一种微生物菌剂及其制备方法和应用
阅读：368发布：2020-05-15
专利汇可以提供一种微生物菌剂及其制备方法和应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及 生物 制药领域，具体地说是一种 微生物 菌剂的制备方法和应用。菌剂的活性成分为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS1.398。本发明的菌剂对 马 铃薯疮痂病的防治有较好的效果，可以用于马铃薯疮痂病的 生物防治 。，下面是一种微生物菌剂及其制备方法和应用专利的具体信息内容。
1.一种微生物菌剂，其特征在于：它的活性成分为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
2.一种制备权利要求1所述的微生物菌剂的方法，其特征在于：
1)马铃薯固体培养基(g/L)制备：马铃薯浸取液1L，葡萄糖20g，pH自然；固体培养基加入15g琼脂；
2)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398在马铃薯固体培养基上活化3次；
3)取1环于50ml马铃薯液体培养基，28℃，摇床培养2天；
4)发酵液经12,000r/min离心1min钟后，弃上清，沉淀悬浮于同体积的无菌水中，制备细胞悬液。
3.一种权利要求1所述的微生物菌剂的应用，其特征在于：所述微生物菌剂用于防治马铃薯疮痂病。
4.一种权利要求3所述的微生物菌剂的应用，其特征在于：所述的马铃薯疮痂病是由疮痂病链霉菌引起。
5.一种权利要求3所述的微生物菌剂的应用，其特征在于：所述的马铃薯疮痂病是由肿痂链霉菌引起。
6.一种权利要求3所述的微生物菌剂的应用，其特征在于：所述的马铃薯疮痂病是由加利利链霉菌引起。
一种微生物菌剂及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法，特别涉及以枯草芽孢杆菌为活性成分的微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
[0002] 马铃薯疮痂病，是一种危害马铃署块茎植物病害。表现为块茎表面出现近圆形至不定形木栓化疮痂状淡褐色病斑或斑块，手摸质感粗糙。一般分为两种发病症状，分别是网纹状病斑和裂口状病斑。通常病斑虽然仅限于皮层，但被害薯块质量和产量仍可降低，不耐贮藏，且病薯外观不雅，商品品级大为下降，招致一定的经济损失。以前在我国境内由于发病率不高，为害面积不大，所以没有引起人们的重视。但近些年来，在内蒙、河北、山东等地区的发病面积越来越大，引起的经济损失也非常可观。因此，迫切需要对这种病害进行科学防治。
[0003] 根据人们长期对病原微生物的分离鉴定研究，已经确定引起马铃薯疮痂病的病原菌主要为疮痂链霉菌等。并且这些致病菌属于条件致病菌，即在土壤环境偏碱性条件下容易生长和引起马铃薯病害，而在偏酸性土壤环境中则很少出现。
[0004] 防治方法主要有以下几种：(1)、选用无病种薯；(2)、多施有机肥或绿肥，可部分抑制发病；(3)、与葫芦科、豆科、百合科蔬菜进行5年以上轮作；(4)选择保水好的菜地种植，结薯期遇干旱应及时浇水；(5)、化学预防：一些化学农药可以用来防治疮痂病；(6)生物防治法：筛选对疮痂病病原菌有良好抑制效果且定植能力强的微生物，在生产种薯过程中及农田种植过程中施用，达到抑制病原菌生长的效果。
发明内容
[0005] 本发明的目的是提供一种微生物菌剂及其制备方法和应用。
[0006] 为实现上述目的，本发明所述的微生物菌剂，它的活性成分为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398。
[0007] 微生物菌剂的制备方法：
[0008] 1)马铃薯固体培养基(g/L)制备：马铃薯浸取液1L，葡萄糖20g，pH自然；固体培养基加入15g琼脂；
[0009] 2)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398在马铃薯固体培养基上活化3次；
[0010] 3)取1环于50ml马铃薯液体培养基，28℃，摇床培养2天；
[0012] 微生物菌剂的应用：本发明的微生物菌剂通过对(疮痂病链霉菌)疮痂病链霉菌(Streptomyces scabiei)、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)、肿痂链霉菌(S.Turgidiscabies)、加利利链霉菌(S.galilaeus)的抑菌试验，发现其能不同程度抑制这些病原微生物生长，能对马铃薯疮痂病起到有效的防治作用。
[0013] 本发明的微生物菌剂具有以下优点：1)本发明的微生物菌剂为纯生物制剂，对人体无害，不污染环境，可以解决化学农药污染带来的环境问题；同时微生物菌剂施入土壤后可以改善土壤质量，对降低病害发生具有积极的作用。2)本发明的微生物菌剂可以有效防治马铃薯疮痂病。。附图说明
[0014] 图1枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076的抑菌效果图
[0015] 图2枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789的抑菌效果图
[0016] 图3枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598的抑菌效果图
[0017] 图4枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对疮痂病链霉菌(Streptomyces scabiei)4.0076、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598三种混合菌株的抑菌效果图
[0018] 图5枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398和疮痂病链霉菌(Streptomyces scabiei)4.0076、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598三种混合菌株共培养过程中的抑菌效果图具体实施方式
[0019] 实施例1
[0020] 微生物菌剂的制备方法：
