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通过超临界 流体色谱法制造物质的方法

阅读：801发布：2020-05-13

专利汇可以提供通过超临界流体色谱法制造物质的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且提供了一种使用超临界流体色谱法制造靶向物质的方法，通过所述方法实现以下效果：提高含有靶向物质的样品的通过量；提高每单位时间分离的处理量；和改进分离效率。所述方法包括以下步骤：将含有靶向物质的样品注射至流动相中；和在改变流动相的组成之后，将流动相的组成返回至改变前的状态。在从检测到最后从柱中洗脱的关注的靶向物质的峰到注射下一个样品之间的时间段期间，进行改变流动相的组成和将其返回至改变前的状态的步骤。，下面是通过超临界流体色谱法制造物质的方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种通过使用超临界流体色谱法设备制造靶向物质的方法，其将靶向物质从注射至含有超临界流体和溶剂的流动相中的样品中分离，
所述方法包括以下步骤：
将样品注射至流动相中；
在将样品注射至流动相中之后，改变流动相的组成；和
在改变流动相的组成之后，将流动相的组成返回至改变前的状态，
其中，在从检测到在通过超临界流体色谱法设备分离的靶向物质中最后从柱中洗脱出的靶向物质之一的峰到注射下一个样品的时间段期间，进行改变流动相的组成的步骤和将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤。
2.权利要求1的方法，其中改变流动相的组成的步骤通过注射溶剂进行。
3.权利要求2的方法，其中以等于或大于样品的注射体积并且等于或小于样品的注射体积的三十倍的量注射所述溶剂。
4.权利要求2或3的方法，其中作为要在改变流动相的组成的步骤中注射的溶剂，使用极性高于包含在流动相中的溶剂的极性的溶剂。

说明书全文

通过超临界 流体色谱法制造物质的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种通过超临界流体色谱法制造物质的方法以及超临界流体色谱法设备。

背景技术

[0002] 在超临界流体色谱法设备中，超临界流体用作流动相。比起普通的溶剂，超临界流体具有较高的扩散性和较低的粘度。因此，通过使用超临界流体色谱法设备，例如，可以高速度分离难以分离的光学异构体。

[0003] 在这种超临界流体色谱法设备中，由二氧化碳等形成的超临界流体用作流动相，并且，在将样品注射至流动相中和将样品的各组分在流动相中溶解之后，通过调节流动相的压力、温度等，将在流动相中的样品的各组分分离。或者，通过将超临界流体与称为夹带剂或改性剂的溶剂(比如乙醇)混合形成流动相，通过调节流动相的压力、温度等进行分离。

[0004] 在专利文件1中，提出了一种从柱中检测和洗去具有大分子量并且无紫外吸收的组分的技术，做法是，通过在样品注射器的上游侧提供第二注射器，以及通过将恒压释放阀的输出侧与光漫射检测器连接。

[0005] 此外，在专利文件2中，提出了一种分级(fractionate)和回收样品的技术，做法是，当将样品从柱(在所述柱中，通过使用其中加入溶剂作为改性剂的超临界流体，将样品吸收)中洗脱时，用各自具有不同溶剂强度的溶剂顺序更换，进行洗脱。然而，在这些技术中，尚未考虑改进分级效率而进行研究，特别是通过顺序注射样品从样品中分级大量的靶向物质的效率，因此，这些技术不适用于工业大量生产。

[0006] 相关的技术文件

[0007] 专利文件

[0008] 专利文件1：JP 06-11497 A

[0009] 专利文件2：JP 07-294503 A

[0010] 发明概述

[0011] 本发明要解决的问题

[0012] 在如上所述的情况下，本发明的发明人致力于研究可顺序注射样品的技术，从而实现工业大量生产。在研究相关技术的过程中，本发明的发明人集中于以下的事实：在柱吸收超临界流体色谱法中，当特别是进行用于负载相对大量的待分离的化合物的分级操作时，柱吸收行为表现出非线性特性，因此其峰形与高斯线形状非常不同，并且表现出具有显著拖尾的峰形。本文描述的“拖尾”表示在峰的后面像长的平缓下坡的图形曲线，如图2所示。当在这种情况下顺序注射样品时，必须在拖尾令人满意地减少之后再注射样品。当在拖尾令人满意地减少之前注射下一个样品时，拖尾组分与下一个注射的样品的峰组分混合。因此，分离的化合物的纯度下降。结果是，每单位时间分离的处理量必须下降。

