技术领域

本发明涉及包括肽和肽模拟物的本身具有抗真菌活性的化合 物，以及所述化合物与具有抗真菌活性的其他药剂的组合。本发明 包括细胞周期G2关卡消除剂作为抗真菌剂如抗真菌药物的应用。

                     技术背景

细胞周期包括S期(DNA复制)、M期(有丝分裂)和S期与M期 之间的两个间期(G1期和G2期)。细胞周期中的关卡保证进程的准 确，如监控DNA的完整状况、DNA的复制、细胞的大小和周围的 环境(Maller，J.L.Curr.Opin.Cell Biol.，3：26(1991))。保持基因组的完 整性对于多细胞生物体来说特别重要，有多重关卡可以监控基因组 的状况，其中有分别出现在DNA复制前和有丝分裂前的G1关卡和 G2关卡。对于多细胞生物体来说，进入S期之前纠正DNA损伤是 至关紧要的，因为一旦受损DNA被复制，通常会发生突变(Hartwell，L. Cell，71：543(1992))。不修复大量的DNA损伤就通过G1关卡和G2 关卡会导致凋亡和/或突变。

大多数癌细胞的G1关卡相关蛋白如p53、Rb、MDM-2、p16INK4 和p19ARF发生异常(Levine，A.J.Cell，88：323(1997))。G1关卡的消除 导致突变率升高，出现在癌细胞中观察到的许多突变。结果，大多 数癌细胞要依赖G2关卡抵挡过量的DNA损伤来存活(O’Connor和 Fan，Prog.Cell Cycle Res.，2：165(1996))。这种状况与没有严格的细胞 周期G1关卡、但有严格的G2关卡的单细胞生物体如酵母和真菌类 似。单细胞生物体只要它们当中有一个能通过获得有利的突变适应 环境变化就能够作为一个物种得以生存。其特别针对DNA损伤的G1 关卡低严格性有利于获得有益的突变。

现认为，引起DNA损伤后细胞周期G2停顿的机制在从酵母到 人类的物种中都是保守的。存在受损DNA时，Cdc2/细胞周期蛋白 B激酶保持在失活状态，这是由于Cdc2激酶上的苏氨酸-14和酪氨 酸-15残基的抑制性磷酸化作用，或者由于细胞周期蛋白B的蛋白水 平降低。有丝分裂开始时，双重磷酸酶Cdc25除去抑制性磷酸，从 而激活Cdc2/细胞周期蛋白B激酶。Cdc2/细胞周期蛋白B的激活等 于M期的开始。

在裂殖酵母中，对应受损DNA的细胞周期停顿需要蛋白激酶 Chk1。Chk1激酶作用于几个rad基因产物(包括rad3(人ATM的直 向同源物))的下游，当发生DNA损伤时可被磷酸化修饰。已知芽殖 酵母的Rad53激酶和裂殖酵母的Cds1激酶可从未复制的DNA传导 信号。Chk1和Cds1之间似乎存在一定的丰余性，因为同时除去Chk1 和Cds1会最终导致由受损DNA诱导的G2停顿发生中断。Chk1和 Cds1均能使Cdc25磷酸化，促进rad24(人14-3-3的直向同源物)与 Cdc25的结合，这可使Cdc25与胞质隔绝，防止Cdc2/细胞周期蛋白 B活化。Cdc25似乎是上述这些激酶的靶标。

                         发明概述

本发明提供抗真菌化合物，包括肽和肽模拟物，还提供使用抗 真菌化合物的方法。本发明抗真菌化合物可用于处理真菌(例如杀死 或抑制酵母、霉菌、黏菌的生长)。这种化合物可用来治疗具有不良 真菌接触、污染、生长、增殖或感染或者具有上述风险的任何对象 或生物体。例如，所述化合物可用来治疗具有真菌生长或感染的或 者存在这种风险的对象，包括哺乳动物如人类。

本发明化合物可与其他治疗或药剂联合使用，包括抗真菌治疗 和其他治疗方法。抗真菌治疗的具体非限制性实例包括例如抗真菌 剂或核酸损伤治疗。可用包括本发明组合物和抗真菌剂的组合物来 减少、降低或抑制真菌的接触、污染、生长、增殖或感染。因此， 可按本文阐明的方法，单独使用本发明化合物或将其与其他抗真菌 治疗联合使用。

本发明因此提供抑制或减少真菌感染或真菌生长的方法。在一 个实施方案中，所述方法包括使真菌或与真菌接触的物体与其量足 以抑制或减少真菌感染或真菌生长的肽或肽模拟物序列相接触。

本发明进一步提供抑制或减少物体或生物体的真菌污染的方 法。在一个实施方案中，所述方法包括使所述物体或者生物体与其 量足以抑制或减少物体真菌污染的化合物(包括肽或肽模拟物序列)相 接触。

本发明还提供治疗真菌生长或真菌感染的方法。在一个实施方 案中，所述方法包括给予具有真菌生长或真菌感染的影响或者存在 这种风险的对象其量足以治疗真菌生长或真菌感染的化合物，包括 肽或肽模拟物序列。

本发明另外提供治疗具有真菌生长、污染或感染或者存在这种 风险的植物、植物部分或种子中真菌生长、污染或感染的方法。在 一个实施方案中，所述方法包括使具有真菌生长、污染或感染或者 存在这种风险的植物、植物部分或种子与其量足以治疗真菌生长、 污染或感染的化合物(包括肽或肽模拟物序列)相接触。

本发明肽和肽模拟物序列包含与P1、P2、P3、P4、P5、P6或P6、 P5、P4、P3、P2、P1所定义的序列具有90％或更高一致性的序列； 其中P1是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l- (Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、 d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧 啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯 并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹 唑啉基团的任何氨基酸；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l- (Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、 d-或l-Phe4NO2、拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe)的氨 基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、吗 啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯并 噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的任 何氨基酸；P3、P4、P5是任何氨基酸，或者P3、P4、P5中的一个 或多个是简单碳链，使得P2和P6的距离与当P3、P4、P5各自为氨 基酸时的距离近乎相同(P4处的实例是d-或l-Trp)；P6是d-或l-Bpa、 d-或l-Phe4NO2、任何氨基酸和d-或l-Tyr(例如d-Ser-d-Tyr)、任何氨 基酸和d-或l-Phe(例如d-Ser-d-Phe)、任何氨基酸或不存在。

本发明肽和肽模拟物序列进一步包含与P1、P2、P3、P4、P5、 P6或P6、P5、P4、P3、P2、P1所定义的序列具有90％或更高一致 性的序列；其中P1是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、 d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、拥有类似侧链空间(例如d-或 l-Tyr、d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、哌 嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、 萘、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔 啉、喹唑啉基团的任何氨基酸；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d- 或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l- Bpa、d-或l-Phe4NO2、拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe) 的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、哌嗪、嘧啶、哌嗪、 吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯 并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的 任何氨基酸；P3、P4、P5是任何氨基酸，或者P3、P4、P5中的一 个或多个是简单碳链，使得P2和P6的距离与当P3、P4、P5各自为 氨基酸时的距离近乎相同(P4处的实例是d-或l-Trp)；P6是d-或l- Bpa、d-或l-Phe4NO2、任何氨基酸和d-或l-Tyr(例如d-Ser-d-Tyr)、 任何氨基酸和d-或l-Phe(例如d-Ser-d-Phe)、任何氨基酸或不存在。

在各个方面，具有简单碳链的氨基酸是d-或l-11-氨基十一烷酸、 d-或l-10-氨基癸酸、d-或l-9-氨基壬酸、d-或l-8-氨基辛酸、d-或l-7- 氨基庚酸、d-或l-6-氨基己酸或具有一个或多个不饱和碳键的类似结 构。

本发明的各方面包括肽和肽模拟物与抗真菌治疗或抗真菌剂的 组合物。在一个方面，抗真菌治疗或抗真菌剂是核酸损伤剂或核酸 损伤治疗。具体地说，肽或肽模拟物可与核酸损伤剂、核酸损伤治 疗、抗真菌剂或抗真菌治疗结合，以给予或传递给对象或者其他生 物体或物体。

本发明的另外各方面包括肽和肽模拟物与抗炎和抗微生物治疗 或抗微生物剂的组合物。具体地说，肽或肽模拟物可与抗炎或抗微 生物治疗或抗炎剂或抗微生物剂结合，以给予或传递给对象或者其 他生物体或物体。

药剂和治疗包括药物，例如化疗药物或具有抗真菌活性或抗真 菌功能的药物。所述药剂和治疗包括全身性药物以及区域性或局部 性药物。

药物的具体实例包括属于以下化学物质类别的药物：烯丙胺、 吡咯、多烯、嘧啶、四烯、硫代氨基甲酸酯、磺酰胺、葡聚糖合成 抑制剂和苯甲酸化合物。这种药物的具体实例包括：amrolfine、布替 萘芬、萘替芬、特比萘芬、酮康唑、氟康唑、elubiol、益康唑、econaxole、 伊曲康唑、异康唑、咪唑、咪康唑、硫康唑、克霉唑、恩康唑、奥 昔康唑、噻康唑、特康唑、布康唑、噻苯达唑、伏立康唑、沙康唑、 舍他康唑、芬替康唑、泊沙康唑、联苯苄唑、氟曲马唑、制霉菌素、 纳他霉素、两性霉素B、氟胞嘧啶、那他霉素、托萘酯、磺胺米隆、 氨苯砜、卡泊芬净、actofunicone、灰黄霉素、碘化钾、龙胆紫、环 吡酮、环吡酮胺、卤普罗近、十一烯酸盐、磺胺嘧啶银、十一烯酸、 十一烯酸链烷醇酰胺、卡宝品红及它们的前药。这种药物另外的实 例包括：5-氟尿嘧啶(5-FU)、雷别卡霉素、阿霉素(ADR)、博来霉素 (Bleo)、培洛霉素、顺铂衍生物、喜树碱(CPT)及它们的前药。

真菌可存在于物体或生物体，如人类对象或植物的内部或表面。 所述物体可以是无机材料或有机材料。所述真菌或物体可存在于环 境中、居住区、商业区、工业区或社区中，或者农业或园艺区域中。 所述生物体可以是单细胞生物或多细胞生物。所述细胞可以是培养 细胞或者是体内细胞或先体外后体内细胞。

所述真菌包括酵母、霉菌或黏菌。具体的酵母属包括念珠菌 (Canida)和酵母菌(Saccharomyces)。具体的酵母包括皮肤真菌、粗球 孢子菌(Coccidioides immitis)、荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)、白念珠菌(Candida albicans)和烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。

真菌生长或真菌感染可出现于对象的表面。真菌生长、感染、 接触或者污染的区域包括例如皮肤、脚趾、指甲、毛发或黏膜组织。 受真菌生长、污染或感染的黏膜组织的实例包括例如胃肠道、口腔、 肺、支气管道、鼻道和鼻窦、泌尿生殖道和阴道。

本发明组合物和方法可在局部、区域或全身性施用。本发明组 合物可在真菌接触、污染、生长或感染之前、基本上同时或之后给 予。本发明组合物可施用于皮肤、脚趾、指甲、毛发或黏膜组织。

真菌生长或真菌感染会导致各种疾病或症状。具体的实例包括 甲真菌病、股癣或脚癣、副球孢子菌病、芽生菌病、毛霉病、隐球 菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、念珠菌病和曲霉病。

本发明组合物和治疗方法可减少、降低或抑制真菌的生长、污 染、生存或感染。本发明组合物和治疗方法可降低对真菌生长、污 染或感染的易感性或重发率。本发明组合物和治疗方法可抑制真菌 生长、污染或感染的恶化或发展。

本发明组合物和方法可使被治疗对象的病症好转。好转可包括 例如减少刺激、发痒、发炎、炎症、荨麻疹、浆液渗出、搔痒症、 排出物过量、变色、头痛和疲劳；减少真菌生长或感染的易感性或 重发率；抑制对象病症的恶化或发展。

当对植物、植物部分或种子实施治疗时，所述接触可为局部、 区域或系统进行。对植物、植物部分或种子实施的治疗包括在真菌 生长、污染或感染之前、基本上同时或之后与所述序列相接触。植 物、植物部分或种子可存在于环境中，工业区、社区、居住区或商 业区中，或者农业或园艺区域中。

真菌生长、污染或感染的实例包括黑斑病、炭疽病(glomerella)、 ripe spot、煤污病、壳针孢叶斑病、尾孢菌叶斑病、锈病、霜霉病、 褐腐、褐斑病、黑穗病、疣病(疣病)、死枝病(dead arm disease)、球 腔菌(mycosphaerella)叶斑病、玫瑰黑斑病、花坏疽病(flower blight)、 壳针孢枯叶病(septoria leaf blight)、早疫病和晚疫病、叶霉、炭疽病、 环斑病、硬币元状斑病、玉米大斑病、梨黑斑病菌和leaspora spot。

用于植物、树木、灌木等，可结合到或应用于本发明组合物和 方法的药物和治疗的具体实例包括Banner Maxx、Compass Cleary′s、 嗪氨灵、Immunox、代森锌、磺氨黄隆、代森锰锌、腈菌唑、托扑净 (Topsin)、克菌丹、塞仑、萎锈灵、甲霜灵(mefenoxan)、PCNB、咯 菌腈、噻苯达唑、铜基杀真菌剂、含硫化合物、柑桔油(citrus oils)和 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

