白胨5g、磷酸二氢3g、硫酸镁1.5g,再加水至1000毫升,pH7;
2、液体培养基的分装、灭菌、接菌:选择透明的玻璃瓶或塑料瓶(250毫 升),每瓶放入100~120毫升的培养基,用皮纸或聚丙烯膜封口,在高压灭 菌器中,压力1.2~1.3kg/cm2,温度121~122℃下灭菌30分钟,待菌瓶冷却 后,在无菌条件下接入蛹虫草菌,每瓶接入量1~2毫升。
3、菌丝体培养:菌瓶接菌后,放入遮光、18~20℃养菌室内静置培养,室 内湿度保持在55~60%,7~10天菌丝长满液面,即得蛹虫草菌。
4、菌丝体转色、原基分化:提高温度至20~22℃,加强光照,光照强度在 500~600lux,每天光照10h,8~10天后菌丝由白色转为桔黄色,菌丝扭结形 成瘤突起物,分化形成原基。
5、子实体生长、采收:形成原基后,在封口膜上开透气小孔,增大透气量, 室内湿度80~85%,光照强度控制在800~1000lux,温度在20~22℃,蛹虫草 子实体逐渐伸长,长至6~8cm时,顶部膨大,少量子囊孢子开始出,开始采收。 采收时,用剪刀从子实体根部剪取,清除杂质,并在1小时内及时放入恒温箱 中,温度控制在30~45℃,6~8小时,烘干即可。
本发明的的技术效果是:蛹虫草菌为兼性寄生菌,其生长发育对光照、温 度、水分、通气等自然条件要求较为严格,若获得优质高产的蛹虫草,首先应 满足其生长发育所需的营养条件及环境,此项发明是根据蛹虫草菌丝生长发育 所需的环境及营养条件进行培养,即在液体培养基中加入蛹虫草生长时所需的 氮源、源和微量元素,并在不同的生长阶段进行温度、光照的控制,促进蛹 虫草菌丝扭结,子座的形成,有利于子实体生长。该方法简便易行,在菌丝体 培养及子实体形成过程中,采用静置培养的方式,具有以下几个优点:(1)节 约大量粮食,降低生产成本近1/5;(2)省去常规液体菌种培养过程中,利用摇 床进行摇动,促进菌丝发酵的过程,生产工艺简单,有利于工厂化生产;(3) 从接种到采收为40天,生产周期缩短1/3~1/2。
附图说明
附图为本发明工艺流程方框图

具体实施方式

本发明具体实施例
1、液体培养基配制:去皮马铃薯200g切片,加入10g蚕蛹粉、800~1000 毫升水,沸腾后煮30分钟,用四层纱布过滤取汁,然后加入蔗糖20g、蛋白胨 5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g,再加水至1000毫升,pH7;
2、液体培养基的分装、灭菌、接菌:选择透明的玻璃瓶(250毫升),每瓶 放入100毫升的培养基,用聚丙烯膜封口,在高压灭菌器中,压力1.2kg/cm2, 温度121℃下灭菌30分钟,待菌瓶冷却后,在无菌条件下接入蛹虫草菌,每瓶 接入量1毫升。
3、菌丝体培养:菌瓶接菌后,放入遮光、18~20℃养菌室内静置培养,室 内湿度保持在55~60%,7~10天菌丝长满液面,即得蛹虫草菌。
4、菌丝体转色、原基分化:提高温度至20~22℃,加强光照,光照强度在 500~600lux,每天光照10h,10天后菌丝由白色转为桔黄色,菌丝扭结形成 瘤突起物,分化形成原基。
5、子实体生长、采收:形成原基后,在封口膜上开7~10个透气小孔,增 大透气量,室内湿度80~85%,光照强度控制在800~1000lux,温度在20~22℃, 蛹虫草子实体逐渐伸长,长至6~8cm时,顶部膨大,少量子囊孢子开始出,开 始采收。采收时,用剪刀从子实体根部剪取,清除杂质,并在1小时内及时放 入恒温箱中,温度控制在30~45℃,6~8小时,烘干即可。
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