杯[8]芳烃硼酸衍生物及制备、含有该衍生物的复合材料及
应用
技术领域
[0001] 本
发明涉及一种识别D-
葡萄糖的复合材料,尤其是涉及一种杯[8]芳烃硼酸衍生物、衍生物-多壁
碳纳米管电极材料的制备方法及其应用。
背景技术
[0002] 葡萄糖是动
植物体内一种重要的碳
水化合物,在生命活动过程中起着重要的作用,也是人体不可或缺的
能源和生理活性物质。葡萄糖的检测在临床诊断、食品检测、生命科学等诸多领域具有极其重要的应用。作为贮藏
能量的物质,糖类可以被
氧化产生能量来驱动代谢过程,也可以转化为
蛋白质和脂肪等其他生物分子。葡萄糖的检测将会是一个长期课题。
[0003] 葡萄糖
传感器的发展经历了基于酶的葡萄糖传感器和非酶葡萄糖传感器,尽管基于酶的葡萄糖传感器经历了三代的不断演变,但是它们都摆脱不了酶本身受
温度、pH、湿度和氧气含量的影响而不稳定这一缺点。另外,酶的价格昂贵,使得基于酶的葡萄糖传感器始终面临着成本这一问题。基于以上因素,非酶葡萄糖传感器的发展得到了极大的关注。文献中已经大量报道了一系列的各种金属及金属氧化物、双金属
纳米材料、
合金和金属/金属氧化物-
碳纳米管复合材料非酶型葡萄糖传感器。然而将杯芳烃-碳纳米管复合材料做成葡萄糖传感器在文献中还未报道。
[0004] 中国
专利CN 103864830A公开了杯芳烃硼酸衍生物、制备方法及其应用。以2-甲酰基苯硼酸为辅配体;以5,17-二-胺基-25,26,27,28-四羟基杯[4]芳烃为主配体。所制备杯芳烃硼酸衍生物对D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖和D-半乳糖都具有结合作用与识别作用。通过
荧光光谱法可知衍生物对四种单糖均有识别作用,但是这种方法检出限不高,线性相关系数不是很高,需要复杂的预处理步骤,所用
试剂量较大。
发明内容
[0005] 本发明的目的就是为了克服上述
现有技术存在的
缺陷而提供一种杯[8]芳烃硼酸衍生物。
[0006] 本发明的另一个目的是提供杯[8]芳烃硼酸衍生物的制备方法。
[0007] 本发明的另一个目的是制备得到杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-
多壁碳纳米管电极材料。
[0008] 本发明的另一个目的是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在识别D-葡萄糖中的应用。
[0009] 本发明的目的可以通过以下技术方案来实现:
[0010] 杯[8]芳烃硼酸衍生物,化学式为C146H202O20N16B6,以2-甲酰基苯硼酸为辅配体,杯[8]芳烃四酰肼衍生物为主配体,结构式如下:
[0011]
[0012] 杯[8]芳烃硼酸衍生物的制备方法,采用以下步骤:
[0013] (1)合成杯[8]芳烃四酰肼衍生物,得到白色粉末;
[0014] (2)将步骤(1)得到的粗产品和2-甲酰基苯硼酸按摩尔比为1:10混合后溶于无水甲醇和
冰醋酸的混合
溶剂中,水浴加热,
温度控制在60~70℃,在搅拌下回流7~8h后,旋转
蒸发除去甲醇和醋酸,得浅黄色粉末;
[0015] (3)向步骤(2)所得产物中加入无水甲醇和硼氢化钠,温度控制在40~50℃,搅拌回流6~7h,再在室温下搅拌反应10h,在自然环境下挥发甲醇和水,得粉末状浅黄色粗产物;
[0016] (4)将步骤(3)处理得到的粗产品用
硅胶层析柱分离,然后
旋转蒸发洗脱剂,得到粉末状产物即为杯[8]芳烃硼酸衍生物。
[0017] 步骤(1)具体采用以下步骤:在
甲苯和甲醇混合溶剂中加入杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼水溶液,杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼的摩尔比为1:34,搅拌回流12h,减压蒸出溶剂,干燥后得到的白色粉末即为杯[8]芳烃四酰肼衍生物,产率大概为60%。
[0018] 步骤(3)中加入的硼氢化钠与杯[8]芳烃四酰肼衍生物的摩尔比为4:25。
[0019] 含有杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料,采用以下方法制备得到:
[0020] (1)将多壁碳纳米管浓
硫酸和浓
硝酸的混酸中,加热回流6小时,温度控制在80℃,离心分离倾析去除上层液体,得到沉淀物,在用去离子水反复洗涤,离心直至上层清液pH值接近中性,在50℃的条件下,12h,烘干得到
酸化后的碳纳米管;