本发明此外还提供鉴定或筛选具有抗真菌活性的化合物(例如肽 和肽模拟物)的方法。在一个实施方案中，所述方法包括使消除或抑 制G2关卡的化合物与真菌相接触；将真菌与所述化合物一起培养； 和测定真菌的生存、生长或增殖。化合物存在时真菌的生存、生长 或增殖降低证实该化合物具有抗真菌活性。在另一个实施方案中， 所述方法包括使消除或抑制G2关卡的化合物与真菌相接触；将真菌 与所述化合物一起培养；和测定真菌的生存、生长或增殖。

                    附图说明

图1显示CBP501对各种丝氨酸-苏氨酸激酶的体外磷酸化抑制 活性。Y轴表示指定激酶对底物的磷酸化作用。100％是无化合物时 的激酶活性。

图2显示CBP501在存在和不存在抗真菌剂两性霉素B时的抗 真菌活性。

                      发明详述

本发明提供可用于处理真菌接触、污染、生长、增殖或感染， 以及治疗真菌接触、污染、生长、增殖或感染相关或造成的疾病或 者病症的化合物。因此本发明提供了包括肽和肽模拟物的具有抗真 菌活性或抗真菌功能的化合物；以及使用所述化合物处理、减少或 已知真菌接触、污染、生长、增殖或感染，或者减少或降低对真菌 接触、污染、生长、增殖或感染的易感性或重发率的方法。虽然不 想为任何理论所囿，但包括肽和肽模拟物的本发明化合物抑制酵母 和其他真菌接触、污染、生长、增殖或感染的能力似乎至少部分归 因于对细胞周期G2关卡的消除。

在一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连肽 或肽模拟物序列：P1、P2、P3、P4、P5、P6或P6、P5、P4、P3、P2、 P1；其中P1是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d- 或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、拥有类似侧链空间(例如d-或l- Tyr、d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、吡 嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、 萘、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔 啉、喹唑啉基团的任何氨基酸；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d- 或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l- Bpa、d-或l-Phe4NO2、拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe) 的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、 吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯 并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的 任何氨基酸；P3、P4、P5是任何氨基酸，或者P3、P4、P5中的一 个或多个是简单碳链，使得P2和P6的距离与当P3、P4、P5各自为 氨基酸时的距离近乎相同(P4处的实例是d-或l-Trp)；P6是d-或l- Bpa、d-或l-Phe4NO2、任何氨基酸和d-或l-Tyr(例如d-Ser-d-Tyr)、任 何氨基酸和d-或l-Phe(例如d-Ser-d-Phe)、任何氨基酸或不存在。在 各个方面，具有简单碳链的氨基酸是d-或l-11-氨基十一烷酸、d-或l-10- 氨基癸酸、d-或l-9-氨基壬酸、d-或l-8-氨基辛酸、d-或l-7-氨基庚酸、 d-或l-6-氨基己酸或具有一个或多个不饱和碳键的类似结构。

在另一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：

P1，P2，P3，P4，P5，P6；P6， P5，P4，P3，P2，P1；P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7，P8，P9，P10，P11，P12；P1，P2，P3，P4，P5，P6， P12，P11，P10，P9，P8，P7；P6，P5，P4，P3，P2，P1，P7，P8，P9，P10，P11，P12；P6，P5，P4，P3， P2，P1，P12，P11，P10，P9，P8，P7；P7，P8，P9，P10，P11，P12，P1，P2，P3，P4，P5，P6；P7，P8， P9，P10，P11，P12，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P10，P9，P8，P7，P1，P2，P3，P4，P5，P6； P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P6，P9，P8，P7，P2，P1；P12，P11， P10，P6，P9，P4，P7，P2，P1；P1，P2，P7，P8，P9，P6，P11，P12；或P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10， P11，P12；

其中P1是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d- 或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、 拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具 有一个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或 一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二 氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的任何氨基酸；P2是 d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、 d-或l-(Phe-4CF3)、拥有类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe)的 氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、 吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯 并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的 任何氨基酸；P3、P4、P5是任何氨基酸，或者P3、P4、P5中的一 个或多个是简单碳链，使得P2和P6的距离与当P3、P4、P5各自为 氨基酸时的距离近乎相同(P4处的实例是d-或l-Trp)；P6是d-或l- Bpa、d-或l-Phe4NO2、任何氨基酸和d-或l-Tyr(例如d-Ser-d-Tyr)、任 何氨基酸和d-或l-Phe(例如d-Ser-d-Phe)；P7、P8、P9、P10、P11、 P12中至少有三个是碱性氨基酸，剩下的是任何氨基酸或不存在。在 各个方面，具有简单碳链的氨基酸是d-或l-11-氨基十一烷酸、d-或l-10- 氨基癸酸、d-或l-9-氨基壬酸、d-或l-8-氨基辛酸、d-或l-7-氨基庚酸、 d-或l-6-氨基己酸或具有一个或多个不饱和碳键的类似结构。

在又一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7，P8，P9，P10，P11，P12； P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P10，P6，P9， P4，P7，P2，P1；或P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10，P11，P12；其中P1是d- 或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、 d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、拥有类似侧链空间(例 如d-或l-Tyr、d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具有一个或两个芳基、哌 啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或一个吲哚、并环戊二烯、 茚、萘、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二氢吲哚、苯并二氢吡喃、 喹喔啉、喹唑啉基团的任何氨基酸；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、 d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、拥有 类似侧链空间(例如d-或l-Tyr、d-或l-Phe)的氨基酸或侧链中具有一 个或两个芳基、哌啶、吡嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉或嘧啶基团或一个 吲哚、并环戊二烯、茚、萘、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、二氢吲 哚、苯并二氢吡喃、喹喔啉、喹唑啉基团的任何氨基酸；P3、P4、P5 是任何氨基酸，或者P3、P4、P5中的一个或多个是简单碳链，使得 P2和P6的距离与当P3、P4、P5各自为氨基酸时的距离近乎相同(P4 处的实例是d-或l-Trp)；P6是d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、任何氨基 酸和d-或l-Tyr(例如d-Ser-d-Tyr)、任何氨基酸和d-或l-Phe(例如d- Ser-d-Phe)、任何氨基酸或不存在；P7、P8、P9、P10、P11、P12中 至少有三个是碱性氨基酸，剩下的是任何氨基酸或不存在。在各个 方面，具有简单碳链的氨基酸是d-或l-氨基十一烷酸或d-或l-8-氨基 辛酸。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：P1，P2，P3，P4，P5，P6或P6，P5，P4，P3，P2，P1； 其中P1是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l- (Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、d-或l- Tyr或者d-或l-Phe；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe- 2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d- 或l-Phe4NO2、d-或l-Tyr或者d-或l-Phe；P3是d-或l-丝氨酸、d-或l- 精氨酸、d-或l-半胱氨酸、d-或l-脯氨酸或者d-或l-天冬酰胺；P4是 d-或l-色氨酸；P5是d-或l-丝氨酸、d-或l-精氨酸或者d-或l-天冬酰 胺；或者P3、P4、P5是单个d-或l-氨基十一烷酸或单个d-或l-8-氨 基辛酸；P6是d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、(d-Ser-d-Tyr)或者(d-Ser- d-Phe)。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：

                                                              P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7， P8，P9，P10，P11，P12；P1，P2，P3，P4，P5，P6，P12，P11，P10，P9，P8，P7；P6，P5，P4，P3，P2， P1，P7，P8，P9，P10，P11，P12；P6，P5，P4，P3，P2，P1，P12，P11，P10，P9，P8，P7；P7，P8，P9， P10，P11，P12，P1，P2，P3，P4，P5，P6；P7，P8，P9，P10，P11，P12，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12， P11，P10，P9，P8，P7，P1，P2，P3，P4，P5，P6；P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2， P1；P12，P11，P6，P9，P8，P7，P2，P1)；P12，P11，P10，P6，P9，P4，P7，P2，P1；P1，P2，P7，P8， P9，P6，P11，P12；或P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10，P11，P12；

其中P1是d-或l-Cha、Nal(2)、d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l- (Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、d-或l- Tyr或者d-或l-Phe；P2是d-或l-Cha、d-或l-Nal(2)、d-或l-(Phe- 2，3，4，5，6-F)、d-或l-(Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)、d-或l-Bpa、d- 或l-Phe4NO2、d-或l-Tyr或者d-或l-Phe；P3是d-或l-丝氨酸、d-或l- 精氨酸、d-或l-半胱氨酸、d-或l-脯氨酸或者d-或l-天冬酰胺；P4是 d-或l-色氨酸；P5是d-或l-丝氨酸、d-或l-精氨酸或者d-或l-天冬酰 胺；或者P3、P4、P5是单个d-或l-氨基十一烷酸或单个d-或l-8-氨 基辛酸；P6是d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、(d-Ser-d-Tyr)或者(d-Ser- d-Phe)；P7、P8、P9、P10、P11、P12中至少有三个是d-或l-Arg或 者d-或l-Lys，剩下的是任何氨基酸或不存在。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7，P8，P9，P10，P11，P12； P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P10，P6，P9， P4，P7，P2，P1；或P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10，P11，P12；其中P1是d- 或l-Cha或者d-或l-Nal(2)；P2是d-或l-(Phe-2，3，4，5，6-F)、d-或l- (Phe-3，4，5F)、d-或l-(Phe-4CF3)；P7、P8、P9、P10、P11、P12中至 少有三个是d-或l-Arg，剩下的是任何氨基酸或不存在；P3是d-或l- 丝氨酸；P4是d-或l-色氨酸；P5是d-或l-丝氨酸或者d-或l-天冬酰 胺；P6是d-或l-Bpa、d-或l-Phe4NO2、(d-或l-Ser或者d-或l-Tyr)或 者(d-或l-Ser或者d-或l-Phe)。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：P1，P2，P3，P4，P5，P6或P6，P5，P4，P3，P2，P1；其 中P1是d-或l-Cha或者d-或l-Nal(2)；P2是(d-或l-Phe-2，3，4，5，6-F)、 (d-或l-Phe-3，4，5F)或者(d-或l-Phe-4CF3)；P3是d-或l-Ser；P4是d- 或l-Trp；P5是d-或l-Ser；P6是d-或l-Bpa或者(d-或l-Ser或者d-或 l-Tyr)。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：

                                                                 P1，P2，P3，P4，P5，P6；P6， P5，P4，P3，P2，P1；P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7，P8，P9，P10，P11，P12；P1，P2，P3，P4，P5，P6， P12，P11，P10，P9，P8，P7；P6，P5，P4，P3，P2，P1，P7，P8，P9，P10，P11，P12；P6，P5，P4，P3， P2，P1，P12，P11，P10，P9，P8，P7；P7，P8，P9，P10，P11，P12，P1，P2，P3，P4，P5，P6；P7，P8， P9，P10，P11，P12，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P10，P9，P8，P7，P1，P2，P3，P4，P5，P6； P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P6，P9，P8，P7，P2，P1；P12，P11， P10，P6，P9，P4，P7，P2，P1；P1，P2，P7，P8，P9，P6，P11，P12；or P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10， P11，P12；

其中P1是d-或l-Cha或者d-或l-Nal(2)；P2是(d-或l-Phe- 2，3，4，5，6-F)、(d-或l-Phe-3，4，5F)或者(d-或l-Phe-4CF3)；P3是任何氨 基酸(例如d-或l-Ser或者d-或l-Pro)；P4是d-或l-Trp；P5是任何氨 基酸(例如d-或l-Ser)；P7是d-或l-Arg；P8是d-或l-Arg；P9是d-或 l-Arg；P10是d-或l-Gln或者d-或l-Arg；P11是d-或l-Arg；P12是 d-或l-Arg；P6是d-或l-Bpa或者(d-或l-Ser或者d-或l-Tyr)。

在再一个实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7，P8，P9，P10，P11，P12； P12，P11，P10，P9，P8，P7，P6，P5，P4，P3，P2，P1；P12，P11，P10，P6，P9， P4，P7，P2，P1或者P1，P2，P7，P4，P9，P6，P10，P11，P12；其中P1是d- 或l-Cha或者d-或l-Nal(2)；P2是(d-或l-Phe-2，3，4，5，6-F)；P3是d-或 l-Ser；P4是d-或l-色氨酸；P5是d-或l-Ser；P7是d-或l-Arg；P8是 d-或l-Arg；P9是d-或l-Arg；P10是d-或l-Gln或者d-或l-Arg；P11 是d-或l-Arg；P12是d-或l-Arg；P6是d-或l-Bpa或者(d-或l-Ser或 者d-或l-Tyr)。

在另外的实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：

                                                           (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d- Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg) (d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F) (d-Cha)；(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln) (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Ser)(d- Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser) (d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d- Arg)(d-Arg)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)；(d-Cha)(d-Phe- 2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)； (d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)( d-Ser)(d-Bpa)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F) (d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)；(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)(d- Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d- Arg)(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d- Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d- Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6- F)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d- Arg)(d-Trp)(d-Arg)(d-Pbe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Trp) (d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d- Trp)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Trp)(d-Arg) (d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)；(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-BPa)(d-Arg)(d-Arg)(d- Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)；或(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d- Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg).

