使用醛糖还原酶抑制剂(ARIs)对糖尿病并发症进行治疗是广为人 知的。由于在例如神经、肾脏、视网膜和晶状体的组织中的葡萄糖水 平升高引起并发症，其中葡萄糖进入多羟基化合物代谢通道并被葡萄 糖还原酶转化为山梨糖醇。因为山梨糖醇不易通过细胞膜，它在某些 细胞内积累，导致渗透压的变化，吡啶核苷的氧化环氧态发生改变(即 NADH/NAD+升高)并且耗尽细胞内的肌醇水平。醛糖还原酶抑制剂能 够控制这些与糖尿病并发症相关联的生物化学变化。
已经广泛回顾了使用醛糖还原酶抑制剂对糖尿病并发症进行治 疗，参见：(a)糖尿病课本，第二版；Pickup，J.C和Williams，G.(Eds.)； Blackwell Science，Boston，MA 1997；(b)Aotsuka，T.；Abe，N.；Fukushima， K.；Ashizawa，N.和Yoshida.M，Bioorg.&Med.Chem.Letters(生物有机 化学和药物化学快报)，1997，7，1677；和(c)T.，Nagaki，Y.；Ishii，A.； Konishi，Y.；Yage，H；Seishi，S.；Okukado，N.；Okamoto，K.，J.Med. Chem.(药物化学期刊)，1997，40，684。
早前在(a)美国专利第5,700,819号；(b)美国专利第4,868,301号； (c)美国专利第5,330,997号；(d)美国专利第5,236,945号；和美国专利 第6,214,991中已经说明了醛糖还原酶抑制剂。尽管已经广泛开发了许 多醛糖还原酶抑制剂，没有一种证明在没有明显副作用的情况下在人 类临床试验中具有足够的功效。因此现在在美国没有醛糖还原酶可用 作被认可的治疗剂；因此，仍然存在对新型、有效和安全的糖尿病并 发症治疗用药物的显著需要。

本发明提供{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基} 乙酸的晶体形式，和含有这种化合物和/或其水合物的药用配制剂。本 发明还提供使用这种化合物和/或其水合物和/或其盐与醛糖还原酶相 互作用而对糖尿病并发症进行治疗的方法。{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻 唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸具有以下结构：
(化学式I)
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸和/或 其水合物(下文称为化学式I表示的化合物)抑制醛糖还原酶。由于醛糖 还原酶对于患有糖尿病的个体中高水平的山梨糖醇的产生是极其重要 的，所以醛糖还原酶的抑制剂可用于对各种与糖尿病相关的并发症进 行预防和/或治疗。因此作为它们抑制醛糖还原酶的能力的结果，本发 明的化合物和组合物可有效地治疗糖尿病并发症。
因此，在另一方面，本发明提供对与糖尿病相关的慢性并发症包 括例如糖尿病性白内障、视网膜病、肾病和神经疾病进行预防和/或治 疗的方法。
在一个相关的方面，本发明提供使组织中山梨糖醇降低的方法， 该组织特别是指坐骨神经、晶状体、视网膜、肾脏皮层或肾髓质，优 选糖尿病患者的这些组织。
类似地，本发明提供使组织中果糖水平降低的方法。此外，本发 明提供使组织中肌醇增加的方法。本发明还包括对多羟基化合物诱发 的坐骨神经中神经传导速度的损失进行抑制的方法，使白内障的形成 逆转的方法和预防白内障形成的方法。优选这些方法中的每一种用于 糖尿病患者，更优选受糖尿病困扰的人类患者。
在又一个方面，本发明提供含有{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基) 甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸的水合物和至少一种药学上可接受的载体、溶 剂、赋形剂或佐剂的药物组合物。
在又一个方面，本发明提供制备化学式I表示的化合物的方法，具 体的说，制备一水合物的方法。
附图说明
图1是显示了制造本发明的药片和胶囊的方法的流程图。

如上所述，本发明提供一种取代的吲哚基链烷酸和/或其水合物； 这些化合物可用于对个体中与提高的葡萄糖水平有关或由它引起的并 发症进行治疗和/或预防，这些个体包括受糖尿病困扰的人类和伴生动 物例如狗、猫和马，优选人类。
本发明I的化合物和组合物可以通过口服、局部施用、肠胃外施用、 通过吸入或喷雾或经直肠以含有常规无毒药学上可接受的载体、佐剂 和赋形剂的剂量单元配制剂给药。优选含有化学式I表示的化合物和/ 或水合物的药物组合物可以是适于口服的形式，例如，药片(tablet)、 丸剂、锭剂(troche)、糖锭(lozenge)、含水或含油的悬浮剂、可分散粉 末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。优选的给药途径是口 服给药，更优选组合物以药片或胶囊进行口服给药。在这些组合物中， 化学式I表示的化合物或水合物可以与一种或多种无毒的药学上可接 受的载体和/或稀释剂和/或佐剂以及需要的其它活性成分联合存在。
