首页 / 专利库 / 生物学 / 微生物 / 一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法

一种生物絮凝剂产生菌的筛选方法

阅读:862发布:2020-05-14

专利汇可以提供一种生物絮凝剂产生菌的筛选方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种 微 生物 絮凝剂产生菌的筛选方法,该方法是在培养基中同时添加刚果红(英文名称:Congo red,分子式:C32H22N6Na2O6S2)和考 马 斯亮蓝,选择性地从不同样品材料中筛选絮凝剂产生菌。利用此方法可以选择性地从不同样品材料中筛选絮凝剂产生菌,能高效、直观地将絮凝剂产生菌和其他微生物区分开来,工艺简单,工作量小,周期短,筛选效率较高。,下面是一种生物絮凝剂产生菌的筛选方法专利的具体信息内容。

1、一种生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其特征在于:在培养基中同时添 加英文名称为Congo red、分子式为C32H22N6Na2O6S2的刚果红和考斯亮 蓝,选择性地从不同样品材料中筛选絮凝剂产生菌,培养基中刚果红的浓 度为0.0005-0.005%、考马斯亮蓝的浓度为0.0005-0.005%。
2、如权利要求1所述的一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其特征在于: 所述的考马斯亮蓝为G 250,英文名称为Coomassie brilliant blue G 250、分 子式为C47H48N3NaO7S2。
3、如权利要求1所述的一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其特征在于: 所述的考马斯亮蓝为R-250,英文名称为Coomassie brilliant blue R-250、分 子式为C45H44N3NaO7S2。
4、如权利要求1、2或3所述的一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其 特征在于:培养基制备时,刚果红及考马斯亮蓝是直接称量相应的质量份 数加入培养基中,使其终浓度达0.0005-0.005%。
5、如权利要求1、2或3所述的一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其 特征在于:培养基制备时,刚果红及考马斯亮蓝是配制成溶液的形式加入 培养基中,使其终浓度达0.0005-0.005%。
6、如权利要求1、2或3所述的一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,其 特征在于:适用的微生物包括细菌、放线菌、酵母菌和丝状真菌

说明书全文

技术领域

发明涉及一种生物絮凝剂产生菌的筛选方法

背景技术

随着全球经济的发展,工业化生产的进步,人类的生活平大大提高, 但是人类赖以生存的环境却遭到日益破坏,环境规律紊乱。水资源匮乏及 污染加剧的严峻形势,促进了水处理剂的研究和应用。在水处理剂絮凝技 术发展史上,60年代开发了无机盐类的絮凝剂(如硫酸、氯化铝、氯化 等),其处理效果不理想;进而研制的高分子聚合无机盐型絮凝剂(如聚合氯 化铝、聚合硫酸铁等)在水处理中收到了很好的效果,但在其使用过程中会 对环境产生一定的二次污染,尤其是铝离子。研究发现,铝离子的环境危害 包括:①对水生生物有毒害,当水中铝含量高于0.2~0.5mg/dm3时可使鲑 鱼致死;②影响植物的生长发育,甚至死亡;③可通过食物链及饮用水,最 终对人类健康产生危害,目前多发的老年痴呆病就很可能是因其脑中铝含 量较高所致。因此,各国对饮用水中铝含量规定了限值,限制了铝盐型絮 凝剂的大规模应用,但聚丙烯酰胺在环境中难以降解,易导致二次污染,且 其单体具有强烈的神经毒性和“三致”效应(致畸、致突变、致癌),使其应 用也大受限制,所以对其使用作了规定。如美国批准使用的聚丙烯酰胺 SeparunNplo的最大允许浓度为1mg/dm3,英国规定聚丙烯酰胺的投加量平 均不得超过0.5mg/dm3,最大投加量不得超过1mg/dm3。因此极大地促进了 水处理化学品新品种、新科技的不断出现和产业化规模的扩大。微生物絮 凝剂(Microbial Flocculants,MBF)属第三代生物有机高分子絮凝剂。主要 成分有糖蛋白、多糖、蛋白质纤维素和DNA等。具有分泌絮凝剂能的 微生物称为絮凝剂产生菌,至今发现具有这种絮凝性的微生物已超过17种, 包括霉菌、细菌、放线菌和酵母菌等。其中最具代表性的MBF有以下三种: Nakamura J发现的酱油曲霉(Aspergillus sojae)产生的絮凝剂AJ7002;Takagi H用拟青霉素(Paecilomyces sp.1-1)产生的MBFPF101,它对大肠杆菌、 啤酒酵母、活性污泥藻土等有良好的絮凝效果;Kurane利用红平红球 菌(Rhodococcus erythropolis)研制成功的微生物絮凝剂NOC-1,对泥浆水、 河水、灰水、膨胀污泥、纸浆废水等均有极好的絮凝和脱色效果。MBF 主要有三种类型:直接利用微生物细胞的絮凝剂;利用微生物细胞壁提取 物的絮凝剂;利用细胞代谢产物的絮凝剂。MBF具有高效性、安全无毒性、 无二次污染、污泥产生量小、脱色效果独特、投放量相对少等特点。获得 高活性的微生物絮凝剂的前提是优良的生产菌种。优良的生产菌种通常是 从不同的环境样品分离、纯化微生物,进一步筛选后获得的。传统的筛选 微生物絮凝剂产生菌的方法主要是通过平板分离,获得纯培养物,然后对 每个纯培养物进行摇瓶培养,测定发酵液是否具有絮凝活性来确定絮凝剂 产生菌,存在着筛选目标不确定、工作量大、周期长、筛选效率低等缺点。