[0021] (2)向酸化后的碳纳米管中加入二氯亚砜,80℃下,回流24h,悬蒸除去二氯亚砜,得到酰氯化的多壁碳纳米管;
[0022] (3)利用N,N-二甲基甲酰胺溶解杯[8]芳烃硼酸衍生物,然后加入酰氯化的多壁碳纳米管,在60-70℃,回流24小时,得到分散性很好的黑色颗粒悬浊液,依次用四氢呋喃、食盐水、二次蒸馏水洗涤除去未反应的苯硼酸,离心分离,烘干得到黑色粉末状产物,即为杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料。
[0023] 步骤(1)中浓硫酸和浓硝酸的体积比为1:3。
[0024] 所述的杯[8]芳烃硼酸衍生物与酰氯化的多壁碳纳米管的重量比为10:9。
[0025] 该复合材料对D-葡萄糖具有选择识别作用。将杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料溶于
乙醇当中,制成修饰液,采用滴涂法,制成修饰电极,采用循环
伏安法,得到修饰电极在D-葡萄糖的循环
伏安图,从循环伏安图中可以看出有明显的氧化还原峰出现,说明杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料对D-葡萄糖有识别作用。
[0026] 与现有技术相比,本发明制备得到的杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料能够与D-葡萄糖发生结合,并有识别D-葡萄糖的作用。葡萄糖和杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管结合,由于杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管上的苯硼酸基团可以和糖类葡萄糖上的羟基反应,形成五元环和六元环的苯硼酸酯,而出现氧化还原峰,另外,根据循环伏安图出峰
位置的不同,还可以区分出D-葡糖糖和L-葡萄糖。
附图说明
[0027] 图1是采用的多壁碳纳米管的SEM图;
[0028] 图2是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料的SEM图;
[0029] 图3是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物、多壁碳纳米管,杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料的XRD图;
[0030] 图4是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,对比不同电极与D-葡萄糖作用的循环伏安图;
[0031] 图5是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同修试剂用量的影响图;
[0032] 图6是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同扫描速度的影响图;
[0033] 图7是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同pH的影响图。
具体实施方式
[0034] 下面结合附图和具体
实施例对本发明进行详细说明。
[0035] 实施例1
[0036] 杯[8]芳烃苯硼酸衍生物的合成
[0037] 1.于1000mL三颈瓶中加入对叔丁基
苯酚(5g,33mmol),多聚甲
醛(1.75g,55mmol),0.1mL(10mol/L)的NaOH的水溶液,和30mL二甲苯,加热搅拌,迅速升温,并将反应温度控制在135~140℃左右。反应物溶解,约5min后反应物变的透明清亮,成为均相,逐渐变粘,反应液中不断有气泡产生,分水器内不断有水分出,约4~4.5h后,反应溶液变成浅橙色,先有白色固体生成,后变成黄色,停止加热,冷却至室温。过滤,滤液依次用2mL甲苯、20mL乙醚、
20mL丙
酮和待20mL蒸馏水洗涤,干燥,烘干得白色粉末状粗产品。粗产品用氯仿重结晶,得白色晶体3g。产率:72%。
[0038] 2.称取步骤(1)产品(0.3g,0.23mmol),碳酸
钾(1g)、无水丙酮(8mL),0.23g碘化钾,一定量的氯乙酸乙酯,加入50mL三颈瓶中,控制
超声波范围,对体系进行加热回流数分钟后停止反应,冷却至室温,抽滤,将滤液旋转蒸发,得少许油状液体,以95%乙醇重结晶得白色固体产品。
[0039] 3.称取步骤(2)产品(1.9840g,1mmol)溶于50mL甲醇和50mL甲苯的混合溶液中,加入20mL水合肼水溶液(含量85%),搅拌回流12h。减压蒸出溶剂,干燥后得白色粉末。产率60%。