可以根据任何药物组合物的制备领域中公知的方法制备用于口服 的组合物，并且这种组合物可以含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、 着色剂和防腐剂的物质，以提供药学上品质上乘的美味的制剂。药片 中所含的活性成分与无毒的药学上可接受的赋形剂相混合，该赋形剂 适用于制造药片。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂，例如碳酸 钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化和分裂剂，例如，玉米淀 粉或褐藻酸；接合剂，例如淀粉、凝胶或阿拉伯树胶；以及润滑剂， 例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。药片可以是无包覆的或者它们可以通 过任何的已知技术进行包覆以延迟在胃肠道中的分裂和吸收从而在较 长时期提供持续作用。例如，可以使用诸如甘油硬脂酸酯或甘油二硬 脂酸酯的时间延迟材料。
口服用的配制剂也可以是硬凝胶胶囊，其中的活性成分与惰性固 体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土相混合，或者是软凝胶胶囊， 其中的活性成分与水或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油相混合。
含水悬浮剂中所含的活性物质与适用于含水悬浮剂制备的赋形剂 相混合。这种赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、 羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树 胶；分散或湿润剂可以是天然磷脂例如卵磷脂，或氧化烯烃与脂肪酸 的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或氧化乙烯与长链脂肪醇的缩合 产物例如十七烷基乙烯氧基鲸蜡醇，或者氧化乙烯与衍生自脂肪酸和 己糖醇的偏酯的缩聚产物例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或氧化乙 烯与衍生白脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩聚产物例如聚氧乙烯脱水山 梨糖醇单油酸酯。含水悬浮剂也可以含有一种或多种防腐剂，例如对 羟基安息香酸乙酯或正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种调味剂； 以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。
含油悬浮剂可以通过使活性成分在植物油例如花生油、橄榄油、 芝麻油或椰子油中或矿物油例如液体石蜡中悬浮而配制。含油悬浮剂 可以含有增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂例 如以上列出的那些以及调味剂以提供宜人的口服制剂。这些组合物可 以通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸进行防腐。
适用于通过加入水制备含水悬浮剂的可分散粉末和颗粒所提供的 活性成分与分散或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂相混合。适用 的分散或湿润剂和悬浮剂例如以上所提到的那些。也可以存在另外的 赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以是水包油型乳剂的形式。油相可以是 植物油，例如橄榄油或花生油；或矿物油，例如液体石蜡；或这些的 混合物。合适的乳化剂可以是天然胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍胶；天 然磷脂，例如大豆卵磷脂；和衍生白脂肪酸和己糖醇、酐的酯或偏酯， 例如脱水山梨糖醇单油酸酯；以及所述的偏酯与氧化乙烯的缩合产物， 例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳剂还可以含有甜味剂和调味 剂。
糖浆和酏剂可以配有甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗 糖。这种配制剂还可以含有缓和剂、防腐剂、调味剂和着色剂。
在上述病症的治疗中，每日每千克体重所使用的化学式I表示的 化合物或水合物，即活性成分的剂量水平为0.01mg至大约100mg，优 选为0.01mg至大约75mg，更优选为0.01mg至大约25mg。更优选剂 量水平为大约0.025mg至大约15mg/千克体重/日。进一步优选剂量水 平为大约0.05mg至大约10mg/千克体重/日。更进一步优选剂量水平为 大约0.05mg至大约2.5mg/千克体重/日。特别优选剂量水平为大约0.1 至0.5mg/千克体重/日。
可以与载体物质一起制成单独剂型的活性成分的量将根据治疗的 主体和具体的给药模式而改变。单位剂型通常含有大约0.25mg至大约 1400mg活性成分。更优选单位剂型通常含有大约0.5mg至大约100mg 活性成分。进一步优选单位剂型通常含有大约1mg至大约50mg活性 成分。更进一步优选单位剂型通常含有大约1mg至大约25mg活性成 分。特别优选单位剂型通常含有大约1mg至大约15mg活性成分。