[0013] 本发明的一个目标是提供一种在顺序注射时解决上述问题的方法，加速在顺序注射时再注射样品的时间安排，增大每单位时间分离的处理量，和改进分离效率。

[0014] 解决问题的手段

[0015] 本发明的发明人致力于研究较早减少拖尾的手段，并且已发现通过改变柱中含有超临界流体和溶剂的流动相的组成而加速减少拖尾的事实。因此，完成本发明。

[0016] 本发明提供了一种制造靶向物质的方法，其通过使用超临界流体色谱法设备，从注射至含有超临界流体和溶剂的流动相中的样品分离靶向物质。所述方法包括以下步骤：

[0017] 将样品注射至流动相中；

[0018] 在将样品注射至流动相中之后，改变流动相的组成；和

[0019] 在改变流动相的组成之后，将流动相的组成返回至改变前的状态，[0020] 其特征在于，在从检测到在通过超临界流体色谱法设备分离的靶向物质中最后从柱中洗脱的靶向物质之一的峰到注射下一个样品的时间段期间，进行改变流动相的组成的步骤和将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤。

[0021] 发明效果

[0022] 根据本发明的方法，与普通的方法相比较，较早出现减少峰拖尾，因此可加速再注射样品的时间安排。因此，可提高每单位时间样品的处理量，和改进超临界流体色谱法的分离性能。

[0023] 附图简述

[0024] 图1是举例说明本发明的超临界流体色谱法设备的一个实例的示意图。

[0025] 图2为显示根据实施例1减少峰拖尾的图。

[0026] 图3为显示在实施例1的方法与普通的注射方法之间的峰的比较的图。

[0027] 图4为显示根据实施例2减少峰拖尾的图。

[0028] 图5为显示根据实施例2减少峰拖尾的放大图。

[0029] 图6为显示在实施例2-(2)的方法与普通的注射方法之间的峰的比较的图。

[0030] 图7为显示根据参考实施例的峰的图。

具体实施方式

[0031] 本发明的方法应用于超临界流体色谱法设备，用于将靶向物质从注射至含有超临界流体和溶剂的流动相中的样品分离。

[0032] 不特别限制用于本发明的流动相，只要流动相含有超临界流体和溶剂即可。流动相可通过将超临界流体与溶剂混合而形成，或者可通过提高用作超临界流体的原料的含有溶剂和液化气体的混合流体的压力和温度之一或二者而形成。流动相可通过使用例如公知的换热器和高压泵而形成。

[0033] 超临界流体为具有临界压力或更高压力和临界温度或更高温度之一或二者的物质(也就是，在超临界状态的物质)。待用作超临界流体的物质的实例包括二氧化碳、氨、二氧化硫、卤化氢、氧化亚氮、硫化氢、甲烷、乙烷、丙烷、丁烷、乙烯、丙烯、卤代烃和水。

[0034] 作为溶剂，根据靶向物质的种类、超临界流体的种类等，在多种公知的溶剂中选择一种或两种以上溶剂。溶剂的实例包括低级醇(比如甲醇、乙醇和2-丙醇)、酮(比如丙酮)、四氢呋喃、乙腈、乙酸乙酯和水。

[0035] 在流动相中超临界流体与溶剂的混合比可设定为常用于超临界流体色谱法中的流动相的混合比，并且通过考虑待用作超临界流体的物质和溶剂的种类，可设定为适当的混合比。具体地，优选60∶40至95∶5范围的混合比，更优选80∶20至95∶5范围的混合比。