[0040] 4.三颈烧瓶中加入步骤(3)所得产品(1.56g,0.8333mmol),加入2-甲酰基苯硼酸(1.2510g,8.34mmol),再加入100mL无水甲醇和1.5mL冰醋酸,加热回流7-8h后,旋转蒸发出去甲醇和冰醋酸。得到浅黄色粉末,再加入120mL无水乙醇和约6倍于理想产物的硼氢化钠(NaBH4)(0.19g,5mmol),温度控制在40~50℃,搅拌回流6~7h,再在室温下搅拌反应10h,取出在自然环境下挥发甲醇和水,得黄色粉末状粗产物。产率约65%。
[0041] 5.将步骤(4)处理得到的粗产品用硅胶层析柱分离,用甲醇/乙酸乙酯(5:2,v/v)洗脱,可得产物0.2356g。产率为50.8%。1H-NMR(CDCl3,TMS,400MHz):
[0042] 6.82~7.16(m,40H,Ar-H)
[0043] 4.21(s,16H,Ar-O-CH2-)
[0044] 3.89(s,12H,Ar-CH2-N-)
[0045] 3.61(d,16H,Ar-CH2-Ar)
[0046] 3.20(s,16H,Ar-O-C-CH2-N-)
[0047] 2.21(s,12H,Ar-B-OH)
[0048] 2.00(s,18H,Ar-C-NH-NH-)
[0049] 0.88~1.25(s,72H,-C(CH3)3)
[0050] MALDI-MS for a1:calcd.m/z=2565.85(M+H)+
[0051]
[0052] 实施例2
[0053] 杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管的合成
[0054] 1.称取0.15g多壁碳纳米管(SEM图如图1所示)在10mL浓硫酸和30mL浓硝酸(体积比1:3)的混酸中,加热回流6小时,温度控制在80℃左右,离心分离倾析去除上层液体,得到沉淀物,在用去离子水反复洗涤,离心直至上层清液pH值接近中性,在50℃的条件下,12h,烘干得到酸化后的碳纳米管MWCNTs-COOH。
[0055] 2.将步骤(1)所得产物加入50mL二氯亚砜,80℃下,回流24h,悬蒸除去二氯亚砜,得到酰氯化的多壁碳纳米管MWCNTs-COCl。
[0056] 3.用5mL N,N-二甲基甲酰胺溶解0.1986g实施例1步骤(5)所得物质,加入步骤(2)反应中,在60-70℃,回流24小时,得到分散性很好的黑色颗粒悬浊液,依次用四氢呋喃、食盐水、二次蒸馏水洗涤除去未反应的苯硼酸,离心分离,烘干得到0.11g黑色粉末状产物,即为杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料,SEM图如图2所示。图3是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物、多壁碳纳米管,杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料的XRD图。从图中可以看出25.5°是多壁碳纳米管的特征峰,31°是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物的特征峰。二者结合后,在26°和30.8°两处都出现了形状相似的特征峰,说明杯[8]芳烃苯硼酸衍生物已经成功接入多壁碳纳米管上。
[0057] 实施例3
[0058] 杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料与D-葡萄糖的电化学传感实验:
[0059] 实验仪器:CHI660C电化学分析仪
[0060] 支持
电解液:配制0.1mol/L的
磷酸盐缓冲溶液,根据需要调到所需pH得到支持电解液。用所配得的缓冲溶液配制0.01mol/L的D-葡萄糖糖溶液,实验时,根据需要用稀释到所需浓度。
[0061] 实验方法:循化伏安法
[0062] 仪器参数:高电位:0.6V,低电位:-1.2V,扫描速度0.1mv/s,灵敏度10-4[0063] 修饰电极的制备:依次用1-6号的金相
砂纸将玻碳电极表面
抛光,然后在鹿皮上依次用0.3μm、0.05μm的三氧化二
铝粉末抛光呈镜面,每次抛光后分别用无水乙醇和去离子水超声清洗30秒。在0.5-1.0mol/L的硫
酸溶液中进行活化处理,用
循环伏安法反复扫描直至得到稳定的循环福安图为止,扫描速率为100mV/s,扫描范围为-1.0-1.0V。