然而要理解，对于任何具体病人的特定剂量水平将随各种因素改 变，这些因素包括所采用的特定化合物的活性、年龄、体重、全身健 康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄的速度、联合用药 以及进行治疗的具体疾病的严重程度。
本申请中所有论文和参考文献包括专利的公开内容在此完整引入 作为参考。
通过以下实施例进一步解释了本发明，这些实施例不被解释为将 本发明的范围或精神限制在其中所述的具体程序和化合物中。
实施例1：
3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚N-乙酸一水合物的制备
2，3，5，6，-四氟乙酰苯胺：
用乙酸酐(120ml，1.27mol)处理2，3，5，6-四氟苯胺(200g，1.21mol) 溶于无水吡啶(103ml，1.27mol)的溶液，将该溶液加热到120℃并保持 2小时。冷却到室温后，将该溶液倾入冰冷水中(500ml)。得到的沉淀 过滤，在乙酸乙酯中溶解，经MgSO4干燥，过滤，然后进行浓缩。用 庚烷(200ml)洗涤该固体物质然后进行干燥获得2，3，5，6-四氟乙酰苯胺 的白色结晶固体(206g，82％)：熔点136-137℃；Rf 0.48(50％乙酸乙酯 的庚烷溶液)；1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ10.10(s，1H)，7.87-7.74 (m，1H)，2.09(s，3 H)。C8H5F4NO的元素分析(Anal.Calcd)：C，46.39；H， 2.43；N，6.67。实测C，46.35；H，2.39；N，6.68。
2，3，5，6-四氟硫代乙酰苯胺：
向烘干的5,000ml四颈圆底烧瓶中填充入五硫化二磷(198g， 0.45mol)，然后用无水苯(3,000ml，0.34M)进行稀释。一次性加入2，3，5，6- 四氟乙酰苯胺(185g，0.89mol)，将亮黄色悬浮液加热到缓慢回流的温 度并保持3小时。将该溶液冷却到0℃然后进行过滤。用醚(2×250ml) 洗涤该不溶性物质，然后用10％NaOH水溶液(750ml，500ml)对合并 的滤液进行萃取。将水层冷却到0℃后，用浓盐酸(pH2-3)小心的对它 进行酸化。通过过滤收集沉淀产物，然后用水(500ml)对它进行洗涤。 将橙黄色物质溶解在乙酸乙酯(1,000ml)中，经MgSO4和活性炭(3g)干 燥，通过二氧化硅(50g)短柱(short pad)进行过滤，然后进行浓缩。用庚 烷(500ml)将得到的固体进行研磨并过滤，得到2，3，5，6-四氟硫代乙酰苯 胺(174.9g，88％)：熔点：103-104℃；Rf0.67(50％乙酸乙酯的庚烷溶液)； 1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ11.20(s，1H)，8.00-7.88(m，1H)，2.66 (s，3H)。C8H5F4NS的元素分析：C，43.05；H，2.26；N，6.28。实测C，43.10； H，2.23；N，6.19。
4，5，7-三氟-2-甲基苯并噻唑：
向烘干的配有高架式搅拌器的5,000ml圆底烧瓶中加入氢化钠 (15.9g，0.66mol)，然后用无水甲苯(3,000ml，0.2M)进行稀释。将悬浮 液冷却到0℃，然后用一次性加入的2，3，5，6-四氟硫代乙酰苯胺(134g， 0.60mol)进行处理。将该溶液回暖至室温并保持超过一个小时，然后加 热至缓慢回流。30min后，小心地加入二甲基甲酰胺(400ml)，继续将 混合物搅拌2小时。将该溶液冷却到0℃并加入到冰水(2,000ml)中。用 乙酸乙酯(1,500ml)萃取该溶液，然后用盐水(1,000ml)进行洗涤。将有 机层浓缩至干，用庚烷稀释然后依次用水(300ml)和饱和NaCl水溶液 (1,000ml)洗涤。有机相经MgSO4干燥，过滤，浓缩得到4，5，7-三氟-2- 甲基苯并噻唑(116.8g，96％)的浅棕色固体：熔点：91-92℃；Rf 0.56(30 ％乙酸乙酯的庚烷溶液)；1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.76-7.67 (m，1H)，2.87(s，3H)。C8H4F3NS的元素分析：C，47.29；H，1.98；N，6.82； S，15.78。实测C，47.56；H，2.07；N，6.82；S，15.59。
2-氨基-3，4，6-三氟硫代苯酚盐酸化物
使用氮气流对4，5，7-三氟-2-甲基苯并噻唑(25.0g，123mmol)溶于乙 二醇(310ml，0.4M)和30％NaOH水溶液(310ml，0.4M)形成的溶液进 行脱气，然后将该溶液加热到缓慢回流(125℃)并保持3小时。将该溶 液冷却至0℃并且用浓盐酸(约200ml)将它酸化到pH3-4。用醚(750ml) 萃取该溶液然后用水(200ml)洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤然后用 2，2-二叔丁基-4-甲基苯酚(0.135g，0.5mol)进行处理。浓缩至干后，将 粗产品溶解在无水甲醇(200ml)中，然后用溶解在1，4-二氧杂环乙烷中 形成的HCl溶液(37ml，4N，148mmol)进行处理。将得到的混合物浓 缩至干，利用异丙醚(100ml)进行研磨，然后过滤得到2-氨基-3，4，6-三 氟硫代苯酚盐酸化物(19.3g，73％)的浅棕色固体，该固体无需进一步 纯化即可使用。熔点：121-124℃；Rf 0.43(30％乙酸乙酯的庚烷溶液)； C6H5ClF3NS的元素分析：C，33.42；H，2.34；N，6.50；S，14.87。实测C， 33.45；H，2.27；N，6.48；S，14.96。
