专利汇可以提供吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本文公开了一种或多种枯草杆菌蛋白酶变体、编码其的核酸以及与其生产和使用有关的组合物和方法,所述一种或多种枯草杆菌蛋白酶变体包括与一种或多种参比枯草杆菌蛋白酶相比具有改善的污垢去除性的一种或多种吉氏芽孢杆菌进化枝枯草杆菌蛋白酶变体。,下面是吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶专利的具体信息内容。
1.一种枯草杆菌蛋白酶变体,其包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处包含两个、三个或四个或更多个取代的氨基酸序列:
(i)99、126、127、128、和54;
(ii)99、126、127、和128;
(iii)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/R/T/V、S126A/D/E/F/G/H/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128A/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W、和P54E/G/I/L/Q/S/T/V;
(iv)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/R/T/V、S126A/D/E/F/G/H/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128A/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W;
(v)S99E/H/I/K/M/Q/R/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128A/C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W、和P54T;
(vi)S99E/H/I/K/M/Q/R/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128A/C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W;
(vii)S99E/H/I/K/M/R/T、S126A/G/M/N/T/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、F128A/C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W、和P54T;
(viii)S99E/H/I/K/M/R/T、S126A/G/M/N/T/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、和
F128A/C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W;
(ix)S99E/H/I/M/R/T、S126A/G/M/T、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、F128A/C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W、和P54T;
(x)S99E/H/I/M/R/T、S126A/G/M/T、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、和F128A/C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W;
(xi)S99M、S126A/G、D127E、和F128C/D/E/G;
(xii)S126A/G、D127E、和F128E/G;或
(xiii)S99M、S126A、D127E、和F128C/D/E;
条件是所述变体不含有对应于以下的取代:
(a)当所述变体含有对应于SEQ ID NO:1中的S126T或F128A的取代时,SEQ ID NO:1中的S99R,
(b)当所述变体含有对应于SEQ ID NO:1中的S99R或F128A的取代时,SEQ ID NO:1中的S126T,或者
(c)当所述变体含有对应于SEQ ID NO:1中的S99R或S126T的取代时,SEQ ID NO:1中的F128A,并且
其中所述变体的氨基酸位置通过与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相对应来编号。
2.一种枯草杆菌蛋白酶变体,其包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处包含两个、三个或四个或更多个取代的氨基酸序列:
(i)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/R/T/V、S126A/D/E/F/G/H/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128A/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W、和P54E/G/I/L/Q/S/T/V;
(ii)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/T/V、S126D/E/F/G/H/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W;
(iii)S99E/H/I/K/M/Q/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128/C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W、和P54T;
(iv)S99E/H/I/K/M/Q/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W;
(v)S99E/H/I/K/M/T、S126A/G/M/N/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、F128C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W、和P54T;
(vi)S99E/H/I/K/M/T、S126A/G/M/N/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、和F128C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W;
(vii)S99E/H/I/M/T、S126A/G/M、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、F128C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W、和P54T;
(viii)S99E/H/I/M/T、S126A/G/M、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、和F128C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W;
(ix)S99M、S126A/G、D127E、和F128C/D/E/G;
(x)S126A/G、D127E、和F128E/G;或
(xi)S99M、S126A、D127E、和F128C/D/E;
其中所述变体的氨基酸位置通过与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相对应来编号。
3.一种枯草杆菌蛋白酶变体,其包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处包含两个、三个或四个或更多个取代的氨基酸序列:
(i)99、126、127、128、和54;
(ii)99、126、127、和128;
(iii)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/R/T/V、S126A/D/E/F/G/H/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128A/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W、和P54E/G/I/L/Q/S/T/V;
(iv)S99A/E/H/I/K/M/N/Q/R/T、S126A/D/E/G/I/L/M/N/Q/R/T/V/W/Y、D127A/E/F/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128A/C/D/E/G/H/I/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/W;
(v)S99E/H/I/K/M/Q/R/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、F128A/C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W、和P54T;
(vi)S99E/H/I/K/M/Q/R/T、S126A/D/E/G/L/M/Q/V/Y、D127A/E/G/I/L/N/P/Q/S/T/V/W/Y、和F128A/C/D/E/G/H/I/L/M/N/P/Q/S/T/V/W;
(vii)S99E/H/I/K/M/R/T、S126A/G/M/N/T/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、F128A/C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W、和P54T;
(viii)S99E/H/I/K/M/R/T、S126A/G/M/N/T/V/Y、D127A/E/G/L/N/P/Q/S/T/V/W、和
F128A/C/D/E/G/I/L/M/N/Q/S/T/V/W;
(ix)S99E/H/I/M/R/T、S126A/G/M/T、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、F128A/C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W、和P54T;
(x)S99E/H/I/M/R/T、S126A/G/M/T、D127A/E/G/L/N/P/S/T/V、和F128A/C/D/E/G/I/N/Q/S/T/W;
(xi)S99M、S126A/G、D127E、和F128C/D/E/G;
(xii)S126A/G、D127E、和F128E/G;或
(xiii)S99M、S126A、D127E、和F128C/D/E;并且
其中所述变体的氨基酸位置通过与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相对应来编号。
4.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其进一步包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处的一个、两个、三个、四个或更多个取代:
(i)9、21、37、39、42、43、47、56、74、80、85、87、97、101、102、114、116、117、122、126、157、
199、200、203、211、242、253、255、和256;
(ii)37、39、47、56、80、85、87、114、和242;
(iii)与对应于选自37、47、56、80、85、87、114、和242的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的39;
(iv)与对应于选自37、39、47、80、85、87、114、和242的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的56;
(v)与对应于选自37、39、47、56、80、85、87、和242的SEQ IDNO:1位置的一个或多个位置相组合的114;
(vi)与对应于选自37、39、47、56、80、85、87、和114的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的242;
(vii)与对应于选自37、47、56、80、85、87、和114的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的39+242;