在另外的实施方案中，本发明化合物包括包含以下结构的毗连 肽或肽模拟物序列：(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d- Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)。

在更多的实施方案中，本发明化合物含有以下毗连肽或肽模拟 物序列：X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11，其中X1是L、F、W、 M、R、I、V、Y、K或不存在，X2是Y、F、A、W、S或T，X3是 任何氨基酸，X4是任何氨基酸，X5是任何氨基酸，X6是S、A、N、 H或P，X7是任何氨基酸，X8是任何氨基酸，X9是任何氨基酸或不 存在，X10是N、G、L、S、M、P、N、A或不存在，X11是L或不 存在。在各个方面，X1是L、F、W、M、R或不存在，或者X1是L、 F或W；X2是Y、F、A；X3是R、T、S、H、D、G、A、L、K、A、 N、Q或P，或者X3是R、T、S、H、D、G、A或L，或者X3是R、 T、S或H；X4是S、T、G、A、L、R、I、M、V、P、或者X4是S、 T、G、A、L、R、或者X4是S；X5是P、A、G、S或T、或者X5 是P；X6是S、N、H、P、A、G或T、或者X6是S、N或H、或者 X6是S；X7是M、F、Y、D、E、N、Q、H、G、I、L、V、A、P、 N或W，或者X7是M、F、Y、D、E、N、Q或H，或者X7是M、 F、Y、Q或H；X8是P、F、Y、W、L、G、M、D、E、N、Q、H、 I、V、A或P，或者X8是P、F、Y或W，或者X8是Y；X9是E、G、 L、S、M、P、N、D、A、T、P或不存在；X10是不存在；X11是不 存在；在再一个实施方案中，X2是Y，X5是P，X10是N；X3是R， X8是P，X11是L；X4是S，X5是P，X6是S，X9是E，X10是N，X11 是L。

在更多的实施方案中，本发明化合物含有以下毗连肽或肽模拟 物序列：Y G G P G G G G N(SEQ ID NO：1)；R Y S L P P E L S N M (SEQ ID NO：2)；L A R S A S M P E A L(SEQ ID NO：3)；L Y R S P S M P E N L(SEQ ID NO：4)；L Y R S P A M P E N L(SEQ ID NO：5)；W Y R S P S F Y E N L(SEQ ID NO：6)； W Y R S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：7)；or，W Y R S P S Y Y(SEQ ID NO：8).

在其他的实施方案中，本发明化合物含有以下毗连肽或肽模拟 物序列：

L Y R S P S Y P E N L(SEQ ID NO：9)，L Y R S P S Y F E N L(SEQ ID NO：10)，L Y R S P S Y Y E N L，(SEQ ID NO：11)，L Y R S P S Y W E N L (SEQ ID NO：12)，L Y R S P S N P E N L(SEQ ID NO：13)，L Y R S P S N F E N L(SEQ ID NO：14)，L Y R S P S N Y E N L(SEQ ID NO：15)，L Y R S P S N W E N L(SEQ ID NO：16)，L Y R S P S H P E N L(SEQ ID NO：17)，L Y R S P S H F E N L(SEQ ID NO： 18)，L Y R S P S H Y E N L(SEQ ID NO：19)，L Y R S P S H W E N L(SEQ ID NO：20)， L Y S S P S M P E N L(SEQ ID NO：21)，L Y S S P S M F E N L(SEQ ID NO：22)，L Y S S P S M Y E N L(SEQ ID NO：23)，L Y S S P S M W E N L(SEQ ID NO：24)，LY S S P S F P E N L(SEQ ID NO：25)，L Y S S P S F P E N L(SEQ ID NO：26)，L Y S S P S F F E N L(SEQ ID NO：27)，L Y S S P S F Y E N L(SEQ ID NO：28)，L Y S S P S F W E N L(SEQ ID NO：29)，L Y S S P S Y P E N L(SEQ ID NO：30)，L Y S S P S Y F E N L(SEQ ID NO： 31)，L Y S S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：32)，L Y S S P S Y W E N L(SEQ ID NO：33)，L Y S S P S Q P E N L(SEQ ID NO：34)，L Y S S P S Q W E N L(SEQ ID NO：35)，L Y S S P S H P E N L(SEQ ID NO：36)，L Y S S P S H F E N L(SEQ ID NO：37)，L Y S S P S H Y E N L(SEQ ID NO：38)，L Y S S P S H W E N L(SEQ ID NO：39)，L Y T S P S M P E N L (SEQ ID NO：40)，L Y T S P S M F E N L(SEQ ID NO：41)，L Y T S P S M Y E N L(SEQ ID NO：42)，L Y T S P S M W E N L(SEQ ID NO：43)，L Y T S P S F P E N L(SEQ ID NO：44)，L Y T S P S F F E N L(SEQ ID NO：45)，L Y T S P S F Y E N L(SEQ ID NO： 46)，L Y T S P S F W E N L(SEQ ID NO：47)，L Y T S P S Y P E N L(SEQ ID NO：48)，L Y T S P S Y F E N L(SEQ ID NO：49)，L Y T S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：50)，L Y T S P S Y W E N L(SEQ ID NO：51)，L Y T S P S N P E N L(SEQ ID NO：52)，L Y T S P S N F E N L(SEQ ID NO：53)，L Y T S P S N Y E N L(SEQ ID NO：54)，L Y T S P S N W E N L (SEQ ID NO：55)，L Y T S P S H P E N L(SEQ ID NO：56)，L Y T S P S H F E N L(SEQ ID NO：57)，L Y T S P S H Y E N L(SEQ ID NO：58)，L Y T S P S H W E N L(SEQ ID NO：59)，L Y H S P S Y P E N L(SEQ ID NO：60)，L Y H S P S Y F E N L(SEQ ID NO： 61)，L Y H S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：62)，L Y H S P S Y W E N L(SEQ ID NO：63)， L F T S P S Y P E N L(SEQ ID NO：64)，L F T S P S Y F EN L(SEQ ID NO：65)，L F T S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：66)，L F T S P S Y W E N L(SEQ ID NO：67)，F Y S S P S H P E N L(SEQ ID NO：68)，F Y S S P S H F E N L(SEQ ID NO：69)，F Y S S P S H Y E N L (SEQ ID NO：70)，F Y S S P S H W E N L(SEQ ID NO：71)，F Y T S P S M P E N L(SEQ ID NO：72)，F Y T S P S M F E N L(SEQ ID NO：73)，F Y T S P S M Y E N L(SEQ ID NO：74)，F Y T S P S M W E N L(SEQ ID NO：75)，F Y T S P S F P E N L(SEQ ID NO： 76)，F Y T S P S F F E N L(SEQ ID NO：77)，F Y T S P S F Y E N L(SEQ ID NO：78)，F Y T S P S F W E N L(SEQ ID NO：79)，F Y T S P S Y P E N L(SEQ ID NO：80)，F Y T S P S Y F E N L(SEQ ID NO：81)，F Y T S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：82)，F Y T S P S Y W E N L(SEQ ID NO：83)，W Y R S P S M P E N L(SEQ ID NO：84)，W Y R S P S M F E N L(SEQ ID NO：85)，W Y R S P S M Y E N L(SEQ ID NO：86)，W Y R S P S M W E N L (SEQ ID NO：87)，W Y R S P S F P E N L(SEQ ID NO：88)，W Y R S P S F F E N L(SEQ ID NO：89)，W Y R S P S F Y E N L(SEQ ID NO：90)，W Y R S P S F W E N L(SEQ ID NO：91)，W Y R S P S Y P E N L(SEQ ID NO：92)，W Y R S P S Y F E N L(SEQ ID NO： 93)，W Y R S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：94)，W Y R S P S Y W E N L(SEQ ID NO：95)， W Y T S P S M P E N L(SEQ ID NO：96)，W Y T S P S M F E N L(SEQ ID NO：97)，W Y T S P S M Y E N L(SEQ ID NO：98)，W Y T S P S M W E N L(SEQ ID NO：99)，W Y T S P S F P E N L(SEQ ID NO：100)，W Y T S P S F F E N L(SEQ ID NO：101)，W Y T S P S F Y E N L(SEQ ID NO：102)，W Y T S P S F W E N L(SEQ ID NO：103)，W Y T S P S Y P E N L(SEQ ID NO：104)，W Y T S P S Y F E N L(SEQ ID NO：105)，W Y T S P S Y Y E N L(SEQ ID NO：106)，W Y T S P S Y W E N L(SEQ ID NO：107)，W Y T S P S H P E N L(SEQ ID NO：108)，W Y T S P S H F E N L(SEQ ID NO：109)，W Y T S P S H Y E N L (SEQ ID NO：110)，W Y T S P S H W E N L(SEQ ID NO：111)，L K R S P S M P E N L (SEQ ID NO：112)，L Y I S P S M P E N L(SEQ ID NO：113)或L Y R S P S M V E N L (SEQ ID NO：114).

本发明化合物任选包括细胞膜渗透剂。细胞膜渗透剂可包括多 肽，如TAT蛋白转导结构域，例如序列Y G R K K R R Q R R R(SEQ ID NO：115)。

本发明化合物包括前药。本文所用“前药”指在体内可被代谢、 转化或修饰成活性形式的化合物，所述活性形式如具有抗真菌活性 或功能的肽模拟物的肽。经常使用前药是因为前药可能比母体药物 更容易给药，或与母体药物相比其生物利用度或溶解度更高。前药 的具体非限制性实例是通过氨基或羧基端基与本发明肽或肽模拟物 连接的多肽。所述多肽在体内水解或被代谢，从而释放出活性肽或 肽模拟物。因此，本发明化合物和方法包括肽或肽模拟物前药，其 在体内被代谢、转化或修饰成肽或肽模拟物的活性形式。

本发明化合物具有抗真菌活性或抗真菌功能，或者具有G2消除 或G2抑制活性。本文所用术语“抗真菌活性”和“抗真菌功能”指 在环境中、在农业或园艺区域中或者在商业区、工业区、居住区或 社区中，体外、先体外后体内、体内可检测或可测量的降低、减少 或抑制真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染的。作为杀真菌 剂的化合物通常杀死真菌，而作为抑真菌剂的化合物通常减少或抑 制真菌的生长、生存或增殖。

降低、减少或抑制真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染 可减少真菌污染、生长、生存、增殖或感染的量；或者防止或抑制 与真菌接触、生长、污染、感染或增殖有关的急性或慢性症状、病 症或疾病的发展或恶化。例如，在动物中，可减少或抑制的一种或 多种真菌感染相关或由其造成的症状或病症包括刺激、发痒、发炎、 炎症、荨麻疹、浆液渗出、搔痒症、排出物过量、变色、头痛和疲 劳。在环境中，或者在农业、园艺、工业、社区、商业或居住区域 中，减少或抑制真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染可减少 真菌接触、污染、生长或增殖的量。

抗真菌活性和抗真菌功能可包括降低或减少真菌接触、污染、 生长、生存、增殖或感染的易感性，或降低或减少真菌接触、污染、 生长或感染的重发率。不管是在环境中还是在工业、商业、居住、 社区或者农业或园艺区域中，抗真菌活性和抗真菌功能可出现于任 何有生命生物体或无生命物体中，例如哺乳动物如人类或兽医对象 中，或者出现于易受真菌污染、生长或感染影响的无机或有机材料 中，如有生命的或死的有机物质、生物流体、细胞、器官或组织， 或者任何植物、树木、灌木或者园艺或农业产品(例如花、草、木材、 坚果、农产品、谷物等)中。

本文所用术语“物体”一般指无生命的或原来有生命的物质实 体。物体可由有机或无机材料或它们的组合所组成。无生命生物体 归属本文所用术语“物体”的含义之内。易受真菌接触、污染、生 长、增殖或感染影响的物体包括机械、仪器、器械、装置、工具、 设备(例如用于食品加工)、容器、包装材料或表面。所述物体还包括 见于卫生保健机构如诊所和医院的医用材料。易受真菌接触、污染、 生长、增殖和感染影响的物体进一步包括例如布料、皮革、鞋子、 袜子、手套、帽子、地毯和毛毯、地板、木材、墙板及居家灰尘。 任何由有机材料制成的东西基本上都易受真菌接触、污染、生长、 增殖和感染的影响。

术语“真菌”及其语法变体指属于真菌界的任何生物体。具体 实例包括酵母、霉菌、黏菌、蘑菇和地衣。

本文所用术语“G2”和“G2/M”指细胞周期G2至M期关卡。 术语“G2消除”和“G2抑制”活性指细胞周期的G2关卡被破坏， 以致于细胞不经G2关卡就进入M期，或者指与细胞正常处于G2的 时间长度相比G2关卡的持续时间缩短。因此，例如消除或抑制G2 关卡的肽或肽模拟物会加速G2向M期的过渡，这反过来又会诱导 或刺激细胞在进入M期之前或之后死亡。消除或抑制G2关卡的化 合物指任何使细胞处于G2关卡的时间长度发生可检测或可测量的减 少的化合物。

本文所用术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可互换使用，指 通过酰氨键或相当的非酰氨键共价连接的两个或更多个氨基酸。本 发明肽可为任意长度。肽可具有约5-100个或更多的残基，如长度为 5-12、12-15、15-18、18-25、25-50、50-75、75-100或更长。具有少 至五个残基的肽有活性。例如，(Bpa)(X)(Trp)(X)(Bpa)的活性与 (Bpa)(X)(Trp)(X)(PheF5)(Cha)的近乎相同。本发明肽包括l-和d-异构 体及l-和d-异构体的组合。所述肽可包括通常有关蛋白质的翻译后加 工的修饰，例如环化(例如二硫键或酰氨键)、磷酸化、糖基化、羧化、 泛素化、十四烷基化或脂质化。

本文公开的肽还包括具有类似于氨基酸结构和功能的化合物， 例如具有合成或非天然的氨基酸或氨基酸类似物的肽模拟物，只要 所述模拟物具有一种或多种功能或活性，例如抗真菌活性。因此， 本发明化合物包括“模拟物”和“肽模拟物”形式。