3-氰甲基-吲哚-N-乙酸乙酯：
在氮气气氛下，用氢化钠(95％，4.2g，168mmol)对3-吲哚基乙腈 (25.0g，160mmol)溶于无水乙腈(530ml，0.3M)中形成的溶液进行处理 并且搅拌30min。在10min的时间内滴加溴乙酸乙酯(21.3ml，192mmol)， 在室温下将该溶液搅拌16小时。减压浓缩后，将得到的残余物溶解在 乙酸乙酯中并且用饱和NaCl水溶液洗涤。有机萃取液经MgSO4干燥， 过滤然后进行浓缩。用庚烷和乙酸乙酯对粗产品进行重结晶，得到目 标化合物的白色结晶固体(19g，49％)：熔点：98-99℃；Rf0.29(30％乙 酸乙酯的庚烷溶液)；1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.59(dd， J1＝7.8Hz，J2＝0.6Hz，1H)，7.40(dd，J1＝8.1Hz，J2＝0.6Hz，1H)，7.36(s，1H)， 7.18(bt，J＝7.2Hz，1H)，7.10(bt，J＝7.2Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.14(q，J＝7.2 Hz，2H)，4.06，(s，2H)，1.20(t，J＝7.2hz，3H))。C14H14N2O2的LRMS calcd： 242.3，实测为243.0(M+1)+。C14H14N2O2的元素分析：C，69.49；H，5.82； N，11.56。实测C，69.39；H，5.89；N，11.59。
3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸乙酯：
在氮气气氛下，用2-氨基-3，4，6-三氟硫代苯酚盐酸化物(12.7g， 59.0mmol)对3-乙腈-吲哚-N-乙酸乙酯(11.0g，45.4mmol)溶解于无水乙 醇(90ml，0.5M)中形成的溶液进行处理，然后加热到缓慢回流并保持 16小时。冷却到室温后，将该溶液在减压下进行浓缩，用乙酸乙酯稀 释然后用2N HCl和饱和NaCl水溶液进行洗涤。有机层经MgSO4干燥， 过滤然后进行浓缩。使用MPLC(10-50％乙酸乙酯的庚烷溶液， 23ml/min，150min)进行纯化，得到3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基- 吲哚-N-乙酸乙酯(6.0g，36％)的白色结晶固体：熔点：110-111℃；Rf 0.41(30％乙酸乙酯的庚烷溶液)；1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ 7.74-7.66(m，1H)，7.54(d，J＝7.8Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.40(d， J＝8.1Hz，1H)，7.15(br t，J＝6.9Hz，1H)，7.04(br t，J＝7.8Hz，1H)，5.14(s， 2H)，4.66，(s，2H)，4.14(q，J＝7.2Hz，3H)；)；。C20H15F3N2O2S的LRMS calcd：404.4，实测为405.0(M+1)+。C20H15F3N2O2S的元素分析：C，59.40； H，3.74；N，6.93；S，7.93。实测C，59.52；H，3.72；N，6.92；S，8.04。
3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸：
将3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸乙酯(5.91g， 14.6mmol)溶解于1，2-二甲氧基乙烷(73ml，0.2M)形成的溶液冷却到0 ℃，然后滴加NaOH水溶液(1.25N，58ml，73.1mmol)对它进行处理， 滴加时间为15min。加入完成后，继续搅拌该溶液30min，然后用2N HCl将它酸化至pH＝3，然后在减压下进行浓缩。将残余物溶解在乙酸乙 酯(200ml)中，然后用盐水(30ml)洗涤。有机萃取物经Na2SO4干燥，过 滤然后进行浓缩。在庚烷中搅拌得到的物质形成悬浮液，过滤然后进 行干燥得到3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸(5.38g，98％) 的浅黄色固体：熔点：177-178℃；Rf 0.44(20％甲醇的二氯甲烷溶液)； 1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.74-7.65(m，1H)，7.53(d，J＝7.5Hz， 1H)，7.46(s，1H)，7.40(d，J＝8.1Hz，1H)，7.15(bt，J＝6.9Hz，1H)，7.03(bt， J＝7.2Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.65(s，2H)；C18H11F3N2O2S的LRMS calcd： 376.4，实测为375.0(M-1)+。C18H11F3N2O2S的元素分析：C，57.44；H，2.95； N，7.44；S，8.52。实测C，57.58；H，2.99；N，7.38；S，8.51。
