一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用
阅读：330发布：2020-05-27
专利汇可以提供一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种克氏原螯虾 饲料 添加剂及其应用。克氏原螯虾饲料添加剂包括月桂酸单甘油酯，所述月桂酸单甘油酯的用量，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾 基础 配合饲料的 质量 比计数，为2-4g/Kg。所述的应用为一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗 白斑综合征病毒 饲料中的应用。本发明针对克氏原螯虾白斑综合症，提供了一种有效的 预防 和 治疗 措施和确定有效的免疫增强剂，本发明的抗病毒效果显著，且无毒性。，下面是一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用专利的具体信息内容。
1.一种克氏原螯虾饲料添加剂，其特征在于：包括月桂酸单甘油酯。
2.根据权利要求1所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂，其特征在于：所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为
2-4g/Kg。
3.根据权利要求2所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂，其特征在于：所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为
3g/Kg。
4.根据权利要求1-3任一权利要求所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗白斑综合征病毒饲料中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述抗白斑综合征病毒饲料包括克氏原螯虾基础配合饲料和克氏原螯虾饲料添加剂，所述抗白斑综合征病毒饲料的制备方法为，称取月桂酸单甘油酯，将月桂酸单甘油酯加入克氏原螯虾基础配合饲料，混合均匀，经挤压成型后于烘干箱中以30-50℃烘干。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述抗白斑综合征病毒饲料的喂食方法为，按常规喂食用量，每日喂食两次。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述月桂酸单甘油酯为月桂酸单甘油酯粉。
一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用
技术领域
[0001] 本发明涉及克氏原螯虾饲料添加剂技术领域，特别是一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用。
背景技术
[0002] 克氏原螯虾(Procambarus clarkii)，俗称小龙虾，是一种淡水螯虾，原产于美国东南部。在20世纪30年代，克氏原螯虾从日本引入中国，在长三角附近生长繁殖，然后沿长江流域自然传播。由于其高营养价值，克氏原螯虾在国内外市场的消费和贸易逐年增加，尤其是近年来国内的消费量十分可观，进而带动了餐饮加工等一批周边产业的发展。然而，克氏原螯虾的人工化养殖面临着诸多问题，尤其是高密度集约化养殖模式为病原体增殖提供了理想的环境，例如白斑综合征病毒(WSSV)，而白斑综合征病毒(WSSV)可在短时间内导致养殖克氏原螯虾的大量死亡。
[0003] 白斑综合症病毒(WSSV)严重危害克氏原螯虾养殖业，对克氏原螯虾养殖造成了巨大的损失，目前还没有有效的针对克氏原螯虾白斑综合症的预防和治疗措施，也无确定有效的免疫增强剂，而化学制剂抗病毒效果不明显，还具有较大的毒性，如色醇。
[0004] 因此，针对克氏原螯虾白斑综合症，目前还没有有效的预防和治疗措施，也无确定有效的免疫增强剂，而化学制剂抗病毒效果不明显，还具有较大的毒性。
发明内容
[0005] 本发明的目的，在于提供了一种克氏原螯虾饲料添加剂及其应用。本发明针对克氏原螯虾白斑综合症，提供了一种有效的预防和治疗措施和确定有效的免疫增强剂，本发明的抗病毒效果显著，且无毒性。
[0006] 本发明的技术方案：一种克氏原螯虾饲料添加剂，包括月桂酸单甘油酯。
[0008] 前述的一种克氏原螯虾饲料添加剂中，所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为3g/Kg。
[0009] 前述的一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗白斑综合征病毒饲料中的应用。
[0010] 前述的应用中，所述抗白斑综合征病毒饲料包括克氏原螯虾基础配合饲料和克氏原螯虾饲料添加剂，所述抗白斑综合征病毒饲料的制备方法为，称取月桂酸单甘油酯，将月桂酸单甘油酯加入克氏原螯虾基础配合饲料，混合均匀，经挤压成型后于烘干箱中以30-50℃烘干。
[0011] 前述的应用中，所述抗白斑综合征病毒饲料的喂食方法为，按常规喂食用量，每日喂食两次。
[0012] 前述的应用中，所述月桂酸单甘油酯为月桂酸单甘油酯粉。