[0036] 不特别限制上述超临界流体色谱法设备，只要超临界流体色谱法设备能将靶向物质从注射至流动相中的样品分离即可。通过将下述装置应用于普通的超临界流体色谱法设备，可设置上述超临界流体色谱法设备，下述装置用于进行，在改变流动相的组成之后，将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤。

[0037] (根据本发明将样品注射至流动相的步骤)

[0038] 根据本发明注射样品的步骤可类似于在超临界流体色谱法中通常进行的操作进行，并且可通过利用公知的技术来进行。例如，如在JP Hei 05-307026 A中所述，可采用在注射时不引起压力波动的注射方法。或者，如在JP 2006-58146 A中所述，可采用使用简单的结构可自由调节注射至流动相中的样品的压力的注射方法。

[0039] (根据本发明改变流动相的组成的步骤和将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤)

[0040] 在根据本发明改变流动相的组成的步骤中，改变含有超临界流体和溶剂的流动相的组成。在本发明中，通过在该步骤中改变流动相的组成，可加速减少峰拖尾。如上所述，在柱吸收超临界流体色谱法中，在特别是进行用于负载相对大量的待分离的化合物的分级操作的情况下，峰表现出显著的拖尾，如图2所示。当在该拖尾减少之前注射下一个样品时，拖尾组分与下一个注射的样品的峰组分混合。结果是，分离的化合物的纯度不利地下降。因此，必须在减少拖尾完成之后进行下一个样品的注射。因此，通过加速减少拖尾，可加速注射下一个样品的时间安排。在本发明中，通过改变流动相的组成，可促进从柱中提取峰组分和加速减少拖尾。

[0041] 在本发明中，通过改变流动相的组成，和通过促进从柱中提取峰组分来加速减少拖尾，得到与在液相色谱法中的步进梯度方法相同的效果。在超临界流体色谱法中，使用具有高扩散性和低粘度的超临界流体，因此，流动相的流速高并且柱的平衡快速。因此，即使当流动相的组成改变时，柱也快速返回至改变前的环境，因此可在减少拖尾之后立即注射下一个样品。结果是，可提高每单位时间样品的处理量，和改进效率和生产率。

[0042] 根据本发明改变流动相的组成的步骤可使用任何方法进行，只要该步骤可在超临界流体色谱法设备中进行即可。例如，通过提高流动相中的溶剂比，可改变流动相的组成。以下描述改变流动相的组成的具体方法。

[0043] 作为提高流动相中的溶剂比的方法，例如，独立于流动相形成装置，可在超临界流体色谱法设备中提供用于改变流动相的组成的溶剂注射装置。溶剂已包含在流动相内。然而，独立于用于将溶剂注射至流动相中的装置，在柱的上游侧和流动相形成装置的下游侧提供溶剂注射装置，因此，流动相中的溶剂比可提高。溶剂注射装置可为，例如，包括用于保存要注射的溶剂的环路管道、流动通道转换阀和溶剂注射泵的溶剂注射装置。

[0044] 用于溶剂注射装置的环路管道为具有预定容量的管。当提供环路管道时，改进了样品的注射定量性，并且可优选地注射较大量的样品。在本发明中，环路管道的容量根据各种条件而变，比如要在超临界流体色谱法设备中使用的柱的种类、柱的内径、靶向物质的种类和流动相的组成。然而，需要立刻注射大量的溶剂。因此，溶剂注射装置的环路管道的尺寸比样品注射装置的环路管道大，并且能保存大量的溶剂的管道适合用作溶剂注射装置的环路管道。

[0045] 不特别限制用于溶剂注射装置的流动通道转换阀，只要流动通道转换阀为在流动相的流动通道中提供并且能自由打开和关闭的阀或旋塞即可。例如，可举例说明通过使用两通阀和蝶形阀的组合、或通过使用三通阀进行流动相的流动通道的切换的阀。作为用于溶剂注射装置的溶剂注射泵，可使用用于在超临界流体色谱法设备中注射样品的高压泵。

