药物递送组合物及其用途
阅读：584发布：2022-02-24
专利汇可以提供药物递送组合物及其用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 申请 提供了因此，移性 肿瘤 的药物递送组合物和装置。例如，提供了一种药物递送装置，所述药物递送装置包含携带一种或多种抗癌 治疗 剂的可 生物 降解 支架 (scaffold)，所述抗癌治疗剂激活先天免疫系统(例如，STING激动剂)和/或适应性免疫系统(例如，抗-PD-1 抗体 )。所述组合物和装置可以包含细胞因子(例如，IL-15超级激动剂)。可以将药物递送装置植入 切除 肿瘤的空隙体积中以防止肿瘤再生和肿瘤转移。本申请还提供了制备药物递送组合物和装置的方法以及含有提供组合物和装置的材料的 试剂 盒 。，下面是药物递送组合物及其用途专利的具体信息内容。
1.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料和先天免疫应答的激活剂。
2.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和细胞因子。
3.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和适应性免疫应答的激活剂。
4.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料和细胞因子。
5.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料、先天免疫应答的激活剂、细胞因子和适应性免疫应答的激活剂。
6.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料和适应性免疫应答的激活剂。
7.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物包含生物材料、细胞因子和适应性免疫应答的激活剂。
8.根据权利要求1所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子。
9.根据权利要求1所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和TLR7和/或TLR8激动剂。
10.根据权利要求1所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和TLR7激动剂。
11.根据权利要求1所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和TLR8激动剂。
12.根据权利要求1所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和NLR激动剂。
13.根据权利要求4所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和IL-15超激动剂。
14.根据权利要求1、2或4中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-15超激动剂。
15.根据权利要求1、2或4中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-15超激动剂。
16.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-PD-1抗体。
17.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和激动剂抗-CD137抗体。
18.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
19.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
20.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
21.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR3激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
22.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
23.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
24.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-CTLA-4抗体。
25.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
26.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
27.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-PD-1抗体。
28.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
29.根据权利要求1、2或4中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、NLR激动剂和IL-15超激动剂。
30.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、NLR激动剂和抗-CTLA-4抗体。
31.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
32.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-CTLA-4抗体。
33.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
34.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
35.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、STING激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
36.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
37.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、STING激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
38.根据权利要求1、3或6中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
39.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和激动剂抗-CD137抗体。
40.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和抗-CTLA-4抗体。
41.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶和抗-PD-1抗体。
42.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
43.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
44.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
45.根据权利要求6所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
46.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述生物材料包括透明质酸、藻酸盐、壳聚糖、甲壳素、硫酸软骨素、葡聚糖、明胶、胶原蛋白、淀粉、纤维素、多糖、纤维蛋白、乙烯-乙酸乙烯酯(EVA)、聚(乳酸-共-乙醇)酸(PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乙二醇(PEG)、PEG二丙烯酸酯(PEGDA)、含二硫化物的PEGDA(PEGSSDA)、PEG二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)、聚二恶烷酮(PDO)、聚羟基丁酸酯(PHB)、聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)(pHEMA)、聚己内酯(PCL)、聚(β-氨基酯)(PBAE)、聚(酯酰胺)、聚(丙二醇)(PPG)、聚(天冬氨酸)、聚(谷氨酸)、聚(富马酸丙二醇酯)(PPF)、聚(癸二酸酐)(PSA)、聚(三亚甲基碳酸酯)(PTMC)、聚(脱氨基酪氨酸基酪氨酸烷基酯碳酸酯)(PDTE)、聚[双(三氟乙氧基)磷腈]、聚甲醛、单壁碳纳米管、聚磷腈、聚酐、聚(N-乙烯基-2-吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(丙烯酸)(PAA)、聚(甲基丙烯酸)(PMA)、聚缩醛、聚(α酯)、聚(原酸酯)、聚磷酸酯、聚氨酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚羟基脂肪酸酯、其衍生物或其组合。
47.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述生物材料是水凝胶。
48.根据权利要求8-45或47中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述水凝胶包含透明质酸。
49.根据权利要求48所述的药物递送组合物，其中所述透明质酸包含巯基修饰的透明质酸和交联剂。
50.根据权利要求8-45或47中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述水凝胶包含藻酸盐。
51.根据权利要求8-45或47中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述水凝胶包含交联的生物制剂。
52.根据权利要求8-45或47中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述水凝胶包含小分子。
53.根据权利要求4、6或7所述的药物递送组合物，还包含先天免疫应答的激活剂。
54.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是I型干扰素的有效诱导剂。
55.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、胞质DNA传感器(CDS)激动剂、Toll样受体(TLR)激动剂、C型凝集素受体(CLR)激动剂、NOD样受体(NLR)激动剂、RIG-I-样受体(RLR)激动剂或炎症体诱导物。
56.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Sp)、c-di-GMP、c-di-IMP、HSV-60、ISD、VACV-70、聚(dA:dT)、聚(dG:dC)、热灭活细菌、脂聚糖、脂多糖(LPS)、磷脂壁酸、肽聚糖(PGN)、合成脂蛋白、聚(A:U)、聚(I:C)、单磷酰脂质A(MPLA)、GSK1795091、G100、SD-101、MGN1703、CMP-001、鞭毛蛋白(FLA)、polyU、聚(dT)、嘎德莫特(gardiquimod)、咪喹莫特(imiquimod)(R837)、碱基类似物、腺嘌呤类似物、鸟嘌呤类似物、嘌呤衍生物、苯并氮杂卓类似物、呫吨酮类似物、咪唑喹啉、噻唑喹啉、洛索立宾、瑞喹莫德(R848)、dactolisib、sumanirole、R837、N1-甘氨酰基[4-((6-氨基-2-(丁基氨基)-8-羟基-9H-嘌呤-9-基)甲基)苯甲酰基]精胺(CL307)、CL264、CL097、CL075、MEDI9197、MEDI5083、次黄嘌呤、TL8-506、PF-4878691、艾沙托立宾(isatoribine)、SM-
324405、SM-324406、AZ12441970、AZ12443988、CpG寡核苷酸、细菌DNA、β葡聚糖、来自真菌和细菌细胞壁的β葡聚糖、γ-D-Glu-mDAP(iE-DAP)、iE-DAP衍生物、胞壁酰二肽(MDP)、MDP衍生物、5′三磷酸双链RNA、聚(dA:dT)、ATP、壳聚糖、硫酸铝钾、焦磷酸钙脱水物、二氧化硅、其衍生物或其药学上可接受的盐。
57.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Sp)、c-di-GMP、c-di-IMP、HSV-60、ISD、VACV-70、聚(dA:dT)、聚(dG:dC)、热灭活细菌、脂聚糖、脂多糖(LPS)、磷脂壁酸、肽聚糖(PGN)、合成脂蛋白、聚(A:U)、聚(I:C)、单磷酰脂质A(MPLA)、鞭毛蛋白(FLA)、polyU、聚(dT)、嘎德莫特(gardiquimod)、咪喹莫特(imiquimod)、洛索立宾、瑞喹莫德(R848)、CpG寡核苷酸、细菌DNA、β葡聚糖、来自真菌和细菌细胞壁的β葡聚糖、γ-D-Glu-mDAP(iE-DAP)、iE-DAP衍生物、胞壁酰二肽(MDP)、MDP衍生物、5′三磷酸双链RNA、聚(dA:dT)、ATP、壳聚糖、硫酸铝钾、焦磷酸钙脱水物、二氧化硅、聚(dA:dT)、FLA、MDP、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)、其衍生物或其药学上可接受的盐。
58.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-GMP、2′3′-c-di-GMP、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-GM(PS)
2(Rp,Sp)、c-di-IMP、瑞喹莫德、CpG寡核苷酸、聚肌苷：聚胞苷酸、其氟化衍生物、其O-甲基化衍生物或其药学上可接受的盐。
59.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP，或其药学上可接受的盐。
60.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)，或其药学上可接受的盐。
61.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是环二核苷酸。
62.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是cGAS激动剂。
63.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是TREX1抑制剂。
64.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是瑞喹莫德，或其药学上可接受的盐。
65.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)，或其药学上可接受的盐。
66.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述先天免疫应答的激活剂是咪唑喹啉。
67.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2superkine、IL-6、IL-7、IL-9、AM0010、IL-12、IL-15、IL-15超激动剂、ALT-803、NIZ985、IL-16、IL-18、IL-21、得尼考新(denenicokin)、IL-21超激动剂抗体、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、细胞因子融合、RG7461、RG7813或M9241。
68.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是趋化因子，其中所述趋化因子是CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL13、CXCL16或CX3CL1。
69.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是IL-15超激动剂。
70.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是干扰素α(IFN-α)。
71.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是干扰素β(IFN-β)。
72.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是干扰素γ(IFN-γ)。
73.根据权利要求2、4、5或7中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述细胞因子是IL-1β。
74.根据权利要求1-3、5或53中任意一项所述的药物递送组合物，还包含其他先天免疫应答的激活剂。
75.根据权利要求1、2或4中任意一项所述的药物递送组合物，还包含适应性免疫应答的激活剂。
76.根据权利要求3、5-7或75中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是生物制剂。
77.根据权利要求3、5-7、75或76中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是蛋白。
78.根据权利要求3、5-7、75或76中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是编码蛋白的核酸。
79.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体、抗-PD-L1抗体、抗-CTLA-4抗体、抗-TIM3抗体、抗-OX40抗体、抗-GITR抗体、抗-LAG-3抗体、抗-CD137抗体、抗-CD27抗体、抗-CD28抗体、抗-CD28H抗体、抗-CD30抗体、抗-CD39抗体、抗-CD40抗体、抗-CD47抗体、抗-CD48抗体、抗-CD70抗体、抗-CD73抗体、抗-CD96抗体、抗-CD160抗体、抗-CD200抗体、抗-CD244抗体、抗-ICOS抗体、抗-TNFRSF25抗体、抗-TMIGD2抗体、抗-DNAM1抗体、抗-BTLA抗体、抗-LIGHT抗体、抗-TIGIT抗体、抗-VISTA抗体、抗-HVEM抗体、抗-Siglec抗体、抗-GAL1抗体、抗-GAL3抗体、抗-GAL9抗体、抗-BTNL2(嗜乳脂蛋白)抗体、抗-B7-H3抗体、抗-B7-H4抗体、抗-B7-H5抗体、抗-B7-H6抗体、抗-KIR抗体、抗-LIR抗体、抗-ILT抗体、抗-MICA抗体、抗-MICB抗体、抗-NKG2D抗体、抗-NKG2A抗体、抗-TGFβ抗体、抗-TGFβR抗体、抗-CXCR4抗体、抗-CXCL12抗体、抗-CCL2抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-13抗体、抗-IL-23抗体、抗-磷脂酰丝氨酸抗体、抗-神经纤毛蛋白抗体、抗-GalCer抗体、抗-HER2抗体、抗-VEGFA抗体、抗-VEGFR抗体、抗-EGFR抗体、抗-Tie2抗体或其抗体片段。
80.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体、抗-PD-L1抗体、抗-CTLA-4抗体、抗-TIM3抗体、抗-OX40抗体、抗-GITR抗体、抗-LAG-3抗体、抗-CD137抗体、抗-CD27抗体、抗-CD28抗体、抗-CD28H抗体、抗-CD30抗体、抗-CD39抗体、抗-CD40抗体、抗-CD47抗体、抗-CD48抗体、抗-CD70抗体、抗-CD73抗体、抗-CD96抗体、抗-CD155抗体、抗-CD160抗体、抗-CD200抗体、抗-CD244抗体、抗-ICOS抗体、抗-TNFRSF25抗体、抗-TMIGD2抗体、抗-DNAM1抗体、抗-BTLA抗体、抗-LIGHT抗体、抗-TIGIT抗体、抗-VISTA抗体、抗-HVEM抗体、抗-Siglec抗体、抗-GAL1抗体、抗-GAL3抗体、抗-GAL9抗体、抗-BTNL2(嗜乳脂蛋白)抗体、抗-B7-H3抗体、抗-B7-H4抗体、抗-B7-H5抗体、抗-B7-H6抗体、抗-KIR抗体、抗-LIR抗体、抗-ILT抗体、抗-MICA抗体、抗-MICB抗体、抗-NKG2D抗体、抗-NKG2A抗体、抗-A2AR抗体、抗-C5aR抗体、抗-TGFβ抗体、抗-TGFβR抗体、抗-CXCR4抗体、抗-CXCL12抗体、抗-CCL2抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-13抗体、抗-IL-23抗体、抗-磷脂酰丝氨酸抗体、抗-神经纤毛蛋白抗体、抗-GalCer抗体、抗-HER2抗体、抗-VEGFA抗体、抗-VEGFR抗体、抗-EGFR抗体、抗-Tie2抗体、抗-CCR4抗体、抗-TRAIL-DR5抗体、抗-CD3抗体、抗-CD43抗体、抗-CD123抗体、抗-CEACAM1抗体、抗-CEACAM5抗体、抗-CEACAM6抗体或其抗体片段。
81.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体。
82.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是激动剂抗-CD137抗体。
83.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是抗-CTLA-4抗体。
84.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、pidilizumab、伊匹单抗(ipilimumab)、曲美姆单抗(tremelimumab)、度伐单抗(durvalumab)、阿特朱单抗(atezolizumab)、avelumab、PF-06801591、utomilumab、PDR001、PBF-509、MGB453、LAG525、AMP-224、INCSHR1210、INCAGN1876、INCAGN1949、samalizumab、PF-05082566、urelumab、lirilumab、lulizumab、BMS-936559、BMS-936561、BMS-986004、BMS-986012、BMS-986016、BMS-986178、IMP321、IPH2101、IPH2201、varlilumab、ulocuplumab、monalizumab、MEDI0562、MEDI0680、MEDI1873、MEDI6383、MEDI6469、MEDI9447、AMG228、AMG820、CC-90002、CDX-1127、CGEN15001T、CGEN15022、CGEN15029、CGEN15049、CGEN15027、CGEN15052、CGEN15092、CX-072、CX-2009、CP-870893、lucatumumab、达西珠单抗(dacetuzumab)、Chi Lob7/4、RG6058、RG7686、RG7876、RG7888、TRX518、MK-4166、IMC-CS4、emactuzumab、曲妥珠单抗(trastuzumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)、cabiralizumab、margetuximab、enoblituzumab、mogamulizumab、帕尼单抗(panitumumab)、carlumab、贝伐单抗(bevacizumab)、利妥昔单抗(rituximab)或西妥昔单抗(cetuximab)。
85.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是派姆单抗、纳武单抗、pidilizumab、伊匹单抗、曲美姆单抗、度伐单抗、阿特朱单抗、avelumab、PF-06801591、utomilumab、PDR001、PBF-509、MGB453、LAG525、AMP-
224、INCSHR1210、INCAGN1876、INCAGN1949、samalizumab、PF-05082566、urelumab、lirilumab、lulizumab、BMS-936559、BMS-936561、BMS-986004、BMS-986012、BMS-986016、BMS-986178、IMP321、IPH2101、IPH2201、IPH5401、IPH4102、IPH4301、IPH52、IPH53、varlilumab、ulocuplumab、monalizumab、MEDI0562、MEDI0680、MEDI1873、MEDI6383、MEDI6469、MEDI9447、AMG228、AMG820、CC-90002、CDX-1127、CGEN15001T、CGEN15022、CGEN15029、CP-870893、lucatumumab、达西珠单抗、Chi Lob7/4、RG6058、RG7686、RG7876、RG7888、TRX518、MK-4166、IMC-CS4、emactuzumab、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、奥滨尤妥珠单抗、cabiralizumab、margetuximab、enoblituzumab、mogamulizumab、帕尼单抗、carlumab、雷莫芦单抗(ramucirumab)、贝伐单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗、fresolimumab、地诺单抗(denosumab)、MGA012、AGEN1884、AGEN2034、LY3300054、JTX-4014、teplizumab、FPA150、PF-
04136309、PF-06747143、AZD5069、GSK3359609、FAZ053、TSR022、MBG453、REGN3767、REGN2810、GSK3174998、MOXR0916、PF-04518600、RO7009789、BMS986156、GWN323、JTX-2011、NKTR-214、DS-8273a、NIS793或BGB-A317。
86.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是双特异性抗体。
87.根据权利要求86所述的药物递送组合物，其中所述双特异性抗体是RG7802、
RG7828、RG7221、RG7386、ERY974、MGD012、AMG211、MEDI573、MEDI565、FS17、FS18、FS20、FS22、FS101、FS117、FS118、RO6958688、MCLA-128、M7824、MGD009或MGD013。
88.根据权利要求3、5-7或75-77中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是抗体-药物缀合物。
89.根据权利要求88所述的药物递送组合物，其中所述抗体-药物缀合物是曲妥珠单抗emtansine、奥英妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)、PF-06647020、PF-06647263、PF-
06650808、RG7596、RG7841、RG7882、RG7986、DS-8201、ABBV-399、glembatumumab vedotin、奥英妥珠单抗、MEDI4276或其药学上可接受的盐。
90.根据权利要求3、5-7或75所述的药物递送组合物，其中所述适应性免疫应答的激活剂是小分子。
91.根据权利要求90所述的药物递送组合物，其中所述小分子是IDO抑制剂、TGFβ抑制剂、BRAF抑制剂、KIT抑制剂、A2aR抑制剂、Tie2抑制剂、精氨酸酶抑制剂、iNOS抑制剂、HIF1α抑制剂、STAT3抑制剂、PGE2抑制剂、PDE5抑制剂、RON抑制剂、mTOR抑制剂、JAK2抑制剂、HSP90抑制剂、PI3K-AKT抑制剂、WNT-β-连环蛋白抑制剂、GSK3β抑制剂、IAP抑制剂、HDAC抑制剂、DNMT抑制剂、BET抑制剂、COX2抑制剂、PDGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、BCR-ABL抑制剂、蛋白酶体抑制剂、血管生成抑制剂、塞来昔布、舒尼替尼、伊马替尼、维罗非尼、达布拉非尼、硼替佐米、伏立诺他、泊马度胺、沙利度胺、来那度胺或其药学上可接受的盐。
92.根据权利要求90所述的药物递送组合物，其中所述小分子是IDO抑制剂、TGFβR抑制剂、BRAF抑制剂、KIT抑制剂、A2aR抑制剂、Tie2抑制剂、精氨酸酶抑制剂、iNOS抑制剂、HIF1α抑制剂、STAT3抑制剂、PGE2抑制剂、PDE5抑制剂、RON抑制剂、mTOR抑制剂、JAK2抑制剂、HSP90抑制剂、PI3K-AKT抑制剂、WNT-β-连环蛋白抑制剂、GSK3β抑制剂、IAP抑制剂、HDAC抑制剂、DNMT抑制剂、BET抑制剂、COX2抑制剂、PDGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、BCR-ABL抑制剂、FGFR3抑制剂、蛋白酶体抑制剂、血管生成抑制剂、MEK抑制剂、BRAF+MEK抑制剂、pan-RAF抑制剂、EGFR抑制剂、PARP抑制剂、谷氨酰胺酶抑制剂、FAK抑制剂、ALK抑制剂、CDK4/6抑制剂、WNT抑制剂、塞来昔布、舒尼替尼、伊马替尼、维罗非尼、达拉菲尼、硼替佐米、伏立诺他、泊马度胺、沙利度胺、来那度胺、epacadostat、indoximid、GDC0919、BMS986205、AZD8055、AZD4635、CPI-444、PBF509、LCL161、CB-839、CB-1158、FPA008、BLZ945、IPI-549、pexidartinib、galunisertib、birinapant、曲美替尼、考比替尼、binimetinib、ensartib、吉非替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、尼达尼布、SYM004、维利帕尼、奥拉帕尼、BGB-290、依维莫司、LXH254、阿扎胞苷、地西他滨、瓜地西汀、RRX001、CC486、罗米地辛、恩替司他、帕比司他、他莫昔芬、依鲁替尼、delalisib、capmatinib、司美替尼、玻玛西尼、帕博西尼、glasdegib、恩杂鲁胺、AZD9150、PF-06840003、SRF231、Hu5F9-G4、CC-900002、TTI-621、WNT974、BGJ398或LY2874455或其药学上可接受的盐。
93.根据权利要求1-7中任意一项所述的药物递送组合物，还包含巨噬细胞效应功能的调节剂。
94.根据权利要求93所述的药物递送组合物，其中所述巨噬细胞效应功能的调节剂是抗-CD40抗体、抗-CD47抗体、抗-CSF1抗体、抗-CSF1R抗体或者CSF1R、BTK、ITK、PI3Kγ或PI3Kδ的小分子抑制剂。
95.根据权利要求3、5-7或75-94中任意一项所述的药物递送组合物，还包含其他适应性免疫应答的激活剂。
96.根据权利要求1-95中任意一项所述的药物递送组合物，还包含溶瘤病毒、放射性同位素、化疗剂或其组合。
97.根据权利要求1-95中任意一项所述的药物递送组合物，还包含溶瘤病毒、放射性同位素、免疫调节化疗剂或其组合。
98.根据权利要求1-97中任意一项所述的药物递送组合物，还包含至少一种赋形剂。
99.根据权利要求98所述的药物递送系统，其中所述赋形剂是磷酸缓冲盐、三(羟甲基)氨基甲烷、氯化钠、海藻糖、蔗糖或其组合。
100.根据权利要求1-99中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物不包含离体加载的过继转移细胞、微粒、肽或肿瘤抗原。
101.根据权利要求1-100中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物不包含有机溶剂。
102.根据权利要求1-98中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述组合物包含有机溶剂。
103.一种药物递送组合物，所述药物递送组合物选自下组：
包含水凝胶和2′3′-cGAMP的组合物；
包含水凝胶和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的组合物；
包含水凝胶和瑞喹莫德的组合物；
包含水凝胶和M-TriDAP的组合物；
包含水凝胶和IL-15超激动剂的组合物；
包含水凝胶和干扰素α(IFN-α)的组合物；
包含水凝胶和干扰素β(IFN-β)的组合物；
包含水凝胶和干扰素γ(IFN-γ)的组合物；
包含水凝胶、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的组合物；
包含水凝胶2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的组合物；
包含水凝胶、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的组合物；
包含水凝胶、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；
包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物，以及
包含水凝胶、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物。
104.根据权利要求8-45、47或103中任意一项所述的药物递送组合物，其中所述水凝胶包含透明质酸或藻酸盐。
105.一种药物递送装置，所述药物递送装置包含根据权利要求1-104中任意一项所述的药物递送组合物。
106.根据权利要求105所述的药物递送装置，其中所述水凝胶包含交联的透明质酸。
107.根据权利要求105所述的药物递送装置，其中所述水凝胶包含交联的藻酸盐。
108.根据权利要求105-107中任意一项所述的药物递送装置，其中所述水凝胶是在体内可生物降解的。
109.根据权利要求105-108中任意一项所述的药物递送装置，其中在植入所述装置后6个月，小于或等于20％的所述装置仍保持在体内。
110.根据权利要求105-109中任意一项所述的药物递送装置，其中所述装置具有至少
100Pa的储能模量。
111.根据权利要求105-109中任意一项所述的药物递送装置，其中所述装置具有多达
100,000,000Pa的储能模量。
112.根据权利要求105-109中任意一项所述的药物递送装置，其中所述装置具有约
500Pa至约3000Pa的储能模量。
113.根据权利要求105-112中任意一项所述的药物递送装置，其中在所述组合物植入后30分钟，小于或等于80％的所述先天免疫应答的激活剂在体内释放。
114.根据权利要求105-113中任意一项所述的药物递送装置，其中在所述组合物植入后10小时，小于或等于80％的所述适应性免疫应答的激活剂在体内释放。
115.根据权利要求105-114中任意一项所述的药物递送装置，其中在所述组合物植入后10小时，小于或等于80％的所述细胞因子在体内释放。
116.一种在需要其的对象中治疗癌症的方法，所述方法包括在所述对象中手术植入权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置。
117.一种在需要其的对象中预防癌症的方法，所述方法包括在所述对象中手术植入权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置。
118.根据权利要求116或117所述的方法，其中所述癌症是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤或胚细胞瘤。
119.根据权利要求116-118中任意一项所述的方法，其中所述癌症是腺癌、肾上腺癌、肛门癌、血管肉瘤、阑尾癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管癌、类癌瘤、心脏肿瘤、宫颈癌，绒毛膜癌、脊索瘤、结直肠癌、结缔组织癌、颅咽管瘤、原位导管癌、内皮肉瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、上皮癌、食道癌、尤文氏肉瘤、眼癌、家族性嗜酸性粒细胞增多症、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞癌、头颈癌、血管母细胞瘤、组织细胞增多症、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、炎性肌纤维母细胞瘤、上皮内瘤、免疫细胞淀粉样变性、卡波西氏肉瘤、肾癌、肝癌、肺癌、平滑肌肉瘤(LMS)、肥大细胞增多症、黑色素瘤、中线癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、肌肉癌、骨髓增生异常综合征(MDS)、间皮瘤、骨髓增生性病症(MPD)、鼻咽癌、神经母细胞瘤、神经纤维瘤、神经内分泌癌、非霍奇金氏淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、副肿瘤综合征、甲状旁腺癌、乳头状腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体瘤、垂体癌、胸膜肺母细胞瘤、原始神经外胚层肿瘤(PNT)、浆细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮脂腺癌、皮肤癌、小肠(small bowel)癌、小肠(small intestine)癌、软组织肉瘤、胃癌、汗腺癌、滑膜瘤、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌、血管癌或外阴癌。
120.一种在需要其的对象中预防原发性肿瘤再生长的方法，所述方法包括在所述对象中手术植入权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置。
121.一种在需要其的对象中预防肿瘤转移的方法，所述方法包括在所述对象中手术植入权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置。
122.根据权利要求120或121所述的方法，其中所述肿瘤是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤、胚细胞瘤或其组合。
123.根据权利要求116-122中任意一项所述的方法，还包括在手术切除肿瘤后植入所述药物递送装置。
124.根据权利要求123所述的方法，还包括在肿瘤切除部位植入所述药物递送装置。
125.根据权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置，用于在需要其的对象中治疗癌症。
126.根据权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置，用于在需要其的对象中预防癌症。
127.根据权利要求125或126所述的药物递送装置，其中所述癌症是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤或胚细胞瘤。
128.根据权利要求125-127中任意一项所述的药物递送装置，其中所述癌症是腺癌、肾上腺癌、肛门癌、血管肉瘤、阑尾癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管癌、类癌瘤、心脏肿瘤、宫颈癌，绒毛膜癌、脊索瘤、结直肠癌、结缔组织癌、颅咽管瘤、原位导管癌、内皮肉瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、上皮癌、食道癌、尤文氏肉瘤、眼癌、家族性嗜酸性粒细胞增多症、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞癌、头颈癌、血管母细胞瘤、组织细胞增多症、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、炎性肌纤维母细胞瘤、上皮内瘤、免疫细胞淀粉样变性、卡波西氏肉瘤、肾癌、肝癌、肺癌、平滑肌肉瘤(LMS)、肥大细胞增多症、黑色素瘤、中线癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、肌肉癌、骨髓增生异常综合征(MDS)、间皮瘤、骨髓增生性病症(MPD)、鼻咽癌、神经母细胞瘤、神经纤维瘤、神经内分泌癌、非霍奇金氏淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、副肿瘤综合征、甲状旁腺癌、乳头状腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体瘤、垂体癌、胸膜肺母细胞瘤、原始神经外胚层肿瘤(PNT)、浆细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮脂腺癌、皮肤癌、小肠(small bowel)癌、小肠(small intestine)癌、软组织肉瘤、胃癌、汗腺癌、滑膜瘤、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌、血管癌或外阴癌。
129.根据权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置，用于在需要其的对象中预防原发性肿瘤再生长。
130.根据权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置，用于在需要其的对象中预防肿瘤转移。
131.根据权利要求129或130所述的药物递送装置，其中所述肿瘤是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤、胚细胞癌或其组合。
132.根据权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置，用于在需要其的对象的肿瘤切除部位植入。
133.一种试剂盒，所述试剂盒包含水凝胶和先天免疫应答的激活剂。
134.一种试剂盒，所述试剂盒包含水凝胶和细胞因子。
135.一种试剂盒，所述试剂盒包含水凝胶和适应性免疫应答的激活剂。
136.根据权利要求133或135所述的试剂盒，还包含细胞因子。
137.根据权利要求133或134所述的试剂盒，还包含适应性免疫应答的激活剂。
138.根据权利要求133-137中任意一项所述的试剂盒，还包含巨噬细胞效应功能的调节剂。
139.根据权利要求133-138中任意一项所述的试剂盒，还包含其他适应性免疫应答的激活剂。
140.根据权利要求133-139中任意一项所述的试剂盒，还包含其他先天免疫应答的激活剂。
141.根据权利要求133-140中任意一项所述的试剂盒，还包含溶瘤病毒、放射性同位素、化疗剂或其组合。
142.根据权利要求133-141中任意一项所述的试剂盒，还包含溶瘤病毒、放射性同位素、免疫调节化疗剂、靶向剂或其组合。
143.一种试剂盒，所述试剂盒包含权利要求1-104中任意一项所述的药物递送组合物。
144.一种试剂盒，所述试剂盒包含权利要求105-115中任意一项所述的药物递送装置。
药物递送组合物及其用途
[0002] 本发明在美国国立卫生研究院国家癌症研究所授予的基金号P50CA168504的政府支持下进行。政府享有本发明的某些权益。发明领域
背景技术
[0004] 将药物、营养物质或其他物质全身施用到循环系统会影响整个机体。全身施用途径包括肠内(例如，使得药物通过胃肠道吸收的口服给药)和胃肠外(例如，静脉内、肌内和皮下注射)施用。免疫疗法的施用通常依赖于这些全身施用途径。然而，免疫疗法经常诱导对非患病组织不利的毒性，因而全身施用能够导致不希望的副作用。在一些情况下，由于相关的毒性和目前施用方法和系统的局限性，使得极难以开发某些有希望的疗法。例如，全身施用治疗癌症的免疫治疗剂通常与免疫相关的不良事件(例如，皮疹、肝炎、腹泻、结肠炎、垂体炎、甲状腺炎和肾上腺功能不全)相关。可将这些不良事件部分归因于非肿瘤特异性免疫细胞暴露于药物，以及通过全身施用以在肿瘤中达到诱导所需应答的足够浓度所需的较高剂量。除了增强安全性以外，免疫治疗剂的定位递送可以通过将药物的作用集中在所需要之处来提高有效性。
[0005] 手术通常是实体瘤癌症的一线治疗，并且通常与抗癌疗法的全身施用联用。然而，手术诱导的免疫抑制与多种代谢和内分泌应答的变化引起的术后脓毒症并发症和肿瘤转移有关，最终导致很多患者死亡(Smyth,M.J.等，Nature Reviews Clinical Oncology,2016,13,143–158)。因此，需要联合手术方法安全、有效地施用免疫疗法，以实现抗转移的有效性并减少肿瘤再生长。
发明内容
[0006] 如上所述，免疫疗法的全身施用可导致不良副作用，并且手术切除肿瘤可导致免疫抑制。然而，本发明提供了靶向药物递送系统(例如，靶向特定组织或细胞类型，或者靶向特异性患病组织，而非正常组织)，所述靶向药物递送系统能够减少机体非靶向组织(例如，非患病组织)中存在的药量，并且当治疗癌症时是特别有用的，此时向癌症组织递送有效剂量的药物同时将对周围非癌组织的影响降至最低是理想的。特别地，药物递送系统递送一种或多种作用于免疫系统的治疗剂，以治疗癌症和预防肿瘤复发和/或转移，同时将不良副作用降至最低。
[0007] 在一个方面中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料(例如，水凝胶)和先天免疫应答的激活剂(例如，STING激动剂)。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、胞质DNA传感器(CDS)激动剂、Toll样受体(TLR)激动剂、C型凝集素受体(CLR)激动剂、NOD样受体(NLR)激动剂、RIG-I-样受体(RLR)激动剂或炎症体诱导剂。先天免疫应答的某些激活剂能够触发抗肿瘤应答。
[0008] 在另一个方面中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和细胞因子(例如，IL-15超激动剂)。某些细胞因子可以作为免疫调节剂，例如能够激活T细胞和NK细胞并诱导其增殖，能够导致T细胞和NK细胞分泌干扰素-γ，以及能够赋予T细胞和NK细胞在没有抗原刺激的情况下杀死恶性细胞的能力。在其他方面中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料和细胞因子(例如，IL-15超激动剂)。
