1.修饰的PH20多肽，其在PH20多肽中包含至少一个氨基酸置换，其中：
所述修饰的PH20多肽与不含有所述氨基酸置换的PH20多肽相比呈现增加的稳定性；
及
增加的稳定性表现为在存在一或多种蛋白质变性条件下对变性的增加的抗性。
2.权利要求1的修饰的PH20多肽，其中所述蛋白质变性条件选自高于30℃的升高的
温度、搅拌、低盐或无盐、存在赋形剂和变性剂。
3.权利要求2的修饰的PH20多肽，其中所述蛋白质变性条件由于存在赋形剂或变性剂
所致，所述赋形剂或变性剂选自抗粘附剂、粘合剂、涂覆剂、充填剂和稀释剂、香料、色素、润滑剂、助流剂、防腐剂、去污剂、吸附剂或者甜味剂及其组合中的一或多种。
4.权利要求1-3任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与SEQ ID NO:3
所示氨基酸序列呈现至少68％的氨基酸序列相同性。
5.权利要求1-4任一项的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有SEQ ID
NO:3、7或32-66所示氨基酸序列或者与SEQ ID NO:3、7或32-66任一至少85％相同的氨
基酸序列的未修饰的PH20多肽中。
6.权利要求1-5任一项的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有与SEQ ID
NO:3、7或32-66任一呈现至少91％序列相同性的氨基酸序列的PH20多肽中。
7.权利要求1-6任一项的修饰的PH20多肽，其中：
所述修饰的PH20多肽在存在变性条件下与不含有所述氨基酸置换的未修饰的PH20多
肽相比呈现高于110％的透明质酸酶活性；或者
所述修饰的PH20多肽在存在变性条件下与不存在所述变性条件下的透明质酸酶活性
相比呈现至少15％、20％、30％、40％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、81％、82％、83％、
84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、
99％或更多的透明质酸酶活性；或者
所述修饰的PH20多肽在存在变性条件下与在不存在所述变性条件下透明质酸酶活性
相比呈现至少50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更多的溶解性；或者所述修饰的PH20多肽在存在变性条件下与在不存在所述变性条件下的透明质酸酶活
性相比呈现低于50％、40％、30％、25％、20％、15％、10％、5％或更低的聚集或结晶化。
8.权利要求1-7任一项的修饰的PH20多肽，其中所述PH20多肽在存在变性条件下稳
定至少4小时。
9.权利要求1-8任一项的修饰的PH20多肽，其中所述变性条件包含酚类防腐剂。
10.权利要求1-9任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽在存在抗微生
物有效量的一或多种酚类防腐剂时是稳定的。
11.权利要求10的修饰的PH20多肽，其中所述抗微生物有效量是一或多种酚类防腐
剂的总量，以质量浓度(w/v)百分比(％)表示为或大约为0.05％-0.6％、0.1％-0.4％、
0.1％-0.3％、0.15％-0.325％、0.15％-0.25％、0.1％-0.2％、0.2％-0.3％或者
0.3％-0.4％，包括端点。
12.权利要求9-11任一项的修饰的PH20多肽，其中所述酚类防腐剂选自苯酚、间甲酚
(m-甲酚)、苯甲醇和对羟基苯甲酸酯中的一或多种。
13.权利要求12的修饰的PH20多肽，其中所述防腐剂是对羟基苯甲酸酯，其是对羟基
苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯。
14.权利要求9-11任一项的修饰的PH20多肽，其中所述防腐剂是酚类防腐剂，其是
m-甲酚、苯酚，或者m-甲酚和苯酚。
15.权利要求9-14任一项的修饰的PH20多肽，其中：
所述修饰的PH20多肽在存在防腐剂条件下与不存在所述防腐剂条件下的透明质酸酶
活性相比呈现至少15％的透明质酸酶活性至少4小时，其中所述活性在除了存在防腐剂之
外的相同条件下对比。
16.权利要求10-15任一项的修饰的PH20多肽，其包含在相应于选自如下的参考SEQ
ID NO:3所示氨基酸位置的位置的氨基酸位置的至少一个氨基酸置换：10、12、20、22、26、
34、36、46、50、52、58、68、70、74、82、83、84、86、97、127、131、138、142、143、144、166、169、
174、193、195、196、204、205、206、213、219、234、237、238、240、249、261、267、277、279、291、
309、310、314、315、317、318、347、367、375、376、399、401、407、416、419、421、431、433、439、
440、443或445，其中相应氨基酸位置通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多
肽而鉴别。
17.权利要求1-16任一项的修饰的PH20多肽，其包含选自如下置换的至少一个氨基酸
置换，所述置换的位置相应于参考SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置：
在相应于位置10的位置的G；在相应于位置12的位置的K；在相应于位置20的位置
的S；在相应于位置22的位置的T；在相应于位置26的位置的M；在相应于位置34的位置
的W；在相应于位置36的位置的N；在相应于位置46的位置的L；在相应于位置50的位置
的M；在相应于位置52的位置的T；在相应于位置52的位置的S；在相应于位置58的位置
的C；在相应于位置58的位置的K；在相应于位置58的位置的R；在相应于位置58的位置
的N；在相应于位置58的位置的Y；在相应于位置58的位置的P；在相应于位置58的位置
的H；在相应于位置68的位置的P；在相应于位置70的位置的V；在相应于位置74的位置
的E；在相应于位置82的位置的L；在相应于位置82的位置的N；在相应于位置83的位置
的V；在相应于位置83的位置的Q；在相应于位置83的位置的S；在相应于位置83的位置
的G；在相应于位置84的位置的N；在相应于位置86的位置的A；在相应于位置86的位置
的K；在相应于位置97的位置的E；在相应于位置97的位置的L；在相应于位置127的位置
的R；在相应于位置131的位置的R；在相应于位置138的位置的L；在相应于位置142的位
置的K；在相应于位置142的位置的N；在相应于位置142的位置的P；在相应于位置142的
位置的S；在相应于位置142的位置的T；在相应于位置143的位置的G；在相应于位置143
的位置的K；在相应于位置144的位置的T；在相应于位置166的位置的Q；在相应于位置
166的位置的T；在相应于位置169的位置的L；在相应于位置174的位置的G；在相应于位
置174的位置的N；在相应于位置193的位置的Q；在相应于位置195的位置的T；在相应于
位置195的位置的N；在相应于位置196的位置的E；在相应于位置196的位置的R；在相应
于位置204的位置的P；在相应于位置205的位置的A；在相应于位置205的位置的E；在相
应于位置206的位置的I；在相应于位置213的位置的A；在相应于位置219的位置的I；在
相应于位置234的位置的M；在相应于位置237的位置的T；在相应于位置238的位置的H；
在相应于位置240的位置的Q；在相应于位置249的位置的V；在相应于位置261的位置的
A；在相应于位置261的位置的K；在相应于位置267的位置的T；在相应于位置277的位置
的K；在相应于位置279的位置的H；在相应于位置279的位置的V；在相应于位置291的位
置的V；在相应于位置309的位置的E；在相应于位置310的位置的Q；在相应于位置314的
位置的Y；在相应于位置315的位置的Y；在相应于位置317的位置的N；在相应于位置317
的位置的W；在相应于位置318的位置的D；在相应于位置347的位置的G；在相应于位置
367的位置的A；在相应于位置375的位置的R；在相应于位置376的位置的R；在相应于位
置399的位置的V；在相应于位置401的位置的E；在相应于位置407的位置的A；在相应于
位置416的位置的L；在相应于位置419的位置的K；在相应于位置421的位置的H；在相应
于位置431的位置的E；在相应于位置433的位置的T；在相应于位置433的位置的V；在相
应于位置439的位置的C；在相应于位置440的位置的P；在相应于位置443的位置的G；以
及在相应于位置445的位置的N。
18.权利要求10-17任一项的修饰的PH20多肽，其包含选自如下置换的至少一个氨基
酸置换，所述置换的位置相应于参考SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置：
在相应于位置52的位置的T，在相应于位置58的位置的K，在相应于位置58的位置的
R，在相应于位置68的位置的P，在相应于位置83的位置的V，在相应于位置204的位置的
P，在相应于位置261的位置的A，在相应于位置267的位置的T，在相应于位置277的位置
的K及在相应于位置421的位置的H。
19.权利要求10-18任一项的修饰的PH20多肽，其包含在PH20多肽中在相应于参考
SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置204的位置的P置换。
20.权利要求10-18任一项的修饰的PH20多肽，其包含在PH20多肽中在相应于参考
SEQ ID NO:3所示氨基酸位置的位置58的位置的R置换。
21.权利要求1-20任一项的修饰的PH20多肽，其中：
所述修饰的PH20多肽在或大约在30℃-45℃、35℃-45℃、30℃-37℃、35℃-37℃或者
37℃-42℃的温度呈现增加的稳定性；
所述修饰的PH20多肽在升高的温度与不含有所述氨基酸置换的未修饰的PH20多肽相
比呈现更高的透明质酸酶活性；以及
所述活性是在相同条件下对比的。
22.权利要求21的修饰的PH20多肽，其包含在相应于选自如下位置的氨基酸位置的
至少一个氨基酸置换，所述如下位置参考SEQ ID NO:3所示氨基酸位置：1、11、12、14、20、
26、29、34、50、58、70、82、83、84、86、87、140、142、143、147、152、166、167、172、174、178、193、
195、206、212、213、219、233、237、240、267、277、291、292、309、313、314、317、318、347、367、
368、371、374、389、392、395、396、406、419、421、439和443，其中相应氨基酸位置通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多肽而鉴别。
23.权利要求22的修饰的PH20多肽，其包含选自如下相应于参考SEQ ID NO:3所示氨
基酸位置的位置的至少一个氨基酸置换：
在相应于位置1的位置的R；在相应于位置11的位置的S；在相应于位置12的位置的
I；在相应于位置14的位置的V；在相应于位置20的位置的S；在相应于位置26的位置的M；
在相应于位置29的位置的R；在相应于位置34的位置的W；在相应于位置50的位置的M；
在相应于位置58的位置的K；在相应于位置58的位置的Q；在相应于位置58的位置的Q；
在相应于位置70的位置的V；在相应于位置82的位置的L；在相应于位置83的位置的Q；
在相应于位置84的位置的R；在相应于位置86的位置的A；在相应于位置87的位置的S；
在相应于位置140的位置的K；在相应于位置142的位置的S；在相应于位置142的位置的
T；在相应于位置143的位置的K；在相应于位置147的位置的S；在相应于位置152的位置
的T；在相应于位置166的位置的T；在相应于位置167的位置的D；在相应于位置172的位
置的A；在相应于位置174的位置的G；在相应于位置174的位置的N；在相应于位置178的
位置的R；在相应于位置193的位置的Q；在相应于位置195的位置的T；在相应于位置206
的位置的I；在相应于位置212的位置的S；在相应于位置213的位置的A；在相应于位置
219的位置的I；在相应于位置233的位置的G；在相应于位置237的位置的T；在相应于位
置240的位置的A；在相应于位置240的位置的Q；在相应于位置267的位置的T；在相应于
位置277的位置的E；在相应于位置291的位置的S；在相应于位置292的位置的H；在相应
于位置292的位置的V；在相应于位置309的位置的S；在相应于位置313的位置的H；在相
应于位置314的位置的S；在相应于位置317的位置的I；在相应于位置317的位置的T；在
相应于位置317的位置的W；在相应于位置318的位置的R；在相应于位置347的位置的G；
在相应于位置367的位置的A；在相应于位置368的位置的R；在相应于位置371的位置的
S；在相应于位置374的位置的P；在相应于位置389的位置的A；在相应于位置392的位置
的V；在相应于位置395的位置的A；在相应于位置396的位置的H；在相应于位置406的位
置的N；在相应于位置419的位置的H；在相应于位置419的位置的K；在相应于位置421的
位置的R；在相应于位置421的位置的S；在相应于位置439的位置的A；在相应于位置439
的位置的C；及在相应于位置443的位置的G。
24.权利要求1-23任一项的修饰的PH20多肽，其中：
所述修饰的PH20多肽在存在低于100mM的低浓度NaCl的条件下呈现增加的稳定性；
所述修饰的PH20多肽与不含有所述氨基酸置换的未修饰的PH20多肽相比在存在低浓