(viii)与对应于选自37、47、56、80、85、87、114、和242的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的39+99+128;或
(ix)39、242、39+242、37+39+242、37+39+47+56+80+85+87+114+242、和37+39+43+47+56+80+85+87+114+242。
5.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其进一步包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处的一个、两个、三个、四个或更多个取代:
(i)T009E、I021V、A037C/D/G/H/N/P/Q/T/V/W/Y、S039D/E、N042R、I43V、A047D/E/F/H/I/M/N/Q/S/W/V/Y、P054E/G/I/L/Q/S/V、T056A/C/D/E/F/H/I/K/L/M/N/P/Q/S/V/W/Y、N074C/D/E/H/S/T、I080C/L/V、N085A/D/E/H/L/P/Q/S/T/V/W、E87D、N097A/G/S、S099V、S101A、V102E/I、T114D/E/F/G/H/I/L/Q/V、N116R、M117I、M122L、S126F/H、G157S、V199I、Q200L、Y203W、M211L、N242D、N253D、S255W、和Q256E;
(ii)A37T、S39E、A47V、T56Y、I80V、N85S、E87D、T114Q、和N242D;
(iii)与对应于选自A37T、A47V、T56Y、I80V、N85S、E87D、T114Q、和N242D的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的S39E;
(iv)与对应于选自A37T、S39E、A47V、I80V、N85S、E87D、T114Q、和N242D的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的T56Y;
(v)与对应于选自A37T、S39E、A47V、T56Y、I80V、N85S、E87D、和N242D的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的T114Q;
(vi)与对应于选自A37T、S39E、A47V、T56Y、I80V、N85S、E87D、和T114Q的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的N242D;
(vii)与对应于选自A37T、A47V、T56Y、I80V、N85S、E87D、和T114Q的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置相组合的S39E+N242D;或
(viii)S39E、N242D、S39E+N242D、A37T+S39E+N242D、A37T+S39E+A47V+T56Y+I80V+N85S+E87D+T114Q+N242D、和A37T+S39E+I43V+A47V+T56Y+I80V+N85S+E87D+T114Q+N242D。
6.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处的两个、三个或四个或更多个取代:
(i)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128A-N242D、
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127G-A128E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99N-T114Q-S126T-D127Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127Q-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99K-T114Q-S126G-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-D127G-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99K-T114Q-D127L-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99A-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126V-D127E-F128K-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-D127G-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99Q-T114Q-S126T-D127V-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127L-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126R-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127H-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127T-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128M-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126L-D127F-F128R-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126V-D127M-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127W-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127A-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126Q-D127L-F128H-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127H-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127L-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Q-D127V-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126N-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126D-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126W-D127N-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127I-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127A-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128H-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Q-D127A-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127T-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127P-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126I-D127E-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127E-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127P-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126D-D127G-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127W-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127N-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127I-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128P-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127T-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127Y-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127A-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127N-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127E-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126N-D127G-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-S126T-F128A-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-D127E-F128G-N242D;
(ii)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127G-A128E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99N-T114Q-S126T-D127Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127Q-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99K-T114Q-S126G-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-D127G-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99K-T114Q-D127L-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99A-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126V-D127E-F128K-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-D127G-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99Q-T114Q-S126T-D127V-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127L-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126R-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127H-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127T-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128M-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126L-D127F-F128R-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126V-D127M-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