本文所用术语“模拟物”和“肽模拟物”指具有与本发明肽基 本相同的结构和/或功能特征的合成化合物。模拟物可完全由合成的 非天然氨基酸类似物组成，或者可以是包括一个或多个天然肽氨基 酸和一个或多个非天然氨基酸类似物的嵌合分子。模拟物中还可混 入任何数量的天然氨基酸保守替换，只要这种替换不会破坏模拟物 的活性。可用常规试验确定模拟物是否具有需要的活性，例如其是 否具有可检测的抗真菌活性。当使用术语“基本上相同”指模拟物 或肽模拟物时，意思是模拟物或肽模拟物具有参考分子的一种或多 种活性或功能，例如抗真菌活性。

肽模拟物组合物可包含非天然结构成分的任何组合，所述结构 成分通常来自以下三种结构类别：a)除天然酰氨键(“肽键”)连接之 外的残基连接基团；b)置换天然氨基酸残基的非天然残基；或c)诱发 二级结构模拟的残基，即诱发或稳定二级结构如β转角、γ转角、β折 叠、α螺旋构象等的残基。例如，一个或多个残基通过酰氨键之外的 化学方式连接时多肽可称为模拟物。肽模拟物的各残基可通过酰氨 键、非天然和非酰胺化学键、其他化学键或偶联方式来连接，包括 例如戊二醛、N-羟基琥珀酰亚胺酯、双官能马来酰亚胺、N，N′-二环 己基碳二亚胺(DCC)或N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)。可代替酰氨键 的连接基团包括例如酮亚甲基(例如-C(＝O)-CH2-，代替-C(＝O)-NH-)、 氨基亚甲基(CH2-NH)、1，2-亚乙基、烯烃(CH＝CH)、醚(CH2-O)、硫 醚(CH2-S)，四唑(CN4-)、噻唑、retroamide、硫代酰胺或酯(参见例如 Spatola(1983)， Chemistry and Biochemistry of Amino Acids，Peptides and Proteins，第7卷，第267-357页，“Peptide and Backbone Modifications，”Marcel Decker，NY)。

如上所述，称为模拟物的肽其特征为含一个或多个置换天然氨 基酸残基的非天然残基。非天然残基为本领域所公知。可用作天然 氨基酸残基模拟物的非天然残基的具体非限制性实例是芳族氨基酸 的模拟物，包括例如D-或L-萘基(naphyl)丙氨酸；D-或L-苯基甘氨 酸；D-或L-2噻吩基(thieneyl)丙氨酸；D-或L-1，-2，3-，或4-芘基丙氨 酸；D-或L-3噻吩基丙氨酸；D-或L-(2-吡啶基)-丙氨酸；D-或L-(3- 吡啶基)-丙氨酸；D-或L-(2-吡嗪基)-丙氨酸；D-或L-(4-异丙基)-苯基 甘氨酸；D-(三氟甲基)-苯基甘氨酸；D-(三氟甲基)-苯丙氨酸；D-对 氟-苯丙氨酸；D-或L-对联苯基苯丙氨酸；K-或L-对甲氧基-联苯基 苯丙氨酸；D-或L-2-吲哚(烷基)丙氨酸；和D-或L-烷基丙氨酸，其 中烷基可以是取代或未取代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戊 基、异丙基、异丁基、sec-isotyl、异戊基，或者是非酸性氨基酸。可 用来置换天然芳环的非天然氨基酸芳环包括例如噻唑基、噻吩基、 吡唑基、苯并咪唑基、萘基、呋喃基、吡咯基和吡啶基芳环。

酸性氨基酸的模拟物可通过用非羧酸氨基酸置换，同时又保留 负电荷；(膦基)丙氨酸；和硫酸化苏氨酸来产生。羧基侧基(例如天 冬氨酰基或谷氨酰基)也可通过与碳二亚胺(R′-N-C-N-R′)反应来进行 选择性修饰，碳二亚胺包括例如1-环己基-3(2-吗啉基-(4-乙基)碳二亚 胺或1-乙基-3(4-偶氮(azonia)-4，4-二甲氧基(dimethol)戊基)碳二亚胺。 天冬酰基或谷氨酰基也可通过与铵离子反应转化为天冬酰胺酰基和 谷氨酰胺酰基。

除赖氨酸和精氨酸外，碱性氨基酸的模拟物可用鸟氨酸、瓜氨 酸或(胍基)乙酸或(胍基)烷基乙酸等氨基酸置换来产生，其中烷基可 以是取代或未取代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戊基、异丙 基、异丁基、sec-isotyl、异戊基，或者是非酸性氨基酸。可用腈衍生 物(例如含CN-部分，置换COOH)置换天冬酰胺或谷氨酰胺。天冬酰 胺酰基和谷氨酰胺酰基残基可脱氨形成相应的天冬氨酰基或谷氨酰 基残基。

精氨酸模拟物可通过使精氨酰基任选在碱性条件下与一种或多 种试剂，包括例如苯基乙二醛、2，3-丁二酮、1，2-环己二酮或茚三酮 反应来产生。酪氨酸残基模拟物可通过使酪氨酰基与芳族重氮化合 物或四硝基甲烷反应来产生。可分别使用N-乙酰咪唑和四硝基甲烷 来形成O-乙酰酪氨酰基基团和3-硝基衍生物。

赖氨酸模拟物可通过使赖氨酰基与琥珀酸酐或其他羧酸酐反应 来产生(且氨基末端残基可被改变)。赖氨酸和其他含α-氨基的残基模 拟物也可通过与亚氨酸酯如吡啶甲亚胺酸甲酯、磷酸吡哆醛、吡哆 醛、硼氢化氯、三硝基苯磺酸、O-甲基异脲、2，4-戊二酮反应，以及 通过转酰氨基酶催化与乙醛酸反应来产生。

甲硫氨酸模拟物可通过与甲硫氨酸亚砜反应来产生。脯氨酸模 拟物包括例如2-哌啶酸、噻唑烷羧酸、3-或4-羟基脯氨酸、脱氢脯 氨酸、3-或4-甲基脯氨酸和3，3，-二甲基脯氨酸。组氨酸模拟物可通 过使组氨酰基与焦碳酸二乙酯或对溴苯甲酰甲基溴反应来产生。其 他模拟物包括例如通过以下方法产生的模拟物：脯氨酸和赖氨酸的 羟基化；丝氨酰基或苏氨酰基残基的羟基的磷酸化；赖氨酸、精氨 酸和组氨酸的α-氨基的甲基化；N-末端胺的乙酰化；主链酰胺残基 的甲基化或用N-甲基氨基酸取代；或者C-末端羧基的酰胺化。

也可用手性相反的氨基酸(或肽模拟物残基)来代替一个或多个残 基。因此，以L-构型(也可叫做R或S构型，取决于化学个体的结构) 天然出现的任何氨基酸可用手性相反的相同氨基酸或模拟物(称为D- 氨基酸，但另外还可叫做R-或S-构型)代替。

本发明肽和肽模拟物还包括本文提出的序列的修饰形式，条件 是所述修饰形式保留未修饰或参考肽或肽模拟物的至少一部分功 能。例如，修饰肽或肽模拟物须保留至少一部分抗真菌活性，但与 参考肽或肽模拟物相比其抗真菌活性或G2消除活性提高或降低。

修饰肽和肽模拟物的一个或多个氨基酸残基可被另一个残基所 置换，或者有一个或多个氨基酸残基被添加到修饰肽和肽模拟物序 列中或从序列中缺失。在一个实施方案中，修饰肽和肽模拟物具有 一个或多个氨基酸置换、添加或缺失(例如1-3、3-5、5-10或更多的 残基)。一方面，所述置换可用其侧链具有与参考氨基酸或模拟物(被 置换的氨基酸或模拟物)近似空间的氨基酸或模拟物来进行。另一方 面，所述置换可用结构上与人类氨基酸残基近似的非人类氨基酸来 进行。在一个具体方面，所述置换是保守氨基酸置换。

本文所用术语“近似空间”指其占有的三维空间大小与参考部 分近似的化学部分。通常，占有近似空间的部分其大小与参考部分 近似。“占有近似侧链空间”的氨基酸或模拟物其侧链占有的三维 空间大小与参考氨基酸或模拟物相近。对于d-(Phe-2，3，4，5，6-F)、l- (Phe-2，3，4，5，6-F)、d-(Phe-3，4，5F)、l-(Phe-3，4，5F)、d-(Phe-4CF3)或l- (Phe-4CF3)，具体实例是(l或d-Phe-2R1，3R2，4R3，5R4，6R5)，其中R1、 R2、R3、R4、R5可以是氯、溴、氟、碘、氢、氧化氢或不存在。对 于小分子，如大小约为1埃的氟，近似的空间可以为部分不存在。

术语“保守置换”指一个氨基酸被生物学上、化学上或结构上 近似的残基所置换。生物学上近似指所述置换与生物学活性如抗真 菌活性相容。结构上近似指氨基酸的侧链长度近似，如丙氨酸、甘 氨酸和丝氨酸，或链大侧小近似。化学近似性指残基具有相同的电 荷，或者均为亲水性或疏水性。具体的实例包括用一个疏水性残基， 如异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸置换另一个疏水性残基， 或者用一个极性残基置换另一个极性残基，如精氨酸置换赖氨酸、 谷氨酸置换天冬氨酸或谷氨酰胺置换天冬酰胺、丝氨酸置换苏氨酸 等。

因此，本发明肽和肽模拟物包括其序列与表1所列出和本文所 举例的肽和肽模拟物序列不相同的肽和肽模拟物。在一个实施方案 中，肽和肽模拟物与本文提出的序列具有50％、60％、70％、75％、 80％、85％、90％、95％或更高的一致性。

本发明肽和肽模拟物包括与本文提出的序列基本相同的肽和肽 模拟物。当用术语“基本相同”指肽和肽模拟物时，意思是其序列 与参考序列具有至少75％或更高的一致性(例如80％、85％、90％、 95％、96％、97％、98％、99％)。比较序列的长度一般至少是5个氨 基酸，但通常更多，至少达6-10、10-15个或更多的残基。在一方面， 一致性涉及明确的序列区域，如氨基或羧基末端的3-5个残基。

本发明化合物，包括肽和肽模拟物可用本领域公知的任何方法 来生产和分离。可用本领域公知的化学方法合成肽的整体或部分(参 见例如Caruthers(1980)Nucleic Acids Res.Symp.Ser.215-223；Horn (1980)Nucleic Acids Res.Symp.Ser.225-232；和Banga，A.K.， Therapeutic Peptides and Proteins，Formulation，Processing and Delivery Systems(1995)Technomic Publishing Co.，Lancaster，PA)。肽的合成可 用各种固相技术来进行(参见例如Roberge(1995)Science 269：202； Merrifield(1997)Methods Enzymol.289：3-13)，可例如按厂商说明书 使用例如ABI 431A肽合成仪(Perkin Elmer)实现自动合成。

可用本领域公知的多种程序和方法(参见例如Organic Syntheses Collective Volumes，Gilman等(编辑)John Wiley & Sons，Inc.，NY)来合 成掺入模拟物的各合成残基和多肽。肽和肽模拟物也可用组合方法 来合成。用以产生肽和肽模拟物文库的技术是公知的，包括例如多 大头针技术、茶叶包技术和剪切-偶联-混合技术(参见例如al-Obeidi (1998)Mol.Bioteclinol.9：205-223；Hruby(1997)Curr.Opin.Chem.Biol. 1：114-119；Ostergaard(1997)Mol.Divers.3：17-27；和Ostresh(1996) Methods Enzymol.267：220-234)。修饰肽可进一步通过化学修饰方法 制备(参见例如Belousov(1997)Nucleic Acids Res.25：3440-3444； Frenkel(1995)Free Radic.Biol.Med.19：373-380；和Blommers(1994) Biochemistry 33：7886-7896)。

本发明化合物和组合物可用于体外、先体外后体内和体内(例如 在全身、区域、局部或在黏膜组织上)抑制真菌接触、污染、生长、 生存、增殖或感染。这样，具有真菌接触、污染、生长、生存、增 殖或感染或者存在这种风险的任何有生命物或无生命物，或者真菌 接触、污染、生长、生存、增殖或感染引起或相关的损害或状况， 均可用本发明化合物进行处理。

因此，本发明提供了抑制、降低和减少体外、先体外后体内和 体内真菌接触、污染、生长、生存、增殖和感染的方法。这种方法 包括抑制、降低或减少与真菌的接触；抑制、降低或减少真菌的生 长或增殖；抑制、降低或减少真菌的感染；抑制、降低或减少真菌 的污染；抑制、降低或减少真菌的生存；和抑制、降低或减少对真 菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染的易感性或重发率。

一个实施方案中，方法包括使有生命生物体或无生命物体(例如 任何材料)接触其量足以降低、减少或抑制真菌在所述生物体、物体 或紧靠该物体的其他物体中的接触、污染、生长、生存、增殖或感 染的本发明化合物。一方面，所述生物体是动物，如哺乳动物(例如 人)。另一方面，所述物体包括有机或无机材料(例如建筑材料或医用 材料)。在又一方面，所述物体包括仪器、机械、设备、装置、工具、 医用材料或表面。在各种其他方面，所述物体处于环境中，或在工 业区、居住区、商业区、社区、农业或园艺区域中。

本文所用术语“物体”指会受真菌接触或污染、被真菌感染， 或者可容许、支持或帮助真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感 染的任何无生命的或原来有生命的物质实体。因此，物体包括易受 真菌接触、污染、生长或感染的任何有机或无机材料，如无生命的 有机物质、生物流体、细胞、器官或组织或原来有生命的生物体的 部分，如园艺或农业产品(例如植物、花草、蔬菜、水果、坚果和谷 物及它们的部分等)。生物体指任何有生命物，例如哺乳动物如人或 兽医对象、植物、草、树木、灌木、庄稼、蔬菜、水果等。植物部 分包括叶、茎、根、花、种子、树干和树枝，因为真菌生长、污染 或感染可至少部分出现在叶、茎、根、花、种子、树干或树枝上。

