发明领域
[0001] 本发明涉及抑制Rho激酶的化合物(在下文中称作ROCK抑制剂)；具体地，本发明涉及二环二氢嘧啶-甲酰胺衍生物、制备这样的化合物的方法、含有它们的药物组合物及其
治疗用途。
[0002] 更具体地，本发明的化合物是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和/或ROCK-II同种型(isoforms)的活性或功能的抑制剂。
[0003] 因此，本发明的化合物可用于治疗许多与ROCK酶机制有关的障碍，诸如
肺疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、特发性肺
纤维化(IPF)和肺动脉
高血压(PAH)。
[0004] 发明背景
[0005] Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)属于丝
氨酸-苏氨酸激酶的AGC(PKA/PKG/PKC)家族。已经描述了ROCK的两种人同种型，ROCK-I(也被称作p160ROCK或ROKβ)和ROCK-II(ROKα)是大约160kDa蛋白，其含有一个N-端Ser/Thr激酶结构域，继之以一个卷曲螺旋结构、一个普列克底物蛋白同源性结构域和在C-端处的一个富含半胱氨酸的区域(Riento,K.；Ridley,A.J.Rocks:multifunctional kinases in cell behaviour.Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2003,4,446-456)。
[0006] ROCK-II和ROCK-I都在许多人和啮齿动物组织中表达，包括心脏、胰腺、肺、肝、骨骼肌、肾和脑(Riento,K.；Ridley,A.J.Rocks:multifunctional kinases in cell behaviour.Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2003,4,446-456)。已经将ROCK
鉴别为RhoA的效应物分子，且参与多种细胞功能，包括肌动蛋白组构、细胞粘附、细胞迁移和胞质分裂(Riento,K.；Ridley ,A.J.Rocks:multifunctional kinases in cell behaviour.Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2003,4,446-456；Feng Y,LoGrasso PV,Defert O,Li R.Rho Kinase(ROCK)Inhibitors and Their Therapeutic Potential.J Med Chem.2016；
59(6):2269-300)。
[0007] 它还通过效应物诸如肌球蛋白轻链
磷酸酶(MLC)的磷
酸化参与调节平滑肌收缩。实际上，ROCK在由几种调节血管和/或气道中的平滑肌细胞收缩的药剂介导的
信号转导中起重要作用，所述药剂包括血清素、血管紧张素II、内皮缩血管肽I、血小板衍生的生长因子(PDGF)和硬骨鱼紧张肽II(Li Q,Xu Y,Li X,Guo Y,Liu G.Inhibition of Rho-kinase ameliorates myocardial remodeling and fibrosis in pressure overload and myocardial infarction:role of TGF-β1-TAK1.Toxicol Lett.2012；211(2):91-7；Shi J,Wei L.Rho kinases in cardiovascular physiology and pathophysiology:the effect of fasudil.J Cardiovasc Pharmacol.2013；62(4):341-54)。
[0008] 迄今为止，在日本和/或在中国仅两种ROCK抑制剂被批准用于临床应用：法舒地尔(Suzuki Y,Shibuya M,Satoh S,Sugiyama H,Seto M,Takakura K.Safety and efficacy of fasudil monotherapy and fasudil-ozagrel combination therapy in patients with subarachnoid hemorrhage:sub-analysis of the post-marketing surveillance study.Neurol Med Chir(Tokyo).2008；48(6):241-7)在1995年被批准用于治疗脑血管痉挛，和ripasudil(Tanihara H,Inoue T,Yamamoto T,Kuwayama Y,Abe H,Fukushima A,Suganami H,Araie M；K-115 Clinical Study Group.One-year clinical evaluation of 0.4％ripasudil(K-115)in patients with open-angle glaucoma and ocular hypertension.Acta Ophthalmol.2016；94(1):e26-34)在2014被批准用于治疗
青光眼。
[0009] ROCK介导血管收缩和内皮功能障碍，它们是包括高血压心脏病、
冠状动脉疾病、动脉粥样硬化、
再狭窄、雷诺现象、中
风和青光眼在内的几种心
血管疾病的两个关键组分(Hartmann S,Ridley AJ,Lutz S.The Function of Rho-Associated Kinases ROCK1 and ROCK2 in the Pathogenesis of Cardiovascular Disease.Front Pharmacol.2015 Nov 20；6:276)。具体地，来自临床试验的药理学数据表明，ROCK抑制剂会降低眼内压并在青光眼患者中表现出有益效果(Inoue T,Tanihara H.Rho-associated kinase inhibitors:a novel glaucoma therapy.Prog Retin Eye Res.2013；37:1-12)。在具有肺性高血压(pulmonary hypertension)的患者中，在肺组织和循环的嗜中性粒细胞中的ROCK活性与对照相比显著更高(Duong-Quy S,Bei Y,Liu Z,Dinh-Xuan AT.Role of Rho-kinase and its inhibitors in pulmonary hypertension.Pharmacol Ther.2013；137(3):352-64)。
在嗜中性粒细胞ROCK活性与肺性高血压的严重程度和持续时间之间建立了显著关联(Duong-Quy S,Bei Y,Liu Z,Dinh-Xuan AT.Role of Rho-kinase and its inhibitors in pulmonary hypertension.Pharmacol Ther.2013；137(3):352-64)。ROCK还可以促进心脏纤维化、肥大和随后心
力衰竭的发展。使用ROCK抑制剂(诸如法舒地尔)的最近实验研究已经证实ROCK抑制在心脏重塑中的益处(Li Q,Xu Y,Li X,Guo Y,Liu G.Inhibition of Rho-kinase ameliorates myocardial remodeling and fibrosis in pressure overload and myocardial infarction:role of TGF-β1-TAK1.Toxicol Lett.2012；211(2):91-7)。缺乏每种ROCK同种型的小鼠也在心脏重塑的多种病理学模型中表现出减少的心肌纤维化(Shimizu T1,Liao JK.Rho Kinases and Cardiac Remodeling.Circ J.2016；
80(7):1491-8)。
[0010] 对于脑血管障碍的治疗，ROCK也是一种有前途的靶标。实际上，临床前研究指示，Rho激酶抑制可以减少颅内
动脉瘤和大脑海绵状畸形的形成/生长/破裂(Bond LM,Sellers JR,McKerracher L.Rho kinase as a target for cerebral vascular disorders.Future Med Chem.2015；7(8):1039-53)。
[0011] RhoA-ROCK信号传递在维持松弛阴茎状态中是重要的，且ROCK信号传递的药理学抑制会以独立于NO的方式增强平滑肌松弛，从而提示，ROCK是治疗勃起功能障碍的新治疗靶标(Sopko NA,Hannan JL,Bivalacqua TJ.Understanding and targeting the Rho kinase pathway in erectile dysfunction.Nat Rev Urol.2014；11(11):622-8)。
[0012] ROCK活性是白血球-血小板-内皮相互作用、白血球
外渗和
水肿中的重要信号传递机制。内皮细胞中Rho激酶的过度活化会造成有利于
炎症细胞募集的细胞-细胞连接部的破坏所引起的
泄漏。总之，这些证据指出了ROCK在与急性和慢性炎症有关的病理学状况以及自身免疫疾病中的作用。具体地，ROCK途径对自身免疫和自身免疫病的贡献是新出现的(Zanin-Zhorov A,Flynn R,Waksal SD,Blazar BR.Isoform-specific targeting of ROCK proteins in immune cells.Small GTPases.2016；7(3):173-177)。这得到了ROCK信号传递在T细胞发育和功能(包括粘附、趋化性应答和
抗原依赖性活化)中的作用以及ROCK抑制在类风湿性关节炎和狼疮的实验模型中的有益效果的证实的支持(LoGrasso,P.；Feng,Y.Rho kinase inhibitors and their application to inflammatory disorders.Curr.Top.Med.Chem.2009；9,704-723；Yoshimi,E.；Kumakura,F.；Hatori,C.；Hamachi,E.；Iwashita,A.；Ishii,N.；Terasawa,T.；Shimizu,Y.；Takeshita,N.Antinociceptive effects of AS1892802,a novel rho kinase inhibitor,in rat models of inflammatory and noninflammatory arthritis.J.Pharmacol.Exp.Ther.2010,334,955-
963；Stirzaker RA,Biswas PS,Gupta S,Song L,Bhagat G,Pernis AB.Administration of fasudil,a ROCK inhibitor,attenuates disease in lupus-prone NZB/W F1female mice.Lupus.2012年5月；21(6):656-61)。法舒地尔对T-细胞迁移的抑制作用可能扩大它作为多发性硬化的新疗法的临床应用(Yu JZ,Ding J,Ma CG,Sun CH,Sun YF,Lu CZ,Xiao BG.Therapeutic potential of experimental autoimmune encephalomyelitis by Fasudil,a Rho kinase inhibitor.J Neurosci Res.2010；88(8):1664-72)。积累的证据也证实，ROCK在调节炎性肠病(IBD)的发病机制的3个疾病因素中起关键作用：肠屏障的破坏，肠内容物向粘膜免疫细胞的暴露，和异常的免疫应答(Huang Y,Xiao S,和Jiang Q.Role of Rho kinase signal pathway in inflammatory bowel disease Int J Clin Exp Med.2015；8(3):3089-3097)。也在
银屑病中观察了ROCK抑制剂的临床应用(Yiu ZZ,Warren RB.Novel Oral Therapies for Psoriasis and Psoriatic Arthritis.Am J Clin Dermatol.2016；17(3):191-200)。
[0013] 几个系列的证据表明，ROCK在糖尿病的病理学中起作用。实际上，ROCK1KO小鼠表现出胰岛素抗性且可以具有
葡萄糖诱导的胰岛素分泌的显著增加，从而导致高胰岛素血症(Lee D.H.,Shi J.,Jeoung N.H.,Kim M.S.,Zabolotny J.M.,Lee S.W.,等人.Targeted disruption of ROCK1causes insulin resistance in vivo.J.Biol.Chem.2009；284,11776-11780)。另外，在1型和2型糖尿病的模型中的研究已经指示ROCKi在糖尿病肾脏疾病中的独立于血压的肾保护作用(Komers R.Rho kinase inhibition in diabetic kidney disease.Br J Clin Pharmacol.2013；76(4):551-9)。
[0014] 现在大量证据表明，ROCK参与许多促进与几种急性和慢性肺疾病(包括哮喘、COPD、支气管扩张和ARDS/ALI)有关的病理学的途径。鉴于ROCK的生物学效应，选择性抑制剂具有治疗
呼吸系统疾病的许多病理学机制的潜力，诸如平滑肌高
反应性、支气管收缩、气道炎症和气道重塑、神经调制和由
呼吸道病毒感染引起的恶化(Fernandes LB,Henry PJ,Goldie RG.Rho kinase as a therapeutic target in the treatment of asthma and chronic obstructive pulmonary disease.Ther Adv Respir Dis.2007Oct；1(1):25-33)。实际上，Rho激酶抑制剂Y-27632会造成支气管扩张和减轻肺嗜酸性粒细胞增多运输和气道高反应性(Gosens,R.；Schaafsma,D.；Nelemans,S.A.；Halayko,A.J.Rhokinase as a drug target for the treatment of airway hyperresponsiveness in asthma.Mini-Rev.Med.Chem.2006,6,339-348)。已经在具有特发性肺纤维化(IPF)的人类中和在该疾病的动物模型中证实了肺的ROCK活化。ROCK抑制剂可以
预防这些模型中的纤维化，且更重要的是，诱导已经建立的纤维化的消退，从而指示ROCK抑制剂作为阻止肺纤维化进展的潜在强效药理学
试剂(Jiang,C.；Huang,H.；Liu,J.；Wang,Y.；Lu,Z.；Xu,Z.Fasudil,a rho-kinase inhibitor,attenuates bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice.Int.J.Mol.Sci.2012,13,8293-8307)。
[0015] 积累的证据支持以下概念：ROCK通过调节许多与
恶性肿瘤有关的关键细胞功能(包括致肿瘤性、肿瘤生长、转移、血管生成、肿瘤细胞凋亡/存活和化学抗性)而在肿瘤发育和进展中起重要作用(Wei L,Surma M,Shi S,Lambert-Cheatham N,Shi J.Novel Insights into the Roles of Rho Kinase in Cancer.Arch Immunol Ther Exp(Warsz).2016；64(4):259-78)。因而，指示ROCK抑制剂也作为癌症的潜在强效药理学试剂。
[0016] 口服ROCK抑制剂的施用在移
植物抗宿主病(GVHD)的实验模型中有效地改善临床表现(Biol Blood Marrow Transplant.2014；20(8):1104-11；Blood.2016；127(17):2144-54)。其它发现强调了Rho激酶作为合理治疗靶标来抵抗进行性核上性麻痹(PSP)和皮质基底变性(CBD)中的tau积累(Gentry等人,J Neurosci.2016；36(4):1316-23)。
[0017] 在中枢神经系统的不同障碍中，存在Rho/ROCK途径的异常活化。ROCK在对成年脑和脊髓的损伤后被活化，且ROCK的抑制导致脊髓损伤以后
加速的再生和增强的功能恢复(Kubo T,Hata K,Yamaguchi A,Yamashita T.Rho-ROCK inhibitors as emerging strategies to promote nerve regeneration.Curr Pharm Des.2007；13(24):2493-9)。还已经证实Rho/ROCK途径的抑制在中风、炎症性疾病和脱髓鞘疾病、阿尔茨海默氏病和神经性
疼痛的动物模型中是有效的(综述在Mueller,B.K.；Mack,H.；Teusch,N.Rho kinase,a promising drug target for neurological disorders.Nat.Rev.Drug Discovery 2005,
4,387-398)。
[0018] 多种化合物已经在文献中被描述为Rho激酶抑制剂。参见例如WO2004/039796；WO2006/009889；WO2010/032875；WO2009/079008；WO2014/118133。
[0019] 杂环的二氢嘧啶在WO 2001040231中被公开为
钾通道抑制剂。
[0020] 二氢四唑并嘧啶衍生物在US 2016/113931中被公开用于治疗和/或预防神经变性疾病。
[0021] 在许多治疗领域(诸如心血管和呼吸系统疾病、勃起功能障碍、纤维化疾病、胰岛素抗性、肾衰竭、中枢神经系统障碍、自身免疫疾病和肿瘤学)中仍然存在开发新的和药理学上改善的ROCK抑制剂的潜力。
[0022] 考虑到由ROCK酶介导的病理学应答的数目，继续需要这样的酶的抑制剂，其可用于治疗许多障碍。
[0023] 本发明涉及新的化合物，它们是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和ROCK-II同种型的抑制剂，它们具有治疗上合乎需要的特征，特别对于一些肺疾病(包括哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH))是有前途的。
发明内容
[0024] 本发明涉及作为ROCK抑制剂起作用的式(I)的化合物
[0025]
[0026] 其中X1、X2、R1、R2、A、p如下面在发明详述中所报道，
[0027] 涉及它们的制备方法、单独地或与一种或多种活性成分组合地包含它们和一种或多种药学上可接受的载体的药物组合物。
[0028] 在一个方面，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途。
[0029] 在另一个方面，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗以ROCK酶异常活性为特征和/或其中需要抑制活性(且具体地通过ROCK酶同种型相对于其它激酶的选择性抑制)的任何疾病。
[0030] 此外，本发明提供了一种用于预防和/或治疗其中需要抑制ROCK酶的任何疾病的方法，所述方法包括给需要这种治疗的患者施用
治疗有效量的本发明的化合物。
[0031] 具体地，可以施用单独的或与其它活性成分组合的本发明的化合物用于预防和/或治疗肺疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
[0032] 发明详述