度盐的条件下呈现增加的透明质酸酶活性；以及
所述活性是在相同条件下对比的。
25.修饰的PH20多肽，其在PH20多肽中包含至少一个氨基酸置换，其中：
所述修饰的PH20多肽与不含有所述氨基酸置换的PH20多肽相比呈现为至少120％透
明质酸酶活性的增加的透明质酸酶活性。
26.权利要求25的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与SEQ ID NO:3所示
氨基酸序列呈现至少68％的氨基酸序列相同性。
27.权利要求25或26的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有SEQ ID
NO:3、7或32-66任一所示氨基酸序列或者与SEQ ID NO:3、7或32-66任一所示序列呈现至
少85％序列相同性的氨基酸序列的未修饰的PH20多肽中。
28.权利要求25-27任一项的修饰的PH20多肽，其包含在相应于选自如下参考SEQ
ID NO:3所示氨基酸位置的位置的氨基酸位置的至少一个氨基酸置换：1、12、15、24、26、27、
29、30、31、32、33、37、39、46、48、52、58、63、67、68、69、70、71、72、73、74、75、84、86、87、92、
93、94、97、118、120、127、131、135、141、142、147、148、150、151、152、155、156、163、164、165、
166、169、170、174、198、206、209、212、213、215、219、233、234、236、238、247、257、259、260、
261、263、269、271、272、276、277、278、282、291、293、305、308、309、310、313、315、317、318、
320、324、325、326、328、347、353、359、371、377、380、389、392、395、399、405、407、409、410、
418、419、421、425、431、433、436、437、438、439、440、441、442、443、445、446和447，其中相应氨基酸位置是通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多肽而鉴别。
29.权利要求25-28任一项的修饰的PH20多肽，其包含选自如下参考SEQ ID NO:3所
示氨基酸位置的置换的至少一个氨基酸置换：
在相应于位置1的位置的组氨酸(H)；在相应于位置1的位置的Q；在相应于位置12的
位置的E；在相应于位置12的位置的T；在相应于位置15的位置的V；在相应于位置24的
位置的E；在相应于位置24的位置的H；在相应于位置26的位置的E；在相应于位置26的
位置的K；在相应于位置27的位置的K；在相应于位置27的位置的R；在相应于位置29的
位置的E；在相应于位置29的位置的I；在相应于位置29的位置的L；在相应于位置29的
位置的M；在相应于位置29的位置的P；在相应于位置29的位置的S；在相应于位置29的
位置的V；在相应于位置30的位置的G；在相应于位置30的位置的H；在相应于位置30的
位置的K；在相应于位置30的位置的M；在相应于位置30的位置的R；在相应于位置30的
位置的S；在相应于位置31的位置的A；在相应于位置31的位置的C；在相应于位置31的
位置的H；在相应于位置31的位置的I；在相应于位置31的位置的K；在相应于位置31的
位置的L；在相应于位置31的位置的P；在相应于位置31的位置的R；在相应于位置31的
位置的S；在相应于位置31的位置的T；在相应于位置31的位置的V；在相应于位置32的
位置的F；在相应于位置32的位置的G；在相应于位置32的位置的H；在相应于位置33的
位置的W；在相应于位置37的位置的F；在相应于位置39的位置的N；在相应于位置39的
位置的T；在相应于位置46的位置的R；在相应于位置48的位置的F；在相应于位置48的
位置的H；在相应于位置48的位置的N；在相应于位置52的位置的Q；在相应于位置58的
位置的K；在相应于位置58的位置的Q；在相应于位置63的位置的W；在相应于位置67的
位置的V；在相应于位置68的位置的H；在相应于位置68的位置的Q；在相应于位置69的
位置的A；在相应于位置69的位置的C；在相应于位置69的位置的F；在相应于位置69的
位置的G；在相应于位置69的位置的I；在相应于位置69的位置的L；在相应于位置69的
位置的M；在相应于位置69的位置的P；在相应于位置69的位置的R；在相应于位置69的
位置的W；在相应于位置69的位置的Y；在相应于位置70的位置的A；在相应于位置70的
位置的C；在相应于位置70的位置的F；在相应于位置70的位置的G；在相应于位置70的
位置的H；在相应于位置70的位置的K；在相应于位置70的位置的L；在相应于位置70的
位置的N；在相应于位置70的位置的P；在相应于位置70的位置的R；在相应于位置70的
位置的S；在相应于位置70的位置的T；在相应于位置70的位置的V；在相应于位置71的
位置的R；在相应于位置71的位置的S；在相应于位置72的位置的M；在相应于位置72的
位置的Q；在相应于位置73的位置的H；在相应于位置73的位置的L；在相应于位置73的
位置的W；在相应于位置74的位置的A；在相应于位置74的位置的C；在相应于位置74的
位置的G；在相应于位置74的位置的N；在相应于位置74的位置的P；在相应于位置74的
位置的R；在相应于位置74的位置的S；在相应于位置74的位置的V；在相应于位置74的
位置的W；在相应于位置75的位置的F；在相应于位置75的位置的L；在相应于位置75的
位置的R；在相应于位置75的位置的T；在相应于位置84的位置的G；在相应于位置84的
位置的R；在相应于位置86的位置的A；在相应于位置87的位置的C；在相应于位置87的
位置的T；在相应于位置87的位置的Y；在相应于位置92的位置的C；在相应于位置93的
位置的I；在相应于位置93的位置的L；在相应于位置93的位置的R；在相应于位置93的
位置的T；在相应于位置94的位置的R；在相应于位置97的位置的G；在相应于位置118的
位置的Q；在相应于位置120的位置的F；在相应于位置120的位置的V；在相应于位置120
的位置的Y；在相应于位置127的位置的H；在相应于位置127的位置的N；在相应于位置
131的位置的G；在相应于位置131的位置的R；在相应于位置131的位置的V；在相应于位
置135的位置的D；在相应于位置135的位置的G；在相应于位置135的位置的R；在相应于
位置141的位置的H；在相应于位置141的位置的Y；在相应于位置142的位置的R；在相应
于位置147的位置的R；在相应于位置147的位置的V；在相应于位置148的位置的K；在相
应于位置150的位置的G；在相应于位置151的位置的K；在相应于位置151的位置的L；在
相应于位置151的位置的M；在相应于位置151的位置的Q；在相应于位置151的位置的R；
在相应于位置152的位置的R；在相应于位置155的位置的G；在相应于位置155的位置的
K；在相应于位置156的位置的D；在相应于位置163的位置的A；在相应于位置163的位置
的E；在相应于位置163的位置的K；在相应于位置163的位置的R；在相应于位置164的位
置的M；在相应于位置165的位置的D；在相应于位置165的位置的N；在相应于位置166的
位置的A；在相应于位置166的位置的F；在相应于位置166的位置的H；在相应于位置166
的位置的L；在相应于位置166的位置的Q；在相应于位置166的位置的R；在相应于位置
166的位置的T；在相应于位置166的位置的Y；在相应于位置169的位置的L；在相应于位
置170的位置的R；在相应于位置174的位置的K；在相应于位置198的位置的D；在相应于
位置206的位置的K；在相应于位置206的位置的L；在相应于位置212的位置的N；在相应
于位置213的位置的M；在相应于位置213的位置的N；在相应于位置215的位置的M；在相
应于位置219的位置的S；在相应于位置233的位置的K；在相应于位置233的位置的R；在
相应于位置234的位置的M；在相应于位置236的位置的R；在相应于位置237的位置的E；
在相应于位置238的位置的S；在相应于位置247的位置的I；在相应于位置257的位置的
T；在相应于位置259的位置的P；在相应于位置260的位置的Y；在相应于位置261的位置
的K；在相应于位置261的位置的N；在相应于位置263的位置的K；在相应于位置263的位
置的R；在相应于位置269的位置的A；在相应于位置271的位置的L；在相应于位置271的
位置的M；在相应于位置272的位置的T；在相应于位置276的位置的D；在相应于位置276
的位置的S；在相应于位置276的位置的Y；在相应于位置277的位置的K；在相应于位置
277的位置的R；在相应于位置277的位置的T；在相应于位置278的位置的H；在相应于位
置278的位置的K；在相应于位置278的位置的N；在相应于位置278的位置的R；在相应于
位置278的位置的S；在相应于位置278的位置的T；在相应于位置278的位置的Y；在相应
于位置282的位置的M；在相应于位置291的位置的V；在相应于位置293的位置的A；在相
应于位置293的位置的C；在相应于位置293的位置的F；在相应于位置293的位置的M；在
相应于位置293的位置的P；在相应于位置293的位置的Q；在相应于位置293的位置的V；
在相应于位置305的位置的E；在相应于位置308的位置的G；在相应于位置308的位置的
N；在相应于位置309的位置的E；在相应于位置309的位置的L；在相应于位置309的位置
的N；在相应于位置309的位置的Q；在相应于位置309的位置的R；在相应于位置309的位
置的T；在相应于位置310的位置的A；在相应于位置310的位置的G；在相应于位置313的
位置的K；在相应于位置313的位置的R；在相应于位置315的位置的H；在相应于位置317
的位置的I；在相应于位置317的位置的K；在相应于位置317的位置的R；在相应于位置
318的位置的M；在相应于位置320的位置的H；在相应于位置320的位置的K；在相应于位
置320的位置的R；在相应于位置324的位置的R；在相应于位置325的位置的A；在相应于
位置325的位置的D；在相应于位置325的位置的E；在相应于位置325的位置的G；在相应
于位置325的位置的H；在相应于位置325的位置的K；在相应于位置325的位置的M；在相
应于位置325的位置的N；在相应于位置325的位置的Q；在相应于位置325的位置的S；在
相应于位置326的位置的V；在相应于位置328的位置的I；在相应于位置328的位置的K；
在相应于位置328的位置的L；在相应于位置328的位置的S；在相应于位置328的位置的
Y；在相应于位置347的位置的G；在相应于位置347的位置的S；在相应于位置353的位置
的V；在相应于位置359的位置的T；在相应于位置371的位置的R；在相应于位置377的位
置的P；在相应于位置377的位置的T；在相应于位置380的位置的W；在相应于位置380的
位置的Y；在相应于位置389的位置的K；在相应于位置392的位置的M；在相应于位置395
的位置的R；在相应于位置399的位置的M；在相应于位置399的位置的T；在相应于位置
399的位置的W；在相应于位置405的位置的G；在相应于位置407的位置的D；在相应于位
置407的位置的Q；在相应于位置409的位置的A；在相应于位置409的位置的Q；在相应于
位置410的位置的T；在相应于位置418的位置的P；在相应于位置419的位置的F；在相应
于位置419的位置的I；在相应于位置419的位置的K；在相应于位置419的位置的R；在相
应于位置419的位置的S；在相应于位置421的位置的H；在相应于位置421的位置的K；在
相应于位置421的位置的N；在相应于位置421的位置的Q；在相应于位置421的位置的R；
在相应于位置421的位置的S；在相应于位置425的位置的K；在相应于位置431的位置的
A；在相应于位置431的位置的H；在相应于位置431的位置的K；在相应于位置431的位置
的Q；在相应于位置431的位置的R；在相应于位置431的位置的S；在相应于位置431的位
置的V；在相应于位置433的位置的L；在相应于位置433的位置的R；在相应于位置433的
位置的T；在相应于位置433的位置的V；在相应于位置436的位置的K；在相应于位置437
的位置的I；在相应于位置437的位置的M；在相应于位置438的位置的T；在相应于位置
439的位置的V；在相应于位置440的位置的H；在相应于位置440的位置的R；在相应于位
置441的位置的F；在相应于位置442的位置的R；在相应于位置443的位置的A；在相应于
位置443的位置的M；在相应于位置445的位置的M；在相应于位置445的位置的P；在相应
于位置446的位置的A；在相应于位置447的位置的D；在相应于位置447的位置的N；和/
或在相应于位置447的位置的Q。
30.权利要求25-29任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与不含有所
述氨基酸置换的PH20多肽相比呈现至少2.0倍的透明质酸酶活性。
31.权利要求30的修饰的PH20多肽，其包含在相应于选自参考SEQ ID NO:3所示位置
的24、29、31、48、58、69、70、75、84、97、165、166、271、278、317、320、325和326的位置的氨基酸位置的至少一个氨基酸置换，其中相应氨基酸位置是通过排列对比所述PH20多肽与SEQ
ID NO:3所示多肽而鉴别的。
32.权利要求31的修饰的PH20的多肽，其包含选自如下在参考SEQ ID NO:3所示氨基
酸位置的位置的置换的至少一个氨基酸置换：