物体还包括任何器械、仪器、装置、工具、机械、设备(例如用 于食品加工)、容器、包装材料或表面。所述物体可出现在居住区、 商业区或社区中，如包含易受真菌接触的表面或材料(如木材、纤维 或者其他有机或无机材料)或通风系统的住宅、房间、公寓、旅馆或 汽车旅馆、医院或诊所、学校、礼堂或办公室。物体可出现在工业 区(例如生产、加工、配送、保藏或销售食品如干酪、牛奶或者任何 未加工的、陈化的、培养的、加工的或发酵的饮料或食品产品的区 域)，例如包含例如易受真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染 的机械或设备或有机物质(例如食品或饮料)的生产、加工、保藏或配 送建筑或设施。物体可出现在环境中，如农场或牧场，或出现在农 业或园艺区域(例如温室或苗圃)，或其他的收割或栽培区域。物体还 可出现在自然环境中，例如伐木区。

本发明进一步提供处理真菌接触、污染、生长、增殖或感染的 方法，或者在对象被真菌接触、污染或感染之后或之前(例如为了预 防)治疗对象中的相关疾病的方法，所述病症包括真菌接触、污染、 生长、增殖或感染引起或相关的病症。一个实施方案中，该方法包 括给予具有真菌感染或有这种风险的对象其量能有效治疗真菌感染 的本发明化合物。在一方面，所述量足以改善对象的病症。在其他 方面，所述改善包括减少真菌生长或真菌感染造成的一种或多种症 状的严重程度或持续时间、减少或降低对象对真菌生长或真菌感染 的易感性，或减少或降低真菌生长或真菌感染的重发率。在又一方 面，在给予对象另一种治疗(如抗真菌治疗)或抗真菌剂之前、同时或 之后，给予对象本发明化合物。在另外的具体方面，真菌感染位于 皮肤(例如头皮、腋下、足部、腹股沟)、脚趾或指甲、头发或黏膜组 织(例如口腔、鼻咽、呼吸道、胃、生殖器官或腺体，如胃肠道、口、 肺、支气管道、鼻道和鼻窦、生殖泌尿道、阴道等)。

可进行治疗的感染或相关疾病包括真菌感染引起或相关的任何 真菌感染或疾病，所述治疗包括预防(防止或降低对真菌接触、污染、 生长、增殖或感染的易感性或重发率)。可根据本发明进行处理的具 体非限制性真菌属包括例如犁头霉(Absidia)、枝顶孢霉 (Acremonium)、(Actinomadura)、链格孢(Altemaria)、节壶霉 (Apophysomyces)、节菱孢(Arthrinium)、节文菌(Arthrographis)、曲霉 (Aspergillus)、短梗霉(Aureobasidium)、蛙粪霉(Basidiobolus)、白僵 菌(Beauveria)、双极菌(Bipolaris)、芽生酵母菌(Blastomyces)、头分裂 芽生菌(Blastoschizomyces)、葡萄孢(Botrytis)、念珠菌(Candida)(白念 珠菌(C.albicans)、克鲁斯念珠菌(C.krusei)、热带念珠菌(C.tropicalis)、 近平滑念珠菌(C.parapsilosis)或(C.glabrata))、毛壳(Chaetomium)、金 孢子菌(Chrysosporium)、支孢瓶霉(Cladophialophora)、枝孢霉 (Cladosporium)、球孢子菌(Coccidioides)、耳霉(Conidiobolus)、隐球 酵母(Cryptococcus)、小克银汉霉(Cunninghamella)、弯孢(Curvularia)、 皮肤真菌(Dermatophytes)、Emmonsia、附球菌(Epicoccum)、皮癣菌 (Epidermophyton)、外瓶霉(Exophiala)、着色霉(Fonsecaea)、镰孢镰刀 霉(Fusarium)、地霉(Geotrichum)、粘帚霉(Gliocladium)、粘束孢 (Graphium)、长蠕孢(Helminthosporium)、组织胞浆菌(Histoplasma)、 威尔尼克何德菌(Hortaea werneckii)、Lacazia、小球腔菌 (Leptosphaeria)、马杜拉菌(Madurella)、鳞斑霉(Malassezia)、 Malbranchea、小孢霉(Microsporum)、毛霉菌(Mucor)、新龟甲形菌 (Neotestudina)、黑孢(Nigrospora)、诺卡氏菌(Nocardia)、Nocardiopsis、 拟青霉(Paecilomyces)、副球孢子菌(Paracoccidioides)、青霉 (Penicillium)、Phaeococcomyces、瓶霉(Phialophora)、茎点菌(Phoma)、 毛结节菌(Piedraia)、毕赤酵母(Pichia)、肺孢子虫(Pneumocystis)、 Pseudallescheria、棘壳孢(Pyrenochaeta)、根毛霉(Rhizomucor)、根霉 (Rhizopus)、红酵母(Rhodotorula)、酵母属(Saccharomyces)、赛多孢 (Scedosporium)、帚霉(Scopulariopsis)、瘤孢(Sepedonium)、掷孢酵母 (Sporobolomyces)、孢子丝菌(Sporothrix)、侧孢霉属(Sporotrichum)、 葡萄穗霉(Stachybotrys)、匍柄霉(Stemphylium)、链霉属 (Streptomyces)、共头霉(Syncephalastrum)、球拟酵母(Torulopsis)、木 霉(Trichoderma)、发癣菌(Trichophyton)、毛孢子菌(Trichosporon)、 单端孢(Trichothecium)、单隔孢(Ulocladium)、黑粉菌(Ustilago)、轮 枝孢(Verticillium)、(Wangiella)和接合菌(Zygomycetes)。

可根据本发明进行处理的动物中的真菌的具体非限制性实例包 括例如导致癣、甲真菌病、股癣和脚癣的皮肤真菌；副球孢子菌病； 芽生菌病；毛霉病；隐球菌病；导致球孢子菌病的粗球孢子菌 (Coccidioides imnzatis)；导致组织胞浆菌病的荚膜组织胞浆菌 (Histoplasma capsulatum)；导致念珠菌病的白念珠菌(Candida albicans)；和导致曲霉病的烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。本发明化 合物的具体应用包括对皮肤(例如头皮、腋下、足部、腹股沟)、黏膜 (例如口腔、鼻咽、呼吸道、胃、生殖器官或腺体，如胃肠道、口、 支气管道、肺、鼻道和鼻窦、阴道等)、头发、指甲和趾甲治疗。

可根据本发明进行处理的农业或园艺区域的真菌的具体非限制 性实例包括例如黑斑病、炭疽病、ripe spot、煤污病、壳针孢叶斑病、 尾孢菌叶斑病、锈病、霜霉病、褐腐、褐斑病、黑穗病、疣病、死 枝病、球腔菌叶斑病、玫瑰黑斑病、花坏疽病、壳针孢枯叶病、早 疫病和晚疫病、叶霉、炭疽病、环斑病、硬币元状斑病、玉米大斑 病、梨黑斑病菌和leaspora spot。

工业区、商业区和居住区中的霉菌(真菌)的非限制性实例包括例 如Stachybotrys chartarum(黑色葡萄状穗霉(Stachybotrys atra)，其导 致动物和人霉菌毒素中毒，且与“写字楼综合征”有关。常见的室 内霉菌还包括例如青霉(penicillium)、曲霉(aspergillus)、镰刀菌 (fusarium)、分支孢子菌(cladosporium)和链格孢(alternaria)。木材的干 腐病真菌可由多个种的真菌造成，如Meruliporia incrassata和Serpula lacrymans。

术语“对象”指动物、通常是哺乳动物，如灵长目动物(人类、 类人猿、长臂猿、黑猩猩、猩猩、短尾猿)、家畜(狗、猫、禽)、畜 牧动物(马、牛、山羊、绵羊、猪)和实验动物(小鼠、大鼠、兔、豚 鼠)。对象包括动物疾病模型，例如真菌疾病动物模型。

适合按本发明进行治疗的对象包括目前正在接受抗真菌治疗的 对象，或抗真菌治疗的候选对象。候选对象包括例如有真菌接触、 污染或真菌感染的风险的对象。因此，本发明方法适用于治疗有真 菌接触、污染、生长、增殖或感染的风险，但还没有显示出明显症 状的对象。反复或经常被真菌感染者或被真菌感染的风险不断加大 者即可确定为风险对象，如免疫抑制对象(HIV)、正在接受免疫抑制(器 官或组织移植)或抗细胞增殖(例如抗癌)疗法的对象或这种疗法的候 选对象，或者暴露于存在或可能存在真菌接触、污染、生长、增殖 或感染的环境中的对象。风险对象包括在一个或多个手指甲上使用 导致甲真菌病(一种甲板真菌感染)的丙烯酸指甲的对象。因此，对象 包括具有免疫能力的对象，也包括免疫削弱的对象。

本发明化合物，包括肽和肽模拟物，可与适合药用的载体、赋 形剂和稀释剂结合在一起。因此，本发明提供例如用以治疗真菌接 触、污染、生长、生存、增殖或感染的药物组合物和制剂以及使用 方法。

本文所用的“药物组合物”或“药物制剂”指一种或多种本文 所述的本发明化合物或其生理上可接受的盐或前药与一种或多种另 外的化学组分，如药物可接受或生理上可接受的载体和赋形剂的混 合物。术语“药物可接受”或“生理上可接受”包括与给药相容的 溶剂(水溶剂或非水溶剂)、溶液剂、乳剂、分散介质、包衣、等渗和 吸收促进剂或延迟剂。因此，“药物组合物”或“药物制剂”指适 合向对象给药的组合物。“药物可接受的盐”指带有电荷和反离子 的化合物。

本文所用的“载体”和“赋形剂”包括溶剂、分散介质、运载 体、包衣、稀释剂、等渗和吸收延迟剂、缓冲剂、载体溶液、悬浮 液、胶体，条件是它们不会破坏活性成分的活性或功能。另外，“赋 形剂”通常指加入到药物组合物中、用以进一步帮助化合物给药的 惰性物质。赋形剂的具体非限制性实例包括碳酸钙、磷酸钙、各种 糖类和淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。

可配制药用组合物，使其适合于具体全身、区域或局部的给药 途径。因此，药用组合物包括适合通过各种途径给药的载体、稀释 剂或赋形剂。

供肠道(口腔)给药的制剂可包含于片剂(包衣或不包衣)、胶囊剂 (硬胶囊或软胶囊)、微球体剂、乳剂、散剂、颗粒剂、晶体剂、悬浮 剂、糖浆剂或酏剂中。可使用常规无毒固体载体来制备固体制剂， 其包括例如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、 纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁。辅助活性化合物(例如防腐剂、抗 细菌剂、抗病毒剂和抗真菌剂)也可掺入到制剂中。肠道给药也可使 用液体制剂。载体可选自多种油类，包括化石油、动物油、植物油 或合成油，例如花生油、豆油、矿物油、芝麻油。合适的药物赋形 剂包括例如淀粉、纤维素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦 芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油一硬脂 酸酯、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇。

用于肠道、胃肠外或跨黏膜递药的药物组合物包括例如水剂、 盐水剂、磷酸缓冲盐水剂、Hank’s溶液剂、林格氏溶液剂、葡萄糖/ 盐水剂和葡萄糖溶液剂。制剂可含有用以接近生理条件的辅助物质， 如缓冲剂、渗透压调节剂、湿润剂、去污剂等。添加剂还可包括另 外的活性成分，如杀细菌剂或稳定剂。例如，溶液剂可含有乙酸钠、 乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、脱水山梨醇单月桂酸酯或油酸 三乙醇胺酯。另外的胃肠外制剂和方法描述于Bai(1997)J. Neuroimmunol.80：65-75；Warren(1997)J.Neurol.Sci.152：31-38；和 Tonegawa(1997)J.Exp.Med.186：507-515中。胃肠外制剂可装入玻 璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多次剂量瓶中。

供皮内或皮下给药的药物组合物可包括无菌稀释剂，如水、盐 水溶液、不挥发性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂； 抗细菌剂，如苄醇或羟苯甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸、谷胱甘肽 或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲剂，如乙酸盐、柠 檬酸盐或磷酸盐以及渗透压调节剂，如氯化钠或葡萄糖。

注射用药物组合物包括含水溶液剂(在可溶于水的情况下)或分散 剂以及供现场配制无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。对于静 脉给药，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF， Parsippany，NJ)或磷酸缓冲盐水(PBS)。载体可以是溶剂或含例如水、 乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)的分散介质或它 们的合适混合物。流动性可例如通过使用包衣如卵磷脂、在分散剂 的情况下维持所需的颗粒大小、和通过使用表面活性剂来维持。抗 细菌剂和抗真菌剂包括例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏 血酸和硫柳汞。组合物中可包括等渗剂，例如糖类、多元醇如甘露 醇和山梨醇、氯化钠。所得溶液剂可原样包装以供使用，或可冻干， 冻干制剂在以后给药前可与溶液组合。

药物可接受的载体可包含稳定、增加或延迟吸收或清除的化合 物。这种化合物包括例如碳水化合物，如葡萄糖、蔗糖或葡萄糖苷； 低分子量蛋白质；减少肽的清除率或水解率的组合物；或者赋形剂 或其他稳定剂和/或缓冲剂。延迟吸收剂包括例如一硬脂酸铝和明胶。 去污剂也可用来稳定或者提高或降低药物组合物的吸收，其包括脂 质体载体。为防止被消化，化合物可与组合物复合，使其能抵抗酸 水解或酶水解，或者化合物可复合于具有适当抗性的载体如脂质体 中。保护化合物免受消化的手段是本领域公知的(参见例如Fix(1996) Pharm Res.13：1760-1764；Samanen(1996)J.Pharm.Pharmacol.48：119- 135；和美国专利5,391,377)。