[0033] 本发明涉及作为Rho激酶(ROCK)的抑制剂起作用的一类化合物。
[0034] 所述类别的化合物抑制ROCK酶的活性或功能，且更具体地，它们是Rho-相关的卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)的ROCK-I和ROCK-II同种型的抑制剂。本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和
溶剂化物
[0035]
[0036] 其中
[0037] X1和X2在每次出现时独立地是
碳原子或氮原子；
[0038] 当存在时，每个R在每次出现时独立地选自：
[0039] -H，
[0040] -CN，
[0041] 卤素，
[0042] -NR5R6，
[0043] (C1-C6)烷基，
[0044] (C1-C6)卤代烷基，
[0045] (C1-C6)羟基烷基，
[0046] (C1-C6)氨基烷基，
[0047] (C3-C10)环烷基，
[0048] (C2-C6)烯基，
[0049] (C5-C7)环烯基，
[0050] (C2-C6)炔基，
[0051] (C2-C6)羟基炔基，
[0052] 羟基羰基，
[0053] -OR7，
[0054] (C1-C6)烷硫基，
[0055] (C1-C6)烷
氧基-(C1-C6)烷基，
[0056] (C1-C6)烷氧基羰基，
[0057] (C1-C6)氨基烷基羰基，
[0058] 氨甲酰基，
[0059] (C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基，
[0060] (C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
[0061] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0062] 其中所述(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的任一个本身(in its turn)任选地和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
[0063] 卤素，
[0064] -OH，
[0065] (C1-C6)烷基，
[0066] (C1-C6)卤代烷基，
[0067] (C1-C6)羟基烷基，
[0068] (C1-C6)氨基烷基，
[0069] (C3-C10)环烷基，
[0070] (C2-C6)烯基，
[0071] (C5-C7)环烯基，
[0072] (C2-C6)炔基，
[0073] (C2-C6)羟基炔基，
[0074] (C1-C6)烷氧基，
[0075] (C1-C6)氨基烷基羰基；
[0076] R5和R6在每次出现时独立地选自：
[0077] H，
[0078] (C1-C6)烷基，
[0079] (C1-C6)卤代烷基，
[0080] (C1-C6)羟基烷基，
[0081] (C1-C6)氨基烷基，
[0082] (C1-C6)氨基烷基羰基，
[0083] 氨甲酰基-(C1-C6)烷基，
[0084] (C1-C6)烷氧基，
[0085] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
[0086] (C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
[0087] (C3-C6)杂环烷氧基烷酰基(alkanoyl)，
[0088] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0089] 其中所述芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的任一个本身任选地和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
[0090] 卤素，
[0091] -OH，
[0092] (C1-C6)烷基；或者
[0093] R5和R6与它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环残基，其中所述杂环残基中的至少一个其它环碳原子可以被至少一个选自N、S或O的杂原子替代；所述杂环残基可以进一步任选地被选自以下的基团取代：
[0094] H，
[0095] -CN，
[0096] 卤素，
[0097] -氧代，
[0098] -NR5R6，
[0099] (C1-C6)烷基，
[0100] (C1-C6)卤代烷基，
[0101] (C1-C6)羟基烷基，
[0102] (C1-C6)氨基烷基，
[0103] (C1-C6)烷氧基，
[0104] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
[0105] 烷酰基；
[0106] R7在每次出现时独立地选自：
[0107] H，
[0108] (C1-C6)烷基，
[0109] (C1-C6)卤代烷基，
[0110] (C1-C6)羟基烷基，
[0111] (C1-C6)氨基烷基，
[0112] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
[0113] (C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
[0114] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0115] 其中所述芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的任一个本身任选地和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
[0116] 卤素，
[0117] -OH，
[0118] (C1-C6)烷基；
[0119] p是0或1或2；
[0120] R1选自：
[0121] (C1-C6)烷基，
[0122] (C1-C6)卤代烷基，
[0123] (C1-C6)羟基烷基，
[0124] (C1-C6)氨基烷基，
[0125] (C3-C10)环烷基，
[0126] (C2-C6)烯基，
[0127] (C5-C7)环烯基，
[0128] (C2-C6)炔基，
[0129] (C2-C6)羟基炔基，
[0130] (C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基，
[0131] (C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基，
[0132] 芳基(C1-C6)烷基，
[0133] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0134] 所述环烷基、环烯基、芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的每一个本身任选地和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
[0135] 硝基，
[0136] 卤素，
[0137] -NR5R6，
[0138] -CN，
[0139] -OH，
[0140] -S(O)2-(C1-C6)烷基，
[0141] (C1-C6)烷基，
[0142] (C1-C6)卤代烷基，
[0143] (C1-C6)烷氧基，
[0144] (C1-C6)卤代烷氧基，
[0145] (C1-C6)氨基烷氧基，
[0146] (C1-C6)羟基烷氧基，
[0147] (C3-C6)杂环烷氧基，
[0148] (C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷氧基，
[0149] 氨甲酰基，
[0150] 烷酰基，
[0151] 芳氧基，
[0152] 芳基(C1-C6)烷氧基，
[0153] 芳氧基-(C1-C6)烷基，
[0154] (C1-C6)烷氧基羰基，
[0155] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
[0156] (C1-C6)烷氧基羰基-氨基-，
[0157] (C1-C6)卤代烷基，
[0158] (C1-C6)羟基烷基，
[0159] (C2-C6)烯基，
[0160] (C2-C6)炔基，
[0161] (C2-C6)羟基炔基，
[0162] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0163] R2选自
[0164] (C1-C6)烷基，
[0165] (C1-C6)卤代烷基，
[0166] (C1-C6)羟基烷基，
[0167] (C1-C6)氨基烷基，
[0168] (C3-C10)环烷基，
[0169] (C1-C6)烷氧基，
[0170] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基；
[0171] A是任选地被一个或多个选自以下的基团取代的二环杂芳基
[0172] 卤素，
[0173] -OH，
[0174] (C1-C6)烷基，
[0175] (C1-C6)烷氧基，
[0176] (C2-C6)烯基，
[0177] (C2-C6)炔基，
[0178] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0179] 所述芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的每一个本身进一步任选地被取代。
[0180] 定义
[0181] 本文中使用的术语“药学上可接受的盐”表示式(I)的化合物的衍生物，其中如下适当地修饰母体化合物：用常规地认为药学上可接受的任意
碱或酸，将可能存在的任意游离酸性或碱性基团转
化成对应的加成盐。
[0182] 所述盐的合适例子因此可以包括碱性残基诸如氨基基团的
无机酸或有机
酸加成盐以及酸性残基诸如羧基基团的无机碱或有机碱加成盐。
[0183] 可以适当地用于制备本发明中的盐的无机碱的阳离子包含碱金属或碱土金属(诸如钾、钠、
钙或镁)的离子。
[0184] 通过使作为碱起作用的主要化合物与无机酸或
有机酸反应以形成盐而得到的那些盐包括，例如，
盐酸、
氢溴酸、
硫酸、磷酸、甲磺酸、樟脑磺酸、乙酸、
草酸、
马来酸、富马酸、
琥珀酸和
柠檬酸的盐。
[0185] 本文中使用的术语“卤素原子”或“卤素”包括氟、氯、溴和碘，优选氯或氟，可替换地将溴、碘、氯、氟称作取代基。
[0186] 术语“(C1-C6)烷基”表示直链或支链烷基，其中组分碳原子的数目是在1-6范围内。具体的烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。
[0187] 表述“(C1-C6)卤代烷基”表示上面定义的“(C1-C6)烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个卤素原子替代，所述卤素原子可以彼此相同或不同。
[0188] 所述(C1-C6)卤代烷基的例子因而可以包括卤代的烷基、多卤代的烷基和其中所有氢原子都被卤素原子替代的全卤代的烷基，例如三氟甲基或二氟甲基。
[0189] 通过类比，术语“(C1-C6)羟基烷基”或“(C1-C6)氨基烷基”表示上面定义的“(C1-C6)烷基”基团，其中一个或多个氢原子分别被一个或多个羟基(OH)或氨基替代。非限制性例子分别是羟基甲基和氨基甲基、二甲基氨基甲基、二甲基氨基乙基等。
[0190] 在本
说明书中，除非另外提供，否则氨基烷基的定义包括被一个或多个氨基基团(NR5R6)取代的烷基(即“(C1-C6)烷基”基团)。因而，氨基烷基的一个例子是单-氨基烷基诸如R5R6N-(C1-C6)烷基。
[0191] 参考如上面和下面定义的取代基R5和R6，在这里进一步解释，当R5和R6与它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环残基时，所述杂环残基中的至少一个其它环碳原子任选地被至少一个杂原子(例如N、NH、S或O)替代和/或可以带有-氧代(＝O)取代基。应当理解，所述杂环残基可能进一步任选地在环中的任何可利用的点上(即在碳原子上或在可用于取代的任何杂原子上)被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在2个邻近碳原子上的取代，在两种情况下因而形成额外的5-6元杂环。因而，所述杂环残基的例子是1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、哌嗪-4-基-2-
酮、4-甲基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,
9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、和(3aR,6aS)-5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基、8-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基、5-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基、1,1-二氧(dioxido)硫吗啉(thiomorpholin)-4-基。
[0192] 术语“(C3-C10)环烷基”表示含有3-10个环碳原子的饱和环状
烃基。非限制性例子包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基和多环环系诸如金刚烷基。
[0193] 术语“(C2-C6)烯基”表示具有一个或多个共轭或非共轭的顺式或反式构型的双键的直链或支链碳链，其中原子的数目是在2-6范围内。
[0194] 通过类比,术语“(C5-C7)环烯基”表示含有5-7个环碳原子和一个或两个双键的环烃基。
[0195] 术语“(C2-C6)炔基”表示具有一个或多个三键的直链或支链碳链，其中原子的数目是在2-6范围内。
[0196] 术语“(C2-C6)羟基炔基”表示上面定义的“(C1-C6)炔基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个羟基(OH)基团替代。
[0197] 术语“(C2-C6)氨基炔基”表示上面定义的“(C1-C6)炔基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个(-NR5R6)基团替代。
[0198] 表述“芳基”表示具有6-20个、优选6-15个环原子的单环、双环或三环碳环系，其中至少一个环是芳族的。表述“杂芳基”表示具有5-20个、优选5-15个环原子的单环、二环或三环环系，其中至少一个环是芳族的且其中至少一个环原子是杂原子(例如N、NH、S或O)。
[0199] 合适的芳基或杂芳基单环环系的例子包括，例如，苯基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异 唑基、 唑基、异噻唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、呋喃基残基等。
[0200] 合适的芳基或杂芳基二环环系的例子包括
萘基、亚联苯基、嘌呤基、喋啶基、吡唑并嘧啶基、苯并三唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并二氧杂环己烯基(benzodioxinyl)、二氢苯并二氧杂环己烯基、茚基、二氢-茚基、二氢苯并[1,4]二氧杂环己烯基、苯并噻唑-2-基、二氢苯并二氧杂环庚三烯基(dihydrobenzodioxepinyl)、苯并 嗪基、1H-吲唑-5-基、6-氟-1H-吲唑-5-基、异喹啉-6-基、噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基、噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基、1,6-萘啶-2-基残基等。
[0201] 合适的芳基或杂芳基三环环系的例子包括芴基以及前述杂芳基二环环系的苯并稠合衍生物。
[0202] 以类似的方式，表述“亚芳基”和“亚杂芳基”表示二价基团，诸如亚苯基、亚联苯基和亚噻吩基。这样的基团也通常命名为“芳烃二基”或“杂芳烃二基”基团。例如邻-亚苯基也称作苯-1,2-二基。亚噻吩基可替换地称作噻吩二基。
[0203] 衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷基”表示饱和的或部分不饱和的单环(C3-C6)环烷基，其中至少一个环碳原子被至少一个杂原子(例如N、S或O)替代或可以带有-氧代(＝O)取代基。所述杂环烷基(即杂环残基或基团)可能进一步任选地在环的可利用点上(即在碳原子上或在可用于取代的杂原子或杂基团上)被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在2个邻近碳原子上的取代，在两种情况下因而形成额外的稠合的5-6元杂环。(C3-C6)杂环烷基的非限制性例子有以下代表：吡咯烷基、咪唑烷基、噻唑烷基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、二氢-或四氢-吡啶基、四氢吡喃基、吡喃基、2H-或4H-吡喃基、二氢-或四氢呋喃基、二氢异 唑基、吡咯烷-2-酮-基残基等。
[0204] 所述杂环残基的具体例子是1-吡咯烷基、1-甲基-2-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、哌嗪-4-基-2-酮、4-甲基哌嗪-1-基、1-甲基哌啶-4-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基、2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基和(3aR,6aS)-5-甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基。
[0205] 术语“芳基(C1-C6)烷基”表示与直链或支链烷基连接的芳基环，其中组分碳原子的数目是在1-6的范围内，例如苯基甲基(即苄基)、苯基乙基或苯基丙基。
[0206] 术语“烷酰基”表示HC(O)-或烷基羰基(例如(C1-C6)烷基C(O)-，其中基团“烷基”具有上面定义的含义。非限制性例子包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基。
[0207] 术语“氨甲酰基”表示氨基羰基衍生的基团-C(O)NR5R6，其中R5和R6如上面在氨基烷基的定义中所定义，且包括取代的(优选的氨基烷基取代的)和螺取代的衍生物。这样的氨甲酰基的非限制性例子是氨基羰基、N,N-二甲基-氨基羰基、(3,3-二氟环丁基)-氨基羰基、哌嗪-1-羰基、吗啉-N-羰基、吗啉-N-羰基和N-(2-(二甲基氨基)乙基)氨基羰基、N-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-甲基氨基羰基、N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基氨基羰基、4-甲基哌嗪-1-羰基、4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基、N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)氨基羰基、(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-甲基-N-(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-(2-(哌啶-1-基)乙基)-氨基羰基、N-甲基-N-(2-(哌啶-1-基)乙基)氨基羰基、N-(1-甲基哌啶-4-基-甲基)-氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、5-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基、N-环丙基-氨基羰基、2-(哌啶-1-基)乙基氨基羰基。术语“羟基羰基”表示末端基团HOC(O)-。