在相应于位置24的位置的E；在相应于位置29的位置的E；在相应于位置31的位置
的V；在相应于位置48的位置的N；在相应于位置58的位置的K；在相应于位置58的位置
的Q；在相应于位置69的位置的A；在相应于位置69的位置的F；在相应于位置69的位置
的G；在相应于位置69的位置的P；在相应于位置69的位置的R；在相应于位置70的位置
的A；在相应于位置70的位置的F；在相应于位置70的位置的G；在相应于位置70的位置
的H；在相应于位置70的位置的H；在相应于位置70的位置的N；在相应于位置70的位置
的R；在相应于位置70的位置的T；在相应于位置70的位置的V；在相应于位置75的位置
的L；在相应于位置75的位置的T；在相应于位置84的位置的G；在相应于位置97的位置
的G；在相应于位置165的位置的D；在相应于位置166的位置的L；在相应于位置166的位
置的R；在相应于位置166的位置的T；在相应于位置271的位置的L；在相应于位置278的
位置的H；在相应于位置278的位置的R；在相应于位置317的位置的K；在相应于位置320
的位置的K；在相应于位置325的位置的E；在相应于位置325的位置的G；在相应于位置
325的位置的K；在相应于位置325的位置的N；在相应于位置325的位置的Q；及在相应于
位置326的位置的V。
33.修饰的PH20多肽，其在SEQ ID NO:7所示PH20多肽、其C-末端截短的片段或者在
具有与SEQ ID NO:7所示氨基酸序列至少91％相同的氨基酸序列的PH20多肽中包含至少
一个氨基酸置换，其中：
所述至少一个氨基酸置换是在相应于选自如下参考SEQ ID NO:3或7所示氨基酸位置
的位置的氨基酸位置：1、2、3、4、5、6、8、9、10、11、12、13、14、15、20、22、23、24、26、27、28、29、
30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、54、58、
59、60、61、63、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、77、79、81、82、83、84、85、86、87、89、
90、91、92、93、94、96、97、98、99、102、103、104、105、106、107、108、110、114、117,118、119、
120、122、124、125、127、128、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、
143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、
162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、
181、182、183、184、186、192、193、195、196、197、198、200、202、204、205、206、208、209、211、
212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、224、226、230、231、232、233、234、235、
236、237、238、239、240、242、245、247、248、251、253、255、256、257、258、259、260、261、263、
264、265、266、267、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、282、283、284、
285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、297、298、300、301、302、304、305、306、307、
308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、320、321、323、324、325、326、327、328、
331、334、335、338、339、342、343、347、348、349、351、353、356、357、358、359、360、361、367、
368、369、371、373、374、375、376、377、378、379、380、381、383、385、387、388、389、391、392、
393、394、395、396、397、398、399、401、403、404、405、406、407、409、410、411、412、413、414、
415、416、417、418、419、420、421、422、425、426、427、428、431、432、433、434、435、436、437、
438、439、440、441、442、443、444、445、446和447；
相应氨基酸位置是通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多肽而鉴别；及
条件是如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置13、47、131或219的位置的氨基
酸置换，则所述置换不是用丙氨酸(A)置换。
34.权利要求33的修饰的PH20多肽，其中：
所述修饰的PH20多肽呈现出不含有所述氨基酸置换的PH20多肽的至少40％的透明质
酸酶活性；及
所述活性是在相同条件下对比的。
35.权利要求33或34的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有SEQ ID
NO:3、7或32-66任一所示氨基酸序列或者与SEQ ID NO:3、7或32-66任一呈现至少91％
序列相同性的氨基酸序列的未修饰的PH20多肽中。
36.权利要求33-35任一项的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是表3中所示的
氨基酸置换。
37.修饰的PH20多肽，其在SEQ ID NO:7所示PH20多肽、其C-末端截短的片段或者在
具有与SEQ ID NO:7所示氨基酸序列至少91％相同的氨基酸序列的PH20多肽中包含至少
一个氨基酸置换，其中：
所述修饰的PH20多肽呈现出低于20％的不含有所述氨基酸置换的PH20多肽的透明质
酸酶活性；
所述活性是在相同条件下对比的；
所述氨基酸置换是在相应于选自如下参考SEQ ID NO:3或7所示氨基酸位置的位置
的氨基酸位置：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、25、27、
33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、
58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、
83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、94、95、96、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、
108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、121、122、123、124、125、126、127、
128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、143、144、145、149、150、152、153、
154、155、156、157、158、159、161、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、
175、176、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、
195、197、198、199、200、201、202、203、204、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、
216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、
235、236、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、
255、256、257、258、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、
275、276、278、279、280、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、
296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、310、311、312、313、314、315、
316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、331、333、334、335、336、337、338、
339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、
358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、
377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、
396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、408、410、411、412、413、414、415、416、
417、419、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、434、437、438、439、440、
441、442、443、444或447；
相应氨基酸位置是通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多肽而鉴别的；及
条件是：
(i)如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置200、333、358或393的位置的氨基酸
置换，则所述置换不是用丙氨酸(A)置换；
(ii)如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置111或249的位置的氨基酸置换，则
所述置换不是用天冬酰胺(N)置换；
(iii)如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置113的位置的氨基酸置换，则所述
置换不是用谷氨酰胺(Q)置换；
(iv)如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置176的位置的氨基酸置换，则所述置
换不是用甘氨酸(G)置换；及
(v)如果所述修饰的PH20多肽含有在相应于位置252的位置的氨基酸置换，则所述置
换不是用苏氨酸(T)置换。
38.权利要求37的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有SEQ ID NO:3、7或
32-66任一所示氨基酸序列或者与SEQ ID NO:3、7或32-66任一呈现至少91％序列相同性
的氨基酸序列的未修饰的PH20多肽中。
39.权利要求37或38的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是表5所示的氨基酸
置换。
40.权利要求1-39任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20不是由SEQ ID
NO:3、6-66、69、72、856-861、869或870任一所示任何氨基酸序列组成的。
41.权利要求1-40任一项的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换是在具有SEQ ID
NO:3、7、69或72任一所示任何氨基酸序列的未修饰的PH20多肽中，条件是：
(i)其中所述修饰的PH20多肽仅包含单一氨基酸置换，所述置换不相应于参考SEQ ID
NO:3所示氨基酸位置的氨基酸置换V12A、N47A、D111N、E113Q、N131A、R176G、N200A、N219A、E249Q、R252T、N333A或N358A；
(ii)其中所述修饰的PH20多肽仅包含两个氨基酸置换，所述置换不相应于参考SEQ
ID NO:3所示位置的氨基酸置换P13A/L464W、N47A/N131A、N47A/N219A、N131A/N219A或
N333A/N358A；及
(iii)其中所述修饰的PH20多肽仅包含三个氨基酸置换，所述置换不相应于参考SEQ
ID NO:3所示氨基酸位置的氨基酸置换N47A/N131A/N219A。
42.权利要求1-41任一项的修饰的PH20多肽，其中所述多肽是人多肽。
43.权利要求1-42任一项的修饰的PH20多肽，其中所述氨基酸置换不是在相应于参考
SEQ ID NO:3的位置204的位置具有脯氨酸(P)的天然或野生型PH20多肽中。
44.权利要求1-43任一项的修饰的PH20多肽，其包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、
13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、
38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48,49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、