[0009] 在某些实施方式中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和趋化因子(例如，CXCL9)。某些趋化因子能够在免疫监视过程中控制免疫系统的细胞，并且可以向肿瘤负荷部位募集免疫细胞。其可以用于指导先天免疫系统和适应性免疫系统的细胞。在其他实施方式中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料和趋化因子(例如，CXCL9)。
[0010] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还包含适应性免疫应答的激活剂(例如，抗-PD-1抗体、抗-CTLA-4抗体、激动剂抗-CD137抗体)。某些适应性免疫应答的激活剂能够激活治疗性抗肿瘤免疫，包括阻断免疫检查点或激活共刺激分子。
[0011] 在另一个方面中，提供了药物递送组合物和装置，所述药物递送组合物和装置包含生物材料和适应性免疫应答的激活剂(例如，抗-PD-1抗体、抗-CTLA-4抗体、激动剂抗-CD137抗体)。
[0012] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还包含一种或多种其他适应性免疫应答的激活剂。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗体(例如，抗-PD-1抗体、抗-PD-L1抗体、抗-CTLA-4抗体、激动剂抗-CD137抗体)，双特异性抗体(例如，靶向PD-L1和TGFβ的双功能性融合蛋白)，抗体-药物缀合物(例如，曲妥珠单抗emtansine、奥英妥珠单抗)，或小分子(例如，塞来昔布、硼替佐米)。
[0013] 在某些实施方式中，生物材料是水凝胶。水凝胶可以提供支架，其使得组合物或装置的组分能够有效组合并形成可在外科手术环境中植入的药物递送系统。在某些实施方式中，水凝胶由透明质酸制备。透明质酸是可生物相容性材料，其在体内能够随着时间的推移而生物降解，能够使得从药物递送系统释放药物。
[0015] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还包含溶瘤病毒、放射性同位素、免疫调节性化疗剂、靶向剂或其组合。
[0016] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含至少一种赋形剂。
[0017] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置的生物材料(例如，水凝胶)是在体内可生物降解的。在某些实施方式中，药物递送装置具有约500Pa至约3000Pa的贮能模量。
[0018] 在另一个方面中，提供了通过手术植入药物递送组合物或装置用于治疗和/或预防癌症的方法。在某些实施方式中，癌症是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤或胚细胞瘤。在另一个方面中，提供了通过手术植入药物递送组合物用于预防原发性肿瘤再生长的方法。在另一个方面中，提供了通过手术植入药物递送组合物预防肿瘤复发和/或转移的方法。在某些实施方式中，所述方法还包括手术切除肿瘤之后植入药物递送组合物。在某些实施方式中，所述方法还包括在肿瘤切除部位植入药物递送组合物。
[0021] 定义
[0022] 如在本申请中所使用的，术语“盐”指任意和所有的盐并且包括药学上可接受的盐。
[0023] 术语“药学上可接受的盐”指的是那些在合理的医学判断的范围内适用于与人类和更低等动物的组织接触而没有不适当的毒性、刺激性、过敏反应等并且与合理的获益/风险比相称的盐。药学上可接受的盐是本领域公知的。举例来说，Berge等在J.Pharmaceutical Sciences，1977，66，1-19中详细描述了药学上可接受的盐，该文献以引用的方式并入本文。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括由合适的无机和有机酸和碱所产生的那些。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例是与无机酸，如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸以及高氯酸，或与有机酸，如乙酸、草酸、顺丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸，或通过使用本领域已知的其他方法(如离子交换法)形成的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。
由适当的碱产生的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐以及N+(C1-4烷基)4-盐。代表性的碱金属盐或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。在适当时，另外的药学上可接受的盐包括使用诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根以及芳基磺酸根之类的抗衡离子形成的无毒铵、季铵以及胺阳离子。
由适当的碱产生的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐以及N+(C1-4烷基)4-盐。代表性的碱金属盐或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。在适当时，另外的药学上可接受的盐包括使用诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根以及芳基磺酸根之类的抗衡离子形成的无毒铵、季铵以及胺阳离子。
[0024] “聚合物”具有其在本领域中使用的通常含义，即包含通过共价键连接的一个或多个重复单元(单体)的分子结构。重复单元可以均是相同的，或者在一些情况下，在聚合物中可以存在一种以上类型的重复单元。在某些实施方式中，聚合物是包含11个或更多个共价连接的重复单元的化合物。在某些实施方式中，聚合物是天然存在的。在某些实施方式中，聚合物是合成的(即，非天然存在的)。
[0025] 术语“交联剂”指例如通过共价键或离子键将一个聚合物与另一个连接的化合物。
[0026] 术语“溶剂化物”指的是与溶剂缔合，通常是通过溶剂分解反应缔合的化合物的形式。这一物理缔合可以包括氢键键合。常规的溶剂包括水、甲醇、乙醇、乙酸、DMSO、THF、乙醚等。本申请所述的化合物可以被制备成例如结晶形式，并且可以被溶剂化。合适的溶剂化物包括药学上可接受的溶剂化物并且还包括化学计量溶剂化物和非化学计量溶剂化物这两者。在某些情况下，溶剂化物将能够分离，例如在一个或多个溶剂分子被并入到结晶固体的晶格中时。“溶剂化物”包括溶液相溶剂化物和可分离的溶剂化物这两者。代表性的溶剂化物包括水合物、乙醇化物、以及甲醇化物。
[0027] 术语“水合物”指的是与水缔合的化合物。通常，化合物的水合物中所含的水分子的数目与水合物中化合物分子的数目呈确定的比率。因此，化合物的水合物可以例如由通式R·x H2O表示，其中R是化合物并且其中x是大于0的数。给定的化合物可以形成超过一种类型的水合物，包括例如一水合物(x是1)、低水合物(x是大于0并且小于1的数，例如半水合物(R·0.5H2O))、以及多水合物(x是大于1的数，例如二水合物(R·2H2O)和六水合物(R·6H2O))。
[0028] 术语“互变异构体”或“互变异构的”指由至少一种形式的氢原子迁移和至少一种化合价改变(例如，单键至双键，三键至单键或反之亦然)产生的两种或多种可相互转化的化合物。互变异构体的精确比例取决于若干因素，包括温度、溶剂和pH。互变异构化反应(即，提供互变异构对的反应)可以由酸或碱催化。示例性的互变异构化反应包括酮-烯醇、酰胺-酰亚胺、内酰胺-内酰亚胺、烯胺-亚胺和烯胺-(不同的烯胺)的互变异构化反应。
[0029] 还应当理解的是，将具有相同分子式，但是其原子键合的性质或顺序或其原子的空间排布不同的化合物称为“异构体”。将其原子空间排布不同的异构体称为“立体异构体”。
[0030] 术语“多晶型物”指化合物(或其盐、水合物或溶剂化物)的结晶形式。所有多晶型物具有相同的元素组成。不同结晶形式通常具有不同X-射线衍射图样、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶体形状、光学和电学性质、稳定性和溶解度。重结晶溶剂、结晶速率、储存温度和其他因素可能导致一种晶体形式占主导地位。可以通过在不同条件下结晶来制备化合物的各种多晶型物。
[0031] 术语“共晶”指由至少两种组分构成的晶体结构。在某些实施方式中，共晶含有本发明的化合物和一种或多种其他组分，包括但不限于原子、离子、分子或溶剂分子。在某些实施方式中，共晶含有本发明的化合物和一种或多种溶剂分子。在某些实施方式中，共晶含有本发明的化合物和一种或多种酸或碱。在某些实施方式中，共晶含有本发明的化合物和与所述化合物相关的一种或多种组分，包括但不限于所述化合物的异构体、互变异构体、盐、溶剂化物、水合物、合成前体、合成衍生物、片段或杂质。
[0032] 术语“前药”指具有可裂解基团并且通过溶剂分解或在生理条件下变成本申请所述的化合物的化合物，其在体内具有药学活性。此类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等以及N-烷基吗啉酯等。本申请所述化合物的其他衍生物在其酸和酸衍生物形式具有活性，但是通常在哺乳动物生物体的溶解度、组织相容性或延迟释放方面酸敏感性形式具有优势(参见Bundgard,H.,Design of Prodrugs,pp.7-9,21-24,Elsevier,Amsterdam 1985)。前药包括本领域技术人员熟知的酸衍生物，例如由母体酸与适宜的醇反应制备的酯，由母体酸化合物与取代的或未取代的胺、酸酐或混合酸酐反应制备的酰胺。衍生自本申请所述化合物上的酸性基团的简单脂肪族或芳香族酯、酰胺和酸酐是特定的前药。在一些情况下，制备双酯型前药如(酰氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯是理想的。本申请所述化合物的C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、C7-C12取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯可能是优选的。
[0033] 预期接受施用的“对象”包括但不限于人类(即，任何年龄组的男性或女性，例如儿科对象(例如，婴儿、儿童、青少年)或成人对象(例如，年轻成人、中年成人或老年成人))和/或其他非人类动物，例如哺乳动物(例如，灵长类动物(例如，食蟹猴、恒河猴)；商业相关的哺乳动物，如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和/或狗，和/或禽类(例如，商业相关的禽类，如鸡、鸭、鹅、和/或火鸡)。在某些实施方式中，动物是哺乳动物。动物可以是雄性或雌性并且处于任何发育阶段。非人类动物可以是转基因或经基因工程改造的动物。
[0034] 术语“生物样品”指的是任何样品，包括组织样品(如组织切片和组织的穿刺活检)；细胞样品(例如细胞学涂片(如巴氏涂片(Pap)或血涂片)或通过显微解剖所获得的细胞的样品)；整个生物体的样品(如酵母或细菌的样品)；或细胞级分、片段或细胞器(如通过使细胞裂解并且通过离心或以其他方式分离其组分所获得)。生物样品的其他实例包括血液、血清、尿液、精液、粪便物、脑脊髓液、间质液、粘液、泪液、汗液、脓液、活检组织(例如通过手术活检或穿刺活检所获得)、乳头抽吸液、乳汁、阴道液、唾液、拭子(如颊拭子)、或含有源自于第一生物样品的生物分子的任何物质。
[0035] 术语“施用(administer)”“、施用(administering)”或“施用(administration)”指的是植入、吸收、摄取、注射、吸入或以其他方式引入如本申请所述的药物递送组合物。
[0036] 术语“治疗(treatment)”、“治疗(treat)”以及“治疗(treating)”指的是逆转、缓解本申请所述的“病理状态”(例如疾病、病症、或病况或其一个或多个体征或症状)、延缓其发病、或抑制其进展。在一些实施方式中，可以在已经出现或已经观察到一种或多种体征或症状之后施用治疗。在症状已经消退之后还可以继续治疗，例如以延缓或预防复发和/或扩散。
[0037] 术语“病况”、“疾病”和“病症”可以互换使用。
[0038] “有效量”指的是足以引出所期望的生物应答(即治疗病况)的量。如将由本领域普通技术人员所了解的那样，药物递送组合物的有效量可以根据诸如以下各项的因素而变化：所期望的生物终点、组合物中治疗剂的药物代谢动力学、所治疗的病况以及对象的年龄和健康情况。有效量包括治疗性治疗和预防性治疗。例如，在治疗癌症中，有效量的本发明的组合物可以预防肿瘤再生长、减轻肿瘤负荷或者使肿瘤的生长或扩散停止。
[0039] “治疗有效量”是足以在治疗病况中提供治疗益处或足以使与所述病况相关的一个或多个症状延缓或减到最低限度的量。本发明组合物的治疗有效量意指在治疗病况中单独或与其他治疗组合提供治疗益处的治疗剂的量。术语“治疗有效量”可以包括改善整体治疗、减少或避免所述病况的症状或病因、或提高另一种治疗剂的治疗功效的量。
[0040] “预防有效量”是足以预防病况或与所述病况相关的一种或多种症状，或预防其复发的量。组合物的预防有效量意指在预防病况中单独或与其他药剂组合提供预防益处的治疗剂的量。术语“预防有效量”可以包括改善整体预防或提高另一预防剂的预防功效的量。
[0041] “增殖性疾病”指由于细胞增殖的异常生长或延伸而发生的疾病(Walker,Cambridge Dictionary of Biology；Cambridge University Press:Cambridge,UK,1990)。增殖性疾病可能与下述相关：1)正常静止细胞的病理性增殖；2)细胞从其正常位置的病理性迁移(例如，肿瘤细胞的转移)；3)蛋白水解酶如基质金属蛋白酶(例如，胶原酶、明胶酶和弹性蛋白酶)的病理性表达；或4)如在增殖性视网膜病变或肿瘤转移中的病理性血管生成。示例性的增殖性疾病包括癌症(即“恶性赘生物”)、良性赘生物、血管生成或与血管生成相关的疾病、炎性疾病、自身炎性疾病和自身免疫性疾病。
[0042] 术语“赘生物”和“肿瘤”在本申请中可互换使用并且指的是异常的组织块，其中所述组织块的生长超过正常组织的生长并且与正常组织的生长不协调。赘生物或肿瘤可以是“良性的”或“恶性的”，这取决于以下特征：细胞分化的程度(包括形态和功能)、生长速率、局部侵袭以及转移。“良性赘生物”一般是分化良好的，在特征上比恶性赘生物生长得更慢，并且保持局限于起源部位。此外，良性赘生物没有浸润、侵袭、或转移到远处部位的能力。示例性良性赘生物包括但不限于脂肪瘤、软骨瘤、腺瘤、软垂疣、老年性血管瘤、脂溢性角化病、雀斑以及皮脂腺增生。在一些情况下，某些“良性”肿瘤随后可能产生恶性赘生物，这可能由肿瘤的赘生性细胞的一个亚群中发生另外的遗传变化所引起，并且这些肿瘤被称为“恶变前赘生物”。示例性恶变前赘生物是畸胎瘤。相比之下，“恶性赘生物”一般是低分化的(间变)并且具有特征性地快速生长，伴有进行性浸润、侵袭以及对周围组织的破坏。此外，恶性赘生物一般具有转移到远处部位的能力。
[0043] 术语“转移”、“转移性”或“转移化”指癌细胞从原发性或原始肿瘤播散或迁移至另一器官或组织，并且通常可通过原发性或原始肿瘤组织类型的“继发性肿瘤”或“继发性细胞块”的存在情况而非继发性(转移性)肿瘤所处的器官或组织标识。例如，将已迁移至骨的前列腺癌称为转移性前列腺癌，并且包括在骨组织中生长的癌性前列腺癌细胞。
[0044] 术语“癌症”指恶性赘生物(Stedman’s Medical Dictionary,25th ed.；Hensyl ed.；Williams&Wilkins:Philadelphia,1990)。示例性的癌症包括但不限于听神经瘤；腺癌；肾上腺癌；肛门癌；血管肉瘤(例如淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、血管肉瘤)；阑尾癌；良性单克隆丙种球蛋白病；胆道癌(例如胆管细胞癌)；胆管癌；膀胱癌；骨癌；乳腺癌(例如乳腺腺癌、乳腺乳头状癌、乳腺癌、乳腺髓样癌)；脑癌(例如脑膜瘤、成胶质细胞瘤、胶质瘤(例如星形细胞瘤、少突胶质瘤)、成神经管细胞瘤)；支气管癌；类癌肿瘤；心脏肿瘤；宫颈癌(例如宫颈腺癌)；绒毛膜癌；脊索瘤；颅咽管瘤；结肠直肠癌(例如结肠癌、直肠癌、结肠直肠腺癌)；结缔组织癌；上皮癌；导管原位癌；室管膜瘤；内皮肉瘤(例如卡波西肉瘤(Kaposi’s sarcoma)、多发性特发性出血性肉瘤)；子宫内膜癌(例如子宫癌、子宫肉瘤)；食道癌(例如食道腺癌、巴雷特氏腺癌(Barrett’s adenocarcinoma))；尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)；眼癌(例如眼内黑色素瘤、成视网膜细胞瘤)；家族性嗜酸性粒细胞增多症；胆囊癌；胃癌(例如胃腺癌)；胃肠道间质瘤(GIST)；生殖细胞癌；头颈部癌(例如头颈部鳞状细胞癌、口腔癌(例如口腔鳞状细胞癌)、咽喉癌(例如喉癌、咽癌、鼻咽癌、口咽癌))；造血系统癌症(例如白血病，如急性淋巴细胞性白血病(ALL)(例如B细胞ALL、T细胞ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)(例如B细胞AML、T细胞AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)(例如B细胞CML、T细胞CML)、以及慢性淋巴细胞性白血病(CLL)(例如B细胞CLL、T细胞CLL))；淋巴瘤，如霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma，HL)(例如B细胞HL、T细胞HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如B细胞NHL，如弥漫性大细胞淋巴瘤(DLCL)(例如弥漫性大B细胞淋巴瘤)、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(CLL/SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、边缘区B细胞淋巴瘤(例如粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤、淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区B细胞淋巴瘤)、原发性纵隔性B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(即瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(macroglobulinemia))、毛细胞白血病(HCL)、成免疫细胞性大细胞淋巴瘤、前体B成淋巴细胞性淋巴瘤以及原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤；以及T细胞NHL，如前体T成淋巴细胞性淋巴瘤/白血病、外周T细胞淋巴瘤(PTCL)(例如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)(例如蕈样真菌病、塞扎里综合征(Sezary syndrome))、血管成免疫细胞性T细胞淋巴瘤、淋巴结外自然杀伤T细胞淋巴瘤、肠病型T细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、以及间变性大细胞淋巴瘤)；如上文所述的一种或多种白血病/淋巴瘤的混合疾病；多发性骨髓瘤；重链病(例如α链病、γ链病、μ链病)；成血管细胞瘤；组织细胞增生症；下咽癌；炎症性肌成纤维细胞瘤；免疫细胞性淀粉样变性；肾癌(例如肾母细胞瘤(也被称为维尔姆斯肿瘤(Wilms’tumor))、肾细胞癌)；肝癌(例如肝细胞癌(HCC)、恶性肝细胞瘤)；肺癌(例如支气管癌、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌)；平滑肌肉瘤(LMS)；肥大细胞增多症(例如系统性肥大细胞增多症)；黑色素瘤；中线癌；多发性内分泌肿瘤综合征；肌肉癌；
骨髓增生异常综合征(MDS)；间皮瘤；骨髓增生性病症(MPD)(例如真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生(agnogenic myeloid metaplasia，AMM)(也被称为骨髓纤维化(MF))、慢性特发性骨髓纤维化、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、嗜酸性粒细胞增多综合征(HES))；鼻咽癌；成神经细胞瘤；神经纤维瘤(例如1型或2型神经纤维瘤病(NF)、神经鞘瘤病)；神经内分泌癌(例如胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、类癌肿瘤)；骨肉瘤(例如骨癌)；卵巢癌(例如囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)；乳头状腺癌；胰腺癌(例如胰腺腺癌、导管内乳头状粘液性赘生物(IPMN)、胰岛细胞瘤)；甲状旁腺癌；乳头状腺癌；阴茎癌(例如阴茎和阴囊的佩吉特氏病(Paget’s disease))；咽癌；松果体瘤；垂体癌；胸膜肺母细胞瘤；原始神经外胚层肿瘤(PNT)；浆细胞瘤形成；副肿瘤综合征；上皮内赘生物；前列腺癌(例如前列腺腺癌)；直肠癌；横纹肌肉瘤；
视网膜母细胞瘤；唾液腺癌；皮肤癌(例如鳞状细胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底细胞癌(BCC))；小肠癌(例如阑尾癌)；软组织肉瘤(例如恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、软骨肉瘤、纤维肉瘤、粘液肉瘤)；皮脂腺癌；胃癌；小肠癌；汗腺癌；滑膜瘤；睾丸癌(例如精原细胞瘤、睾丸胚胎癌)；胸腺癌；甲状腺癌(例如甲状腺乳头状癌、乳头状甲状腺癌(PTC)、甲状腺髓样癌)；尿道癌；子宫癌；阴道癌；以及外阴癌(例如外阴的佩吉特氏病)。
骨髓增生异常综合征(MDS)；间皮瘤；骨髓增生性病症(MPD)(例如真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生(agnogenic myeloid metaplasia，AMM)(也被称为骨髓纤维化(MF))、慢性特发性骨髓纤维化、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、嗜酸性粒细胞增多综合征(HES))；鼻咽癌；成神经细胞瘤；神经纤维瘤(例如1型或2型神经纤维瘤病(NF)、神经鞘瘤病)；神经内分泌癌(例如胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、类癌肿瘤)；骨肉瘤(例如骨癌)；卵巢癌(例如囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)；乳头状腺癌；胰腺癌(例如胰腺腺癌、导管内乳头状粘液性赘生物(IPMN)、胰岛细胞瘤)；甲状旁腺癌；乳头状腺癌；阴茎癌(例如阴茎和阴囊的佩吉特氏病(Paget’s disease))；咽癌；松果体瘤；垂体癌；胸膜肺母细胞瘤；原始神经外胚层肿瘤(PNT)；浆细胞瘤形成；副肿瘤综合征；上皮内赘生物；前列腺癌(例如前列腺腺癌)；直肠癌；横纹肌肉瘤；
视网膜母细胞瘤；唾液腺癌；皮肤癌(例如鳞状细胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底细胞癌(BCC))；小肠癌(例如阑尾癌)；软组织肉瘤(例如恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、软骨肉瘤、纤维肉瘤、粘液肉瘤)；皮脂腺癌；胃癌；小肠癌；汗腺癌；滑膜瘤；睾丸癌(例如精原细胞瘤、睾丸胚胎癌)；胸腺癌；甲状腺癌(例如甲状腺乳头状癌、乳头状甲状腺癌(PTC)、甲状腺髓样癌)；尿道癌；子宫癌；阴道癌；以及外阴癌(例如外阴的佩吉特氏病)。
[0045] 术语“免疫疗法”指通过诱导、增强或抑制免疫应答促进疾病治疗的治疗剂。将设计用于引发或扩增免疫应答的免疫疗法分类为激活免疫疗法，而将降低或抑制免疫应答的免疫疗法分类为抑制免疫疗法。免疫疗法通常但不总是生物治疗剂。将多种免疫疗法用于治疗癌症。这些包括但不限于单克隆抗体、过继细胞转移、细胞因子、趋化因子、疫苗、小分子抑制剂和小分子激动剂。例如，有用的免疫疗法可以包括但不限于I型干扰素的诱导物、干扰素、干扰素基因刺激物(STING)激动剂、TLR7/8激动剂、IL-15超激动剂、抗-PD-1抗体、抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0046] 术语“生物制剂(Biologic)”、“生物药”和“生物制品”指广泛的产品，如疫苗、血液和血液成分、过敏原、体细胞、基因疗法、组织、核酸和蛋白。生物制剂可以包括糖、蛋白或核酸，或者这些物质的复杂组合，或者可以是生物实体如细胞和组织。生物制剂可以从多种天然来源(例如，人、动物、微生物)中分离，以及可以通过生物技术方法和其他技术生产。
[0047] 术语“抗体”指血清的功能性成分，通常指分子的集合(抗体或免疫球蛋白)或一个分子(抗体分子或免疫球蛋白)。抗体能够与特异性抗原决定簇(抗原或抗原表位)结合或反应，其反过来可以导致免疫效应机制的诱导。单个抗体通常被认为是单特异性的，抗体组合物可以是单克隆的(即，由相同抗体分子组成)或多克隆的(即，由与相同抗原或者甚至独特、不同抗原上的相同或不同表位反应的两个或多个不同抗体组成)。每种抗体具有独特的结构，使其能够与其相应抗原特异性结合，并且所有天然抗体均具有两条相同轻链和两条相同重链的相同总体基本结构。抗体也统称为免疫球蛋白。
[0048] 如在本申请中所使用的，术语“抗体”还旨在包括嵌合和单链抗体(例如，纳米抗体或Fcab)，以及抗体的结合片段，如Fab、Fv片段或单链Fv(scFV)片段，以及多聚体形式，如二聚体IgA分子或五价IgM分子。还包括双特异性抗体、双特异性T细胞衔接器(BiTE)、针对癌症的免疫动员单克隆T细胞受体(ImmTAC)、双亲和性重新靶向(DART)；替代性支架或抗体模拟物(例如，anticalin、FN3单体、DARPin、Affibody、Affilin、Affimer、Affitin、Alphabody、Avimer、Fynomer、Im7、VLR、VNAR、Trimab、CrossMab、Trident)；纳米抗体、双纳米抗体、F(ab’)2、Fab’、di-sdFv、单域抗体、三功能抗体、双抗体和微抗体。抗体可以是人或非人来源的，例如鼠源的或其他啮齿动物来源的抗体，或者基于例如鼠源抗体的嵌合、人源化或改型抗体。
[0049] 术语“小分子”或“小分子治疗剂”指分子量相对较低的天然存在或人工产生(例如，通过化学合成)的分子。通常地，小分子是有机化合物(即，其含有碳)。小分子可以含有多个碳-碳键、立体中心和其他官能团(例如，胺、羟基、羰基和杂环等)。在某些实施方式中，小分子的分子量不超过约1,000g/mol、不超过约900g/mol、不超过约800g/mol、不超过约700g/mol、不超过约600g/mol、不超过约500g/mol、不超过约400g/mol、不超过约300g/mol、不超过约200g/mol或不超过约100g/mol。在某些实施方式中，小分子的分子量是至少约
100g/mol、至少约200g/mol、至少约300g/mol、至少约400g/mol、至少约500g/mol、至少约
600g/mol、至少约700g/mol、至少约800g/mol、至少约900g/mol或至少约1,000g/mol。上述范围的组合(例如，至少约200g/mol且不超过约500g/mol)也是可能的。在某些实施方式中，小分子是治疗活性剂如药物(例如，由美国食品和药物管理局根据美国联邦法规(C.F.R.)批准的分子)。小分子还可以与一种或多种金属原子和/或金属离子络合。在这种情况下，小分子也称为“小有机金属分子”。优选的小分子具有生物活性，因为其在动物(优选哺乳动物，更优选人)中产生生物学效应。小分子包括但不限于放射性核素和成像剂。在某些实施方式中，小分子是药物。优选地，但不一定是必需的，药物是由适当的政府机构或监管机关认为对人体或动物安全且有效的药物。例如，经批准供人用的药物列于FDA 21 C.F.R.§§
330.5、331至361和440至460，其通过引用并入本申请；供兽用的药物列于FDA 21 C.F.R.§§
500至589，其通过引用并入本申请。所有列出的药物都被认为是根据本发明的用途可以接受的。
100g/mol、至少约200g/mol、至少约300g/mol、至少约400g/mol、至少约500g/mol、至少约
600g/mol、至少约700g/mol、至少约800g/mol、至少约900g/mol或至少约1,000g/mol。上述范围的组合(例如，至少约200g/mol且不超过约500g/mol)也是可能的。在某些实施方式中，小分子是治疗活性剂如药物(例如，由美国食品和药物管理局根据美国联邦法规(C.F.R.)批准的分子)。小分子还可以与一种或多种金属原子和/或金属离子络合。在这种情况下，小分子也称为“小有机金属分子”。优选的小分子具有生物活性，因为其在动物(优选哺乳动物，更优选人)中产生生物学效应。小分子包括但不限于放射性核素和成像剂。在某些实施方式中，小分子是药物。优选地，但不一定是必需的，药物是由适当的政府机构或监管机关认为对人体或动物安全且有效的药物。例如，经批准供人用的药物列于FDA 21 C.F.R.§§
330.5、331至361和440至460，其通过引用并入本申请；供兽用的药物列于FDA 21 C.F.R.§§
500至589，其通过引用并入本申请。所有列出的药物都被认为是根据本发明的用途可以接受的。
[0050] 术语“治疗剂”指具有产生所需的(通常是有益的)作用的治疗性质的任何物质。例如，治疗剂可以治疗、改善和/或预防疾病。如在本申请中所公开的，治疗剂可以是生物制剂或小分子治疗剂。
[0051] 术语“化疗剂”指已知用于癌症化疗的治疗剂。
[0052] 术语“靶向剂”指通过干扰参与癌症生长、进展和扩散的特异性分子(“分子靶点”)阻断癌症生长和扩散的抗癌剂。有时将靶向剂称为“靶向癌症疗法”、“分子靶向药物”、“分子靶向疗法”或“精准医疗”。靶向剂与标准化疗的不同之处在于靶向剂作用于与癌症相关的特异性分子靶点，而大多数标准化学疗法作用于所有快速分裂的正常和癌细胞。靶向剂是有目的的选择或设计与其靶点相互作用的，而鉴定了很多标准化疗，因为其杀死细胞。
[0053] 术语“生物材料”指已经过工程化改造与用于医学目的(例如，治疗、诊断)的生物系统相互作用的任何生物相容性物质。生物材料可以来自天然的或合成的。
[0054] 术语“水凝胶”是亲水性聚合物链的网络，有时发现其是其中水是分散介质的胶体凝胶。水凝胶是高吸水性(其能够含有超过90％的水)天然或合成聚合物网络。由于其具有显著的含水量，使得水凝胶还具有与天然组织相似的一定程度的柔性。
[0055] 术语“可植入的”、“植入(implantation)”、“植入(implanting)”和“植入(implant)”指将药物递送组合物定位在对象中的特定位置，如在肿瘤切除部位内或在前哨淋巴结中，并且通常通过一般手术方法。
[0056] 术语“生物相容的”指在其预期用途的体内环境中基本上无毒并且基本上不被患者的生理系统排斥(即，非抗原性)的材料。这可以通过某种材料通过在国际标准化组织(ISO)标准号10993和/或美国药典(USP)23和/或美国国家食品和药品管理局(FDA)蓝皮书备忘录编号G95-1，题目“国际标准ISO-10993的使用，医疗器械的生物学评价第1部分：评价与检测”中所列的生物相容性检测的能力来衡量。通常地，这些检测测量材料的毒性、感染性、致热原性、潜在刺激性、反应性、溶血活性、致癌性和/或免疫原性。当导入大多数患者中时，生物相容性结构或材料将不会引起不希望的不利、长期或不断增强的生物学反应或应答，并且不同于轻度、暂时性的炎症，其通常伴随着向生物体手术或植入外来物。
[0057] 在酶的背景下，术语“抑制(inhibit)”或“抑制(inhibition)”指酶活性降低。在一些实施方式中，该术语指酶活性的水平降至统计学上显著低于初始水平的水平，例如初始水平可以处于酶活性的基线水平。在一些实施方式中，该术语指酶活性的水平降至低于75％、低于50％、低于40％、低于30％、低于25％、低于20％、低于10％、低于9％、低于8％、低于7％、低于6％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％、低于1％、低于0.5％、低于0.1％、低于0.01％、低于0.001％或低于0.0001％的初始水平，例如初始水平可以是酶活性的基线水平。
[0058] 术语“先天免疫应答的激活剂”指激活先天免疫系统的药剂。此类激活能够刺激引发炎症应答的分子的表达和/或辅助诱导适应性免疫应答，从而导致出现抗原特异性获得性免疫。先天免疫系统的激活能够通过增强抗原提呈以及由抗原提呈细胞的共刺激分子的表达导致细胞因子产生、增殖和存活以及改善T细胞引发。
[0059] 术语“适应性免疫应答的激活剂”指激活适应性免疫系统的药剂。此类激活能够通过中和抑制性免疫检查点或通过触发共刺激受体恢复抗肿瘤功能，最终产生针对由癌细胞表达的免疫原性抗原的辅助和/或效应T细胞应答并产生记忆B细胞和/或T细胞群。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂参与适应性免疫应答和/或白细胞运输的调节。
[0060] 术语“巨噬细胞效应功能调节剂”指激活巨噬细胞效应功能或耗竭免疫抑制性巨噬细胞或巨噬细胞来源的抑制细胞的药剂。这种增强能够动员巨噬细胞和骨髓成分破坏肿瘤及其基质，包括肿瘤脉管系统。可以诱导巨噬细胞分泌抗肿瘤细胞因子和/或进行吞噬作用，包括抗体依赖性细胞吞噬作用。
[0061] 如在本申请中所使用的，术语“持续释放”和“延长释放”是等同术语。本公开内容的组合物和装置可以在肿瘤切除后植入体内后释放治疗剂。术语“持续”和“延长”可以指在从1分钟至1个月的时间范围内释放任何治疗剂。在某些实施方式中，在组合物或装置植入后4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟、10分钟或1分钟内，在体内释放任何治疗剂的小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或小于或等于1％。在某些实施方式中，在组合物或装置植入后1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟、10分钟或1分钟内，在体内释放任何治疗剂的大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％或大于或等于1％。
附图说明
[0062] 图1是与ALEXA 750染料缀合的示例性药物递送装置F的图像。
[0063] 图2显示了在肿瘤接种和切除后植入示例性药物递送装置F后的单个小鼠的图像。该图像显示了在13周的时间段内负载荧光染料的水凝胶的降解。
[0064] 图3是显示在图2中植入的示例性药物递送装置F随时间生物降解的图。
[0065] 图4是原位接种4T1-Luc2细胞的雌性BALB/cJ小鼠的Kaplan-Meier曲线，所述小鼠的肿瘤未经治疗或被手术切除。
[0066] 图5显示了在未接种和切除肿瘤的情况下通过乳房脂肪垫植入示例性药物递送装置F后的单个小鼠的图像。该图像显示了在24周的时间段内负载荧光染料的水凝胶的降解。
[0067] 图6是显示在图5中植入的示例性药物递送装置F随时间生物降解的图。
[0068] 图7显示了局部施用在溶液中的ALEXA 750染料，以及在所示时间点进行荧光IVIS成像的单个小鼠的图像。
[0069] 图8是对图6中示例性药物递送装置F的生物降解情况与图7中游离染料体内扩散情况进行比较的图。
[0070] 图9显示了示例性药物递送装置1(荧光标记的2′3′-cGAMP+抗-PD-1抗体+IL-15超激动剂)的荧光共聚焦图像。
[0071] 图10显示了示例性药物递送装置2(荧光标记的抗-PD-1抗体+IL-15超激动剂)的荧光共聚焦图像。
[0072] 图11是显示治疗剂(塞来昔布、抗-PD-1抗体、IL-15超激动剂)从具有不同赋形剂(吐温、PBS、RPMI+10％FBS)的药物递送装置3、4和5中的释放速率的一系列的图。
[0073] 图12是显示c-di-GMP从药物递送装置6和2′3′-cGAMP从具有不同赋形剂(PBS、RPMI+10％FBS)的药物递送装置1和7中的释放速率的图。
[0074] 图13是显示2′3′-cGAMP在不同介质中(PBS、RPMI+10％FBS)从药物递送装置1和7；IL-15超激动剂在不同介质中(PBS、RPMI+10％FBS)从药物递送装置1和5；以及抗-PD-1抗体在不同介质中(PBS、RPMI+10％FBS)从药物递送装置1和4中的释放速率的一系列的图。
[0075] 图14显示了非荷瘤雌性BALB/cJ小鼠施用在溶液中的荧光标记的2′3′-cGAMP或在第四乳腺脂肪垫旁植入示例性药物递送装置7后的单个小鼠的图像。
[0076] 图15显示了非荷瘤雌性BALB/cJ小鼠施用在溶液中的荧光标记的IL-15超激动剂(IL-15sa)或在第四乳腺脂肪垫旁植入示例性药物递送装置5后的单个小鼠的图像。
[0077] 图16显示了非荷瘤雌性BALB/cJ小鼠施用在溶液中的荧光标记的抗-PD-1-抗体或在第四乳腺脂肪垫旁植入示例性药物递送装置4后的单个小鼠的图像。
[0078] 图17是对来自图14-16中实验的2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1的释放动力学进行定量的一系列图。显示了每个时间点的倍数差异。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0079] 图18显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤的单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0080] 图19显示了在植入不含药的水凝胶(装置8)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0081] 图20显示了在植入示例性药物递送装置2(抗-PD-1抗体+IL-15超激动剂)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0082] 图21显示了在植入示例性药物递送装置9(STING激动剂+抗-PD-1抗体)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0083] 图22显示了在植入示例性药物递送装置10(STING激动剂+IL-15超激动剂)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0084] 图23显示了在植入示例性药物递送装置1(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0085] 图24显示了在接种和切除后植入示例性药物递送装置11(STING激动剂+IL-15超激动剂+激动剂抗-CD137抗体)后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0086] 图25显示了在植入示例性药物递送装置12(STING激动剂+IL-15超激动剂+激动剂抗-CD40抗体)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0087] 图26显示了在接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入示例性药物递送装置13(STING激动剂+IL-21+抗-PD-1抗体)单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0088] 图27显示了在接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入示例性药物递送装置14(瑞喹莫德+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0089] 图28显示了在接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入示例性药物递送装置15(聚(I:C)+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0090] 图29显示了在接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入示例性药物递送装置16(CpG寡核苷酸+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0091] 图30显示了在接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入包含含有超激动剂、抗-PD-1和小分子治疗剂(溶于DMSO中的塞来昔布或EW7197)的水凝胶的装置后单个小鼠的图像。图30还显示了通过局部施用给予含有超激动剂、抗-PD-1和小分子治疗剂(溶于DMSO中的塞来昔布或EW7197)的溶液，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在3-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0092] 图31显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后植入一系列装置：(c-di-GMP+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)、(c-di-GMP+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体+DMSO)或(DMSO)后不同队列小鼠的图像。图像显示了在1-3周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0093] 图32显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后，腹腔(IP)或静脉内(IV)注射示例性组合物(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)的溶液后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0094] 图33显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后，局部施用示例性组合物(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)的溶液，随后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0095] 图34显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后，植入示例性药物递送装置1(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)，随后单个小鼠的图像。图像显示了在NK细胞耗竭的小鼠中在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0096] 图35显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后，植入示例性药物递送装置1(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)，随后单个小鼠的图像。图像显示了在CD8+ T细胞耗竭的小鼠中在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0097] 图36显示了接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后，植入示例性药物递送装置1(STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体)，随后单个小鼠的图像。图像显示了在CD4+ T细胞耗竭的小鼠中在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0098] 图37A-37C显示了可生物降解水凝胶支架延伸有效载荷在原位的局部释放，使得能够聚焦围手术期的癌症免疫疗法。图37A显示了负载R848的代表性支架的图。图37B显示了描述模型小分子有效载荷(Cy7羧酸)的体内释放曲线的荧光IVIS成像。图37C显示了Cy7羧酸体内释放曲线的量。使用n＝5个生物学重复进行一次实验。显示了每个时间点的倍数差异。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SD表示。*p≤0.05、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0099] 图38A-38F显示了水凝胶支架延伸生物制剂和小分子在体外的释放。将支架置于PBS(pH 7.4)中，使用荧光酶标仪或HPLC测量药物释放。评价下述有效载荷：抗-PD-1(图38A)、IL-15sa(图38B)、来那度胺(图38C)、塞来昔布(图38D)、2’3’-cGAMP(2’3’-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的模型化合物，“STING-RR”)(图38E)和R848(图38F)。以生物学重复(n＝4+)3次进行实验。数据以平均值±SD表示。
[0100] 图39显示了植入示例性药物递送装置17(STING激动剂)、18(IL-15超激动剂)或19(抗-PD-1抗体)，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在6-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。倍增STING激动剂或IL-15超激动剂的剂量产生显著的有效性，表明可以将这些化合物作为单药疗法，而倍增抗-PD-1的剂量则未产生上述结果。
[0101] 图40是装置1的图像，其显示了水凝胶的机械完整性。
[0102] 图41是负载ALEXA 750染料的装置(左图)和未负载荧光染料的对照装置(右图)的图像。荧光图像表明负载的小分子均匀地分布在整个水凝胶中。
[0103] 图42显示了植入示例性药物递送装置1，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。评价了下述的组：未经治疗(假手术)，空水凝胶，腹腔注射三重组合(2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1)，静脉内注射三重组合(2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1)，局部施用三重组合(2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1)或装置1。将水凝胶置于肿瘤切除部位，在溶液中的三重组合的局部施用也在此处。