[0208] 术语“(C1-C6)烷氧基(alkoxy)”或“(C1-C6)烷氧基(alkoxyl)”表示通过氧桥(oxygen bridge)连接的
指定数目的碳的直链或支链烃。
[0209] 同样，术语“(C1-C6)烷硫基”表示通过硫(-S-)桥连接的指定数目的碳的直链或支链烃。
[0210] 衍生出的表述“(C1-C6)卤代烷氧基(haloalkoxy)”或“(C1-C6)卤代烷氧基(haloalkoxyl)”表示通过氧桥连接的上面定义的卤代烷基。非限制性例子是三氟甲氧基。
[0211] 通过类推，衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷氧基”和“(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷氧基”分别表示通过氧桥连接的杂环烷基和成链的杂环烷基-烷氧基。这样的(C3-C6)杂环烷氧基和(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷氧基的非限制性例子分别是(哌啶-4-基)氧基、1-甲基哌啶-4-基)氧基、2-(哌啶-4-基)乙氧基、2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基和2-(4-吗啉代)乙氧基。
[0212] 衍生出的表述“芳氧基”和“芳基(C1-C6)烷氧基”表示通过氧桥连接的芳基基团和成链的芳基-烷氧基。它们的非限制性例子分别是苯氧基和苄氧基。
[0213] 同样，衍生出的表述“(C3-C6)杂环烷基-(C1-C6)烷基”和“(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基”表示经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的上面定义的杂环烷基和环烷基。非限制性例子是哌啶-4-基-甲基、环己基乙基。
[0214] 衍生出的表述“(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基”表示经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。非限制性例子分别是甲氧基甲基。
[0215] 衍生出的表述“(C1-C6)烷氧基羰基”表示经由羰基与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。非限制性例子是乙氧基羰基。
[0216] 其它衍生的表述如“(C1-C6)烷氧基羰基-氨基”表示经由羰基、继之以氨基基团(-NR5-)与分子的其余部分连接的上面定义的烷氧基。非限制性例子是叔丁氧基-羰基-氨基。
[0217] 因而，“(C1-C6)烷氧基羰基(C3-C6)杂环烷基(C1-C6)烷基”表示以所述次序成链并经由指定数目的碳的烷基与分子的其余部分连接的烷氧基羰基杂环烷基取代基。非限制性例子是(叔丁基哌啶-1-
甲酸酯)-4-基-甲基。
[0218] “(C3-C6)杂环烷氧基烷酰基”表示以所述次序成链并经由羰基与分子的其余部分连接的如上定义的(C3-C6)杂环烷氧基和烷酰基取代基。非限制性例子是((哌啶-4-基)氧基)乙酰基。
[0219] 衍生出的表述“(C1-C6)氨基烷氧基”表示经由氧桥连接的如上定义的(C1-C6)氨基烷基，非限制性例子是(2-(二甲基氨基)乙氧基。
[0220] 表述“(C1-C6)羟基烷氧基”表示经由氧桥与分子的其余部分连接的如上定义的羟基烷基。非限制性例子是羟基乙氧基。
[0221] 衍生出的表述“(C1-C6)氨基烷基羰基”表示经由羰基与分子的其余部分连接的如上定义上面定义的“(C1-C6)氨基烷基”基团。
[0222] 非限制性例子是2-(哌啶-1-基)乙基羰基，2-(吡咯烷-1-基)乙酰基。衍生出的表述“(C1-C6)氨基烷基氨甲酰基”表示被(C1-C6)氨基烷基取代的如上定义的“氨甲酰基”基团(即-C(O)NR5R6，其中例如R6是(C1-C6)氨基烷基)。
[0223] 非限制性例子是2-(二甲基氨基)乙基氨甲酰基。
[0224] 同样，衍生出的表述“氨甲酰基-(C1-C6)烷基”表示通过指定数目的碳的烷基桥与分子的其余部分连接的如上定义的“氨甲酰基”基团(即基团-(C1-C6)烷基-C(O)NR5R6)。非限制性例子是3-氧代-3-(吡咯烷-1-基)丙基。
[0225] 术语“芳基烷酰基”表示芳基C(O)或芳基烷基羰基[例如芳基(C1-C6)烷基C(O)-]，其中芳基和烷基具有上面定义的含义。非限制性例子是苯甲酰基、苯基乙酰基、苯基丙酰基或苯基丁酰基残基。
[0226] 表述“饱和的、部分不饱和的或芳族的5或6元环烷烃-二基、亚芳基-二基或杂环-二基”表示具有5或6个元素的合适的连位(vicinal)二取代的环烷烃或杂环残基，包括1,2-、1,3-或1,4-苯-二基；2,3-、3,4-、4,5-或5,6-吡啶-二基；3,4-、4,5-或5,6-哒嗪-二基；
4,5-或5,6-嘧啶-二基；2,3-吡嗪二基；2,3-、3,4-或4,5-噻吩-二基/呋喃-二基/吡咯-二基；4,5-咪唑-二基/ 唑-二基/噻唑二基；3,4-或4,5-吡唑-二基/异 唑二基/异噻唑-二基，它们的饱和的或部分不饱和的类似物等。也包括非连位二取代的残基(二残基)，诸如
1,3-或1,4-苯-二基。
[0227] 本文中使用的表述“环系”表示单-或二-环或多环环系，其可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的，诸如芳基、(C3-C10)环烷基、(C3-C6)杂环烷基或杂芳基。
[0228] 本文中使用的术语“基团”、“残基”或“
片段”或“取代基”是同义的，且意图指示可与键或其它片段或分子连接的官能团或分子片段。不是在2个字母或符号之间的破折号(“-”)意在代表取代基的连接点。当用图形表示时，环状官能团中的连接点用位于可利用的环原子中的一个中的点(“·”)指示，在该处所述官能团可连接至分子的键或其它片段。
[0229] 本文中使用的氧代部分由(O)表示，作为对其它一般表示(例如(＝O))的替代。因而，以通式的方式，羰基在本文中优选地表示为-C(O)-作为其它常见表示诸如-CO-、-(CO)-或-C(＝O)-的替代。一般而言，加括号的基团是侧基，没有被包括在链中，且当认为有用时，使用括号来帮助区分直链化学式；例如磺酰基-SO2-也可能表示为-S(O)2-以消除例如关于亚磺酰基-S(O)O-的歧义。
[0230] 每当碱性氨基或季铵基团存在于式I的化合物中时，可以存在生理学上可接受的阴离子，其选自氯离子、溴离子、碘离子、三氟乙酸根、甲酸根、硫酸根、磷酸根、甲磺酸根、
硝酸根、马来酸根、乙酸根、柠檬酸根、富马酸根、
酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、
苯甲酸根、
对甲苯磺酸根、扑酸根(pamoate)和萘二磺酸根(naphthalene disulfonate)。同样地，在有酸性基团诸如COOH基团存在下，也可以存在相应的生理学阳离子盐，例如，包括碱金属或碱土
金属离子。
[0231] 本领域技术人员显而易见，式(I)的化合物当含有一个或多个立体中心时可以作为光学立体异构体存在。
[0232] 在根据本发明的化合物具有至少一个立体中心的情况下，它们可以相应地作为对映异构体存在。在根据本发明的化合物具有两个或更多个立体中心的情况下，它们可以另外作为非对映异构体存在。应当理解，所有这样的单一对映异构体、非对映异构体及其任意比例的混合物被包括在本发明的范围内。以基于基团的优先性的Cahn-Ingold-Prelog命名规则为
基础，指定带有立体中心的碳的绝对构型(R)或(S)。
[0233] 阻转异构体源自围绕单键的受阻旋转，其中旋转的空间
张力障碍足够高以允许构象异构体的分离(Bringmann G等人,Angew.Chemie Int.Ed.44(34),5384-5427,2005.doi:10.1002/anie.200462661)。
[0234] Oki将阻转异构体定义为这样的构象异构体：其在给定的
温度以超过1000秒的
半衰期互变(Oki M,Topics in Stereochemistry 14,1-82,1983)。
[0235] 阻转异构体与其它
手性化合物的差别在于，在许多情况下，它们可以发生热平衡，而在手性的其它形式，异构化经常仅仅是化学上可能的。
[0236] 通过手性拆分法诸如选择性结晶，阻转异构体的分离是可能的。在阻转-对映选择性的或阻转选择性的合成中，一种阻转异构体以另一种阻转异构体为代价而形成。阻转选择性的合成可以通过使用手性助剂进行，如Corey Bakshi Shibata(CBS)催化剂，即一种从脯氨酸衍生出的不对称催化剂；或在异构化反应有利于一种阻转异构体超过另一种阻转异构体时，通过基于
热力学平衡的方案。
[0237] 在本发明的范围内包括式(I)的化合物的外消旋形式以及单独的阻转异构体(基本上不含有其相应的对映异构体)和富含立体异构体的阻转异构体混合物。
[0238] 因而，本发明进一步涉及在本发明的范围内包括的式(I)的化合物的对应氘化衍生物。
[0239] 应当理解，在上面和在下文关于式I的化合物描述的所有优选的基团或实施方案可以彼此组合并在细节上做必要的修正后同样适用。
[0240] 在第一个优选的实施方案中，本发明涉及由式Ia表示的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中X1和X2中的每一个是碳原子：
[0241]
[0242] 其中R3和R4在每次出现时独立地选自：
[0243] -H，
[0244] -CN，
[0245] 卤素，
[0246] -NR5R6，
[0247] (C1-C6)烷基，
[0248] (C1-C6)卤代烷基，
[0249] (C1-C6)羟基烷基，
[0250] (C1-C6)氨基烷基，
[0251] (C3-C10)环烷基，
[0252] (C2-C6)烯基，(C5-C7)环烯基，
[0253] (C2-C6)炔基，
[0254] (C2-C6)羟基炔基，
[0255] 羟基羰基，
[0256] -OR7，
[0257] (C1-C6)烷硫基，
[0258] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，
[0259] (C1-C6)烷氧基羰基，
[0260] (C1-C6)氨基烷基羰基，
[0261] 氨甲酰基，
[0262] 芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基；
[0263] 其中所述芳基、杂芳基和(C3-C6)杂环烷基中的任一个本身任选地和独立地被一个或多个选自以下的基团取代：
[0264] 卤素，
[0265] -OH，
[0266] (C1-C6)烷基，
[0267] (C1-C6)卤代烷基，
[0268] (C1-C6)羟基烷基，
[0269] (C1-C6)氨基烷基，
[0270] (C3-C10)环烷基，
[0271] (C2-C6)烯基，
[0272] (C5-C7)环烯基，
[0273] (C2-C6)炔基，
[0274] (C2-C6)羟基炔基，
[0275] (C1-C6)烷氧基，
[0276] (C1-C6)氨基烷基羰基；
[0277] 所有其它变量如上面所定义。
[0278] 在该第一组式Ia的化合物中特别优选的是这样的化合物或其药学上可接受的盐和
溶剂化物：其中A是异喹啉-6-基、4-甲基异喹啉-6-基或1H-吲唑-5-基，
[0279] X1和X2中的每一个是碳原子；
[0280] R3在每次出现时独立地是H或选自：
[0281] -CN，
[0282] 卤素，其为溴、氯、氟或碘，
[0283] (C1-C6)烷氧基羰基，其为乙氧基羰基，
[0284] 氨甲酰基，其为氨基羰基、N-(2-(二甲基氨基)乙基)氨基羰基或4-甲基哌嗪-1-羰基；且
[0285] R4在每次出现时独立地选自：H；
[0286] -CN；
[0287] 卤素，其为溴、氯、氟或碘；
[0288] -NR5R6，其为氨基、4-甲基哌嗪-1-基、3-(哌啶-1-基)丙酰氨基、2-(吡咯烷-1-基)乙酰氨基、((1-甲基哌啶-4-基)氧基)乙酰氨基；
[0289] (C1-C6)烷基，其为甲基、乙基、丙基或异丙基；
[0290] (C1-C6)卤代烷基，其为三氟甲基；
[0291] (C1-C6)羟基烷基，其为羟基甲基；
[0292] (C1-C6)烷硫基，其为甲硫基；
[0293] (C1-C6)氨基烷基，其为氨基甲基、二甲基氨基甲基、2-(N,N-二甲基氨基)乙基、N-甲基-N-(2甲氧基乙基)-2-氨基乙基、2-(N-甲基-N-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)氨基)乙基、3-甲氧基氮杂环丁基-乙基、3-(N,N-二甲基氨基甲基)氮杂环丁基-乙基、3-(甲氧基甲基)氮杂环丁基-乙基、N-吡咯烷基-乙基、N-哌啶基-乙基、4-甲氧基哌啶基-乙基、4-(吡咯烷-
1-基)哌啶基-乙基、4-甲基哌嗪-N-基-乙基、(1-乙酰基哌嗪-4-基)-乙基、吗啉-N-基-乙基、(硫吗啉1,1-二氧(dioxide))-4-基-乙基、(8-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基、(3-(哌啶-1-基)丙酰氨基)甲基；
[0294] 羟基羰基；
[0295] (C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，其为甲氧基甲基；
[0296] (C1-C6)烷氧基羰基，其为乙氧基羰基；
[0297] 氨甲酰基，其为氨基羰基、N,N二甲基-氨基羰基、(3,3-二氟环丁基)-氨基羰基、3-氧代-3-(吡咯烷-1-基)丙基-氨基羰基、哌嗪-1-羰基、吗啉-N-羰基、吗啉-N-羰基和N-(2-(二甲基氨基)乙基)氨基羰基、N-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-甲基氨基羰基、N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基氨基羰基、4-甲基哌嗪-1-羰基、4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基、N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)氨基羰基、(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-甲基-N-(2-吗啉代-乙基)氨基羰基、N-(2-(哌啶-1-基)乙基)氨基羰基、N-甲基-N-(2-(哌啶-1-基)乙基)氨基羰基、N-(1-甲基哌啶-4-基-甲基)氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)氨基羰基、5-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2羰基、N-环丙基-氨基羰基、2-(哌啶-1-基)乙基氨基羰基；芳基，其为对甲氧基-苯基、间甲氧基-苯基、邻甲氧基-苯基；
[0298] (C3-C6)杂环烷基，其为氧杂环
丁烷-3-基、(2-(哌啶-1-基)乙基羰基)哌啶-4-基，[0299] R1选自：
[0300] (C1-C6)烷基，其为异戊烷基，
[0301] (C3-C10)环烷基，其为环己烷基、4-(三氟甲基)环己基、金刚烷基，
[0302] 芳基(C1-C6)烷基，其为苯基乙基，
[0303] 芳基，其为对甲基苯基、4-(叔丁基)苯基、4-(羟基)苯基、对氟苯基、对氯苯基、对溴苯基、4-氯-2-氟-苯基、4-氯-3-氟-苯基、3-氟-4-羟基苯基、4-(三氟甲基)苯基、3-氟-4-(三氟甲基)苯基、2,3-二氟-4-(三氟甲基)苯基、4-氯-3-(三氟甲基)苯基、3-甲氧基-苯基、2,3-二氢-1H-茚-2-基、3-苯氧基苯基、2,3-二氟-4-甲基苯基、3-氟-4-甲基苯基、4-(二氟甲基)-3-氟苯基；
[0304] 杂芳基，其为哌啶基、2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-2-基、苯并[d]噻唑-2-基、2-氯-5-吡啶基、1H-吲哚-6-基、2-苯基噻唑-5-基、2-苯基 唑-5-基、苯并[b]噻吩-
6-基、1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基；
[0305] (C3-C6)杂环烷基，其为1-甲基哌啶-4-基、吗啉-N-基；
[0306] R2选自(C1-C6)烷基，其为甲基，(C3-C10)环烷基，其为环丙基，(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基，其为甲氧基甲基。
[0307] 在第二个优选的实施方案中，本发明涉及由式Ib表示的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中p是0且X1和X2中的每一个是氮：
[0308]
[0309] 所有其它变量R1、R2、A如上面所定义。
[0310] 在根据本发明的该第二个实施方案中特别优选的是根据式Ib的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中A是1H-吲唑-5-基，
[0311] X1和X2中的每一个是氮原子；
[0312] R1是芳基，其为对氟苯基、对氯苯基、4-(三氟甲基)苯基、3-氟-4-(三氟甲基)苯基；
[0313] R2是(C1-C6)烷基，其为甲基。
[0314] 特别优选的是根据式I的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中A选自1H-吲唑-5-基、6-氟-1H-吲唑-5-基、异喹啉-6-基、噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基、噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基、1,6-萘啶-2-基的二环杂芳基；所有其它变量如上面所定义。
[0315] 本发明的一个甚至更优选的实施方案是式Ia的化合物，其中R3是H；R4是(C1-C6)氨基烷基；R1是被一个或多个选自卤素和(C1-C6)卤代烷基的基团取代的芳基；A是异喹啉-6-基，R2是(C1-C6)烷基，其为甲基。
[0316] 在第三个优选的实施方案中，本发明涉及由式Ic表示的如上定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中X1是氮原子且X2是碳原子：
[0317]
[0318] 所有其它变量R1、R2、A如上面所定义。
[0319] 本发明也提供了一种药物组合物，其包含单独的或与一种或多种活性成分组合的、与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式I、Ia或Ib的化合物或其药学上可接受的盐。
[0320] 在一个方面，本发明提供了用于用作药物的根据本发明的化合物。
[0321] 在另一个方面，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与ROCK酶机制有关的障碍，特别是用于治疗障碍诸如肺疾病。