对于透黏膜或透皮给药，在制剂中使用适合于待渗透屏障的渗 透剂。这种渗透剂通常是本领域公知的，例如对于透黏膜给药，包 括去污剂、胆盐和夫西地酸衍生物。可通过鼻腔喷雾剂或栓剂进行 透黏膜给药(参见例如Sayani(1996)″Systemic delivery of peptides and proteins across absorptive mucosae″Crit.Rev.Ther.Drug Carrier Syst. 13：85-184)。对于透皮给药，化合物可配制成本领域公知的油膏剂、 软膏剂、凝胶剂、泡沫剂、喷雾剂或霜剂。可使用皮肤病学用途的 任何膏基。对于栓剂，可将甘油或石蜡与常规的增稠剂如羟丙基甲 基纤维素一起使用，以调节粘度。也可使用贴剂实现透皮递药系统。

对于吸入递药，药物制剂可以气雾剂或喷雾剂的形式给药。对 于气雾剂给药，制剂可以微粒形式与表面活性剂和推进剂一起供给。 在另一个实施方案中，制剂在用以递送制剂到呼吸道组织的装置中 汽化。其他本领域公知的递药系统包括干粉气雾剂、液体递药系统、 吸入器、空气喷射喷雾器和推进剂系统(参见例如Patton(1998) Biotechniques 16：141-143；Dura Pharmaceuticals，San Diego，CA； Aradigm，Hayward，CA；Aerogen，Santa Clara，CA；和Inhale Therapeutic Systems，San Carlos，CA)。

可使用生物可降解、生物相容性聚合物，如乙烯-乙酸乙烯酯共 聚物、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这种配方 的方法是本领域公知的。这种材料也可从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc市售获得。脂质体悬浮液(包括使用抗体或病毒外 被蛋白导向细胞或组织的脂质体)也可用作药物可接受的载体。所述 脂质体悬浮液可按照本领域公知的方法制备，这种方法例如描述于 美国专利4,235,871；4,501,728、4,522,811、4,837,028、6,110,490、 6,096,716、5,283,185、5,279,833；Akimaru(1995)Cytokines Mol.Ther. 1：197-210；Alving(1995)Immunol.Rev.145：5-31；和Szoka(1980)Ann. Rev.Biophys.Bioeng.9：467)。能够持续递送小分子(包括肽)的生物可 降解微球体或胶囊或者其他生物可降解聚合物构造是本领域公知的 (参见例如Putney(1998)Nat.Biotechnol.16：153-157)。本发明化合物 可掺入到胶束中(参见例如Suntres(1994)J.Pharm.Pharmacol.46：23- 28；Woodle(1992)Pharm.Res.9：260-265)。肽可吸附到脂单层或脂双 层的表面上。例如，肽可吸附到含酰肼-PEG-(二硬脂酰基磷脂酰基) 乙醇胺的脂质体上(参见例如Zalipsky(1995)Bioconjug.Chem.6：705- 708)。另外，可使用任何形式的脂膜，如平面脂膜或完整细胞(如红 血球)的细胞膜。脂质体制剂和含脂制剂可通过任何方式递送，包括 例如静脉内给药、透皮给药(参见例如Vutla(1996)J.Pharm.Sci.85：5- 8)、透黏膜给药或口内给药。

药物可接受的制剂可掺入约0.11％-99.9％的活性成分(例如肽和 肽模拟物)。药物组合物可通过众所周知的常规灭菌技术进行灭菌， 或可过滤除菌。

另外的药物制剂和递药系统是本领域公知的，它们可应用于本 发明的方法和组合物中(参见例如 Remington′s Pharmaceutical Scieces (1990)第18版，Mack Publishing Co.，Easton，PA； The Merck Index (1996)第12版，Merck Publishing Group，Whitehouse，NJ； Pharmaceutical Principles of Solid Dosage Forms，Technonic Publishing Co.，Inc.，Lancaster，Pa.，(1993)；和Poznansky等， Drug Delivery Systems，R.L.Juliano(编辑)，Oxford，N.Y.(1980)，第253-315页)。

药物制剂可包装成单剂量形式，以方便给药和保证剂量的一致 性。本文中使用的“单剂量形式”指物理上分立的单位剂量，供给 药于待治疗的对象；各单位含有能产生所需效果的预定量化合物及 药物载体或赋形剂的组合。“多单位”剂型指多重的物理上分立单 位，包装的各单位按产生所需效果的治疗方案进行单位给药。

本发明化合物也可与具有抗真菌活性或抗真菌功能的任何治疗 联合使用。因此，可通过将本发明化合物与能直接或间接抑制真菌 接触、污染、生长、生存、增殖或感染的治疗组合，来提高、加强、 协同或延长抗真菌活性。也可通过将本发明化合物与能抑制或压制 真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染，或者能减少对真菌接 触、污染、生长、增殖或感染的易感性的治疗(不论这种治疗是否会 损伤核酸)组合，来提高、加强、协同或延长抗真菌活性。因此，本 发明进一步提供包含本发明化合物(例如肽或肽模拟物)和抗真菌治疗 或抗真菌剂(例如核酸损伤剂)的组合物和使用方法。

本文所用术语“抗真菌治疗”和“抗真菌剂”指能直接或间接 抑制或减少真菌生长、污染或感染或者与真菌生长、污染或感染有 关的症状或病症，或者能降低或减少真菌生长、污染或感染的重发 率或者易感性的任何治疗方案或药剂，而不管其作用方式如何，例 如所述治疗或药剂是否会损伤核酸。抗真菌剂的具体实例包括抑制 细胞增殖的药物。具体的实例包括尤其是环磷酰胺、硫唑嘌呤、环 孢菌素A、泼尼松龙、美法仑、苯丁酸氮芥、氮芥、百消安、甲氨 喋呤、6-巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、泰素、长春碱、长春新碱、 多柔比星、放射菌素D、普卡霉素、卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司 汀、链唑毒素、羟基脲、顺铂、米托坦、丙卡巴肼、达卡巴嗪和二 溴甘露醇。导致核酸复制错误或抑制核酸复制的抗增殖剂包括核苷 和核苷酸类似物，如AZT和5-AZC。

在动物(例如人类)或农业中使用的合适抗真菌剂包括烯丙胺 (amrolfine、布替萘芬、萘替芬、特比萘芬)、吡咯(酮康唑、氟康唑、 elubiol、益康唑、econaxole、伊曲康唑、异康唑、咪唑、咪康唑、硫 康唑、克霉唑、恩康唑、奥昔康唑、噻康唑、特康唑、布康唑、噻 苯达唑、伏立康唑、沙康唑、舍他康唑、芬替康唑、泊沙康唑、联 苯苄唑、氟曲马唑)、多烯(制霉菌素、纳他霉素、两性霉素B)、嘧啶 (氟胞嘧啶)、四烯(那他霉素)、硫代氨基甲酸酯(托萘酯)、磺酰胺(磺 胺米隆、氨苯砜)、葡聚糖合成抑制剂(卡泊芬净)、苯甲酸化合物、 它们的复合物和衍生物(actofunicone)以及其他系统用或黏膜用药物 (灰黄霉素、碘化钾、龙胆紫)和局部用药物(环吡酮、环吡酮胺、卤 普罗近、十一烯酸盐、磺胺嘧啶银、十一烯酸、十一烯酸链烷醇酰 胺、卡宝品红)。其他在动物中使用的合适抗真菌剂描述于例如 Physicians Desk Reference，第57版，2002年11月，Medical Economics Company。

在农业或园艺中使用的合适的抗真菌剂包括代森锰锌、代森锰、 Banner Maxx、Compass Cleary′s、嗪氨灵，Immunox、代森锌、磺氨 黄隆、代森锰锌、腈菌唑、托扑净、克菌丹、塞仑、萎锈灵、甲霜 灵、PCNB、咯菌腈、噻苯达唑、铜基杀真菌剂(例如氯氧化铜)、含 硫化合物、柑桔油和枯草芽孢杆菌。其他在农业中使用的合适抗真 菌剂描述于例如 Fungicides in Plant Disease Control，第3版，Nen和 Thapliyal，1993，Science Publishers Inc.。

在工业区、居住区、社区和商业区中使用的合适抗真菌剂包括 例如去污剂、漂白剂、OMACIDEIPBC(3-碘丙炔基氨基甲酸丁酯)、 Fungitrol、Nuocept、microban、柑桔油和铬化砷酸铜(木材防腐剂)。

本文所用术语“核酸损伤治疗”和“核酸损伤剂”指能直接或 间接损伤核酸(例如DNA、cDNA、基因组DNA、mRNA、tRNA或rRNA) 的任何治疗方案。这种药剂的具体实例包括烷化剂、亚硝基脲、抗 代谢物、植物生物碱、植物提取物和放射性同位素。这种药剂的具 体实例还包括核酸损伤药物，例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他滨、S- 1(替加氟，5-氯-2，4-二羟基吡啶和1，4，5，6-四氢-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2- 羧酸)、5-乙炔基尿嘧啶、阿糖胞苷(ara-C)、5-氮杂胞苷(5-AC)、2′，2′- 二氟-2′-脱氧胞苷(dFdC)、嘌呤抗代谢物(巯基嘌呤、硫唑嘌呤、硫鸟 嘌呤)、盐酸吉西他滨(健择)、喷司他丁、别嘌醇、2-氟-阿拉伯糖腺 嘌呤(2F-ara-A)、羟基脲、硫芥子气(双氯乙基硫)、氮芥、美法仑、 苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、塞替派、AZQ、丝裂霉素C、 双无水半乳糖醇、二溴卫矛醇、烷基磺酸盐(百消胺)、亚硝基脲 (BCNU、CCNU、4-甲基CCNU或ACNU)、丙卡巴肼、达卡巴嗪 (decarbazine)、雷别卡霉素、蒽环霉素如多柔比星(阿霉素；ADR)、柔 红霉素(Cerubicine)、伊达比星(Idamycin)和表柔比星(Ellence)、蒽环 霉素类似物如米托蒽醌、放射菌素D、非嵌入拓扑异构酶抑制剂如 表鬼臼毒素(依托泊苷＝VP16，替尼泊苷＝VM-26)、鬼臼毒素、博来霉 素(Bleo)、培洛霉素、与核酸形成加合物的化合物，包括铂衍生物(例 如顺铂(CDDP)、顺铂的反式类似物、卡铂、异丙铂、四铂和奥沙利 铂)、喜树碱、托泊替康、伊立替康(CPT-11)和SN-38。核酸损伤治 疗的具体实例包括辐射(例如紫外线(UV)辐射、红外线(IR)辐射或者 α-、β-或γ-辐射)和环境冲击(例如高温)。

本发明方法和组合物(包括肽和肽模拟物)可与其他能提供益处的 药剂或治疗联合使用。例如，真菌接触、污染、生长、增殖或感染 经常伴随着其他病原体，如细菌、病毒和寄生虫。具体地说，有真 菌机会感染风险的对象，例如免疫受损患者(例如由于器官或组织移 植或HIV感染)也存在病毒、细菌、寄生虫感染和其他感染的风险。 因此，抗微生物剂或治疗(抗病毒剂或抗细菌剂或抗寄生虫剂)可与本 发明肽或肽模拟物联合使用。因此，本发明提供包括与细菌、病毒 和寄生虫治疗和药剂的组合的方法和组合物。

此外，真菌接触、污染、生长、增殖或感染可导致炎症。因此， 抗炎药或抗炎治疗可与本发明肽或肽模拟物组合物或方法联合使 用。真菌接触、污染、生长、增殖或感染也可导致疼痛或肿胀。因 此，镇痛药或止痛药或者镇痛或止痛治疗可与本发明肽或肽模拟物 联合使用。

抗炎药或抗炎治疗包括例如基于类固醇和非类固醇的药物和疗 法。类固醇抗炎药包括糖皮质激素。类固醇的非限制性实例包括氟 轻松、曲安西龙、曲安奈德、倍他米松、倍他米松二丙酸盐、二氟 可龙、氟替卡松、可的松、氢化可的松、莫米松、甲基泼尼松龙、 丙酸倍氯米松、氯倍他索、泼尼松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、倍 他米松、布地奈德、地塞米松等。非类固醇抗炎药的非限制性实例 包括塞来考昔、尼美舒利、罗非考昔、甲氧芬那酸、甲氧芬那酸钠、 氟尼辛、氟洛芬、氟比洛芬、舒林酸、美洛昔康、吡罗昔康、依托 度酸、非诺洛芬、芬布洛芬(fenbuprofen)、酮洛芬、舒洛芬、双氯芬 酸、溴芬酸钠、保泰松、沙利度胺和吲哚美辛。

镇痛药和止痛药及镇痛或止痛治疗(其中一些具有抗炎活性)包括 阿司匹林、对乙酰氨基酚、布洛芬、萘普生、普鲁卡因、利多卡因、 丁卡因、地布卡因、苯佐卡因、盐酸对丁基氨基苯甲酸2-(二乙基氨 基)乙酯、甲哌卡因、哌罗卡因和达克罗宁。其他镇痛药包括阿片类， 例如吗啡、可待因、氢可酮和羟考酮。

