技术领域
[0001] 本
发明属于
生物医药技术领域,具体的涉及一种含精氨酸的组合物及含有这种组合物的制剂。
背景技术
[0002] 随着国内经济的迅速发展及人们
水平的提高,人们生活方式也发生了巨大的改变,慢性
疾病随之而来,慢性伤口就是其中一种。慢性伤口是指因为各种原因所致的
皮肤组织受伤,其愈合大于8周的伤口,如溃疡性伤口、糖尿病伤口、压
力性溃疡和手术后愈合不良的伤口。
[0003] 通常而言,形成慢性伤口的病因较复杂,主要原因有静脉功能不全、外伤瘢痕和伤口感染等,而伤口处生长因子减少、新生的肉芽组织易受损及伤口抑制素失衡是延迟了
伤口愈合的原因。因为绝大多数的慢性伤口由急性伤口发展而来,故慢性伤口的愈合时间会比正常伤口的愈合时间长5周左右,借助外力促使伤口
加速愈合对患者便具有更重要意义。近年来,随着国内一些慢性疾病患者和慢性伤口患者人数的日益增加,如何提高慢性伤口的
治疗疗效已成为临床界面临的重大难题之一。
[0004] 精氨酸是人体内所有组织的
蛋白质合成的必须底物,也是唯一的一种脒供体氨基酸,参与多胺、肌酸合成,也是尿素循环的重要参与者。精氨酸在正常成年人中是半必需氨基酸,儿童及饥饿、创伤和严重应激的成年人自身合成的精氨酸很低,必须有外源补充,此时精氨酸为必须氨基酸。
发明内容
[0005] 本发明的目的是克服
现有技术的不足,提供一种含精氨酸的组合物。
[0006] 本发明的第二个目的是提供一种含有上述组合物的制剂。
[0007] 本发明的技术方案概述如下:
[0008] 一种含精氨酸的组合物,按
质量百分比由1%-99%的精氨酸或精氨酸
盐酸盐,1%-99%的海藻糖组成。
[0009] 包含上述组合物的凝胶剂,按重量百分比由1%-20%的含精氨酸的组合物,1%-20%的
保湿剂,1%-15%的
增稠剂,64%-78%的水制成。
[0010] 保湿剂优选为甘油、丙二醇和1-3丁二醇中的至少一种。
[0011] 增稠剂优选为羟乙基
纤维素、羧甲基
纤维素钠、黄原胶和瓜尔豆胶中的至少一种。
[0012] 还可以按常规技术制备喷剂、膏剂等。
[0013] 试验证明,本发明的一种含精氨酸的组合物及其制剂,无刺激,吸水性强,能有效吸收渗出液,同时本发明组合物不与创面发生粘连,即移除时不会产生
疼痛感,为伤口提供湿性愈合环境,有效促进创面愈合,并且制备方法简单,生产周期短,
处方精简,成本低。
具体实施方式
[0014] 下面结合具体
实施例对本发明作进一步的说明。
[0015] 实施例1
[0016] 一种含精氨酸的组合物,按质量百分比由1%的精氨酸和99%的海藻糖组成。
[0017] 实施例2
[0018] 一种含精氨酸的组合物,按质量百分比由99%的精氨酸和1%的海藻糖组成。
[0019] 实施例3
[0020] 一种含精氨酸的组合物,按质量百分比由33.33%的精氨酸和66.67%的海藻糖组成。
[0021] 实施例4
[0022] 一种含精氨酸的组合物,按质量百分比由72%的精氨酸盐酸盐和28%的海藻糖组成。
[0023] 实施例5
[0024] 一种含精氨酸的组合物,按质量百分比由45%的精氨酸和55%的海藻糖组成。
[0025] 实施例6
[0026] 包含含精氨酸的组合物的凝胶剂,按质量百分比由实施例1的含精氨酸的组合物1%,甘油10%,丙二醇10%,羟乙基纤维素0.66%,瓜尔豆胶0.34%,水78%制成。
[0027] 实施例7
[0028] 包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备,按质量百分比由实施例2的含精氨酸的组合物20%,1-3丁二醇1%,
羧甲基纤维素钠6%,黄原胶9%,水64%制成。
[0029] 实施例8
[0030] 包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备,按质量百分比由实施例3的含精氨酸的组合物3%,甘油18%,黄原胶4.5%,水74.5%制成。
[0031] 实施例9
[0032] 包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备,按质量百分比取:实施例4的含精氨酸的组合物8%,丙二醇6.6%,1-3丁二醇3.4%,瓜尔豆胶12%,水70%制成。
[0033] 实施例10
[0034] 包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备,按质量百分比由实施例5的含精氨酸的组合物14%,甘油8%,羟乙基纤维素1.6%,黄原胶6.4%,水70%制成。
[0035] 实施例11
[0036] 凝胶剂的制作方法:
[0037] (1)分别按实施例6-10之一的配方称取原料;
[0038] (2)将含精氨酸的组合物、水加入到水相罐中混合,加热至85℃,保温20min;
[0039] (3)将增稠剂与保湿剂混合,均匀后,倒入乳化罐中,将乳化罐加热至85℃;
[0040] (4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中,