[0322] 具体地，本发明提供了用于预防和/或治疗肺疾病的化合物，所述肺疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺疾病COPD、特发性肺纤维化(IPF)、肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
[0323] 此外，本发明提供了用于预防和/或治疗与ROCK酶机制有关的障碍的方法，所述方法包括给需要这种治疗的患者施用治疗有效量的本发明的化合物。
[0324] 具体地，本发明提供了用于预防和/或治疗与ROCK酶机制有关的障碍的方法，其中所述障碍是哮喘、慢性阻塞性肺疾病COPD特发性肺纤维化(IPF)、肺性高血压(PH)和尤其是肺动脉高血压(PAH)。
[0325] 根据具体实施方案，本发明提供了在下表中列出的化合物及其药学上可接受的盐。
[0326]
[0327]
[0328]
[0329]
[0330]
[0331]
[0332]
[0333]
[0334]
[0335]
[0336] 根据本发明的式(I,Ia,Ib和Ic)的化合物，包括上文列出的所有化合物：
[0337]
[0338] 可以使用下述一般方法和操作或通过使用本领域普通技术人员容易得到的轻微
修改的方法从容易得到的起始原料制备。尽管本文显示或描述了本发明的特定实施方案，但是本领域技术人员会认识到，使用本文所述的方法或通过使用其它已知方法、试剂和起始原料可以制备本发明的所有实施方案或方面。当给出典型的或优选的工艺条件(process conditions)(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压强等)时，也可以使用其它工艺条件，除非另有说明。尽管最适反应条件可以随使用的特定反应物或溶剂而改变，但是这样的条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作容易地确定。
[0339] 因而，在下面描述的和在下述方案中报告的制备方法不应当视作限制可用于制备本发明的化合物的合成方法的范围。
[0340] 在某些情况下，需要一个步骤以便掩蔽或保护敏感的或反应性的部分，根据一般化学原理已经采用了通常已知的保护基(T.W.Greene,P.G.M.Wuts,Protective groups in organic synthesis,第4版,Wiley,2007)。
[0341] 式(I,Ia,Ib和Ic)的化合物，包括上文列出的所有化合物，通常可以根据在下面方案中所示的操作来制备。在具体细节或步骤不同于一般方案的情况下，它已经在具体
实施例中和/或在额外方案中详述。
[0342]
[0343] 借助于式V的氨基五元杂环、式VI的
醛和式IV的β-酮酰胺的多组分组装经由Biginelli氏反应根据方案1(途径A)可以制备式I的化合物。Biginelli反应可以通过L.L.Kurti,B.Czako；Strategic applications of Named reactions in Organic Syntheses,Elsevier academic Press,2005所述的多种反应条件完成，并由本领域技术人员容易地改进和优化。在某些情况下，其中(R)p含有伯或仲氨基基团，本领域技术人员显而易见，这样的氨基部分可能需要一个或多个保护基以便掩蔽氨基基团反应性。氨基部分的合适保护基可以是氨基甲酸酯诸如Boc(叔丁氧基羰基)、Cbz(苄氧基羰基)或氨基甲酸乙酯，其将根据一般化学原理在合成的最适当阶段除去(T.W.Greene,P.G.M.Wuts,Protective groups in organic synthesis,第4版,Wiley,2007)。
[0344] 可以用于制备式I的化合物的反应条件由以下组成：在有或没有碱(诸如NaHCO3、吡啶或哌啶)或酸催化剂(诸如H2SO4、TsOH或Yb(OTf)3)存在下，在极性的合适溶剂诸如DMF、THF、EtOH或MeCN中加热适当的3种组分(IV、V和VI)。所述反应通常在高于室温的温度进行，且可以花费从数小时至数天的时间。通过在极性的
有机溶剂(诸如MeCN或DMF)中在高温(100-120℃或更高)使合适的β-酮酯II(例如叔丁基酯、甲基酯或乙基酯衍生物)与适当的氨基杂环III反应，通过转酰胺基反应可以制备β-酮酰胺IV。在另一个方案中，通过金属催化的偶联诸如Buchwald异偶联，用适当的杂环卤化物IIIa和β-酮酰胺IIa可以制备中间体IV。例如在有合适的钯催化系统诸如Pd2(dba)3/Xantphos存在下通过在极性的有机溶剂(诸如二 烷或DMF)中在约100℃加热几小时，可以使杂环溴化物IIIa与β-酮酰胺IIa反应。方案1(途径A)提供了至少一种用于制备实施例1-40、实施例113-117和实施例130、136的非限制性合成途径。任选地通过在有合适的
偶联剂(诸如HATU、COMU或EDC)和碱(诸如DIPEA、TEA或DMAP)存在下在合适的有机溶剂(诸如DMF、THF或DCM)中使中间体VIII和中间体III进行酰胺偶联，可以制备式I的化合物(根据方案_1路径B)。通常，所述反应在约室温进行几小时直到过夜。通过对应的保护的
羧酸VII的去保护可以得到中间体VIII，且它取决于用作PG的酯的类型。例如当PG是叔丁基时，可以在有TMSOTf/DIPEA或TFA存在下在非极性有机溶剂(诸如DCM或Et2O)中进行去保护。通过合适的保护的β-酮酯II、氨基五元杂环V和醛VI的组装，经由Biginelli氏反应可以制备中间体VII，且它可以使用与上面关于式I的化合物的制备已经描述的相同反应条件来制备。方案1(途径B)提供了至少一种用于制备实施例41和42的非限制性合成途径。
[0345] 在(R)p中含有伯或仲氨基基团的式I的化合物可以进一步分别转化成含有对应的伯或仲酰胺的本发明的化合物。酰胺偶联可以通过多种反应条件进行，例如在有合适的偶联剂(诸如HATU、HBTU或COMU)存在下在有有机碱(诸如DIPEA或TEA)存在下在极性的有机溶剂(诸如DMF或二 烷)中在室温或更高温度可以使伯胺或仲胺和羧酸反应以产生期望的酰胺产物。描述的所述转化提供了至少一种用于制备实施例131-135和实施例137A/137B和138A/138B的非限制性合成途径。
[0346] 根据方案_2，通过在有合适的偶联剂(诸如HATU、COMU或EDC)和碱(DIPEA、TEA或DMAP)存在下在合适的有机介质(诸如DMF、NMP、DCM或THF)中Ia”(其中R3或R4是羧酸(R3或R4＝-COOH))与式IX的胺的酰胺偶联，可以制备式Ia’的化合物，其中R3或R4是酰胺(R3或R4＝-C(O)NR5R6)。通过在特定条件下对应的酯Ia”’(R3或R4＝-C(O)OPG)的去保护，可以制备式Ia”的化合物，其中R3或R4是羧酸(R3或R4＝-COOH)，所述特定条件取决于选择的PG的类型且是本领域技术人员容易使用的。可替换地，使用式IX的胺通过转酰胺基反应可以从Ia”’(R3或R4＝-C(O)OPG)制备化合物Ia’(R3或R4＝-C(O)NR5R6)。例如，当PG是Et或Me时，该转化可以在有合适的刘易斯酸(诸如AlMe3或DABAL)存在下在合适的非质子有机溶剂(诸如甲苯或1,2-二氯乙烷)中在室温或更高温度通过酯Ia”’和胺IX的反应完成。
[0347] 在本发明的另一个实施方案中，通过还原对应的前体Ia”’，其中R3或R4是酯(R3或R4＝-C(O)OPG)，可以制备式Iaiv的化合物，其中R3或R4是羟基亚甲基残基(R3或R4＝-CH2OH)。当PG是甲基或乙基时，该转化可以在合适的非质子有机溶剂(诸如THF或Et2O)中在通常低于室温的温度通过酯与还原剂(诸如LAH或DIBAL-H)的反应完成。
[0348] 在还原胺化条件下可以从醛中间体X和胺IX制备式Iav的化合物，其中R3或R4是亚甲基胺(R3或R4＝-CH2NR5R6)。例如，使用还原剂诸如NaBH(OAc)3、NaBH3CN或NaBH4可以在溶剂(诸如DCM、MeOH或THF)中执行还原胺化。它可用于在加入还原剂之前使X和IX反应。所述反应在室温平稳地进行几小时。通过在合适的有机溶剂(诸如DCM或THF)中使用
氧化剂(诸如戴斯-马丁过碘烷(Dess-Martin periodinane)、IBX或MnO2)选择性地氧化对应的醇Iaiv(R3或R4＝-CH2OH)，可以制备中间体X。
[0349] 方案2
[0350]
[0351] 任选地通过首先将醇部分转化成离去基团LG诸如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或卤素，然后用胺IX替换LG，可以从对应的醇Iaiv(R3或R4＝-CH2OH)制备式Iav的化合物，其中R3或R4是亚甲基胺(R3或R4＝-CH2NR5R6)。例如，当将甲磺酸酯用作LG时，可以在有机溶剂(诸如DMF、THF或MeCN)中在有有机碱(诸如DIPEA或TEA)存在下通常在低于室温的温度进行Iaiv(R3或R4＝-CH2OH)与Ms-Cl的反应。被活化为甲磺酸酯或卤素的醇也可以用于在室温或更低温度在极性的有机溶剂(诸如THF、DMF或MeCN)中的胺IX的烷基化。方案2提供了至少一种用于制备实施例43-110和实施例118-128的非限制性合成途径。
[0352] 方案2也可以用于合成式Ic的化合物，如在实施例129的情况下。
[0353] 可以任选地通过还原对应的腈Iavi(R3或R4＝-CN)来制备式Iav的化合物，其中R3或R4是亚甲基伯胺(R3或R4＝-CH2NH2)。还原可以用原位制备的
硼化镍或通过催化氢化来执行。可以以与上面在方案_1(途径A)中关于式I的化合物的制备已经描述的相同的方式制备对应的式Iavi的腈(其中R3或R4＝-CN)。通过根据所述方法的CN还原可以制备实施例111和
112。
[0354] 式I的化合物含有至少一个立体中心，如在下图中作为星号*标记的。
[0355]
[0356] 借助于手性色谱法可以从对应的母体外消旋体制备对映异构纯的(enantiomerically pure)化合物。每当在一个或多个式I的取代基中存在一个或多个另外的立体中心时，则通过不同的立体异构体来表征结构。来自非对映异构体混合物的立体化学纯的化合物可以通过手性分离来制备，或通过色谱分离单一非对映异构体、随后进一步手性分离成纯的对映异构体来逐步制备。
[0357] 在一个更方便的方案中，在上述的反应中使用对映异构纯的中间体可以完成每种单一立体异构体的合成。
[0358] 本发明的化合物Ia、Ib和Ic可以在理论上作为由5,6-二环环系内的NH互变异构化产生的异构体的混合物存在，其中所述NH可以存在于如下所述的6-元环或5-元环中。
[0359]
[0360] 实际上，在某些情况下，甚至当不可分析检测时，互变异构体存在并认为都实现本发明的化合物。
[0361] 本发明的化合物是激酶活性、尤其是Rho-激酶活性的抑制剂。一般而言，作为Rock抑制剂的化合物可用于治疗许多与ROCK酶机制有关的障碍。
[0362] 在一个实施方案中，通过本发明的化合物可以治疗的障碍包括青光眼、炎性肠病(IBD)以及选自哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、间质性肺病诸如特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)的肺疾病。
[0363] 在另一个实施方案中，通过本发明的化合物可以治疗的障碍选自哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和间质性肺病诸如特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
[0364] 在另一个实施方案中，所述障碍选自特发性肺纤维化(IPF)和肺动脉高血压(PAH)。
[0365] 本发明的治疗方法包括向有此需要的患者施用安全且有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。如本文中使用的，关于式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其它药学活性剂的“安全且有效量”是指这样的化合物的量：其足以治疗患者的病症，但是足够低以避免严重的
副作用，尽管如此它可以常规地由熟练的技术人员确定。可以一次性施用或根据定量施用方案施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，在所述定量施用方案中，在给定时期的变化的时间间隔施用若干剂量。典型日剂量可以根据所选择的具体施用途径而变化。
[0366] 本发明还提供了与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式(I)的化合物的药物组合物，例如在Remington’s Pharmaceutical Sciences Handbook,XVII Ed.,Mack Pub.,N.Y.,U.S.A.中描述的那些。
[0367] 可以根据患者需要施用本发明的化合物和它们的药物组合物，例如，口服、经鼻、肠胃外(皮下、静脉内、肌内、胸骨内和输注)、通过吸入、直肠、
阴道、外用(topically)、局部(locally)、透皮和通过眼
给药。
[0368] 可以将各种固体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括如下固体剂型：片剂、软胶囊(gelcap)、胶囊剂、胶囊形片剂(caplets)、颗粒剂、锭剂和整装散剂(bulk powders)。可以将本发明的化合物单独施用，或与各种药学上可接受的载体、稀释剂(诸如
蔗糖、甘露醇、乳糖、
淀粉)和已知的赋形剂组合施用，所述赋形剂包括助悬剂、增溶剂、缓冲剂、
粘合剂、崩解剂、
防腐剂、
着色剂、
调味剂、
润滑剂等。定时释放胶囊剂、片剂和凝胶剂在本发明的化合物的给药中也是有利的。
[0369] 还可将各种液体口服剂型用于施用本发明的化合物，包括水溶液剂和非水溶液剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这样的剂型还可以含有合适的已知的惰性稀释剂诸如水和合适的已知的赋形剂诸如防腐剂、润湿剂、
甜味剂、调味剂、以及用于乳化和/或悬浮本发明的化合物的试剂。例如，可以以等渗无菌溶液的形式静脉内注射本发明的化合物。其它制剂也是可能的。
[0370] 通过将化合物与合适的赋形剂诸如可可脂、水杨酸盐和聚乙二醇混合，可以制备用于本发明的化合物的直肠施用的栓剂。
[0371] 用于阴道施用的制剂可以呈乳膏剂、凝胶、糊剂、
泡沫或喷雾剂的形式，其除了活性成分之外还含有也已知的诸如合适的载体。
[0372] 对于外用施用，所述药物组合物可以是适于施用于
皮肤、眼、
耳或鼻的乳膏剂、
软膏剂、搽剂、洗剂、乳剂、混悬剂、凝胶剂、溶液剂、糊剂、散剂、喷雾剂和滴剂的形式。局部给药还可以包括通过装置(如
透皮贴剂)进行
透皮给药。
[0373] 对于治疗呼吸道疾病，根据本发明的化合物优选地通过吸入来施用。
[0374] 可吸入的制剂包括可吸入的散剂、含有推进剂的定量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂。
[0375] 对于作为干粉给药，可以使用根据
现有技术已知的单或多剂量吸入器。在该情况下，该粉末可以填充在明胶、塑料或其它胶囊、药筒或泡罩包中或在储器中。
[0376] 可以将通常无毒且对本发明化合物是化学惰性的稀释剂或载体(例如乳糖)或适于改善可吸收分数(respirable fraction)的任意其它其它添加剂加入到粉末化的本发明的化合物中。
[0377] 包含推进气体(如氢氟烷烃)的吸入气雾剂可以包含溶液或分散形式的本发明的化合物。推进剂驱动的制剂还可以包含其它成分，例如共溶剂、稳定剂或任选的其它赋形剂。
[0378] 包含本发明化合物的不含推进剂的可吸入制剂可以是在水性、醇性或水醇性介质中的溶液或悬浮液形式，且它们可以通过从现有技术已知的喷射或超声
喷雾器或通过软雾喷雾器诸如 来递送。
[0379] 本发明的化合物可以作为唯一活性剂施用，或与其它药物活性成分联合施用(即作为在
固定剂量组合中或在单独配制的活性成分的
联合治疗中施用的共治疗剂)，所述其它药物活性成分选自：有机硝酸盐(organic nitrate)和NO供体；吸入的NO；可溶性
鸟苷酸环化酶(sGC)的刺激物；prostaciclin类似物PGI2和前列环素受体的激动剂；抑制环鸟苷酸(cGMP)和/或环腺苷酸(cAMP)的降解的化合物，诸如磷酸二酯酶(PDE)1、2、3、4和/或5的抑制剂，特别是PDE 5抑制剂；人嗜中性粒细胞性弹性蛋白酶抑制剂；抑制信号转导级联的化合物，诸如酪氨酸激酶和/或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂；抗血栓形成剂，例如血小板聚集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶物质；用于降低血压的活性物质，例如钙拮抗剂、血管紧张素II拮抗剂、ACE抑制剂、内皮缩血管肽拮抗剂、肾素抑制剂、醛固酮合酶抑制剂、α受体阻滞剂、β受体阻滞剂、盐皮质
激素受体拮抗剂；中性内肽酶抑制剂；渗透剂；ENaC阻滞剂；抗炎剂，包括皮质类固醇和趋化因子受体的拮抗剂；支气管扩张剂例如β2激动剂和毒蕈碱拮抗剂；抗组胺药物；镇咳药；抗生素诸如大环内酯和DNA酶药用物质和选择性切割剂诸如重组人脱氧核糖核酸酶I(rhDNA酶)；抑制Smad2和Smad3的ALK5和/或ALK4磷酸化的药剂；
色氨酸水解酶1(TPH1)抑制剂和多激酶抑制剂。
[0380] 在一个优选的实施方案中，将本发明的化合物与以下药剂联合施用：磷酸二酯酶V诸如西地那非、伐地那非和他达拉非；有机硝酸盐和NO供体(例如硝普钠、硝基甘油、单硝酸异山梨酯、硝酸异山梨酯、吗多明或SIN-1和吸入的NO)；合成的prostaciclin类似物PGI2诸如伊洛前列素、曲前列尼尔(treprostinil)、依前列醇和贝前列素；前列环素受体的激动剂诸如selexipag和WO 2012/007539的化合物；可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的刺激物如利奥西呱和酪氨酸激酶如伊马替尼、索拉非尼和尼洛替尼和内皮缩血管肽拮抗剂(例如马昔腾坦、波生坦、西他生坦和安立生坦(ambrisentan))。
[0381] 本发明的化合物的剂量取决于多种因素，包括要治疗的具体疾病、症状的严重性、给药途径、剂量间隔
频率、使用的具体化合物、化合物的效力、毒理学特性(profile)和药代动力学特性。
[0382] 有利地，可以在例如0.001至1000mg/天、优选0.1至500mg/天的剂量，施用式(I)化合物。
[0383] 当通过吸入途径施用式(I)化合物时，优选地以被包含在0.001至500mg/天之间、优选0.1至100mg/天之间的剂量施用它们。
[0384] 包含本发明的化合物的药物组合物适合通过吸入来施用，诸如可吸入的散剂、含有推进剂的计量气雾剂或不含推进剂的可吸入制剂。
[0385] 本发明也涉及一种装置，其包含含有根据本发明的化合物的药物组合物，所述装置可以是单次剂量或多次剂量
干粉吸入器、定量吸入器和软雾(soft mist)型
雾化器。
[0386] 中间体和实施例的制备
[0387] 一般实验细节
[0388] 通过色谱法纯化表示使用 Companion纯化系统或Biotage SP1纯化系统的纯化。在使用 SPE Si II筒纯化产物的情况下，‘Isolute SPE Si筒’表示含有未结合的活化
二氧化硅(silica)的预填充聚丙烯柱，其含有具有50μm的平均大小和标称 孔隙率的不规则颗粒。合并含有所需产物的级分(通过TLC和/或LCMS分析鉴别)，并在
真空中浓缩。在使用SCX-2筒的情况下，‘SCX-2筒’表示含有未末端加帽的丙基磺酸官能化的
二氧化硅强阳离子交换
吸附剂的 预填充聚丙烯柱。在将HPLC用于纯化(通过MDAP纯化)的情况下，合并含有所需产物的级分(通过TLC和/或LCMS分析鉴别)，并使用Biotage EV10
蒸发器除去溶剂。可替换地，将合并的产物级分低压冻干。