127W-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127A-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126Q-D127L-F128H-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127H-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127L-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Q-D127V-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126N-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126D-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126W-D127N-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127I-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127A-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128H-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Q-D127A-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127T-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127P-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126I-D127E-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127E-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127P-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126D-D127G-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127W-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127N-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127I-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128P-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127T-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127Y-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127A-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127N-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127E-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126N-D127G-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-S126T-F128A-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-D127E-F128G-N242D;
(iii)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128A-N242D、
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127G-A128E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127Q-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-D127G-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99K-T114Q-D127L-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99Q-T114Q-S126T-D127V-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127L-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128M-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127A-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Q-D127V-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126D-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127A-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128H-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127T-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-D127P-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127E-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126L-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126G-D127P-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127W-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127N-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127I-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128P-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127G-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127Y-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126M-D127A-F128D-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127E-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126Y-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-S126T-F128A-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-D127E-F128G-N242D;
(iv)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126V-D127G-A128E-F128A-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-N242D;A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126N-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128L-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128M-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127Q-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-D127G-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127L-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127Q-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127S-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127T-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126T-D127G-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127L-F128V-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-S126T-F128A-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-D127E-F128G-N242D;
(v)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99T-T114Q-S126G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99M-T114Q-D127G-F128S-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99E-T114Q-D127E-F128G-N242D;
(vi)
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、
A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126T-D127E-F128E-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-F128E-N242D、和A37T-S39E-I43V-A47V-P54T-T56Y-I80V-N85S-E87D-S99R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D;或
(vii)(i)-(vi)的组合。