[0104] 图43显示了一系列图，其中2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1(装置1)的持续局部释放在大多数小鼠中阻止了肿瘤复发和转移，如生物发光的4T1-Luc2细胞的总通量所示。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0105] 图44是图42中所示的所有组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用对数秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有三重组合的水凝胶进行治疗的组进行统计。**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0106] 图45显示了植入示例性药物递送装置11-6和20，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。将这些装置置于肿瘤切除部位。
[0107] 图46是显示将图45中所述实验的装置11、12和20施用后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量与装置1(含有抗-PD-1作为抗体与IL-15sa和2’3’-cGAMP联用)进行比较的一系列图。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0108] 图47是显示将图45中所述实验的装置13施用后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量与装置1(含有IL-15sa作为细胞因子与2’3’-cGAMP和抗-PD-1联用)进行比较的一系列图。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0109] 图48是显示将图45中的装置14-16施用后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量与装置1(含有2′3′-cGAMP作为先天免疫激活剂与IL-15sa和抗-PD-1联用)进行比较的一系列图。
显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0110] 图49A-49C显示了装置1、11、12和20(图49A)；装置1和13(图49B)，以及装置1和14-16(图49C)的一系列Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用对数秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有抗-PD-1(装置1)(图49A)、IL-15sa(装置1)(图
49B)或2′3′-cGAMP(装置1)(图49C)的水凝胶进行治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤
0.01、***p≤0.001。
49B)或2′3′-cGAMP(装置1)(图49C)的水凝胶进行治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤
0.01、***p≤0.001。
[0111] 图50显示了植入示例性药物递送装置2、9和10，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。将装置置于肿瘤切除部位中。
[0112] 图51是显示将图50中所述实验的示例性药物递送装置2、9和10施用后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量与装置1进行比较的一系列图。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0113] 图52显示了装置1、2、9和10的一系列Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用对数秩(Mantel-Cox)检验相对于使用装置1进行治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001。
[0114] 图53是显示对手术后10天的血液中分离的白细胞进行流式细胞术分析的一系列图。图中证实了向小鼠施用适宜抗体后NK细胞、CD8+ T细胞和CD4+ T细胞被耗竭。
[0115] 图54显示了植入示例性药物递送装置1，随后接种和切除源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后单个小鼠的图像。图像显示了在NK细胞、CD8+ T细胞或CD4+ T细胞被耗竭的小鼠；或者先天性免疫信号传导(IFNAR1)被抑制的小鼠中在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0116] 图55是图54中描述的实验中所有组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用对数秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有三重组合的水凝胶(装置1)进行治疗和使用PSB(对照)进行治疗的组进行统计。*p≤0.05、***p≤0.001。
[0117] 图56是显示将图45中所述实验的示例性药物递送装置1施用后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0118] 图57A-57F是显示2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1持续局部释放增加先天性和适应性抗肿瘤免疫细胞数以及细胞因子的一系列图。从原位接种4T1-Luc2细胞后10天的小鼠切除肿瘤，并将装置1置于切除部位。从手术后3或14天的小鼠收集脾脏进行流式细胞术分析，从手术后14天的小鼠收集血液进行细胞因子分析。图57A-57C显示了观察到具有活化的和效应物表型的白细胞数增加。显示了对NK细胞(第3天)(图57A)、树突状细胞(第3天)(图57B)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞(第14天)(图57C)亚群的流式细胞术门控定量。图57D-57E显示了观察到产生促炎性细胞因子和溶细胞分子的T细胞数增加。显示了对CD4+T细胞和CD8+T细胞(第14天)的流式细胞术门控定量。在进行流式细胞术之前，在存在佛波醇酯、离子霉素和布雷非德菌素A(图57D)或由4T1细胞表达的特异性免疫显性肽(存活素66-74)和布雷非德菌素A(图57E)存在的条件下，将脾细胞培养5小时。图57F显示了在手术后第14天收集的血浆中观察到细胞因子的浓度升高。显示了I型干扰素的水平(见图57F)。由多路复用激光珠技术产生数据。使用双尾非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。*p≤
0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0119] 图58是显示在图57A-57F所述的实验中在手术后第14天收集的血浆中观察到细胞因子浓度升高的图。显示了一系列细胞因子的水平。由多路复用激光珠技术产生数据。使用双尾非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0120] 图59是显示2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1的持续局部释放在肺部增加若干白细胞亚群数量的图。在图57A-57F中所述实验的手术后第14天收集肺脏，并制备用于流式细胞术的单细胞悬液。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01。
[0121] 图60是显示示例性药物递送装置1对母体4T1(缺乏luc2转基因)的有效性与示例性药物递送装置1对具有源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤的小鼠中的4T1-luc2有效性相当的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。
[0122] 图61显示了植入示例性药物递送装置1随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的小鼠对比未经治疗小鼠的单个小鼠的图像。没有切除肿瘤，在肿瘤周围植入装置。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。
[0123] 图62显示了图61中描述的实验中所有组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。图62还显示了显示图61中描述的实验中施用示例性药物递送装置1后生物发光的4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。显示了在所示治疗后肿瘤局部复发或转移至肺部的单个小鼠的数据。
[0124] 图63显示了植入示例性药物递送装置21随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。图63还显示了显示施用示例性药物递送装置21后生物发光的4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。
[0125] 图64显示了植入示例性药物递送装置21对比示例性药物递送装置1，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后小鼠的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。
[0126] 图65是显示下述体外释放速率的一系列图：来自药物递送装置7的2′3′-cGAMP(25μg、50μg、100μg)在PBS(pH 7.4)中；来自药物递送装置22的瑞喹莫德(R848；100μg、200μg)在PBS(pH 7.4)中；来自药物递送装置4的抗-PD-1抗体(150μg、300μg)在PBS(pH 7.4)中；以及来自药物递送装置5的L-15sa(1.5μg、3.0μg)在PBS(pH 7.4)中。
[0127] 图66显示了植入示例性药物递送装置7(50μg或100μg S)、23(50μg STING-RR)或负载STING-RR的藻酸盐(100μg)，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0128] 图67是显示施用图66中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0129] 图68显示了植入示例性药物递送装置22，其中将瑞喹莫德(R848,Invivogen)(50μg、100μg或200μg)溶于水中用于装置的制剂；以及示例性药物递送装置22，其中将瑞喹莫德(R848,Sigma)(200μg)溶于DMSO中用于装置的制剂后的单个小鼠的图像。植入装置，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0130] 图69是显示施用图68中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0131] 图70显示了植入示例性药物递送装置5(3μg IL-15sa)、4(300μg抗-PD-1抗体)、24(15μg IFN-α)、25(3μg IFN-β)和26(30μg IFN-γ)，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0132] 图71是显示施用图70中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0133] 图72显示了植入示例性药物递送装置27(抗-PD-1抗体和抗-CTLA4抗体分别为150μg)、28(50μg瑞喹莫德+抗-PD-1抗体和抗-CTLA4抗体各150μg)、29(300μg M-TriDAP)、30(200μg来那度胺，其中将来那度胺溶于水中用于装置的制剂)和30(200μg来那度胺，其中将来那度胺溶于DMSO中用于装置的制剂)，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0134] 图73是显示施用图72中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0135] 图74显示了植入示例性药物递送装置23(100μg STING-RR)或8(水凝胶4)，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。将植入装置8与STING-RR(100μg)的局部施用联用。还评价了对照组，其中在肿瘤切除后未进行治疗。图像显示了在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0136] 图75是显示施用图74中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0137] 图76显示了植入示例性药物递送装置23，随后接种源自4T1-Luc2同源乳腺癌细胞的肿瘤后的单个小鼠的图像。图像显示了在NK细胞、CD8+ T细胞或CD4+ T细胞被耗竭的小鼠；或者先天性免疫信号传导(IFNAR1)被抑制的小鼠中在4-周时间段内肿瘤的出现/消失情况。上图监测切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0138] 图77是显示施用图76中所述的示例性药物递送装置后生物发光4T1-Luc2细胞的总通量的一系列图。上图显示切除部位(局部肿瘤复发)，而下图显示肺转移。
[0139] 图78是显示STING-RR持续局部释放增加血液中细胞因子水平的一系列图。原位接种4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，将装置23置于切除部位。为了进行细胞因子分析，手术后3天(上图)或14天(下图)从小鼠收集血液。
[0140] 图79是显示2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1(装置1)持续局部释放不改变血液成分的一系列图。在手术后将装置1置于切除部位后第14天采集血液。WBC，白细胞；NE，中性粒细胞；RBC，红细胞；MCV，平均血球容积；RDW，红细胞分布宽度；MCH，平均血球血红蛋白；MCHC，平均血球血红蛋白浓度；MPV，平均血小板容积；PLT，血小板。数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
[0141] 图80A-80B是显示在肿瘤切除后植入多种不同装置(1、2、9、10)或通过不同途径(IP、IV、局部)施用后2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1的持续局部释放具有良好耐受性的一系列图。所列的这些条件均不影响手术后15天测量的肝酶水平(图80A)或小鼠体重的增长(图80B)。在第一周观察到的体重减轻与手术应激本身相关，因为在所有组中均观察到，包括未经治疗的组和空水凝胶阴性对照组。图80A中的数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
[0142] 图81是显示STING-RR(装置23)的持续局部释放不改变血液成分的一系列图。在将装置23置于切除部位的手术后第14天收集血液。WBC，白细胞；NE，中性粒细胞；LY，淋巴细胞；MO，单核细胞；EO，嗜酸性粒细胞；BA，嗜碱性粒细胞；HCT，红细胞压积；RBC，红细胞；MCV，平均血球容积；RDW，红细胞分布宽度；MCH，平均血球血红蛋白；MCHC，平均血球血红蛋白浓度；MPV，平均血小板容积；PLT，血小板。数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
[0143] 图82A-82B是显示肿瘤切除后植入装置23或局部施用后STING-RR持续局部释放具有良好耐受性的一系列图。所列的施用途径或装置均不影响手术后15天测量的肝酶水平(图82A)或小鼠体重的增长(图82B)。在第一周观察到的体重减轻与手术应激本身相关，因为在所有组中均观察到，包括未经治疗的组和空水凝胶阴性对照组。“水凝胶(RR)”指将STING-RR负载至由透明质酸制备的水凝胶(装置23)；“水凝胶(藻酸盐)”指将STING-RR(100μg)负载至由藻酸盐制备的水凝胶。图82A中的数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
[0144] 图83A-83D显示了先天性免疫激动剂的延迟局部释放阻止肿瘤复发和远距离转移，在围手术期治疗后治愈大部分小鼠。在原位接种4T1-Luc2细胞10天后从小鼠切除肿瘤，并对负载下述有效载荷的水凝胶进行评价：抗-PD-1、抗-CTLA-4、IL-15sa、来那度胺、塞来昔布、STING-RR或R848。没有将水凝胶作为阴性对照检查。图83A显示了所有组4T1-Luc2细胞的IVIS成像，并显示了肿瘤负荷。图83B显示了对诱导免疫检查点阻断(装置19或31(300μg抗-CTLA-4))的抗体与无水凝胶进行比较的Kaplan-Meier曲线。图83C显示了对高效细胞因子IL-15sa(装置18)与无水凝胶进行比较的Kaplan-Meier曲线。图83D显示了将各种免疫调节小分子(装置3(1500μg塞来昔布)、22、23或30)与无水凝胶进行比较的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用无水凝胶治疗的组进行统计。**p≤0.01、***p≤0.001。
[0145] 图84A-84F显示了仅当从水凝胶中局部释放时先天性免疫激动剂才有效。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤(见图84A-84B)。图84A显示了所述的所有组的Kaplan-Meier曲线：无水凝胶，每周腹腔(IP)注射R848，每周静脉(IV)注射R848，空水凝胶加上局部施用在溶液中的R848，或者负载R848的水凝胶(装置22)。图84B显示了所述的所有组的Kaplan-Meier曲线：无水凝胶，空水凝胶加上局部施用在溶液中的STING-RR，或者负载STING-RR的水凝胶(装置23)。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天采用单剂量R848或STING-RR向肿瘤进行瘤内(IT)注射(见图84C-84D)。测量肿瘤体积(图84C)和小鼠存活情况(图84D)。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤(见图84E-84F)。图84E显示了所述的所有组的Kaplan-Meier曲线：无水凝胶，Ccl4(装置32)、Ccl5(装置33)或Cxcl10(装置34)。图84F显示了所述的所有组的Kaplan-Meier曲线：无水凝胶，紫杉醇(装置35)或多柔比星(装置
36)。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含所示先天性免疫激动剂的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001。
36)。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含所示先天性免疫激动剂的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001。
[0146] 图85A-85B显示了多次全身施用R848不能获得强大的存活获益，并且与从水凝胶释放的R848相比，耐受性差得多。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤。图85A显示了无水凝胶和三次连续每日IP注射R848(200μg)的Kaplan-Meier曲线。图85B描述了各治疗组小鼠的体重。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。
[0147] 图86显示了在围手术期从水凝胶(装置23或7(100μg S))延长释放后针对给定的负荷剂量STING-RR具有比2’3’-cGAMP更好的有效性。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤。Kaplan-Meier曲线说明了相对生存获益。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于无水凝胶进行统计。**p≤0.01。
[0148] 图87显示了在4℃下冷藏保存1周后在水凝胶中负载的STING-RR保持了其有效性。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤。显示了无水凝胶，负载STING-RR的水凝胶(装置23)，或者负载已在4℃下保存7天的STING-RR的水凝胶的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于无水凝胶进行统计。**p≤0.01。
[0149] 图88A-88B显示了在术中将负载免疫疗法的水凝胶置于肿瘤切除部位是获得治疗益处所需要的。即使将水凝胶置于肿瘤周围，在未将肿瘤除去的情况下，先天性免疫激动剂(作为单药疗法)从水凝胶中的局部释放也不会产生治疗有效性。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天将负载R848(装置22)(图88A)或STING-RR(装置23)(图88B)的水凝胶置于肿瘤周围。显示了对照组和治疗组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。
[0150] 图89显示了联合免疫检查点阻断的延长局部释放赋予了有限的存活获益。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤。显示了无水凝胶或负载抗-PD-1和抗-CTLA-4的水凝胶(每种抗体均负载300μg的装置27)的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。
[0151] 图90A-90B显示了免疫系统的先天和适应性组这两者对所观察到的有效性均是关键的。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，并且将装置22(R848)(图90A)或装置23(STING-RR)(图90B)置于切除部位中。耗竭特异性免疫细胞亚群(NK细胞、CD8+T细胞或CD4+T细胞)或者抑制先天性免疫信号传导(IFNAR1)以探索其对于所观察到的有效性的相对贡献。显示了所述的所有组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有所示先天性免疫激动剂的水凝胶治疗和使用PBS(无耗竭对照)治疗的组进行统计。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001。
[0152] 图91A-91G显示了R848的延长局部释放增加先天性和适应性抗肿瘤免疫细胞的数量以及细胞因子。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，并且将装置22置于切除部位。在手术后3天和14天从小鼠中收集脾脏进行流式细胞术分析，以及在手术后1.5小时、6小时、3天和14天从小鼠收集血液进行细胞因子分析。如图91A-91C中所示，观察到具有活化的和效应物表型的白细胞数增加。显示了对NK细胞(第3天)(图91A)、树突状细胞(第3天)(图91B)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞(第14天)(图91C)亚群的流式细胞术门控定量。图91D显示了观察到中央记忆样CD8+T细胞的数量增加。图91E显示了观察到产生促炎性细胞+ +
因子和溶细胞分子的T细胞数量增加。显示了对CD4T细胞和CD8T细胞(第14天)的流式细胞术门控定量。在进行流式细胞术之前，在由4T1细胞表达的特异性免疫显性肽(gp70423-431)和布雷非德菌素A存在的条件下，将脾细胞培养6小时。在手术后不同时间点收集的血浆中观察到细胞因子浓度升高(见图91F-91G)。在图91F中，显示了I型干扰素的水平。在图91G中，显示了一系列细胞因子的水平。由多路复用激光珠技术产生数据。使用n＝5个生物重复进行一次实验。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
因子和溶细胞分子的T细胞数量增加。显示了对CD4T细胞和CD8T细胞(第14天)的流式细胞术门控定量。在进行流式细胞术之前，在由4T1细胞表达的特异性免疫显性肽(gp70423-431)和布雷非德菌素A存在的条件下，将脾细胞培养6小时。在手术后不同时间点收集的血浆中观察到细胞因子浓度升高(见图91F-91G)。在图91F中，显示了I型干扰素的水平。在图91G中，显示了一系列细胞因子的水平。由多路复用激光珠技术产生数据。使用n＝5个生物重复进行一次实验。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0153] 图92A-92B显示了STING-RR延长的局部释放增加先天性免疫细胞的数量。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，并且将装置23置于切除部位。在手术后3天从小鼠中收集脾脏进行流式细胞术分析。观察到具有活化的和效应物表型的白细胞数量增加。显示了对NK细胞(图92A)和树突状细胞(图92B)亚群的流式细胞术门控定量。
[0154] 图93A-93B显示了R848延长的局部释放增加在肺脏中若干白细胞亚群的数量。在原位植入4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，并且将装置22置于切除部位。手术后第3天(图93A)和第14天(图93B)收集肺脏，并制备用于流式细胞术的单细胞悬液。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01。
[0155] 图94A-94B显示了通过拒绝接种的4T1-Luc2细胞再攻击证实了适应性抗肿瘤记忆应答的诱导。Kaplan-Meier曲线表明，100％的天然小鼠死于致死性攻击，而在使用负载R848(图94A)或STING-RR(图94B)的水凝胶治疗后，100％的小鼠获得了持续的生存获益，其在再攻击的情况下存活下来。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复进行一次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于再攻击小鼠进行统计。***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0156] 图95A-95B显示了先天性免疫激动剂延长的局部释放不改变血液成分。对于使用R848(装置22)(图95A)或STING-RR(装置23)(图95B)进行的治疗，在手术后第3天和第14天收集血液。WBC，白细胞；NE，中性粒细胞；LY，淋巴细胞；MO，单核细胞；EO，嗜酸性粒细胞；BA，嗜碱性粒细胞；HCT，红细胞压积；RBC，红细胞；MCV，平均血球容积；RDW，红细胞分布宽度；MCH，平均血球血红蛋白；MCHC，平均血球血红蛋白浓度；MPV，平均血小板容积；PLT，血小板。
使用n＝5个生物学重复进行一次实验。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
使用n＝5个生物学重复进行一次实验。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。虚线表示已确立的正常范围。
[0157] 图96A-96B显示了先天性免疫激动剂延长的局部释放是安全的。所列的条件均不影响术后3天(R848，装置22)(图96A)或术后15天(STING-RR，装置23)(图96B)测量的肝酶水平。数据以平均值±SD表示(每组n＝6+，进行两次生物重复)。虚线表示已确立的正常范围。
[0158] 图97显示了先天性免疫激动剂延长的局部释放具有非常良好的耐受性。所列的条件均不影响施用R848(装置22)后小鼠体重的增长。在第一周观察到的体重减轻与手术应激本身相关，因为在所有组中均观察到，包括非水凝胶组和空水凝胶阴性对照组。数据以平均值±SD表示(图2d中提供了每组的样本量，进行至少3次生物重复)。
[0159] 图98显示了母体4T1细胞对从水凝胶中局部释放R848的应答与表达Luc2的4T1细胞类似。显示了原位接种野生型4T1细胞且接受无水凝胶或负载R848的水凝胶(装置22)治疗的雌性BALB/cJ小鼠的Kaplan-Meier曲线。这些数据与图84A中的那些类似，其使用了4T1-Luc2细胞。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于无水凝胶进行统计。*p≤0.05。
[0160] 图99A-99C显示了在自发转移的其他模型中围手术期免疫疗法的局部释放是有效的。皮下植入B16-BL6黑色素瘤细胞(图99A)或LLC肺癌细胞(图99B-99C)后，当肿瘤体积达到～600mm3时，切除肿瘤。图99A-99C显示了无水凝胶或R848(装置22)(图99A-99B)或STING-RR(装置23)(图99C)的Kaplan-Meier曲线。
[0161] 图99D显示了可以将其他生物材料用于实现在围手术期免疫疗法延长的局部释放，以产生有意义的存活获益。图99D显示了切除原位4T1-Luc2肿瘤以及使用无水凝胶、负载DMSO载剂的藻酸盐水凝胶(“空”)或负载R848的藻酸盐水凝胶治疗后的小鼠的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有所示先天性免疫激动剂的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05。
[0162] 图100显示了来自藻酸盐的水凝胶支架延长R848的体外释放。将支架置于PBS(pH 7.4)中，并且使用HPLC测量药物释放。使用生物重复(n＝4+)进行3次实验。数据以平均值±SD表示。
[0163] 图101显示了表明NOD1/NOD2激动剂M-TriDAP(装置29)对比无水凝胶的存活获益的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有三重组合的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05。
[0164] 图102A-102C显示了在自发转移的其他模型中围手术期免疫疗法的局部释放是有效的。原位接种母体4T1乳腺癌细胞(图102A)后10天，皮下接种B16-BL6黑色素瘤细胞(图102B)或LLC肺癌细胞(图102C)后，当肿瘤体积达到～600mm3时，从小鼠切除肿瘤。图102A-
102C显示了无水凝胶或者2’3’-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1三重组合(装置1)的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有三重组合的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05。
102C显示了无水凝胶或者2’3’-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1三重组合(装置1)的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。使用生物重复至少进行3次实验。使用对数-秩(Mantel-Cox)检验相对于使用含有三重组合的水凝胶治疗的组进行统计。*p≤0.05。
[0165] 图103A-103C显示了针对给定负载剂量的R848，水凝胶(来自交联的透明质酸或藻酸盐)与聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)支架相比具有更好的生存获益。对于200μg R848的负载剂量而言，大部分R848必需在2小时内释放以提供有效性。图103A显示了当干燥(上图)或湿润(下图)时PLGA支架的图。PLGA支架的制备方法为每个支架称取100mg PLGA(50:50，酯封端，Mn～50,000Da；Akina AP121)，与200μg固体R848(每100mg PLGA)混合过夜，使用1500psi(5000lbs)的压力加压1分钟，使用850psi二氧化碳发泡过夜。图103B显示了将支架置于PBS(pH 7.4)中的累积药物释放情况，通过HPLC测量药物释放。R848从PLGA支架的释放需要数周而非数小时。图103C显示了这种延迟释放减弱了先天性免疫激动剂局部释放的有效性。显示了对照组和治疗组的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。
[0166] 图104A-104B显示了STING-RR延长的局部释放增加了血液中细胞因子的水平。原位接种4T1-Luc2细胞后10天从小鼠切除肿瘤，并且将装置23置于切除部位。在手术后3天(图104A)和14天(图104B)收集的血浆中观察到细胞因子的浓度升高。显示了一系列细胞因子的水平。由多路复用激光珠技术产生数据。使用n＝5个生物重复进行一次实验。使用双侧非配对t-检验进行统计。数据以平均值±SEM表示。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0167] 图105显示了表示Ifn-α(装置24)对于无水凝胶存活获益的Kaplan-Meier曲线。列出了每组小鼠的数量(n)和中位生存期(ms)。
[0168] 发明某些实施方式的详述
[0169] 本申请提供了药物递送组合物和装置。药物递送组合物和装置可以包含生物材料和先天免疫应答的激活剂。药物递送组合物和装置可以包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和细胞因子。药物递送组合物和装置可以包含生物材料、先天免疫应答的激活剂和趋化因子。药物递送组合物和装置可以包含生物材料和细胞因子。药物递送组合物和装置可以包含生物材料和趋化因子。药物递送组合物和装置还可以包含一种或多种适应性免疫应答的激活剂。
[0170] 药物递送组合物和装置可以包含生物材料和适应性免疫应答的激活剂。药物递送组合物和装置还可以包含适应性免疫应答的其他激活剂。药物递送组合物和装置还可以包含其他治疗剂(例如，巨噬细胞效应物功能的调节剂或化疗剂)。
[0171] 在药物递送组合物和装置内的治疗剂可以激活先天性免疫应答系统和/或适应性免疫应答系统，从而提供治疗癌症(特别是实体瘤)的独特工具。本申请提供的组合物、装置、方法、系统和试剂盒也优于现有方法，因为其不需要施用细胞(例如，过继细胞转移)或引入其他成分，如微粒、肽或肿瘤抗原。
[0172] 药物递送组合物和装置可用于在围手术期治疗癌症。特别地，所述组合物和装置可通过在有此需要的对象需要治疗的部位植入一个或多个所述装置来递送免疫疗法。药物递送组合物和装置特别优于现有免疫疗法，因为其能够直接递送至肿瘤切除部位，避免了全身施用。因此，药物递送组合物和装置提供了用于在肿瘤切除部位处递送药物的载体，其避免了可能与免疫疗法的传统全身施用相关的潜在毒性。在肿瘤切除部位集中进行免疫疗法能够类似地改善有效性。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置可用于延缓和/或阻止肿瘤生长、预防癌症复发、预防肿瘤转移和/或预防原发性肿瘤再生长。
[0173] 药物递送组合物和装置
[0174] 生物材料/水凝胶
[0175] 药物递送组合物和装置包含生物材料。在某些实施方式中，生物材料是支架或储库。支架和储库包含适于含有和促进在本申请所述的药物递送组合物和装置中的任何治疗剂持续或延长释放的任何合成或天然存在的材料。因此，生物材料具有为本申请所述的组合物和装置提供有利性质(例如，贮能模量、生物降解、治疗剂的释放曲线)的性质。在某些实施方式中，与在溶液中施用相同治疗剂相比，生物材料延长治疗剂在肿瘤切除部位的释放。在某些实施方式中，与在溶液中施用相同治疗剂相比，生物材料将治疗剂在肿瘤切除部位的释放延长至少5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、18小时、24小时、2天、3天、4天、5天、6天、7天、2周、3周或4周。
[0176] 在某些实施方式中，生物材料包括透明质酸、藻酸盐、壳聚糖、甲壳素、硫酸软骨素、葡聚糖、明胶、胶原蛋白、淀粉、纤维素、多糖、纤维蛋白、乙烯-乙酸乙烯酯(EVA)、聚(乳酸-共-乙醇)酸(PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乙二醇(PEG)、PEG二丙烯酸酯(PEGDA)、含二硫化物的PEGDA(PEGSSDA)、PEG二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)、聚二恶烷酮(PDO)、聚羟基丁酸酯(PHB)、聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)(pHEMA)、聚己内酯(PCL)、聚(β-氨基酯)(PBAE)、聚(酯酰胺)、聚(丙二醇)(PPG)、聚(天冬氨酸)、聚(谷氨酸)、聚(富马酸丙二醇酯)(PPF)、聚(癸二酸酐)(PSA)、聚(三亚甲基碳酸酯)(PTMC)、聚(脱氨基酪氨酸基酪氨酸烷基酯碳酸酯)(PDTE)、聚[双(三氟乙氧基)磷腈]、聚甲醛、单壁碳纳米管、聚磷腈、聚酐、聚(N-乙烯基-2-吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(丙烯酸)(PAA)、聚(甲基丙烯酸)(PMA)、聚缩醛、聚(α酯)、聚(原酸酯)、聚磷酸酯、聚氨酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚羟基脂肪酸酯、其衍生物和/或其组合。
[0177] 在某些实施方式中，生物材料是水凝胶。在某些实施方式中，水凝胶包括透明质酸、藻酸盐、壳聚糖、硫酸软骨素、葡聚糖、明胶、胶原蛋白、淀粉、纤维素、多糖、纤维蛋白、聚乙二醇(PEG)、PEG二丙烯酸酯(PEGDA)、含二硫化物的PEGDA(PEGSSDA)、PEG二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)、聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)(pHEMA)、聚(β-氨基酯)(PBAE)、聚(天冬氨酸)、聚(谷氨酸)、聚(丙二醇)(PPG)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚缩醛、聚甘油或聚葡糖醛酸。在某些实施方式中，当生物材料是水凝胶时，则组合物或装置的治疗剂是亲水性分子。在某些实施方式中，当生物材料是水凝胶时，则组合物或装置的治疗剂是疏水性分子。在某些实施方式中，当生物材料是水凝胶时，则组合物或装置的治疗剂是疏水性或亲水性分子。在某些实施方式中，当生物材料是水凝胶时，则组合物或装置的治疗剂是疏水性和亲水性分子。
[0178] 在某些实施方式中，生物材料是透明质酸或藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料是交联的透明质酸或交联的藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料包含透明质酸或藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料包含交联的透明质酸或交联的藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶是透明质酸或藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶是交联的透明质酸或交联的藻酸盐。
在某些实施方式中，水凝胶包含透明质酸或藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶包含交联的透明质酸或交联的藻酸盐。
在某些实施方式中，水凝胶包含透明质酸或藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶包含交联的透明质酸或交联的藻酸盐。
[0179] 在某些实施方式中，生物材料包含透明质酸。在某些实施方式中，生物材料包含交联的透明质酸。在某些实施方式中，生物材料是透明质酸。在某些实施方式中，生物材料是交联的透明质酸。在某些实施方式中，水凝胶包含透明质酸。在某些实施方式中，水凝胶包含交联的透明质酸。在某些实施方式中，水凝胶是透明质酸。在某些实施方式中，水凝胶是交联的透明质酸。
[0180] 透明质酸，也称为透明质酸(hyaluronan)，是一种阴离子、非硫酸化糖胺聚糖，其广泛分布于结缔组织、上皮细胞和神经组织。其在糖胺聚糖中是独特的，因为其是非硫酸化的，其在质膜中而非高尔基体中形成，透明质酸可以非常巨大，其分子量通常达到几百万。
[0181] 透明质酸是细胞外基质的主要成分之一，在癌症转移中发挥重要作用，因为其对细胞增殖和迁移有重要作用。在一些癌症中，透明质酸水平与恶性肿瘤和预后较差相关。通常将透明质酸作为一些癌症(例如，前列腺癌和乳腺癌)的肿瘤标记物，还可以将其用于监测个体中疾病的进展。因此，在所公开的药物递送组合物和装置中使用透明质酸作为生物材料提供了预料不到的有用的和有效的癌症疗法。
[0182] 在某些实施方式中，透明质酸可以是通过连接巯基甲基丙烯酸酯、十六烷基酰胺 和酪胺 进行
交联的。透明质酸还可以直接与甲醛(HYLAN- )或二乙烯基砜(HYLAN- )交联的。
交联的。透明质酸还可以直接与甲醛(HYLAN- )或二乙烯基砜(HYLAN- )交联的。
[0183] 在某些实施方式中，透明质酸包含巯基修饰的透明质酸和交联剂。在某些实施方式中，水凝胶包含巯基修饰的透明质酸(例如， )和巯基反应性PEGDA交联剂(例如， )。在某些实施方式中，将巯基修饰的透明质酸和巯基反应性PEGDA
交联剂组合以形成用于本申请所述药物递送组合物和装置的交联的水凝胶。
交联剂组合以形成用于本申请所述药物递送组合物和装置的交联的水凝胶。
[0184] 在某些实施方式中，可以对巯基修饰的透明质酸、巯基反应性透明质酸和交联剂的量和浓度进行调整以提供具有所需物理性质(如具有约500Pa至约3000Pa的贮能模量)的药物递送组合物和装置。
[0185] 在某些实施方式中，生物材料包含藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料包含交联的藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料是藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料是交联的藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶包含藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶包含交联的藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶是藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶是交联的藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料不包含藻酸盐。在某些实施方式中，生物材料不是藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶不是藻酸盐。在某些实施方式中，水凝胶不包含藻酸盐。
[0186] 在某些实施方式中，藻酸盐可以通过加入促进交联的盐(例如，氯化钙)进行离子交联。
[0187] 在某些实施方式中，藻酸盐包含藻酸盐和交联剂(例如，氯化钙)。在某些实施方式中，水凝胶包含藻酸盐和交联剂(例如，氯化钙)。在某些实施方式中，将藻酸盐和氯化钙(例如，离子交联剂)组合以形成用于本申请所述药物递送组合物和装置的交联的水凝胶。
[0188] 在某些实施方式中，可以对藻酸盐和氯化钙的量和浓度进行调整以提供具有所需物理性质(如具有约500Pa至约3000Pa的贮能模量)的药物递送组合物和装置。
[0189] 在某些实施方式中，生物材料是疏水性聚合物。在某些实施方式中，疏水性聚合物是乙烯-乙酸乙烯酯(EVA)、聚(乳酸-共-乙醇)酸(PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚二恶烷酮(PDO)、聚羟基丁酸酯(PHB)、聚己内酯(PCL)、聚(酯酰胺)、聚(富马酸丙二醇酯)(PPF)、聚(癸二酸酐)(PSA)、聚(三亚甲基碳酸酯)(PTMC)、聚(脱氨基酪氨酸基酪氨酸烷基酯碳酸酯)(PDTE)、聚[双(三氟乙氧基)磷腈]、聚甲醛、单壁碳纳米管、聚磷腈、聚酐、聚(N-乙烯基-2-吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(丙烯酸)(PAA)、聚(甲基丙烯酸)(PMA)、聚(α酯)、聚(原酸酯)、聚磷酸酯、聚氨酯、聚碳酸酯、聚酰胺或聚羟基脂肪酸酯。当在组合物或装置中的治疗剂是亲水性的时，使用疏水性聚合物作为生物材料可能是特别有用的。预计疏水性治疗剂将在更长时间段内(例如，数天/数周)释放，而非更有利于获得治疗作用的释放时间尺度(例如，数小时)。因此，在某些实施方式中，当生物材料是疏水性聚合物时，则组合物或装置的治疗剂是亲水性分子。
[0190] 在某些实施方式中，生物材料包含交联的生物制剂。在某些实施方式中，生物制剂通过自甾化交联剂二巯基双(乙基1H-咪唑-1-羧酸酯)(DIC)交联。在某些实施方式中，所得到的水凝胶负载小分子。
[0191] 先天免疫应答的激活剂