63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、
88、89、90或更多个氨基酸置换。
45.权利要求1-44任一项的修饰的PH20多肽，其是缺少信号序列的成熟PH20多肽。
46.修饰的PH20多肽，其包含SEQ ID NO:73-855任一所示氨基酸序列或者与SEQ ID
NO:73-855任一所示氨基酸序列呈现至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、
96％、97％、98％、99％或更高序列相同性的氨基酸序列。
47.权利要求1-46任一项的修饰的PH20多肽，其在中性pH呈现催化活性。
48.权利要求1-47任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽是在从细胞
中表达时分泌的，且可溶解于上清中。
49.权利要求1-48任一项的修饰的PH20多肽，其是基本上纯化的或分离的。
50.权利要求1-49任一项的修饰的PH20多肽，其通过选自糖基化、唾液酸化、白蛋白
化、法尼基化、羧化、羟基化和磷酸化的修饰方式而修饰。
51.权利要求50的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽是糖基化的，其中所述
多肽包含至少N-乙酰葡糖胺部分，与至少三个天冬酰胺(N)残基的每一个连接。
52.权利要求51的修饰的PH20多肽，其中所述三个天冬酰胺残基相应于SEQ ID NO:3
的氨基酸残基200、333和358。
53.权利要求1-52任一项的修饰的PH20多肽，其通过与聚合物缀合而修饰。
54.权利要求53的修饰的PH20多肽，其中所述聚合物是葡聚糖或PEG。
55.权利要求1-54任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与选自多聚
化结构域、毒素、可检测标记或药物的部分缀合。
56.权利要求55的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与Fc结构域缀合。
57.核酸分子，其编码权利要求1-48任一项的修饰的PH20多肽。
58.载体，其包含权利要求57的核酸分子。
59.权利要求58的载体，其是真核或原核载体。
60.权利要求58或59的载体，其是哺乳动物载体或病毒载体。
61.权利要求60的载体，其是病毒载体，其中所述病毒载体是腺病毒载体、逆转录病毒
载体或者痘苗病毒载体。
62.细胞，其包含权利要求58-61任一项的载体。
63.权利要求62的细胞，其是哺乳动物细胞。
64.权利要求63的细胞，其中所述哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
65.修饰的PH20多肽，其由权利要求62-64任一项的细胞产生。
66.产生修饰的PH20多肽的方法，包括：
将权利要求57的核酸或者权利要求58-61任一项的载体导入能将N-连接的糖部分掺
入多肽的细胞中；
在一定条件下培养所述细胞，其中编码的修饰的PH20多肽由所述细胞产生和分泌；及
回收表达的多肽。
67.权利要求66的方法，其中所述核酸与启动子可操纵地连接。
68.权利要求66或67的方法，其中所述细胞是真核细胞。
69.权利要求66-68任一项的方法，其中所述细胞是哺乳动物细胞。
70.权利要求66-69任一项的方法，其中所述细胞是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
71.药物组合物，其包含权利要求1-56任一项的修饰的PH20多肽。
72.权利要求71的药物组合物，其中所述组合物中修饰的PH20多肽在或在大约2℃至
8℃且包括端点的温度稳定至少1个月，或者在或在大约30℃至42℃且包括端点的温度稳
定至少3天。
73.权利要求71或72的药物组合物，其中所述药物组合物包含药物可接受的赋形剂。
74.权利要求71-73任一项的药物组合物，其用于单剂给予。
75.权利要求71-73任一项的药物组合物，其用于多剂给予。
76.权利要求71-75任一项的药物组合物，其中所述修饰的PH20多肽的浓度是或是大
约0.1μg/mL至100μg/mL、1μg/mL至50μg/mL或者1μg/mL至20μg/mL。
77.权利要求71-76任一项的药物组合物，其中所述修饰的PH20多肽的量是或是
大 约 10U/mL-5000U/mL、50U/mL-4000U/mL、100U/mL-2000U/mL、300U/mL-2000U/mL、600U/mL-2000U/mL或者100U/mL-1000U/mL。
78.权利要求71-77任一项的药物组合物，其中所述组合物的体积是或是大约
0.5mL-50mL、1mL-10mL或者1mL-5mL。
79.权利要求71-78任一项的药物组合物，其包含浓度为低于或大约或为200mM、
180mM、150mM、140mM、130mM、120mM、110mM、100mM、90mM、80mM、70mM、60mM、50mM、40mM、30mM、
25mM、20mM、15mM、10mM、5mM或更低的NaCl。
80.权利要求71-79任一项的药物组合物，其包含浓度为或大约为0.1mM-200mM、
0.1mM-100mM、120mM-200mM、10mM-50mM、10mM-90mM、80mM-200mM、80mM-140mM、50mM-100mM、
80mM-100mM、50mM-80mM、100mM-140mM或120mM-140mM的NaCl。
81.权利要求71-80任一项的药物组合物，其包含抗微生物有效量的防腐剂或者防腐
剂混合物。
82.权利要求81的药物组合物，其中所述防腐剂是酚类防腐剂、非酚类防腐剂或者酚
类防腐剂及非酚类防腐剂。
83.权利要求81或82的药物组合物，其中所述防腐剂选自苯酚、m-甲酚、对羟基苯甲
酸甲酯、苯甲醇、硫柳汞、苯扎氯铵、4-氯-1-丁醇、氯己定二盐酸盐、氯己定二葡糖酸盐、L-苯丙氨酸、EDTA、溴硝丙二醇、醋酸苯汞、甘油、咪脲、氯己定、脱氢醋酸钠、邻甲酚、对甲酚、氯甲酚、溴棕三甲铵、苄索氯铵、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯及其任何组合。
84.权利要求81-83任一项的药物组合物，其中所述组合物含有仅一种防腐剂。
85.权利要求81-83任一项的药物组合物，其中所述组合物含有2、3或4种不同防腐剂
的防腐剂混合物。
86.权利要求71-85任一项的药物组合物，其包含至少一种酚类防腐剂。
87.权利要求86的药物组合物，其中所述防腐剂选自苯酚、间甲酚(m-甲酚)、苯甲醇
和对羟基苯甲酸酯。
88.权利要求87的药物组合物，其中所述防腐剂是对羟基苯甲酸酯，其是对羟基苯甲
酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯。
89.权利要求81-88任一项的药物组合物，其中所述抗微生物有效量是一或多种防
腐剂的总量，以质量浓度(w/v)百分比(％)表示，其为0.05％-0.6％、0.1％-0.4％、
0.1％-0.3％、0.15％-0.325％、0.15％-0.25％、0.1％-0.2％、0.2％-0.3％或者
0.3％-0.4％，包括端点。
90.权利要求71-89任一项的药物组合物，其包含治疗活性剂。
91.权利要求90的药物组合物，其中所述治疗剂与所述组合物配制或者在单独组合物
中。
92.权利要求90或91的药物组合物，其中所述治疗性物质是多肽、蛋白质、核酸、药物、
小分子或者有机分子。
93.权利要求90-92任一项的药物组合物，其中所述治疗活性剂选自化疗剂、止痛剂、
抗炎剂、抗微生物剂、杀阿米巴虫剂、杀毛滴虫剂、抗帕金森剂、抗疟疾剂、抗惊厥剂、抗抑郁剂、及抗关节炎剂、抗真菌剂、抗高血压剂、退热剂、抗寄生虫剂、抗组胺剂、α-肾上腺素能激动剂、α阻断剂、麻醉剂、支气管扩张剂、生物杀灭剂、杀菌剂、抑菌剂、β肾上腺素能阻断剂、钙通道阻断剂、心血管药物、避孕药、减充血剂、利尿剂、抑郁剂、诊断剂、电解剂、催眠药、激素制剂、高血糖制剂、肌肉松弛剂、肌肉收缩剂、眼科用药、拟副交感神经剂、精神兴奋剂、镇静剂、拟交感神经剂、安定剂、尿路用药、阴道制剂、杀病毒剂、维生素制剂、非类固醇抗炎剂、血管紧张素转换酶抑制剂、或者睡眠诱导剂。
94.权利要求90-93任一项的药物组合物，其中所述治疗剂选自抗体、免疫球蛋白、二
膦酸盐、细胞因子、化疗剂、凝血因子和胰岛素。
95.权利要求94的药物组合物，其中所述治疗剂是速效胰岛素。
96.权利要求95的药物组合物，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素或者胰岛素类似
物。
97.权利要求95或96的药物组合物，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素，其是人胰岛
素或猪胰岛素。
98.权利要求95-97任一项的药物组合物，其中：
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:862所示氨基酸序列的A链及具有SEQ ID NO:863
所示氨基酸序列的B链；或者
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置88-108所示氨基酸序列
的A链及具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置25-54所示氨基酸序列的B链。
99.权利要求95或96的药物组合物，其中所述速效胰岛素是选自赖脯胰岛素、门冬胰
岛素或赖谷胰岛素的胰岛素类似物。
100.权利要求99的药物组合物，其中所述胰岛素类似物选自具有SEQ ID NO:862所示
氨基酸序列的A链和具有SEQ NO:865-867任一所示氨基酸序列的B链的胰岛素。
101.权利要求95-100任一项的药物组合物，其中所述速效胰岛素的量是或是大约
10U/mL-1000U/mL、50U/mL-500U/mL、100U/mL-1000U/mL或者500U/mL-1000U/mL，包括端
点。
102.权利要求90-93任一项的药物组合物，其中所述治疗剂选自阿达木单抗、阿加糖
酶β、阿莱法塞、氨苄青霉素、阿那白滞素、抗脊髓灰质炎疫苗、抗胸腺细胞、阿奇霉素、贝卡普勒明、卡泊芬净、头孢唑林、头孢吡肟、头孢替坦、头孢他啶、头孢曲松、西妥昔单抗、西司他丁、克拉维酸、克林霉素、达依泊汀α、达克珠单抗、白喉、白喉抗毒素、白喉类毒素、依法珠单抗、肾上腺素、促红细胞生成素α、依那西普、非格司亭、氟康唑、促卵泡激素、促卵泡素α、促卵泡素β、磷苯妥英、钆双胺、Gadopentetates、加替沙星、格拉默、GM-CSF's、戈舍瑞林、醋酸戈舍瑞林、格拉司琼、流感嗜血杆菌B、氟哌啶醇、肝炎疫苗、甲肝疫苗、乙肝疫苗、替伊莫单抗、Tiuxetans、免疫球蛋白、流感嗜血杆菌疫苗、流感病毒疫苗、英利昔单抗、赖脯胰岛素、75％中性赖脯鱼精蛋白(NPL)/25％赖脯胰岛素、50％中性鱼精蛋白
Hagedorn(NPH)/50％普通胰岛素、70％NPH/30％普通胰岛素；普通胰岛素、NPH胰岛素、
超级胰岛素、特慢胰岛素、和甘精胰岛素、干扰素、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、干扰素α-2a、干扰素α2-b、干扰素Alphacon、干扰素α-n、干扰素β、干扰素β-1a、干扰
素γ、干扰素α-con、碘克沙醇、碘海醇、碘帕醇、碘佛醇、酮咯酸、拉罗尼酶、左氧氟沙星、利多卡因、利奈唑胺、劳拉西泮、麻疹疫苗、麻疹病毒、腮腺炎病毒、麻疹-腮腺炎-风疹病毒疫苗、风疹疫苗、甲羟孕酮、美罗培南、甲泼尼龙、咪达唑仑、吗啡、奥曲肽、奥马珠单抗、昂丹司琼、帕利珠单抗、泮托拉唑、培门冬酶、培非司亭、Peg-干扰素α-2a、Peg-干扰素α-2b、培维索孟、百日咳疫苗、哌拉西林、肺炎球菌疫苗和肺炎球菌缀合物疫苗、异丙嗪、瑞替普酶、生长激素、舒巴坦、舒马普坦、他唑巴坦、替奈普酶、破伤风纯化类毒素、替卡西林、托西莫单抗、曲安西龙、曲安奈德、己曲安奈德、万古霉素、水痘带状疱疹免疫球蛋白、水痘疫苗、其它疫苗、阿仑珠单抗、阿利维A酸、别嘌呤醇、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、砒霜、三氧化二砷、天冬酰胺酶、卡介苗(BCG)疫苗、BCG Live、贝沙罗汀、博来霉素、白消安、静脉内白消安、口服白消安、卡普睾酮、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、卡莫司汀与聚苯丙生、塞来昔布、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、环磷酰胺、阿糖胞苷、阿糖胞苷脂质体、达卡巴嗪、更生霉素、柔红霉素脂质体、柔红霉素、道诺霉素、地尼白介素2、右雷佐生、多西他赛、多柔比星、多柔比星脂质体、丙酸屈他雄酮、Elliott's B溶液、表柔比星、阿法依泊汀、雌氮芥、依托泊苷、磷酸依托泊苷、依托泊苷VP-16s、依西美坦、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、氟维司群、吉西他滨、吉妥珠单抗、奥佐米星、吉妥珠单抗奥佐米星、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、甲磺酸伊马替尼、伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸、左旋咪唑、洛莫司汀、CCNUs、氮芥(Mechlorethamines)、氮芥(Nitrogen mustards)、甲地孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、L-PAMs、巯嘌呤、6-巯嘌呤、美司钠、氨甲喋呤、甲氧沙林、丝裂霉素类、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、诺龙、苯丙酸诺龙、若莫单抗、奥普瑞白介素、奥沙利铂、紫杉醇、帕玛二磷酸、培加酶、喷司他丁、哌泊溴烷、普利霉素、光辉霉素、卟菲尔钠、卟吩姆钠、丙卡巴肼、奎纳克林、拉布立酶、利妥普单抗、沙格司亭、链脲菌素、滑石、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾内酯、硫鸟嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、三亚乙基硫代磷酰胺(噻替派)、托泊替康、托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、尿嘧啶氮芥、戊柔比星、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、唑来膦酸、阿西维辛、阿柔比星、阿考达唑、阿克罗宁、阿多来新、阿地白介素、视黄酸、阿利维A酸、