7.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置的位置处的两个、三个或四个或更多个取代:A037C-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037D-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037G-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037H-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037N-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037P-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037Q-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039D-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-A047V-I080V-N085S-S099R-N242D、A037T-S039E-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-A047V-T056Y-E087D-S099R-T114A-F128A-N242D、A037T-S039E-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047D-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047E-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047F-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047H-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047I-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047M-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047N-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047Q-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047S-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V、A037T-S039E-I043V-A047V-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-N085S-E087D-S099R-T114Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054E-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054G-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054I-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054L-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054Q-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054S-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056A-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056C-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056D-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056E-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056F-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056H-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056I-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056K-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056L-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056M-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056N-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056P-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Q-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056S-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056V-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056W-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080C-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080L-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085A-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085D-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085E-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085H-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085L-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085P-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085Q-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-N097A-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-N097G-S099R-T114Q-
S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-N097S-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099E-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099E-T114Q-S126T-F128A-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099M-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S101A-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114D-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114E-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114F-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114G-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114H-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114I-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114L-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127E-F128G-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127G-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127G-F128P-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127I-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127I-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127N-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127S-F128S-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127T-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M117I-M122L-S126A-D127E-F128G-M211L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M117I-M122L-S126A-
D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M122L-S126A-D127E-F128G-M211L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M122L-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-N116R-
S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128E-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-G157S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-M211L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127N-F128C-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127W-F128E-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-F128Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126D-D127G-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126F-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126G-D127E-
F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126G-D127P-F128C-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126H-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126I-D127E-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-D127G-
F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-D127P-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-D127T-F128Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-F128H-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126M-
D127A-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126N-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126N-D127G-F128L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126Q-D127A-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-