[0064] 称取5mg杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管,分散在10mL无水乙醇中,超声2h,得到0.5mg/L的两瓶均一稳定的黑色悬浊液。采用滴涂法修饰电极。用微量进样器吸取上述悬浊液,滴涂在玻碳电极的表面,在空气中挥发晾干。每次滴涂电极前,都需要将修饰液再次超声处理30min作分散处理。
[0065] 结果表明:杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管修饰电极能够与D-葡萄糖发生识别作用。
[0066] 图4是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,对比不同电极与D-葡萄糖作用的循环伏安图,从图中可以看出,对在同一条件下,三种电极的循环伏安图差异较大。裸玻碳电极在PBS缓冲溶液中的
电流信号几乎不可测;杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极在PBS缓冲溶液中,杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极在加入D-葡萄糖的PBS缓冲溶液中溶液中上,在循环伏安图中可以观察到一个明显的还原峰。这是因为杯[8]芳烃苯硼酸衍生物与葡萄糖结合形成五元或者六元环酯,使得杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极对葡萄糖的
吸附能
力大大的增加,大大提到了识别的灵敏度。
[0067] 图5是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同修试剂用量的影响图,当修饰剂用量少于20μL时,峰电流随修饰剂用量的增加而显著增大,这是因为增加修饰剂的用量,电极表面的杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管复合物逐渐被铺满,导致
导电性增加,
电信号被放大,同时使得催化活性位点随之增加,富集效率提高,两者共同作用导致峰电流增大。当修饰剂用量超过20μL之后,峰电流反而逐渐降低,背景电流变得较大,重现性变差。这是因为当修饰剂超过一定的量后,电极表面修饰膜太厚,不易固定在电极表面,容易在实验过程中发生脱落,电极的
稳定性也会下降。因此,本实验修饰剂用量选用20μL。
[0068] 图6是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同扫描速度的影响图,当扫描速度从50mV/s逐渐增加到300mV/s时,还原峰和氧化峰都逐渐增大,其还原峰电流Ipc和氧化峰电流Ipa与扫描速度的平方根v1/2呈良好的线性关系,说明该电极反应主要受扩散控制。
[0069] 图7是杯[8]芳烃苯硼酸衍生物-多壁碳纳米管电极材料在Na2HPO4-NaH2PO4离子缓冲剂溶液中,不同pH的影响图,从图可以看出当中性接近弱
碱性的条件下,峰电流最大;在酸性和碱性条件下,峰电流逐渐减小。并且有略微的偏移。人体血液当中的pH在7.35~7.45的范围内,由此说明这种材料可以再人体所具有的pH范围内发挥作用。
[0070] 实施例4
[0071] 杯[8]芳烃硼酸衍生物,化学式为C146H202O20N16B6,以2-甲酰基苯硼酸为辅配体,杯[8]芳烃四酰肼衍生物为主配体,结构式如下:
[0072]
[0073] 杯[8]芳烃硼酸衍生物的制备方法,采用以下步骤:
[0074] (1)在甲苯和甲醇混合溶剂中加入杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼水溶液,杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼的摩尔比为1:34,搅拌回流12h,减压蒸出溶剂,干燥后得到的白色粉末即为杯[8]芳烃四酰肼衍生物,产率大概为60%;
[0075] (2)将步骤(1)得到的粗产品和2-甲酰基苯硼酸按摩尔比为1:10混合后溶于无水甲醇和冰醋酸的混合溶剂中,水浴加热,温度控制在60℃,在搅拌下回流7h后,旋转蒸发除去甲醇和醋酸,得浅黄色粉末;
[0076] (3)向步骤(2)所得产物中加入无水甲醇和硼氢化钠,加入的硼氢化钠与杯[8]芳烃四酰肼衍生物的摩尔比为4:25,温度控制在40℃,搅拌回流6h,再在室温下搅拌反应10h,在自然环境下挥发甲醇和水,得粉末状浅黄色粗产物;
[0077] (4)将步骤(3)处理得到的粗产品用硅胶层析柱分离,然后旋转蒸发洗脱剂,得到粉末状产物即为杯[8]芳烃硼酸衍生物。