3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸水合物(“化学式I的水 合物)
用乙腈和水对浅黄色的3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N- 乙酸进行重结晶，得到3-(4，5，7-三氟苯并噻唑-2-基)甲基-吲哚-N-乙酸 (4.53g，92％)的白色结晶固体：熔点：176-177℃；Rf0.44(20％甲醇的 二氯甲烷溶液)；1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.74-7.65(m，1H)， 7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.40(d，J＝8.1Hz，1H)，7.15(bt， J＝6.9Hz，1H)，7.03(bt，J＝7.2Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.65(s，2H)； C18H11F3N2O2S的LRMS calcd：376.4，实测为375.0(M-1)-。
C18H13F3N2O3S的元素分析：C，54.82；H，3.32；N，7.10；S，8.13。实测C， 54.92；H，3.32；N，7.16；S，8.23。
实施例2
对实施例1的化合物作为人类醛糖还原酶抑制剂的药效、选择性 和效力进行试验。使用与Butera等人在J.Med.Chem(药物化学期刊) 1989，32，757中所述的那些相似的方法对药效或对醛糖还原酶的抑 制效果进行试验。使用这种试验方法，确定了人类醛糖还原酶(hALR2) 活性的50％(IC50)受到抑制时需要的浓度。
在第二种试验方法中，对同样的化合物抑制醛还原酶(hALR1)(一 种结构上有关联的酶)的能力进行试验。所采用的试验方法基本上与 Ishii等人在J.Med.Chem(药物化学期刊)1996 39：1924中所述的方法相 同。使用这种试验方法，确定了人类醛还原酶活性的50％(IC50)受到 抑制时需要的浓度。
由这些数据，确定了hALR1/hALR2的比率。因为希望试验化合物 作为醛糖还原酶的抑制剂具有高药效，所以寻求低的hALR2 IC50s值。 另一方面，不希望试验化合物作为醛还原酶的抑制剂具有高药效，所 以寻求高的hALR1 IC50值。因此，使用hALR1/hALR2比率确定试验 化合物的选择性。这种选择性的重要之处如Kotani等人在J.Med. Chem(药物化学期刊)40：684，1997中所述。
合并这些试验的结果，并且在表1中列出。  实施例#  HALR2  (IC50)  HALR2  (IC50)  hALR1/hALR2  1  5nM  27,000nM  5,400  Tolrestat  13nM  1.940nM  149
以上结果显示了实施例1中化合物的优越的药效、选择性和效力。 该化合物可用于糖尿病引起的慢性并发症的治疗，例如糖尿病性白内 障、视网膜病和神经疾病。因此，本发明的一个方面是用本发明的化 合物对这种并发症的治疗；治疗包括预防和缓解。该化合物可用于例 如糖尿病性白内障、视网膜病、肾病和神经疾病的治疗当中。
实施例3
在第三组试验中，对实施例1的化合物使患有链脲菌素诱发的糖 尿病的大鼠类的坐骨神经中山梨糖醇的积累正常化或降低的能力进行 检测。用来测定效力的试验方法基本上是Mylari等人在J.Med. Chem.(药物化学期刊)34：108，1991中的那些。
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物使组织中山梨糖醇水平的降低与剂量相关。在对大鼠坐骨神经的 15日研究中，{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基} 乙酸一水合物的ED50为1.3mg/kg日，当剂量为4.8mg/kg/日时对山梨 糖醇积累的抑制作用达到100％。在果糖(水平降低)和mysinositol(水平 升高)中也观察到类似的有利变化。
[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基]乙酸一水合物使 患有STZ诱导
               糖尿病的大鼠的组织中山梨糖醇水平降低   研究时间   活体剂量  (mg/kg/日)                      山梨糖醇降低％   坐骨神     经   晶状体   视网膜   肾皮层   肾髓质     30日     5     100     88     ND     ND     ND     30日     10     100     90     ND     ND     ND     30日     25     100     95     ND     ND     ND     90日     5     100     -     89     33     36     90日     10     100     -     99     25     47     90日     25     100     -     96     45     58