[0389] 在Varian Unity Inova 400波谱仪(具有运行在400MHz的5mm倒置检测三共振
探头)上，或在Bruker Avance DRX 400波谱仪(具有运行在400MHz的5mm倒置检测三共振TXI探头)上，或在Bruker Avance DPX 300波谱仪(具有运行在300MHz的标准5mm双频率探头)上，或在Bruker Fourier 300波谱仪(具有运行在300MHz的5mm双探头)上，得到NMR谱。以相对于四甲基硅烷的ppm给出迁移。
[0390] 用Structure To Name Enterprise 12.0 CambridgeSoft(Perkin Elmer)产生实施例和中间体的化学名称。
[0391] 在后处理中使用的常见无机盐的溶液是水溶液。盐水表示NaCl的饱和水溶液。除非另外指出。
[0392] LC-MS方法1
[0393] 将具有C18-反相柱(100×2.1mm Acquity BEH，具有1.7μm粒度)的Waters Micromass ZQ2000质谱仪维持在40℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲
酸洗脱。
[0394] 梯度：
[0395]
[0396] 检测-MS,UV PDA
[0397] MS电离方法-电喷射(正/负离子)。
[0398] LC-MS方法2
[0399] 将具有C18-反相柱(100×2.1mm Acquity BEH，具有1.7μm粒度)的Quattro Micro质谱仪维持在40℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
[0400] 梯度：
[0401]
[0402] 检测-MS,UV PDA
[0403] MS电离方法-电喷射(正/负离子)。
[0404] LC-MS方法3
[0405] 将具有C18-反相柱(50×2.1mm Acquity BEH，具有1.7μm粒度)的Quattro Micro质谱仪维持在50℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
[0406] 梯度：
[0407]
[0408] 检测-MS,UV PDA
[0409] MS电离方法-电喷射(正/负离子)。
[0410] LC-MS方法4
[0411] 将具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna，具有3μm粒度)的Waters ZQ四极质谱仪维持在50℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
[0412] 梯度：
[0413]
[0414] 检测-MS,UV PDA
[0415] MS电离方法-电喷射(正/负离子)。
[0416] LC-MS方法5
[0417] 将具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna，具有3μm粒度)的Waters ZMD质谱仪维持在50℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
[0418] 梯度：
[0419]
[0420]
[0421] 检测-MS,UV PDA
[0422] MS电离方法-电喷射(正/负离子)。
[0423] LC-MS方法6
[0424] 将具有C18-反相柱(50×2.1mm Acquity CSH，具有1.7μm粒度)的QDa质谱仪维持在40℃，用A:水+0.1％甲酸；B:MeCN+0.1％甲酸洗脱。
[0425] 梯度：
[0426]
[0427] 检测-MS,UV PDA
[0428] MS电离方法-电喷射(正/负离子)
[0429] LC-MS方法7
[0430] 将具有C18-反相柱(50×2.1mm Acquity CSH，具有1.7μm粒度)的QDa质谱仪维持在40℃，用A:95/5水/乙腈+0.05％甲酸；B:95/5乙腈/水+0.05％甲酸洗脱。
[0431] 梯度：
[0432]
[0433]
[0434] 检测-MS,UV PDA
[0435] MS电离方法-电喷射(正/负离子)
[0436] MDAP方法(酸性的)
[0437] 除非另有说明，否则使用下述
质量导向的自动纯化(MDAP)条件：
[0438] 将具有XSELECT CSH Prep C18柱(19×250mm,5μm OBD)的Agilent Technologies 1260Infinity纯化系统维持在室温。
[0439] 流动相A:0.1％甲酸水溶液
[0440] 流动相B:0.1％的甲酸在乙腈中的溶液
[0441] 流速:20ml/min
[0442] 梯度程序:10％-95％,22min，中心在特定聚焦的梯度附近
[0443] 样品:注射20-60mg/ml的在DMSO中的溶液(+任选的甲酸和水)
[0444] MDAP方法(碱性的)
[0445] 除非另有说明，否则使用下述质量导向的自动纯化(MDAP)条件：
[0446] 将具有XSELECT CSH Prep C18柱(19×250mm,5μm OBD)的Agilent Technologies 1260Infinity纯化系统维持在室温。
[0448] 流动相B:0.1％的氨在乙腈中的溶液
[0449] 流速:20ml/min
[0450] 梯度程序:10％-95％,22min，中心在特定聚焦的梯度附近
[0451] 样品:注射20-60mg/ml的在DMSO中的溶液(+任选的甲酸和水)
[0452] SFC方法
[0454] 使用Waters Thar Prep100制备型SFC系统(P200CO2
泵,2545调节泵,2998紫外/可见光检测器,具有Stacked Injection Module的2767液体处理器)或Waters Thar Investigator半制备型系统(Waters Fluid Delivery Module,2998紫外/可见光检测器,Waters Fraction Collection Module)。为每种化合物指出了使用的柱和等度方法，并使用给出的方法分析单一对映异构体。为了达到要求的％ee纯度(>90％ee)，一些化合物可能已经经历第二个纯化过程。
[0455] 使用在说明书中指定的条件通过SFC分离立体异构体。参考按照操作得到的峰的收集次序，将分离的立体异构体称作第一异构体和第二异构体和其它异构体。
[0456] 例如
[0457] 将作为两种对映异构体的混合物得到的实施例4的化合物通过SFC分离在两个色谱峰中并命名：
[0458]
[0459] 将作为4种立体异构体的混合物得到的实施例72的化合物通过SFC分离成4个单一立体异构体峰并命名：
[0460]
[0461] 同样，实施例104的化合物
[0462]
[0463] 在实验部分中使用的缩写：
[0464] Ac 乙酰基
[0465] ATP 腺苷5′-三磷酸
[0466] Boc 苄氧基羰基
[0468] COMU 1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(carbenium)六氟
磷酸盐[0469] DABAL 双(三甲基
铝)-1,4-二氮杂双环[2.2.2]-辛烷
[0470] DIBAL-H 二异丁基氢化铝
[0471] DCM 二氯甲烷
[0472] DEA 二乙胺
[0473] DIPEA 二-异丙基乙胺
[0474] DMF N,N-二甲基甲酰胺
[0475] DMAP 二甲基氨基吡啶
[0476] DMSO 二甲基亚砜
[0477] EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺
[0479] Et2O 乙醚
[0480] h 小时
[0481] HATU (1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶 3-氧化物六氟磷酸盐)
[0482] HPLC 高效液相色谱法
[0483] IBX 2-碘酰基苯甲酸(2-iodoxybenzoic acid)
[0484] LAH 氢化铝锂
[0485] LC-MS 液相色谱法-质谱法
[0486] MD 质量导向的
[0487] MeCN 乙腈
[0488] MeOH 甲醇
[0489] Min 分钟
[0490] NMP N-甲基吡咯烷酮
[0491] Rt 保留时间
[0492] RT 室温
[0494] SM 起始原料
[0495] TEA 三乙胺
[0496] TFA 三氟乙酸
[0497] THF 四氢呋喃
[0498] Tf 三氟甲基磺酸酯
[0499] TRIS 2-氨基-2-(羟基甲基)-1,3-丙二醇
[0500] Ts 甲苯磺酰基
[0501] 在下面的操作中，通过“中间体”或“实施例”编号或步骤指示来鉴别一些起始原料。这仅仅为了辅助阅读而提供。
[0502] 已经从立体化学纯的起始原料(例如95％ee)制备以下实施例中描述的许多化合物。
[0503] 在没有描述起始原料的制备的情况下，这些是商购可得的、在文献中已知的或本领域技术人员使用标准规程可容易地得到。
[0504] 在指出的情况下，实施例中的化合物的立体化学在以下假设上指定：贯穿任意随后的反应条件，维持在起始原料的拆分立体中心处的绝对构型。
[0505] 当提及使用“类似的”或“相似的”操作时，本领域技术人员会明白，这样的操作可能包含微小变化，例如反应温度、试剂/溶剂量、反应时间、后处理条件或色谱纯化条件。
[0506] 现在将通过下述实施例进一步描述本发明。
[0507] 中间体1A至1H的制备
[0508] 中间体1A
[0509]
[0510] N-(异喹啉-6-基)-3-氧代丁酰胺(中间体1A)
[0511] 将乙酰乙酸叔丁酯(1.82ml,11mmol)和异喹啉-6-胺(1.44g,10mmol)在MeCN(10ml)中密封在反应试管中并加热至120℃保持2h。将反应混合物蒸发，然后与MeCN和乙醚的混合物一起
研磨以得到灰白色固体(1.50g)。尽管该物质含有大约10％SM，将它不经进一步纯化地用于下一步。
[0512] LCMS(方法3):Rt＝0.46min,m/z 229[M+H]+
[0513] 使用该中间体1A的类似操作，通过根据下面报告的表改变胺，制备中间体1B、1C和1D。
[0514]
[0515] 中间体1E
[0516]
[0517] 3-环丙基-N-(异喹啉-6-基)-3-氧代丙酰胺(中间体1E)
[0518] 将6-氨基异喹啉(1.0g,6.94mmol)在3-环丙基-3-氧代丙酸甲酯(5mL)中在100℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，然后应用于硅胶垫，并用DCM洗涤，然后使用5％的甲醇在DCM中的溶液洗脱。将该级分蒸发，并将得到的粗产物在100g Si筒上色谱分离，用0-5％的甲醇在DCM中的溶液洗脱。得到作为棕色油的产物(880mg)。
[0519] LCMS(方法6):Rt＝0.67min,m/z 255.1[M+H]+
[0520] 中间体1F和1G
[0521] 以类似的方式从显示的起始原料制备下述中间体1F和1G。
[0522]
[0523] 中间体1H
[0524] 步骤A
[0525]
[0526] 2-(3-溴苯基)丙腈(中间体1H-a)
[0527] 在
冰浴中在氩气下将叔丁醇钾(5.64g,50.26mmol)在叔丁醇(25mL)中的悬浮液加入3’-溴乙酰苯(3.16mL,25.13mmol)和对甲苯磺酰基甲基异氰化物(5.89g,30.16mmol)在无水DME(75mL)中的溶液中，保持内部温度低于10℃。1h以后，除去冰浴，并将混合物在室温搅拌过夜。加入水(60mL)，并将反应混合物用异己烷萃取2次。将有机相经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将得到的粗产物在220g Si筒上色谱分离，用0-10％的乙酸乙酯在异己烷中的溶液洗脱。得到作为几乎无色液体的产物(2.1g)。
[0528] LCMS(方法6):Rt＝1.36min，没有观察到质量离子
[0529] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52-7.50(m,1H),7.49-7.45(m,1H),7.31-7.28(m,1H),7.27-2.56(m,1H),3.88(q,J＝7.4Hz,1H),1.65(d,J＝1.64Hz,3H)。
[0530] 步骤B
[0531]
[0532] 2-(3-溴苯基)丙烷-1-胺(中间体1H-b)
[0533] 在室温在氩气下将硼烷二甲基硫复合物(2M的在THF中的溶液，7.29mL,14.57mmol)加入中间体1H-a(1.02mL,4.86mmol)在无水THF(10mL)中的溶液中，然后在回流下加热5h。将反应物在室温静置过夜，然后通过逐滴加入6M HCl(4mL)进行猝灭，并将混合物在回流下加热2h。将反应混合物用6N NaOH碱化，然后用DCM萃取3次。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。得到作为淡黄色液体的产物(981mg)。
[0534] LCMS(方法6):Rt＝0.76min,m/z 214.1/216.1[M+H]+
[0535] 步骤C
[0536]
[0537] N-(2-(3-溴苯基)丙基)甲酰胺(中间体1H-c)
[0538] 将中间体1H-b(980mg,4.579mmol)在甲酸乙酯(1.8mL)中的溶液在回流下加热64h，然后冷却至室温并蒸发。得到作为棕色油的粗产物(934mg)。
[0539] LCMS(方法6):1.20分钟,m/z 242.1/244.1[M+H]+
[0540] 步骤D
[0541]
[0542] 6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉(中间体1H-d)
[0543] 将多磷酸(13.8g)加入中间体1H-c(930mg,3.84mmol)并将混合物加热至160℃。然后加入五氧化二磷(1.24g,8.77mmol)并继续加热过夜。将反应混合物冷却，然后用冰小心地处理，并将存在的稠密的黑色胶质(gum)在用6N氢氧化钠溶液和DCM碱化后逐渐溶解。将水相用DCM萃取2次，然后将有机物干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将粗产物在25g Si筒上色谱分离，用10-25％的乙酸乙酯在异己烷中的溶液洗脱。第一个洗脱峰是与期望的产物一致的棕色油(254mg)。
[0544] LCMS(方法6):0.58分钟,m/z 224.0/226.0[M+H]+
[0545] 1H NMR(237297)(400MHz,CDCl3)δ8.31(t,J＝2.2Hz,1H),7.45(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.39(br s,1H),7.15(d,J＝8.0Hz,1H),3.87-3.78(m Hz,1H),3.56-3.47(m,1H),
2.94-2.83(m,1H),1.25(d,J＝7.0Hz,3H)。
[0546] 步骤E
[0547]
[0548] 6-溴-4-甲基异喹啉(中间体1H-e)
[0549] 将二氧化锰(8.15g,93.7mmol)加入中间体1H-d(1.40g,6.25mmol)在1,4-二 烷(85mL)中的溶液中，将混合物在回流下加热过夜。将反应混合物冷却，然后穿过 过滤，用DCM洗涤。将滤液蒸发以得到作为橙色液体的粗产物，存在一些固体物质(850mg)，将其直接用在下一反应中。
[0550] LCMS(方法6):0.86分钟,m/z 222.0/224.0[M+H]+
[0551] 步骤F
[0552]
[0553] N-(4-甲基异喹啉-6-基)-3-氧代丁酰胺(中间体1H)
[0554] 将在1,4-二 烷(10mL)中的中间体1H-e(560mg,2.25mmol)、乙酰乙酰胺(255mg,2.25mmol)、Xantphos(146mg,0.25mmol)、碳酸铯(1.64g,5.04mmol)和Pd2(dba)3(231mg,
0.25mmol)脱气，然后在
微波中在100℃加热2h。将反应混合物穿过 过滤，用甲醇洗涤，然后蒸发。将残余物在水和DCM之间分配，并分离各相。将有机物在80g Si筒上色谱分离，用0-10％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。得到作为橙色固体的中间体1H(195mg)，将其不经进一步纯化地使用。
[0555] LCMS(方法6):0.69分钟,m/z 243.1[M+H]+
[0556] 实施例1
[0557]
[0558] 6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(实施例1)
[0559] 将中间体1A(398mg,1.74mmol)、5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(295mg,1.9mmol)和4-(三氟甲基)
苯甲醛(330mg,1.9mmol)在DMF(3mL)中的混合物在120℃加热3h。将反应混合物冷却至室温并加入LiCl(4％水溶液，10mL)，随后加入DCM(10mL)。将含有固体物质的悬浮液的有机相分离，并然后过滤。将溶液干燥(Na2SO4)并蒸发以得到作为灰白色固体的期望产物(330mg)。将粗产物的一部分(100mg)通过MDAP(酸性的)纯化以得到作为白色固体的纯实施例1(62mg)。
[0560] LCMS(方法1):Rt＝3.47min,m/z 522.2[M+H]+
[0561] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.12(s,1H),9.96(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.8Hz,1H),8.28(d,J＝1.8Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.72-7.67(m,4H),7.39(d,J＝
8.1Hz,2H),6.74(s,1H),6.06(s,1H),4.27-4.16(m,2H),2.27(s,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,
3H)。
[0562] 实施例2-40和实施例113-117
[0563] 通过分别用下表给出的中间体1A、1B、1C、1D、1E、1F、1G或1H、醛和氨基杂环改变中间体1A、4-(三氟甲基)苯甲醛和5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯，通过与在实施例1中使用的操作类似的操作制备下述实施例。
[0564]
[0565]
[0566]
[0567]
[0568]
[0569]
[0570]
[0571]
[0572]
[0573]
[0574]
[0575]
[0576]
[0577]
[0578]
[0579]
[0580] 实施例41
[0581] 步骤A
[0582]
[0583] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2,6-二甲酸6-(叔丁基)2-乙基酯(中间体41A)
[0584] 将5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(1.55g,10mmol)、乙酰乙酸叔丁酯(1.65mL,10mmol)、3-氟-(4-三氟甲基)苯甲醛(1.92g,10mmol)和
碳酸氢钠(2.52g,30mmol)在DMF(3mL)中在70℃加热过夜。将反应混合物冷却，然后在乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)之间分配。将水层用乙酸乙酯(20mL)进一步萃取，并将合并的有机层通过穿过疏水玻璃料进行干燥，并蒸发以得到橙色油。将残余物溶解在最小量的DCM中并加载到50g Si筒上。将产物用