9-顺式-视黄酸、Alvocidibs、安巴腙、安波霉素、阿美蒽醌、氨鲁米特、安吖啶、阿那昔酮、安西他滨、氨茴霉素、Apaziquones、精美司那、曲林菌素、阿莫司汀、阿扎胞苷、阿扎替派、阿佐霉素、Banoxantrones、Batabulins、巴马司他、贝那昔滨、苯达莫司汀、苯佐替派、比卡鲁胺、比他舍平、比立考达、比生群、Bisnafide Dimesylates、比折来新、硼替佐米、布喹那、溴匹立明、布度钛、放线菌素C、Canertinibs、卡醋胺、卡贝替姆、卡波醌、卡莫氟、卡柔比星、卡折来新、西地芬戈、西马多丁、苯丁酸氮芥、塞奥罗奈、西罗霉素、克兰氟脲、氯法拉滨、克立那托、地西他滨、右尼古地平、右奥马铂、地扎胍宁、地吖醌、Dibrospidiums、地诺孕素、地那林、Disermolides、Dofequidars、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、达佐霉素、依考莫司汀、依达曲沙、Edotecarins、依氟鸟氨酸、依拉克达、依利奈法德、依沙芦星、乙嘧替氟、恩洛铂、恩普氨酯、Enzastaurins、依匹哌啶、依他前列素、厄布洛唑、依索比星、依他硝唑、依托格鲁、氯苯乙嘧胺、依昔舒林、法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、氟甲睾酮、氟西他滨、磷喹酮、福司曲星、福曲他明、加柔比星、加洛他滨、吉罗酚、Gimatecans、吉美嘧啶、格洛沙腙、葡磷酰胺、伊莫福新、伊洛马司他、伊美克、英丙舒凡、Indisulams、双丙氧亚胺醌、白介素、白介素-2s、重组白介素、茚托利辛、碘苄胍、异丙铂、伊索拉定、Ixabepilones、酮曲沙、L-阿拉诺新、兰瑞肽、Lapatinibs、来多蒽琼、亮丙瑞林、亮丙瑞林、来沙骨化醇、利阿唑、洛铂、洛美曲索、法尼醇蛋白转移酶抑制剂、洛索蒽醌、勒托替康、马磷酰胺、甘露舒凡、马立马司他、马索罗酚、美坦辛、氮芥、美仑孕酮、美法仑、美诺立尔、美雄烷、美替辛德、美托咪酯、氯苯氨啶、美妥替哌、米帕、米泼昔芬、米索硝唑、米丁度胺、Mitocarcins、丝裂红素、米托拉酮、米托洁林、米托胍腙、米托马星、米托萘胺、米托喹酮、米托司培、米托唑胺、米伏布林、咪唑立宾、莫法罗汀、莫哌达醇、Mubritinibs、霉酚酸、奈达铂、Neizarabines、奈莫柔比星、硝氨丙吖啶、诺考达唑、诺拉霉素、诺拉曲塞、Nortopixantrones、奥马铂、Ortataxels、奥替拉西、奥昔舒仑、氧芬胂、Patupilones、培得星、培利霉素、Pelitrexols、培美曲塞、溴新斯的明、培洛霉素、培磷酰胺、哌立福辛、Picoplatins、吡奈非特、哌泊舒凡、吡非尼酮、吡罗蒽醌、Pixantrones、Plevitrexeds、普洛美坦、泊非霉素、波尼莫司汀、普罗帕脒、螺丙醇、嘌嘧替派、嘌呤霉素、吡唑呋喃菌素、雷莫司汀、利波腺苷、利曲舒凡、罗谷亚胺、罗喹美克、链黑霉素、Sabarubicins、沙芬戈、沙铂、司铂、司莫司汀、辛曲秦、西左非兰、索布佐生、索拉非尼、Sparfosates、磷乙天冬氨酸、司帕霉素、锗螺胺、螺莫司汀、螺铂、角鲨胺、链黑霉素、链伐立星、磺磷酰胺、磺氯苯脲、Tacedinalines、他利霉素、他莫司汀、Tariquidars、牛磺莫司汀、Tecogalans、替加氟、替洛蒽醌、替莫泊芬、替罗昔隆、硫咪嘌呤、硫咪嘌呤、噻唑羧胺核苷、噻氯咪索、替洛隆、汀考达、噻莫西酸、替拉扎明、Topixantrones、曲贝替定、海鞘素743、曲托龙、曲西立滨、曲洛司坦、三甲曲沙、Triplatin Tetranitrates、曲普瑞林、曲磷胺、妥布氯唑、乌苯美司、乌瑞替派、伐司朴达、伐普肽、维替泊芬、长春碱、长春地辛、长春匹定、长春氟宁、长春米特、长春甘酯、长春西醇、长春罗新、长春罗定、长春曲醇、长春利定、伏氯唑、黄链霉素A、胍甲环素、折尼铂、亚苄维C(2H)、净司他丁、佐柔比星、Zosuquidars、乙酰唑胺、阿昔洛韦、胆影酸、阿拉曲沙星、阿芬太尼、变应原浸出物、α1-蛋白酶抑制剂、前列地尔、阿米卡星、氨基酸、氨基己酸、氨茶碱、阿米替林、异戊巴比妥、氨力农、镇痛药、抗-脊髓灰质炎疫苗、抗狂犬病血清、抗破伤风免疫球蛋白、破伤风疫苗、抗凝血酶III、抗蛇毒血清、阿加曲班、精氨酸、抗坏血酸、阿替洛尔、阿曲库铵、阿托品、金硫葡糖、硫唑嘌呤、氨曲南、杆菌肽、巴氯芬、巴利昔单抗、苯甲酸、苯扎托品、倍他米松、生物素、比伐卢定、肉毒抗毒素、溴苄铵、布美他尼、布比卡因、丁丙诺啡、布托啡诺、降钙素、骨化三醇、钙、卷曲霉素、卡波前列素、肉碱、头孢孟多、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑肟、头孢呋辛、氯霉素、氯普鲁卡因、氯喹、氯噻嗪、氯丙嗪、硫酸软骨素、绒毛膜促性腺激素α、铬、西多福韦、西咪替丁、环丙沙星、顺阿曲库铵、可乐定、可待因、秋水仙碱、粘菌素、胶原、Corticorelin ovine triflutates、促皮质素、二十四肽促皮质素、氰钴胺、环孢菌素、半胱氨酸、达昔单抗、达福普汀、达肝素、达那肝素、丹曲林、去铁胺、去氨加压素、地塞米松、右美托咪定、右泛醇、右旋糖酐、右旋糖酐铁、泛影酸、地西泮、二氮嗪、双环维林、Digibinds、地高辛、双氢麦角胺、地尔硫卓、苯海拉明、双嘧达莫、多巴酚丁胺、多巴胺、多沙氯铵、多沙普仑、度骨化醇、多西环素、氟哌利多、二羟丙茶碱、依地酸、依酚氯铵、依那普利拉、麻黄碱、依前列醇、麦角钙化醇、麦角新碱、厄他培南、红霉素、艾司洛尔、雌二醇、Estrogenics、依他尼酸、乙醇胺、乙醇、乙碘油、羟乙磷酸、依托咪酯、法莫替丁、非诺多泮、芬太尼、氟马西尼、荧光素、氟奋乃静、叶酸、甲吡唑、福米韦生、磺达肝素、膦甲酸、磷苯妥英、呋塞米、钆特醇、钆弗塞胺、更昔洛韦、庆大霉素、胰高血糖素、葡萄糖、甘氨酸、格隆溴铵、戈那瑞林、绒毛膜促性腺激素、嗜血杆菌B多糖、氯化血红素、Herbals、组胺、肼苯哒嗪、氢化可的松、氢吗啡酮、羟钴胺、羟嗪、莨菪碱、伊布利特、伊米苷酶、靛胭脂、吲哚美辛、碘化物、碘普胺、碘拉酸、碘克沙酸、碘昔兰、异烟肼、异丙肾上腺素、日本脑炎疫苗、卡那霉素、氯胺酮、拉贝洛尔、来匹卢定、左布比卡因、左甲状腺素、林可霉素、碘塞罗宁、促黄体激素、莱姆病疫苗、锰福地吡、Manthtols、脑膜炎球菌多糖疫苗、哌替啶、甲哌卡因、美索达嗪、间羟胺、美沙酮、美索巴莫、美索比妥、甲基多巴类、甲基麦角新碱、甲氧氯普胺、美托洛尔、甲硝唑、米诺环素、米伐克龙、鱼肝油酸、莫西沙星、莫罗单抗-CD3、麦考酚酸吗乙酯、萘夫西林、纳布啡、纳美芬、纳洛酮、新斯的明、烟酰胺、尼卡地平、硝酸甘油、硝普钠、去甲肾上腺素、奥芬那君、苯唑西林、羟吗啡酮、土霉素、缩宫素、潘可龙、泛醇、泛酸、罂粟碱、PEG干扰素α2A、青霉素G、喷他脒、喷他佐辛、戊巴比妥、全氟丙烷、奋乃静、苯巴比妥、酚妥拉明、去氧肾上腺素、苯妥英、毒扁豆碱、植物甲萘醌、多粘菌素、解磷定、丙胺卡因、普鲁卡因胺、普鲁卡因、丙氯拉嗪、孕酮、普萘洛尔、吡啶斯的明氢氧化物、维生素B6、奎尼丁、奎奴普丁、狂犬病免疫球蛋白、狂犬病疫苗、雷尼替丁、瑞芬太尼、核黄素、利福平、罗哌卡因、钐、东莨菪碱、硒、舍莫瑞林、辛卡利特、人蛋氨生长素、壮观霉素、链激酶、链霉素、琥珀酰胆碱、舒芬太尼、磺胺甲噁唑、他罗利姆、特布他林、特立帕肽、睾酮、破伤风抗毒素、丁卡因、十四烷基硫酸盐/酯、茶碱、硫胺素、硫乙拉嗪、硫喷妥、促甲状腺激素、亭扎肝素、替罗非班、妥布霉素、妥拉唑啉、甲苯磺丁脲、托拉塞米、氨甲环酸、曲罗尼尔、三氟拉嗪、曲美苄胺、甲氧苄啶、氨丁三醇、结核菌素、伤寒疫苗、尿促卵泡素、尿激酶、丙戊酸、加压素、维库溴铵、维拉帕米、伏立康唑、华法林、黄热病疫苗、齐多夫定、锌、盐酸齐拉西酮、阿克拉霉素、放线菌素、阿霉素、偶氮丝氨酸、6-氮尿苷、嗜癌素、色霉素、二甲叶酸、6-叠氮-5-氧-L-正亮氨酸、依诺他滨、氟尿苷、橄榄霉素、吡柔比星、吡曲克辛、蝶罗呤、替加氟、杀结核菌素、阿替普酶、阿西莫单抗、贝伐珠单抗、A型肉毒菌毒素、B型肉毒菌毒素、卡罗单抗喷地肽、达克珠单抗、阿法链道酶、替加色罗α、戊酸印西洛马、碘-131；抗生素物质；血管发生抑制剂；抗白内障和抗糖尿病视网膜病变药物；碳酸酐酶抑制剂；瞳孔放大剂；光动力治疗剂；前列腺素类似物；生长因子；抗肿瘤药物；抗代谢物；抗病毒药物；杀阿米巴剂和抗原生动物剂；抗结核药和抗麻风药；抗毒素和抗蛇毒素；抗血友病因子，抗抑制剂凝血复合物，抗凝血酶III，凝血因子V，凝血因子IX，血浆蛋白级分，von Willebrand因子；抗血小板制剂，集落刺激因子(CSF)；红细胞生成刺激物；止血剂和白蛋白；免疫球蛋白；凝血酶抑制剂；抗凝血剂；类固醇抗炎药物，选自阿氯米松、阿尔孕酮、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、氯泼尼醇、皮质酮、可的松、可的伐唑、地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龙、二氟泼尼酯、甘草次酸、氟扎可特、氟二氯松、氟米松、氟尼缩松、肤轻松、醋酸氟轻松、氟可丁、氟可龙、氟米龙、氟培龙、氟泼尼定、氟泼尼龙、丙酮缩氟氢羟龙、氟替卡松、福莫可他、氯氟舒松、卤倍他索、卤米松、卤泼尼松、氢可他酯、氢化可的松、氯替泼诺碳酸乙酯、马泼尼酮、甲羟松、甲泼尼松、甲泼尼龙、糠酸莫米松、帕拉米松、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松、强的松龙戊酸酯、泼尼立定、利美索龙、替可的松和曲安西龙；docosenoid，前列腺素类药物，前列腺素类似物，抗前列腺素和前列腺素前体；缩瞳剂，胆碱能药和抗胆碱酯酶；及抗变态反应药。
103.权利要求71-102任一项的药物组合物，其是液体组合物。
104.一种共配制物，其包含：
治疗有效量的权利要求1-56任一项的修饰的PH20多肽；及
治疗有效量的速效胰岛素。
105.一种共配制物，其包含治疗有效量的权利要求1-20任一项的修饰的PH20多肽；
及
治疗有效量的速效胰岛素。
106.权利要求104或105的共配制物，其中所述配制物中修饰的PH20多肽在或在大
约2℃-8℃且包括端点的温度稳定至少1个月，或者在或在大约30℃-42℃且包括端点的
温度稳定至少3天。
107.权利要求104-106任一项的共配制物，其中所述修饰的PH20多肽的量是或是大约
100U/mL-1000U/mL、200U/mL-800U/mL或者400U/mL-800U/mL。
108.权利要求104-107任一项的共配制物，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素或者胰
岛素类似物。
109.权利要求104-108任一项的共配制物，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素，其是
人胰岛素或猪胰岛素。
110.权利要求104-109任一项的共配制物，其中：
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:862所示氨基酸序列的A链和具有SEQ ID NO:863
所示氨基酸序列的B链；或者
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置88-108所示氨基酸序列
的A链和具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置25-54所示氨基酸序列的B链。
111.权利要求104-108任一项的共配制物，其中所述速效胰岛素是选自赖脯胰岛素、
门冬胰岛素和赖谷胰岛素的胰岛素类似物。
112.权利要求111的共配制物，其中所述胰岛素类似物选自具有SEQ ID NO:862所示
氨基酸序列的A链和具有SEQ NO:865-867任一所示氨基酸序列的B链的胰岛素。
113.权利要求104-112任一项的共配制物，其中速效胰岛素的量是或是大约10U/
mL-1000U/mL、50U/mL-500U/mL、100U/mL-1000U/mL或者500U/mL-1000U/mL，包括端点。
114.权利要求104-113任一项的共配制物，其pH为或为大约7.0-7.6。
115.权利要求104-114任一项的共配制物，其包含浓度为或为大约0.1mM-200mM、
0.1mM-100mM、120mM-200mM、10mM-50mM、10mM-90mM、80mM-200mM、80mM-140mM、50mM-100mM、
80mM-100mM、50mM-80mM、100mM-140mM或120mM-140mM的NaCl。
116.权利要求104-115任一项的共配制物，其包含抗微生物有效量的至少一种防腐
剂。
117.权利要求116的共配制物，其中所述抗微生物有效量是一或多种防腐剂的总