[0192] 药物递送组合物和装置可以包含先天免疫应答的激活剂。药物递送组合物和装置可以包含一种以上先天免疫应答的激活剂。先天免疫应答激活剂的主要功能包括通过产生化学因子(包括专门的化学介质(例如，细胞因子))将免疫细胞募集到感染部位；激活补体级联以鉴定细菌、激活细胞和促进抗体复合物或死亡细胞的清除；通过专门的白细胞鉴定和除去器官、组织、血液和淋巴中存在的外源性物质；通过已知称为抗原提呈的过程激活适应性免疫系统；以及作为感染物的物理和化学屏障(例如，上皮表面、胃肠道)。通常地，白细胞是执行先天免疫系统作用的白细胞。这些细胞包括自然杀伤细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞。这些细胞通过识别和消除可能引起感染的病原体在免疫系统内发挥作用。
[0193] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是模式识别受体(PRR)的配体。
[0194] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是模式识别受体(PRR)的激动剂。
[0195] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是I型干扰素的诱导物。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是重组干扰素。
[0196] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是NK细胞激活和/或增殖的有效诱导物。在某些实施方式中，“有效诱导物”指直接诱导NK细胞激活和/或增殖的先天免疫应答的激活剂。
[0197] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是树突状细胞激活和/或成熟的有效诱导物。在某些实施方式中，“有效诱导物”指直接诱导树突状细胞激活和/或成熟的先天免疫应答的激活剂。
[0198] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是树突状细胞I型干扰素的有效诱导物。在某些实施方式中，“有效诱导物”指由树突状细胞直接诱导I型干扰素的先天免疫应答的激活剂。
[0199] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是小分子或生物制剂。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是小分子。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是生物制剂。
[0200] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、胞质DNA传感器(CDS)激动剂、Toll样受体(TLR)激动剂、C-型凝集素受体(CLR)激动剂、NOD样受体(NLR)激动剂、RIG-I样受体(RLR)激动剂或炎性体诱导物。
[0201] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、Toll样受体(TLR)激动剂或NOD-样受体(NLR)激动剂。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子或Toll-样受体(TLR)激动剂。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、TLR7激动剂或TLR8激动剂。
[0202] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp/Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Rp)、2′3′-c-di-AMP(PS)2(Rp/Sp)、c-di-GMP、c-di-IMP、HSV-60、ISD、VACV-70、聚(dA:dT)、聚(dG:dC)、热灭活细菌、脂聚糖、脂多糖(LPS)、脂磷壁酸、肽聚糖(PGN)、合成脂蛋白、聚(A:U)、聚(I:C)、单磷脂酰脂质A(MPLA)、GSK1795091、G100、SD-101、MGN1703、CMP-001、鞭毛蛋白(FLA)、聚U、聚(dT)、嘎德莫特、咪喹莫特(R837)、碱基类似物、腺嘌呤类似物、鸟嘌呤类似物、嘌呤衍生物、苯并氮杂卓类似物、咪唑喹啉、噻唑喹啉、洛索立宾、瑞喹莫德(R848)、达托里昔布、sumanirole、N1-甘氨酰[4-((6-氨基-2-(丁氨基)-8-羟基-9H-嘌呤-9-基)甲基)苯甲酰基]精胺(CL307)、CL264、CL097、CL075、MEDI9197、MEDI5083、次黄嘌呤、TL8-506、PF-4878691、艾沙托立宾、SM-324405、SM-324406、AZ12441970、AZ12443988、CpG寡核苷酸、细菌DNA、β葡聚糖、来自真菌和细菌细胞壁的β葡聚糖、γ-D-Glu-mDAP(iE-DAP)、iE-DAP衍生物、胞壁酰二肽(MDP)、MDP衍生物、5′三磷酸双链RNA、聚(dA:dT)、ATP、壳聚糖、硫酸铝钾、焦磷酸钙脱水物、二氧化硅、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)、呫吨酮类似物(例如，DMXAA；vadimezan)、TREX1抑制剂、环二核苷、其衍生物或其药学上可接受的盐。
[0203] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是任何上述激活剂的氟化衍生物。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是任何上述激活剂的O-甲基化衍生物。
[0204] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-GMP、2′3′-c-di-GMP、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-IMP、瑞喹莫德、CpG寡核苷酸、聚肌苷：聚胞苷酸或其药学上可接受的盐。
[0205] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-GMP、2′3′-c-di-GMP、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-IMP的氟化衍生物或其药学上可接受的盐。
[0206] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是3′3′-cGAMP、2′3′-cGAMP、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-cGAM(PS)2(Rp,Sp)、2′2′-cGAMP、c-di-AMP、2′3′-c-di-AMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-GMP、2′3′-c-di-GMP、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Rp)、2′3′-c-di-GM(PS)2(Rp,Sp)、c-di-IMP的O-甲基化衍生物或其药学上可接受的盐。
[0207] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)、c-di-GMP或瑞喹莫德。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)或瑞喹莫德。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)或瑞喹莫德。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)或瑞喹莫德。
[0208] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP,或其药学上可接受的盐。特别地，2′3′-cGAMP(环[G(2′,5′)pA(3′,5′)p])已被描述为具有作为内源性第二信使的功能，诱导STING-依赖性I型干扰素应答。2′3′-cGAMP也已被证明是一种有效的佐剂，其在小鼠中激发产生抗原特异性抗体和T细胞应答。2′3′-cGAMP在其产生的细胞中具有抗病毒功能，但是也可以通过被动扩散穿过细胞膜以对邻近细胞发挥作用。
[0209]
[0210] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)或其药学上可接受的盐。2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)是3'3'-环腺苷一磷酸(c-di-AMP)的2'3'双硫代磷酸酯类似物的Rp,Rp-异构体。其也是STING激动剂。
[0211]
[0212] 2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)
[0213] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是STING激动剂，其中STING激动剂是环二核苷酸。在某些实施方式中，环二核苷酸是2016年8月11日提交的美国专利申请U.S.S.N.15/234,182中公开的任何环二核苷酸，其全部内容通过引用并入本申请。
[0214] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是胞质DNA传感器(CDS)激动剂。在某些实施方式中，CDS激动剂是环GMP-AMP合酶(cGAS)激动剂。
[0215] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2013年12月16日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/653,586中公开的任何STING激动剂或cGAS激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年5月2日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/268,967中公开的任何STING激动剂或cGAS激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年4月29日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/787,611中公开的任何STING激动剂或cGAS激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年7月31日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/908,019中公开的任何STING激动剂或cGAS激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。
[0216] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2011年6月14日提交的美国专利申请U.S.S.N.13/057,662中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2013年12月13日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/106,687中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2016年5月19日提交的美国专利申请U.S.S.N.15/
035,432中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2017年1月11日提交的国际专利申请PCT/US2017/013049中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2017年1月11日提交的国际专利申请PCT/US2017/013066中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年5月18日提交的国际专利申请PCT/US2014/038525中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2013年6月7日提交的美国专利申请U.S.S.N.13/912,960中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2016年1月12日提交的国际专利申请PCT/IB2016/057265中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。
035,432中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2017年1月11日提交的国际专利申请PCT/US2017/013049中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2017年1月11日提交的国际专利申请PCT/US2017/013066中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年5月18日提交的国际专利申请PCT/US2014/038525中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2013年6月7日提交的美国专利申请U.S.S.N.13/912,960中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2016年1月12日提交的国际专利申请PCT/IB2016/057265中公开的任何STING激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。
[0217] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)或其药学上可接受的盐。M-TriDAP是主要存在于革兰氏阴性细菌中的肽聚糖(PGN)的降解产物。M-TriDAP被胞内传感器NOD1(CARD4)以及较小程度地被NOD2(CARD15)所识别。通过NOD1/NOD2识别M-TriDAP诱导涉及丝氨酸/苏氨酸RIP2(RICK,CARDIAK)激酶的信号级联，其与IKK相互作用，导致NF-κB的活化和炎性细胞因子(如TNF-α和IL-6)的产生。M-TriDAP以与Tri-DAP相似的水平诱导NF-κB激活。
[0218] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是TLR7激动剂。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是TLR8激动剂。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是TLR7激活剂和TLR8激动剂。
[0219] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是一种免疫应答调节剂(IRM)。
[0220] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1996年3月22日提交的美国专利申请U.S.S.N.08/620,779中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1997年10月24日提交的美国专利申请U.S.S.N.08/957,192中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2000年3月20日提交的美国专利申请U.S.S.N.09/528,620中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1985年11月15日提交的美国专利申请U.S.S.N.06/798,385中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1994年9月8日提交的美国专利申请U.S.S.N.08/303,216中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1998年12月11日提交的美国专利申请U.S.S.N.09/210,114中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是1999年7月27日提交的美国专利申请U.S.S.N.09/361,544中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2004年10月1日提交的国际专利申请PCT/US2004/032480中公开的任何IRM，其全部内容通过引用并入本申请。
[0221] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是CL307(N1-甘氨酰[4-((6-氨基-2-(丁氨基)-8-羟基-9H-嘌呤-9-基)甲基)苯甲酰基]精胺)，或其药学上可接受的盐。CL307是一种非常高效的TLR7激动剂。滴定实验表明，即使浓度低至20nM(10ng/ml)CL307也能诱导强大的NF-κB激活。
[0222]
[0223] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是CL264,或其药学上可接受的盐。CL264在表达TLR7的细胞中诱导NF-κB激活和IFN-α分泌。CL264是一种TLR7-特异性配体，即使在较高浓度下(>10μg/ml)其也不刺激TLR8。在转染TLR7的HEK293细胞中，CL264以0.1μM的浓度激活NF-κB，其比咪喹莫特低5-10倍。
[0224]
[0225] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是洛索立宾，或其药学上可接受的盐。洛索立宾是在位置N7和C8衍生化的鸟苷类似物。这种核苷是一种免疫系统非常强大的刺激物。洛索立宾通过TLR7激活先天性免疫系统，这种激活需要内体成熟。洛索立宾的识别仅限于TLR7。
[0226]
[0227] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是次黄嘌呤，或其药学上可接受的盐。次黄嘌呤是天然存在的嘌呤衍生物。
[0228]
[0229] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是TL8-506，或其药学上可接受的盐。TL8-506是一种苯并氮杂卓化合物，这是一种Toll样受体8(TLR8)激动剂VTX-2337的类似物。TL8-506比R848和CL075更有效地激活TLR8。TL8-506在TLR8转染的HEK293细胞中诱导NF-κB激活的效力分别比R848和CL075高约50倍和约25倍。TL8-506是一种选择性TLR8激动剂。
[0230]
[0231] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是PF-4878691、艾沙托立宾、SM-324405、SM-324406、AZ12441970、AZ12443988或其药学上可接受的盐。PF-4878691、艾沙托立宾、SM-324405、SM-324406、AZ12441970和AZ12443988是TLR7激动剂。
[0232] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是咪唑喹啉衍生物，包括达托里昔布、咪喹莫特、嘎德莫特、瑞喹莫德、sumanirole及其药学上可接受的盐。
[0233] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是CL097，或其药学上可接受的盐。CL097是瑞喹莫德的高水溶性衍生物(≥20mg/ml)。CL097是TLR7和TLR8的配体。其在TLR7转染的HEK293细胞中以0.4μM(0.1μg/ml)和在TLR8转染的HEK293细胞中以4μM(1μg/ml)诱导NF-κB激活。
[0234]
[0235] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是CL075，或其药学上可接受的盐。CL075(3M002)是一种噻唑并喹啉酮衍生物，其刺激人外周血单核细胞中的TLR8。其激活NF-κB并且优选地触发产生TNF-α和IL-12。CL075还诱导通过TLR7分泌IFN-α，但程度更低。其在TLR8转染的HEK293细胞中以0.4μM(0.1μg/ml)诱导NF-κB激活，并且需要约10倍以上的CL075以便在TLR7转染的HEK293细胞中激活NF-κB。
[0236]
[0237] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是MEDI9197，或其药学上可接受的盐。MEDI9197(3M052)是一种可注射的TLR7和TLR8激动剂。其是一种带有C18脂质部分的咪唑喹啉免疫应答调节剂(IRM)，设计用于从施用部位缓慢扩散。
[0238]
[0239] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是瑞喹莫德(R848)，或其药学上可接受的盐。特别地，瑞喹莫德是一种作为免疫应答调节剂的药剂，具有抗病毒和抗肿瘤活性。将其作为治疗皮肤损伤的局部凝胶，如由单纯疱疹病毒和皮肤T细胞淋巴瘤引起的皮肤损伤。还将其作为增加疫苗作用的佐剂。其具有几种作用机制，既是toll样受体7(TLR7)和8(TLR8)的激动剂，也是阿片样生长因子受体的上调剂。
[0240]
[0241] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是一种TLR7-选择性前效药物(antedrug)。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是SM-324405、AZ12441970或药学上可接受的盐。
[0242] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是一种炎性体诱导剂。炎性体是多聚体蛋白复合物，对宿主防御感染和内源性危险信号至关重要。其促进促炎性细胞因子白介素(IL)-1β和IL-18分泌，并引起称为细胞凋亡的快速和促炎形式的细胞死亡。
[0243] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是NLRP3、AIM2、NLRC4或NLRP1炎性体的诱导剂。
[0244] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是
[0245]
[0246] 或其药学上可接受的盐，其中：R1是H，和R2是H；R1是丁基和R2和H；R1是H和R2是—CO2CH3；或者R1是丁基和R2是—CO2CH3。
[0247] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是咪唑喹啉；咪唑萘啶；吡唑并吡啶；芳基取代的咪唑喹啉；具有1-烷氧基1H-咪唑环系的化合物；恶唑并[4,5-c]-喹啉-4-胺；噻唑并[4,5-c]-喹啉-4-胺；硒唑并[4,5-c]-喹啉-4-胺；咪唑萘啶；咪唑喹啉胺；1-取代，2-取代1H-咪唑并[4,5-C]喹啉-4-胺；稠合的环烷基咪唑并吡啶；1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺；
1-取代1H-咪唑并-[4,5-c]喹啉-4-胺；咪唑并-[4,5-C]喹啉-4-胺；2-乙基1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺；烯属(olfenic)1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺；6,7-二氢-8-(咪唑基-1-基)-
5-甲基-1-氧代-1H,5H-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；吡啶喹喔啉-6-羧酸；6,7-二氢-8-(咪唑基-
1-基)-5-甲基-1-氧代-1H,5H-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；取代的萘并[ij]喹嗪；取代的吡啶喹喔啉-6-羧酸；7-羟基-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸衍生物；取代的苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；7-羟基-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；取代的吡啶并[1,2,3,-de]-1,4-苯并恶嗪；四氢喹啉的N-亚甲基丙二酸酯或其药学上可接受的盐。
1-取代1H-咪唑并-[4,5-c]喹啉-4-胺；咪唑并-[4,5-C]喹啉-4-胺；2-乙基1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺；烯属(olfenic)1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺；6,7-二氢-8-(咪唑基-1-基)-
5-甲基-1-氧代-1H,5H-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；吡啶喹喔啉-6-羧酸；6,7-二氢-8-(咪唑基-
1-基)-5-甲基-1-氧代-1H,5H-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；取代的萘并[ij]喹嗪；取代的吡啶喹喔啉-6-羧酸；7-羟基-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸衍生物；取代的苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；7-羟基-苯基[ij]喹嗪-2-羧酸；取代的吡啶并[1,2,3,-de]-1,4-苯并恶嗪；四氢喹啉的N-亚甲基丙二酸酯或其药学上可接受的盐。
[0248] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2016年8月31日提交的美国专利申请U.S.S.N.15/253,215中公开的任何NLRP3激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。
[0249] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是RORγ激动剂。RORγ激活剂是促进RORγ活性的药剂，如通过结合并激活RORγ或通过增加患者或细胞群中RORγ的表达。RORγ激动剂可以是例如有机小分子、多肽或核酸。在文献中报道了多种RORγ激动剂，如在美国专利申请U.S.S.N.14/398,774；Zhang等，Mol.Pharmacol.(2012)vol.82，第583-590页；和Wang等，ACS Chem.Biol.(2010),vol.5，第1029-1034页中，其均通过引用并入本申请。
[0250] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是RORγ激动剂如
[0251]
[0252] 及其药学上可接受的盐。
[0253] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是如在美国专利申请U.S.S.N.14/398,774中所描述的通用或特定化合物，如式(I)所示的化合物：
[0254]
[0255] 或其药学上可接受的盐；其中：
[0256] A是芳基、芳烷基、杂芳基、环烷基或杂环烷基；其分别任选地被1、2或3个独立地选自下组的取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、—N(R4)(R5)、—CO2R6、—C(O)R6、—CN、—C1-4亚烷基-C1-4烷氧基、—C1-4亚烷基-N(R4)(R5)、—C1-4亚烷基-CO2R6、—O—C1-6亚烷基-N(R4)(R5)、—N(R4)C(O)—C1-6亚烷基-N(R4)(R5)、—S(O)pC1-6烷基、—SO2N(R4)(R5)、—N(R4)SO2(C1-6烷基)、—C(O)N(R4)(R5)和—N(R4)C(O)N(R4)(R5)；
[0257] X是—O—[C(R6)(R7)]—[C(R6)2]m-Ψ、—O—C(R6)2—C(R6)(R7)—C(R6)2-Ψ、—O—C(R6)2—C(R6)(R7)-Ψ、—C(R6)2—[C(R6)(R7)]—[C(R6)2]m-Ψ、—C(O)—[C(R6)(R7)]—[C(R6)2]m-Ψ、—C(R6)2—N(R8)—[C(R6)(R7)]—[C(R6)2]m-Ψ、—C(R6)═N-Ψ、—C(R6)2C(R6)═N-Ψ、—N═C(R6)-Ψ或—N═C(R6)C(R6)2-Ψ；其中Ψ是与式I中磺酰胺环的氮原子连接的键；
[0258] Y是—N(R2)(R3)或—O-芳烷基，其中所述芳烷基任选地被独立地选自下组的1、2或3个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、—N(R4)(R5)、—CN、—CO2—C1-6烷基、—C(O)—C1-6烷基、—C(O)N(R4)(R5)、—S(O)pC1-6烷基、—SO2N
4 5 4
(R)(R)和—N(R)SO2(C1-6烷基)；
4 5 4
(R)(R)和—N(R)SO2(C1-6烷基)；
[0259] R1代表分别独立地存在的氢、卤素或C1-6烷基；
[0260] R2是—C(O)-芳基、—C(O)-芳烷基、—C(O)—[C(R6)2]m-环烷基、—C(O)—[C(R6)2]m-杂环基、—C(O)—C1-6烷基、—C(O)—C1-6亚烷基-C1-6烷氧基、—C(O)—C1-6亚烷基-环烷基或—C(O)—C1-6亚烷基-杂环烷基；其分别任选地被独立地选自下组的1、2或3个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、—N(R4)(R5)、—CN、—CO2—C1-6烷基、—C(O)—C1-6烷基、—C(O)N(R4)(R5)、—S(O)pC1-6烷基、—SO2N(R4)(R5)和—N(R4)SO2(C1-6烷基)；
[0261] R3是氢或C1-6烷基；
[0262] R4和R5分别独立地代表分别存在的氢或C1-6烷基；或者R4和R5与其所连接的氮原子一起形成3-7元杂环；
[0263] R6独立地代表分别存在的氢或C1-6烷基；
[0264] R7是氢、羟基、C1-6羟基烷基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、—CO2R6、C1-6亚烷基-CO2R6、C1-4羟基亚烷基-CO2R6、—N(R4)(R5)、C1-6亚烷基-N(R4)(R5)、C1-6羟基亚烷基-N(R4)(R5)、—N(R4)C(O)R9、C1-6亚烷基-N(R4)C(O)R9、C1-6亚烷基-C(O)N(R4)(R5)、—N(R4)CO2—C1-6烷基或C1-6亚烷基-N(R4)(C(O)N(R4)(R5)；或者R7是杂环烷基或C1-4亚烷基-杂环烷基，其中杂环烷基任选地被独立地选自下组的1、2或3个取代基取代：氧代、卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-6烷氧基和C1-6卤代烷氧基；
[0265] R8是氢、C1-6烷基或—C(O)—C1-6烷基；
[0266] R9是氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-N(R4)(R5)或C1-6亚烷基-N(R4)C(O)—C1-6烷基；
[0267] n是1或2；以及
[0268] m和p分别独立地代表分别存在的0、1或2。
[0269] 在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂是2014年11月4日提交的美国专利申请U.S.S.N.14/398,774中公开的任何RORγ激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。在某些实施方式中，先天免疫应答的激活剂2016年8月23日提交的美国专利申请U.S.S.N.15/120,798中公开的任何RORγ激动剂，其全部内容通过引用并入本申请。
[0270] 细胞因子
[0271] 药物递送组合物和装置可以包含细胞因子。细胞因子是在细胞信号传导中具有重要作用的一类广泛的小蛋白(～5-20kDa)。其释放会对其周围细胞的行为产生影响。细胞因子作为免疫调节剂参与自分泌信号传导、旁分泌信号传导和内分泌信号传导。细胞因子包括趋化因子、干扰素、白介素、淋巴因子和肿瘤坏死因子。细胞因子由多种细胞产生，包括免疫细胞，如巨噬细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞和肥大细胞，以及内皮细胞、成纤维细胞和各种基质细胞。其通过受体发挥作用并且在免疫系统中起重要作用。细胞因子调节基于液体和细胞的免疫应答之间的平衡，其调控特定细胞群的成熟、生长和反应性。一些细胞因子以复杂的方式增强或抑制其他细胞因子的作用。细胞因子在宿主对感染、免疫应答、炎症、创伤、败血症、癌症和繁殖的应答中是重要的。
[0272] 而且，目前本领域公知的是，必须解决递送方法、给药和方案以及毒性相关的问题以使得很多细胞因子和趋化因子的免疫刺激功能得以充分利用。
[0273] 在某些实施方式中，细胞因子是IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2超级因子、IL-6、IL-7、IL-9、AM0010、IL-12、IL-15、IL-15超激动剂、ALT-803、NIZ985、IL-16、IL-18、IL-21、IL-21超激动剂、得尼考新、IL-21超激动剂抗体、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、细胞因子融合、RG7461、RG7813或M9241。
[0274] 在某些实施方式中，细胞因子是ALT-803、NIZ985、得尼考新、RG7461、RG7813、M9241、IFN-α、IFN-β或IFN-γ。
[0275] 在某些实施方式中，细胞因子是IL-15超激动剂或IL-21。在某些实施方式中，细胞因子是IL-15超激动剂。
[0276] 在某些实施方式中，细胞因子是IL-15超激动剂、IL-21、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、CCL4、CCL5或CXCL10。在某些实施方式中，细胞因子是IL-15超激动剂、IFN-α、IFN-β或IFN-γ。在某些实施方式中，细胞因子是IL-15超激动剂或IFN-α。
[0277] IL-15(白介素15)是一种与IL-2具有结构相似性的细胞因子，并且在被病毒感染后由单核吞噬细胞分泌。IL-15诱导自然杀伤细胞的细胞增殖，其主要作用是杀死病毒感染的细胞。IL-15与可溶性IL-15Rα组合产生称为IL-15超激动剂(IL-15sa)的复合物，其具有比单独的IL-15更强的生物活性。IL-15sa是抗肿瘤和抗病毒剂，因为其能够选择性扩增NK和记忆CD8+ T(mCD8+ T)淋巴细胞。
[0278] 在某些实施方式中，细胞因子是一种称为ALT-803的IL-15超激动剂，一种IL-15超激动剂。认为ALT-803诱导记忆CD8+ T细胞增殖、上调参与先天性免疫的受体、分泌干扰素-γ以及在没有抗原刺激的情况下获得杀死恶性细胞的能力。因而，ALT-803能够促进记忆CD8+ T细胞的扩增和激活，同时将其转化为具有强大抗肿瘤活性的先天免疫效应细胞。ALT-803是IL-15突变体和IL-15Rα/Fc复合物的融合蛋白，其最近已作为直接免疫调节剂进入临床试验。与IL-15相比，ALT-803显示出生物活性增强>25倍。
[0279] 在某些实施方式中，细胞因子是NIZ985(hetIL-15)。研究表明，给予hetIL-15能够促进肿瘤浸润增加和CD8+ T细胞(包括肿瘤特异性T细胞)持续存在，并导致CD8+/Treg的比例增加。肿瘤驻留CD8+ T细胞显示出效应细胞的特征，其特征为增殖增加(Ki67+)和具有较高的潜在细胞毒性(颗粒酶B+)。在缺乏hetIL-15的情况下，较小的肿瘤浸润T细胞群显示出较高水平的耗竭标记物PD-1，这可能限制了其抗癌作用。提供hetIL-15能够导致PD-1淋巴细胞表达的显著降低，这是减轻耗竭表型的一种潜在机制。临床前癌症研究支持在肿瘤免疫治疗方法中使用hetIL-15，以通过有利于效应物而非调控细胞来促进抗肿瘤应答的发展。
[0280] 在某些实施方式中，细胞因子是干扰素α(IFN-α)。IFN-α蛋白由白细胞产生。其主要参与针对病毒感染的先天免疫应答。
[0281] 在某些实施方式中，细胞因子是干扰素β(IFN-β)。IFN-β包含由成纤维细胞产生的蛋白并且参与先天免疫应答。IFN-β刺激巨噬细胞和NK细胞这两者以激发抗病毒应答，并且还具有针对肿瘤的活性。在小鼠中，IFN-β抑制免疫细胞产生生长因子，从而减缓肿瘤生长，并抑制产生血管的生长因子的其他细胞，进而阻止肿瘤血管生成并阻碍肿瘤进入血管系统。
[0282] 在某些实施方式中，细胞因子是干扰素γ(IFN-γ)。IFN-γ或II型干扰素是用于先天和适应性免疫的细胞因子。IFN-γ是巨噬细胞重要的激活剂和II型主要组织相容性复合物(MHC)分子表达的诱导物。IFN-γ在癌细胞中的体外研究是广泛的，结果表明IFN-γ的抗增殖活性导致生长抑制或细胞死亡，其通常由细胞凋亡诱导但有时通过自噬诱导。临床施用IFN-γ导致卵巢癌、膀胱癌和黑色素瘤患者的生存期得到改善。
[0283] 在某些实施方式中，细胞因子是IL-1β。IL-1β以蛋白原形式产生，其通过半胱天冬酶1(caspase 1)蛋白水解加工成其活性形式。这种细胞因子是炎症应答的重要介质，参与多种细胞活性。
[0284] 在某些实施方式中，细胞因子是趋化因子。趋化因子是一类小细胞因子家族。趋化因子的主要作用是作为化学引诱物引导细胞迁移。一些趋化因子在免疫监视过程中控制免疫系统的细胞，如将淋巴细胞导向淋巴结，因此其可以通过与驻留在这些组织中的抗原提呈细胞相互作用来筛选入侵的病原体。将这些称为稳态趋化因子，并且其在不需要刺激其源细胞的情况下产生和分泌。一些趋化因子在发育中起作用，促进血管生成(新血管生长)，或将细胞导向为细胞成熟提供关键的特异性信号的组织。其他趋化因子是炎性的，并且从对细菌、病毒和导致机体损伤的物质(如二氧化硅或痛风中出现的尿酸盐晶体)生应答的多种细胞释放。其释放通常由促炎性细胞因子(如白介素1)刺激。炎性趋化因子的主要功能是作为白细胞的化学引诱物，从血液中募集单核细胞、中性粒细胞和其他效应细胞到感染或组织损伤部位。某些炎性趋化因子激活细胞以启动免疫应答或促进伤口愈合。其由很多不同细胞类型释放，用于引导先天性免疫系统和适应性免疫系统的细胞。
[0285] 而且，目前本领域公知的是，必须解决递送方法、给药和方案以及毒性相关的问题以使得很多细胞因子和趋化因子的免疫刺激功能得以充分利用。
[0286] 在某些实施方式中，趋化因子是CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL13、CXCL16或CX3CL1。
[0287] 适应性免疫应答的激活剂
[0288] 药物递送组合物和装置可以包含一种或多种适应性免疫应答的激活剂。
[0289] 适应性免疫应答系统，也称为获得性免疫系统，是整个免疫系统的一个子系统，其包括高度特异性的系统细胞以及消除或预防病原体生长的过程。适应性免疫系统是在脊椎动物中发现的两个主要的免疫策略之一(另一个是先天性免疫系统)。适应性免疫在对特定病原体的初始应答后产生免疫记忆并导致随后与该病原体相遇时的应答增强。获得性免疫的这一过程是疫苗接种的基础。与先天性系统类似的是，适应性系统包括体液免疫组分和细胞介导的免疫组分。与先天性系统不同的是，适应性免疫系统对特定病原体是高度特异性的。
[0290] 当病原体逃避先天性免疫应答系统，产生阈值水平的抗原，并产生激活树突状细胞的“陌生人”或“危险”的信号时，在脊椎动物中触发适应性免疫应答系统。获得性免疫系统的主要功能包括在抗原提呈过程中在“自身”存在的条件下识别特定的“非自身”抗原；产生定制以消除特定病原体或病原体感染的细胞的应答；以及发展免疫记忆，其中通过记忆B细胞和记忆T细胞“记住”病原体。
[0291] 激活适应性免疫应答系统(例如，激活治疗性抗肿瘤免疫)的有用方法包括阻断免疫检查点。免疫检查点指固定进入免疫系统的大量抑制性途径，这些途径对于维持自身耐受和调节外周组织中生理免疫应答的持续时间和幅度至关重要，以便最小化附带组织损伤。肿瘤将某些免疫检查点途径作为免疫抗性的主要机制，特别是针对肿瘤抗原特异性T细胞。由于很多免疫检查点由配体-受体相互作用所启动，因而能够容易地通过抗体对其进行阻断或通过重组形式的配体或受体对其进行调控。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抗体是获得FDA批准的首个此类免疫疗法(伊匹单抗)。其他免疫检查点蛋白(如程序性细胞死亡蛋白1(PD-1))阻断剂的初步临床发现表明存在广泛和多样的机会以增强具有产生持久临床应答潜能的抗肿瘤免疫。
[0292] PD-1作为免疫检查点发挥作用，其通过阻止T细胞激活而在下调免疫系统中发挥重要作用，从而减少自身免疫并促进自身耐受。PD-1的抑制作用是通过在淋巴结的抗原特异性T细胞中促进细胞凋亡(程序性细胞死亡)同时在调节性T细胞(抑制性T细胞)中减少细胞凋亡的双重机制来实现的。阻断PD-1的一类新型治疗剂PD-1抑制剂(例如，抗-PD-1抗体)激活免疫系统以攻击肿瘤，因此用于治疗一些类型的癌症。此外，程序性死亡配体1(PD-L1)的抗体对激活适应性免疫应答提供与靶向PD-1的抗体类似的影响。因此，预计包含抗-PD-L1抗体的组合物和装置提供与包含抗-PD-1抗体的那些类似的治疗作用。
[0293] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是小分子。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是生物制剂。在某些实施方式中，生物制剂是蛋白。在某些实施方式中，生物制剂是抗体或其片段。在某些实施方式中，生物制剂是编码蛋白的核酸。
[0294] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体、抗-PD-L1抗体、抗-CTLA-4抗体、抗-TIM3抗体、抗-OX40抗体、抗-GITR抗体、抗-LAG-3抗体、抗-CD137抗体、抗-CD3抗体、抗-CD27抗体、抗-CD28抗体、抗-CD28H抗体、抗-CD30抗体、抗-CD39抗体、抗-CD40抗体、抗-CD43抗体、抗-CD47抗体、抗-CD48抗体、抗-CD70抗体、抗-CD73抗体、抗-CD96抗体、抗-CD123抗体、抗-CD155抗体、抗-CD160抗体、抗-CD200抗体、抗-CD244抗体、抗-ICOS抗体、抗-TNFRSF25抗体、抗-TMIGD2抗体、抗-DNAM1抗体、抗-BTLA抗体、抗-LIGHT抗体、抗-TIGIT抗体、抗-VISTA抗体、抗-HVEM抗体、抗-唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(Siglec)抗体、抗-GAL1抗体、抗-GAL3抗体、抗-GAL9抗体、抗-BTNL2(嗜乳脂蛋白)抗体、抗-B7-H3抗体、抗-B7-H4抗体、抗-B7-H5抗体、抗-B7-H6抗体、抗-KIR抗体、抗-LIR抗体、抗-ILT抗体、抗-CEACAM1抗体、抗-CEACAM5抗体、抗-CEACAM6抗体、抗-MICA抗体、抗-MICB抗体、抗-NKG2D抗体、抗-NKG2A抗体、抗-A2AR抗体、抗-C5aR抗体、抗-TGFβ抗体、抗-TGFβR抗体、抗-CXCR4抗体、抗-CXCL12抗体、抗-CCL2抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-13抗体、抗-IL-23抗体、抗-磷脂酰丝氨酸抗体、抗-神经纤毛蛋白抗体、抗-GalCer抗体、抗-HER2抗体、抗-VEGFA抗体、抗-VEGFR抗体、抗-EGFR抗体、抗-Tie2抗体、抗-CCR4抗体或抗-TRAIL-DR5抗体。
[0295] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是上文所列任意抗体的片段。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是上文所列任意抗体的人源化形式。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是上文所列任意抗体的单链。在某些实施方式中，免疫应答的激活剂是上文所列任意抗体的多聚体形式(例如，二聚体IgA分子，五价IgM分子)。
[0296] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体、激动剂抗-CD137抗体、激动剂抗-CD40抗体、抗-CTLA-4抗体、抗-LAG-3抗体、抗-TIM3或其组合。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体或抗-CTLA-4抗体。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-CTLA-4抗体。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是激动剂抗-CD137抗体。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-LAG-3抗体。在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗-TIM3抗体。