发明内容

本发明的目的就是提供一种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,该方法 能克服传统微生物絮凝剂产生菌筛选方法的不足,可高效、直观地将絮凝 剂产生菌与其他微生物区分开来,工艺简单,工作量小,周期短,筛选效 率较高。
本发明的目的是这样实现的:这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法, 是在培养基中同时添加刚果红(英文名称:Congo red,分子式: C32H22N6Na2O6S2)和考斯亮蓝,选择性地从不同样品材料中筛选絮凝剂 产生菌。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,所述的考马斯亮蓝为G 250(英 文名称:Coomassie brilliant blue G 250,分子式:C47H48N3NaO7S2)。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,所述的考马斯亮蓝为R-250(英 文名称:Coomassie brilliant blue R-250,分子式:C45H44N3NaO7S2)。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,培养基中刚果红的浓度为 0.0005-0.005%。、考马斯亮蓝的浓度为0.0005-0.005%。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,培养基制备时,刚果红及考马 斯亮蓝可以是直接称量相应的质量份数加入培养基中,使其终浓度达 0.0005-0.005%。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,培养基制备时,刚果红及考马 斯亮蓝可以是配制成溶液的形式加入培养基中使其终浓度达 0.0005-0.005%。
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法,适用的微生物包括细菌、放线 菌、酵母菌和丝状真菌
这种微生物絮凝剂产生菌的筛选方法是指按常规方法制备培养基,采 用稀释涂布平板法,或稀释混合平板法,或平板划线法进行微生物的分离 和纯化,待形成单菌落后,挑取红色菌落。
本发明的微生物絮凝剂产生菌的筛选方法由于是在培养基中添加考马 斯亮蓝和刚果红,可高效、直观地将絮凝剂产生菌和其他微生物区分开来, 工艺简单,工作量小,周期短,筛选效率较高。
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明,但本发明又不受这些实 施例所局限。

具体实施方式

实施例1:絮凝活性细菌的筛选
取1000ml细菌培养基(g/L:蔗糖10,K2HPO4 1.5,FeCl3 0.002, CaCO3 1.5,酵母膏0.5,琼脂20,水1000ml,pH 7.0~7.5)于一容器内, 分别加10mg考马斯亮蓝和刚果红,摇匀,121℃灭菌20min.,制成平板, 涂布不同稀释度的土壤悬液,25-30℃培养至平板上形成明显单菌落。挑取 蓝色背景下的红色菌落,接入50ml液体培养基(g/L:蔗糖10,K2HPO4 1.5, FeCl3 0.002,CaCO3 1.5,酵母膏0.5,pH 7.0~7.5)中,25-30℃培养4天 后用高岭土悬液测定发酵液的絮凝活性,结果99.6%的菌株具有絮凝活性。
实施例2:絮凝活性放线菌的筛选
取1000ml放线菌培养基(g/L:可溶性淀粉20,KNO3 1,NaCl 0.5, K2HPO4 0.5,MgSO4 0.5,FeSO4 0.01,琼脂20,水1000ml,pH7.2-7.4)于 一容器内,分别加10mg考马斯亮蓝和刚果红,摇匀,121℃灭菌30min.,制 成平板,涂布不同稀释度的土壤悬液,25℃培养至平板上形成明显单菌落。 挑取蓝色背景下的红色菌落,接入50ml液体培养基(g/L:可溶性淀粉20, KNO3 1,NaCl 0.5,K2HPO4 0.5,MgSO4 0.5,FeSO4 0.01,水1000ml,pH7.2-7.4) 中,25℃培养10天后用高岭土悬液测定发酵液的絮凝活性,结果87.9%的 菌株具有絮凝活性。
实施例3:絮凝活性酵母菌的筛选
取1000ml酵母菌培养基[g/L:酵母膏3,麦芽膏3,蛋白胨5,葡萄 糖20,琼脂20,pH 5.3(高压灭菌后用盐酸磷酸调节,添加广谱抗生素 以抑制细菌)]于一容器内,分别加10mg考马斯亮蓝和刚果红,摇匀,110 ℃灭菌30min.,制成平板,涂布不同稀释度的土壤悬液,25℃培养至平板上 形成明显单菌落。挑取蓝色背景下的红色菌落,接入50ml液体培养基[g/L: 酵母膏3,麦芽膏3,蛋白胨5,葡萄糖20,琼脂20,pH 5.3(高压灭菌 后用盐酸或磷酸调节)]中,25℃培养4天后用高岭土悬液测定发酵液的絮 凝活性,结果90.5%的菌株具有絮凝活性。
实施例4:絮凝活性丝状真菌的筛选
取1000ml真菌培养基[g/L:葡萄糖20,蛋白胨1,酵母膏0.8,KH2PO4 1,MgSO4.7H2O 0.5,琼脂20,pH自然,水1000ml(高压灭菌后添加广谱 抗生素以抑制细菌)]于一容器内,分别加10mg考马斯亮蓝和刚果红,摇 匀,110℃灭菌30min.,制成平板,涂布不同稀释度的土壤悬液,28℃培养 至平板上形成明显单菌落。挑取蓝色背景下的红色菌落,接入50ml液体培 养基(g/L:葡萄糖20,蛋白胨1,酵母膏0.8,KH2PO4 1,MgSO4.7H2O 0.5, pH自然,水1000ml)中,28℃培养4天后用高岭土悬液测定发酵液的絮凝 活性,结果82.3%的菌株具有絮凝活性。
高效检索全球专利

专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。

我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。

申请试用

分析报告

专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。

申请试用

QQ群二维码
意见反馈