[0046] 当使用溶剂注射装置时，通过切换流动通道转换阀和使用溶剂注射泵将溶剂进料至柱中的流动相中，进行溶剂的注射。关于溶剂的注射，优选立刻注射等于或大于样品的注射体积量的溶剂，优选等于或大于样品的注射体积的两倍，更优选等于或大于样品的注射体积的五倍。作为上限，优选注射等于或小于样品的注射体积的三十倍，优选等于或小于二十倍，更优选等于或小于十五倍的量的溶剂。通过采用这种方式设定溶剂的注射量，进一步加速减少峰拖尾。

[0047] 此外，根据本发明将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤为在通过上述方法改变流动相的组成之后将流动相的组成返回至稳态的步骤。该步骤可通过任何方法进行，只要该步骤可在超临界流体色谱法设备中进行即可。当特别地使用溶剂注射装置时，切换流动通道转换阀，在通过溶剂注射泵将溶剂进料至柱中的流动相之后，将流动通道转换阀返回至其初始状态。从而进行了从流动相形成装置切换至流动相的流动通道。如上所述，在超临界流体色谱法中，流动相的流速高并且柱的平衡快速，因此，通过进行切换至流动相的流动通道，流动相的组成快速返回至改变前的组成。由于可容易地改变流动相的组成和容易地将流动相的组成返回至初始组成，溶剂注射装置可优选使用。

[0048] 根据本发明改变流动相的组成的步骤和将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤二者优选立刻进行。本文所述的“立刻”是足以产生流动相改变的时间段。通过及早平衡流动相，加速注射下一个样品的时间安排，因此，两个步骤在30秒内，优选10秒内进行。当使用溶剂注射装置时，在切换流动通道转换阀和注射溶剂之后，使流动通道转换阀返回至其初始状态，并且进行用于平衡流动相的操作。考虑到允许注射预定溶剂的时间段，优选尽可能快地进行切换操作。

[0049] 根据本发明改变流动相的组成的步骤和将流动相的组成返回至改变前的状态的步骤二者在从检测到在样品中的分离组分中最后洗脱的峰到注射下一个样品的时间段期间进行。两个步骤在该时间安排下进行，并因此可促进从柱中提取峰组分，和加速减少拖尾。

[0050] 不特别限制检测峰的方法。通过由通常提供用于超临界流体色谱法的检测器(比如紫外吸收光谱仪)检测到的峰，可计算时间安排。通过在上述时间安排下产生流动相的组成改变，可发挥本发明的效果。然而，当溶剂注射装置用于流动相的组成改变时，该装置通常具有死体积(dead volume)，因此，鉴于在注射溶剂之后引起流动相通过柱的出口的时间段(t0)，进行组成的变化。

[0051] 不特别限制待通过溶剂注射装置注射的溶剂。可注射与包含在流动相中的溶剂相同的溶剂，或者可注射不同的溶剂。待注射的溶剂可为一种溶剂，或者两种以上的混合物形式的溶剂。溶剂种类的实例包括低级醇(比如甲醇、乙醇和2-丙醇)、酮(比如丙酮)、四氢呋喃、乙腈、乙酸乙酯和水。

[0052] 在上述溶剂中，由于具有高极性的溶剂可进一步加速减少拖尾，优选使用具有高极性的溶剂。此外，优选的模式是采用极性高于包含在流动相中的溶剂的极性的溶剂。

[0053] 在本发明的方法中，将样品注射至流动相中的步骤可以短的间隔连续进行。因此，优选采用通过顺序注射样品分离靶向物质的方法，也就是，顺序进行上述三个步骤。比起常规的方法，在进行这种顺序注射样品时，注射样品的间隔可设定为更短。结果是，可提高每单位时间样品的处理量。

[0054] 在本发明中，当样品中的靶向物质之一的减少峰拖尾完成时，进行注射下一个样品。因此，根据靶向物质适当确定注射样品的间隔。

[0055] (本发明的超临界流体色谱法设备)