量，以质量浓度(w/v)百分比(％)表示，为0.05％-0.6％、0.1％-0.4％、0.1％-0.3％、
0.15％-0.325％、0.15％-0.25％、0.1％-0.2％、0.2％-0.3％或者0.3％-0.4％，包括端
点。
118.权利要求116或117的共配制物，其中所述防腐剂是酚类防腐剂、非酚类防腐剂或
者酚类防腐剂及非酚类防腐剂。
119.权利要求116-118任一项的共配制物，其中所述防腐剂选自苯酚、m-甲酚、对羟基
苯甲酸甲酯、苯甲醇、硫柳汞、苯扎氯铵、4-氯-1-丁醇、氯己定二盐酸盐、氯己定二葡糖酸盐、L-苯丙氨酸、EDTA、溴硝丙二醇、醋酸苯汞、甘油、咪脲、氯己定、脱氢醋酸钠、邻甲酚、对甲酚、氯甲酚、溴棕三甲铵、苄索氯铵、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯及其任意组合。
120.权利要求116-119任一项的共配制物，其中所述组合物含有仅一种防腐剂。
121.权利要求116-119任一项的共配制物，其中所述组合物含有2、3或4种不同防腐
剂的防腐剂混合物。
122.权利要求104-121任一项的共配制物，其包含至少一种酚类防腐剂。
123.权利要求122的共配制物，其中所述防腐剂选自苯酚、间甲酚(m-甲酚)、苯甲醇
和对羟基苯甲酸酯。
124.权利要求123的共配制物，其中所述防腐剂是对羟基苯甲酸酯，其是对羟基苯甲
酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯。
125.权利要求104-124任一项的共配制物，其包含表面活性剂，所述表面活性剂的量
以配制物中质量浓度(w/v)百分比％表示，为至少或至少大约0.001％、0.005％、0.01％、
0.015％、0.02％、0.025％、0.03％、0.035％、0.04％、0.045％、0.05％、0.055％、0.06％、
0.065％、0.07％.0.08％或0.9％。
126.权利要求125的共配制物，其中所述表面活性剂选自聚丙二醇、聚乙二醇、甘油、
山梨糖醇、泊洛沙姆和聚山梨酯。
127.权利要求126的共配制物，其中所述表面活性剂选自泊洛沙姆188、聚山梨酯20
和聚山梨酯80。
128.权利要求104-127任一项的共配制物，其包含缓冲剂，所述缓冲剂是非金属结合
剂或者是金属结合剂。
129.权利要求128的共配制物，其中所述缓冲剂选自Tris、组氨酸、磷酸盐和柠檬酸盐
缓冲剂。
130.权利要求128或129的共配制物，其中所述缓冲剂的浓度是或大约是1mM-100mM、
10mM-50mM或者20mM-40mM。
131.权利要求104-130任一项的共配制物，其包含浓度低于60mM、低于55mM、低于
50mM、低于45mM、低于40mM、低于35mM、低于30mM、低于25mM、低于20mM、低于15mM、低于
10mM的甘油。
132.权利要求104-131任一项的共配制物，其包含抗氧化剂。
133.权利要求132的共配制物，其中所述抗氧化剂选自半胱氨酸、色氨酸和甲硫氨酸。
134.权利要求132或133的共配制物，其中所述抗氧化剂的浓度是或大约是
2mM-50mM、5mM-40mM、5mM-20mM或者10mM-20mM，包括端点。
135.权利要求104-134任一项的共配制物，其包含锌。
136.权利要求135的共配制物，其中锌的浓度是或大约是0.001-0.1mg/100单位胰岛
素(mg/100U)、0.001-0.05mg/100U或者0.01-0.05mg/100U。
137.闭环系统，其包含权利要求105-136任一项的共配制物。
138.胰岛素泵，其包含权利要求105-136任一项的共配制物。
139.胰岛素笔，其包含权利要求105-136任一项的共配制物。
140.一种治疗乙酰透明质酸相关疾病或病症的方法，所述方法包括给予对象权利要求
1-56任一项的修饰的PH20多肽或者权利要求71-103任一项的药物组合物。
141.权利要求140的方法，其中所述乙酰透明质酸相关疾病或病症是炎性疾病或者肿
瘤或癌症。
142.权利要求141的方法，其中所述肿瘤是实体肿瘤。
143.权利要求140-142任一项的方法，其中所述乙酰透明质酸相关疾病或病症选自晚
期癌症、转移癌症和未分化癌症。
144.权利要求140-143任一项的方法，其中所述乙酰透明质酸相关疾病或病症选自
卵巢癌、原位癌(ISC)、鳞状细胞癌(SCC)、前列腺癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和结肠癌。
145.治疗糖尿病的方法，所述方法包括给予对象权利要求95-101任一项的药物组合
物或者权利要求104-136任一项的共配制物。
146.权利要求145的方法，其中所述糖尿病选自1型糖尿病、2型糖尿病或者妊娠糖尿
病。
147.一种增加治疗剂输送至对象的方法，包括：
给予对象权利要求1-56任一项的修饰的PH20多肽、权利要求71-103任一项的药物组
合物或者权利要求104-136任一项的共配制物；及
给予治疗剂。
148.权利要求147的方法，其中所述给予是皮下给予。
149.权利要求147或148的方法，其中所述修饰的PH20多肽或包含修饰的PH20多肽
的组合物是在给予所述治疗剂之前、同时、间歇或随后给予的。
150.权利要求147-149任一项的方法，其中所述治疗剂是多肽、蛋白质、核酸、药物、小
分子或有机分子。
151.权利要求147-150任一项的方法，其中所述治疗剂选自化疗剂、止痛剂、抗炎剂、
抗微生物剂、杀阿米巴虫剂、杀毛滴虫剂、抗帕金森剂、抗疟疾剂、抗惊厥剂、抗抑郁剂、及抗关节炎剂、抗真菌剂、抗高血压剂、退热剂、抗寄生虫剂、抗组胺剂、α-肾上腺素能激动剂、α阻断剂、麻醉剂、支气管扩张剂、生物杀灭剂、杀菌剂、抑菌剂、β肾上腺素能阻断剂、钙通道阻断剂、心血管药物、避孕药、减充血剂、利尿剂、抑郁剂、诊断剂、电解剂、催眠药、激素制剂、高血糖制剂、肌肉松弛剂、肌肉收缩剂、眼科用药、拟副交感神经剂、精神兴奋剂、镇静剂、拟交感神经剂、安定剂、尿路用药、阴道制剂、杀病毒剂、维生素制剂、非类固醇抗炎剂、血管紧张素转换酶抑制剂、或者睡眠诱导剂。
152.权利要求147-151任一项的方法，其中所述治疗剂选自抗体、免疫球蛋白、二膦酸
盐、细胞因子、化疗剂、凝血因子和胰岛素。
153.权利要求152的方法，其中所述治疗剂是胰岛素，其是速效胰岛素。
154.权利要求153的方法，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素或者胰岛素类似物。
155.权利要求153或154的方法，其中所述速效胰岛素是普通胰岛素，其是人胰岛素或
者猪胰岛素。
156.权利要求153-155任一项的方法，其中：
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:862所示氨基酸序列的A链和具有SEQ ID NO:863
所示氨基酸序列的B链；或者
所述速效胰岛素包含具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置88-108所示氨基酸序列
的A链和具有SEQ ID NO:864的氨基酸残基位置25-54所示氨基酸序列的B链。
157.权利要求153或154的方法，其中所述速效胰岛素是选自赖脯胰岛素、门冬胰岛素
或赖谷胰岛素的胰岛素类似物。
158.权利要求157的方法，其中所述胰岛素类似物包含具有SEQ ID NO:862所示氨基
酸序列的A链和选自SEQ NO:865-867任一所示氨基酸序列的B链。
159.权利要求147-151任一项的方法，其中所述治疗剂选自阿达木单抗、阿加糖酶
β、阿莱法塞、氨苄青霉素、阿那白滞素、抗脊髓灰质炎疫苗、抗胸腺细胞、阿奇霉素、贝卡普勒明、卡泊芬净、头孢唑林、头孢吡肟、头孢替坦、头孢他啶、头孢曲松、西妥昔单抗、西司他丁、克拉维酸、克林霉素、达依泊汀α、达克珠单抗、白喉、白喉抗毒素、白喉类毒素、依法珠单抗、肾上腺素、促红细胞生成素α、依那西普、非格司亭、氟康唑、促卵泡激素、促卵泡素α、促卵泡素β、磷苯妥英、钆双胺、Gadopentetates、加替沙星、格拉默、GM-CSF's、戈舍瑞林、醋酸戈舍瑞林、格拉司琼、流感嗜血杆菌B、氟哌啶醇、肝炎疫苗、甲肝疫苗、乙肝疫苗、替伊莫单抗、Tiuxetans、免疫球蛋白、流感嗜血杆菌疫苗、流感病毒疫苗、英利昔单抗、赖脯胰岛素、75％中性赖脯鱼精蛋白(NPL)/25％赖脯胰岛素、50％中性鱼精蛋白
Hagedorn(NPH)/50％普通胰岛素、70％NPH/30％普通胰岛素；普通胰岛素、NPH胰岛素、
超级胰岛素、特慢胰岛素、和甘精胰岛素、干扰素、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、干扰素α-2a、干扰素α2-b、干扰素Alphacon、干扰素α-n、干扰素β、干扰素β-1a、干扰
素γ、干扰素α-con、碘克沙醇、碘海醇、碘帕醇、碘佛醇、酮咯酸、拉罗尼酶、左氧氟沙星、利多卡因、利奈唑胺、劳拉西泮、麻疹疫苗、麻疹病毒、腮腺炎病毒、麻疹-腮腺炎-风疹病毒疫苗、风疹疫苗、甲羟孕酮、美罗培南、甲泼尼龙、咪达唑仑、吗啡、奥曲肽、奥马珠单抗、昂丹司琼、帕利珠单抗、泮托拉唑、培门冬酶、培非司亭、Peg-干扰素α-2a、Peg-干扰素α-2b、培维索孟、百日咳疫苗、哌拉西林、肺炎球菌疫苗和肺炎球菌缀合物疫苗、异丙嗪、瑞替普酶、生长激素、舒巴坦、舒马普坦、他唑巴坦、替奈普酶、破伤风纯化类毒素、替卡西林、托西莫单抗、曲安西龙、曲安奈德、己曲安奈德、万古霉素、水痘带状疱疹免疫球蛋白、水痘疫苗、其它疫苗、阿仑珠单抗、阿利维A酸、别嘌呤醇、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、砒霜、三氧化二砷、天冬酰胺酶、卡介苗(BCG)疫苗、BCG Live、贝沙罗汀、博来霉素、白消安、静脉内白消安、口服白消安、卡普睾酮、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、卡莫司汀与聚苯丙生、塞来昔布、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、环磷酰胺、阿糖胞苷、阿糖胞苷脂质体、达卡巴嗪、更生霉素、柔红霉素脂质体、柔红霉素、道诺霉素、地尼白介素2、右雷佐生、多西他赛、多柔比星、多柔比星脂质体、丙酸屈他雄酮、Elliott's B溶液、表柔比星、阿法依泊汀、雌氮芥、依托泊苷、磷酸依托泊苷、依托泊苷VP-16s、依西美坦、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、氟维司群、吉西他滨、吉妥珠单抗、奥佐米星、吉妥珠单抗奥佐米星、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、甲磺酸伊马替尼、伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸、左旋咪唑、洛莫司汀、CCNUs、氮芥(Mechlorethamines)、氮芥(Nitrogen mustards)、甲地孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、L-PAMs、巯嘌呤、6-巯嘌呤、美司钠、氨甲喋呤、甲氧沙林、丝裂霉素类、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、诺龙、苯丙酸诺龙、若莫单抗、奥普瑞白介素、奥沙利铂、紫杉醇、帕玛二磷酸、培加酶、喷司他丁、哌泊溴烷、普利霉素、光辉霉素、卟菲尔钠、卟吩姆钠、丙卡巴肼、奎纳克林、拉布立酶、利妥普单抗、沙格司亭、链脲菌素、滑石、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾内酯、硫鸟嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、三亚乙基硫代磷酰胺(噻替派)、托泊替康、托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、尿嘧啶氮芥、戊柔比星、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、唑来膦酸、阿西维辛、阿柔比星、阿考达唑、阿克罗宁、阿多来新、阿地白介素、视黄酸、阿利维A酸、