0-50％的乙酸乙酯在环己烷中的溶液洗脱。将含有期望产物的级分合并，并蒸发以得到淡黄色固体。将固体与乙酸乙酯/环己烷一起研磨以得到白色固体(1.25g)。
[0585] LCMS(方法3):Rt＝1.36min,m/z 470.5[M+H]+
[0586] 步骤B
[0587]
[0588] 2-(乙氧基羰基)-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸(中间体41B)
[0589] 将实施例41A(1.25g,2.66mmol)溶解在DCM(75mL)中。缓慢地加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(0.96ml,5.33mmol)，并将反应混合物搅拌1h。加入三乙胺(0.74ml,5.33mmol)并将反应混合物倒在水上。将有机层分离，通过穿过疏水玻璃料进行干燥，并蒸发以得到白色固体。将产物与乙酸乙酯/乙醚一起研磨以得到白色固体(0.67g)。
[0590] LCMS(方法3):Rt＝1.06min,m/z 414.3[M+H]+
[0591] 步骤C
[0592]
[0593] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-6-(噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基氨甲酰基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(实施例41)
[0594] 将中间体41B(104mg,0.252mmol)和噻吩并[3,2-c]吡啶-2-胺(69mg,0.460mmol)溶解在DMF(2mL)中，并加入DIPEA(88μL,0.504mmol)和HATU(105mg,0.276mmol)。将溶液在室温静置过夜，并然后将混合物在乙酸乙酯(15mL)和水(10mL)之间分配。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×15mL)进一步萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物通过25g Si筒上的色谱法纯化，用0-5％的DCM在甲醇中的溶液洗脱。得到作为白色固体的期望产物(30mg)。
[0595] LCMS(方法1):Rt＝3.48min,m/z 546.2[M+H]+
[0596] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ11.26(s,1H),10.17(s,1H),8.92(s,1H),8.26(d,J＝5.4Hz,1H),7.86-7.74(m,2H),7.30-7.22(m,2H),7.08(s,1H),6.80(s,1H),6.09(s,1H),
4.29-4.17(m,2H),2.31(s,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。
[0597] 实施例42
[0598] 通过在步骤C中用下表报告的那些改变胺，通过与在实施例41中使用的操作类似的操作制备下述化合物。
[0599]
[0600] 实施例43
[0601]
[0602] 2-(羟基甲基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)-苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例43)
[0603] 将实施例1(230mg,0.46mmol)在THF(5mL)中的悬浮液在氩气下搅拌并冷却至0℃。逐滴加入2M氢化铝锂在THF中的溶液(0.7mL,1.35mmol)并将反应混合物缓慢地温热至室温。3h以后，通过加入水(0.5mL)、1N氢氧化钠(0.5mL)和然后加入水(2mL)猝灭反应。将产物萃取进乙酸乙酯(10mL)中，并将有机萃取物通过穿过疏水玻璃料进行干燥。蒸发溶剂后，将粗产物在25g Si筒上色谱分离，用0-10％的甲醇在DCM中的溶液洗脱。得到作为黄色固体的期望产物(89mg)。
[0604] LCMS(方法1):Rt＝2.80min,m/z 480.2[M+H]+
[0605] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.02(s,1H),9.73(s,1H),9.13(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.26(d,J＝1.8Hz,1H),8.01(d,J＝8.9Hz,1H),7.72-7.64(m,4H),7.36(d,J＝
8.1Hz,2H),6.60(s,1H),5.62(s,1H),4.96(dd,J＝5.9,5.9Hz,1H),4.26(d,J＝5.8Hz,2H),
2.26(s,3H)。
[0606] 实施例44-71和实施例118-119
[0607] 关于将对应的乙基酯还原为羟基甲基，与实施例43类似地制备下述实施例。尽管需要的中间体酯没有描述为实例，但是使用在下表中给出的起始原料根据与在实施例1中使用的操作类似的操作制备它们。
[0608]
[0609]
[0610]
[0611]
[0612]
[0613]
[0614]
[0615]
[0616]
[0617]
[0618]
[0619]
[0620]
[0621]
[0622]
[0623] 实施例72A-D
[0624]
[0625] 7-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-2-基)-2-(羟基甲基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
[0626] 将中间体1A(291mg,1.27mmol)、5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(200mg,1.01mmol)和2,3-二氢苯并[1,4]二氧杂环己烯-2-甲醛(300mg,1.29mmol)在DMF(1mL)中的混合物在120℃加热2h。将反应混合物冷却至室温，并然后倒在冰上。将形成的固体滤出，用水洗涤并在干燥器中在50℃干燥过夜。将粗制物质在Si筒上色谱分离，用0-10％的甲醇在DCM中的溶液洗脱。蒸发得到黄色油(383mg,0.75mmol)，将其溶解在THF(9mL)中。将溶液在氩气下冷却至0℃并逐滴加入2M氢化铝锂(1.12mL,2.25mmol)。使反应物缓慢地温热至室温，并在3h以后，通过加入水(1mL)和1N氢氧化钠(0.4mL)将它猝灭。将混合物用THF稀释并穿过过滤。将固体饼用10％的甲醇在DCM中的溶液洗涤，并将滤液蒸发以得到橙色油。将粗制物质在25g Si筒上色谱分离，用0-10％的甲醇在乙酸乙酯中的溶液洗脱。得到作为黄色固体的4种立体异构体的混合物(136mg)。使用以下条件通过SFC分离异构体。
[0627]
[0628] 实施例72A
[0629] LCMS(方法1):Rt＝2.63min,m/z 470.2[M+H]+
[0630] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.04(s,1H),9.63(s,1H),9.16(s,1H),8.40(d,J＝5.8Hz,1H),8.32(d,J＝1.6Hz,1H),8.04(d,J＝8.9Hz,1H),7.79-7.67(m,2H),6.83-6.68(m,3H),6.56(dd,J＝1.7,7.9Hz,1H),5.76(d,J＝2.4Hz,1H),5.59(s,1H),5.02-4.96(m,
1H),4.49-4.44(m,1H),4.34(d,J＝5.3Hz,2H),4.13(dd,J＝2.2,11.5Hz,1H),4.02(dd,J＝
9.2,11.5Hz,1H),2.24(s,3H)。
[0631] 实施例72B
[0632] LCMS(方法1):Rt＝2.56min,m/z 470.2[M+H]+
[0633] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.07(s,1H),9.63(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.31(d,J＝1.7Hz,1H),8.01(d,J＝8.9Hz,1H),7.75-7.68(m,2H),6.79(d,J＝
7.6Hz,1H),6.73-6.63(m,1H),6.62-6.60(m,2H),5.74(d,J＝5.4Hz,1H),5.60(s,1H),5.00(s,1H),4.36-4.23(m,4H),3.81(dd,J＝7.1,11.4Hz,1H),2.23(s,3H)。
[0634] 实施例72C
[0635] LCMS(方法1):Rt＝2.63min,m/z 470.2[M+H]+
[0636] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.04(s,1H),9.63(s,1H),9.16(s,1H),8.40(d,J＝5.8Hz,1H),8.32(d,J＝1.6Hz,1H),8.04(d,J＝8.9Hz,1H),7.79-7.67(m,2H),6.83-6.68(m,3H),6.56(dd,J＝1.7,7.9Hz,1H),5.76(d,J＝2.4Hz,1H),5.59(s,1H),5.02-4.96(m,
1H),4.49-4.44(m,1H),4.34(d,J＝5.3Hz,2H),4.13(dd,J＝2.2,11.5Hz,1H),4.02(dd,J＝
9.2,11.5Hz,1H),2.24(s,3H)。
[0637] 实施例72D
[0638] LCMS(方法1):Rt＝2.55min,m/z 470.2[M+H]+
[0639] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.07(s,1H),9.63(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.31(d,J＝1.7Hz,1H),8.01(d,J＝8.9Hz,1H),7.75-7.68(m,2H),6.79(d,J＝
7.6Hz,1H),6.73-6.63(m,1H),6.62-6.60(m,2H),5.74(d,J＝5.4Hz,1H),5.60(s,1H),5.00(s,1H),4.36-4.23(m,4H),3.81(dd,J＝7.1,11.4Hz,1H),2.23(s,3H)。
[0640] 实施例73
[0641]
[0642] 6-((1H-吲唑-5-基)氨甲酰基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(实施例73)
[0643] 将在MeOH(1.3mL)中的实施例2(153mg,0.30mmol)在室温搅拌5min。加入2N氢氧化钠溶液(1.2mL)，并将反应混合物在45℃搅拌20min。冷却至室温以后，将混合物过滤并通过加入1N HCl进行酸化。将产物萃取进乙酸乙酯(2×15mL)中，将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物通过MDAP(酸性的)纯化以得到白色固体(75mg)。
[0644] LCMS(方法1):Rt＝3.31min,m/z 483.2[M+H]+
[0645] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.94(br s,2H),9.74-9.71(m,2H),7.99(dd,J＝1.0,6.4Hz,2H),7.69(d,J＝8.2Hz,2H),7.46-7.36(m,4H),6.68(s,1H),5.99(s,1H),2.22(s,
3H)。
[0646] 实施例74和75
[0647] 通过与在实施例73中使用的操作类似的操作制备下述化合物。
[0648]
[0649] 实施例76
[0650]
[0651] N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例76)
[0652] 将1-甲基哌嗪(111mg,1.1mmol)在甲苯(665μL)中的溶液用氩气
净化5min。加入2M的三甲基铝在甲苯中的溶液(665μL,1.33mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2h。加入另一个体积的甲苯(1mL)，随后加入实施例2(115mg,0.225mmol)，将反应物在室温在60℃在氩气下搅拌2h，并然后在80℃搅拌过夜。小心地加入水(5mL)，将沉淀的固体滤出。将滤液用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物与已经通过过滤得到的固体组合。将粗产物溶解在少量甲醇中，并加载到已经用甲醇处理过的5g SCX-2筒上。用更多的甲醇冲洗后，将产物用2M甲醇氨洗脱。将得到的固体在25g Si筒上进一步纯化，用5-10％的在甲醇/DCM中的2M甲醇氨洗脱，然后用MDAP(酸性的)洗脱，以得到白色固体(15mg)。
[0653] LCMS(方法1):Rt＝2.70min,m/z 565.3[M+H]+
[0654] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.94(s,1H),9.72(s,2H),8.02-7.97(m,2H),7.68(d,J＝8.2Hz,2H),7.46-7.34(m,4H),6.67(s,1H),5.85(s,1H),3.79-3.74(m,1H),3.68-3.59(m,2H),3.47-3.43(m,1H),2.36-2.30(m,1H),2.22(m,5H),2.16(m,4H)。
[0655] 实施例77
[0656] 步骤A
[0657]
[0658] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸叔丁酯(中间体77A)
[0659] 使用与实施例1类似的操作从中间体1A、3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛和5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯制备中间体77A。
[0660] LCMS(方法3):Rt＝0.99min,m/z 568.5[M+H]+
[0661] 步骤B
[0662]
[0663] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(中间体77B)
[0664] 将中间体77A(1.18g,2.08mmol)溶解在20％的TFA在DCM中的溶液(10mL)中。在室温搅拌18h以后，将挥发物蒸发。将残余物溶解在甲醇中并蒸发几次，然后与乙醚一起研磨。将黄色固体过滤收集并干燥(1.31g)。
[0665] LCMS(方法3):Rt＝0.78min,m/z 512.4[M+H]+
[0666] 步骤C
[0667]
[0668] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N6-(异喹啉-6-基)-5-甲基-N2-(2-(哌啶-1-基)乙基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2,6-二甲酰胺(实施例77)
[0669] 将中间体77B(175mg,0.28mmol)、2-(哌啶-1-基)乙烷-1-胺(43mg,0.336mmol)、DIPEA(0.25mL,1.4mmol)和HATU(160mg,0.42mmol)溶解在DMF(0.5mL)中并将溶液在室温搅拌过夜。将所述混合物在乙酸乙酯(10mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)之间分配。将有机相分离并通过穿过疏水玻璃料进行干燥。蒸发得到粗产物，将其在10g Si筒上色谱分离，用0-10％的甲醇在DCM中的溶液洗脱，并然后用0-20％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。将得到的胶质与乙醚一起研磨以得到作为黄色固体的期望产物。将其通过MDAP(酸性的)进一步纯化以得到作为灰白色固体的
甲酸盐(38mg)。
[0670] LCMS(方法1):Rt＝2.52min,m/z 622.3[M+H]+
[0671] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.13(s,1H),9.99(s,1H),9.15(s,1H),8.41-8.38(m,1H),8.28(d,J＝1.7Hz,1H),8.18(s,1H),8.03(d,J＝9.0Hz,1H),7.84-7.67(m,4H),7.29-
7.20(m,2H),6.67(s,1H),6.00(s,1H),3.34-3.23(m,2H),2.44-2.34(m,6H),2.27(s,3H),
1.49-1.43(m,4H),1.37(dd,J＝4.9,10.2Hz,2H)。
[0672] 实施例78-90
[0673] 通过与在实施例77中使用的操作类似的操作制备下述化合物。在某些情况下，得到的化合物通过1H NMR鉴别为甲酸盐。
[0674]
[0675]
[0676]
[0677]
[0678]
[0679]
[0680] 实施例91
[0681] 步骤A
[0682]
[0683] 6-((1H-吲唑-5-基)氨甲酰基)-7-(4-氟苯基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(中间体91A)
[0684] 使用与用于制备实施例73的方法类似的方法从实施例17制备中间体91A。
[0685] LCMS(方法2):Rt＝2.94min,m/z 433.2[M+H]+
[0686] 步骤B
[0687]
[0688] 7-(4-氟苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例91)
[0689] 使用与在实施例77的合成中使用的方法类似的方法，从中间体91A和1-甲基哌嗪制备实施例91。
[0690] LCMS(方法1):Rt＝2.29min,m/z 515.2[M+H]+(方法1)
[0691] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.90(s,1H),9.72(s,1H),8.92(s,1H),7.97-7.93(m,2H),7.57(s,1H),7.42-7.38(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.25-7.20(m,2H),7.13-7.06(m,
2H),6.49(s,1H),3.58(m,4H),2.29(m,4H),2.23(s,3H),2.17(s,3H)。
[0692] 实施例92
[0693] 使用与在实施例77的合成的步骤B中使用的方法类似的方法，也从中间体91A和显示的胺制备下述实施例。
[0694]
[0695] 实施例93
[0696]
[0697] 7-(4-氟苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-2-(哌嗪-1-羰基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例93)