[0056] 本发明的超临界流体色谱法设备包括用于将样品注射至流动相中的样品注射装置，和用于改变流动相的组成的溶剂注射装置。此外，超临界流体色谱法设备通常具有柱和用于形成流动相的流动相形成装置，其提供给普通的超临界流体色谱法设备，并且具有其他结构，比如检测器和压力调节装置。

[0057] 不特别限制流动相形成装置，只要流动相形成装置为能形成含有超临界流体和溶剂的流动相的装置即可。流动相形成装置可例如由温度调节装置(比如换热器)和高压泵组成。

[0058] 不特别限制柱，只要该柱具有能在注射至流动相中的样品中分离靶向物质的分离剂即可。根据靶向物质，在多种分离剂中选择分离剂。不特别限制分离剂的模式。例如，当被粒状载体携带时分离剂可填充柱，当被待在柱中容纳的整体载体携带时可容纳于柱中，或者作为由分离剂形成的整体模塑材料可容纳于柱中。

[0059] 例如，当靶向物质中至少一种为光学异构体时，优选将具有光学活性的多糖或多糖衍生物用作分离剂。多糖的实例包括纤维素和直链淀粉。多糖衍生物的实例包括纤维素酯衍生物、直链淀粉酯衍生物、纤维素氨基甲酸酯衍生物和直链淀粉氨基甲酸酯衍生物。

[0060] 不特别限制检测器，只要检测器为能检测通过柱的流动相中的靶向物质的装置即可。检测器的实例包括紫外吸收光谱仪、差示折光计和偏振检测器。

[0061] 不特别限制压力调节装置，只要压力调节装置为在流动相的流动通道中从流动相形成装置到检测器的范围内能将压力调节至保持通过流动相形成装置形成的流动相的压力的装置即可。例如，公知的背压阀(背压调节阀)可用作压力调节装置。

[0062] 本发明的超临界流体色谱法设备还可包括不是用于分离样品中的靶向物质的设备的另一种装置。另一种装置的实例包括用于从流动相取出靶向物质的取出部件，该流动相通过压力调节装置从流动相中的超临界流体的超临界状态释放；和气体回收装置，用于从由超临界状态释放的流动相回收形成超临界流体作为气体的组分，和用于将组分供应至流动相形成装置。

[0063] 不特别限制取出部件，只要取出部件为能从流动相取出靶向物质的装置即可，该流动相含有通过柱分离的靶向物质并且由超临界状态释放。具体地，取出部件可由气-液分离器(比如旋风器)、可气密密封的容器等组成，气-液分离器用于使由超临界流体的超临界状态释放的流动相经受气-液分离，可气密密封的容器具有较低的压力并且接受已分离的液相。

[0064] 在本发明中，关于压力调节装置，可提供一个取出部件或者可并联提供多个取出部件。考虑到取出多个靶向物质，优选提供多个并联的取出部件。

[0065] 不特别限制气体回收装置，只要气体回收装置为能做到以下的装置即可：从由超临界流体的超临界状态释放的流动相回收形成超临界流体作为气体的组分，和将已回收的气体作为超临界流体的原料供应至流动相形成装置。气体回收装置可例如由气体回收管和回收气-液分离器组成，气体回收管将取出部件和流动相形成装置连接在一起，回收气-液分离器用于将气相和液相从在气体回收管中流动的流体中分离。

[0066] 回收气-液分离器的实例包括旋风器和在气体的流动通道中具有用于从已回收的气体中吸收溶剂的吸收溶液或用于吸收溶剂的固体吸收剂的装置。

[0067] 当本发明的超临界流体色谱法设备包括气体回收装置时，可将已回收的气体再循环，用于为流动相形成超临界流体。在这种情况下，当待供应至流动相形成装置的已回收的气体的压力高于待供应至流动相形成装置的新鲜气体的压力时，优选将已回收的气体供应至流动相形成装置，考虑到提高已回收的气体再循环的效率，比起新鲜的气体，对已回收的气体给予较高的优先权。如下可进行已回收的气体的这种供应，例如，将用于新鲜气体的供应源与流动相形成装置通过比如调节器的装置连接，以在适当的压力(初始压力)下供应新鲜气体。

