一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物及其制备方法和
应用
技术领域
背景技术
[0002] 认知是
机体认识和获取知识的智能加工过程,涉及学习、记忆、语言、思维、精神、情感等一系列随意、心理和社会行为。认知障碍指与上述学习记忆以及思维判断有关的大脑高级智能加工过程出现异常,从而引起严重学习、记忆障碍,同时伴有失语或失用或失认或失行等改变的病理过程。认知的
基础是大脑皮层的正常功能,任何引起大脑皮层功能和结构异常的因素均可导致认知障碍。由于大脑的功能复杂,且认知障碍的不同类型互相关联,即某一方面的认知问题可以引起另一方面或多个方面的认知异常(例如,一个病人若有注意
力和记忆方面的
缺陷,就会出现解决问题的障碍)。其临床表现包括:
[0003] 1.
感知障碍,如感觉过敏、感觉迟钝、内感不适、感觉变质、感觉剥夺、病理性错觉、幻觉、感知综合障碍;
[0004] 2.记忆障碍,如记忆过强、记忆缺损、记忆错误;
[0005] 3.思维障碍,如抽象概括过程障碍、联想过程障碍、思维逻辑障碍、妄想等。
[0006] 上述各种认知障碍的原因是多种多样的,除器质性疾病原因外,大多精神疾患所致。如神经衰弱、癔症、疑症、更年期综合征、
抑郁症、
强迫症、老年性痴呆、
精神分裂症、
反应性精神病、偏执型精神病、躁狂症、躁郁症等等。
[0008] 1.对症和神经保护性治疗,且,针对认知障碍的病因和发病机制,可应用不同的神经细胞保护剂,如脑循环改善剂、
能量代谢激活剂、神经递质和神经生长因子保护剂、Ca2+拮抗剂、谷
氨酸盐受体拮抗剂、抗
氧化剂、胶质细胞调节剂和非甾体类抗炎剂等均被广泛应用于不同疾病引起的认知障碍的治疗;
[0010] 3.手术治疗。
[0011] 以上所述的治疗方案均属于西医治疗方案,会对患者产生一定的
副作用。
[0012] 关于中医治疗:知母百合药对始载于东汉张仲景的《金匮要略》,由百合和知母两味中药组成,“百脉俱朝于
肺。百合能治邪气之实,而补正气之虚;知母入肺金,益其水源,下通膀胱,使天水之气合,而所伤之阴转,则其邪从小便出矣。”二药配伍,一润一清,一补一泻,共奏滋阴祛热,消烦润燥,润心养肺之效。百合为百合科
植物卷丹、百合或细叶百合的干燥肉质鳞叶。味甘,性寒。归心、肺经。具有养阴润肺,清心安神的作用。用于阴虚燥咳,劳嗽咳血,虚烦惊悸,
失眠多梦,精神恍惚。知母为百合科植物知母的干燥根茎。味苦、甘,性寒。归肺、胃、肾经。具有清热泻火,滋阴润燥的作用。用于外感热病,高热烦渴,肺热燥咳,骨蒸
潮热,内热消渴,肠燥便秘。现已成为中医药治疗抑郁症、失眠、焦虑等精神神经性疾病的经典名方。研究表明,知母百合汤能够通过调节海
马神经元的生长及代谢相关
信号通路,来修复大鼠海马神经元的病理改变。
[0013] 传统百合知母汤剂一副药由百合7枚,知母三两组成,用量大,携带不方便。
[0014]
发明人针对
现有技术的缺陷,设计了本发明一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物及其制备方法和应用,关于此内容目前尚无文献报道。
发明内容
[0015] 本发明的第一个目的是针对现有技术的不足,提供一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物。
[0016] 本发明的第二个目的是针对现有技术的不足,提供如上所述中药提取物组合物的用途。
[0017] 本发明的第三个目的是针对现有技术的不足,提供一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物的制备方法。
[0018] 本发明的第四个目的是针对现有技术的不足,提供一种治疗认知障碍疾病的药物。
[0019] 本发明的第五个目的是针对现有技术的不足,提供如上所述药物的制备方法。
[0020] 为实现上述第一个目的,本发明采取的技术方案是:
[0021] 一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物,其特征在于,所述的中药提取物组合物由含有知母总皂苷的知母提取物和含有百合总皂苷的百合提取物组成,所述中药提取物组合物中知母总皂苷:百合总皂苷的重量份比例为1:2;
[0022] 所述知母提取物和百合提取物的制备方法如下:
[0023] (A)百合提取物:
[0024] 将百合药材100℃干燥12小时,至
含水量10%以下,
粉碎,过14目筛,3倍量30%
乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至
密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液,将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有
树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为百合总皂苷成品;
[0025] (B)知母提取物:
[0026] 将知母药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下,粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液。将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为知母总皂苷成品。
[0027] 作为本发明的一个优选实施方案,步骤(A)制得的百合提取物中百合总皂苷的平均含量为70%-100%;步骤(B)制得的知母提取物中知母总皂苷的含量为70%-100%。
[0028] 为实现上述第二个目的,本发明采取的技术方案是:
[0029] 如上任一所述的中药提取物组合物在制备治疗认知障碍疾病的药物中的应用。
[0030] 作为本发明的一个优选实施方案,所述的认知障碍疾病是指精神衰弱、癔症、抑郁症、老年痴呆、精神分裂。
[0031] 为实现上述第三个目的,本发明采取的技术方案是:
[0032] 一种治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物的制备方法,包括如下步骤:
[0033] (A)制备百合提取物:
[0034] 将百合药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下,粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液,将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为百合总皂苷成品;
[0035] (B)知母提取物:
[0036] 将知母药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下,粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液,将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为知母总皂苷成品。
[0037] (C)将步骤(A)制得的百合提取物和步骤(B)制得的知母提取物按照知母总皂苷:百合总皂苷的重量份比例为1:2组合,即得。
[0038] 作为本发明的一个优选实施方案,将步骤(A)制得的百合提取物和步骤(B)制得的知母提取物按照知母总皂苷:百合总皂苷的重量份比例为1:2进行组合。
[0039] 为实现上述第四个目的,本发明采取的技术方案是:
[0040] 一种治疗认知障碍疾病的药物,所述药物是由如上任一所述的中药提取物组合物和药用辅料制得的。
[0041] 作为本发明的一个优选实施方案,所述的药物的制剂形式为片剂、丸剂、颗粒剂、注射剂。
[0042] 为实现上述第五个目的,本发明采取的技术方案是:
[0043] 如上任一所述药物的制备方法,包括如下步骤:
[0044] (A)制备百合提取物:
[0045] 将百合药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下。粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液,将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为百合总皂苷成品;
[0046] (B)制备知母提取物:
[0047] 将知母药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下,粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液。将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h,70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,为知母总皂苷成品。
[0048] (C)将步骤(A)制得的百合提取物和步骤(B)制得的知母提取物按照知母总皂苷:百合总皂苷的重量份比例为1:2组合,加入药物辅料,即得。
[0049] 本发明中的百合炮制品,可市售,如蜜百合。
[0050] 本发明中的知母炮制品,可市售。
[0051] 本发明提供的中药提取物组合物,可以单独作为药物使用,也可以作为原料制成片剂、丸剂、颗粒剂、注射剂等剂型使用,制成各种剂型时,按照制药现有技术加入各种辅料即可。
[0052] 本发明优点在于:
[0053] 1、在知母百合汤中的知母、百合含有的化学成分复杂,包括如皂苷、双苯吡
酮类、蒽醌类、
生物碱类等多种成分,提取难度很大。本发明通过优化提取方法提取出单味药材的有效化学成,并筛选出其有效化学成分的最佳比例,结合药理实验,制备得到了一种用于治疗认知障碍疾病的中药提取物组合物。
[0054] 2、本发明通过药理实验证明,通过本发明的制备方法得到的中药提取物组合物具有很好的抗认知障碍的作用。含有知母总皂苷的知母提取物和含有百合总皂苷的百合提取物组成的中药提取物组合物协同奏效,具有疗效佳、服用方便,
质量稳定可控、可长期保存、用药剂量低的优点,具有很好的应用前景。
具体实施方式
[0055] 下面结合具体实施方式,进一步阐述本发明。应理解,这些
实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明记载的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或
修改,这些等价形式同样落于本
申请所附
权利要求书所限定的范围。
[0056] 实施例1百合提取物
[0057] 将百合药材100℃干燥12小时,至含水量9%,粉碎,过14目筛,3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-
1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液。将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h。70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,得百合总皂苷含量为71.1%。
[0058] 实施例2知母提取物
[0059] 将知母药材100℃干燥12小时,至含水量10%以下,粉碎,过14目筛。3倍量30%乙醇浸润6h后,再用30%乙醇渗漉,渗漉速度为1.2BV/h,收集24倍量渗漉液,减压浓缩至密度为1.0-1.5g/ml,冷却、过滤,滤液即为上柱样品液。将上柱样品液按0.8BV上样量通入装有树脂的色谱柱中,依次用12BV的蒸馏水、12BV的20%乙醇、10BV的70%乙醇、8BV的95%乙醇梯度洗脱,流速为2.5BV/h。70%乙醇洗脱液减压浓缩,干燥并粉碎得淡黄色粉末,得知母总皂苷含量为82.3%。
[0060] 实施例3百合知母提取物组合物
[0061] 将实施例1和实施例2中制得的知母总皂苷和百合总皂苷按照重量份配比为:知母总皂苷:百合总皂苷=1:2组合,得到知母百合提取物组合物。
[0062] 实施例4中药提取物组合物对抑郁症模型大鼠的影响试验
[0063] 1.实验材料
[0064] 1.1动物