[0013] 与现有技术比较，本发明中的克氏原螯虾饲料添加剂包括月桂酸单甘油酯，月桂酸单甘油酯可提高克氏原螯虾的免疫酶活活性，抑制白斑综合征病毒的复制，并降低克氏原螯虾的死亡率。相对于传统的化学制剂和复方中草药制剂，月桂酸单甘油酯是安全的食品添加剂，成分天然，且无毒性。喂食含所述克氏原螯虾饲料添加剂的饲料对克氏原螯虾白斑综合征病毒具有显著的抑制作用，为人工养殖克氏原螯虾过程中有效抑制白斑综合征病毒的感染和传播提供了有效的方法。以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，含2-4g/Kg的月桂酸单甘油酯的饲料可显著提高克氏原螯虾的免疫力，大大增强了克氏原螯虾对白斑综合征病毒的抵抗力，对克氏原螯虾白斑综合征病毒具有较好的抑制作用，尤以含3g/Kg的月桂酸单甘油酯的饲料的效果最好。在对克氏原螯虾进行白斑综合征病毒攻毒实验中，喂食含3g/Kg的月桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾的THC(总血细胞计数)在24小时增加到1.19×106个/ml，在48小时增加到1.39×106个/ml，这两者都显著高于喂食不含月桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾(24小时p＝0.023680772；48小时p＝0.007435374，P为差异显著性)；喂食含3g/kg的月桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾的PO(酚氧化酶)在24小时为0.538000428U，在48小时为1.095589809 U，与喂食不含桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾相比PO活性产生显著增强(24小时p＝0.014203997；48小时p＜0.0001，P为差异显著性)；12天后，喂食不含月桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾的死亡率为100％，而喂食含3g/Kg的月桂酸单甘油酯的饲料的克氏原螯虾的死亡率为57％。本发明针对克氏原螯虾白斑综合症，提供了一种有效的预防和治疗措施和确定有效的免疫增强剂，本发明的抗病毒效果显著，且无毒性。
附图说明
附图说明
[0014] 图1为月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾攻毒后死亡率的影响图；
[0015] 图2为月桂酸单甘油酯(GML)添加对攻毒后病毒拷贝数的影响图；
[0016] 图3为月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾先天性免疫指标THC的影响图(对照组、3g/Kg GML组)；
[0017] 图4为月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾先天性免疫指标THC的影响图(对照组、WSSV组、WSSV+3g/Kg GML组)；
[0018] 图5为月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾先天性免疫指标PO的影响图(对照组、3g/Kg GML组)；
[0019] 图6为月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾先天性免疫指标PO的影响图(对照组，WSSV组、WSSV+3g/Kg GML组)。
具体实施方式
[0020] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
[0021] 实施例1。
[0022] 一种克氏原螯虾饲料添加剂，包括月桂酸单甘油酯。所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为2g/Kg。
[0023] 所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗白斑综合征病毒饲料中的应用。所述抗白斑综合征病毒饲料包括克氏原螯虾基础配合饲料和克氏原螯虾饲料添加剂，所述抗白斑综合征病毒饲料的制备方法为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，按2g/Kg的量称取月桂酸单甘油酯粉，将月桂酸单甘油酯粉按比例加入克氏原螯虾基础配合饲料，充分搅拌混合均匀，经挤压成型后于烘干箱中以30℃烘干。所述抗白斑综合征病毒饲料的喂食方法为，按常规喂食用量，每日喂食两次。
[0024] 实施例2。一种克氏原螯虾饲料添加剂，包括月桂酸单甘油酯。所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为4g/Kg。
[0025] 所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗白斑综合征病毒饲料中的应用。
[0026] 所述抗白斑综合征病毒饲料包括克氏原螯虾基础配合饲料和克氏原螯虾饲料添加剂，所述抗白斑综合征病毒饲料的制备方法为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，按2g/Kg的量称取月桂酸单甘油酯粉，将月桂酸单甘油酯粉按比例加入克氏原螯虾基础配合饲料，充分搅拌混合均匀，经挤压成型后于烘干箱中以40℃烘干。所述抗白斑综合征病毒饲料的喂食方法为，按常规喂食用量，每日喂食两次。