真空均质5min,搅拌20min;
[0041] (5)降温至40℃,即得。
[0042] 试验:
[0043] 下述试验中所使用的对照品及其制备方法如下:
[0044] 对照1组:
[0045] (1)称取精氨酸1g,黄原胶4.5g,丙二醇18g,水74.5g;
[0046] (2)将精氨酸、水加入到水相罐中混合,加热至85℃,保温20min;
[0047] (3)将黄原胶与丙二醇混合,均匀后,倒入乳化罐中,将乳化罐加热至85℃;
[0048] (4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中,真空均质5min,搅拌20min;
[0049] (5)降温至40℃,即得。
[0050] 对照2组:
[0051] (1)称取海藻糖2g,黄原胶4.5g,丙二醇18g,水74.5g;
[0052] (2)将海藻糖、水加入到水相罐中混合,加热至85℃,保温20min;
[0053] (3)将黄原胶与丙二醇混合,均匀后,倒入乳化罐中,将乳化罐加热至85℃;
[0054] (4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中,真空均质5min,搅拌20min;
[0055] (5)降温至40℃,即得。
[0056] 对照3组:
[0057] (1)称取黄原胶4.5g,丙二醇18g,水74.5g;
[0058] (2)将丙二醇加热至85℃,保温20min,;加黄原胶搅拌25min,至均匀;
[0059] (3)降温至40℃,即得。
[0060] 对照4组:藻酸盐
敷料[泰州市榕兴抗粘敷料有限公司(苏食药监械(准)字2014第2640061号)]
[0061] 下述试验中,各实施例组所使用的实验品均按照各实施例的百分含量,按照实施例11制成的凝胶剂。
[0062] 实施例12
[0063] 吸湿性试验
[0064] 参照《2015版中国药典(第四部)》指导原则9103药物引湿性试验指导原则[0065] 1、取干燥的具塞玻璃称量瓶(外径为50mm,高为15mm)于前一天置于适宜的25℃±1℃恒温干燥器(下部放置
氯化铵或
硫酸铵饱和溶液)内,精密称重(m1)。
[0066] 2.取实施例6-10制备的实验品、对照1组、对照2组,对照4组适量,置上述称量瓶中并平铺于称量瓶内,供试品厚度一般约为1mm,精密称重(m2)。
[0067] 3.将称量瓶敞口,并与瓶盖同置于上述恒温恒湿条件下24小时。
[0068] 4.盖好称量瓶
盖子,精密称重(m3)。
[0069] 增重百分率=(m3-m2)/(m2-m1)×100%
[0070] 5.引湿性特征描述与引湿性增重的界定。
[0071] 潮解:吸收足量水分形成液体。
[0072] 极具引湿性:引湿增重不小于15%。
[0073] 有引湿性:引湿增重小于15%但不小于2%。
[0074] 略有引湿性:引湿增重小于2%但不小于0.2%。
[0075] 无或几乎无引湿性:引湿增重小于0.2%。
[0076] 表1、引湿性实验结果
[0077] 增重百分率(%) 引湿性
实施例6 15.71% 极具引湿性
实施例7 15.32% 极具引湿性
实施例8 16.43% 极具引湿性
实施例9 15.38% 极具引湿性
实施例10 15.09% 极具引湿性
对照1组 12.84% 有引湿性
对照2组 13.53% 有引湿性
对照4组 10.37% 有引湿性
[0078] 实施例13
[0079] 凝血:即血液
凝固是指血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程,是生理性
止血的重要环节。血液凝固的实质就是
血浆中的可溶性纤维蛋白原变成不可溶的纤维蛋白的过程。
[0080]
试剂:氯化
钙溶液、去离子水、抗凝血浆(
柠檬酸钠:SD大鼠血=1:6混匀)。
[0081] 凝血试验:取直径为8mm的玻璃试管,每管分别加入0.05mg上述粉末、0.95ml去离子水,再加入
氯化钙溶液1ml;摇匀后于各管内同时加入抗凝血浆1ml,轻摇、混匀,放入37摄氏度的水浴锅中观察,从加入抗凝血浆开始计时,至
混合液凝固为止,计时停止。
[0082] 表2、凝血实验结果(单位:秒)
[0083]组别 时间 组别 时间
实施例6 172.47±2.01△* 对照1组 326.84±2.67
实施例7 169.36±2.25△* 对照2组 344.52±2.08
实施例8 167.59±1.97△* 对照3组 血液无明显变化
实施例9 177.37±2.09△* 对照4组 285.37±2.48△
实施例10 174.58±1.99△*
[0084] △与对照1组比P<0.05,*与对照2组比P<0.05
[0085] 实施例14
[0086] 创面愈合试验
[0087] (一)
[0088] 取100只Balb/c雄性小鼠,背部脱毛,用生理盐水清理干净。小鼠用1%戊巴比妥钠