[0068] 以下将描述用于本发明的一个实施方案的超临界流体色谱法设备的结构。

[0069] 如图1所示，用于该实施方案的超临界流体色谱法设备包括：储气筒1，其填充具有高压力的二氧化碳；换热器2，其用于冷却由储气筒1供应的二氧化碳，以将二氧化碳转化为液化气体；高压泵3，其用于定量泵送由换热器2形成的液化气体；溶剂储罐4，其用于接受溶剂；高压泵5，其用于定量将溶剂从溶剂储罐4供应至通过高压泵3泵送的液化气体；和换热器6，其用于加热含有液化气体和溶剂的混合流体，以将混合流体中的液化气体转化成为超临界流体。储气筒1为新鲜气体的供应源。从换热器2至换热器6范围的元件相应于流动相形成装置。

[0070] 此外，超临界流体色谱法设备包括：样品注射装置7，其用于在形成的流动相中注射含有靶向物质(例如，光学异构体)的样品；柱8，其用于分离已注射的样品中的靶向物质；检测器9，其用于检测通过柱8的流动相中的物质；和背压阀10，其用于保持在从高压泵3到检测器9范围内的系统中的压力在预定的压力。背压阀10相应于压力调节装置。注意到，管14为用于通过样品注射装置7的中间介导将换热器6与柱8连接的管。管14相应于流动相的流动通道。

[0071] 此外，超临界流体色谱法设备包括：多个气-液分离器11，各自用于使通过背压阀10的流动相经受气-液分离；多个第一储罐12，各自用于接受通过各气-液分离器11分离的液相；和多个第二储罐13，其分别相应地与第一储罐12连接。从气-液分离器11到第二储罐13范围的元件相应于取出部件。

[0072] 此外，超临界流体色谱法设备包括：气体回收管15，其用于将各气-液分离器11与换热器2连接；气-液分离器16，其用于将液体与在气体回收管15中流动的已回收的气体分离；第三储罐17，其用于接受通过气-液分离器16分离的液相；和第四储罐18，其与第三储罐17连接。气-液分离器16相应于回收气-液分离器。从气体回收管15到第四储罐18范围的元件相应于气体回收装置。

[0073] 此外，本发明的超临界流体色谱法设备包括：调节器19，其用于以预定的压力从储气筒1供应二氧化碳气体；止回阀20，其用于防止气体从换热器2回流至储气筒1；缓冲储罐21，其用于接受通过换热器2形成的液化气体；两通阀22，各自在背压阀10和各气-液分离器11之间提供；两通阀23，各自分别在第一储罐12和第二储罐13之间提供；止回阀26，其用于防止气体回流至气-液分离器11；和止回阀27，其在第三储罐17和第四储罐18之间提供。

[0074] 提供溶剂注射装置来改变本发明的流动相的组成，该溶剂注射装置包括溶剂储罐30、高压泵31、流动通道转换阀32和优选的环路管道33。溶剂注射装置以特定的时间安排通过对转换阀32的切换操作将溶剂注射装置中的溶剂注射至柱中。随后，在注射溶剂之后立刻切换转换阀32，以返回至初始流动通道状态。为了通过对转换阀的操作立刻注射溶剂，通过高压泵31将溶剂注射装置的内部保持在高压力下。由于环路管道33改进样品的注射定量性，优选提供环路管道33。

[0075] 接着，描述通过超临界流体色谱法设备分离靶向物质。

[0076] 首先，在适当的初始压力下将二氧化碳从储气筒1供应至换热器2。通过换热器2冷却的二氧化碳转化为液化气体，并在缓冲储罐21中接受。在缓冲储罐21中接受的液化气体通过高压泵3定量泵送，并供应至换热器6，同时加压至预定的压力(例如，临界压力)，该预定的压力通过背压阀10确定。