[0078] 以制备得到的杯[8]芳烃硼酸衍生物为原料制备含有杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料,具体采用以下方法:
[0079] (1)将多壁碳纳米管浓硫酸和浓硝酸的混酸中(浓硫酸和浓硝酸的体积比为1:3),加热回流6小时,温度控制在80℃,离心分离倾析去除上层液体,得到沉淀物,在用去离子水反复洗涤,离心直至上层清液pH值接近中性,在50℃的条件下,12h,烘干得到酸化后的碳纳米管;
[0080] (2)向酸化后的碳纳米管中加入二氯亚砜,80℃下,回流24h,悬蒸除去二氯亚砜,得到酰氯化的多壁碳纳米管;
[0081] (3)利用N,N-二甲基甲酰胺溶解杯[8]芳烃硼酸衍生物,然后加入酰氯化的多壁碳纳米管,杯[8]芳烃硼酸衍生物与酰氯化的多壁碳纳米管的重量比为10:9,在60℃,回流24小时,得到分散性很好的黑色颗粒悬浊液,依次用四氢呋喃、食盐水、二次蒸馏水洗涤除去未反应的苯硼酸,离心分离,烘干得到黑色粉末状产物,即为杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料。
[0082] 该复合材料对D-葡萄糖具有选择识别作用。将杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料溶于乙醇当中,制成修饰液,采用滴涂法,制成修饰电极,采用循环伏安法,得到修饰电极在D-葡萄糖的循环伏安图,从循环伏安图中可以看出有明显的氧化还原峰出现,说明杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料对D-葡萄糖有识别作用。
[0083] 实施例5
[0084] 杯[8]芳烃硼酸衍生物,化学式为C146H202O20N16B6,以2-甲酰基苯硼酸为辅配体,杯[8]芳烃四酰肼衍生物为主配体,结构式如下:
[0085]
[0086] 杯[8]芳烃硼酸衍生物的制备方法,采用以下步骤:
[0087] (1)在甲苯和甲醇混合溶剂中加入杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼水溶液,杯[8]四乙酸乙酯衍生物和水合肼的摩尔比为1:34,搅拌回流12h,减压蒸出溶剂,干燥后得到的白色粉末即为杯[8]芳烃四酰肼衍生物,产率大概为60%;
[0088] (2)将步骤(1)得到的粗产品和2-甲酰基苯硼酸按摩尔比为1:10混合后溶于无水甲醇和冰醋酸的混合溶剂中,水浴加热,温度控制在70℃,在搅拌下回流8h后,旋转蒸发除去甲醇和醋酸,得浅黄色粉末;
[0089] (3)向步骤(2)所得产物中加入无水甲醇和硼氢化钠,加入的硼氢化钠与杯[8]芳烃四酰肼衍生物的摩尔比为4:25,温度控制在50℃,搅拌回流7h,再在室温下搅拌反应10h,在自然环境下挥发甲醇和水,得粉末状浅黄色粗产物;
[0090] (4)将步骤(3)处理得到的粗产品用硅胶层析柱分离,然后旋转蒸发洗脱剂,得到粉末状产物即为杯[8]芳烃硼酸衍生物。
[0091] 以制备得到的杯[8]芳烃硼酸衍生物为原料制备含有杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料,具体采用以下方法:
[0092] (1)将多壁碳纳米管浓硫酸和浓硝酸的混酸中(浓硫酸和浓硝酸的体积比为1:3),加热回流6小时,温度控制在80℃,离心分离倾析去除上层液体,得到沉淀物,在用去离子水反复洗涤,离心直至上层清液pH值接近中性,在50℃的条件下,12h,烘干得到酸化后的碳纳米管;
[0093] (2)向酸化后的碳纳米管中加入二氯亚砜,80℃下,回流24h,悬蒸除去二氯亚砜,得到酰氯化的多壁碳纳米管;
[0094] (3)利用N,N-二甲基甲酰胺溶解杯[8]芳烃硼酸衍生物,然后加入酰氯化的多壁碳纳米管,杯[8]芳烃硼酸衍生物与酰氯化的多壁碳纳米管的重量比为10:9,在70℃,回流24小时,得到分散性很好的黑色颗粒悬浊液,依次用四氢呋喃、食盐水、二次蒸馏水洗涤除去未反应的苯硼酸,离心分离,烘干得到黑色粉末状产物,即为杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料。
[0095] 该复合材料对D-葡萄糖具有选择识别作用。将杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料溶于乙醇当中,制成修饰液,采用滴涂法,制成修饰电极,采用循环伏安法,得到修饰电极在D-葡萄糖的循环伏安图,从循环伏安图中可以看出有明显的氧化还原峰出现,说明杯[8]芳烃硼酸衍生物的多壁碳纳米管复合材料对D-葡萄糖有识别作用。