[0698] 将实施例75(100mg,0.23mmol)、1-Boc-哌嗪(47mg,0.255mmol)、DIPEA(81mg,0.46mmol)和HATU(97mg,0.255mmol)溶解在DMF(2mL)中并将溶液在室温搅拌过夜。将所述混合物在乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)之间分配。将有机相分离和干燥(Na2SO4)。蒸发得到粗产物，将其在25g Si筒上色谱分离，用0-8％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。将得到的白色固体溶解在10％的TFA在DCM中的溶液(10mL)中并将溶液在室温静置过夜。使挥发物蒸发并将残余物溶解在少量甲醇中。将溶液加载到已经用甲醇处理过的5g SCX-2筒上。用甲醇冲洗后，将产物用2M甲醇氨洗脱。蒸发得到黄色胶质，将其溶解在水/乙腈中并
冷冻干燥以得到淡黄色固体(19mg)。
[0699] LCMS(方法1):Rt＝2.22min,m/z 501.2[M+H]+
[0700] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.93(s,1H),9.66(s,1H),9.62(s,1H),7.99(m,2H),7.46-7.36(m,2H),7.26-7.20(m,2H),7.15-7.09(m,2H),6.58(s,1H),5.79(s,1H),3.75-
3.63(m,1H),3.60-3.49(m,2H),3.44-3.36(m,2H),2.71-2.56(m,4H),2.23(s,3H)。
[0701] 实施例94
[0702] 步骤A
[0703]
[0704] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-甲酰基-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体94A)
[0705] 将实施例65(2.49g,5.0mmol)溶解在DCM(170mL)和DMF(17mL)的混合物中。将溶液冷却至0℃并逐份加入戴斯-马丁过碘烷(2.55g,6.0mmol)。将溶液搅拌，同时将其历时3h温热至室温。加入1N氢氧化钠(10mL)并将混合物搅拌10min。在真空中减少溶剂，然后加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×15mL)进一步萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发以得到黄色固体(2.48g)。尽管期望的产物被未反应的起始原料污染，但是将它不经进一步纯化地使用。
[0706] LCMS(方法3):Rt＝0.87min,m/z 496.5[M+H]+
[0707] 步骤B
[0708]
[0709] 2-((二甲基氨基)甲基)-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例94)
[0710] 将中间体94A(450mg,909mmol)溶解在THF(10mL)中并加入2M的二甲基胺在THF中的溶液(909μL,1.82mmol)。将所述混合物在室温搅拌1h，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(384mg,1.82mmol)。将反应物在室温搅拌90min，然后加入饱和碳酸氢钠(10mL)。将产物萃取进乙酸乙酯(2×20mL)中，并将合并的萃取物干燥(Na2SO4)和蒸发。将粗产物在25g Si筒上纯化，用0-10％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。得到作为黄色固体的产物(60mg)。
[0711] LCMS(方法1):Rt＝2.41min,m/z 525.3[M+H]+
[0712] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.06(s,1H),9.80(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.76-7.67(m,3H),7.18-7.10(m,2H),6.60(s,1H),5.58(s,1H),3.30-3.17(m,2H),2.25(s,3H),2.10(s,6H)。
[0713] 实施例95-106
[0714] 通过实施例94的类似操作，从下表中给出的醛中间体和胺组合开始制备下述化合物。
[0715]
[0716]
[0717]
[0718]
[0719]
[0720] 实施例107
[0721] 步骤A
[0722]
[0723] 2-甲酰基-N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体107A)
[0724] 从实施例69开始以中间体94A的类似方式制备中间体107A。
[0725] 步骤B
[0726]
[0727] N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-2-(吗啉代甲基)-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例107)
[0728] 从中间体107A和吗啉开始使用类似的操作以实施例94的步骤B的类似方式制备实施例107。
[0729] LCMS(方法1):Rt＝2.76min,m/z 538.3[M+H]+
[0730] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.93(s,1H),9.67(s,1H),9.52(s,1H),7.99(d,J＝13.4Hz,2H),7.65(d,J＝8.1Hz,2H),7.45-7.37(m,2H),7.30(d,J＝8.1Hz,2H),6.59(s,
1H),5.54(s,1H),3.56-3.51(m,4H),3.35-3.22(m,2H),2.31(m,4H),2.20(s,3H)。
[0731] 实施例108
[0732]
[0733] 2-((1,1-二氧硫吗啉代)甲基)-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例108)
[0734] 将实施例65(250mg,0.502mmol)和DIPEA(262μL,1.51mmol)在DMF(4mL)中的溶液在冰中冷却，并加入甲磺酰氯(63mg,0.552mmol)在DMF(2mL)中的溶液。将反应物在0℃搅拌30min。加入另一份甲磺酰氯(31mg,0.275mmol)并将反应物搅拌另外30min，然后加入另一份甲磺酰氯(31mg,0.275mmol)。在0℃搅拌1h以后，通过加入硫吗啉1,1-二氧化物(dioxide)盐酸盐(207mg,1.21mmol)和DIPEA(0.262mL,1.51mmol)在DMF(2mL)中的溶液猝灭反应。将反应物在室温搅拌30min，然后加入另一份硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(103mg,
0.603mmol)。继续搅拌90min。将反应混合物在真空中浓缩并将残余物溶解在甲醇中。将溶液加载到已经用甲醇处理过的5g SCX-2筒上。用甲醇冲洗以后，将产物用2M甲醇氨洗脱。将蒸发得到的粗产物通过MDAP(酸性的)纯化，得到黄色固体(109mg)。
[0735] LCMS(方法1):Rt＝2.91min,m/z 615.2[M+H]+
[0736] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.08(s,1H),9.84(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝1.7Hz,1H),8.04-8.01(m,1H),7.76-7.67(m,3H),7.15(d,J＝
9.7Hz,2H),6.62(s,1H),5.63(s,1H),3.56(d,J＝13.7,1H),3.49(d,J＝13.7Hz,1H),3.10-
3.03(m,4H),2.87-2.81(m,4H),2.25(s,3H)。
[0737] 中间体120A、121A和123A的制备
[0738] 通过将对应的乙基酯还原为羟基甲基，使用实施例43的相同操作制备下述中间体。使用在下表中给出的起始原料，根据与在实施例1中使用的操作类似的操作，制备需要的中间体酯。
[0739]
[0740] 实施例109至110和实施例120-124
[0741] 通过用下表中报告的那些替代醇和胺，通过实施例108的类似操作制备下述化合物。
[0742]
[0743]
[0744]
[0745]
[0746]
[0747] 实施例111
[0748] 步骤A
[0749]
[0750] ((6-((1H-吲唑-5-基)氨甲酰基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)-苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体111A)
[0751] 将实施例34(92mg,0.2mmol)溶解在甲醇(1.5mL)中并将溶液在氩气下在冰浴中冷却。加入碳酸二叔丁酯(87mg,0.4mmol)，随后加入氯化镍六水合物(4.8mg,0.02mmol)。逐份加入硼氢化钠(53mg,1.4mmol)，然后将混合物搅拌，同时将其温热至室温。搅拌过夜以后，加入二亚乙基三胺(22μL,0.2mmol)，并继续搅拌30min。注意到从黑色至浅紫色的
颜色变化。将溶剂蒸发，然后将残余物在乙酸乙酯(10mL)和饱和碳酸氢钠(10mL)之间分配。将有机层分离，干燥(Na2SO4)并蒸发以得到白色固体。将粗产物通过10g Si筒上的色谱法纯化，用10-100％的乙酸乙酯在环己烷中的溶液洗脱。得到作为白色固体的Boc-保护的胺(66mg)。
[0752] LCMS(方法3):Rt＝1.06min,m/z 568.4[M+H]+
[0753] 步骤B
[0754]
[0755] 2-(氨基甲基)-N-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-7-(4-(三氟甲基)苯基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例111)
[0756] 将中间体111A(66mg,0.12mmol)溶解在20％的TFA在DCM中的溶液(3mL)中。1h以后，将挥发物蒸发并将残余物溶解在甲醇中。将溶液加载到已经用甲醇处理过的2g SCX-2筒上。用甲醇冲洗以后，将产物用2M甲醇氨洗脱。蒸发得到白色固体。将产物通过10g Si筒上的色谱法纯化，用0-20％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱，作为白色固体得到(36mg)。
[0757] LCMS(方法1):Rt＝2.62min,m/z 468.2[M+H]+
[0758] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.94(s,1H),9.64(s,1H),9.56(s,1H),7.99-7.96(m,2H),7.68-7.63(m,2H),7.44-7.31(m,4H),6.54(s,1H),5.65(s,1H),4.20-4.20(m,2H),
3.60(s,2H),2.21(s,3H)。
[0759] 实施例112
[0760] 步骤A
[0761]
[0762] 2-氰基-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体112A)
[0763] 从中间体1A、5-氨基-1H-吡唑-3-甲腈和3-氟-4-(三氟甲基)-苯甲醛开始，以与实施例1类似的方式制备中间体112A。
[0764] LCMS(方法3):Rt＝0.95min,m/z 493.5[M+H]+
[0765] 步骤B
[0766]
[0767] ((7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体112B)
[0768] 以与中间体111A类似的方式从中间体112A制备中间体112B。
[0769] LCMS(方法3):Rt＝1.05min,m/z 597.5[M+H]+
[0770] 步骤C
[0771]
[0772] 2-(氨基甲基)-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例112)
[0773] 以与实施例111所用方式类似的方式从中间体112B制备实施例112。
[0774] LCMS(方法1):Rt＝2.32min,m/z 497.2[M+H]+
[0775] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.02(s,1H),9.79(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.27(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.75-7.66(m,3H),7.22-7.15(m,2H),6.55(s,1H),5.65(s,1H),3.51(s,2H),2.26(s,3H),1.39(s,2H)。
[0776] 实施例125
[0777] 步骤A
[0778]
[0779] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(中间体125A)
[0780] 从中间体1A、3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛和3-氨基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯开始，根据与实施例1所用方法类似的方法制备中间体125A。
[0781] LCMS(方法2):Rt＝3.38min,m/z 540.3[M+H]+
[0782] 步骤B
[0783]
[0784] N2-环丙基-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N6-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2,6-二甲酰胺(实施例125)
[0785] 将在THF(5mL)中的中间体125A(200mg,0.37mmol)、环丙胺(32mg,0.56mmol)和DABAL加成化合物(143mg,0.56mmol)在微波中在100℃加热8分钟。将反应混合物小心地分份加入酒石酸钾钠(Rochelle氏盐)的饱和水溶液中，然后加入DCM。分离各相。将有机物蒸发以得到黄色固体，将其用甲醇和乙醚处理。将少量未溶解的固体通过过滤除去，并将溶液在室温静置。分两批得到作为白色固体的纯产物(48和47mg)。
[0786] LCMS(方法1):Rt＝3.12min,m/z 551.4[M+H]+
[0787] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.15(s,1H),9.98(s,1H),9.15(s,1H),8.40(d,J＝5.8Hz,1H),8.29(d,J＝1.6Hz,1H),8.05-8.01(m,2H),7.75(t,J＝7.9Hz,1H),7.72-7.67(m,2H),7.23-7.15(m,2H),6.62(s,1H),6.03(s,1H),2.77-2.70(m,1H),2.26(s,3H),0.64-
0.52(m,4H)。
[0788] 实施例126-128
[0789] 通过如在下表中所示替代适当的胺，使用与实施例125所用操作类似的操作从指示的起始原料制备下述实施例。
[0790]
[0791]
[0792] 实施例129
[0793] 步骤A
[0794]
[0795] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(中间体129A)
[0796] 从中间体1A、3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛和5-氨基-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯开始，根据与实施例1所用方法类似的方法制备中间体129A。
[0797] LCMS(方法6):Rt＝0.93min,m/z 541.3[M+H]+
[0798] 步骤B
[0799]
[0800] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N6-(异喹啉-6-基)-5-甲基-N2-(2-(哌啶-1-基)乙基)-4,7-二氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-2,6-二甲酰胺(实施例129)
[0801] 从中间体129A和2-(哌啶-1-基)乙烷-1-胺开始，以实施例121的类似方式制备实施例129。
[0802] LCMS(方法1):Rt＝2.38min,m/z 623.4[M+H]+
[0803] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.62(s,1H),10.27(s,1H),9.16(s,1H),8.40(d,J＝5.7Hz,1H),8.25(d,J＝1.7Hz,1H),8.09(s,1H),8.04(d,J＝9.0Hz,1H),7.79(dd,J＝7.8,
7.8Hz,1H),7.70(d,J＝5.9Hz,1H),7.66(dd,J＝2.0,8.9Hz,1H),7.45(d,J＝11.4Hz,1H),
7.36(d,J＝8.2Hz,1H),6.71(s,1H),3.41-3.33(m,4H),2.48-2.32(m,4H),2.26(s,3H),
1.61-1.45(m,4H),1.45-1.34(m,2H)。
[0804] 实施例130
[0805] 步骤A
[0806]
[0807] (5-硝基-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体130A)
[0808] 将5-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(1.2g,7.64mmol)在叔丁醇(20ml)中的搅拌悬浮液用TEA(4.3mL,30.60mmol)处理，然后用二苯基磷酰基叠氮化物(4.9mL,22.90mmol)处理，然后在90℃加热过夜。将冷却的混合物在真空中浓缩，并将粗产物在80g Si筒上纯化，用5-55％的乙酸乙酯在异己烷中的溶液洗脱。将含有产物的级分合并，并在减压下蒸发以得到作为白色固体的标题化合物(1.36g)。
[0809] LCMS(方法6):Rt＝1.12min,m/z 227.0[M-H]-
[0810] 步骤B
[0811]
[0812] (5-氨基-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体130B)
[0813] 将中间体130A(4.00g,17.50mmol)和10％Pd/C(500mg)在乙醇(经变性，100mL)中的搅拌混合物置于氢气的气球气氛下在室温过夜。将混合物经 过滤并将滤液在减压下蒸发以得到作为淡黄色泡沫的标题化合物(3.50g)。
[0814] LCMS(方法6):Rt＝0.74min,m/z 197.0[M-H]-
[0815] 步骤C
[0816]
[0817] (7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基)氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体130C)