抗病毒剂或抗病毒治疗能抑制、减少或消除病毒复制、增殖或 者病毒复制或增殖相关或导致的症状或病症。因此，抗病毒剂和抗 病毒治疗包括能够在病毒生命周期的任何步骤或阶段抑制、减少、 防止或减轻病毒感染或产生的任何药剂或者治疗，所述病毒生命周 期的任何步骤或阶段例如病毒通过细胞表面受体或不用细胞表面受 体与细胞融合；病毒核酸进入细胞；病毒核酸的逆转录；逆转录病 毒核酸整合到细胞的基因组；原病毒核酸转录或复制；成熟病毒蛋 白的翻译或形成；传染性病毒颗粒的形成/装配；成熟毒粒从细胞芽 生或释放。

抗病毒剂的具体非限制性实例包括病毒融合抑制剂，例如T20 和T20类似物(Trimeris公司)；非核苷逆转录酶抑制剂(例如奈韦拉平、 地位韦啶、依法韦仑)；蛋白酶抑制剂(例如沙奎那韦、利托那韦、茚 地那韦、奈非那韦、氨普那韦)；胸苷激酶抑制剂；糖或糖蛋白合成 抑制剂；结构蛋白合成抑制剂；核苷类似物(例如齐多夫定(AZT)、司 他夫定(d4T)、larnivudine(3TC)、去羟肌苷(DDI)、扎西他滨(ddC)、 阿巴卡韦、阿昔洛韦、喷昔洛韦、伐昔洛韦和更昔洛韦)；及病毒成 熟抑制剂(例如“锌指注入器”，其抑制病毒α核衣壳蛋白的装配，从 而防止形成传染性病毒颗粒)。

适合按本发明进行处理的工业区、居住区、社区、商业区、农 业区域、园艺区域和环境可通过检测所述具体区域中真菌的存在来 确定。例如，为确定真菌是否存在于建筑物中，可在室内和室外进 行采样。如果室内的真菌量超过室外，那么很可能存在真菌的污染。 例如，可检查大楼或其他建筑物中的空气，看是否存在霉菌。可通 过对降落到过滤器或显微镜载片上的霉菌颗粒进行镜检，来大致估 计霉菌颗粒(孢子和分生孢子)的数量和不同种类。另外，空气中的任 何真菌也可降落到生长培养基上。在实验室进行生长培养可准确鉴 定采样处空气中的活真菌。通过目视检查也可发现真菌的存在。例 如，可以观察建筑物或其他结构表面或内部的霉菌生长。可检查真 空吸尘器的袋子的内容，或者可从物体表面擦拭样本，或者可切下 并鉴定似乎生长真菌的材料片。

本发明化合物可在真菌感染、污染或生长之前、同时、之后， 在采用其他治疗方案或药剂之前、同时、之后给予。因此，本发明 提供预防性治疗方法以及减少或抑制真菌接触、污染、生长、增殖 或感染的重发率的方法。

因此，本发明还提供用以抑制、降低和减少体外、先体外后体 内和体内真菌接触、污染、生长、生存、增殖和感染的组合方法和 治疗。可与本发明化合物联合使用的治疗包括本文公开的或本领域 公知的任何抗真菌、核酸损伤或抗肿瘤治疗或药剂。例如，化学疗 法治疗可包括通过外源辐射或放射性同位素内化进行的放射治疗， 任选结合药物治疗。因此，治疗可包括给予化学物质如放射性同位 素，或者药物如化疗药物。

治疗的给药量通常是“有效量”或“足够量”，即足以产生需 要效果的量。因此，有效量包括以下一点或几点：相对于合适的对 照，抑制或减少对真菌接触、污染、生长、增殖或感染的易感性或 者重发率；减少、降低或抑制真菌污染、生长、生存、增殖或感染(例 如减少或消除真菌细胞)；及减少或降低真菌接触、污染、生长、生 存、增殖或感染相关或导致的一种或多种症状。因此，所述量可足 以减少感染或使感染稳定(例如抑制或防止真菌污染、生长、增殖或 感染，或者真菌接触、污染、生长、增殖或感染相关或导致的一种 或多种症状的发展或恶化)。因此，认为有效的量能防止或抑制感染 或者相关的病症或疾病的发展。

有效量可客观地或主观地减少或降低真菌接触、污染、生长、 生存、增殖或感染相关或导致的一种或多种症状，或者相关的疾病 或病症的严重性、发生频率或持续时间。例如，能减少发痒、炎症、 疼痛、排出物或其他任何症状或相关病症的严重性、发生频率或持 续时间的本发明化合物量即为符合要求的临床终点。有效量也能实 现组织学方面的改善。

有效量还包括减少另一种抗真菌治疗的量(例如剂量)或治疗频 率，该减少可认为是符合要求的临床终点。例如，接受本发明化合 物治疗的对象可需要更少的核酸损伤治疗即可治疗真菌感染。有效 量可包括与不用本发明化合物进行治疗时抗真菌治疗的剂量频率或 给药量相比，减少联合使用本发明化合物进行治疗时的剂量频率或 给药量的量。

“治疗有效量”指能减少或改善真菌接触、污染、生长、生存、 增殖或感染相关或导致的一种或多种症状的量，所述改善即对象病 症的“好转”或给对象的“治疗益处”。

“预防有效量”指降低或减少对真菌污染、生长、增殖或感染 的易感性的量；或者保持通过给予抗真菌治疗或抗真菌剂实现的抑 制真菌细胞生长或增殖的量；或者保持通过给予抗真菌治疗或抗真 菌剂实现的抑制真菌感染的传播或恶化的量；或者保持减少真菌污 染、生长、增殖或感染导致或相关的一种或多种症状的量。预防有 效量也指可抑制或防止真菌接触、污染、生长、增殖或感染易感对 象(例如有生命的生物体)的量。词语“改善”当指具有真菌接触、污 染、生长、增殖或感染或者有这种风险的对象时，同义使用。

CBP501的代表性用量为约1-20uM(体外)，或约2-40ug/ml。 CBP501的全身代表性用量为约1-10mg/kg，或约3-30mg/mm(静 脉)；或约5-50mg/kg，或约15-150mg/mm(腹膜内)。以mm计的量 在大多数动物中都基本相同，因此，例如在人类中，输液时的量约 为3-30mg/mm。对于局部使用，每平方厘米皮肤约20微克应当足够。

导致对象病症好转或出现治疗效果的本发明方法的持续时间可 能相对较短，例如好转时间可持续几分钟、几小时、几天或几周， 或者本发明方法会持续更长的时间，例如几个月或几年。因此，有 效量不必要完全去除或消除真菌接触、污染、生长、生存、增殖或 感染，或者真菌接触、污染、生长、生存、增殖或感染相关或导致 的任何或所有症状。因此，当采用适合于确定真菌接触、污染、生 长、生存、增殖或感染的状态或程度，或者适合确定真菌接触、污 染、生长、生存、增殖或感染的易感性或重发率的任何前述标准或 其他本领域公知的标准，在较短或较长的一段时间内进行确定，发 现对象的病症有主观或客观的好转时，即达到有效量的符合要求的 临床终点。

可基于在体外与已知在给定浓度或剂量下在动物中具有活性的 抗真菌剂的量进行比较，来确定本发明化合物治疗对象的有效量。 例如，可使用易感性试验来确定以下化合物最小浓度：抑制或减少 真菌生长或增殖的浓度；抑制或减少真菌量的浓度(最小抑菌浓度， MFC，μg/ml)或者杀死真菌的浓度(最小杀菌浓度，MFC，μg/ml)。 另外，可使用动物研究，包括人临床试验来确定有效量。

本领域普通技术人员会知道，各种因素可影响治疗具体对象所 需的剂量和时机，包括例如对象的一般健康状况、年龄或性别，疾 病或病症的严重程度或阶段，以往接受过的治疗，对不良副作用的 易感性，需要获得的临床结果以及是否存在其他疾病或病症。这种 因素可能影响提供足以产生治疗效果的量所需的剂量和时机。

在用于治疗对象的本发明方法中，可按照实现需要效果的任何 方案或途径，在全身、区域上(例如导向器官或组织)或局部上给予本 发明化合物。本发明化合物可每天以单剂量或多剂量给药(例如采用 低剂量)、间断地(例如每隔一天、一周一次等，采用高剂量)或连续 地给药，具体可由专业医师来确定。化合物以及药物组合物，包括 单独一种或多种组合物或者它们的组合，可通过吸入(例如气管内)、 口内、静脉内、动脉内、血管内、鞘内、腹膜内、肌内、皮下、腔 内、透皮(例如局部)、透黏膜(例如口腔、阴道、子宫、直肠或鼻)给 药，可以是多次给药、持续给药(例如连续输液、长时间梯度输液或 采用胶囊)或单次大剂量给药。

局部给药的化合物通常以1mg/mL-1gm/mL的单位剂量给予， 或者以1mg/mL-100mg/mL的剂量给予。静脉内(IV)给药的化合物 通常是在几个小时内(通常是1、3或6小时)给予约0.01mg/hr至约1.0 mg/hr，这可间歇循环反复进行一周或几周。分一次或多次给予的日 剂量通常在每天0.1mg/kg-100mg/kg、每天0.1mg/kg-20mg/kg 或每天1mg/kg-20mg/kg的范围内。可使用相对较高的剂量(例如高 达约10mg/ml)，特别是当局部或区域给药，且药物不进入血流中(例 如不进入体腔或进入器官如阴道的内腔)的时候。本领域普通技术人 员能容易地确定达到治疗效果的有效剂量和给药方案。

化合物可用缓释系统，如固体疏水聚合物的半渗透性基质来递 药。缓释系统和方法，包括用于持续内部递药的微装配装置是本领 域公知的。

本发明还提供包括本发明化合物及其药物制剂的药盒，药盒任 选用合适的包装材料包装。药盒通常包括标签或包装插页，其包括 组分描述和这种组分在体外、先体外后体内或体内、在环境中、在 农业或园艺区域或在商业区、工业区、居住区或社区中的使用说明。 标签任选包括适合治疗的具体真菌属种的列表。药盒可包含多种这 样的组分，例如两种或更多种本发明化合物或者一种本发明化合物 与一种抗真菌剂的组合。

术语“包装材料”指用以储存药盒组分的物理构造。包装材料 能使组分保持无菌状态，其可由通常用于此类目的的材料制成(例如 纸张、波纹纤维、玻璃、塑料、金属、金属箔、安瓿等)。标签或包 装插页可包括合适的书面说明。因此，本发明药盒可另外包括以本 发明任何方法使用药盒组分的标签或说明书。说明书可包括实施本 文描述的任何明方法的说明。因此，例如药盒可包括装在容器或分 药器中的本发明化合物，以及按本发明治疗方法给予化合物的说明 书。说明书可另外包括符合要求的临床终点或任何可能出现的不良 症状的说明，或者管理机构如美国食品和药品监督管理局要求的有 关在人类对象中使用的附加信息。

说明书可以在“印刷物”上，例如在药盒内或附于药盒的纸张 或硬纸板上，或者在附于药盒或包装材料的标签上，或者附在装有 组分的小瓶或小管上。另外，说明书也可存储于计算机可读介质中， 如磁盘(软盘或硬盘)、光盘如CD-或DVD-ROM/RAM、磁带、电子 存储介质如RAM和ROM、IC触点和以上介质的混合体如磁/光学存 储介质。

另外，本发明药盒可在药物制剂中包含缓冲剂、防腐剂或稳定 剂。药盒的各组分可装在单独的容器中，所有各容器可装在单个包 装中。本发明药盒可设计成适于冷藏。

本发明另外还提供容纳本发明化合物及其药物制剂的物品。本 文所定义的术语“物体”应包括物品。

物品包括可接触真菌的机械、器械、仪器、装置、包装材料， 或者任何有机或无机材料(例如建筑材料或医用材料)。

本文所有术语“医用材料”指在卫生保健中使用的，在检查、 诊断或治疗过程中可能会暴露于患者或对象的任何物体。医用材料 的具体非限制性实例包括缝合线、创伤敷料(封闭或半封闭织物，例 如网垫或绷带)、局部用纱布、粘合膜、硬质敷料、粘合带和扣件。 医周材料的另外非限制性实例包括诊察用手套、手术服和口罩、注 射器和注射针。

此外，本发明还提供本发明肽和肽模拟物(例如与本文提出的序 列具有90％或更高一致性的序列)或其前药在制备足以抑制、减少或 防止真菌接触、污染、生长、增殖或感染的药物中的应用。所述药 物任选包括其他药剂，如抗微生物剂、抗炎药物或止痛剂，或者药 物可接受的或生理可接受的载体或赋形剂。

本发明提供了鉴定和筛选具有抗真菌活性或功能的化合物的方 法。鉴定和筛选方法可在溶液中或者在固相、体外(细胞或组织培养)、 先体外后体内或体内(在动物中)进行。

在一个实施方案中，所述方法包括使能消除或抑制G2关卡的化 合物与真菌相接触；将真菌与化合物一起培养；然后确定真菌的生 存、生长或增殖。真菌在化合物存在时生存、生长或增殖减少证明 该化合物具有抗真菌活性。在另一个实施方案中，所述方法包括使 能消除或抑制G2关卡的化合物与真菌相接触；将真菌与化合物一起 培养；然后确定真菌的生存、生长或增殖。在还一个实施方案中， 所述方法包括使肽或肽模拟物与真菌相接触；将真菌与肽或肽模拟 物一起培养；然后确定真菌的生存、生长或增殖。真菌在肽或肽模 拟物存在时生存、生长或增殖减少证明该肽或肽模拟物具有抗真菌 活性。在又一个实施方案中，所述方法包括使肽或肽模拟物与真菌 相接触；将真菌与肽或肽模拟物一起培养；然后确定真菌的生存、 生长或增殖。