腹腔注射麻醉后,背部注射表柔比星(2mg/ml)。将形成溃疡性创面的小鼠随机分为10组,空白对照组不作任何处理,各组在涂抹对应实验品前,先用生理盐水清洗伤口,涂抹后用无菌纱布固定包扎伤口,每2天换药1次,观察伤口愈合情况。
[0089] 每日观察并记录各组动物的生理、行为特征,创面形态及创面分泌物及动物死亡情况。
[0090] (1)创面愈合率=(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积。对于原始创面及未愈合创面均用透明方格纸画创面形状的方法,以image J
软件处理图片,计算创面愈合率。
[0091] 表3 创面情况表
[0092]
[0093] *与空白对照组比P<0.01;△与对照1组比P<0.01
[0094] (二)
[0095] 创面分泌物溶菌酶含量测定
[0096] 溶菌酶是构成
机体非特异性免疫力的一种重要抗菌质,广泛存在正常体液和各种分泌液中,主要由巨噬细胞释放,溶菌酶能
水解细胞壁中的粘肽分子,使细菌溶解,而祈祷抗感染作用,同时,其含量的提高,促进了各种补体、
抗体、纤维素及杀菌物质的增多,这些物质都是局部消炎、组织重建的重要条件,有利于创面的愈合。
[0097] 参照“琼脂免疫扩散法”进行,在涂抹实验品3天、5天、10天时用
脱脂棉吸取各组小鼠创面分泌物,置入装有1ml生理盐水试管中,反复震荡,洗液经3000r/min离心15min,取上清20ul,注入含金黄色葡萄球菌菌平皿孔内,25℃温育18h后,测量小孔中卫溶菌酶环直径。以同样方法,用不同浓度梯度的溶菌酶标准液绘制标准曲线。从曲线上查得分泌物中溶菌酶含量。
[0098] 表4 各组小鼠创面分泌物溶菌酶含量(mg/l)
[0099]组别 3天 5天 10天
实施例6 201.75±21.06 227.14±20.69*△ 293.69±22.48*△
实施例7 201.69±20.42 227.96±20.85*△ 294.74±21.36*△
实施例8 203.68±20.53 228.57±21.41*△ 297.35±20.68*△
实施例9 202.68±20.59 227.63±20.25*△ 295.44±20.67*△
实施例10 202.39±20.73 226.98±20.56*△ 296.37±21.05*△
对照1组 200.37±21.65 214.23±21.45* 272.69±22.08*
对照2组 200.65±21.82 215.78±20.12* 270.41±21.27*
对照3组 197.18±20.93 205.75±20.69 235.28±20.91
对照4组 199.64±21.07 208.39±20.46 246.38±20.65
空白对照组 198.34±20.36 205.36±21.39 230.38±21.08
[0100] *与空白对照组比P<0.05;△与对照1组比P<0.05
[0101] (三)
[0102] 重复上述实验,分别于5天、10天每组随机选出5只小鼠,取创面处组织约30mg放入50ml锥形瓶中,加入6M盐酸10ml,置于电热鼓
风干燥箱105℃下水解16小时,调pH至6.8-
6.9,按羟脯氨酸
试剂盒依次加入试剂液,混匀,60℃水浴15分钟,冷却后,3500转/分离心10分钟,取上清液在550nm处,1cm光径,测吸光度。根据试剂盒中公式计算出羟脯氨酸含量。
[0103] 表5 创面羟脯氨酸含量(ug/g)
[0104]组别 5天 10天
实施例6 22.3±1.9 31.2±1.8
实施例7 21.5±1.8 31.6±1.8
实施例8 23.2±2.0 32.5±2.0
实施例9 22.4±1.7 31.8±1.9
实施例10 22.6±1.7 31.7±1.9
对照1组 20.7±1.8 27.1±1.7
对照2组 20.5±1.9 27.2±2.0
对照3组 19.4±1.8 24.6±2.0
对照4组 20.1±2.1 25.6±1.7
空白对照组 19.3±1.6 23.4±1.7
[0105] 实施例15
[0106] 皮肤刺激性试验
[0107] 采用健康新西兰白色纯种大白兔27只,体重不低于2kg,实验前4h将动物背部脊柱两侧被毛除去,范围约为5cm*5cm,作为试验和观察部位,随机分为9组,将实验品涂抹在左侧,右侧作为空白对照,将左侧涂抹实验品后用绷带固定4h,结束后拆除绷带,用蒸馏水洗去残留实验品。观察拆除绷带后1h,24h,48h和72h涂抹实验品部位及周围皮肤组织反应,包括红斑、焦痂、水肿和
坏死等并做好记录。
[0108] 表6、皮肤刺激性实验结果
[0109]
[0110] 以上述实施例仅表达了本发明的具体实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明
专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干
变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。