[0297] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、pidilizumab、伊匹单抗(ipilimumab)、曲美姆单抗(tremelimumab)、度伐单抗(durvalumab)、阿特朱单抗(atezolizumab)、avelumab、PF-06801591、utomilumab、PDR001、PBF-509、MGB453、LAG525、AMP-224、INCSHR1210、INCAGN1876、INCAGN1949、samalizumab、PF-05082566、urelumab、lirilumab、lulizumab、BMS-936559、BMS-936561、BMS-986004、BMS-986012、BMS-986016、BMS-986178、IMP321、IPH2101、IPH2201、varlilumab、ulocuplumab、monalizumab、MEDI0562、MEDI0680、MEDI1873、MEDI6383、MEDI6469、MEDI9447、AMG228、AMG820、CC-90002、CDX-1127、CGEN15001T、CGEN15022、CGEN15029、CGEN15049、CGEN15027、CGEN15052、CGEN15092、CX-072、CX-2009、CP-870893、lucatumumab、达西珠单抗(dacetuzumab)、Chi Lob 7/4、RG6058、RG7686、RG7876、RG7888、TRX518、MK-4166、IMC-CS4、emactuzumab、曲妥珠单抗(trastuzumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)、cabiralizumab、margetuximab、enoblituzumab、mogamulizumab、帕尼单抗(panitumumab)、carlumab、贝伐单抗(bevacizumab)、利妥昔单抗(rituximab)、西妥昔单抗(cetuximab)、fresolimumab、地诺单抗(denosumab)、MGA012、AGEN1884、AGEN2034、LY3300054、JTX-4014、teplizumab、FPA150、PF-04136309、PF-06747143、AZD5069、GSK3359609、FAZ053、TSR022、MBG453、REGN3767、REGN2810、GSK3174998、MOXR0916、PF-04518600、RO7009789、BMS986156、GWN323、JTX-2011、NKTR-214、DS-8273a、NIS793或BGB-A317。
[0298] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、pidilizumab、伊匹单抗(ipilimumab)、曲美姆单抗(tremelimumab)、度伐单抗(durvalumab)、阿特朱单抗(atezolizumab)、REGN2810、MGA012、AGEN1884、AGEN2034、LY3300054、JTX-4014或avelumab。
[0299] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗体模拟物或抗体融合。
[0300] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是双特异性抗体。在某些实施方式中，双特异性抗体是RG7802(靶向癌胚抗原(CEA)和CD3受体的抗体)、RG7828(靶向B细胞上的CD20和T细胞上的CD3的双特异性单克隆抗体)、RG7221(靶向VEGF和血管生成素2的双特异性单克隆抗体)、RG7386(靶向FAP和DR5的双特异性单克隆抗体)、ERY974(靶向CD3和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的双特异性单克隆抗体)、MGD012(靶向PD-1和LAG-3的双特异性单克隆抗体)、AMG211(靶向CD3和CEA的双特异性T细胞衔接器)、MEDI573(靶向IGF1和IGF2的双特异性单克隆抗体)、MEDI565(靶向CD3和CEA的双特异性单克隆抗体)、FS17(未公开靶点)、FS18(靶向LAG3和未公开靶点的双特异性单克隆抗体)、FS20(未公开靶点)、FS22(未公开靶点)、FS101(靶向EGFR和HGF的双特异性单克隆抗体)、FS117(未公开靶点)、FS118(靶向LAG3和PD-L1的双特异性单克隆抗体)、RO6958688(靶向CD3和CEA的双特异性单克隆抗体)、MCLA-128(靶向HER2和HER3双特异性单克隆抗体)、M7824(靶向PD-L1和TGFβ的双功能性融合蛋白)、MGD009(识别B7-H3和CD3的人源化抗体)或MGD013(双特异性PD-1和LAG-3抗体)。
[0301] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是抗体-药物缀合物。在某些实施方式中，抗体-药物缀合物是曲妥珠单抗emtansine、奥英妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)、PF-06647020、PF-06647263、PF-06650808、RG7596、RG7841、RG7882、RG7986、DS-8201、ABBV-399、glembatumumab vedotin、奥英妥珠单抗、MEDI4276或其药学上可接受的盐。
[0302] 在某些实施方式中，适应性免疫应答的激活剂是小分子。在某些实施方式中，小分子是IDO抑制剂、TGFβR抑制剂、BRAF抑制剂、KIT抑制剂、A2aR抑制剂、Tie2抑制剂、精氨酸酶抑制剂、iNOS抑制剂、HIF1α抑制剂、STAT3抑制剂、PGE2抑制剂、PDE5抑制剂、RON抑制剂、mTOR抑制剂、JAK2抑制剂、HSP90抑制剂、PI3K-AKT抑制剂、β-连环蛋白抑制剂、GSK3β抑制剂、IAP抑制剂、HDAC抑制剂、DNMT抑制剂、BET抑制剂、COX2抑制剂、PDGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、BCR-ABL抑制剂、蛋白酶体抑制剂、血管生成抑制剂、MEK抑制剂、BRAF+MEK抑制剂、泛-RAF抑制剂、EGFR抑制剂、PARP抑制剂、谷氨酰胺酶抑制剂、WNT抑制剂、FAK抑制剂、ALK抑制剂、CDK4/6抑制剂或FGFR3抑制剂。
[0303] 在某些实施方式中，小分子是塞来昔布、舒尼替尼、伊马替尼、维罗非尼、达拉菲尼、硼替佐米、伏立诺他、泊马度胺、沙利度胺、来那度胺、epacadostat、indoximid、GDC0919、BMS986205、AZD8055、AZD4635、CPI-444、PBF509、LCL161、CB-839、CB-1158、FPA008、BLZ945、IPI-549、pexidartinib、galunisertib、birinapant、曲美替尼、考比替尼、binimetinib、ensartib、吉非替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、尼达尼布、SYM004、维利帕尼、奥拉帕尼、BGB-290、依维莫司、LXH254、阿扎胞苷、地西他滨、瓜地西汀、RRX001、CC486、罗米地辛、恩替司他、帕比司他、他莫昔芬、依鲁替尼、delalisib、capmatinib、司美替尼、玻玛西尼、帕博西尼、glasdegib、恩杂鲁胺、AZD9150、PF-06840003、SRF231、Hu5F9-G4、CC-900002、TTI-621、WNT974、BGJ398或LY2874455或其药学上可接受的盐。
[0304] 其他治疗剂
[0305] 药物递送组合物和装置可以含有其他治疗剂。
[0306] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置可以含有巨噬细胞效应功能的调节剂。巨噬细胞是源自循环单核细胞的免疫细胞，存在于所有组织中，并参与很多病理状态。巨噬细胞在癌症中发挥二分作用，其能够促进肿瘤生长，但也能作为治疗性抗体的关键免疫效应物。巨噬细胞表达所有类别的Fcγ受体，并且其具有通过抗体依赖性细胞吞噬作用过程破坏肿瘤的潜力。很多研究表明，巨噬细胞的吞噬作用是很多被批准用于治疗癌症的抗体的主要作用机制。因此，正在研究增加对治疗性抗体的巨噬细胞应答的很多方法，包括探索新靶点和开发具有增强的功能的抗体。还可以使用经工程改造的Fc变体、双特异性抗体或抗体-药物缀合物增强巨噬细胞对抗体疗法的应答。巨噬细胞已证明能够成功作为癌症免疫疗法的效应物。
[0307] 在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是抑制骨髓细胞的调节剂，包括骨髓源性抑制细胞(MDSC)。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂可以杀死、耗竭或增强巨噬细胞和/或MDSC。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是抗-CD40抗体、抗-CD47抗体、抗-CSF1抗体或抗-CSF1R抗体。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是SRF231、Hu5F9-G4、CC-900002或TTI-621(抗-CD47抗体)。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是MCS-110(抗-CSF1抗体)。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是FPA008、RG7155、IMC-CS4、AMG820或UCB6352(抗-CSF1R抗体)。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是CSF1R的小分子抑制剂。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是BLZ945、GW2580或PLX3397(CSF1R的小分子抑制剂)。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂是BTK抑制剂、ITK抑制剂、PI3Kγ抑制剂或PI3Kδ抑制剂。在某些实施方式中，巨噬细胞效应功能的调节剂可以替代组合物或装置中的一种或多种适应性免疫应答的激活剂。
[0308] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还可以包含溶瘤病毒。在某些实施方式中，溶瘤病毒包括但不限于单纯疱疹病毒(例如，HSV1716、OncoVex GM-CSF)；腺病毒(例如，H101、Onyx-15)；脊髓灰质炎病毒(例如，PV1(RIPO))；呼肠孤病毒(例如，reolysin)；塞内卡病毒(例如，NTX-010、SVV-001)；Rigvir病毒；马拉巴病毒；麻疹；新城疫病毒；牛痘或ECHO病毒。
[0309] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还可以包含放射性同位素(例如，作为分子的一部分或在小珠上)。在某些实施方式中，放射性同位素是钇-90、钯-103、碘-125、铯131或铱192。
[0310] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还可以包含化疗剂。在某些实施方式中，化疗剂包括但不限于抗雌激素(例如，他莫昔芬、雷洛昔芬和甲地孕酮)、LHRH激动剂(例如，戈舍瑞林和亮丙瑞林)、抗雄激素(例如，氟他胺和比卡鲁胺)、光动力疗法抗(例如，vertoporfin(BPD-MA)、酞菁、光敏剂Pc4和去甲氧基-竹红菌素A(2BA-2-DMHA))、氮芥(例如，环磷酰胺、异环磷酰胺、曲洛磷胺、苯丁酸氮芥、雌莫司汀和美法仑)、亚硝基脲(例如，卡莫司汀(BCNU)和洛莫司汀(CCNU))、烷基磺酸盐(例如，白消安和曲奥舒凡)、三氮烯(例如，达卡巴嗪和替莫唑胺)、含铂化合物(例如，顺铂、卡铂和奥沙利铂)、长春花生物碱(例如，长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨)、紫杉醇(例如，紫杉醇或紫杉醇等同物，如纳米颗粒白蛋白结合的紫杉醇(ABRAXANE)、二十二碳六烯酸结合的-紫杉醇(DHA-紫杉醇，Taxoprexin)、聚谷氨酸结合的-紫杉醇(PG-紫杉醇、聚谷氨酸紫杉醇
(Paclitaxelpoliglumex)、CT-2103、XYOTAX)、肿瘤活化的前药(TAP)ANG1005(与三个紫杉醇分子结合的Angiopep-2)、紫杉醇-EC-1(与erbB2识别肽EC-1结合的紫杉醇)和葡萄糖缀合的紫杉醇，例如2'-紫杉醇甲基2-吡喃葡萄糖基琥珀酸酯；多西他赛，紫杉酚)、表鬼臼脂素(例如，依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、拓扑替康、9-氨基喜树碱、开普拓(伊立替康)、克雷斯托和丝裂霉素C)、抗代谢物、DHFR抑制剂(例如，甲氨蝶呤、二氯甲氨蝶呤、三甲曲沙和依达曲沙)、IMP脱氢酶抑制剂(例如，霉酚酸、噻唑福林、利巴韦林和EICAR)、核糖核苷酸还原酶抑制剂(例如，羟基脲和去铁胺)、尿嘧啶类似物(例如，5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷、多西氟尿苷、雷替曲塞、替加氟-尿嘧啶和卡培他滨)、胞嘧啶类似物(例如，阿糖胞苷(ara C)、胞嘧啶阿拉伯糖苷和氟达拉滨)、嘌呤类似物(例如，巯嘌呤和硫鸟嘌呤)、维生素D3类似物(例如，EB 1089、CB 1093和KH 1060)、异戊二烯化抑制剂(例如，洛伐他汀)、多巴胺能神经毒素(例如，1-甲基-4-苯基吡啶离子)、细胞周期抑制剂(例如，星形孢菌素)、放线菌素(例如，放线菌素D、更生菌素)、博来霉素(例如，博来霉素A2、博来霉素B2和培洛霉素)、蒽环霉素(例如，柔红霉素、多柔比星、聚乙二醇化脂质体多柔比星、伊达比星、表柔比星、吡柔比星、佐罗霉素和米托蒽醌)、MDR抑制剂(例如，维拉帕米)，Ca2+ATP酶抑制剂(例如，毒胡萝卜素)、奥利默森、吉西他滨、洋红霉素、亚叶酸、培美曲塞、环磷酰胺、达卡巴嗪、甲基苄肼、泼尼松龙、地塞米松、campathecin、普卡霉素、天冬酰胺酶、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、泊非霉素、马法兰、异长春碱、环氧长春碱、苯丁酸氮芥、曲贝替定、甲基苄肼、圆皮海绵内酯、洋红霉素、氨基蝶呤、六甲蜜胺及其药学上可接受的盐。
(Paclitaxelpoliglumex)、CT-2103、XYOTAX)、肿瘤活化的前药(TAP)ANG1005(与三个紫杉醇分子结合的Angiopep-2)、紫杉醇-EC-1(与erbB2识别肽EC-1结合的紫杉醇)和葡萄糖缀合的紫杉醇，例如2'-紫杉醇甲基2-吡喃葡萄糖基琥珀酸酯；多西他赛，紫杉酚)、表鬼臼脂素(例如，依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、拓扑替康、9-氨基喜树碱、开普拓(伊立替康)、克雷斯托和丝裂霉素C)、抗代谢物、DHFR抑制剂(例如，甲氨蝶呤、二氯甲氨蝶呤、三甲曲沙和依达曲沙)、IMP脱氢酶抑制剂(例如，霉酚酸、噻唑福林、利巴韦林和EICAR)、核糖核苷酸还原酶抑制剂(例如，羟基脲和去铁胺)、尿嘧啶类似物(例如，5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷、多西氟尿苷、雷替曲塞、替加氟-尿嘧啶和卡培他滨)、胞嘧啶类似物(例如，阿糖胞苷(ara C)、胞嘧啶阿拉伯糖苷和氟达拉滨)、嘌呤类似物(例如，巯嘌呤和硫鸟嘌呤)、维生素D3类似物(例如，EB 1089、CB 1093和KH 1060)、异戊二烯化抑制剂(例如，洛伐他汀)、多巴胺能神经毒素(例如，1-甲基-4-苯基吡啶离子)、细胞周期抑制剂(例如，星形孢菌素)、放线菌素(例如，放线菌素D、更生菌素)、博来霉素(例如，博来霉素A2、博来霉素B2和培洛霉素)、蒽环霉素(例如，柔红霉素、多柔比星、聚乙二醇化脂质体多柔比星、伊达比星、表柔比星、吡柔比星、佐罗霉素和米托蒽醌)、MDR抑制剂(例如，维拉帕米)，Ca2+ATP酶抑制剂(例如，毒胡萝卜素)、奥利默森、吉西他滨、洋红霉素、亚叶酸、培美曲塞、环磷酰胺、达卡巴嗪、甲基苄肼、泼尼松龙、地塞米松、campathecin、普卡霉素、天冬酰胺酶、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、泊非霉素、马法兰、异长春碱、环氧长春碱、苯丁酸氮芥、曲贝替定、甲基苄肼、圆皮海绵内酯、洋红霉素、氨基蝶呤、六甲蜜胺及其药学上可接受的盐。
[0311] 在某些实施方式中，化疗剂是免疫调节性化疗剂。在某些实施方式中，化疗剂具有已知的免疫调节功能(例如，诱导免疫原性细胞死亡或免疫抑制性调控免疫细胞的耗竭)。在某些实施方式中，由于其具有免疫治疗性质，而非将其作为常规癌细胞固有细胞毒性化疗，而将化疗剂包含在药物递送组合物和装置中。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含化疗剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含细胞毒剂。
[0312] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置还可以包含靶向剂。在某些实施方式中，靶向剂包括但不限于IDO抑制剂、TGFβR抑制剂、精氨酸酶抑制剂、iNOS抑制剂、HIF1α抑制剂、STAT3抑制剂、CSF1R抑制剂、PGE2抑制剂、PDE5抑制剂、RON抑制剂、mTOR抑制剂、JAK2抑制剂、HSP90抑制剂、PI3K-AKT抑制剂、β-连环蛋白抑制剂、GSK3β抑制剂、IAP抑制剂、HDAC抑制剂、DNMT抑制剂、BET抑制剂、A2AR抑制剂、BRAF+MEK抑制剂、泛-RAF抑制剂、PI3Kγ抑制剂、PI3Kδ抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、PARP抑制剂、谷氨酰胺酶抑制剂、BTK抑制剂、ITK抑制剂、WNT抑制剂、FAK抑制剂、ALK抑制剂、CDK4/6抑制剂或FGFR3抑制剂。
[0313] 在某些实施方式中，靶向剂包括但不限于伊马替尼、沙利度胺、来那度胺、酪氨酸激酶抑制剂(例如，阿西替尼(AG013736)、博舒替尼(SKI-606)，西地尼布(RECENTINTM、AZD2171)、达沙替尼( BMS-354825)、厄洛替尼 吉非替尼伊马替尼( CGP57148B、STI-571)、拉帕替尼
来他替尼(CEP-701)、来那替尼(HKI-272)、尼罗替尼
司马沙尼(semaxinib、SU5416)、舒尼替尼( SU11248)、托西尼布
凡德他尼( ZD6474)、瓦他拉尼碱(PTK787、PTK/ZK)、曲
妥珠单抗 贝伐单抗 利妥昔单抗 西妥昔单抗
帕尼单抗 雷珠单抗 尼罗替尼
索拉非尼 依维莫司 阿伦单抗 吉妥
单抗 替西罗莫司 ENMD-2076、PCI-32765、AC220、多韦替尼乳
酸盐(TKI258、CHIR-258)、BIBW 2992(TOVOKTM)、SGX523、PF-04217903、PF-02341066、PF-
299804、BMS-777607、ABT-869、MP470、BIBF 1120 AP24534、JNJ-
26483327、MGCD265、DCC-2036、BMS-690154、CEP-11981、替沃扎尼(AV-951)、OSI-930、MM-
121、XL-184、XL-647和/或XL228)、蛋白酶体抑制剂(例如，硼替佐米(万珂))、mTOR抑制剂(例如，雷帕霉素、替西罗莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD-001)、地磷莫司、AP23573(Ariad)、AZD8055(阿斯利康)、BEZ235(诺华)、BGT226(诺华)、XL765(赛诺非)、PF-4691502(辉瑞)、GDC0980(Genetech)、SF1126(Semafoe)和OSI-027(OSI))、epacadostat、indoximid、GDC0919、BMS986205、AZD4635、CPI-444、PBF509、LCL161、CB-839、CB-1158、FPA008、BLZ945、IPI-549、pexidartinib、galunisertib、birinapant、曲美替尼、达拉非尼、维罗非尼、考比替尼、比美替尼、ensartib、帕唑帕尼、尼达尼布、SYM004、维利帕尼、奥拉帕尼、BGB-290、LXH254、阿扎胞苷、地西他滨、瓜德希他滨、RRX001、CC486、罗米地辛、恩替司他、伏立诺他、帕比司他、他莫昔芬、依鲁替尼、艾代拉里斯、卡博替尼、司美替尼、阿贝西尼、帕博西尼、glasdegib、恩杂鲁胺、AZD9150、PF-06840003、SRF231、Hu5F9-G4、CC-900002、TTI-621、WNT974、BGJ398、LY2874455、抗-Tie2抗体或其药学上可接受的盐。
来他替尼(CEP-701)、来那替尼(HKI-272)、尼罗替尼
司马沙尼(semaxinib、SU5416)、舒尼替尼( SU11248)、托西尼布
凡德他尼( ZD6474)、瓦他拉尼碱(PTK787、PTK/ZK)、曲
妥珠单抗 贝伐单抗 利妥昔单抗 西妥昔单抗
帕尼单抗 雷珠单抗 尼罗替尼
索拉非尼 依维莫司 阿伦单抗 吉妥
单抗 替西罗莫司 ENMD-2076、PCI-32765、AC220、多韦替尼乳
酸盐(TKI258、CHIR-258)、BIBW 2992(TOVOKTM)、SGX523、PF-04217903、PF-02341066、PF-
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[0314] 药物递送组合物和装置的实施方式
[0315] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和先天免疫应答的激活剂。
[0316] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂和其他先天免疫应答的激活剂。
[0317] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂和细胞因子。
[0318] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂和细胞因子。
[0319] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂和趋化因子。
[0320] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂和趋化因子。
[0321] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和细胞因子。
[0322] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和趋化因子。
[0323] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和适应性免疫应答的激活剂。
[0324] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂和适应性免疫应答的激活剂。
[0325] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂和适应性免疫应答的激活剂。
[0326] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0327] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、适应性免疫应答的激活剂和两种其他适应性免疫应答的激活剂。
[0328] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、细胞因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0329] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂、细胞因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0330] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、细胞因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0331] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂、细胞因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0332] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、趋化因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0333] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂、趋化因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0334] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、趋化因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0335] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、其他先天免疫应答的激活剂、趋化因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0336] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、细胞因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0337] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、细胞因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0338] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、趋化因子和适应性免疫应答的激活剂。
[0339] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、趋化因子、适应性免疫应答的激活剂和其他适应性免疫应答的激活剂。
[0340] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和NLR激动剂。
[0341] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和M-TriDAP。
[0342] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0343] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0344] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、M-TriDAP和抗-CTLA-4抗体。
[0345] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和M-TriDAP。
[0346] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0347] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和M-TriDAP。
[0348] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0349] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和IL-1β。
[0350] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子。
[0351] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和2′3′-cGAMP。
[0352] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)。
[0353] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和IL-15超激动剂。
[0354] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和干扰素α(IFN-α)。
[0355] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和干扰素β(IFN-β)。
[0356] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和干扰素γ(IFN-γ)。
[0357] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-15超激动剂。
[0358] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂。
[0359] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂。
[0360] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素α(IFN-α)。
[0361] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素β(IFN-β)。
[0362] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素γ(IFN-γ)。
[0363] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素α(IFN-α)。
[0364] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素β(IFN-β)。
[0365] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素γ(IFN-γ)。
[0366] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-PD-1抗体。
[0367] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0368] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0369] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0370] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0371] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0372] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0373] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0374] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0375] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0376] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0377] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0378] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0379] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、c-di-GMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0380] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0381] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0382] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0383] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0384] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0385] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0386] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR3激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0387] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、聚(I:C)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0388] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、a TLR9激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0389] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、CpG寡核苷酸、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0390] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0391] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-CTLA-4抗体。
[0392] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0393] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0394] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0395] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和TLR7和/或TLR8激动剂。
[0396] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和TLR7激动剂。
[0397] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和TLR8激动剂。
[0398] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和瑞喹莫德。
[0399] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-15超激动剂。
[0400] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、瑞喹莫德和IL-15超激动剂。
[0401] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-PD-1抗体。
[0402] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0403] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0404] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0405] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、瑞喹莫德、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0406] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-CTLA-4抗体。
[0407] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0408] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0409] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0410] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0411] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0412] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0413] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0414] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和激动剂抗-CD137抗体。
[0415] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和抗-CTLA-4抗体。
[0416] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和抗-PD-1抗体。
[0417] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0418] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0419] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0420] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、激动剂抗-CD137抗体、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0421] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和先天免疫应答的激活剂，其中先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)或瑞喹莫德。
[0422] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶和趋化因子，其中趋化因子是IL-15超激动剂、IFN-α、IFN-β或IFN-γ。
[0423] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂和趋化因子；其中先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)或瑞喹莫德；以及趋化因子是IL-15超激动剂、IFN-α、IFN-β或IFN-γ。
[0424] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含水凝胶、先天免疫应答的激活剂、趋化因子和适应性免疫应答的激活剂；其中先天免疫应答的激活剂是2′3′-cGAMP、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-mDAP(M-TriDAP)或瑞喹莫德；以及趋化因子是IL-15超激动剂、IFN-α、IFN-β或IFN-γ；以及适应性免疫应答的激活剂是抗-PD-1抗体、抗-CTLA4抗体、抗-CD40抗体或抗-CD137抗体。
[0425] 在某些实施方式中，药物递送组合物选自下组：
[0426] 包含水凝胶和2′3′-cGAMP的组合物；
[0427] 包含水凝胶和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的组合物；
[0428] 包含水凝胶和瑞喹莫德的组合物；
[0429] 包含水凝胶和M-TriDAP的组合物；
[0430] 包含水凝胶和IL-15超激动剂的组合物；
[0431] 包含水凝胶和干扰素α(IFN-α)的组合物；
[0432] 包含水凝胶和干扰素β(IFN-β)的组合物；
[0433] 包含水凝胶和干扰素γ(IFN-γ)的组合物；
[0434] 包含水凝胶、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的组合物；
[0435] 包含水凝胶2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的组合物；
[0436] 包含水凝胶、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的组合物；
[0437] 包含水凝胶、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；
[0438] 包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物，以及
[0439] 包含水凝胶、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物。
[0440] 在某些实施方式中，药物递送装置选自下组：
[0441] 包含水凝胶和2′3′-cGAMP的装置；
[0442] 包含水凝胶和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的装置；
[0443] 包含水凝胶和瑞喹莫德的装置；
[0444] 包含水凝胶和M-TriDAP的装置；
[0445] 包含水凝胶和IL-15超激动剂的装置；
[0446] 包含水凝胶和干扰素α(IFN-α)的装置；
[0447] 包含水凝胶和干扰素β(IFN-β)的装置；
[0448] 包含水凝胶和干扰素γ(IFN-γ)的装置；
[0449] 包含水凝胶、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的装置；
[0450] 包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的装置；
[0451] 包含水凝胶、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的装置；
[0452] 包含水凝胶、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；
[0453] 包含水凝胶、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；以及
[0454] 包含水凝胶、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置。
[0455] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和NLR激动剂。
[0456] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和M-TriDAP。
[0457] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0458] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0459] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、M-TriDAP和抗-CTLA-4抗体。
[0460] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和M-TriDAP。
[0461] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0462] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和M-TriDAP。
[0463] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0464] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和IL-1β。
[0465] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-1β。
[0466] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-1β。
[0467] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子。
[0468] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和2′3′-cGAMP。
[0469] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)。
[0470] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和IL-15超激动剂。
[0471] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和干扰素α(IFN-α)。
[0472] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和干扰素β(IFN-β)。
[0473] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和干扰素γ(IFN-γ)。
[0474] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-15超激动剂。
[0475] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂。
[0476] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂。
[0477] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素α(IFN-α)。
[0478] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素β(IFN-β)。