本文使用了以下缩写词：

Cha：环己基丙氨酸

Phe-2，3，4，5，6-F：氟在苯丙氨酸的苯基残基上的2、3、4、5、6位

F：氟

Bpa：苄酰基-苯丙氨酸

Nal(2)：2-萘基-丙氨酰基

Ala(3-Bzt)：(3-苯并噻吩基)丙氨酸

Nal(1)：1-萘基-丙氨酰基

Dph：联苯基-丙氨酸

Ala(tBu)：叔丁基-丙氨酰基

Cys(tBu)：叔丁基-半胱氨酸

Phe-3，4，5-F：氟在苯丙氨酸的苯基上的3、4、5位

Phe-4CF3：CF3在苯丙氨酸的苯基残基上的4位

Phe-3Br，4Cl，5Br：溴在苯丙氨酸苯基的3位，氯在4位，溴在5位

Phe-4Cl：氯在苯丙氨酸的苯基上的4位

P1，P2，P3，P4，P5，P6等，和(P1，P2，P3，P4，P5，P6等)；P7，P8，P9，P10， P11，P12等，和(P7，P8，P9，P10，P11，P12等)；X1，X2，X3，X4，X5，X6，X7， X8，X9，X10，X11：分别是P1，P2，P3，P4，P5，P6等；P7，P8，P9，P10，P11， P12及X1，X2，X3，X4，X5，X6，X7，X8，X9，X10，X11的毗连序列

X：任何氨基酸。

除非另作定义，本文使用的所有技术和科学术语与本发明所属 领域的普通技术人员通常理解的含义一样。尽管可以将类似于或等 于本文描述的方法和材料应用于本发明的实施或试验中，但本文描 述了合适的方法和材料。

本文引用的所有出版物、专利和其他参考文献通过引用整体结 合到本文中。如有冲突，以本说明书(包括其中的定义)为准。

除上下文清楚地指明外，本文使用单数形式“一个”“一种” 包括复数含义。因此，如果合适，例如“化合物”包括多种化合物， “肽”或者“氨基酸”包括一种或多种肽和氨基酸。

本发明描述了多个实施方案。尽管如此，还应认识到，可以作 出各种修改而不偏离本发明的精神和范围。因此，以下实施例旨在 说明而不是限制权利要求书所描述的本发明范围。

                        实施例

                        实施例1

本实施例描述材料和几种方法。

化学品和试剂  两性霉素B购自Sigma-Aldrich公司(St.Louis， MO)，将其溶于DMSO，至10mg/ml。硼霉素和L，L-D42067α由北 里大学的H.Tomoda教授惠赠。

细胞培养物  酿酒酵母(Saccaromices Cerevisie)AH109购自 CLONTECH(Palo Alto，CA)。YAPD平板用购自CLONTECH的YPD 琼脂和购自Sigma-Aldrich公司的腺嘌呤制备。细胞在30度下进行培 养。

                         实施例2

本实施例描述本发明各种化合物的结构。表1列举了各种肽/肽 模拟物，包括CBP501((d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe2，3，4，5，6- F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg))。

表1  代表性肽/肽模拟物序列和相应的编号   (l-Tyr)(l-Gly)(l-Arg)(l-Lys)(l-Lys)(l-Arg)(l-Arg)(l-Gln)(l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6，-F)(l-Arg)(l-Ser)(l-Pro)(l-Ser)(l-   Tyr)(l-Tyr)(SEQ ID NO：116)   CBP413   (l-TYr)(l-Gly)(l-Arg)(l-Lys)(l-Lys)(l-Arg)(l-Arg)(l-Gln)(l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6-F)(l-Arg)(l-Ser)(l-Pro)(l-Ser)(l-Tyr)   (SEQ ID NO：117)   CBP420   (l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6-F)(l-Arg)(l-Ser)(l-Pro)(l-Ser)(l-Tyr)(l-Tyr)(SEQ ID NO：118)   CBP430   (l-Arg)(l-Arg)(l-Gln)(l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6-F)(l-Arg)(l-Ser)(l-Pro)(l-Ser)(l-Tyr)(l-Tyr)(SEQ ID NO：119)   CBP431   (l-Arg)(l-Arg)(l-Gln)(l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(l-Pro)(l-Ser)(l-Tyr)   CBP432   (l-Tyr)(l-Gly)(l-Arg)(l-Lys)(l-Lys)(l-Arg)(l-Arg)(l-Gln)(l-Arg)(l-Arg)(l-Arg)(l-Cha)(l-Phe-2，3，4，5，6-F)(l-氨基十一烷酸)(l-Tyr)(l-   Tyr)(SEQ ID NO：120)   CBP440   (d-Tyr)(d-Tyr)(d-Ser)(l-Gly)(d-Ser)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Lys)(d-Lys)(d-   Arg)(l-Gly)(d-Tyr)   CBP450   (d-Tyr)(d-Ser)(d-Pro)(l-Trp)(l-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP451   (d-Tyr)(d-Ser)(l-Pro)(l-Trp)(l-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP452   (d-Tyr)(d-Ser)(d-Pro)(l-Trp)(l-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Pro)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP454   (d-Tyr)(d-Ser)(l-Pro)(l-Trp)(l-Ser)(d-Phe-2，3，4、5，6-F)(l-Pro)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP455   (l-Tyr)(l-Tyr)(l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Lys)(d-Lys)(d-Arg)   (l-Gly)(d-Tyr)   CBP460   (l-Tyr)(l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arp)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Lys)(d-Lys)(d-Arg)(l-   Gly)(d-Tyr)   CBP461   (l-Tyr)(l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP462   (l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Lys)(d-Lys)(d-Arg)(l-Gly)(d-   Tyr)   CBP463   (l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，e-F)(d-Cha)   CBP464   (l-氨基十一烷酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP465   (l-8-氨基辛酸)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP466   (d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP470   (d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP471   (d-Tyr)(d-Ser)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP481   (d-Tyr)(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP500   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP501   (d-Bpa)(l-8-氨基辛酸)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP502   (d-Bpa)(l-8-氨基辛酸)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP503   (d-Asp)(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP504   (d-Bpa)(d-Asp)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP505   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Asp)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP506   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)   CBP510   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP511   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Cha)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)   CBP512   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Bpa)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP601   (d-Bpa)(l-8-氨基辛酸)(d-Bpa)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP602   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe4No2)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP603   (d-Bpa)(d-Pro)(d-Trp)(d-Pro)(d-Phe4NO2)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP604   (d-Bpa)(d-Pro)(d-Trp)(d-Pro)(d-Phe4NO2)(d-Nal2)(d-Arg)(d-Ag)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP605   (d-Phe4NO2)(d-Pro)(d-Trp)(d-Pro)(d-Phe4NO2)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Gln)(d-Arg)(d-Arg)   CBP606   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg(d-Arg)(d-Arg)   CBP607   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)   CBP608   (d-Bpa)(d-Ser)(d-Trp)(d-Ser)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)(d-Lys)(d-Lys)(d-Lys)(d-Lys)(d-Lys)(d-Lys)   CBP609   (d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP700   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Trp)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d·Cha)   CBP701   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Trp)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP702   (d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Bpa)(d-Arg)(d-Arg)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6-F)(d-Cha)   CBP703   (d-Bpa)(d-Cys)(d-Trp)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6F)(d-Cha)(d-Cys)   CBP524   (d-Tyr)(d-Cys)(d-Pro)(d-Trp)(d-Arg)(d-Phe-2，3，4，5，6F)(d-Cha)(d-Cys)   CBP721

                        实施例3

本实施例简述CBP501的磷酸化抑制活性。如图1所示，与其 他丝氨酸-苏氨酸激酶如依赖细胞周期蛋白的激酶PKA和PKC相比， CBP501强烈抑制涉及细胞周期G2关卡的激酶如ATM、ATR、CHK1、 CHK2、PLK1和Weel的活性。

激酶的来源、测定方法、底物、第一抗体、第二抗体、反应缓 冲液、反应体积、ATP浓度和反应时间如下所示。ATM和ATR：全 长重组人激酶，293T细胞、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、GST-p53 (aa1-99)、抗-p53-磷酸化Ser15、辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗兔 IgG、1xMg/Mn激酶缓冲液(20mM Hepes-KOH(pH7.5)，1mM DTT， 80ug/ml BSA，10mM MgCl2，10mM MnCl2)、50ul、100uM和60分钟。 Chk1、Chk2和c-Tak1：全长重组人激酶，SF-9细胞(Chk1)、全长重 组人激酶，大肠杆菌(E.Coli)细胞(Chk2)和全长重组人激酶，SF-9细 胞(c-Tak1)、ELISA、GST-Cdc25C(aa167-267)、抗-Cdc25C-磷酸化 Ser216、HRP-标记的抗小鼠IgG、1×Mg激酶缓冲液(20mM  Hepes-KOH(pH7.5)，1mM DTT，80ug/ml BSA，10mM MgCl2)、50ul、50uM 和60分钟。PLK-1：人全长GST融合体，大肠杆菌、ELISA、GST 融合蛋白Y、抗磷酸化Ser/Thr单克隆抗体、HRP-标记的抗小鼠IgG、 1×Mg激酶缓冲液、30ul、50uM和60分钟。Weel：人全长重组激 酶GST融合体，大肠杆菌、ELISA、抗-Cdc2-磷酸化Tyr15、HRP- 标记的抗兔IgG、1×Mg激酶缓冲液、50ul、100uM和60分钟。 DNA-PK：人纯化，HeLa细胞、ELISA、GST-p53(aa 1-99)、抗-p53- 磷酸化Ser15、HRP-标记的抗兔IgG、1×Mg激酶缓冲液、50ul、100uM 和60分钟。Cdk2-细胞周期蛋白A、Cdc2-细胞周期蛋白B、Cdk2-细 胞周期蛋白E和Cdk4-细胞周期蛋白D1：全长重组人蛋白，SF-9细 胞、夹心ELISA、抗-RB-磷酸化Thr356、Ser612、Thr356和Thr356(分 别)、HRP-标记的抗-RB小鼠单克隆抗体、1×Cdk/细胞周期蛋白反 应缓冲液(50mM Hepes-KOH(pH7.5)，1mM EGTA，1mM DTT， 200ug/ml BSA，15mM MgCl2，0.02％Tween-20，10％甘油)、50ul、100uM 和30分钟。Cdk5-p25：人全长重组激酶GST融合体，大肠杆菌、玻 璃滤片俘获试验(使用γ-32ATP)、组蛋白H1、1×Mg激酶缓冲液、30ul、 25uM和60分钟。PKA：人重组催化亚单位，大肠杆菌、ELISA、PS 肽、生物素化小鼠单克隆抗体2B9、HRP链霉抗生物素蛋白、1×PKA 反应缓冲液(20mM Tris HCl(pH7.0)，3mM MgCl2)、50ul、100uM和30 分钟。PKC：纯化大鼠，大鼠大脑、ELISA、PS肽、生物素化小鼠 单克隆抗体2B9、HRP缀合链霉抗生物素蛋白、1×PKC缓冲液(20mM Tris HCl(pH7.0)，3mM MgCl2，2mM CaCl2，50ug/ml磷脂酰丝氨酸)、 50ul、100uM和30分钟。

所有培养都在30℃进行。如下进行磷酸化抑制分析。各种激酶、 ATP和底物在以上指定的缓冲液中与或不与CBP501(0.5、5、50uM) 一起在30℃下培养指定的时间。被磷酸化的底物如上所述用ELISA 或RIA检测。反应中的底物磷酸化百分比对CBP501浓度进行作图。 无CBP501的各激酶反应的磷酸化底物量指定为100％。

                      实施例4

本实施例显示CBP501对YAPD平板上酵母AH109生长的抑制 作用(图2)。

将液体培养基(YAPD)中处于对数生长期的酵母AH109用温热 的液体YAPD培养基(添加或不添加指定剂量的CBP501和/或两性霉 素B)稀释1-10倍。在30℃下培养1小时后，将全部溶液倒入YAPD 琼脂糖平板。然后将平板培养3天，对样本进行拍照(图2)。

                     实施例5

本实施例显示CBP501对白念珠菌(Candida albicans)、Candida glabrata、新生隐球菌(Cryptococcus neoformans)和须毛癣菌 (Trichophyton mentagroohytes)的生长抑制作用。

白念珠菌获自ATCC(ATCC 10231)，在液体沙氏(Sabouraud)培 养基中37℃培养。在接种并用0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/ml CBP501处理后1天，测定浊度。Candida glabrata获自ATCC(ATCC 36583)，在液体沙氏培养基中28℃培养。在接种并用0.03、0.1、0.3、 1、3、10、30、100μg/ml CBP501处理后2天，测定浊度。新生隐球 菌获自ATCC(ATCC 24067)，在液体沙氏培养基中37℃培养。在接 种并用0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/ml CBP501处理后2 天，测定浊度。须毛癣菌获自ATCC(ATCC 9533)，在马铃薯葡萄糖 肉汁中28℃培养。在接种并用0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/ml CBP501处理后3天，测定浊度。最小生长抑制浓度确定为在浊度不 增加的情况下CBP501的最小浓度(表2)。

表2：CBP501对各种真菌的抗真菌活性   CBP501的MIC*   白念珠菌   100μg/ml   Candida glabrata   30μg/ml   新生隐球菌   1μg/ml   须毛癣菌   100μg/ml

MIC*＝最小抑制浓度

                     相关申请

本申请要求2003年4月7日提交的申请系列号60/461,109的优 先权，后者申请通过引用结合到本文中。