9-顺式-视黄酸、Alvocidibs、安巴腙、安波霉素、阿美蒽醌、氨鲁米特、安吖啶、阿那昔酮、安西他滨、氨茴霉素、Apaziquones、精美司那、曲林菌素、阿莫司汀、阿扎胞苷、阿扎替派、阿佐霉素、Banoxantrones、Batabulins、巴马司他、贝那昔滨、苯达莫司汀、苯佐替派、比卡鲁胺、比他舍平、比立考达、比生群、Bisnafide Dimesylates、比折来新、硼替佐米、布喹那、溴匹立明、布度钛、放线菌素C、Canertinibs、卡醋胺、卡贝替姆、卡波醌、卡莫氟、卡柔比星、卡折来新、西地芬戈、西马多丁、苯丁酸氮芥、塞奥罗奈、西罗霉素、克兰氟脲、氯法拉滨、克立那托、地西他滨、右尼古地平、右奥马铂、地扎胍宁、地吖醌、Dibrospidiums、地诺孕素、地那林、Disermolides、Dofequidars、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、达佐霉素、依考莫司汀、依达曲沙、Edotecarins、依氟鸟氨酸、依拉克达、依利奈法德、依沙芦星、乙嘧替氟、恩洛铂、恩普氨酯、Enzastaurins、依匹哌啶、依他前列素、厄布洛唑、依索比星、依他硝唑、依托格鲁、氯苯乙嘧胺、依昔舒林、法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、氟甲睾酮、氟西他滨、磷喹酮、福司曲星、福曲他明、加柔比星、加洛他滨、吉罗酚、Gimatecans、吉美嘧啶、格洛沙腙、葡磷酰胺、伊莫福新、伊洛马司他、伊美克、英丙舒凡、Indisulams、双丙氧亚胺醌、白介素、白介素-2s、重组白介素、茚托利辛、碘苄胍、异丙铂、伊索拉定、Ixabepilones、酮曲沙、L-阿拉诺新、兰瑞肽、Lapatinibs、来多蒽琼、亮丙瑞林、亮丙瑞林、来沙骨化醇、利阿唑、洛铂、洛美曲索、法尼醇蛋白转移酶抑制剂、洛索蒽醌、勒托替康、马磷酰胺、甘露舒凡、马立马司他、马索罗酚、美坦辛、氮芥、美仑孕酮、美法仑、美诺立尔、美雄烷、美替辛德、美托咪酯、氯苯氨啶、美妥替哌、米帕、米泼昔芬、米索硝唑、米丁度胺、Mitocarcins、丝裂红素、米托拉酮、米托洁林、米托胍腙、米托马星、米托萘胺、米托喹酮、米托司培、米托唑胺、米伏布林、咪唑立宾、莫法罗汀、莫哌达醇、Mubritinibs、霉酚酸、奈达铂、Neizarabines、奈莫柔比星、硝氨丙吖啶、诺考达唑、诺拉霉素、诺拉曲塞、Nortopixantrones、奥马铂、Ortataxels、奥替拉西、奥昔舒仑、氧芬胂、Patupilones、培得星、培利霉素、Pelitrexols、培美曲塞、溴新斯的明、培洛霉素、培磷酰胺、哌立福辛、Picoplatins、吡奈非特、哌泊舒凡、吡非尼酮、吡罗蒽醌、Pixantrones、Plevitrexeds、普洛美坦、泊非霉素、波尼莫司汀、普罗帕脒、螺丙醇、嘌嘧替派、嘌呤霉素、吡唑呋喃菌素、雷莫司汀、利波腺苷、利曲舒凡、罗谷亚胺、罗喹美克、链黑霉素、Sabarubicins、沙芬戈、沙铂、司铂、司莫司汀、辛曲秦、西左非兰、索布佐生、索拉非尼、Sparfosates、磷乙天冬氨酸、司帕霉素、锗螺胺、螺莫司汀、螺铂、角鲨胺、链黑霉素、链伐立星、磺磷酰胺、磺氯苯脲、Tacedinalines、他利霉素、他莫司汀、Tariquidars、牛磺莫司汀、Tecogalans、替加氟、替洛蒽醌、替莫泊芬、替罗昔隆、硫咪嘌呤、硫咪嘌呤、噻唑羧胺核苷、噻氯咪索、替洛隆、汀考达、噻莫西酸、替拉扎明、Topixantrones、曲贝替定、海鞘素743、曲托龙、曲西立滨、曲洛司坦、三甲曲沙、Triplatin Tetranitrates、曲普瑞林、曲磷胺、妥布氯唑、乌苯美司、乌瑞替派、伐司朴达、伐普肽、维替泊芬、长春碱、长春地辛、长春匹定、长春氟宁、长春米特、长春甘酯、长春西醇、长春罗新、长春罗定、长春曲醇、长春利定、伏氯唑、黄链霉素A、胍甲环素、折尼铂、亚苄维C(2H)、净司他丁、佐柔比星、Zosuquidars、乙酰唑胺、阿昔洛韦、胆影酸、阿拉曲沙星、阿芬太尼、变应原浸出物、α1-蛋白酶抑制剂、前列地尔、阿米卡星、氨基酸、氨基己酸、氨茶碱、阿米替林、异戊巴比妥、氨力农、镇痛药、抗-脊髓灰质炎疫苗、抗狂犬病血清、抗破伤风免疫球蛋白、破伤风疫苗、抗凝血酶III、抗蛇毒血清、阿加曲班、精氨酸、抗坏血酸、阿替洛尔、阿曲库铵、阿托品、金硫葡糖、硫唑嘌呤、氨曲南、杆菌肽、巴氯芬、巴利昔单抗、苯甲酸、苯扎托品、倍他米松、生物素、比伐卢定、肉毒抗毒素、溴苄铵、布美他尼、布比卡因、丁丙诺啡、布托啡诺、降钙素、骨化三醇、钙、卷曲霉素、卡波前列素、肉碱、头孢孟多、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑肟、头孢呋辛、氯霉素、氯普鲁卡因、氯喹、氯噻嗪、氯丙嗪、硫酸软骨素、绒毛膜促性腺激素α、铬、西多福韦、西咪替丁、环丙沙星、顺阿曲库铵、可乐定、可待因、秋水仙碱、粘菌素、胶原、Corticorelin ovine triflutates、促皮质素、二十四肽促皮质素、氰钴胺、环孢菌素、半胱氨酸、达昔单抗、达福普汀、达肝素、达那肝素、丹曲林、去铁胺、去氨加压素、地塞米松、右美托咪定、右泛醇、右旋糖酐、右旋糖酐铁、泛影酸、地西泮、二氮嗪、双环维林、Digibinds、地高辛、双氢麦角胺、地尔硫卓、苯海拉明、双嘧达莫、多巴酚丁胺、多巴胺、多沙氯铵、多沙普仑、度骨化醇、多西环素、氟哌利多、二羟丙茶碱、依地酸、依酚氯铵、依那普利拉、麻黄碱、依前列醇、麦角钙化醇、麦角新碱、厄他培南、红霉素、艾司洛尔、雌二醇、Estrogenics、依他尼酸、乙醇胺、乙醇、乙碘油、羟乙磷酸、依托咪酯、法莫替丁、非诺多泮、芬太尼、氟马西尼、荧光素、氟奋乃静、叶酸、甲吡唑、福米韦生、磺达肝素、膦甲酸、磷苯妥英、呋塞米、钆特醇、钆弗塞胺、更昔洛韦、庆大霉素、胰高血糖素、葡萄糖、甘氨酸、格隆溴铵、戈那瑞林、绒毛膜促性腺激素、嗜血杆菌B多糖、氯化血红素、Herbals、组胺、肼苯哒嗪、氢化可的松、氢吗啡酮、羟钴胺、羟嗪、莨菪碱、伊布利特、伊米苷酶、靛胭脂、吲哚美辛、碘化物、碘普胺、碘拉酸、碘克沙酸、碘昔兰、异烟肼、异丙肾上腺素、日本脑炎疫苗、卡那霉素、氯胺酮、拉贝洛尔、来匹卢定、左布比卡因、左甲状腺素、林可霉素、碘塞罗宁、促黄体激素、莱姆病疫苗、锰福地吡、Manthtols、脑膜炎球菌多糖疫苗、哌替啶、甲哌卡因、美索达嗪、间羟胺、美沙酮、美索巴莫、美索比妥、甲基多巴类、甲基麦角新碱、甲氧氯普胺、美托洛尔、甲硝唑、米诺环素、米伐克龙、鱼肝油酸、莫西沙星、莫罗单抗-CD3、麦考酚酸吗乙酯、萘夫西林、纳布啡、纳美芬、纳洛酮、新斯的明、烟酰胺、尼卡地平、硝酸甘油、硝普钠、去甲肾上腺素、奥芬那君、苯唑西林、羟吗啡酮、土霉素、缩宫素、潘可龙、泛醇、泛酸、罂粟碱、PEG干扰素α2A、青霉素G、喷他脒、喷他佐辛、戊巴比妥、全氟丙烷、奋乃静、苯巴比妥、酚妥拉明、去氧肾上腺素、苯妥英、毒扁豆碱、植物甲萘醌、多粘菌素、解磷定、丙胺卡因、普鲁卡因胺、普鲁卡因、丙氯拉嗪、孕酮、普萘洛尔、吡啶斯的明氢氧化物、维生素B6、奎尼丁、奎奴普丁、狂犬病免疫球蛋白、狂犬病疫苗、雷尼替丁、瑞芬太尼、核黄素、利福平、罗哌卡因、钐、东莨菪碱、硒、舍莫瑞林、辛卡利特、人蛋氨生长素、壮观霉素、链激酶、链霉素、琥珀酰胆碱、舒芬太尼、磺胺甲噁唑、他罗利姆、特布他林、特立帕肽、睾酮、破伤风抗毒素、丁卡因、十四烷基硫酸盐/酯、茶碱、硫胺素、硫乙拉嗪、硫喷妥、促甲状腺激素、亭扎肝素、替罗非班、妥布霉素、妥拉唑啉、甲苯磺丁脲、托拉塞米、氨甲环酸、曲罗尼尔、三氟拉嗪、曲美苄胺、甲氧苄啶、氨丁三醇、结核菌素、伤寒疫苗、尿促卵泡素、尿激酶、丙戊酸、加压素、维库溴铵、维拉帕米、伏立康唑、华法林、黄热病疫苗、齐多夫定、锌、盐酸齐拉西酮、阿克拉霉素、放线菌素、阿霉素、偶氮丝氨酸、6-氮尿苷、嗜癌素、色霉素、二甲叶酸、6-叠氮-5-氧-L-正亮氨酸、依诺他滨、氟尿苷、橄榄霉素、吡柔比星、吡曲克辛、蝶罗呤、替加氟、杀结核菌素、阿替普酶、阿西莫单抗、贝伐珠单抗、A型肉毒菌毒素、B型肉毒菌毒素、卡罗单抗喷地肽、达克珠单抗、阿法链道酶、替加色罗α、戊酸印西洛马、碘-131；抗生素物质；血管发生抑制剂；抗白内障和抗糖尿病视网膜病变药物；碳酸酐酶抑制剂；瞳孔放大剂；光动力治疗剂；前列腺素类似物；生长因子；抗肿瘤药物；抗代谢物；抗病毒药物；杀阿米巴剂和抗原生动物剂；抗结核药和抗麻风药；抗毒素和抗蛇毒素；抗血友病因子，抗抑制剂凝血复合物，抗凝血酶III，凝血因子V，凝血因子IX，血浆蛋白级分，von Willebrand因子；抗血小板制剂，集落刺激因子(CSF)；红细胞生成刺激物；止血剂和白蛋白；免疫球蛋白；凝血酶抑制剂；抗凝血剂；类固醇抗炎药物，选自阿氯米松、阿尔孕酮、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、氯泼尼醇、皮质酮、可的松、可的伐唑、地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龙、二氟泼尼酯、甘草次酸、氟扎可特、氟二氯松、氟米松、氟尼缩松、肤轻松、醋酸氟轻松、氟可丁、氟可龙、氟米龙、氟培龙、氟泼尼定、氟泼尼龙、丙酮缩氟氢羟龙、氟替卡松、福莫可他、氯氟舒松、卤倍他索、卤米松、卤泼尼松、氢可他酯、氢化可的松、氯替泼诺碳酸乙酯、马泼尼酮、甲羟松、甲泼尼松、甲泼尼龙、糠酸莫米松、帕拉米松、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松、强的松龙戊酸酯、泼尼立定、利美索龙、替可的松和曲安西龙；docosenoid，前列腺素类药物，前列腺素类似物，抗前列腺素和前列腺素前体；缩瞳剂，胆碱能药和抗胆碱酯酶；及抗变态反应药。
160.治疗糖胺聚糖过量、治疗肿瘤、治疗糖胺聚糖在脑中积聚、治疗心血管疾病、治疗
眼科病症、治疗肺部疾病、增加化疗剂渗透进实体肿瘤中、治疗蜂窝组织、治疗增生性病症、或者增加药物和其它治疗剂的生物利用度的方法，包括给予对象权利要求1-56任一项的
修饰的PH20多肽或者权利要求71-103任一项的药物组合物。
161.权利要求71-103任一项的药物组合物，其用于治疗乙酰透明质酸相关疾病或病
症。
162.权利要求95-101任一项的药物组合物或权利要求104-136任一项的共配制物，其
用于治疗糖尿病。
163.权利要求71-103任一项的药物组合物，其用于将治疗剂输送至对象。
164.权利要求71-103任一项的药物组合物，其用于治疗糖胺聚糖过量、治疗肿瘤、治
疗糖胺聚糖在脑中积聚、治疗心血管病症、治疗眼科病症、治疗肺部疾病、增加化疗剂渗透至实体肿瘤中、治疗蜂窝组织、治疗增生性病症、或者增加药物及其它治疗剂的生物利用
度。
165.鉴别或选择在变性条件下呈现稳定性的修饰的乙酰透明质酸降解酶的方法，其
中：
所述方法包括：
a)检测修饰的乙酰透明质酸降解酶在包含变性剂的组合物中和/或在变性条件下的
活性；
b)检测所述修饰的乙酰透明质酸降解酶在除了不存在所述变性剂或变性条件之外的
与a)相同的组合物中和/或在相同条件下的活性；及
c)选择或鉴别在a)中呈现活性是在b)中活性的至少5％的修饰的乙酰透明质酸降解
酶；和/或
所述方法包括：
a)检测修饰的乙酰透明质酸降解酶在包含变性剂的组合物中和/或在变性条件下的
活性；
b)检测相应未修饰的乙酰透明质酸降解酶在含有与a)相同的变性剂的组合物中和/
或在相同变性条件下的活性，其中在与a)相同的条件下检测所述活性；及
c)选择或鉴别呈现更高活性的修饰的乙酰透明质酸降解酶，所述活性与所述未修饰的
乙酰透明质酸降解酶相比是其活性的至少120％。
166.权利要求165的方法，其中所述活性是透明质酸酶活性。
167.权利要求165或166的方法，包括：
d)对比在相同条件下在a)中选择或鉴别的修饰的乙酰透明质酸降解酶的活性与所述
未修饰的乙酰透明质酸降解酶的活性；及
e)鉴别或选择与所述未修饰的乙酰透明质酸降解酶相比呈现至少120％、130％、
135％、140％、145％、150％、160％、170％、180％、200％、250％、300％、350％、400％、
500％、1500％、2000％、3000％、4000％、5000％或更多的透明质酸酶活性的修饰的乙酰透明质酸-降解酶。
168.权利要求165-167任一项的方法，其中所述变性剂或条件是由温度、搅拌、无盐或
低盐或者存在赋形剂所致的。
169.权利要求165-167任一项的方法，其中所述变性剂或条件是变性赋形剂，其选自
抗粘附剂、结合剂、涂覆剂、充填剂和稀释剂、香料、色素、润滑剂、助流剂、防腐剂、吸附剂和甜味剂。
170.权利要求169的方法，其中所述变性剂或条件是防腐剂。
171.权利要求170的方法，其中所述防腐剂是酚类防腐剂。
172.权利要求171的方法，其中所述酚类防腐剂选自苯酚、间甲酚(m-甲酚)、苯甲醇
和对羟基苯甲酸酯。
173.权利要求172的方法，其中所述防腐剂是苯酚和/或m-甲酚。
174.权利要求171-173任一项的方法，其中所述组合物中以质量浓度(w/v)百分比
(％)表示的酚类防腐剂的总量是或者是大约0.05％-0.6％、0.1％-0.4％、0.1％-0.3％、
0.15％-0.325％、0.15％-0.25％、0.1％-0.2％、0.2％-0.3％或者0.3％-0.4％，包括端
点。
175.权利要求165-174任一项的方法，其中在a)和b)中检测乙酰透明质酸降解酶组
合物的活性之前，将所述乙酰透明质酸降解酶暴露于所述变性条件或变性剂预定时间。
176.权利要求175的方法，其中所述预定时间是或是大约1分钟至1个月，1分钟至3
周，1分钟至2周，1分钟至1周，1分钟至24小时，1分钟至12小时，30分钟至6小时或者
1小时至4小时。
177.权利要求165-176任一项的方法，其中所述修饰的乙酰透明质酸降解酶与未修饰
的乙酰透明质酸降解酶相比包含氨基酸置换、氨基酸插入或缺失。
178.权利要求177的方法，其中所述修饰的乙酰透明质酸降解酶与所述未修饰形式的
乙酰透明质酸降解酶相比含有仅一个氨基酸置换或者2、3、4、5、6、7、8、9或更多个氨基酸置换。
179.权利要求165-178任一项的方法，其中检测在a)和/或b)中的多个修饰的乙酰
透明质酸降解酶。
180.权利要求179的方法，其中：
与相应未修饰的乙酰透明质酸降解酶相比，所述多个修饰的乙酰透明质酸降解酶被修
饰，产生修饰的乙酰透明质酸降解酶集合，其中在a)和/或b)中检测所述集合中每个修饰
的蛋白质，其中
所述集合中每个修饰的乙酰透明质酸降解酶与所述未修饰形式的乙酰透明质酸降解
酶相比含有仅一个氨基酸置换；
在所述集合中，在每个修饰的位置的氨基酸由除了在该位置的原始氨基酸之外的至多
1-19个其它氨基酸置换，其中每个修饰的乙酰透明质酸降解酶含有不同的氨基酸置换；及
在所述集合中，沿着所述乙酰透明质酸降解酶的长度或者其选择的一部分的每个氨基
酸被置换。
181.权利要求165-180任一项的方法，其中所述未修饰的乙酰透明质酸降解酶是软骨
素酶或者是透明质酸酶。
182.权利要求181的方法，其中所述未修饰的乙酰透明质酸降解酶是透明质酸酶，其
是PH20透明质酸酶或者其缺少C-末端糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚附着位点或者GPI锚附
着位点的一部分的截短形式，其中所述截短形式呈现透明质酸酶活性。
183.权利要求182的方法，其中所述未修饰的乙酰透明质酸降解酶是PH20透明质酸