[0479] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素γ(IFN-γ)。
[0480] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素α(IFN-α)。
[0481] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素β(IFN-β)。
[0482] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素γ(IFN-γ)。
[0483] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-PD-1抗体。
[0484] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0485] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0486] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0487] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0488] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0489] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0490] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0491] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0492] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0493] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0494] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0495] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0496] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、c-di-GMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0497] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0498] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0499] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0500] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0501] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0502] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0503] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR3激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0504] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、聚(I:C)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0505] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、a TLR9激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0506] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、CpG寡核苷酸、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0507] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0508] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-CTLA-4抗体。
[0509] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0510] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0511] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0512] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和TLR7和/或TLR8激动剂。
[0513] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和TLR7激动剂。
[0514] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和TLR8激动剂。
[0515] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和瑞喹莫德。
[0516] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-15超激动剂。
[0517] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、瑞喹莫德和IL-15超激动剂。
[0518] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-PD-1抗体。
[0519] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0520] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0521] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0522] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、瑞喹莫德、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0523] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-CTLA-4抗体。
[0524] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0525] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0526] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0527] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0528] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0529] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0530] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0531] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和激动剂抗-CD137抗体。
[0532] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和抗-CTLA-4抗体。
[0533] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸和抗-PD-1抗体。
[0534] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0535] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0536] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0537] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含透明质酸、激动剂抗-CD137抗体、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0538] 在某些实施方式中，药物递送组合物选自下组：
[0539] 包含透明质酸和2′3′-cGAMP的组合物；
[0540] 包含透明质酸和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的组合物；
[0541] 包含透明质酸和瑞喹莫德的组合物；
[0542] 包含透明质酸和M-TriDAP的组合物；
[0543] 包含透明质酸和IL-15超激动剂的组合物；
[0544] 包含透明质酸和干扰素α(IFN-α)的组合物；
[0545] 包含透明质酸和干扰素β(IFN-β)的组合物；
[0546] 包含透明质酸和干扰素γ(IFN-γ)的组合物；
[0547] 包含透明质酸、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的组合物；
[0548] 包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的组合物；
[0549] 包含透明质酸、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的组合物；
[0550] 包含透明质酸、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；
[0551] 包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；以及
[0552] 包含透明质酸、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物。
[0553] 在某些实施方式中，药物递送装置选自下组：
[0554] 包含透明质酸和2′3′-cGAMP的装置；
[0555] 包含透明质酸和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的装置；
[0556] 包含透明质酸和瑞喹莫德的装置；
[0557] 包含透明质酸和M-TriDAP的装置；
[0558] 包含透明质酸和IL-15超激动剂的装置；
[0559] 包含透明质酸和干扰素α(IFN-α)的装置；
[0560] 包含透明质酸和干扰素β(IFN-β)的装置；
[0561] 包含透明质酸和干扰素γ(IFN-γ)的装置；
[0562] 包含透明质酸、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的装置；
[0563] 包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的装置；
[0564] 包含透明质酸、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的装置；
[0565] 包含透明质酸、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；
[0566] 包含透明质酸、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；以及
[0567] 包含透明质酸、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置。
[0568] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和NLR激动剂。
[0569] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和M-TriDAP。
[0570] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0571] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0572] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、M-TriDAP和抗-CTLA-4抗体。
[0573] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和M-TriDAP。
[0574] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、M-TriDAP和IL-15超激动剂。
[0575] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和M-TriDAP。
[0576] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、M-TriDAP和抗-PD-1抗体。
[0577] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和IL-1β。
[0578] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-1β。
[0579] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-1β。
[0580] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子。
[0581] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和2′3′-cGAMP。
[0582] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)。
[0583] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和IL-15超激动剂。
[0584] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和干扰素α(IFN-α)。
[0585] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和干扰素β(IFN-β)。
[0586] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和干扰素γ(IFN-γ)。
[0587] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和IL-15超激动剂。
[0588] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂。
[0589] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂。
[0590] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素α(IFN-α)。
[0591] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素β(IFN-β)。
[0592] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和干扰素γ(IFN-γ)。
[0593] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素α(IFN-α)。
[0594] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素β(IFN-β)。
[0595] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和干扰素γ(IFN-γ)。
[0596] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-PD-1抗体。
[0597] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0598] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0599] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素α(IFN-α)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0600] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素α(IFN-α)和抗-PD-1抗体。
[0601] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0602] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素β(IFN-β)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0603] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素β(IFN-β)和抗-PD-1抗体。
[0604] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0605] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、干扰素γ(IFN-γ)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0606] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素γ(IFN-γ)和抗-PD-1抗体。
[0607] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0608] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0609] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、c-di-GMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0610] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0611] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0612] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-CD137抗体。
[0613] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0614] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0615] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0616] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR3激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0617] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、聚(I:C)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0618] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR9激动剂、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0619] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、CpG寡核苷酸、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体。
[0620] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0621] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子和抗-CTLA-4抗体。
[0622] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0623] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0624] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0625] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和TLR7和/或TLR8激动剂。
[0626] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和TLR7激动剂。
[0627] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和TLR8激动剂。
[0628] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和瑞喹莫德。
[0629] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和IL-15超激动剂。
[0630] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、瑞喹莫德和IL-15超激动剂。
[0631] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-PD-1抗体。
[0632] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD137抗体。
[0633] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和激动剂抗-CD40抗体。
[0634] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0635] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、瑞喹莫德、抗-CTLA-4抗体和抗-PD-1抗体。
[0636] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂和抗-CTLA-4抗体。
[0637] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、抗-LAG-3抗体和抗-PD-1抗体。
[0638] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15超激动剂和抗-LAG-3抗体。
[0639] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、IL-15和激动剂抗-CD40抗体。
[0640] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0641] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0642] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、干扰素基因(STING)激动剂的刺激因子、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0643] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、TLR7和/或TLR8激动剂、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0644] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和激动剂抗-CD137抗体。
[0645] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和抗-CTLA-4抗体。
[0646] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐和抗-PD-1抗体。
[0647] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、激动剂抗-CD137抗体和抗-PD-1抗体。
[0648] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、激动剂抗-CD137抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0649] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0650] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含藻酸盐、激动剂抗-CD137抗体、抗-PD-1抗体和抗-CTLA-4抗体。
[0651] 在某些实施方式中，药物递送组合物选自下组：
[0652] 包含藻酸盐和2′3′-cGAMP的组合物；
[0653] 包含藻酸盐和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的组合物；
[0654] 包含藻酸盐和瑞喹莫德的组合物；
[0655] 包含藻酸盐和M-TriDAP的组合物；
[0656] 包含藻酸盐和IL-15超激动剂的组合物；
[0657] 包含藻酸盐和干扰素α(IFN-α)的组合物；
[0658] 包含藻酸盐和干扰素β(IFN-β)的组合物；
[0659] 包含藻酸盐和干扰素γ(IFN-γ)的组合物；
[0660] 包含藻酸盐、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的组合物；
[0661] 包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的组合物；
[0662] 包含藻酸盐、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的组合物；
[0663] 包含藻酸盐、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；
[0664] 包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物；以及
[0665] 包含藻酸盐、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的组合物。
[0666] 在某些实施方式中，药物递送装置选自下组：
[0667] 包含藻酸盐和2′3′-cGAMP的装置；
[0668] 包含藻酸盐和2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)的装置；
[0669] 包含藻酸盐和瑞喹莫德的装置；
[0670] 包含藻酸盐和M-TriDAP的装置；
[0671] 包含藻酸盐和IL-15超激动剂的装置；
[0672] 包含藻酸盐和干扰素α(IFN-α)的装置；
[0673] 包含藻酸盐和干扰素β(IFN-β)的装置；
[0674] 包含藻酸盐和干扰素γ(IFN-γ)的装置；
[0675] 包含藻酸盐、2′3′-cGAMP和IL-15超激动剂的装置；
[0676] 包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)和IL-15超激动剂的装置；
[0677] 包含藻酸盐、瑞喹莫德和IL-15超激动剂的装置；
[0678] 包含藻酸盐、2′3′-cGAMP、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；
[0679] 包含藻酸盐、2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置；以及
[0680] 包含藻酸盐、瑞喹莫德、IL-15超激动剂和抗-PD-1抗体的装置。
[0681] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含藻酸盐、COX-2抑制剂(例如，塞来昔布)和抗-PD-1抗体。
[0682] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含1,3-双(2-氯乙基)-1-亚硝基脲(BCNU)和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物。
[0683] 药物递送组合物和装置的性质
[0684] 用于本申请所述的药物递送组合物和装置的生物材料是生物相容性的。生物材料(例如，水凝胶)是生物可降解的。药物递送组合物和装置能够在生理环境中(如机体内)化学和/或生物降解。组合物和装置可以以不同速率降解，这取决于其组成和所使用的水凝胶。例如，组合物和装置的半衰期(50％的组合物降解成单体和/或其他非聚合物部分的时间)可以是数天、数周、数月或数年。在一些情况下(例如，暴露于溶菌酶(例如，具有相对较低的pH)或通过简单水解)，组合物和装置可以是生物降解的，例如通过酶促活性或细胞机制。在一些情况下，组合物和装置可以分解成能够被细胞重新利用或处置且对细胞不具有显著毒性的单体和/或其他非聚合物部分。药物递送组合物和装置在体内是稳定的，以使得其在适宜的时间内将药物递送至预期靶点。
[0685] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持12个月。
[0686] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持6个月。
[0687] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持5个月。
[0688] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持4个月。
[0689] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持3个月。
[0690] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持2个月。
[0691] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持1个月。
[0692] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持1周。
[0693] 在某些实施方式中，将药物递送组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％、小于或等于4％、小于或等于3％、小于或等于2％、小于或等于1％、小于或等于0.5％或者小于或等于0.1％的装置在体内保持1天。
[0694] 粘弹性材料中的贮能模量测量材料的弹性部分储存的能力。可以使用流变仪测量贮能模量。在室温下使用TA Instruments AR-G2磁性轴承流变仪进行本申请中提供的测量。药物递送组合物和装置的贮能模量将根据组合物的成分而改变。
[0695] 在通常情况下，贮能模量与巯基修饰透明质酸(例如， )和巯基反应性PEGDA交联剂(例如， )的浓度之间的关系是线性的(不包括灵敏度限)。
例如，0.8％ 和0.2％ 的制剂将具有约100Pa的贮能模量，以
及1.3％ 和2％ 的制剂将具有约1600Pa的贮能模量。在某些
实施方式中，药物递送组合物或装置具有至少50Pa、至少100Pa、至少200Pa、至少300Pa、至少400Pa、至少500Pa、至少600Pa、至少700Pa、至少800Pa、至少900Pa、至少1000Pa、至少
1100Pa、至少1200Pa、至少1300Pa、至少1400Pa、至少1500Pa、至少1600Pa、至少1700Pa、至少
1800Pa、至少1900Pa、至少2000Pa、至少2100Pa、至少2200Pa、至少2300Pa、至少2400Pa、至少
2500Pa、至少2600Pa、至少2700Pa、至少2800Pa、至少2900Pa或者至少3000Pa的贮能模量。
例如，0.8％ 和0.2％ 的制剂将具有约100Pa的贮能模量，以
及1.3％ 和2％ 的制剂将具有约1600Pa的贮能模量。在某些
实施方式中，药物递送组合物或装置具有至少50Pa、至少100Pa、至少200Pa、至少300Pa、至少400Pa、至少500Pa、至少600Pa、至少700Pa、至少800Pa、至少900Pa、至少1000Pa、至少
1100Pa、至少1200Pa、至少1300Pa、至少1400Pa、至少1500Pa、至少1600Pa、至少1700Pa、至少
1800Pa、至少1900Pa、至少2000Pa、至少2100Pa、至少2200Pa、至少2300Pa、至少2400Pa、至少
2500Pa、至少2600Pa、至少2700Pa、至少2800Pa、至少2900Pa或者至少3000Pa的贮能模量。
[0696] 在某些实施方式中，药物递送组合物或装置具有约50Pa至约100,000,000Pa、约50Pa至约100,000Pa、约50Pa至约10,000Pa、约50Pa至约3,000Pa、约100Pa至约3,000Pa、约
100Pa至约2,000Pa、约500Pa至约3,000Pa、约500Pa至约2,000Pa、约1,000Pa至约2,000Pa、约1,200Pa至约1,800Pa、约1,300Pa至约1,700Pa或者约1,400Pa至约1,600Pa的贮能模量。
100Pa至约2,000Pa、约500Pa至约3,000Pa、约500Pa至约2,000Pa、约1,000Pa至约2,000Pa、约1,200Pa至约1,800Pa、约1,300Pa至约1,700Pa或者约1,400Pa至约1,600Pa的贮能模量。
[0697] 在某些实施方式中，药物递送组合物或装置具有可达约600Pa、可达约700Pa、可达约800Pa、可达约900Pa、可达约1,000Pa、可达约1,100Pa、可达约1,200Pa、可达约1,300Pa、可达约1,400Pa、可达约1,500Pa、可达约1,600Pa、可达约1,700Pa、可达约1,800Pa、可达约1,900Pa、可达约2,000Pa、可达约2,500Pa、可达约3,000Pa、可达约5,000Pa、可达约10,
000Pa、可达约100,000Pa、可达约1,000,000Pa、可达约10,000,000Pa或者可达约100,000,
000Pa的贮能模量。
000Pa、可达约100,000Pa、可达约1,000,000Pa、可达约10,000,000Pa或者可达约100,000,
000Pa的贮能模量。
[0698] 药物递送组合物和装置在生理条件下(如在机体内)释放治疗剂。治疗剂的释放可以以不同速率发生，其取决于组合物或装置的组成(例如，水凝胶的特性和浓度)。例如，治疗剂的释放速率(治疗剂不再是组合物或装置的一部分的时间)可以是数分钟、数小时、数天、数周、数月或数年。治疗剂可以通过各种机制释放，例如通过扩散、化学活性、酶促活性或细胞机制。药物递送组合物和装置在体内是稳定的，以使得其在适宜的时间内将药物递送至预期靶点。
[0699] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或者小于或等于1％的先天免疫系统的激活剂在4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0700] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％,or大于或等于1％的先天免疫系统的激活剂在1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或10分钟内在体内释放。
[0701] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或者小于或等于1％的任意其他先天免疫系统的激活剂在4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0702] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％或者大于或等于1％的任意其他先天免疫系统的激活剂在1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0703] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或者小于或等于1％的适应性免疫系统的激活剂在4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0704] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％或者大于或等于1％的适应性免疫系统的激活剂在1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0705] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或者小于或等于1％的适应性免疫系统的激活剂在4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0706] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％或者大于或等于1％的任意其他适应性免疫系统的激活剂在1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0707] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，小于或等于90％、小于或等于80％、小于或等于70％、小于或等于60％、小于或等于50％、小于或等于40％、小于或等于30％、小于或等于20％、小于或等于10％、小于或等于5％或者小于或等于1％的细胞因子在4周、3周、2周、10天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0708] 在某些实施方式中，组合物或装置植入后，大于或等于99％、大于或等于95％、大于或等于90％、大于或等于80％、大于或等于70％、大于或等于60％、大于或等于50％、大于或等于40％、大于或等于30％、大于或等于20％、大于或等于10％、大于或等于5％或者大于或等于1％的细胞因子在1天、18小时、12小时、8小时、6小时、4小时、3小时、2小时、1小时、45分钟、30分钟、20分钟、15分钟或者10分钟内在体内释放。
[0709] 药物递送组合物和装置的制备和施用
[0710] 本公开内容提供了包含如本申请所述的治疗剂的药物递送组合物和装置。在某些实施方式中，在药物递送组合物和装置中以有效量提供治疗剂以治疗和/或预防疾病(例如，增殖性疾病，如癌症)。在某些实施方式中，有效量是特定治疗剂的治疗有效量。在某些实施方式中，有效量是特定治疗剂的预防有效量。
[0711] 可以采用药理学领域公知的任何方法制备本申请中所述的药物递送组合物和装置。在某些实施方式中，这些制备方法包括将巯基修饰的透明质酸加入模具；任选地将适应性免疫应答的激活剂加入模具；任选地将趋化因子或细胞因子加入模具；任选地将先天免疫应答的激活剂加入模具；将交联剂加入模具(例如，巯基反应性PEGDA交联剂)；以及将混合物静置至少10分钟、至少15分钟、至少20分钟、至少25分钟、至少30分钟、至少35分钟、至少40分钟、至少45分钟、至少50分钟、至少55分钟、至少1小时、至少90分钟、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时或者至少6小时以进行固化的步骤。
[0712] 在某些实施方式中，用于制备水凝胶的巯基修饰的透明质酸(例如，)的浓度以重量/体积计为约1％至约10％、约1％至约5％、约1％至约3％或
者约1.5％至约2.5％；以及用于制备水凝胶的巯基反应性PEGDA交联剂(例如，
)的量以重量/体积计为约1％至约20％、约10％至约20％、约5％至约15％
或者约10％至约15％。在某些优选的实施方式中，巯基修饰的透明质酸的浓度为约2％w/v和巯基反应性PEGDA交联剂的浓度为约12.5％w/v。在某些实施方式中，2％巯基修饰的透明质酸和12.5％巯基反应性PEGDA交联剂的制剂提供了具有约1000Pa至约2000Pa贮能模量的水凝胶。
者约1.5％至约2.5％；以及用于制备水凝胶的巯基反应性PEGDA交联剂(例如，
)的量以重量/体积计为约1％至约20％、约10％至约20％、约5％至约15％
或者约10％至约15％。在某些优选的实施方式中，巯基修饰的透明质酸的浓度为约2％w/v和巯基反应性PEGDA交联剂的浓度为约12.5％w/v。在某些实施方式中，2％巯基修饰的透明质酸和12.5％巯基反应性PEGDA交联剂的制剂提供了具有约1000Pa至约2000Pa贮能模量的水凝胶。
[0713] 为了制备本领域公知的标准组织工程应用，巯基修饰的透明质酸(例如，)的通常浓度为约1％w/v和巯基反应性PEGDA交联剂(例如，
)的通常浓度为约1％w/v。因此，使用2％w/v巯基修饰的透明质酸(例如，
)和12.5％w/v巯基反应性PEGDA交联剂(例如， )在所公开
的药物递送组合物和装置中提供了预料之外的有用的和有利的生物材料。
)的通常浓度为约1％w/v。因此，使用2％w/v巯基修饰的透明质酸(例如，
)和12.5％w/v巯基反应性PEGDA交联剂(例如， )在所公开
的药物递送组合物和装置中提供了预料之外的有用的和有利的生物材料。
[0714] 在某些实施方式中，用于制备水凝胶的藻酸盐的浓度以重量/体积计为约0.5％至约2.5％、约0.75％至约2.0％或者约1.0％至约1.5％的藻酸盐。在某些实施方式中，用于制备水凝胶的1M氯化钙交联剂溶液的量为约5μL至25μL、约10μL至20μL或者约15μL。在某些实施方式中，目标有效载荷能够负载在约10μL至70μL溶剂(PBS或DMSO)、20μL至60μL溶剂(PBS或DMSO)、约30μL至50μL溶剂(PBS或DMSO)或者约40μL溶剂(PBS或DMSO)中。
[0715] 药物递送组合物和装置还可以包含至少一种赋形剂。在某些实施方式中，赋形剂是磷酸盐缓冲液、三(羟基甲基)氨基甲烷、氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸钾、硝酸钙、葡萄糖、乳糖、海藻糖、蔗糖或其组合。在某些实施方式中，赋形剂是磷酸盐缓冲液、三(羟基甲基)氨基甲烷、氯化钠或其组合。在某些实施方式中，赋形剂是磷酸盐缓冲液。
[0716] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含纳米颗粒或微粒。纳米颗粒包括尺寸为1至100nm之间的颗粒。微粒包括尺寸为0.1至100μm之间的颗粒。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含二氧化硅微粒、聚乙烯微粒、聚苯乙烯微粒、聚酯微粒、聚酸酐微粒、聚己内酯微粒、聚碳酸酯微粒或聚羟基丁酸酯微粒。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含多孔性二氧化硅微粒。
[0717] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含一种或多种有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含二甲亚砜(DMSO)。
[0718] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含有机溶剂。在某些实施方式中，在制备组合物或装置中不使用有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不含有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置基本上不含有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含以重量计低于10％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％、低于1％、低于0.5％、低于0.1％、低于0.01％、低于0.001％或者低于0.0001％的有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置包含以重量计低于1000ppm、低于500ppm、低于400ppm、低于300ppm、低于200ppm、低于100ppm、低于50ppm、低于40ppm、低于30ppm、低于20ppm、低于10ppm、低于1ppm、低于10ppb或者低于1ppb的有机溶剂。在某些实施方式中，药物递送组合物不包含二甲亚砜(DMSO)。
[0719] 在某些实施方式中，药物递送组合物包含有机溶剂。在某些实施方式中，有机溶剂是环糊精、甲醇、乙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇或其组合。
[0720] 药物递送组合物和装置可以作为单一单位剂量和/或作为多个单一单位剂量批量制备、包装和/或销售。“单位剂量”是包含预定量治疗剂的组合物或装置的离散量。治疗剂的量通常等于将施用于对象的治疗剂的剂量和/或此类剂量的常规分数，如此类剂量的二分之一、三分之一或四分之一。