[0065] SD雄性大鼠70只(中国人民解放军第二军医大学动物中心),体重180-220g。
[0066] 1.2实验药物
[0067] 氟西汀、传统知母百合水煎液(取百合150g,先以清水300mL浸泡12h,去水,再加蒸馏水500mL武火煎开(约18min)后改为文火(约20min),得百合煎煮液400mL;取知母75g,加蒸馏水150mL,同前法得知母煎煮液200mL。将所得百合、知母煎煮液混合,文火浓缩(约45min)至1g/mL)、实施例1百合提取物、实施例2知母提取物、实施例3百合知母提取物组合物。
[0068] 2实验方法
[0069] 2.1动物造模
[0070] 所有大鼠单笼饲养,连续接受35d各种不同的应激刺激,包括:4℃
冰水游泳5min、开灯过夜(
白炽灯,5W,900cm2)、夹尾巴10min、倾斜45度过夜、禁水24h、足底电击(
电压50mV,每隔30s刺激1次,持续10s,共8次)、禁食24h、湿笼(白天将300mL水泼入
垫料中,8h后换干垫料)。每天随机接受2种不同刺激,但连续2d内所予刺激均不相同,末次刺激后进行各项指标检测。
[0072] 将抑郁大鼠随机分成7组,每组10只,即:
[0073] 空白对照组
[0074] 模型组
[0075] 阳性药组(氟西汀10mg/kg/d)
[0076] 传统知母百合水煎液组(剂量5g/kg)
[0077] 实施例1百合提取物组(剂量95mg/kg)
[0078] 实施例2知母提取物组(剂量95mg/kg)
[0079] 实施例3知母百合提取物组合物组(1:2,剂量95mg/kg)
[0080] 边造模边给药,连续4周灌服给药。
[0081] 2.3观测指标
[0082] 2.3.1旷场试验
[0083] 将大鼠放入敞箱中间,记录3min内大鼠穿过方格的数量,三足以上穿过一格为1分,水平穿过的格子总数为水平运动分数;同时统计其双足垂直离地的次数,垂直离地一次为1分,垂直离地的次数为大鼠垂直运动的得分。水平运动和垂直运动总和为旷场运动得分。本试验可检测大鼠自主活
动能力和对外界的好奇程度,慢性应激处理后的大鼠旷场试验得分会明显降低。结果见下表1。
[0084] 表1、各组大鼠旷场实验结果(x±s,n=10,分)
[0085]
[0086] 注:与空白对照组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01[0087] 造模后,模型组大鼠的水平穿越格数、竖立次数均显著低于空白对照组(P<0.01),说明大鼠出现抑郁症状,造模成功;与模型组相比,传统知母百合水煎液组、实例1百合提取物组、实例2知母提取物组和氟西汀组大鼠的水平穿越格数、竖立次数均有增加,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实例3知母百合提取物组合物组大鼠的水平穿越格数、竖立次数均有增加,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。
[0088] 2.3.2强迫游泳试验
[0089] 将大鼠放入直径20cm,深70cm的透明水缸内,保持水温25℃,放入大鼠适应性游泳1min,然后记录大鼠4min内游泳不动的时间,本试验可反映大鼠在紧急情况下本能的求生欲望,慢性应激处理后大鼠的游泳不动时间会延长。结果见下表2。
[0090] 表2、各组大鼠游泳不动时间的比较(x±s,n=16)
[0091]
[0092] 注:与空白对照组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01[0093] 造模后,与空白对照组相比,模型组大鼠强迫游泳不动时间显著延长(P<0.01),大鼠出现抑郁症状;与模型组相比,传统知母百合水煎液组、实例1百合提取物组、实例2知母提取物组和氟西汀组大鼠不动时间减少,差异具有统计学意义(P<0.05),实例3知母百合提取物组合物组大鼠不动时间减少尤其明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。
[0094] 2.3.3 5-HT、CORT及促ACTH水平检测
[0095] 3%戊巴比妥钠0.3-0.4mL注入腹膜腔内麻醉大鼠,腹主动脉取5mL血液,保留标本。常温静置1h后放入离心机进行离心。4℃,1500r/min,离心15min,取上部血清,-80℃
冰箱保存。根据
试剂盒
说明书用ELISA法检验血清中5-HT、CORT及促ACTH水平。结果见下表3。
[0096] 表3、各组大鼠血清中5-HT、CORT、ACTH含有量的比较(x±s,n=8)
[0097]
[0098] 注:与空白对照组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01[0099] 模型组大鼠血清中5-HT、CORT、ACTH水平显著低于空白对照组(P<0.01)。与模型组相比,氟西汀组的5-HT、CORT、ACTH水平显著升高(P<0.01);传统知母百合水煎液组5-HT、CORT、ACTH水平显著升高(P<0.01);实例1百合提取物组CORT、ACTH水平显著升高(P<0.01);实例2知母提取物组CORT、ACTH水平显著升高(P<0.01);实例3知母百合提取物组合物组大鼠的5-HT、CORT、ACTH水平升高尤其明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。
[0100] 3结论
[0101] 本发明制备的知母百合汤有效组分(中药提取物组合物)能升高血清中5-HT、CORT、ACTH的水平,改善行为学特征,改善和缓解抑郁症的症状,并且治疗效果比传统水煎液更为显著,具有治疗认知障碍疾病的作用,且与传统知母百合水煎液相比,本发明的中药提取物组合物用药剂量低,服用方便,质量可控,另外本发明优化百合提取物和知母提取物的制备方法,得到的百合提取物和知母提取物含量高。
[0102] 以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和补充,这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。