D127E-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-D127E-F128L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-D127G-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-D127Y-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-
F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126V-D127A-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126V-D127E-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126Y-D127E-F128G-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126Y-F128L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114V-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-V102E-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-V102I-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099V-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085T-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-
F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085V-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085W-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074C-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074D-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-
S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074E-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074H-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074S-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-
S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N074T-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-P054V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099A-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099E-T114Q-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099H-T114Q-D127G-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099H-T114Q-D127Q-F128N-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099H-T114Q-D127S-F128Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099I-T114Q-S126T-D127E-F128I-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099K-T114Q-D127L-F128C-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099K-T114Q-S126G-D127G-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099M-T114Q-D127G-F128S-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099M-T114Q-S126E-D127A-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099N-T114Q-S126T-D127Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099Q-T114Q-S126T-D127V-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127A-F128C-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M117I-S126A-D127E-F128G-M211L-
M122L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M117I-S126A-D127E-F128G-M211L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-M122L-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-M211L-
M122L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-M211L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126D-D127S-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126E-D127A-F128S-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126L-D127H-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126M-D127L-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126M-D127P-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126N-D127G-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126Q-D127V-F128C-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-D127E-F128E-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126T-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126V-D127G-A128E-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126W-D127N-F128D-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099T-T114Q-S126G-D127G-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099T-T114Q-S126G-D127G-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099T-T114Q-S126G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099T-T114Q-S126V-D127E-F128K-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127A-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127G-F128L-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127G-F128Q-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127L-F128N-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127L-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127N-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127P-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127Q-F128M-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127Q-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127T-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127V-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-D127V-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127G-F128N-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127H-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127L-F128N-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127S-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127S-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127V-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126A-D127W-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126G-D127A-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126G-D127T-F128E-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126G-D127V-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126L-D127F-F128R-