[0721] 本公开内容的组合物或装置中治疗剂、赋形剂和/或任何其他成分的相对量将根据所治疗对象的性质、体格和/或状况而改变。举例来说，组合物和装置可以包含0.1％至99％(w/w)之间、0.1％至90％(w/w)之间、0.1％至80％(w/w)之间、0.1％至70％(w/w)之间、
1％至50％(w/w)之间、10％至80％(w/w)之间、10％至90％(w/w)之间、10％至80％(w/w)之间、20％至80％(w/w)之间、30％至80％(w/w)之间、30％至70％(w/w)之间或者40％至60％(w/w)之间的治疗剂。
1％至50％(w/w)之间、10％至80％(w/w)之间、10％至90％(w/w)之间、10％至80％(w/w)之间、20％至80％(w/w)之间、30％至80％(w/w)之间、30％至70％(w/w)之间或者40％至60％(w/w)之间的治疗剂。
[0722] 可以将其他药学上可接受的赋形剂用于生产所提供的药物递送组合物和装置。这些包括惰性稀释剂、分散和/或造粒剂、表面活性剂和/或乳化剂、崩解剂、粘合剂、防腐剂、缓冲剂、润滑剂和/或油。诸如可可脂和栓剂蜡、着色剂和包衣剂在内的赋形剂也可以存在于本组合物或装置中。
[0723] 示例性的稀释剂包括碳酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钠、蔗糖、纤维素、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、氯化钠、干淀粉、玉米淀粉、糖粉及其混合物。
[0724] 示例性的造粒剂和/或分散剂包括马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、羟基乙酸淀粉钠、粘土、海藻酸、瓜尔胶、柑橘渣、琼脂、膨润土、纤维素和木制品、天然海绵、阳离子交换树脂、碳酸钙、硅酸盐、碳酸钠、交联聚(乙烯基吡咯烷酮)(交聚维酮)、羧甲基淀粉钠(羟基乙酸淀粉钠)、羧甲基纤维素、交联的羧甲基纤维素钠(croscarmellose)、甲基纤维素、预胶化淀粉(淀粉1500)、微晶淀粉、水不溶性淀粉、羧甲基纤维素钙、硅酸铝镁(VEEGUM)、十二烷基硫酸钠、季铵化合物及其混合物。
[0725] 示例性的表面活性剂和/或乳化剂包括天然乳化剂(例如，金合欢、琼脂、海藻酸、海藻酸钠、西黄蓍胶、软骨素、胆固醇、黄原胶、果胶、明胶、蛋黄、酪蛋白、羊毛脂、胆固醇、蜡和卵磷脂)、胶体粘土(例如，膨润土(硅酸铝)和Veegum(硅酸铝镁))、长链氨基酸衍生物、高分子量醇(例如，硬脂醇、鲸蜡醇、油醇、三乙酸甘油酯单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯和丙二醇单硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(例如，羧基聚亚甲基、聚丙烯酸、丙烯酸聚合物和羧乙烯基聚合物)、角叉菜胶、纤维素衍生物(例如，羧基甲基纤维素钠、粉状纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素)、脱水山梨醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯( 20)、聚氧乙烯脱水山梨醇( 60)、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯( 80)、脱水山梨醇单棕榈酸酯( 40)、脱水山梨
醇单硬脂酸酯( 60)、脱水山梨醇三硬脂酸酯( 65)、单油酸甘油酯、脱水山梨醇
单油酸酯( 80))、聚氧乙烯酯(例如，聚氧乙烯单硬脂酸酯(MYRJ 45)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯和Solutol)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，CremophorTM)，聚氧乙烯醚(例如，聚氧乙烯十二烷基醚(BRIJ 30))、聚(乙烯吡咯烷酮)、二乙二醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸钠、油酸钾、乙基油酸酯、油酸、月桂酸乙酯、十二烷基硫酸钠、PLURONIC F-68、泊洛沙姆-188、西曲溴铵、氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、多库酯钠和/或其混合物。
醇单硬脂酸酯( 60)、脱水山梨醇三硬脂酸酯( 65)、单油酸甘油酯、脱水山梨醇
单油酸酯( 80))、聚氧乙烯酯(例如，聚氧乙烯单硬脂酸酯(MYRJ 45)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯和Solutol)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，CremophorTM)，聚氧乙烯醚(例如，聚氧乙烯十二烷基醚(BRIJ 30))、聚(乙烯吡咯烷酮)、二乙二醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸钠、油酸钾、乙基油酸酯、油酸、月桂酸乙酯、十二烷基硫酸钠、PLURONIC F-68、泊洛沙姆-188、西曲溴铵、氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、多库酯钠和/或其混合物。
[0726] 示例性的结合剂包括淀粉(例如，玉米淀粉和淀粉糊)、明胶、糖(例如，蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、乳糖醇、甘露醇等)、天然和合成的树胶(例如，阿拉伯胶、海藻酸钠、爱尔兰苔提取物、panwar树胶、印度树胶、isapol husks的粘液、羧甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、微晶纤维素、醋酸纤维素、聚(乙烯吡咯烷酮)、硅酸铝镁(VEEGUM)和落叶松阿拉伯半乳聚糖)、藻酸盐、聚氧化乙烯、聚乙二醇、无机钙盐、硅酸、聚甲基丙烯酸酯，蜡、水、醇和/或其混合物。
[0727] 示例性的防腐剂包括抗氧剂、螯合剂、抗微生物防腐剂、抗真菌防腐剂、醇防腐剂、酸性防腐剂和其他防腐剂。在某些实施方式中，防腐剂是抗氧剂。在其他实施方式中，防腐剂是螯合剂。
[0729] 示例性的螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)及其盐和水合物(例如，乙二胺四乙酸钠、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、乙二胺四乙酸二钠钙、乙二胺四乙酸二钾等)、柠檬酸及其盐和水合物(例如，柠檬酸一水合物)、富马酸及其盐和水合物、苹果酸及其盐和水合物、磷酸及其盐和水合物以及酒石酸及其盐和水合物。示例性的抗微生物防腐剂包括苯扎氯铵、，苄索氯铵、苯甲醇、溴硝醇、溴棕三甲铵、氯化十六烷基吡啶、氯己定、氯丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、己二胺、咪唑、苯酚，苯氧乙醇，苯乙醇、硝酸苯汞、丙二醇和硫柳汞。
[0730] 示例性的抗真菌防腐剂包括对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠和山梨酸。
[0731] 示例性的醇防腐剂包括乙醇、聚乙二醇、苯酚、酚类化合物、双酚、氯丁醇，羟苯酸酯和苯乙醇。
[0732] 示例性的酸性防腐剂包括维生素A、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、柠檬酸、乙酸、脱氢乙酸、抗坏血酸、山梨酸和植酸。
[0733] 其他防腐剂包括生育酚、生育酚乙酸酯、甲磺酸去铁胺、溴棕三甲铵、丁基羟基茴香醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、乙二胺、十二烷基硫酸钠(SLS)、十二烷基醚硫酸钠(SLES)、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钾、焦亚硫酸钾、GLYDANT PLUS、PHENONIP、对羟基苯甲酸甲酯、GERMALL 115、GERMABEN II、NEOLONE、KATHON和EUXYL。
[0734] 示例性缓冲剂包括柠檬酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液、氯化铵、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、葡乳醛酸钙、葡庚糖酸钙、葡萄糖酸钙、D-葡糖酸、甘油磷酸钙、乳酸钙、丙酸、乙酰丙酸钙、戊酸、磷酸氢钙、磷酸、磷酸三钙、碱式磷酸钙、醋酸钾、氯化钾、葡萄糖酸钾、钾混合物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸钾混合物、醋酸钠、碳酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、乳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钠混合物、氨丁三醇、氢氧化镁、氢氧化铝、海藻酸、无热原水、等渗盐水、林格氏液、乙醇及其混合物。
[0736] 示例性的天然油包括扁桃仁、杏仁、鳄梨、巴巴苏、佛手柑、黑穗醋栗种子、琉璃苣、杜松、甘菊、油菜、葛缕子、巴西棕榈、蓖麻、肉桂、可可脂、椰子、鱼肝、咖啡、玉米、棉籽、鸸鹋、桉树、见月草、鱼、亚麻籽、香叶、葫芦、葡萄籽、榛子、牛膝草、肉豆蔻酸异丙酯、荷荷巴油、夏威夷核果、醒目薰衣草、薰衣草、柠檬、山苍子、澳洲坚果、锦葵、芒果仁、池花籽、水貂、肉豆蔻、橄榄、橙、橘棘鲷、棕榈、棕榈仁、桃仁、花生、罂粟籽、南瓜子、油菜籽、米糠、迷迭香、红花、檀香、茶花、香薄荷、沙棘、芝麻、乳木果油、硅酮、大豆、向日葵、茶树、蓟、椿、香根草、核桃和小麦胚芽的油。示例性的合成油包括但不限于硬脂酸丁酯、辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯、环甲硅油、癸二酸二乙酯、二甲聚硅氧烷360、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、辛基十二烷醇、油醇、硅油及其混合物。
[0737] 尽管本申请提供的药物递送组合物的描述主要涉及适于向人施用的组合物，但是本领域技术人员将理解的是此类组合物通常适于向各种动物施用。对适于向人施用的药物递送组合物进行修改，以使其成为适于向各种动物施用的组合物是很好理解的，并且本领域的普通兽医药理学家能够通过普通实验设计和/或进行这些修改。
[0738] 本申请提供的药物递送组合物和装置通常以适于预期用途(例如，手术植入)的尺寸(例如，体积)和重量制剂，以便于施用。但是，将理解的是，本公开内容的组合物或装置的总量(例如，所植入装置的数量)将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任何特定对象或生物体的特定治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括所治疗的疾病和病症的严重程度；所使用的特定活性成分的活性；所使用的特定成分；对象的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用时间、施用途径和所使用的特定活性成分的排泄速率；治疗持续时间；与所使用的特定活性成分联合或同步使用的药物；以及医学领域公知的因素。
[0739] 可以通过手术植入施用本申请提供的药物递送组合物和装置。例如，可以通过在切除肿瘤的空隙体积中手术植入施用药物递送组合物或装置。
[0740] 达到有效量所需的治疗剂的准确量将因对象而异，其取决于例如对象的物种、年龄和一般状况、副作用或病症的严重程度、特定药剂的鉴定等。
[0741] 在某些实施方式中，向70kg成人施用的组合物或装置的有效量可以包括约0.0001mg至约3000mg、约0.0001mg至约2000mg、约0.0001mg至约1000mg、约0.001mg至约
1000mg、约0.01mg至约1000mg、约0.1mg至约1000mg、约1mg至约1000mg、约1mg至约100mg、约
10mg至约1000mg或者约100mg至约1000mg。
1000mg、约0.01mg至约1000mg、约0.1mg至约1000mg、约1mg至约1000mg、约1mg至约100mg、约
10mg至约1000mg或者约100mg至约1000mg。
[0742] 在某些实施方式中，组合物或装置可以是每日足以递送约0.001mg/kg至约100mg/kg、约0.01mg/kg至约50mg/kg、约0.1mg/kg至约40mg/kg、约0.5mg/kg至约30mg/kg、约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.1mg/kg至约10mg/kg或者约1mg/kg至约25mg/kg对象体重的在组合物中存在的任何治疗剂的剂量水平，以获得所需的治疗作用。
[0743] 应当意识到的是，本申请所述的剂量范围为向成人施用所提供的药物递送组合物和装置提供了指导。向例如儿童或青少年施用的量可以由医师或本领域技术人员确定，并且可以低于或等于向成人施用的量。
[0744] 还应当意识到的是，本申请所述的组合物和装置还可以与一种或多种其他药剂联合施用。例如，可以将组合物和装置与在体内降低和/或改善其代谢、抑制其排泄和/或改善其分布的其他药剂联合施用。还应当意识到的是，所使用的其他疗法可以实现对相同病症的所需效果，和/或其可以实现不同作用。
[0745] 组合物和装置可以与一种或多种其他药剂同时、在其之前或之后施用，可以将一种或多种其他药剂作为例如联用疗法使用。药剂包括治疗活性剂。药剂还包括预防活性剂。每种其他药剂可以以某一剂量和/或针对该药剂确定的时间表施用。其他药剂将以不同剂量和/或不同施用途径单独施用。在某一方案中使用的特定组合将考虑药物递送组合物与其他药剂的相容性和/或要实现的所需治疗和/或预防作用。在通常情况下，预计组合使用的其他药剂的使用水平不超过单独使用其的水平。在一些实施方式中，在组合中使用的水平将低于单独使用其的水平。
[0746] 示例性的其他药剂包括但不限于抗增殖剂、抗癌剂、抗炎剂、免疫抑制剂和止痛剂。药剂包括小分子治疗剂，如药物化合物(例如，由美国食品和药物管理局根据美国联邦法规(CFR)批准的化合物)、肽、蛋白、碳水化合物、单糖、寡糖、多糖、核蛋白、粘蛋白、脂蛋白、合成多肽或蛋白质、与蛋白连接的小分子、糖蛋白、类固醇、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷，寡核苷酸、反义寡核苷酸、脂质、激素、维生素和细胞。
[0747] 在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含细胞。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含过继转移细胞。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包含T细胞。在某些实施方式中，其他药剂不是过继转移细胞。在某些实施方式中，其他药剂不是T细胞。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包括肿瘤抗原。在某些实施方式中，药物递送组合物和装置不包括离体负载的肿瘤抗原。
[0748] 在某些实施方式中，“药物递送组合物“指液体形式的组合物。在某些实施方式中，术语“药物递送装置”指固体形式的组合物。在某些实施方式中，可以在充分交联后发生从组合物向装置的转变，以使得所得到的材料具有与固体形式一致的贮能模量，这使得能够在外科手术中对其进行物理操作和植入。因此，固体形式的药物递送装置可能特别适于实施本公开内容的预期用途(例如，手术植入)。
[0749] 在某些实施方式中，在体内植入之前，立即制备药物递送组合物和/或药物递送装置(例如，在手术室或较近距离)。在某些实施方式中，药物递送组合物和/或药物递送装置在体内植入24小时、18小时、12小时、11小时、10小时、9小时、8小时、7小时、6小时、5小时、4小时、3小时、2小时、1小时、30分钟、20分钟、10分钟、5分钟或者1分钟内制备。
[0750] 在某些实施方式中，药物递送组合物和/或药物递送装置在体内植入前制备。在某些实施方式中，药物递送组合物和/或药物递送装置在体内植入31天、28天、21天、14天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或者1天内制备。
[0751] 在某些实施方式中，在治疗背景下在其使用的1年、10个月、8个月、6个月、4个月、3个月、2个月、31天、28天、21天、14天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天内制备药物递送组合物。在某些实施方式中，然后，在体内植入31天、28天、21天、14天、7天、6天、5天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、11小时、10小时、9小时、8小时、7小时、6小时、5小时、4小时、3小时、2小时、1小时、30分钟、20分钟、10分钟、5分钟或1分钟内，通过加入如本申请所述的交联剂，将所制备的药物递送组合物制备相应的药物递送装置。
[0752] 本公开内容还包括试剂盒。所提供的试剂盒可以包含本申请中所述的组合物和/或装置以及容器(例如，小瓶、安瓿、瓶子、注射器和/或分配器包装或者其他适宜的容器)。在一些实施方式中，所提供的试剂盒还可以任选地包含第二容器，所述第二容器包含用于稀释或混悬本申请所述的药物组合物或化合物的药物赋形剂。在一些实施方式中，试剂盒包含药物递送组合物和/或药物递送装置的前体成分(例如，透明质酸和交联剂；或者藻酸盐和交联剂)。
[0753] 在某些实施方式中，试剂盒包含水凝胶和先天免疫应答的激活剂。在某些实施方式中，试剂盒包含水凝胶和细胞因子。在某些实施方式中，试剂盒包含水凝胶和适应性免疫应答的激活剂。在某些实施方式中，试剂盒还包含先天免疫功能的激活剂。在某些实施方式中，试剂盒还包含细胞因子。在某些实施方式中，试剂盒还包含适应性免疫应答的激活剂。在某些实施方式中，试剂盒还包含巨噬细胞效应功能的调节剂。在某些实施方式中，试剂盒还包含其他适应性免疫应答的激活剂。在某些实施方式中，试剂盒还包含溶瘤病毒、放射性同位素、免疫调节性化疗剂、靶向剂或其组合。在某些实施方式中，试剂盒包含本申请所述的任何药物递送组合物。在某些实施方式中，试剂盒包含本申请所述的任何药物递送装置。
[0754] 在某些实施方式中，试剂盒不包含化疗剂。在某些实施方式中，试剂盒不包含细胞毒剂。
[0755] 在某些实施方式中，本申请所述的试剂盒还包含试剂盒的使用说明书。本申请所述的试剂盒还可以包含监管机关如美国食品和药物管理局(FDA)所要求的信息。在某些实施方式中，在试剂盒中包含的信息是处方信息。在某些实施方式中，试剂盒和说明书用于治疗癌症。本申请所述的试剂盒可以包含一种或多种本申请所述的其他药剂作为单独的组合物。
[0756] 治疗和使用方法
[0757] 本公开内容提供了使用本申请所述的药物递送组合物和装置用于在对象中治疗和/或预防增殖性疾病如癌症(例如，肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤或胚细胞瘤)的方法。
[0758] 在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于治疗癌症。在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于推迟癌症发作、减缓其进展或改善其症状。在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于预防癌症。在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于预防原发性肿瘤再生长。在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于预防肿瘤转移。在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置与其他化合物、药物或治疗剂联合施用以治疗癌症。
[0759] 在某些实施方式中，癌症是实体瘤。在某些实施方式中，癌症是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤、胚细胞瘤或其组合。在某些实施方式中，肿瘤是肉瘤、癌、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤、胚细胞瘤或其组合。
[0760] 在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于治疗癌症，包括但不限于听神经瘤；腺癌；肾上腺癌；肛门癌；血管肉瘤(例如淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、血管肉瘤)；阑尾癌；良性单克隆丙种球蛋白病；胆道癌(例如胆管细胞癌)；胆管癌；膀胱癌；骨癌；乳腺癌(例如乳腺腺癌、乳腺乳头状癌、乳腺癌、乳腺髓样癌)；脑癌(例如脑膜瘤、成胶质细胞瘤、胶质瘤(例如星形细胞瘤、少突胶质瘤)、成神经管细胞瘤)；支气管癌；类癌肿瘤；心脏肿瘤；宫颈癌(例如宫颈腺癌)；绒毛膜癌；脊索瘤；颅咽管瘤；结肠直肠癌(例如结肠癌、直肠癌、结肠直肠腺癌)；结缔组织癌；上皮癌；导管原位癌；室管膜瘤；内皮肉瘤(例如卡波西肉瘤(Kaposi’s sarcoma)、多发性特发性出血性肉瘤)；子宫内膜癌(例如子宫癌、子宫肉瘤)；食道癌(例如食道腺癌、巴雷特氏腺癌(Barrett’s adenocarcinoma))；尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)；眼癌(例如眼内黑色素瘤、成视网膜细胞瘤)；家族性嗜酸性粒细胞增多症；胆囊癌；胃癌(例如胃腺癌)；胃肠道间质瘤(GIST)；生殖细胞癌；头颈部癌(例如头颈部鳞状细胞癌、口腔癌(例如口腔鳞状细胞癌)、咽喉癌(例如喉癌、咽癌、鼻咽癌、口咽癌))；造血系统癌症(例如白血病，如急性淋巴细胞性白血病(ALL)(例如B细胞ALL、T细胞ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)(例如B细胞AML、T细胞AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)(例如B细胞CML、T细胞CML)、以及慢性淋巴细胞性白血病(CLL)(例如B细胞CLL、T细胞CLL))；淋巴瘤，如霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma，HL)(例如B细胞HL、T细胞HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如B细胞NHL，如弥漫性大细胞淋巴瘤(DLCL)(例如弥漫性大B细胞淋巴瘤)、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(CLL/SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、边缘区B细胞淋巴瘤(例如粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤、淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区B细胞淋巴瘤)、原发性纵隔性B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(即瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(macroglobulinemia))、毛细胞白血病(HCL)、成免疫细胞性大细胞淋巴瘤、前体B成淋巴细胞性淋巴瘤以及原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤；以及T细胞NHL，如前体T成淋巴细胞性淋巴瘤/白血病、外周T细胞淋巴瘤(PTCL)(例如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)(例如蕈样真菌病、塞扎里综合征(Sezary syndrome))、血管成免疫细胞性T细胞淋巴瘤、淋巴结外自然杀伤T细胞淋巴瘤、肠病型T细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、以及间变性大细胞淋巴瘤)；如上文所述的一种或多种白血病/淋巴瘤的混合疾病；多发性骨髓瘤；重链病(例如α链病、γ链病、μ链病)；成血管细胞瘤；组织细胞增生症；
下咽癌；炎症性肌成纤维细胞瘤；免疫细胞性淀粉样变性；肾癌(例如肾母细胞瘤(也被称为维尔姆斯肿瘤(Wilms’tumor))、肾细胞癌)；肝癌(例如肝细胞癌(HCC)、恶性肝细胞瘤)；肺癌(例如支气管癌、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌)；平滑肌肉瘤(LMS)；
肥大细胞增多症(例如系统性肥大细胞增多症)；黑色素瘤；中线癌；多发性内分泌肿瘤综合征；肌肉癌；骨髓增生异常综合征(MDS)；间皮瘤；骨髓增生性病症(MPD)(例如真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生(agnogenic myeloid metaplasia，AMM)(也被称为骨髓纤维化(MF))、慢性特发性骨髓纤维化、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、嗜酸性粒细胞增多综合征(HES))；鼻咽癌；成神经细胞瘤；神经纤维瘤(例如1型或2型神经纤维瘤病(NF)、神经鞘瘤病)；神经内分泌癌(例如胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、类癌肿瘤)；骨肉瘤(例如骨癌)；卵巢癌(例如囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)；乳头状腺癌；胰腺癌(例如胰腺腺癌、导管内乳头状粘液性赘生物(IPMN)、胰岛细胞瘤)；甲状旁腺癌；乳头状腺癌；阴茎癌(例如阴茎和阴囊的佩吉特氏病(Paget’s disease))；咽癌；松果体瘤；垂体癌；胸膜肺母细胞瘤；原始神经外胚层肿瘤(PNT)；浆细胞瘤形成；副肿瘤综合征；上皮内赘生物；前列腺癌(例如前列腺腺癌)；直肠癌；横纹肌肉瘤；
视网膜母细胞瘤；唾液腺癌；皮肤癌(例如鳞状细胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底细胞癌(BCC))；小肠癌(例如阑尾癌)；软组织肉瘤(例如恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、软骨肉瘤、纤维肉瘤、粘液肉瘤)；皮脂腺癌；胃癌；小肠癌；汗腺癌；滑膜瘤；睾丸癌(例如精原细胞瘤、睾丸胚胎癌)；胸腺癌；甲状腺癌(例如甲状腺乳头状癌、乳头状甲状腺癌(PTC)、甲状腺髓样癌)；尿道癌；子宫癌；阴道癌；外阴癌(例如外阴的佩吉特氏病)或其任意组合。
下咽癌；炎症性肌成纤维细胞瘤；免疫细胞性淀粉样变性；肾癌(例如肾母细胞瘤(也被称为维尔姆斯肿瘤(Wilms’tumor))、肾细胞癌)；肝癌(例如肝细胞癌(HCC)、恶性肝细胞瘤)；肺癌(例如支气管癌、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌)；平滑肌肉瘤(LMS)；
肥大细胞增多症(例如系统性肥大细胞增多症)；黑色素瘤；中线癌；多发性内分泌肿瘤综合征；肌肉癌；骨髓增生异常综合征(MDS)；间皮瘤；骨髓增生性病症(MPD)(例如真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生(agnogenic myeloid metaplasia，AMM)(也被称为骨髓纤维化(MF))、慢性特发性骨髓纤维化、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、嗜酸性粒细胞增多综合征(HES))；鼻咽癌；成神经细胞瘤；神经纤维瘤(例如1型或2型神经纤维瘤病(NF)、神经鞘瘤病)；神经内分泌癌(例如胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、类癌肿瘤)；骨肉瘤(例如骨癌)；卵巢癌(例如囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)；乳头状腺癌；胰腺癌(例如胰腺腺癌、导管内乳头状粘液性赘生物(IPMN)、胰岛细胞瘤)；甲状旁腺癌；乳头状腺癌；阴茎癌(例如阴茎和阴囊的佩吉特氏病(Paget’s disease))；咽癌；松果体瘤；垂体癌；胸膜肺母细胞瘤；原始神经外胚层肿瘤(PNT)；浆细胞瘤形成；副肿瘤综合征；上皮内赘生物；前列腺癌(例如前列腺腺癌)；直肠癌；横纹肌肉瘤；
视网膜母细胞瘤；唾液腺癌；皮肤癌(例如鳞状细胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底细胞癌(BCC))；小肠癌(例如阑尾癌)；软组织肉瘤(例如恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、软骨肉瘤、纤维肉瘤、粘液肉瘤)；皮脂腺癌；胃癌；小肠癌；汗腺癌；滑膜瘤；睾丸癌(例如精原细胞瘤、睾丸胚胎癌)；胸腺癌；甲状腺癌(例如甲状腺乳头状癌、乳头状甲状腺癌(PTC)、甲状腺髓样癌)；尿道癌；子宫癌；阴道癌；外阴癌(例如外阴的佩吉特氏病)或其任意组合。
[0761] 在某些实施方式中，癌症是乳腺癌。在某些实施方式中，癌症是皮肤癌。在某些实施方式中，癌症是黑色素瘤。在某些实施方式中，癌症是肺癌。在某些实施方式中，癌症是肾癌。在某些实施方式中，癌症是肝癌。在某些实施方式中，癌症是胰腺癌。在某些实施方式中，癌症是结直肠癌。在某些实施方式中，癌症是膀胱癌。在某些实施方式中，癌症是淋巴瘤。在某些实施方式中，癌症是前列腺癌。在某些实施方式中，癌症是甲状腺癌。
[0762] 在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于治疗腺癌、肾上腺癌、肛门癌、血管肉瘤、阑尾癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管癌、类癌、心脏肿瘤、宫颈癌、绒毛膜癌、脊索瘤、结直肠癌、结缔组织癌、颅咽管瘤、原位导管癌、内皮瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、上皮癌、食道癌、尤文氏肉瘤、眼癌，家族性嗜酸性粒细胞增多症、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞癌、头颈癌、血管母细胞瘤、组织细胞增多症，霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、炎性肌纤维母细胞瘤、上皮内肿瘤、免疫细胞淀粉样变性、卡波西氏肉瘤、肾癌、肝癌、肺癌、平滑肌肉瘤(LMS)、肥大细胞增多症、黑色素瘤、中线癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、肌肉癌、骨髓增生异常综合征(MDS)、间皮瘤、骨髓增生性疾病(MPD)、鼻咽癌、神经母细胞瘤、神经纤维瘤、神经内分泌癌、非霍奇金氏淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、副肿瘤综合征、甲状旁腺癌、乳头状腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体瘤、垂体癌、胸膜肺母细胞瘤、原始神经外胚层肿瘤(PNT)、浆细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮脂腺癌、皮肤癌、小肠癌(small bowel cancer)、小肠癌(small intestine cancer)、软组织肉瘤、胃癌、汗腺癌、滑膜瘤、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌、血管癌、外阴癌或其组合。
[0763] 在一些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置用于治疗和/或预防实体瘤和转移。
[0764] 在某些实施方式中，本申请所述的方法包括在对象中植入有效量的本申请所述的药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法包括在对象中手术植入有效量的本申请所述的药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法还包括在手术切除肿瘤后植入药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法还包括在肿瘤切除部位植入药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法还包括在切除肿瘤的空隙体积植入药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法还包括在肿瘤切除手术过程中在肿瘤切除部位植入药物递送组合物或装置。
[0765] 在某些实施方式中，本申请所述的方法包括在除去以重量计大于或等于50％、大于或等于55％、大于或等于60％、大于或等于65％、大于或等于70％、大于或等于75％、大于或等于80％、大于或等于85％、大于或等于90％、大于或等于95％、大于或等于96％、大于或等于97％、大于或等于98％或者大于或等于99％的切除肿瘤后植入药物递送组合物或装置。在某些实施方式中，本申请所述的方法包括在除去以体积计大于或等于50％、大于或等于55％、大于或等于60％、大于或等于65％、大于或等于70％、大于或等于75％、大于或等于80％、大于或等于85％、大于或等于90％、大于或等于95％、大于或等于96％、大于或等于
97％、大于或等于98％或者大于或等于99％的切除肿瘤后植入药物递送组合物或装置。
97％、大于或等于98％或者大于或等于99％的切除肿瘤后植入药物递送组合物或装置。
[0766] 在某些实施方式中，本申请所述的方法不包括将药物递送组合物或装置植入肿瘤附近。在某些实施方式中，本申请所述的方法不包括在不切除肿瘤的情况下将药物递送组合物或装置植入肿瘤附近。
[0767] 在某些实施方式中，本申请所述的药物递送组合物和装置与本申请所述的一种或多种其他治疗剂联合施用。在某些实施方式中，其他治疗剂是抗癌剂。
[0768] 在某些实施方式中，所治疗的对象是哺乳动物。在某些实施方式中，对象是人。在某些实施方式中，对象是驯养动物，如犬、猫、奶牛、猪、马、绵羊或山羊。在某些实施方式中，对象是伴侣动物，如犬或猫。在某些实施方式中，对象是牲畜，如奶牛、猪、马、绵羊或山羊。在某些实施方式中，对象是动物园动物。在另一个实施方式中，对象是研究动物，如啮齿动物、猪、犬或非人灵长类。在某些实施方式中，对象是非人转基因动物，如转基因小鼠或转基因猪。
实施例
实施例
[0769] 为了可以更全面的理解本申请所述的发明，提出下述实施例。应当理解的是，这些实施例仅用于说明目的，并且不应被解释为以任何方式限制本发明。
[0770] 用于制备水凝胶的材料和方法: 透明质酸(巯基修饰的透明质酸和天然细胞外基质的组分)和 聚乙二醇二丙烯酸酯(巯基反应性交联剂)购
自ESI BIO。使用Hystem水凝胶试剂盒(ESI Bio)制备水凝胶。首先使用120μl Glycosil填充Teflon模具(9mm直径)，然后加入200μg R848(Sigma,SML0196)或100μg c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)(Invivogen,tlrl-nacda2r)。对于比较研究，加入300μg大鼠抗-小鼠PD-1(抗-PD-
1)(BioXCell，克隆29F.1A12)、300μg仓鼠抗-小鼠CTLA-4(抗-CTLA-4)(BioXCell，克隆
9H10)、3μg无(IL-15sa)的小鼠IL-15/IL-15R复合重组蛋白载体(eBioscience,34-8152-
82)、100μg 2’3’-cGAMP(Invivogen,tlrl-nacga23)、200μg来那度胺(Sigma,CDS022536)、
1500μg塞来昔布(Selleckchem,S1261)、10μg Ccl4(R&D Systems,451-MB/CF)、10μg Ccl5(R&D Systems,478-MR/CF)、10μg Cxcl10(R&D Systems,466-CR/CF)、100μg紫杉醇(Selleckchem,S1150)或100μg多柔比星(Selleckchem,S1208)。接下来，将30μl Extralink加入模具，并使水凝胶交联至少1小时。对于体外释放研究和共聚焦成像，根据生产厂商的指南，分别使用Alexa Fluor 405NHS酯(Thermo Fisher Scientific,A30000)和VivoTag
680XL蛋白标记试剂盒(Perkin Elmer,NEV11118)对抗-PD-1和IL-15sa进行荧光标记，并将荧光素标记的2’3’-cGAMP(BIOLOG Life Science Institute,C195)作为2’3’-c-di-PS(2)(Rp,Rp)的模型化合物。对于体内成像，使用VivoTag 800(Perkin Elmer,NEV11107)荧光标记的抗-PD-1和IL-15sa以及磺酸基-Cy7-标记的2’3’-cGAMP(BIOLOG Life Science Institute，客户定制)。对于水凝胶降解的体内评价，将1.2μl Alexa Fluor 750C5-马来酰亚胺(Molecular Probes,A30459)直接与水凝胶缀合。通过使用200μl藻酸钠溶液(amsbio,AMS.CSR-ABC-AL)填充Teflon模具，然后加入200μg of R848，之后加入15μl1M氯化钙(bioWORLD,40320005)制备藻酸盐水凝胶。使水凝胶凝固至少30分钟。蛋白缀合和水凝胶的制备在无菌条件下进行。抗-CD40(克隆，FGK45)和抗-CD137(克隆3H3)抗体也购自BioxCell。c-di-GMP、瑞喹莫德(TLR7/8激动剂)(对于图68和图69，其中瑞喹莫德溶解在水中而非DMSO中)、聚(I:C)(TLR3激动剂)和CpG(TLR9激动剂)购自Invivogen。ALEXA
750染料购自Thermo Fisher Scientific。
自ESI BIO。使用Hystem水凝胶试剂盒(ESI Bio)制备水凝胶。首先使用120μl Glycosil填充Teflon模具(9mm直径)，然后加入200μg R848(Sigma,SML0196)或100μg c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)(Invivogen,tlrl-nacda2r)。对于比较研究，加入300μg大鼠抗-小鼠PD-1(抗-PD-
1)(BioXCell，克隆29F.1A12)、300μg仓鼠抗-小鼠CTLA-4(抗-CTLA-4)(BioXCell，克隆
9H10)、3μg无(IL-15sa)的小鼠IL-15/IL-15R复合重组蛋白载体(eBioscience,34-8152-
82)、100μg 2’3’-cGAMP(Invivogen,tlrl-nacga23)、200μg来那度胺(Sigma,CDS022536)、
1500μg塞来昔布(Selleckchem,S1261)、10μg Ccl4(R&D Systems,451-MB/CF)、10μg Ccl5(R&D Systems,478-MR/CF)、10μg Cxcl10(R&D Systems,466-CR/CF)、100μg紫杉醇(Selleckchem,S1150)或100μg多柔比星(Selleckchem,S1208)。接下来，将30μl Extralink加入模具，并使水凝胶交联至少1小时。对于体外释放研究和共聚焦成像，根据生产厂商的指南，分别使用Alexa Fluor 405NHS酯(Thermo Fisher Scientific,A30000)和VivoTag
680XL蛋白标记试剂盒(Perkin Elmer,NEV11118)对抗-PD-1和IL-15sa进行荧光标记，并将荧光素标记的2’3’-cGAMP(BIOLOG Life Science Institute,C195)作为2’3’-c-di-PS(2)(Rp,Rp)的模型化合物。对于体内成像，使用VivoTag 800(Perkin Elmer,NEV11107)荧光标记的抗-PD-1和IL-15sa以及磺酸基-Cy7-标记的2’3’-cGAMP(BIOLOG Life Science Institute，客户定制)。对于水凝胶降解的体内评价，将1.2μl Alexa Fluor 750C5-马来酰亚胺(Molecular Probes,A30459)直接与水凝胶缀合。通过使用200μl藻酸钠溶液(amsbio,AMS.CSR-ABC-AL)填充Teflon模具，然后加入200μg of R848，之后加入15μl1M氯化钙(bioWORLD,40320005)制备藻酸盐水凝胶。使水凝胶凝固至少30分钟。蛋白缀合和水凝胶的制备在无菌条件下进行。抗-CD40(克隆，FGK45)和抗-CD137(克隆3H3)抗体也购自BioxCell。c-di-GMP、瑞喹莫德(TLR7/8激动剂)(对于图68和图69，其中瑞喹莫德溶解在水中而非DMSO中)、聚(I:C)(TLR3激动剂)和CpG(TLR9激动剂)购自Invivogen。ALEXA
750染料购自Thermo Fisher Scientific。
[0771] 共聚焦显微镜：将如本申请所述的荧光标记的2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1在激光共聚焦扫描显微镜(Leica TCS SP8 STED CW；Leica Microsystems)下成像。使用Leica LAS AF软件(Leica Microsystems)处理所获得的图像。
[0772] 细胞系：在含有10％FBS、1％青霉素-链霉素和1％L-谷氨酰胺的RPMI 1640完全培养基中培养表达Luc2的转移性小鼠4T1乳腺癌细胞(Perkin Elmer)。在在含有10％FBS、1％青霉素-链霉素和1％L-谷氨酰胺的RPMI 1640完全培养基中培养转移性小鼠4T1乳腺癌(ATCC,CRL2539)和B16-BL6黑色素瘤(由NIH的Glenn Merlino博士惠赠)细胞系。在含10％FBS、1％青霉素-链霉素和1％丙酮酸钠的完全DMEM中培养小鼠LLC肺癌细胞系(由DFCI的Harvey Cantor博士惠赠)。检测细胞的支原体污染情况，结果为阴性。
[0773] 小鼠：所有动物实验均按照Dana-Farber癌症研究所(DFCI)机构动物管理和使用委员会(IACUC)批准的方案进行。对于转移性乳腺癌模型，雌性BALB/cJ小鼠(6-8周龄)购自Jackson Laboratories(Stock#000651)。对于转移性黑色素瘤模型，B6(Cg)-Tyrc-2J/J小鼠(7周龄)购自Jackson Laboratories(Stock#000058)。对于肺癌模型，雌性C57BL/6J小鼠(6-8周龄)购自Jackson Laboratories(Stock#000664)。小鼠饲养在DFCI的动物房。
[0774] 一般外科手术：对7周龄雌性Balb/c小鼠原位接种100,000个4T1-Luc2同源乳腺癌细胞(接种至第四乳腺脂肪垫)。10天后，对小鼠进行麻醉，手术切除肿瘤，并将组合物置于切除部位。对于体内降解研究，将组合物置于乳腺脂肪垫；对于大多数小鼠，针对这些研究没有接种或除去肿瘤，因为如果在组合物中不包含免疫疗法，则大多数小鼠会死于复发，尽管一只小鼠仅通过手术存活下来。通过分组确定手术顺序以避免系统性误差。提供标准的随访护理(缝合夹，止痛剂)。
[0775] 体外释放研究：为了确定每种有效载荷从水凝胶中的释放动力学，将负载荧光标记的抗-PD-1，荧光标记的IL-15sa、来那度胺、塞来昔布，荧光标记的2’3’-cGAMP或R848的水凝胶浸入3mL pH 7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中。在每个时间点，取出1mL培养基，并且再加入等量的新鲜培养基。然后，使用荧光酶标仪或通过HPLC测量已释放的有效载荷的量。
[0776] 水凝胶降解的体内评价：在将水凝胶手术植入小鼠后，使用IVIS光谱体内成像系统(Perkin Elmer)监测荧光团标记水凝胶的体内降解。每周进行荧光成像并使用活体成像软件(Perkin Elmer)进行分析。对荷瘤小鼠和非荷瘤小鼠进行体内水凝胶降解评价的检测，但是仅有一只荷瘤小鼠在没有治疗的情况下存活超过几周，因为几乎所有仅进行手术的动物均会肿瘤复发。
[0777] 体内释放研究：为评价Cy7羧酸(R848的模型化合物)、抗-PD-1、IL-15sa和2’3’-cGAMP的体内释放性质，将含有荧光团或者荧光标记有效载荷的一种的水凝胶手术植入非荷瘤小鼠。使用IVIS光谱体内成像系统(Perkin Elmer)监测荧光成像。
[0778] 体内肿瘤模型和治疗：对于转移性乳腺癌模型，将105个4T1-Luc2或4T1细胞(在30μl DPBS中)原位接种至小鼠的第四乳房垫以产生局部肿瘤块。在没有任何切口的情况下，将细胞注射至脂肪垫。将小鼠随机分配至治疗组，并在肿瘤接种后10天进行手术。对于转移性黑色素瘤和肺癌模型，在小鼠中皮下接种106个B16-BL6或5x105个LLC细胞(在100μl DPBS中)以产生局部肿瘤块。将小鼠随机分配至治疗组，并且当肿瘤体积达到～600mm3时进行手术。使用2％异氟烷对小鼠进行麻醉，切除肿瘤，并将水凝胶置于手术切除时所得的腔的部位。用医用夹封闭伤口。进行对照实验，其中在手术部位、腹腔内或静脉内以溶液形式给予治疗。对于肿瘤再攻击实验，在对侧第四乳腺脂肪垫中接种104个4T1-Luc2细胞。手术至少独立地进行三次，外科医师通常是盲态的。
[0779] 体内生物发光和成像：手术后，通过生物发光成像(BLI)每周检查小鼠的肿瘤复发和远端转移情况。为此，腹腔注射Luc2的底物D-萤光素(150mg/kg)10min后，使用2％异氟烷对小鼠麻醉，并使用IVIS光谱体内成像系统(Perkin Elmer)成像。
[0780] NK细胞、CD8+T细胞或CD4+T细胞的耗竭以及IFNAR-1的中和：通过从治疗前1天开始每3天腹腔内施用耗竭抗体将特定细胞亚群(NK细胞、CD8+T细胞或CD4+T细胞)耗竭。用于耗竭的抗体分别是抗-Asialo GM1(多克隆，Wako Chemical,30μl)、抗-小鼠CD8a(克隆2.43)和抗-小鼠CD4(克隆GK1)。为检测I型IFN信号传导的作用，给予小鼠阻断抗-IFNα/β受体亚基1(抗-IFNAR-1，克隆MAR1-5A3)。除非另有说明，否则所有抗体均购自BioXCell，并且使用200μg抗体。通过对从小鼠的血液中分离的白细胞进行的流式细胞术确认了NK细胞、CD8+T+