酶，其选自人、猴、牛、羊、大鼠、狐狸、小鼠或豚鼠PH20。
184.权利要求183的方法，其中所述未修饰的透明质酸酶是人PH20或者其C末端截短
形式。
185.权利要求165-184任一项的方法，其中所述未修饰的乙酰透明质酸降解酶具有
SEQ ID NO:3、7、10、12、14、24、32-66、69、72、857、859、861、870任一所示氨基酸序列或者与SEQ ID NO:3、7、10、12、14、24、32-66、69、72、857、859、861、870任一是至少80％序列相同性的氨基酸序列。
186.权利要求165-185任一项的方法，其在体外进行。
187.权利要求165-186任一项的方法，进一步包括重复多次所述步骤，其中在每次重
复中，产生并检测选择的修饰的乙酰透明质酸降解酶的进一步修饰的乙酰透明质酸降解
酶，其中所述修饰的乙酰透明质酸降解酶被进化为在变性条件下呈现增加的稳定性。
188.通过权利要求165-187任一项的方法鉴别的修饰的乙酰透明质酸降解酶。
189.在存在酚类防腐剂条件下呈现增加的稳定性的修饰的PH20多肽，其在PH20多肽
中包含氨基酸置换，其中：
所述氨基酸置换赋予所述增加的稳定性；
与无所述氨基酸置换的未修饰的多肽相比稳定性是增加的；及
所述未修饰的PH20多肽由SEQ ID NO:7所示氨基酸序列组成或者是其C-末端截短片
段，其为可溶的PH20多肽，或者与其具有至少85％序列相同性。
190.权利要求189的修饰的PH20多肽，其中所述未修饰的PH20多肽是可溶的PH20多
肽，其由SEQ ID NO:3或32-66任一所示任何氨基酸序列组成。
191.权利要求189或190的修饰的PH20多肽，其与SEQ ID NO:3具有至少85％序列
相同性。
192.权利要求189-191任一项的修饰的PH20多肽，其包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、
11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48,49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、
61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75或更多个氨基酸置换。
193.权利要求189-192任一项的修饰的PH20多肽，其是人PH20。
194.权利要求189-193任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽在存在
防腐剂条件下与不存在所述酚类防腐剂条件下的透明质酸酶活性相比呈现至少15％的透
明质酸酶活性至少4小时，其中所述活性是在除了存在酚类防腐剂之外相同的条件下对比
的。
195.权利要求189-194任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽在存在
抗微生物有效量的一或多种酚类防腐剂的条件下是稳定的。
196.权利要求195的修饰的PH20多肽，其中所述抗微生物有效量是一或多种酚
类防腐剂的总量，以质量浓度(w/v)百分比(％)表示，是或者是大约0.05％-0.6％、
0.1 ％-0.4 ％、0.1 ％-0.3 ％、0.15 ％-0.325 ％、0.15 ％-0.25 ％、0.1 ％-0.2 ％、
0.2％-0.3％或者0.3％-0.4％，包括端点。
197.权利要求189-196任一项的修饰的PH20多肽，其中所述酚类防腐剂选自苯酚、间
甲酚(m-甲酚)、苯甲醇和对羟基苯甲酸酯中的一或多种。
198.权利要求189-197任一项的修饰的PH20多肽，其中所述防腐剂是酚类防腐剂，其
是m-甲酚、苯酚或者m-甲酚和苯酚。
199.权利要求189-198任一项的修饰的PH20多肽，其在相应于选自如下参考SEQ ID
NO:3所示氨基酸位置的位置的氨基酸位置包含至少一个氨基酸置换：204、58、10、12、20、
22、26、34、36、46、50、52、68、70、74、82、83、84、86、97、127、131、138、142、143、144、166、169、
174、193、195、196、205、206、213、219、234、237、238、240、249、261、267、277、279、291、309、
310、314、315、317、318、347、367、375、376、399、401、407、416、419、421、431、433、439、440、
443或445，其中相应氨基酸位置是通过排列对比所述PH20多肽与SEQ ID NO:3所示多肽
而鉴别的。
200.权利要求189-199任一项的修饰的PH20多肽，其包含选自如下置换的至少一个氨
基酸置换，所述如下置换的位置相应于参考SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置：
在相应于位置10的位置的G；在相应于位置12的位置的K；在相应于位置20的位置
的S；在相应于位置22的位置的T；在相应于位置26的位置的M；在相应于位置34的位置
的W；在相应于位置36的位置的N；在相应于位置46的位置的L；在相应于位置50的位置
的M；在相应于位置52的位置的T；在相应于位置52的位置的S；在相应于位置58的位置
的C；在相应于位置58的位置的K；在相应于位置58的位置的R；在相应于位置58的位置
的N；在相应于位置58的位置的Y；在相应于位置58的位置的P；在相应于位置58的位置
的H；在相应于位置68的位置的P；在相应于位置70的位置的V；在相应于位置74的位置
的E；在相应于位置82的位置的L；在相应于位置82的位置的N；在相应于位置83的位置
的V；在相应于位置83的位置的Q；在相应于位置83的位置的S；在相应于位置83的位置
的G；在相应于位置84的位置的N；在相应于位置86的位置的A；在相应于位置86的位置
的K；在相应于位置97的位置的E；在相应于位置97的位置的L；在相应于位置127的位置
的R；在相应于位置131的位置的R；在相应于位置138的位置的L；在相应于位置142的位
置的K；在相应于位置142的位置的N；在相应于位置142的位置的P；在相应于位置142的
位置的S；在相应于位置142的位置的T；在相应于位置143的位置的G；在相应于位置143
的位置的K；在相应于位置144的位置的T；在相应于位置166的位置的Q；在相应于位置
166的位置的T；在相应于位置169的位置的L；在相应于位置174的位置的G；在相应于位
置174的位置的N；在相应于位置193的位置的Q；在相应于位置195的位置的T；在相应于
位置195的位置的N；在相应于位置196的位置的E；在相应于位置196的位置的R；在相应
于位置204的位置的P；在相应于位置205的位置的A；在相应于位置205的位置的E；在相
应于位置206的位置的I；在相应于位置213的位置的A；在相应于位置219的位置的I；在
相应于位置234的位置的M；在相应于位置237的位置的T；在相应于位置238的位置的H；
在相应于位置240的位置的Q；在相应于位置249的位置的V；在相应于位置261的位置的
A；在相应于位置261的位置的K；在相应于位置267的位置的T；在相应于位置277的位置
的K；在相应于位置279的位置的H；在相应于位置279的位置的V；在相应于位置291的位
置的V；在相应于位置309的位置的E；在相应于位置310的位置的Q；在相应于位置314的
位置的Y；在相应于位置315的位置的Y；在相应于位置317的位置的N；在相应于位置317
的位置的W；在相应于位置318的位置的D；在相应于位置347的位置的G；在相应于位置
367的位置的A；在相应于位置375的位置的R；在相应于位置376的位置的R；在相应于位
置399的位置的V；在相应于位置401的位置的E；在相应于位置407的位置的A；在相应于
位置416的位置的L；在相应于位置419的位置的K；在相应于位置421的位置的H；在相应
于位置431的位置的E；在相应于位置433的位置的T；在相应于位置433的位置的V；在相
应于位置439的位置的C；在相应于位置440的位置的P；在相应于位置443的位置的G；及
在相应于位置445的位置的N。
201.权利要求189-200任一项的修饰的PH20多肽，其包含选自如下置换的至少一个氨
基酸置换，所述如下置换的位置相应于参考SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置：
在相应于位置52的位置的T、在相应于位置58的位置的K、在相应于位置58的位置的
R、在相应于位置68的位置的P、在相应于位置83的位置的V、在相应于位置204的位置的
P、在相应于位置261的位置的A、在相应于位置267的位置的T、在相应于位置277的位置
的K及在相应于位置421的位置的H。
202.权利要求189-201任一项的修饰的PH20多肽，其包含在相应于在PH20多肽中参
考SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置204的位置用P的置换。
203.权利要求189-202任一项的修饰的PH20多肽，其包含在相应于PH20多肽中参考
SEQ ID NO:3所示氨基酸残基位置的位置58的位置用R的置换。
204.权利要求189-203任一项的修饰的PH20多肽，其是基本上纯化的或分离的。
205.权利要求189-204任一项的修饰的PH20多肽，其是通过选自如下的修饰方式修饰
的：糖基化、唾液酸化、白蛋白化、法尼基化、羧化、羟化和磷酸化。
206.权利要求189-205任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽是糖基
化的，其中所述多肽包含与至少三个天冬酰胺(N)残基的每个均连接的至少一个N-乙酰葡
糖胺部分。
207.权利要求206的修饰的PH20多肽，其中所述三个天冬酰胺残基相应于SEQ ID
NO:3的氨基酸残基200、333和358。
208.权利要求189-207任一项的修饰的PH20多肽，其通过与聚合物缀合而修饰。
209.权利要求208的修饰的PH20多肽，其中所述聚合物是葡聚糖或PEG。
210.权利要求189-209任一项的修饰的PH20多肽，其中所述修饰的PH20多肽与选自
多聚化结构域、毒素、可检测标记或药物的部分缀合。
211.核酸分子，其编码权利要求189-203任一项的修饰的PH20多肽。
212.载体，其包含权利要求211的核酸分子。
213.权利要求212的载体，其是真核或原核载体。
214.权利要求213的载体，其是哺乳动物载体或病毒载体。
215.细胞，其包含权利要求212-214任一项的载体。
216.产生修饰的PH20多肽的方法，包括：
将权利要求211的核酸导入能将N-连接的糖部分掺入所述多肽中的细胞中；
将所述细胞在一定条件下培养，其中所述细胞产生和分泌编码的修饰的PH20多肽；及
回收表达的多肽。
217.药物组合物，其包含权利要求189-210任一项的修饰的PH20多肽。
218.权利要求217的药物组合物，其包含治疗活性剂。
219.权利要求218的药物组合物，其中所述治疗剂是胰岛素，其是速效胰岛素。
220.权利要求219的药物组合物，其中：
修饰的PH20多肽的量是或者是大约100U/mL-1000U/mL；及
速效胰岛素的量是或是大约10U/mL-1000U/mL。
221.权利要求220的药物组合物，其中：
所述pH是或是大约7.0-7.6；及
进一步包含：
浓度是或是大约0.1mM-200mM的NaCl；及
抗微生物有效量的至少一种防腐剂，其中所述组合物含有至少一种酚类防腐剂。
222.权利要求221的药物组合物，其中所述抗微生物有效量是一或多种防腐剂的总
量，以质量浓度(w/v)百分比(％)表示，其是0.05％-0.6％。
223.权利要求221或222的药物组合物，其中所述防腐剂选自苯酚、间甲酚(m-甲酚)、
苯甲醇及对羟基苯甲酸酯。
224.权利要求220-223任一项的药物组合物，进一步包含：
表面活性剂，其在所述配制物中质量浓度(w/v)％的量为至少或至少大约0.001％；
缓冲剂，其是非金属结合剂或者是金属结合剂，其中所述缓冲剂的浓度是或是大约
1mM-100mM；
甘油，浓度低于60mM；
抗氧化剂，浓度为或者为大约2mM-50mM，包括端点；和/或
锌，浓度为或为大约0.001-0.1mg/100单位胰岛素(mg/100U)。
225.权利要求224的药物组合物，其中所述表面活性剂选自聚丙二醇、聚乙二醇、甘
油、山梨糖醇、泊洛沙姆和聚山梨酯。
226.权利要求224的药物组合物，其中所述缓冲剂选自Tris、组氨酸、磷酸盐和柠檬酸
盐缓冲剂。
227.权利要求224的药物组合物，其中所述抗氧化剂选自半胱氨酸、色氨酸和甲硫氨
酸。
228.闭环系统、胰岛素泵或胰岛素针，其包含权利要求219-227任一项的药物组合物。
229.一种治疗乙酰透明质酸相关疾病或病症、治疗与糖胺聚糖过量相关的病症、治疗
肿瘤、治疗脑中糖胺聚糖聚集、治疗心血管疾病、治疗眼科病症、治疗肺部疾病、增加化疗剂渗透进实体肿瘤中、治疗蜂窝组织、治疗增生性疾病、增加治疗剂输送至对象或者增加药物及其它治疗剂的生物利用度的方法，包括给予对象权利要求189-210任一项的修饰的PH20
多肽或者权利要求217-227任一项的药物组合物。
230.权利要求217-227任一项的药物组合物，其用于治疗乙酰透明质酸相关疾病或病
症、治疗与糖胺聚糖过量相关的病症、治疗肿瘤、治疗脑中糖胺聚糖聚集、治疗心血管疾病、治疗眼科病症、治疗肺部疾病、增加化疗剂渗透进实体肿瘤中、治疗蜂窝组织、治疗增生性疾病、增加治疗剂输送至对象或者增加药物及其它治疗剂的生物利用度。
231.治疗糖尿病的方法，包括给予对象权利要求219-227任一项的药物组合物。
232.权利要求219-227任一项的药物组合物，其用于治疗糖尿病。