N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126M-D127A-F128W-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126M-D127S-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126M-D127S-F128T-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126M-D127V-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126Q-D127L-F128H-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126R-F128A-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126T-D127G-F128V-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126T-D127L-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-T114Q-S126V-D127M-F128S-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V-T056Y-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047W-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-A047Y-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q、A037T-S039E-I043V-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-N242D、A037T-S039E-I043V-N085S-E087D-S099R-T114Q、A037T-S039E-I043V-N085S-E087D-S099R-T114Q-N242D、A037T-S039E-I043V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-S099R-T114Q-N242D、A037T-S039E-I043V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-I043V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、A037V-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、A037W-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-
N242D、A037Y-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、I021V-A037T-S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、I043V-A047V-N242D、I043V-A047V-S099R-F128A-N242D、I043V-A047V-S099R-S126T-N242D、I043V-A047V-T056Y-T114Q、I043V-A047V-T056Y-T114Q-N242D、N242D、S039E-A047V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-N085S-S099R-T114Q-N242D、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-A047V-T056Y-I080V-N085S-S099R-T114Q、S039E-A047V-T056Y-N085S-E087D-S099R-T114Q、S039E-A047V-T056Y-N085S-S099R-T114Q-F128A-N242D、S039E-E087D-N242D、S039E-E087D-S099R-F128A-N242D、S039E-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-E087D-S099R-S126T-N242D、S039E-I043V-A047V-E087D-N242D、S039E-I043V-A047V-E087D-S099R、S039E-I043V-A047V-P054T-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-
N242D、S039E-I043V-A047V-S099R-T114Q-N242D、S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-E087D-S099R-T114Q-S126T-N242D、S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、S039E-I043V-A047V-T056Y-I080V-N085S-E087D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G-N242D、S039E-I043V-E087D-S099R-T114Q、S039E-I043V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I043V-N085S-E087D-S099R-T114Q-N242D、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-I043V-T056Y-E087D-S099R-N242D、S039E-I043V-T056Y-E087D-S099R-T114Q、S039E-I043V-T056Y-I080V-N085S-S099R-T114Q-N242D、S039E-I043V-T056Y-S099R-T114Q-F128A-N242D、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-I080V-S099R-T114Q-N242D、S039E-N042R-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、S039E-N074D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-P054T-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-N242D、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-N253D、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q200L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q256E、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-S255W、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-V199I、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Y203W、S039E-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-T056Y-E087D-T114Q-N242D、S039E-T056Y-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S099R-F128A-N242D、S099R-S126T-N242D、T009E-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、T056Y-S099R-T114Q-F128A-N242D、T056Y-S099R-T114Q-S126T-N242D、和T056Y-T114Q-N242D。
8.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述变体选自:
(i)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90%同一性的变体,并且所述变体包含至少一个取代(使用SEQ ID NO:1编号),所述取代选自由以下组成的组:T3V、T9R、A15T、V66A、N74D、N97NS、N97AD、N97D/G、S99G/M、S101A、V102E/I、N116V/R、S126F、D127Q、F128A、G157S、Y161A、R164S、T188P、V199I、Q200C/E/I/K/T/V/W/L、Y203W、M211C、N212D、M216S/F、Q239R和T249R;以及
(ii)与亲本蛋白酶的氨基酸序列具有至少90%同一性的变体,所述亲本蛋白酶具有
SEQ ID NO:13的氨基酸序列,并且所述变体包含至少一个对应于SEQ ID NO:13编号的取代,所述取代选自由以下组成的组:S3V、S9R、A15T、V66A、N74D、S97SE、S97AD、S97D/G、S99G/M、S101A、V102E/I、G116V/R、S126F、P127Q、S128A、G157S、Y161A、R164S、A188P、V199I、Q200C/E/I/K/T/V/W/L、Y203W、L211C/M、N212D、M216S/F、Q239R和T249R。
9.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述变体
(i)是吉氏芽孢杆菌(Bacillus Gibsonii)进化枝的成员;
(ii)是分离的;
(iii)具有蛋白水解活性;或
(iv)包含(i)至(iii)的组合。
10.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述变体衍生自亲本多肽或参比多肽,所述亲本多肽或参比多肽
(i)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、
90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%氨基酸序列同一性;或(ii)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有100%氨基酸序列同一性。
11.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述变体包含如下氨基酸序列,所述氨基酸序列
(i)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、
90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%氨基酸序列同一性;
(ii)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、
93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%氨基酸序列同一性;或
(iii)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于
100%氨基酸序列同一性。
12.根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中当与SEQ ID NO:1相比时,所述变体具有BMI、蛋、和/或法式焦糖布丁污渍清洁PI>1,当与包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的枯草杆菌蛋白酶相比时,所述变体具有改善的稳定性,或其组合。
13.根据权利要求12所述的枯草杆菌蛋白酶变体,其中所述变体的BMI、蛋、和/或法式焦糖布丁污渍清洁性能或稳定性根据实例2中描述的测定法进行测量。
14.一种组合物,所述组合物包含一种或多种根据任一项前述权利要求所述的枯草杆菌蛋白酶变体。
15.根据权利要求14所述的组合物,其中所述组合物选自酶组合物和洗涤剂组合物。
16.根据权利要求15所述的组合物,其中所述洗涤剂组合物选自衣物洗涤剂、织物柔顺洗涤剂、餐具洗涤剂、和硬表面清洁洗涤剂。
17.根据权利要求14-16中任一项所述的组合物,所述组合物进一步包含(i)一种或多种其他酶,所述酶选自:酰基转移酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、角叉菜胶酶、过氧化氢酶、软骨素酶、角质酶、内切β-甘露聚糖酶、外切β-甘露聚糖酶、酯酶、外切甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、脂肪酶、脂肪分解酶、脂加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂合酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、聚酯酶、聚半乳糖醛酸酶、另外的蛋白酶、短梗霉多糖酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶和木糖苷酶;(ii)一种或多种表面活性剂;(iii)选自钙和锌的一种或多种离子;(iv)一种或多种辅助材料;(v)一种或多种稳定剂;(vi)从约0.001%至约1.0重量%的根据权利要求1-13中任一项所述的变体;
(vii)一种或多种漂白剂;和/或(viii)其组合。