[0818] 将中间体130B(260mg,1.31mmol)、中间体1A(299mg,1.31mmol)和3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(252mg,1.31mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(3mL)中的搅拌混合物在80℃加热2h。将冷却的溶液倒入水(75mL)中以形成固体。将其滤出，用水洗涤并干燥。将粗产物在40g Si筒上纯化，用0-10％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。将适当的级分合并，并在减压下蒸发以得到作为淡黄色固体的标题化合物(0.42g)。
[0819] LCMS(方法6):Rt＝1.11min,m/z 583.3[M+H]+
[0820] 步骤D
[0821]
[0822] 2-氨基-7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例130)
[0823] 将中间体130C(0.42g,0.72mmol)在DCM(10mL)中的混合物用TFA(3.0mL,38.9mmol)在DCM(10ml)中的溶液处理，并将所述混合物在室温搅拌3h。将反应混合物加载到已经用DCM处理过的10g SCX-2筒上。将所述筒用甲醇冲洗，并然后将产物用2M甲醇氨洗脱。将粗产物在40g Si筒上纯化，用0-10％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。将含有产物的级分合并，并在减压下蒸发以得到作为淡黄色固体的标题化合物(0.26g)。
[0824] LCMS(方法1):Rt＝2.56min,m/z 483.1[M+H]+
[0825] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ9.98(s,1H),9.59(s,1H),9.13(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.26(d,J＝1.5Hz,1H),8.01(d,J＝8.9Hz,1H),7.73-7.66(m,3H),7.16(d,J＝
7.9Hz,1H),7.11(d,J＝11.2Hz,1H),6.29(s,1H),4.93(s,1H),4.67(s,2H),2.23(s,3H)。
[0826] 实施例131
[0827]
[0828] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-(3-(哌啶-1-基)丙酰氨基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例131)
[0829] 将实施例130(0.26g,0.54mmol)、3-哌啶-1-基丙酸(89mg,0.57mmol)和DIPEA(0.19mL,1.08mmol)在DCM(20ml)中的混合物在室温用HATU(225mg,0.59mmol)处理并搅拌2h。将反应混合物在真空中浓缩并将残余物在水和2-甲基THF之间分配。将有机萃取物分离，合并，用水和饱和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。将粗产物通过MDAP(碱性的)纯化以得到作为白色固体的标题化合物(115mg)。
[0830] LCMS(方法1):Rt＝2.44min,m/z 622.1[M+H]+
[0831] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.49(s,1H),10.04(s,1H),9.85-9.85(m,1H),9.14(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.25(d,J＝1.7Hz,1H),8.01(d,J＝9.0Hz,1H),7.73(t,J＝8.0Hz,1H),7.71-7.66(m,2H),7.25-7.19(m,2H),6.47(s,1H),6.01(s,1H),2.51-2.44(m,
2H),2.39-2.30(m,6H),2.27(s,3H),1.48-1.41(m,4H),1.35(d,J＝5.3Hz,2H)。
[0832] 实施例132和133
[0833] 通过用在表中指定的酸替换酸，使用与在实施例131中使用的操作类似的操作从实施例130制备下述实施例。
[0834]
[0835]
[0836] 实施例134
[0837] 步骤A
[0838]
[0839] 2-氨基-7-(3-氟-4-甲基苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体134A)
[0840] 通过用3-氟-4-甲基苯甲醛替代3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛，使用与实施例130的步骤C类似的方法制备中间体134A。
[0841] LCMS(方法6):Rt＝1.12min,m/z 428.8[M+H]+
[0842] 步骤B
[0843]
[0844] 7-(3-氟-4-甲基苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙酰氨基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例134)
[0845] 使用与在实施例131中使用的操作类似的操作，从中间体134A和2-(吡咯烷-1-基)乙酸制备下述实施例。
[0846] LCMS(方法1):Rt＝2.10min,m/z 540.4[M+H]+
[0847] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.00(s,1H),9.90(s,1H),9.67(s,1H),9.13(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.27(d,J＝1.7Hz,1H),8.01(d,J＝9.0Hz,1H),7.71-7.66(m,2H),
7.17(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),6.93(dd,J＝1.6,7.8Hz,1H),6.86(dd,J＝1.5,10.5Hz,1H),
6.38(s,1H),5.98(s,1H),3.16(d,J＝3.2Hz,2H),2.56-2.52(m,4H),2.24(s,3H),2.13(d,J＝1.1Hz,3H),1.69(dd,J＝6.5,6.5Hz,4H)。
[0848] 实施例135
[0849] 步骤A
[0850]
[0851] 4-(7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-6-(异喹啉-6-基氨甲酰基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体135A)
[0852] 使用中间体1A、4-(5-氨基-1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和3-氟-4-(三氟-甲基)苯甲醛作为起始原料，以与实施例1类似的方式制备中间体135A。
[0853] LCMS(方法6):Rt＝1.12min,m/z 651.5[M+H]+
[0854] 步骤B
[0855]
[0856] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-(哌啶-4-基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体135B)
[0857] 将中间体135A(1.46g,2.24mmol)溶解在DCM(16mL)和TFA(4mL)的混合物中，并将反应物在室温搅拌2h。将混合物加载到20g SCX-2筒上，将其用DCM、甲醇和然后用2M甲醇氨洗脱。将有关的级分蒸发至干燥以得到黄色胶质(1.16g)。
[0858] LCMS(方法6):Rt＝0.7min,m/z 551.4[M+H]+
[0859] 步骤C
[0860]
[0861] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-(1-(3-(哌啶-1-基)丙酰基)哌啶-4-基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例135)
[0862] 将中间体135B(0.25g,0.454mmol)、3-(哌啶-1-基)丙酸(79mg,0.5mmol)、DIPEA(0.16mL,0.91mmol)和HATU(207mg,0.55mmol)溶解在DMF(10mL)中并将溶液在室温搅拌16h。蒸发DMF，并将所述混合物在乙酸乙酯(3×30mL)和水(25mL)之间分配。将有机相分离，并用盐水洗涤，经(Na2SO4)干燥和过滤。蒸发得到粗产物，将其通过MDAP(碱性的)纯化以得到灰白色固体(147mg)。
[0863] LCMS(方法1):Rt＝2.59min,m/z 690.4[M+H]+
[0864] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.06(s,1H),9.78(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝1.6Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.75-7.67(m,3H),7.17-7.09(m,2H),6.61(s,1H),5.53(s,1H),4.35(d,J＝10.7Hz,1H),3.88(d,J＝13.1Hz,1H),3.05(t,J＝12.0Hz,1H),2.71(tdd,J＝3.7,11.2,11.2Hz,1H),2.62(t,J＝12.4Hz,1H),2.48-
2.43(m,4H),2.29(s,4H),2.25(s,3H),1.84-1.76(m,2H),1.46(m,5H),1.40-1.27(m,3H)。
[0865] 实施例136
[0866] 步骤A
[0867]
[0868] (Z)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(甲硫基)丙烯腈(中间体136A)
[0869] 将2-氰基-3,3-双(甲硫基)
丙烯酸(4.5g,23.8mmol)在甲醇(30mL)中的溶液在室温用1-甲基哌嗪(4.48mL,40.4mmol)和TEA(3.32mL,23.8mmol)处理。将反应物在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩，并将粗制物质通过80g Si筒上的色谱法纯化，用0-10％的甲醇在DCM中的溶液洗脱。得到作为黄色液体的标题化合物(1.3g)。
[0870] LCMS(方法6):Rt＝0.21min,m/z 198.2[M+H]+
[0871] 步骤B
[0872]
[0873] 3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-吡唑-5-胺(中间体136B)
[0874] 将中间体136A(1.30g,6.59mmol)溶解在IMS(30mL)中并用1M的肼在THF中的溶液(22mL,22mmol)处理。将反应混合物在85℃搅拌过夜。蒸发乙醇，并加入另外量的1M的肼在THF中的溶液(30mL,30mmol)。继续在85℃加热另外6h。将反应混合物冷却，并在真空中蒸发。将粗产物在25g Si筒上纯化，用0-10％的甲醇在DCM中的溶液、然后用10％的在DCM中的2M的甲醇氨溶液洗脱。得到作为胶质的产物(0.68g)。
[0875] LCMS(方法6):Rt＝0.15min,m/z 182.3[M+H]+
[0876] 步骤C
[0877]
[0878] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(实施例136)
[0879] 使用与实施例1所用方法类似的方法，从中间体1A和136B和3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛制备实施例136。
[0880] LCMS(方法1):Rt＝2.38min,m/z 566.1[M+H]+
[0881] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.01(s,1H),9.72(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.8Hz,1H),8.30-8.27(m,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.74-7.67(m,3H),7.16-7.07(m,
2H),6.43(s,1H),5.20(s,1H),3.03-2.99(m,4H),2.33(t,J＝4.7Hz,4H),2.23(s,3H),2.17(s,3H)。
[0882] 实施例137A和137B
[0883]
[0884] 2-(4-((二甲基氨基)甲基)苯甲酰氨基)-7-(3-氟-4-(三氟甲基)-苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
[0885] 使用实施例130和4-((二甲基氨基)甲基)苯甲酸作为起始原料，以与实施例131类似的方式制备实施例137A和137B。立即根据下表通过SFC分离外消旋产物。
[0886]
[0887] 实施例137A
[0888] LCMS(方法1):Rt＝2.50min,m/z 644.4[M+H]+
[0889] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.76(s,1H),10.09(s,1H),9.91(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.26(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,
2H),7.77-7.67(m,3H),7.36(d,J＝8.4Hz,2H),7.27-7.22(m,2H),6.53(s,1H),6.21(s,
1H),3.42(s,2H),2.28(s,3H),2.14(s,6H)。
[0890] 实施例137B
[0891] LCMS(方法1):Rt＝2.49min,m/z 644.4[M+H]+
[0892] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.76(s,1H),10.09(s,1H),9.92(s,1H),9.14(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.26(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,
2H),7.78-7.67(m,3H),7.36(d,J＝8.4Hz,2H),7.27-7.22(m,2H),6.53(s,1H),6.21(s,
1H),3.42(s,2H),2.28(s,3H),2.14(s,6H)。
[0893] 实施例138A和138B
[0894]
[0895] 7-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-N-(异喹啉-6-基)-5-甲基-2-((3-(哌啶-1-基)丙酰氨基)甲基)-4,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
[0896] 将实施例112(0.45g,0.91mmol)、3-哌啶-1-基丙酸(157mg,0.99mmol)和DIPEA(0.32mL,1.81mmol)在DMF(10ml)中的混合物在室温用HATU(414mg,1.09mmol)处理并搅拌16h。将反应混合物在真空中浓缩并在40g Si筒上纯化，用0-50％的甲醇在DCM中的溶液洗脱以得到外消旋产物(0.383g)。立即使用下表给出的条件通过SFC分离外消旋体。
[0897]
[0898]
[0899] 实施例138A
[0900] LCMS(方法1):Rt＝2.39min,m/z 636.4[M+H]+
[0901] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.04(s,1H),9.78(s,1H),9.14(s,1H),8.42-8.37(m,2H),8.26(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.76-7.67(m,3H),7.23-7.14(m,2H),
6.56(s,1H),5.55(s,1H),4.16-4.01(m,2H),2.60-2.52(m,2H),2.38-2.29(m,3H),2.28-
2.25(m,6H),1.48-1.43(m,4H),1.40-1.29(m,2H)。
[0902] 实施例138B
[0903] LCMS(方法1):Rt＝2.39min,m/z 636.4[M+H]+
[0904] 1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ10.04(s,1H),9.79(s,1H),9.14(s,1H),8.41-8.36(m,2H),8.27(d,J＝1.7Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.76-7.68(m,3H),7.23-7.14(m,2H),
6.56(s,1H),5.55(s,1H),4.16-4.00(m,2H),2.46(t,J＝7.1Hz,2H),2.29-2.22(m,9H),
1.48-1.38(m,4H),1.38-1.29(m,2H)。
[0905] 使用下面给出的条件从对应的外消旋体实施例拆分下述实施例，得到纯的对映异构体。
[0906]
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[0918] 本发明化合物的药理学活性
[0919] 体外抑制活性测定描述
[0920] 使用ADP-Glo
试剂盒(Promega)可以在10μl含有40mM Tris pH7.5、20mM MgCl2 0.1mg/ml BSA、50μM DTT和2.5μM肽底物(髓磷脂碱蛋白)的测定中确定本发明的化合物抑制Rho激酶活性的有效性。将化合物溶解在DMSO中，使得所述测定中DMSO的终浓度是1％。在
25℃执行所有反应/温育。将化合物(2ul)和Rho激酶1或2(4μl)混合并温育30分钟。通过加入ATP(4μl)使得所述测定中ATP的终浓度是10μM，开始反应。1小时温育以后，加入10μl ADP-Glo试剂，并在另外45分钟温育以后，加入20ul激酶检测缓冲液，并将混合物温育另外
30分钟。在光度计上测量发
光信号。对照由不含有化合物的测定孔组成，使用没有加入酶的测定孔确定背景。以剂量-响应形式试验化合物，并在化合物的每个浓度计算激酶活性的抑制。为了确定IC50(抑制50％的酶活性所需要的化合物浓度)，使用具有可变斜率的S形拟合将数据拟合至％抑制相对于Log10化合物浓度的图，并将最大值固定至100％和将最小值固定至0％。为了确定Ki值，利用Cheng-Prusoff方程式(Ki＝IC50/(1+[S]/Km)。
[0921] 根据本发明的化合物表现出低于5μM的Ki值，且对于大多数本发明的化合物，Ki甚至低于500nM。
[0922] 各种化合物的结果提供在下面表1中并表达为活性的范围。
[0923] 表1
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[0932] 其中根据下述分类判据将化合物以关于它们对rock1 rock 2同种型的抑制活性的效力的方式分类：
[0933] +++:Ki<50nM
[0934] ++:Ki在50-500nM范围内
[0935] +:Ki>500nM。