[0077] 同时，通过高压泵5将溶剂(例如，乙醇)从溶剂储罐4定量泵送至液化气体。在供应至换热器6之前，溶剂加入液化气体以与液化气体混合。将含有液化气体和溶剂的混合流体供应至换热器6，以加热至预定的温度(例如，临界温度或柱8的预置温度)。由于该加热，混合流体中的液化气体转化为超临界流体，并形成含有超临界流体和溶剂的流动相。

[0078] 将含有靶向物质(例如，光学异构体)的样品注射至形成的流动相中，从样品注射装置7注射至管14。

[0079] 将其中注射了样品的流动相进料至柱8，用于接受根据靶向物质选择的分离剂(例如，多糖衍生物)。在柱8中，靶向物质从样品中分离。通过检测器9检测靶向物质。当检测器9检测靶向物质之一时，两通阀22中任意之一打开，而将另外的两通阀22关闭。将含有靶向物质的流动相进料至背压阀10。

[0080] 在此处通过检测器9检测靶向物质。在从检测到在靶向物质中最后从柱中洗脱的靶向物质之一的峰到注射下一个样品的时间段期间，操作溶剂注射装置的流动通道转换阀32，将保持在环路管道33中的加压的溶剂立刻注射至柱中。在注射溶剂后，切换转换阀32，将流动通道返回至流动相的顺序流动通道。

[0081] 接着，在检测到的峰拖尾减少之后，将样品从样品注射装置7再注射至管14。转换阀32和样品注射装置7的控制还可通过单独提供的控制系统以恒定的间隔自动进行。

[0082] 通过背压阀10的流动相由通过背压阀10进行的压力调节释放，将其减压，并供应至预定的气-液分离器11之一。使进料至预定的气-液分离器11之一的流动相经受气-液分离。分离形成超临界流体的二氧化碳作为气相，分离靶向物质和溶剂作为液相。液相在第一储罐12之一中接受，并进一步在具有低压力的第二储罐13之一中接受。将在第二储罐13中接受的液相从第二储罐13中取出。通过公知的方法将溶剂和靶向物质从液相中分离，比如真空浓缩和真空蒸馏，可得到靶向物质。溶剂可按需纯化，并作为流动相再循环。

[0083] 通过止回阀26之一的中间介导，将通过预定的气-液分离器11之一分离的二氧化碳进料至气-液分离器16。

[0084] 当不是已检测到的靶向物质的靶向物质之一被检测器9检测到时，将相应于用于已检测到的靶向物质的预定的气-液分离器11之一的两通阀22之一关闭。接着，将相应于气-液分离器11的另外之一的两通阀22的另外之一打开，使含有不是已检测到的靶向物质的靶向物质之一的流动相通过气-液分离器11的另外之一类似地经受气-液分离。

[0085] 将进料至气-液分离器16的二氧化碳(已回收的气体)通过气-液分离器16经受气-液分离。将包含在已回收的气体中的微量的液相(溶剂)在第三储罐17中接受，随后在第四储罐18中接受，将其丢弃。

[0086] 将通过气-液分离器16纯化的已回收的气体通过气体回收管15进料至换热器2。当已回收的气体的压力高于通过调节器19确定的初始压力时，将已回收的气体供应至换热器2并液化。当已回收的气体的压力低于通过调节器19确定的初始压力时，将新鲜的二氧化碳气体从储气筒1供应至换热器2并液化。

[0087] 注意到，在该实施方案中，通过管将第二储罐13和气-液分离器16彼此连接，可进一步回收在第二储罐13中从液相中排放的二氧化碳。使用该结构，待用作超临界流体的原料的气体的回收率提高，考虑到降低靶向物质的制造成本，这种结构进一步特别有效。

[0088] 实施例

[0089] 以下参考实施例来详细描述本发明的效果。然而，本发明不局限于以下所述的实施例。

[0090] (实施例1)

[0091] 使用在图1中举例说明的超临界流体色谱法设备，在以下条件下将氟比洛芬从含有氟比洛芬的样品中分离。

[0092] 当在注射含有氟比洛芬的样品之后过去6.4分钟时，通过切换转换阀立刻注射100μL乙醇，将阀返回至其初始状态。在这种情况下，设备具有死体积，因此，当7.3分钟过去后，乙醇进行洗脱。