细胞或CD4T细胞的细胞耗竭，所述小鼠已经给予了抗体或PBS。
细胞或CD4T细胞的细胞耗竭，所述小鼠已经给予了抗体或PBS。
[0781] 体内细胞因子分析：在切除肿瘤并放置支架(空的或含有三重组合的)后14天，从小鼠收集血液。在切除肿瘤并给予负载R848的水凝胶或无水凝胶后1.5小时、6小时、3天和14天，从小鼠收集血液。在其他实验中，使用负载STING-RR的水凝胶。将血浆送至Eve Technologies，以测量由对治疗的应答产生的循环细胞因子的水平。补充MD-31嵌板评估IFN-α和IFN-β。
[0782] 流式细胞术：在BD LSRFortessa X-20(BD Biosciences)进行流式细胞术，所有抗体均购自BioLegend、eBioscience或BD Biosciences(表6)。使用具有BD GolgiPlug的白细胞激活混合物(BD Biosciences)以刺激脾细胞。存活素的显性肽(氨基酸66-74)GWEPDDNPI(纯度>95％)购自New England Peptide。小鼠白血病病毒包膜糖蛋白gp70的显性肽(氨基酸423-431)SPSYVYHQF(纯度>95％)购自New England Peptide。将GolgiPlug(BD Biosciences)用于检查细胞内的细胞因子和溶细胞分子。
[0783] 血液计数和肝酶的评价：在切除肿瘤和给予治疗后15天或者在切除肿瘤和给予治疗后3和14天，从小鼠收集血液。在DFCI Animal Research Facility中使用HEMAVET 950FS对血液计数(血红蛋白、红细胞比容、白细胞、血小板、分群和红细胞指数)进行定量。从血液中分离血清，并由IDEXX BioResearch对肝酶(AST、ALT和BUN)进行定量。
[0784] 统计方法：未将统计方法用于预先确定必要的样本量。根据预实验的结果选择样本量，以便相关的统计检验能够揭示实验组之间的显著性差异。使用GraphPad Prism软件(7.01版)进行统计分析。如图例中所示，数据以平均值±SEM表示。为了对两组的统计学显著性进行比较，使用双尾非配对t-检验。对于生存期分析，使用对数-秩(Mantel-Cox)检验。*p≤0.05、**p≤0.01、***p≤0.001、****p≤0.0001。
[0785] 实施例1：药物递送组合物的制备
[0786] 制备一系列水凝胶，以确定有用的制备方法和构建水凝胶系统所需的试剂量。通常地，将 透明质酸和 聚乙二醇二丙烯酸酯交联剂在模具中结合。将结合的试剂静置至少1小时后形成水凝胶。使用流变仪测量水
凝胶的贮能模量。将这些总结在表1中。
凝胶的贮能模量。将这些总结在表1中。
[0787] 表1：
[0788]
[0789] 水凝胶还可以由藻酸盐制备。为制备水凝胶5，将200μL藻酸钠溶液(购自amsbio的ca.0.5-2.5％溶液；产品代码：AMS.CSR-ABC-AL)与15μL 1M氯化钙溶液以及目标化合物(例如，将100μg STING-RR溶于40μL PBS中)混合。以类似方式制备含有瑞喹莫德的藻酸盐水凝胶。使用200μL藻酸钠溶液(购自amsbio的ca.0.5-2.5％溶液；产品代码：AMS.CSR-ABC-AL)填充Teflon模具，然后加入200μg瑞喹莫德(溶于20μL DMSO中)，之后加入15μL 1M氯化钙(bioWORLD,40320005)。使用前，将水凝胶放置至少30分钟。
[0790] 药物递送组合物制备的一般程序：将120μL 透明质酸(2.0％)倒入模具(直径：9mm；高度：3.2mm)中。任选地，将适应性免疫应答的激活剂溶于PBS(30μL)中并加入模具。任选地，将细胞因子溶于PBS(10μL)中并加入模具。任选地，将先天免疫应答的激活剂溶于水中(10μL)并加入模具。将30μL 聚乙二醇二丙烯酸
酯(12.5％)加入模具中。将混合物放置至少1小时以使其固化。
酯(12.5％)加入模具中。将混合物放置至少1小时以使其固化。
[0791] 根据上述一般程序制备组合物并总结在表2中。在表2中，S＝STING激动剂(2′3′-cGAMP)；STING-RR＝2′3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)；I＝IL-15超激动剂；P＝抗-PD-1抗体；R848＝瑞喹莫德。除非另有明示，否则S、I和P的典型剂量分别为25μg、1.5μg和150μg。可以向组合物中加入荧光染料(例如，ALEXA 750染料)，以使得对装置进行成像(例如，装置F是装置8+1.2μL ALEXA 750C5-马来酰亚胺，其直接与水凝胶缀合；图1)。根据表1中针对水凝胶4所述的方法制备该表中的装置(以及装置F)。
[0792] 表2：
[0793]
[0794]
[0795] 实施例2：生物降解研究
[0796] 对7周龄雌性Balb/c小鼠原位接种100,000个4T1-Luc2同源乳腺癌细胞(接种至第四乳腺脂肪垫)。10天后，对小鼠进行麻醉，手术切除肿瘤，并将装置F至于切除部位。由于肿瘤复发，大多数小鼠被处死。在13周时间段内，通过成像监测存活小鼠中组合物的存在情况(图2)。13周后，该组合物稳定且完全地生物降解(图3)。
[0797] 未经治疗的4T1肿瘤荷瘤小鼠在肿瘤接种几周内(中位生存期40d)死于其原发肿瘤，而手术除去肿瘤几乎没有提供生存期获益(中位生存期44d)，因为在该模型中小鼠死于肿瘤复发和转移(图4)。
[0798] 在一项附加研究中，将装置F置于5只没有接种或除去肿瘤的小鼠的乳腺脂肪垫。在20周时间段内通过成像监测水凝胶在小鼠中的存在情况(图5)。水凝胶在小鼠中是稳定的，并且20周后保留少于5％(图6)。还对植入部位进行了组织病理学分析。经认证的病理学家没有检测到异常，证实水凝胶是高度生物相容性的。为了进行比较，局部施用了荧光染料溶液，结果表明如果未与支架缀合，则游离染料会非常迅速地扩散(图7和8)。这些数据证实可以将交联的透明质酸作为稳定的、可生物降解的储库。
[0799] 实施例3：包含治疗剂的水凝胶组合物的成像
[0800] 使用与2′3′-cGAMP缀合的FITC，与抗-PD-1抗体缀合的ALEXA 405染料和与IL-15sa缀合的 680染料制备装置1。获得共聚焦图像，证明这三个均分布在整个装置中(图9)。
[0801] 使用与抗-PD-1抗体缀合的ALEXA 555染料和与IL-15sa缀合的680染料制备装置2。获得共聚焦图像，证明抗-PD-1抗体和IL-15sa分布在整
个装置中(图10)。
个装置中(图10)。
[0802] 实施例4：治疗剂从水凝胶组合物中的体外释放
[0803] 根据实施例1中的一般程序制备水凝胶。其含有所示的一种或所有所示有效载荷。将荧光染料与蛋白缀合以便于测量蛋白释放动力学。将水凝胶浸入3mL缓冲液中(仅PBS、含吐温80(0.2％v/v)的PBS或含10％FBS的RPMI)并在37℃、搅拌条件下孵育。
[0804] 在所示的采样时间点，收集1mL缓冲液进行测量，并再加入等体积的新鲜缓冲液。使用荧光酶标仪测量分装样品以确定蛋白浓度。还通过HPLC对分装样品进行评估以确定小分子的浓度。
[0805] 通过向组合物中加入不同治疗剂和赋形剂制备几种组合物。根据实施例1中的一般程序制备装置3。在PBS、PBS+吐温80(0.2％v/v)或RPMI+10％FBS中研究药物从该装置中的释放情况。在PBS缓冲液中，塞来昔布的释放推迟最长时间(图11)。
[0806] 根据实施例1中的一般程序制备装置4。在PBS、PBS+吐温80(0.2％v/v)或RPMI+10％FBS中研究药物从该装置中的释放情况。抗-PD-1在所有三种缓冲液中的释放速率接近(图11)。
[0807] 根据实施例1中的一般程序制备装置5。在PBS、PBS+吐温80(0.2％v/v)或RPMI+10％FBS中研究药物从该装置中的释放情况。IL-15sa在所有这些缓冲液中的释放速率接近(图11)。
[0808] 根据实施例1中的一般程序制备装置6[c-di-GMP+I+P]。根据实施例1中的一般程序制备装置1[2′3′-cGAMP+I+P]和装置7[仅2′3′-cGAMP]。在PBS或RPMI+10％FBS中研究从这些装置中的药物释放。c-di-GMP和2′3′-cGAMP的释放速率在所有这些缓冲液中接近。无论是小分子单独制剂还是与蛋白质共同制剂，2′3′-cGAMP的释放速率是相似的(图12)。
[0809] 对2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1抗体从装置1、4、5和7中释放速率的附加比较如图13中所示。在体外沉降条件下，释放动力学在PBS和培养基中几乎相同，其范围从小分子的数小时至生物制剂的数日。包含多个有效载荷不会影响任何单独分子的释放动力学，因为无论是化合物单独负载还是与两种其他化合物联合负载是无法区分所得到的结果的。
[0810] 此外，通过将不同量的药物负载到各装置中制备装置4、5、7和22。确定了在PBS(pH 7.4)中2′3′-cGAMP(25μg、50μg、100μg)从药物递送装置7；在PBS(pH 7.4)中瑞喹莫德(R848；100μg、200μg)从药物递送装置22；在PBS(pH 7.4)中抗-PD-1抗体(150μg，300μg)从药物递送装置4；以及在PBS(pH 7.4)中IL-15sa从药物递送装置5中的释放速率。在各实验中释放速率与药物的浓度几乎没有依赖性(图65)。
[0811] 在附加实验中考察了水凝胶的负载和释放性质。在沉降条件下，在磷酸盐缓冲液(PBS)中，装置3(1500μg塞来昔布)、7(100μg S)、18、19、22和30的释放动力学的范围从小分子的数小时到生物制剂的数天(图38A-38F)。然后，确认了水凝胶在体内释放小分子和生物制剂的程度。将Cy7羧酸(Cy7-CA)作为模型小分子有效载荷，因为其物理性质与瑞喹莫德(R848)非常接近。将Cy7-CA给予非荷瘤小鼠，在溶液中或负载在置于第四乳腺脂肪垫的支架中。通过荧光IVIS成像(图37B)对小鼠进行评估，并对数据进行定量(图37C)。施用含荧光团的溶液2小时内检测到信号丧失～60％，而对于负载在水凝胶中的荧光团达到该信号衰减量需要24小时。在这段时间内，后者的信号平均增加了约3倍。
[0812] 实施例5：示例性药物递送组合物的体内植入和评价
[0813] 为了证实水凝胶在体内持续释放小分子和生物制剂，在溶液中或在随后置于第四乳腺脂肪垫的装置(荧光标记的装置4、5和7)中将荧光标记的2′3′-cGAMP、IL-15sa或抗-PD-1给予非荷瘤小鼠。使用IVIS光谱体内成像系统(Perkin Elmer)通过荧光IVIS成像对小鼠进行评估(图14-16)，并使用活体成像软件(Perkin Elmer)对数据进行分析和定量(图17)。与体外释放速率相比，体内释放速率显示出延长的动力学，因为预期这种环境比沉降条件具有更高的生理相关性。对于2'3'-cGAMP，在通过水凝胶递送后局部保留的百分比平均几乎是在最初24小时内检测的每个时间点的游离化合物的两倍。对于IL-15sa，在第一周考察的每个时间点，通过水凝胶递送后局部保留的百分比略高于游离化合物的两倍。对于抗-PD-1，在溶液中与通过水凝胶递送后局部保留的百分比差异是到目前为止最显著的，这可能是由于分子的尺寸导致的(150,000g/mol，而2′3′-cGAMP为674g/mol和IL-15sa为29,
400g/mol)。对于单克隆抗体而言，几乎所有的在溶液中递送的化合物在1周内从施用位点扩散出去。而相反的是，如果其在水凝胶中递送，则超过三分之二的抗体在施用部位保持1周以上。水凝胶将抗体的存在延长至可达施用后至少5周。这些数据证实了与在溶液中局部递送相同化合物相比水凝胶支架能够显著地持续局部释放免疫调节化合物。
400g/mol)。对于单克隆抗体而言，几乎所有的在溶液中递送的化合物在1周内从施用位点扩散出去。而相反的是，如果其在水凝胶中递送，则超过三分之二的抗体在施用部位保持1周以上。水凝胶将抗体的存在延长至可达施用后至少5周。这些数据证实了与在溶液中局部递送相同化合物相比水凝胶支架能够显著地持续局部释放免疫调节化合物。
[0814] 在体内评价了上表2中描述的一系列组合物。在评价的每个组中，对7周龄雌性Balb/c小鼠原位接种100,000个4T1-Luc2同源乳腺癌细胞(接种至第四乳腺脂肪垫)。10天后，对小鼠进行麻醉，手术切除肿瘤，并将组合物置于切除部位。在6周期间通过成像监测肿瘤复发和转移。表3总结了这些研究的结果。小鼠研究的成像情况如图18-29、32-33和39中所示。其他成像研究如图30-31和34-36中所示。
[0815] 表3：
[0816]装置 评价的小鼠 肿瘤复发的小鼠 附图
无(仅切除肿瘤) 15 12(80％) 图18
8 22 17(77％) 图19
2 14 12(86％) 图20
9 13 5(38％) 图21
10 15 7(47％) 图22
1 23 4(17％) 图23
1a 12 8(67％) 图32
1b 13 9(69％) 图32
c
1 13 7(54％) 图33
11 12 2(17％) 图24
12 12 8(67％) 图25
13 8 5(62％) 图26
14 9 2(22％) 图27
15 11 8(73％) 图28
16 12 4(33％) 图29
17 11 2(18％) 图39
18 10 1(10％) 图39
19 9 5(56％) 图39
无(仅切除肿瘤) 15 12(80％) 图18
8 22 17(77％) 图19
2 14 12(86％) 图20
9 13 5(38％) 图21
10 15 7(47％) 图22
1 23 4(17％) 图23
1a 12 8(67％) 图32
1b 13 9(69％) 图32
c
1 13 7(54％) 图33
11 12 2(17％) 图24
12 12 8(67％) 图25
13 8 5(62％) 图26
14 9 2(22％) 图27
15 11 8(73％) 图28
16 12 4(33％) 图29
17 11 2(18％) 图39
18 10 1(10％) 图39
19 9 5(56％) 图39
[0817] a：溶液剂型-IP注射；b：溶液剂型-IV注射；c：溶液剂型-局部施用。
[0818] 对照实验表明，当在切除部位未植入组合物时，肿瘤复发率较高(80％)。植入装置8(不含治疗剂的水凝胶4)产生类似结果(77％复发)。植入装置2导致较高的复发率(86％)。
其余组合物通常显示出较低至中等的肿瘤复发。特别地，含有STING激动剂如2′3′-cGAMP的组合物特别有效，并且导致了令人吃惊的较低的肿瘤复发。通过在肿瘤切除部位植入给予水凝胶组合物提供了当以溶液全身或局部施用制剂时相比更高的有效性。例如，与植入水凝胶相比，以溶液形式注射(IV或IP或局部)的装置1导致高得多的肿瘤复发(图32和33；
67％或69％或54％对比17％)。
其余组合物通常显示出较低至中等的肿瘤复发。特别地，含有STING激动剂如2′3′-cGAMP的组合物特别有效，并且导致了令人吃惊的较低的肿瘤复发。通过在肿瘤切除部位植入给予水凝胶组合物提供了当以溶液全身或局部施用制剂时相比更高的有效性。例如，与植入水凝胶相比，以溶液形式注射(IV或IP或局部)的装置1导致高得多的肿瘤复发(图32和33；
67％或69％或54％对比17％)。
[0819] 然而，将IL-15超激动剂、抗-PD-1和能够促进免疫应答的一部分小分子治疗剂(需要溶于DMSO中)加入水凝胶组合物的制剂提供了不太有效的结果(图30)。这些小分子治疗剂包括塞来昔布(COX2抑制剂)和EW7197(TGFβR抑制剂)。
[0820] 此外，研究表明将DMSO加入水凝胶组合物中降低了其他有效组合物的有效性(图31)，因此提示有机溶剂可能对组合物中的蛋白具有不利的作用。图31显示了含有c-di-GMP、IL-15sa、抗-PD-1抗体和DMSO的制剂与不含DMSO的相同组合物相比具有高得多的肿瘤复发。
[0821] 从机制角度来看，实验表明NK细胞、CD8+ T细胞和CD4+ T细胞可能均有助于由2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1的组合介导的抗肿瘤作用(图34-36)。
[0822] 总体而言，具有先天免疫应答的激活剂(例如，STING激动剂)、细胞因子或趋化因子(例如，IL-15超激动剂)以及适应性免疫应答的激活剂(例如，抗-PD-1抗体)三重组合的组合物对所治疗的小鼠显示出预料之外的高存活率(图23)。含有TLR7和/或TLR8激动剂如R848代替STING激动剂的组合物(图27)，以及含有激动剂抗-CD137抗体代替抗-PD-1的组合物(图24)也是特别有效的。出乎预料的是，将STING激动剂或IL-15sa的剂量加倍显示出这两种分子中的任何一种均能够有效的作为单药疗法，而在抗-PD-1中未观察到这一现象(图39)。所评价的组合物包括：局部、IV或IP施用的STING激动剂+IL-15超激动剂+抗-PD-1抗体的组合物。所评估的装置包括示例性的装置1、2、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和19。
在整个这些实验中，植入水凝胶组合物对小鼠的体重也没有明显影响，表明水凝胶组合物是安全的和无毒的(图80B)。在一些情况下，其中肿瘤似乎已经复发或转移，但是免疫系统随后清除了这些病变。
在整个这些实验中，植入水凝胶组合物对小鼠的体重也没有明显影响，表明水凝胶组合物是安全的和无毒的(图80B)。在一些情况下，其中肿瘤似乎已经复发或转移，但是免疫系统随后清除了这些病变。
[0823] 实施例6：示例性药物递送装置的持续局部释放阻止肿瘤复发和转移
[0824] 将4T1-Luc2乳腺癌细胞原位植入雌性BALB/cJ小鼠的第四乳腺脂肪垫。9天后，通过生物发光IVIS成像对小鼠进行成像以确认肿瘤尺寸在动物之间是一致的，以便能够对其3
进行随机分组。在肿瘤接种后第10天，切除肿瘤(～100mm)，并在肿瘤切除部位植入装置1。
对照包括未经治疗的(假手术)、空水凝胶(装置8/水凝胶4)或者在溶液中(S+I+P)递送三重组合——通过腹腔注射、静脉注射或局部施用。每周通过IVIS成像监测肿瘤负荷，结果证实当通过装置1施用三重组合时最有效地防止了局部肿瘤复发(图42、43)。值得注意的是，手术时已经出现了肺转移，并且三重组合的持续局部释放再次成为根治现有转移性病变的唯一条件(图42、43)。IVIS成像有意义地反映了长期存活情况，因为负载三重组合的水凝胶(装置1)为大多数小鼠提供了持久的生存期获益(图44)。这些数据强调了与施用在溶液中的化合物相比免疫调节有效载荷的持续局部释放具有效用。
进行随机分组。在肿瘤接种后第10天，切除肿瘤(～100mm)，并在肿瘤切除部位植入装置1。
对照包括未经治疗的(假手术)、空水凝胶(装置8/水凝胶4)或者在溶液中(S+I+P)递送三重组合——通过腹腔注射、静脉注射或局部施用。每周通过IVIS成像监测肿瘤负荷，结果证实当通过装置1施用三重组合时最有效地防止了局部肿瘤复发(图42、43)。值得注意的是，手术时已经出现了肺转移，并且三重组合的持续局部释放再次成为根治现有转移性病变的唯一条件(图42、43)。IVIS成像有意义地反映了长期存活情况，因为负载三重组合的水凝胶(装置1)为大多数小鼠提供了持久的生存期获益(图44)。这些数据强调了与施用在溶液中的化合物相比免疫调节有效载荷的持续局部释放具有效用。
[0825] 还在相同的实验条件下评价了装置2、9-16和20的作用。将2′3′-cGAMP和IL-15sa与同种型对照抗体组合以形成示例性药物递送装置20。这些研究的结果如图45-52中所示。作为2′3′-cGAMP和IL-15sa的补充，抗-PD-1赋予了与激动剂抗-CD137或激动剂抗-CD40相比更高的生存期获益(图46和图49A-49C)。抗-CD137，其为NK细胞、CD8+ T细胞和CD4+ T细胞提供了共刺激信号，也提供益处。而相反的是，抗-CD40，其为B细胞、树突状细胞和骨髓细胞提供共刺激信号且即使在缺乏T细胞介导的免疫的情况下也是有效的，与单独的2'3'-cGAMP和IL-15sa相比几乎没有影响(图50-52)。与在本研究中观察到的结果一致，已发现抗-CD40的活性(其被化疗所增强)不依赖于STING途径。
[0826] 作为2′3′-cGAMP和抗-PD-1的补充，IL-15sa赋予了与IL-21相比更高的生存期获益(图47和49A-49C)。IL-21是多层次的免疫调控因子，因为尽管其限制了树突状细胞的功能和存活，但是其促进B细胞、NK细胞和T细胞的增殖。这种多效性细胞因子(其活性是背景依赖性的)与单独的2′3′-cGAMP和抗-PD-1相比几乎不具有影响(图50-52)。作为IL-15sa和抗-PD-1的补充，2′3′-cGAMP与Toll样受体(TLR)7/8激动剂R848、TLR9激动剂CpG寡核苷酸或TLR3激动剂聚(I:C)相比赋予了更高的生存期获益(图48和49)。这些TLR的每一种的激活均能够刺激产生I型干扰素，通常将这些激动剂作为癌症疫苗的佐剂使用。基于核酸的激动剂CpG寡核苷酸和聚(I:C)与单独的IL-15sa和抗-PD-1相比几乎不具有影响(图50-52)。R848作为先天免疫激活剂赋予了有意义的获益，尽管其不如2′3′-cGAMP。虽然前者在预防局部肿瘤复发方面具有相似的效果，但是其在对抗肺转移方面的效果较差，因为使用R848治疗的一些小鼠在较晚的时间点死于疾病。这些数据表明这些免疫调节剂对已建立的抗肿瘤免疫有影响。特别地，包含I型干扰素的有效诱导剂似乎是有用的，因为配对组合中最无效的是缺乏2′3′-cGAMP的那个(图50-52)。
[0827] 还进行了实验以辨别哪些细胞和途径是在免疫疗法持续局部释放后增强抗肿瘤免疫应答的基础。重复上文所述的肿瘤接种和切除程序，但是此外将装置1置于切除部位中，将NK细胞、CD8+T细胞或CD4+T细胞耗竭(图53)，或者通过中和干扰素α受体1(IFNAR1)抑制I型干扰素的信号传导。IVIS成像表明NK细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞和I型干扰素信号传导在防止肿瘤复发和转移中均是有用的(图54和56)。组间最显著的差异是在手术后第1周NK细胞参与阻止转移的情况。与此前所述一致，通过IVIS成像观察到的复发与对长期获益的影响对应；在围手术期背景下，在三重组合持续释放后(装置1)，在所有组中先天或适应性免疫系统受损的小鼠均显示出降低的生存期(图55)。
[0828] 为了剖析使用装置1治疗后免疫细胞亚群之间的细胞和分子变化，评估了脾脏中白细胞的组成、激活状态和功能。手术后3或14天从小鼠收集脾脏进行流式细胞术分析。在较早时间点，评价免疫系统的先天性小组，特别是NK细胞和树突状细胞。在装置1的三重组合持续释放后，激活的NK细胞(高效应物(CD11b+CD27+)和终末效应物(CD11b+CD27-))的数量增加，表达NKG2D和KLRG1的NK细胞的数量也是如此(图57A)。类似地，树突状细胞的数量增加，包括用于产生强大抗肿瘤免疫的CD103+类型的树突状细胞和已知产生大量I型干扰+ +素的B220PDCA1类型浆细胞样树突状细胞(图57B)。树突状细胞表达共刺激分子CD40、CD80和CD86，表明其已被激活。
[0829] 这些树突状细胞诱导强烈的适应性抗肿瘤应答，如手术后14天的T细胞池所证实的。检测到表达包括CD69、GITR、OX40和ICOS在内的激活标记物的CD4+FoxP3-T细胞和CD8+T细胞的数量增加(图57C)。与给予空水凝胶相比，给予装置1还增加表达促炎性细胞因子IL-2、GM-CSF和IFN-γ以及细胞溶解分子颗粒酶B的T细胞的比例(图57D)。为了证实T细胞对肿瘤相关抗原的功能性识别，使用GWEPDDNPI对从治疗组和对照组分离的脾细胞进行再刺激，GWEPDDNPI是由4T1细胞表达的存活素(氨基酸66-74)的免疫显性肽。观察到表达GM-CSF和颗粒酶B的CD4+FoxP3-T细胞和CD8+T细胞的数量增加(图57E)。这些数据证实了通过装置1的围手术期递送诱导全身性抗肿瘤免疫应答的广度、耐用性和特异性。
[0830] 考虑到治疗能够消除肺中已出现的转移，还检查了手术后恢复14天后肺中白细胞的组成。在用装置1治疗的小鼠中检测到B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞的数量增加(图59)。虽然这些数据未提示负责根治转移的特定机制，但是其再次支持了这样的观点，本申请所述的治疗剂的持续释放促进了广泛的全身性抗肿瘤免疫应答。
[0831] 为了深入了解与先天性和适应性免疫细胞的激活相关的可溶性因子，测量了外周血中细胞因子的水平。在手术后第14天，收集血浆并使用多路复用激光珠技术进行分析。与使用IFNAR1中和后有效性的丧失一致，观察到与空水凝胶相比使用含有三重组合的水凝胶治疗后IFN-α和IFN-β这两者的水平均显著升高(图57F)。几种其他可溶性免疫介质的水平也显着增加，包括IL-12、IL-3和IL-7以及趋化因子CXCL2、CCL2和CCL5(图58)。这些结果表明广泛诱导了抗肿瘤免疫。
[0832] 还进行了有效性实验，结果表明装置1的三重组合在使用母体4T1乳腺癌细胞原位接种的雌性BALB/cJ小鼠中是有效的(图60)。重要的是，这些细胞缺乏Luc2转基因。
[0833] 有效性实验还表明药物递送装置(例如，装置1)的术中放置是治疗获益所需要的。如果未手术除去肿瘤，即使将水凝胶放置在肿瘤周围，有效性也会丧失(图61和62)。
[0834] 将其他STING激动剂作为药物递送装置的组成也是有效的。将STING激动剂2′,3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)(在本申请中也称为STING-RR)加入IL-15sa和抗-PD-1抗体的装置21在原位植入4T1-Luc2乳腺癌细胞的雌性BALB/cJ小鼠中也是有效的(图63和64)。
[0835] 将治疗剂的其他组合加入示例性药物递送装置27(抗-PD-1抗体和抗-CTLA4抗体分别为150μg)和28(50μg瑞喹莫德+抗-PD-1抗体和抗-CTLA4抗体分别为150μg)中。这些装置也表明在切除肿瘤并植入雌性BALB/cJ小鼠后期具有阻止肿瘤复发和转移的能力，所述雌性BALB/cJ小鼠已在其第四乳腺脂肪垫原位接种了4T1-Luc2乳腺癌细胞(图72和73)。
[0836] 实施例7：示例性单药疗法药物递送装置的持续局部释放阻止肿瘤复发和转移[0837] 制备若干具有单一治疗剂的药物递送装置并对其进行评价。在雌性BALB/cJ小鼠的第四乳腺脂肪垫原位接种4T1-Luc2乳腺癌细胞。如上所述，将装置在书中植入小鼠的肿瘤切除部位。所评价的治疗剂/装置包括：在药物递送装置7中的2′3′-cGAMP(50μg，100μg)；在药物递送装置23中的STING-RR(50μg)；在药物递送装置中的STING-RR(100μg)，其中使用藻酸盐代替交联的透明质酸；在药物递送装置22中的瑞喹莫德(50μg，100μg，200μg)，其中将瑞喹莫德溶于水中用于对装置制剂；在药物递送装置22中的瑞喹莫德(200μg)，其中将瑞喹莫德溶于DMSO中用于对装置制剂；在药物递送装置5中的IL-15sa(3μg)；在药物递送装置
4中的抗-PD-1抗体(300μg)；在药物递送装置24中的IFN-α(15μg)；在药物递送装置25中的IFN-β(3μg)；在药物递送装置26中的IFN-γ(30μg)；在药物递送装置29中的M-TriDAP(300μg)；在药物递送装置30中的来那度胺(200μg)，其中将来那度胺溶于水中用于对装置制剂；
以及在药物递送装置30中的来那度胺(200μg)，其中将来那度胺溶于水DMSO中用于对装置制剂。
4中的抗-PD-1抗体(300μg)；在药物递送装置24中的IFN-α(15μg)；在药物递送装置25中的IFN-β(3μg)；在药物递送装置26中的IFN-γ(30μg)；在药物递送装置29中的M-TriDAP(300μg)；在药物递送装置30中的来那度胺(200μg)，其中将来那度胺溶于水中用于对装置制剂；
以及在药物递送装置30中的来那度胺(200μg)，其中将来那度胺溶于水DMSO中用于对装置制剂。
[0838] 结果表明单药疗法装置能够提供有效性，观察到了一系列的有效性(图66-73)。藻酸盐作为水凝胶的用途证实了从来自其他生物材料的水凝胶释放的免疫疗法也能够赋予有效性。在装置22的制剂中使用了DMSO还表明有机溶剂(例如，DMSO)可能不会对装置的有效性产生负面影响。总之，多种治疗剂和装置提供了良好的有效性。
[0839] 还评价了包含2′,3′-c-di-AM(PS)2(Rp,Rp)(STING-RR)的装置23。从置于肿瘤切除部位的支架在围手术期持续释放STING-RR(100μg)与STING激动剂的局部递送相比能够更好地阻止局部肿瘤复发和远端转移(图74和75)。从装置23持续释放STING-RR还改变了血液中细胞因子的水平(图78)。
[0840] 重复上文所述的肿瘤接种和切除程序。除了将装置23置于切除部位以外，将NK细胞、CD8+T细胞或CD4+T细胞耗竭，或者通过中和干扰素α受体1(IFNAR1)抑制I型干扰素的信号传导。IVIS成像表明NK细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞和I型干扰素的信号传导在阻止肿瘤复发和转移中均是有用的(图76和77)，提示免疫系统的先天性和适应性小组对于施用STING-RR所观察到的有效性均是有用的。有趣的是，与2′3′-cGAMP、IL-15sa和抗-PD-1的三重组合相比，CD4+T细胞似乎更多地参与了STING-RR单药疗法的治疗有效性。
[0841] 实施例8：先天免疫激动剂的延长局部释放阻止肿瘤复发和转移
[0842] 已证实在体内能够在局部延长这些免疫调节化合物的释放，其目的是评价在治疗背景下这种延长的递送的效用。在雌性BALB/cJ小鼠的第四乳腺脂肪垫原位接种4T1-Luc2乳腺癌细胞。9天后，通过生物发光IVIS成像对小鼠进行成像以确认肿瘤尺寸在动物之间是一致的，以便能够对其进行随机分组。在肿瘤接种后第10天，切除肿瘤(～100mm3)，并在肿瘤切除部位植入装置(3(1500μg塞来昔布)、18、19、22、23、30或31)。通过IVIS成像每周监测肿瘤负荷，并且已证实当通过水凝胶施用先天免疫的激活剂(STING-RR或R848)时最有效地防止了局部肿瘤复发(图83A)。
[0843] STING激动剂STING-RR通过肿瘤驻留树突状细胞诱导产生Ifn-β，这是激发自发性肿瘤启动T细胞所需要的。到目前为止，尚未在缺乏完整原发性肿瘤的情况下对这种分子进行研究。R848是一种TLR7/8激动剂，其通过浆细胞样树突状细胞诱导I型干扰素和共刺激分子的表达以及常规树突状细胞的表型成熟。通常将其作为疫苗佐剂或者作为治疗病毒性或肿瘤性皮肤病变的局部凝胶使用，但是同样地此前未在瘤内注射或局部应用以外的背景下对其进行检测。
[0844] 值得注意的是，手术时已经出现了肺转移，并且先天免疫激动剂的延长局部释放再次成为根治现有转移性病变的唯一条件(图83A)。IVIS成像有意义地反映了长期存活情况，因为负载先天免疫激动剂中的一种的水凝胶为大多数小鼠提供了持久的生存期获益(图83B-83D)。这些数据表明适应性免疫系统的激活(通过免疫检查点阻断或免疫调节性酰亚胺药物(iMiD))或者抑制免疫抑制性骨髓细胞(塞来昔布)不足以在围手术期背景下作为单药疗法赋予有效性。IL-15sa是IL-15和IL-15Rαsushi结构域的一种高效复合物，其对于NK细胞和CD8+T细胞具有显著的扩增作用，IL-15sa具有适度获益，表明驱动效应细胞的增殖不如刺激产生I型干扰素的上游细胞重要。
[0845] 实施例9：仅当从水凝胶中局部释放时先天免疫激动剂才是有效的
[0846] 为证实从水凝胶中延长释放对于所观察到的有效性是有用的，比较了先天免疫激动剂的多种附加施用模式。对于使用装置22(200μg R848)的治疗，除了无水凝胶对照以外，还评价了下述组：水凝胶(单剂量)，每周静脉注射一次(200μg R848)，每周腹腔注射一次(200μg R848)以及在溶液中局部递送(单剂量200μg R848)结合放置空水凝胶(图84A)。仅当在水凝胶中负载R848时，观察到了生存期获益。为了确保由在溶液中递送R848产生的有效性不会因为每周施用一次使得两剂之间的窗口过长而丧失，连续三天每天进行一次腹腔注射。R848的多次全身施用不会产生更强大的生存期获益(图85A)，反而会导致显著的体重减轻(图85B)——但是从水凝胶中释放的R848具有良好的耐受性(图97)。类似地，对于使用STING-RR(装置23)的治疗——其效力远高于其天然类似物2’3’-cGAMP(装置7(100μg S)；图86)——需要通过水凝胶递送以便在大多数小鼠中诱导持久的生存期获益(图84B和图
74)。
74)。
[0847] 值得注意的是，从水凝胶在围手术期递送R848或STING-RR由于瘤内(IT)注射任意一种化合物，后者不延长生存期(图84C-84D)。这一发现是值得注意的，因为环二核苷酸STING激动剂目前在临床试验中是瘤内注射施用的；围手术期施用可以产生优异的结果并且不限于表明上可及的病变。为了证实能够向临床转化，验证了在4℃下冷藏保存一周后在水凝胶中负载的STING-RR保持了其有效性(装置23；图87)。
[0848] 在某些实施方式中，为了获得治疗获益，需要在术中放置负载免疫疗法的水凝胶。在未切除的肿瘤附近放置负载R848(装置22)或STING-RR(装置23)的水凝胶不产生生存期获益(图88A-88B)，这支持了干预是改善手术切除后的微环境而非已形成的肿瘤的观点。总的来说，这些结果强调了与在溶液中施用化合物(无论是全身、在切除部位局部，还是直接向肿瘤施用)相比，在肿瘤切除部位中延长局部释放免疫调节性有效负荷的有用性。
[0849] 为了评价免疫刺激与白细胞募集，将已知对介导抗肿瘤免疫具有关键作用的趋化因子负载在水凝胶上：Ccl4、Ccl5和Cxcl10(装置32-34)。Cc14对于募集CD103+树突状细胞具有关键作用，而CCL5和CXCL10募集T细胞并且在DNA损伤应答缺陷乳腺肿瘤中上调，其对STING途径显示出组成型激活。有趣的是，这些趋化因子均不产生生存期获益(图84E)，抗-PD-1和抗-CTLA-4免疫检查点阻断的组合也不产生生存期获益(装置27(分别为300μg抗体)；图89)。类似地，在水凝胶中负载紫杉醇(装置35)或多柔比星(装置36)也不产生有效性(图84F)，尽管据报道多柔比星诱导导致癌细胞自动产生I型干扰素的免疫原性细胞死亡。总之，这些数据表明先天免疫细胞的直接激动(导致产生足够水平的I型干扰素和/或其他成熟相关的表型决定因子，如共刺激分子的表达)可能是在大多数经治疗的小鼠中实现治愈结局的必要条件。
[0850] 实施例10：免疫系统先天性和适应性小组的激活对于所观察到的有效性均是有用的
[0851] 当R848和STING-GG激活先天免疫细胞时，我们试图辨别在这些化合物延长的局部释放后是否存在增强抗肿瘤免疫应答的特定下游细胞或途径。为此，重复上文所述的肿瘤+接种和切除程序，但是此外将负载R848或STING-RR的水凝胶置于切除部位，将NK细胞、CD8T细胞或CD4+T细胞耗竭(图53)，或者通过中和干扰素α受体1(IFNAR1)抑制I型干扰素的信号传导。存活研究表明NK细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞和I型干扰素的信号转到对于阻止肿瘤复发和转移均是有用的。在围手术期背景下，在先天免疫激动剂延长释放后，在所有组中先天或适应性免疫系统受损的小鼠均显示出降低的生存期(图90A-90B)。
[0852] 为了剖析R848局部释放后免疫细胞亚群之间的细胞和分子变化，评估了脾脏中白细胞的组成、激活状态和功能。手术后3和14天从小鼠收集脾脏进行流式细胞术分析。对于较早的时间点—“激发期”—主要集中在免疫系统的先天性小组，特别是NK细胞和树突状细胞。使用R848治疗后(装置22；图91A)，激活的(CD69+,KLRG1+)以及高效应物(CD11b+CD27+)NK细胞的数量增加。同样还观察到CD8+和CD103+树突状细胞(其对于交叉提呈和产生强大的+ +抗肿瘤免疫具有至关重要的作用)以及B220PDCA1浆细胞样树突状细胞(其产生大量I型干扰素)数量的增加(图91B)。暴露于R848后，很多树突状细胞表达共刺激分子CD40和CD86以及MHC II，表明其已被激活。在从给予含有STING-RR的水凝胶的小鼠中分离的NK细胞和树突状细胞中观察到了类似的结果(装置23；图92A-92B)，这支持了激活先天性免疫对观察到的治疗性作用是有用的。
[0853] 这些树突状细胞诱导强烈的适应性抗肿瘤应答，如手术后14天的T细胞池所证实的。检测到表达激活标记物(包括CD69和GITR)的CD4+FoxP3-T细胞和CD8+T细胞的数量增加(图91C)。有效的癌症免疫疗法需要全身性免疫，并且已证实共表达Ly6C和CD62L的中央记+忆样CD8T细胞的数量增加(图91D)，其已显示出在有效治疗中变得更为普遍。为评估植入负载R848的水凝胶后是否肿瘤复发和肺转移的抑制与肿瘤抗原特异性CD8+T细胞的全身性扩增相关，我们使用了SPSYVYHQF对从治疗组和对照组分离的脾细胞进行再刺激，SPSYVYHQF是一种由4T1细胞表达的小鼠白血病病毒包膜糖蛋白gp70的显性肽(氨基酸423-
431)。在给予含R848的水凝胶的小鼠中表达促炎性细胞因子IFN-γ、IL-2和GM-CSF以及溶细胞分子颗粒酶B的T细胞的比例增加(图91E)。这些数据证实了通过负载R848的水凝胶(装置22)的围手术期递送诱导全身性抗肿瘤免疫应答的广度、耐用性和特异性。
431)。在给予含R848的水凝胶的小鼠中表达促炎性细胞因子IFN-γ、IL-2和GM-CSF以及溶细胞分子颗粒酶B的T细胞的比例增加(图91E)。这些数据证实了通过负载R848的水凝胶(装置22)的围手术期递送诱导全身性抗肿瘤免疫应答的广度、耐用性和特异性。
[0854] 考虑到治疗能够消除肺中已出现的转移，还检查了手术后恢复3天和14天后肺中白细胞的组成。在给予负载R848的水凝胶的小鼠中检测到B细胞、T细胞、NK细胞和树突状细胞的数量增加(装置22；图93A-93B)。虽然这些数据未提示负责根治转移的特定机制，但是其再次支持了这样的观点，R848的延长释放促进了广泛的全身性抗肿瘤免疫应答。
[0855] 为了深入了解与先天性和适应性免疫细胞的激活相关的可溶性因子，测量了外周血中细胞因子的水平。在手术后多个时间点，收集血浆并使用多路复用激光珠技术进行分析。与使用IFNAR1中和后有效性的丧失一致，观察到与无水凝胶相比使用含有R848的水凝胶(装置22)治疗后Ifn-α和Ifn-β这两者的水平均显著升高(图91F)。几种其他可溶性免疫介质的水平也显着增加，包括CXCL2(IP-10)、CXCL9(MIG)和IL-15(图91G和表4)。这些结果表明广泛诱导了抗肿瘤免疫。实际上，通过对存活小鼠的再攻击证实诱导了记忆应答，100％的小鼠排斥新接种的4T1-Luc2细胞(图94A)。
[0856] 使用类似程序对STING-RR(装置23)(表5)进行评价后得到了类似结果(图94B)。
[0857] 表4：显示了对在手术后3天和14天收集的血浆中测量的一系列细胞因子的定量和统计(装置22对比无水凝胶)。这些数据以柱状图形式存在于图91G中。
[0858]
[0859]
[0860] 表4(续上表)
[0861]
[0862] 表5:显示了对在手术后3天和14天收集的血浆中测量的一系列细胞因子的定量和统计(装置23对比无水凝胶)。这些数据以柱状图形式存在于图104A-104B中。
[0863]
[0864]
[0865] 表5(续上表)
[0866]
[0867]
[0868] 实施例11：安全性研究
[0869] 证实了水凝胶(水凝胶4；装置8)以及负载治疗剂的水凝胶(例如，示例性装置1、2、9、10)的安全性。在切除肿瘤并放置空的或负载的支架后15天，收集血清并进行血液分析。
从装置1释放的三重组合不影响血液的成分(图79)。在各治疗组的血液中(图80A)均不存在肝酶(AST、ACT和BUN)变化，这证实了不存在任何全身毒性。类似地，所检测的各组体重均是一致的，正如所预期的那样，仅在手术后观察到了暂时性的体重减轻(图80B)。
从装置1释放的三重组合不影响血液的成分(图79)。在各治疗组的血液中(图80A)均不存在肝酶(AST、ACT和BUN)变化，这证实了不存在任何全身毒性。类似地，所检测的各组体重均是一致的，正如所预期的那样，仅在手术后观察到了暂时性的体重减轻(图80B)。
[0870] 以类似的方式，证实了装置23和STING-RR的施用是安全的。重复上述对装置1、2、8、9、10的实验，使用装置23治疗不影响血液的成分(图81)。在这项实验中，局部施用含有STING-RR的溶液，以及放置装置8。通过血液中不存在肝酶(AST、ACT和BUN)变化，也证实了不存在全身毒性(图81)。除了给予装置23(包含藻酸盐作为水凝胶)的小鼠以外，所检测的几组体重均是一致的，正如所预期的那样，仅在手术后第1周观察到了体重减轻(图82)。
[0871] 使用R848和STING-RR进行了附加安全性研究。切除肿瘤并放置无水凝胶、空水凝胶加上局部递送药物(200μg R848或100μg STING-RR)或者负载药物的水凝胶(装置22或23)后3天或14天，收集血清并进行血液分析。治疗对血液的成分没有影响(图95A-95B)。在各治疗组的血液中(图96A-96B)均不存在肝酶(AST、ACT和BUN)变化，这证实了不存在任何全身毒性。类似地，所检测的各组体重均是一致的，正如所预期的那样，仅在手术后观察到了暂时性的体重减轻(图97)。
[0872] 实施例12：在其他自发转移模型中证实有效性
[0873] 还证实了围手术期免疫疗法的延长局部释放具有广泛的用途。除了证实母体4T1细胞系与4T1-Luc2细胞一样也会对负载R848的水凝胶(装置22；图98)产生应答以外，如此前所描述的，使用B16-BL6黑色素瘤细胞或LLC肺癌细胞对C57BL/6J小鼠进行皮下接种也能够自发地向肺部转移。当肿瘤体积达到～600mm3时，手术切除肿瘤。再一次，在接受负载R848(装置22)或STING-RR(装置23)的水凝胶的小鼠中观察到了延长的生存期获益(图99A-99C)。
[0874] 此外，由与氯化钙离子交联的藻酸盐产生水凝胶，以确立能够使用其他生物材料实现先天免疫激动剂的延长局部释放。基于藻酸盐的水凝胶显示出与基于透明质酸的水凝胶类似的R848体外释放性质(图100)，并且具有类似的生存期获益(图99D)。
[0875] 表6：流式细胞术实验使用的抗体
[0876]
[0877]
[0878] 本申请所述的数据表明免疫疗法从位于肿瘤切除部位的水凝胶中的延长释放能够阻止局部肿瘤复发并诱导能够根治现有转移的全身性抗肿瘤免疫。这种疗法可能优于包括新辅助免疫疗法在内的现有疗法，其已显示出优于辅助免疫疗法。不希望受到任何理论的束缚，认为这种相对的获益是基于这样一个事实，即肿瘤抗原的存在对于肿瘤反应性T细胞的扩增是重要的。然而，本申请中的数据表明免疫疗法在不存在大量残留肿瘤抗原的情况下可能是有效的。
[0879] 通过去除癌细胞内在的抗性机制，手术能够降低对免疫疗法的主要抗性。此外，其能够除去促进原发性和适应性抗体的癌细胞的外在因素，如在肿瘤微环境中经常发现的较多数量的免疫抑制性调控细胞。尽管通常认为早期使用免疫疗法治疗将是有益的，但是全身施用后的副作用到目前为止限制了此类研究，并且预计局部疗法将降低这种毒性。术中放置支架还省去了对免疫疗法施用方案进行优化的需求，这在新辅助治疗中是必需的，并且对于联用疗法可能特别具有挑战性。
[0880] 围手术期背景代表了一个具有较高影响力的时间点，因为手术应激导致急性免疫抑制，必须克服这种免疫抑制以防止复发和播散。将围手术期从明显的转移性进展增强器转变为拦截和/或根治残留疾病的机会窗预计将提高长期存活率。
[0881] 手术参与促进转移，转移占癌症相关死亡率的90％。具体地，伤口愈合应答通过诱导瞬时免疫抑制能够使癌细胞播散以及唤醒休眠的微转移，如在本申请所述的，可以在手术时抵消这种免疫抑制。可以将支架(例如，本申请公开的组合物和装置)用于以时空方式控制药物递送。将治疗作用集中在患病部位将药物浓缩在所关注的细胞上，这与全身施用相比改善了有效性并降低全身毒性。值得注意的是，从本申请所述的支架中持续释放小分子和/或生物制剂具有与在溶液中相同疗法的局部递送相比更好的有效性。
[0882] 总之，本公开内容提供了组合物和装置，其在手术切除肿瘤后实现先天免疫激活剂延长的局部释放以阻止局部肿瘤复发和清除已形成的远端转移。正如对全身白细胞群的细胞和分子分析所证实的那样，对免疫系统产生的影响是广泛的。与此前的方法不同的是，此干预不需要负载外源性肿瘤抗原或肿瘤反应性T细胞以获得有效性。数据表明值得对术中放置含有免疫疗法的支架进行临床研究，并且本申请所述的成品支架不需要逐个患者定制。
[0883] 等同方案和范围
[0884] 在实施方式中，除非有相反的指示或另外根据上下文显而易见，否则诸如“一个(a)”、“一种(the)”和“所述”的冠词可以意指一个(种)或多于一个(种)。除非有相反的指示或另外根据上下文显而易见，否则在一组的一个或多个成员之间包括“或”的实施方式或说明书在一个、多于一个、或所有组成员存在于、被用于给定的产品或方法中、或以其他方式与给定的产品或方法有关的情况下被认为是满足的。本发明包括其中该组中只有一个成员存在于、被用于给定的产品或方法中、或以其他方式与给定的产品或方法有关的实施方式。本发明包括其中多于一个、或所有的组成员存在于、被用于给定的产品或方法中、或以其他方式与给定的产品或方法有关的实施方式。
[0885] 此外，本发明涵盖了其中来自所列实施方式中的一个或多个的一个或多个限制条件、要素、条项、以及描述性术语被引入到另一个实施方式中的所有变化、组合以及排列。举例来说，从属于另一实施方式的任何实施方式可以被修改以包括从属于同一项基础实施方式的任何其他实施方式中所存在的一个或多个限制条件。在要素以清单形式，例如以马库什组形式呈现的情况下，还公开了所述要素的每一个子组，并且任何一个或多个要素可以从该组中被去除。应当了解的是，一般来说，在本发明或本发明的方面包含/被称为包含特定的要素和/或特征的情况下，本发明或本发明的各方面的某些实施方式由这些要素和/或特征组成、或基本上由这些要素和/或特征组成。为了简单起见，那些实施方式在本文没有被具体地这样阐述。还应当指出的是，术语“包含”和“含有”意图是开放性的并且容许包括另外的要素或步骤。在给出范围的情况下，端点被包括在内。此外，除非另外指明或另外根据上下文和本领域的普通技术人员的理解显而易见，否则被表示为范围的值可以在本发明的不同实施方案中采用所述范围内的任何具体值或子范围，除非上下文另外明确规定，否则直到所述范围的下限的单位的十分之一为止。
[0886] 本申请参考了各种授权专利、公开的专利申请、期刊文章、以及其他出版物，其全部均以引用的方式并入本文。如果在所并入的参考文献中的任一篇与本说明书之间存在矛盾，那么应当以本说明书为准。此外，本发明的落入现有技术内的任何具体实施方式可以明确地被排除在实施方式中的任一个或多个以外。由于这些实施方式被认为是本领域的普通技术人员已知的，因此其可以被排除，即使所述排除没有在本文被明确阐述。本发明的任何具体实施方式可以由于任何原因被排除在任何实施方式以外，无论与现有技术的存在相关与否。
[0887] 本领域技术人员仅仅使用常规的实验就将认识到或能够确定本文所述的具体实施方式的许多等同方案。本文所述的本发明的实施方式的范围不意图限于上述说明，而是如所附实施方式中所述。本领域的普通技术人员将了解的是，可以对本说明书作出各种变化和改动而不脱离本发明的精神或范围，如以下实施方式中所限定。
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