专利汇可以提供人神经干细胞的培养方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种人神经干细胞的培养方法,包括以下步骤:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的 基础 培养液、胰岛素、 盐酸 丁二胺、硒化钠、氢化可的松、L-谷 氨 酰胺、人转 铁 蛋白和黄体 酮 组成的人神经干细胞培养基;2、即时采集病员本人自体血清;3、将采集的病员本人自体血清加入配制出的人神经干细胞培养基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO2温箱孵育。本发明方法简单,可重复性强,操作简便易行;为有关神经干细胞及其应用的科研、教学、临床应用等能起到不可估量的作用,同时也孕育着巨大的社会效益和经济效益。,下面是人神经干细胞的培养方法专利的具体信息内容。
1.一种人神经干细胞的培养方法,其特征在于包括以下步骤:(1)配制人神经干细胞培养基,该培养基的配制步骤为:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基础培养液,加纯净水至浓度为10~25g/L,并充分搅拌溶解,制得细胞的一般基础培养液;b、再取胰岛素(Insulin)、L-谷氨酰胺(L-Glutamine)、盐酸丁二胺(Putrescine)、硒化钠(Sodium Selenide)、人转铁蛋白(Transferrin)、氢化可的松(Hydrocortisone)、黄体酮(Progesterone)依次加入基础培养液中,充分搅拌均匀;c、以1~10当量浓度的氢氧化钠调pH为7.4~8.0;d、层流细胞培养室抽滤消毒,4℃储存备用。(2)即时采集病员本人自体血清,采集步骤为:a、准备玻璃离心管、一次性无菌注射器、酒精棉;b、常规消毒、前臂静脉取血,不加任何抗凝剂;c、将静脉血置于无菌玻璃离心管中,室温或4℃条件下,离心1500~1800rmp,10分钟,可得到病员自体血清,收集血清;(3)取步骤1配制出的人神经干细胞培养基,取步骤2即时采集病员本人自体血清加入培养基中,血清的含量为培养基的5~20%;将加入血清的培养基置于培养箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2温箱孵育11~21天。
2.根据权利要求1所述的一种人神经干细胞的培养方法,其特征在于步骤1中所述培养基所包含各组分的重量配比为:DMEM和F12按1∶1混合而成的基础培养液 10000~25000胰岛素(Insulin) 4.5~12.5L-谷氨酰胺(L-Glutamine) 3.5~12.5盐酸丁二胺(Putrescine) 9.2~35.6硒化钠(Sodium Selenide) 0.01~0.51人转铁蛋白(Transferrin) 50.0~150.0氢化可的松(Hydrocortisone) 5.0~35.0黄体酮(Progesterone) 0.01~0.55
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