[0021] 1)马铃薯固体培养基(g/L)制备：马铃薯浸取液1L，葡萄糖20g，pH自然；固体培养基加入15g琼脂；
[0022] 2)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398在马铃薯固体培养基上活化3次；
[0023] 3)取1环于50ml马铃薯液体培养基(指的是哪个培养基，和上述的固体培养基是否相同)，28℃，摇床培养2天；
[0024] 4)发酵液经12,000r/min离心1min钟后，弃上清，沉淀悬浮于同体积的无菌水中，制备细胞悬液。
[0025] 实施例2
[0026] 培养基的制备：
[0027] 1)马铃薯培养基(g/L)：马铃薯浸取液1L，葡萄糖20g，pH自然；固体培养基加入15g琼脂。
[0028] 2)ISP-2培养基(g/L)：酵母提取物4g，麦芽提取物10g，葡萄糖4g，PH7.3，加入15g琼脂。
[0029] 实施例3枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398培养方法：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398在马铃薯固体培养基上活化3次。然后取1环于50ml马铃薯液体培养基，28℃，摇床培养2天。发酵液经12,000r/min离心1min钟后，弃上清，沉淀悬浮于同体积的无菌水中，制备细胞悬液。
[0030] 实施例4
[0031] 病原菌培养方法：
[0032] 1)疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076：在马铃薯培养基上培养4－5天，28℃。
[0033] 2)酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789和微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598在ISP-2培养基上培养4－5天，28℃。
[0034] 实施例5
[0035] 病原菌悬液制备：用3ml无菌水刮取孢子和菌丝体，制成一定浓度的病原体悬液；要求50ul体积涂布平板时菌丝生长后可以铺满平板表面。
[0036] 实施例6
[0037] 单独抑菌试验：疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598各50ul涂布于不同平板上(PDA，ISP-2)，在平板局部点接10ul枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398。28℃培养。2天以后观察。
[0038] 结果：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对三株菌株都有效果，其中对疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076和微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598效果最为明显。
[0039] 实施例7
[0040] 抑制混合菌生长试验：疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598各50ul涂布于同一平板上(ISP-2)，在平板局部点接10ul枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398。28℃培养。2天以后观察。
[0041] 结果：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398对混合病原菌具有抑制效果。
[0042] 实施例8
[0043] 共培养抑菌试验方法：疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)4.0076、酸疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)4.1789、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)4.3598各50ul和10ul枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398混合涂布于(ISP-2)，28℃培养。2天以后观察。
[0044] 结果：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398和三种病原菌在共生过程中，能够优先生长，其它三种菌没有生长的迹象。
[0045] 实施例9
[0046] 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398的pH生长范围：将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS 1.398在pH值为4,5,6,7,8,9的马铃薯液体培养基，28℃，摇床培养2天。
[0047] 结果：除了在pH值为4条件下不生长外，在5,6,7,8,9中都有良好的生长。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 利用微生物发酵产生油脂的方法 | 2021-02-23 | 0 |
| 一种微藻型微生物燃料电池 | 2021-02-25 | 2 |
| 微生物增生器废水处理方法 | 2021-06-17 | 3 |
| 一种混合微生物接菌剂的生产方法 | 2021-06-29 | 1 |
| 一种收集鲜切果蔬中微生物的方法 | 2021-08-01 | 3 |
| 包含益生微生物的婴儿喂养配方 | 2022-08-09 | 4 |
| 一种新型微生物保护剂及其应用 | 2021-05-12 | 4 |
| 细胞或微生物的培养方法 | 2021-10-21 | 1 |
| 一种微生物培养箱 | 2020-11-28 | 4 |
| 一种微生物培养箱 | 2020-10-20 | 2 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
微生物热门专利
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