18.根据权利要求14-17中任一项所述的组合物,其中所述组合物不含磷酸盐或含有磷酸盐和/或不含硼或含有硼。
19.根据权利要求14-18中任一项所述的组合物,其中所述组合物是颗粒、粉末、固体、棒状、液体、片剂、凝胶、糊剂和/或单位剂量组合物。
20.一种清洁方法,所述方法包括使需要清洁的表面或物品与有效量的根据权利要求
1-13中任一项所述的变体或根据权利要求14-19中任一项所述的组合物接触;并且所述方法任选地进一步包括在使所述表面或物品与所述变体或组合物接触之后漂洗所述表面或物品的步骤。
21.根据权利要求20所述的方法,其中所述方法是清洁法式焦糖布丁污渍的方法。
22.根据权利要求20或21所述的方法,其中所述物品是餐具或织物。
23.一种多核苷酸,所述多核苷酸包含编码权利要求1-13中任一项所述的变体的核酸序列,其中所述多核苷酸是任选地分离的。
24.根据权利要求23所述的多核苷酸,其中所述核酸序列有效地连接到启动子。
25.根据权利要求23或24所述的多核苷酸,其中由所述多核苷酸编码的变体在对应于SEQ ID NO:1的位置N242的位置处包含天冬氨酸(D)氨基酸取代。
26.根据权利要求25所述的多核苷酸,其中所述变体包含大于1.0的生产率性能指数
(PI),其中生产率PI是相对于在对应于SEQ ID NO:1的位置N242的位置处不包含天冬氨酸(D)氨基酸取代的枯草杆菌蛋白酶变体多肽而言的。
27.根据权利要求25或26所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸是表达构建体,所述表达构建体按5’至3’方向包含:启动子序列,其位于信号肽序列的上游(5’)并与信号肽序列有效地连接;前肽序列,其位于5’信号肽序列的下游(3’)并与5’信号肽序列有效地连接;编码在对应于SEQ ID NO:1的N242位置的位置处包含天冬氨酸(D)氨基酸取代的变体的核酸序列,所述核酸序列位于5’前肽序列的下游(3’)并且与5’前肽序列有效地连接;和任选的终止子序列,其位于所述核酸序列的下游(3’)并且与所述核酸序列有效地连接,所述核酸序列编码在对应于SEQ ID NO:1的N242位置的位置处包含天冬氨酸(D)氨基酸取代的变体。
28.根据权利要求27所述的多核苷酸,其中(i)所述启动子序列包含芽孢杆菌属物种
(Bacillus spp.)核糖体RNA启动子,其中芽孢杆菌属物种核糖体RNA启动子是枯草芽孢杆菌rrnI启动子;(ii)所述信号肽序列包含SEQ ID NO:3;(iii)所述前肽序列包含SEQ ID NO:4;(iv)编码所述变体的核酸序列编码包含选自本文提供的枯草杆菌蛋白酶变体的氨基酸序列的多肽,所述变体在对应于SEQ ID NO:1的242的位置处具有天冬氨酸(D)氨基酸取代;和/或(v)所述任选的终止子序列包含SEQ ID NO:6。
29.一种表达载体或盒,其包含权利要求23-28中任一项所述的多核苷酸。
30.一种重组宿主细胞,所述重组宿主细胞包含权利要求23-28中任一项所述的多核苷酸或权利要求29所述的载体或盒。
31.一种组合物,所述组合物包含权利要求1-12中任一项所述的变体,其中所述组合物是消毒剂组合物、医疗器械清洁组合物、动物饲料组合物、贴眼透镜清洁组合物、伤口清洁组合物、或纺织品加工组合物、皮革加工组合物或羽毛加工组合物。
32.一种用于增加革兰氏阳性细菌宿主细胞中枯草杆菌蛋白酶变体生产的方法,所述方法包括:
(a)向宿主细胞中引入编码枯草杆菌蛋白酶变体的多核苷酸构建体,所述变体在对应于SEQ ID NO:1的一个或多个位置处包含一个或多个取代,其中对应于SEQ ID NO:1的N242的位置被天冬氨酸(D)取代(N242D),和
(b)在适于生产经编码的枯草杆菌蛋白酶变体的条件下使所述宿主细胞生长,
其中相对于相同属、种和遗传背景的革兰氏阳性宿主细胞,所述宿主细胞生产增加量的(a)的枯草杆菌蛋白酶变体,所述相同属、种和遗传背景的革兰氏阳性宿主细胞包含引入的、编码枯草杆菌蛋白酶变体的多核苷酸构建体,所述变体在对应于SEQ ID NO:1的N242的位置处不包含取代;并且
其中所述变体的氨基酸位置通过与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相对应来编号。
33.根据权利要求32所述的方法,其中所述方法使(a)所述的枯草杆菌蛋白酶变体的产率提高至少2.5%。
34.根据权利要求32或33所述的方法,其中(a)所述的枯草杆菌蛋白酶变体相对于在对应于SEQ ID NO:1的N242的位置处不具有天冬氨酸(D)取代的枯草杆菌蛋白酶变体具有生产率性能指数(PI)>1.0。
35.根据权利要求32-34中任一项所述的方法,其中(a)所述的枯草杆菌蛋白酶变体进一步包含在对应于选自9、37、39、42、43、47、54、56、74、80、85、87、99、114、126、127、128、
199、200、203、211、253、255和256的SEQ ID NO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个取代。
36.根据权利要求32-35中任一项所述的方法,其中(a)所述的枯草杆菌蛋白酶变体进一步包含在对应于选自以下的SEQ ID NO:1位置包含一个或多个取代的氨基酸序列:
I043V-A047V-T056Y-T114Q、S039E-I043V-E087D-S099R-T114Q、S039E-I043V-A047V-E087D-S099R、S039E-I043V-T056Y-E087D-S099R-T114Q、S039E-A047V-T056Y-N085S-E087D-S099R-T114Q、S039E-A047V-T056Y-I080V-N085S-S099R-T114Q、A037T-S039E-I043V-N085S-E087D-S099R-T114Q、T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-N042R-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Y203W、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-V199I、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-N253D、T009E-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-S255W、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q256E、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q200L、S039E-N074D-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V、S039E-P054T-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I043V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-T056Y-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-N042R-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Y203W、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-M211L、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-V199I、S039E-I043V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-N253D、T009E-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-S255W、S039E-T056Y-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-P054T-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q256E、S039E-S099R-S126A-D127E-F128G-Q200L、S039E-N074D-I080V-S099R-S126A-D127E-F128G、A037T-S039E-I043V-A047V、S039E-P054T-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-A047V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-S099R-T114Q-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-N085S-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-N074D-E087D-S099R-S126A-D127E-F128G、S039E-I043V-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、和S039E-T056Y-N074D-S099R-S126A-D127E-F128G、及其组合。
37.根据权利要求32-36中任一项所述的方法,其中(a)所述的枯草杆菌蛋白酶变体包含如下氨基酸序列,所述氨基酸序列
(i)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、
90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%氨基酸序列同一性;
(ii)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、
93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%氨基酸序列同一性;或
(iii)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于
100%氨基酸序列同一性。
38.根据权利要求32-37中任一项所述的方法,其中所述多核苷酸是表达构建体,所述表达构建体按5’至3’方向包含:启动子序列,其位于信号肽序列的上游(5’)并与信号肽序列有效地连接;前肽序列,其位于5’信号肽序列的下游(3’)并与5’信号肽序列有效地连接;
编码在对应于SEQ ID NO:1的N242位置的位置处包含天冬氨酸(D)氨基酸取代的变体的核酸序列,所述核酸序列位于5’前肽序列的下游(3’)并且与5’前肽序列有效地连接;和任选的终止子序列,其位于所述核酸序列的下游(3’)并且与所述核酸序列有效地连接,所述核酸序列编码在对应于SEQ ID NO:1的N242位置的位置处包含天冬氨酸(D)氨基酸取代的变体。
39.如权利要求38所述的方法,其中(i)所述启动子序列包含芽孢杆菌属物种核糖体
RNA启动子,其中芽孢杆菌属物种核糖体RNA启动子是枯草芽孢杆菌rrnI启动子;(ii)所述信号肽序列包含SEQ ID NO:3;(iii)所述前肽序列包含SEQ ID NO:4;(iv)编码所述变体的核酸序列编码包含选自本文提供的枯草杆菌蛋白酶变体的氨基酸序列的多肽,所述变体在对应于SEQ ID NO:1的242的位置处具有天冬氨酸(D)氨基酸取代;和/或(v)所述任选的终止子序列包含SEQ ID NO:6。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
用于表征重组病毒颗粒的分析性超速离心法 | 2020-05-13 | 227 |
表达重组蛋白G的细菌磁颗粒及其应用 | 2020-05-13 | 79 |
一种制备重组脊髓灰质炎病毒样颗粒的方法 | 2020-05-13 | 896 |
一种人活性颗粒酶K重组蛋白的制备方法 | 2020-05-12 | 592 |
重组脊髓灰质炎Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法 | 2020-05-12 | 310 |
重组EV71病毒样颗粒的纯化及其疫苗制备方法 | 2020-05-12 | 109 |
重组肠病毒71型病毒样颗粒的制备方法 | 2020-05-12 | 332 |
重组病毒蛋白及颗粒 | 2020-05-11 | 264 |
一种重组人颗粒细胞酶溶液及其制备方法 | 2020-05-13 | 833 |
一种重组猪圆环病毒病毒样颗粒及其制备方法 | 2020-05-11 | 588 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。