[0093] 由于注射乙醇，迅速地提取峰组分，因此，峰变尖，并且减少拖尾加速1分钟。峰的状态示于图2和图3。

[0094] 柱：CHIRALPAK AD-H(0.46×25cm)，由DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD制造。

[0095] 流动相：CO2/EtOH＝95/5

[0096] 流动相的流速：4mL/分钟

[0097] 温度：25℃

[0098] 压力：10MPa

[0099] 检测：290nm

[0100] 样品：40μL含有氟比洛芬的乙醇溶液(250mg/mL，在EtOH中)

[0101] 注射的溶剂：EtOH

[0102] 溶剂的注射量：100μL

[0103] (实施例2-(1))

[0104] 与实施例1类似，使用在图1中举例说明的超临界流体色谱法设备，在以下条件下，将苯偶姻乙醚从含有苯偶姻乙醚的样品中分离。

[0105] 当在注射含有苯偶姻乙醚的样品之后过去3.2分钟时，通过切换转换阀立刻注射300μL四氢呋喃(THF)，将阀返回至其初始状态。在这种情况下，设备具有死体积，因此，当
4.1分钟过去后，THF进行洗脱。

[0106] 由于注射THF，迅速地提取峰组分，因此，峰变尖，并且减少拖尾加速1分钟。峰的状态示于图4和图5。

[0107] 柱：CHIRALPAK IA(0.46×25cm)，由DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD制造。

[0108] 流动相：CO2/THF＝90/10

[0109] 流动相的流速：4mL/分钟

[0110] 温度：25℃

[0111] 压力：10MPa

[0112] 检测：360nm

[0113] 样品：40μL含有苯偶姻乙醚的乙醇溶液(500mg/mL，在EtOH中)[0114] 注射的溶剂：THF

[0115] 溶剂的注射量：300μL

[0116] (实施例2-(2))

[0117] 与实施例2-(1)类似，不同之处在于用甲醇代替THF作为注射的溶剂，将苯偶姻乙醚从含有苯偶姻乙醚的样品中分离。

[0118] 由于注射甲醇，迅速地提取峰组分，因此，峰变尖，并且减少拖尾加速2分钟。峰的状态示于图4和图5。

[0119] (参考实施例1)

[0120] 将根据本发明改变流动相的组成的方法应用于高效液相色谱法(HPLC)，在以下条件下，将反式-均二苯乙烯氧化物(t-SO)从含有t-SO的样品中分离。

[0121] 当在注射含有t-SO的样品之后过去5.8分钟时，通过切换转换阀立刻注射30μL正己烷/2-丙醇(IPA)，将阀返回至其初始状态。在这种情况下，设备具有死体积，因此，当13.5分钟过去后，THF进行洗脱。

[0122] 在HPLC中，在注射IPA后，柱的内部环境返回至其初始状态耗时长，并且在顺序注射下一个样品时分离受到影响。峰的状态示于图6。

[0123] 柱：CHIRALPAK AS-H(0.46×25cm)，由DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES，LTD制造。

[0124] 流动相：正己烷/IPA＝95/5

[0125] 流动相的流速：0.4mL/分钟

[0126] 温度：25℃

[0127] 压力：正常压力

[0128] 检测：254nm

[0129] 样品：30μL含有t-SO的MP溶液(3mg/mL，在MP中)

[0130] 注射的溶剂：IPA

[0131] 溶剂的注射量：30μL

[0132] 附图标记的描述

[0133]1 储气筒
2，6 换热器
3，5，31 高压泵
4，30 溶剂储罐
7 样品注射装置
8 柱
9 检测器
10 背压阀
11，16 气-液分离器
12 第一储罐
13 第二储罐
14 管
15 气体回收管
17 第三储罐
18 第四储罐
19 调节器
20，26 止回阀
21 缓冲储罐
22，23 两通阀
32 转换阀
33 环路管道

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