ND＝未检出。
“-”＝由于未经治疗糖尿病的白内障而不能准确测定。
实施例5
将{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一 水合物与已知的醛糖还原酶抑制剂(ARI)折那司他(zenarestat)和唑 泊司他(zopolrestat)在8日STZ糖尿病大鼠模型中进行比较。在 10mg/kg/日的剂量下，在使坐骨神经和晶状体中山梨糖醇水平降低方 面，化学式I表示的化合物的药效明显好于折那司他或唑泊司他。     ARI   活体剂量   mg/kg/日 坐骨神经中山 梨糖醇的降低 晶状体中山梨 糖醇的降低    化学式I的水合物     10     100％   25-42％    折那司他     10     52％   0％    唑泊司他     10     71％   0％
实施例6
在STZ糖尿病大鼠的4周研究中，{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2- 基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物对多羟基化合物诱发的坐骨神经 的神经传导速度(NCV)损失的抑制作用与剂量有关。剂量为5、10、 25mg/kg/日时对下降的抑制程度分别为14％、41％和79％。在对STZ 糖尿病大鼠进行3个月的5、10和25mg/kg/日的给药的第二次长时间 研究中，证实了这种活性。数据如下。     活体剂量     mg/kg/日     治疗时间   NCV的改善     5     3个月     50％     10     3个月     68％     25     3个月     105％
实施例7
对{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一 水合物与折那司他和唑泊司他对NCV下降的抑制能力进行非常有利的 比较。在相当的剂量下对{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H- 吲哚-1-基}乙酸一水合物的活性是已知ARI化合物活性的两倍。数据如 下。     ARI   活体剂量   mg/kg/日 研究时间 治疗时间 NCV的改善 化学式I的水合物     25     4周     3周     79％ 折那司他     32     2周     2周     48％ 唑泊司他     25     4周     4周     43％
药物组合物
以下化合物基本上是根据实施例9的程序制备的。
组合物A
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物，
                               50mg药片     组分     mg/药片     wt.％ 活性化合物*     50     15.15 乳糖fast flo     248     75.15 PVP     16     4.85 纯化水     适量     - 交联羧甲基纤维素钠     10     3.03 硬脂酸镁     6.0     1.82 总计     330mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
组合物B
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物， 200mg药片 组分     mg/药片     wt.％ 活性化合物*     200     60.61 乳糖fast flo     98     29.69 PVP     16     4.85 纯化水     适量     - 交联羧甲基纤维素钠     10     3.03 硬脂酸镁     6.0     1.82 总计     330mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
组合物C
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物， 25mg药片     组分     mg/药片     wt.％ 活性化合物*     25     7.57 乳糖fast flo     273     82.73 PVP     16     4.85 纯化水     适量     - 交联羧甲基纤维素钠     10     3.03 硬脂酸镁     6.0     1.82 总计     330mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
组合物D
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物，