[0027] 实施例3。一种克氏原螯虾饲料添加剂，包括月桂酸单甘油酯。所述月桂酸单甘油酯的用量为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，为3g/Kg。
[0028] 所述的一种克氏原螯虾饲料添加剂在制备抗白斑综合征病毒饲料中的应用。所述抗白斑综合征病毒饲料包括克氏原螯虾基础配合饲料和克氏原螯虾饲料添加剂，所述抗白斑综合征病毒饲料的制备方法为，以每克月桂酸单甘油酯占每千克克氏原螯虾基础配合饲料的质量比计数，按2g/Kg的量称取月桂酸单甘油酯粉，将月桂酸单甘油酯粉按比例加入克氏原螯虾基础配合饲料，充分搅拌混合均匀，经挤压成型后于烘干箱中以50℃烘干。所述抗白斑综合征病毒饲料的喂食方法为，按常规喂食用量，每日喂食两次。
[0029] 以下为螯虾(克氏原螯虾)的饲喂实验。
[0030] 1.螯虾感染实验
[0031] 健康的螯虾随机分成5组(每组n＝15)，对WSSV(白斑综合征病毒)组、WSSV+2g/kg GML(月桂酸单甘油酯)组、WSSV+3g/kg GM L组、WSSV+4g/kg GML组、Control组进行WSSV口服攻毒后的累计死亡率分析。WSSV组指先饲喂一周基础饲料之后再进行口服攻毒，WSSV+2g/kg GML组、WSSV+3g/kg GML组、WSSV+4g/kg GML组指饲喂添加GML饲料一周后进行口服攻毒。Control组为阴性对照，仅投喂基础饲料不攻毒。攻毒后继续投喂对应的饲料，每天观察实验动物两次，观察疾病和死亡的症状，记录死亡个数。攻毒后第2天到第11天，WSSV组螯虾的死亡率迅速上升并接近95％，攻毒12天后，WS SV组的螯虾死亡率达到100％。WSSV+3g/kg GML组的螯虾死亡率明显低于WSSV组、WSSV+2g/kg GML组、WSSV+4g/kg GML组，死亡率仅为57％。因此仅对3g/kg GML的添加剂量进行后续实验。月桂酸单甘油酯(GML)添加对螯虾攻毒后死亡率的影响如图1所示。
[0032] 2.月桂酸单甘油酯的抗病毒机制
[0033] 根据死亡率确定病毒拷贝数采样时间，将采样时间定为攻毒前，以及攻毒后24小时、48小时、72小时、96小时和120小时。攻毒后24小时，WSSV组开始出现死亡现象，攻毒48小时后，死亡率快速上升，96小时后病毒拷贝数达到107，而WSSV+3g/kg GML组病毒拷贝数在120小时后达到107(如图2所示)。从72小时到120小时，WSSV组的病毒拷贝数均显著高于WSSV+3g/kg GML组病毒拷贝数(p＝0.009883637；p＜0.0001；p＝0.002241528)，由此可见
3g/kg GML组对病毒的复制有一定的抑制作用，在一定程度上增强了螯虾对病毒的抵抗力。
3g/kg GML组对病毒的复制有一定的抑制作用，在一定程度上增强了螯虾对病毒的抵抗力。
[0034] 对WSSV组、对照组、WSSV+3g/kg GML组以及3g/kg GML组进行了免疫活性检测，免疫参数分别是THC(总血细胞计数)，PO(酚氧化酶)活性。在24小时后，螯虾THC不受3g/kg GML处理的影响(p＝0.23647866)，但是在48小时后，3g/kg GML组的THC显著高于对照组(p＝0.017558593)(如图3所示)。WSSV感染后在24小时和48小时均不影响THC(24小时p＝0.784257268；48小时p＝0.933360795)(如图4所示)。饲喂GML添加剂饲料的螯虾THC在24小
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时增加到1.19×10/ml，在48小时增加到1.39×10/ml，这两者都显著高于WSSV感染组(24小时p＝0.023680772；48小时p＝0.007435374)。3g/kg GML组在24小时(0.538000428U)和
48小时(1.095589809U)与对照组相比PO活性产生显著增强(24小时p＝0.014203997；48小时p＜0.0001)(如图5所示)。在病毒攻击实验中，图d，PO活性在24小时和48小时均呈下降趋势，但是趋势不明显(如图6所示)。3g/kg GML添加剂组在病毒攻击实验中，PO活性显著高于WSSV组(24小时p＝0.003704694；48小时p＝0.022025511)。以上结果说明，3g/kg GML添加剂使用后能显著提高螯虾的免疫力，包括未攻毒和口服攻毒以后。
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时增加到1.19×10/ml，在48小时增加到1.39×10/ml，这两者都显著高于WSSV感染组(24小时p＝0.023680772；48小时p＝0.007435374)。3g/kg GML组在24小时(0.538000428U)和
48小时(1.095589809U)与对照组相比PO活性产生显著增强(24小时p＝0.014203997；48小时p＜0.0001)(如图5所示)。在病毒攻击实验中，图d，PO活性在24小时和48小时均呈下降趋势，但是趋势不明显(如图6所示)。3g/kg GML添加剂组在病毒攻击实验中，PO活性显著高于WSSV组(24小时p＝0.003704694；48小时p＝0.022025511)。以上结果说明，3g/kg GML添加剂使用后能显著提高螯虾的免疫力，包括未攻毒和口服攻毒以后。
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