50mg胶囊     组分     mg/药片     wt.％     活性化合物*     50     15.92     乳糖fast flo     248     78.98     PVP     16     5.10     纯化水     适量     -     总计     314mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
组合物E
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物， 200mg胶囊     组分     mg/药片     wt.％     活性化合物*     200     63.69     乳糖fast flo     98     31.21     PVP     16     5.10     纯化水     适量     -     总计     314mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
组合物F
{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物， 25mg胶囊     组分     mg/药片     wt.％     活性化合物*     25     7.96     乳糖fast flo     273     86.94     PVP     16     5.10     纯化水     适量     -     总计     314mg     100％
*活性化合物指{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水 合物
实施例9
药物组合物的制备
在受控室温(15-30℃)下保存{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基) 甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物。
以下是批量为大约1,200片药片成品的典型工艺说明，其中该药片 中每片含有200mg{3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1- 基}乙酸一水合物。该工艺如图1所示。
(1)在干净的、已去皮重并且做好标记的聚乙烯袋中分别称重 {3-[(4，5，7-三氟-1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物、 乳糖fast flo和PVP。
(2)在转速500rpm的Niro-Fielder PP1搅拌机中使{3-[(4，5，7-三氟 -1，3-苯并噻唑-2-基)甲基]-1H-吲哚-1-基}乙酸一水合物、乳糖和PVP进 行5分钟的混合，无需磨碎。
(3)当用切碎机(设定为速度2)在500rpm下混合时，使用蠕动 泵向搅拌机加入纯化水。水的量为大约60ml。当颗粒很好地形成时停 止加入水。
(4)将湿颗粒从搅拌机转移到Aeromatic流化床干燥器中，并且 在70℃下进行干燥，直到水含量达到1.0和2.5％之间。
(5)使用Erweka AR400的1mm筛对干燥的颗粒进行筛分。
(6)得到大约410g颗粒。对颗粒重量进行水含量校正。然后基 于校正的颗粒重量计算需要的交联甲基纤维素钠和硬脂酸镁的量。然 后在设定为中速的Turbula混合器中将颗粒与交联甲基纤维素钠搅拌6 分钟。
(7)向掺和物中加入硬脂酸镁并在设定为最慢速度下混合4分 钟。
(8)将该掺和物排放到聚乙烯袋中。
(9)使用配有10mm标准凹面冲孔的Manesty F3压片机对该掺和 物进行压制。压制制备的药片芯的重量为大约330mg(±5％)。
(10)测定该芯的厚度和硬度，然后将该芯进行双包被。
(11)得到大约400g的药片芯，然后测定Opadry和水的数量。 使用Heidolph磁力搅拌机对Opadry和水进行30分钟的混合。
(12)将Aeromatic Strea 1预热到65℃。将配有1mm喷嘴的喷 雾枪设定为最小喷雾宽度和最低喷雾位置，并且将该枪置于中间位置。
(13)将排风设为10，在Strea中对药片芯进行15分钟的预热。 将Opadry溶液置于Heidolph搅拌机中搅拌均匀，并且将来自蠕动泵的 管子插入该溶液中。
(14)将喷雾的初始设定调整到温度为65℃，喷雾压力为 1.2bar，排风量为15，并且将蠕动泵设为7。
(15)开始包被过程，并调整排风量确保药片被均匀包被。喷 雾速率保持在4到5g/分钟之间。
(16)全部溶液喷雾完成之后，在大约65℃下对药片进行10 分钟的干燥，排风量10。然后使药片恢复到室温，然后在两层聚乙烯 袋中保存。
现在用这种完整、清楚、简洁和准确的术语描述了本发明以及制 造和使用其的方式和方法，以使其所属领域的任何普通技术人员能够 制造和使用本发明。应当理解前述说明了本发明的优选实施方案，在 不脱离如权利要求中所列出的本发明的精神或范围的情况下可以对它 做出修改。为具体指出并且清楚地要求本发明的主题，所附权利要求 概括了本说明书。
本申请要求2002年7月26日提交的美国临时申请序列号第 60/398701号的优先权，其公开内容在此完整引入。