1.一种抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，包括：(1)样品制备及前处理；(2)设备选型及试剂、培养基配制；(3)菌种保藏、活化及菌悬液制备；(4)美蓝染色后菌悬液活菌含量CB的血球板计数及接种菌液CB标定；(5)活菌含量对数值lgCB-相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；(6)样品接种、培养及洗脱回收；(7)回收液相对荧光强度值IB测定；(8)回收液活菌含量CB和TB推算以及抗菌率R和抗菌活性值A计算；(9)结果评价；其特征在于，应用ATP荧光光度计对以抗菌率R或抗菌活性值A表征的抗菌不锈钢抗真菌性能进行精准定量测试的ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法，具体的：
在回收液相对荧光强度值IB测定中：
明确对照样品和抗菌样品的数量、尺寸及前处理要求，将真菌试验菌种的标准菌株进行传代、活化后，取新鲜白色念珠菌或霉菌孢子培养物制备菌悬液；经美蓝染色后采用血球计数板测定菌液的活菌含量CB，并对接种菌液CB进行标定：5.0×105CFU/mL～9.0×105CFU/
3 4 5
mL，选择活菌含量CB为2.1×10CFU/mL、2.1×10 CFU/mL、2.1×10CFU/mL的菌液作为标准系列菌悬液，应用ATP荧光光度计对其相对荧光强度值IB进行测定；绘制lgCB-lgIB标准曲线，推导得出曲线的线性方程式Y＝aBX+bB及相关系数RB2，然后，向各组样品待测表面分别滴加0.3mL接种菌液，并立即用4.6mL洗脱液对6组0h接触样品进行洗脱回收，测定回收液的相对荧光强度值IBC0ij、IBT0ij，根据lgCB-lgIB曲线方程式Y＝aBX+bB推算其活菌含量CBOij和TBOij，同时，在(95±2)％RH的湿度条件下，将6组密封于无菌平皿内的对照样品及抗菌样品在(30±2)℃(白色念珠菌)培养24h±2h或(28±2)℃(霉菌)培养48h±2h后；采用与0h接触样品相同方式洗脱回收表面残留菌并测定回收液的相对荧光强度值IBCtij、IBTtij，推算其活菌含量CBtij和TBtij；
在抗菌率R及抗菌活性值A计算中：
根据试验菌种标准曲线lgCB-lgIB的线性方程式Y＝aBX+bB，以0h接触及经24h或48h培养后每件对照样品和抗菌样品回收液的相对荧光强度测定值 和 作为基础
数据；在试验有效条件下，计算其真菌增长值Fij、Gij以及抗菌率Rij和抗菌活性值Aij；对每组样品的Rij和Aij取算术平均值得到相应的Ri和Ai；每批抗菌不锈钢样品的抗菌率R和抗菌活性值A为其三组样品Ri和Ai的算术平均值；并明确相关数据修约和测量不确定度要求；
在结果评价中：
参考卫生行业通用做法和相关抗菌产品标准要求，确定抗真菌性能分级判定标准；当某组(件)抗菌不锈钢样品的抗菌率Ri(Rij)或抗菌活性值Ai(Aij)与其他两组(四件)样品的抗真菌性能相比至少相差一个水平级时，重新提取一组(件)样品重复实验；计算其经ATP生物荧光lgCB─lgIB标准曲线法测得的抗菌率或抗菌活性值，如果前后两组(件)抗菌不锈钢样品抗真菌性能水平相同，则弃之；取另外两组(四件)剩余样品抗菌率Ri(Rij)或抗菌活性值Ai(Aij)的算术平均值作为该批次(组)抗菌不锈钢样品抗真菌性能的评价结果。
2.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的样品制备及前处理，按下述步骤进行：
(1)对照样品：除不具备抗菌覆盖层外，对照样品的类别、金属基体、工艺及外观、尺寸、数量等与待测抗菌不锈钢样品完全相同；每个菌种试验使用6组样品；其中0h接触和24h或
48h培养试验各用3组，每组5件样品；
(2)抗菌样品：经电镀、化学镀等电化学方法处理后，在表面形成抗菌覆盖层的不锈钢材料及制品；样品覆盖层表面均匀并具备一定附着强度，无任何到达基材金属的损伤；尺寸为(50±2)mm×(50±2)mm，厚度不大于5mm，抗菌样品数量与对照样品相同，每组待测样品选择一组对照样品作为参照物并有效标识；
(3)样品前处理：实验前将对照样品和抗菌样品在75％的乙醇溶液中浸泡5min，并在超净工作台上用无菌水充分清洗样品以去除乙醇；自然干燥后将样品待测表面向上放入无菌平皿中备用。
3.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的设备选型及试剂、培养基配制，按下述步骤进行：
(1)通用要求：试验用分析纯试剂及符合GB/T 6682-2008规定的三级水(蒸馏水或去离子水)，实验室具备二级生物安全资质，人员具有正规微生物实验室工作经验；
(2)仪器设备：二级生物安全柜或洁净等级不低于100的超净工作台；含ATP荧光光度计、专用试管等的ATP生物荧光快速检测系统，ATP荧光光度计波长量程300nm～650nm，真菌细胞/孢子总数检测范围101CFU/mL～105CFU/mL；放大倍数40×～400×的生物光学显微镜；
(20～50)℃±1℃、(30～95)％RH±2％RH的恒温恒湿培养箱；(0～50)℃±1℃、(50～300)r/min的恒温振荡器；转速≥8000r/min的离心机及配套离心管；转速范围(500～3000)r/min的旋涡振荡器；(121±2)℃、(103±5)kPa的压力蒸汽灭菌器；-20℃～-80℃的低温冰箱；0℃～10℃的冷藏箱；感量0.001g的电子天平；频率范围(30～50)kHz的超声波清洗器；
精度±0.1(25℃)的pH计；电炉；
(3)材料器具：血球计数板及专用盖玻片；1mL、10mL的无菌刻度吸管；0.05mL、0.1mL、
0.2mL、1mL、5mL、10mL(计量误差小于1％)的单道可变量程移液枪和无菌移液枪头；容量
100mL、250mL、500mL的无菌锥形瓶及瓶塞；直径90mm的无菌培养皿；玻璃漏斗；无菌旋塞试管；直径不大于4mm的接种环；L棒；直径5mm的玻璃珠；酒精灯；灭菌镊子；医用胶带；用于生化检测的药棉和纱布；酒精棉球(75％)；无菌滤纸； 的温度计；精度
0.01s的秒表；
(4)试剂：75％的乙醇溶液；0.1％的吕氏碱性美蓝染色液；以下试剂分装后121℃高压灭菌30min，5℃～10℃存放30d：N一甲基乙磺酸、吐温80、二辛磺化丁二酸钠任选一种，配制成0.05％的润湿剂水溶液；85％的生理盐水；
(5)培养基/液(可用市售培养基/液)：所配培养基/液分装后121℃高压灭菌30min，2℃～8℃存放30d；
沙氏培养基/液(白色念珠菌菌种活化用)：将40g葡萄糖、10g蛋白胨、20g琼脂加热溶解于1000mL水中(培养液不加琼脂)，调节pH至5.6±0.2(25℃)；
察氏培养液(霉菌孢子液制备、菌悬液稀释及样品洗脱用)：将2g硝酸钠、1g磷酸氢二钾、0.5g氯化钾、0.5g硫酸镁、0.01g硫酸亚铁、30g蔗糖加热溶解于1000mL含0.05％润湿剂的水溶液中，调节pH至6.0～6.5(25℃)；
马铃薯一葡萄糖培养基(霉菌孢子菌种活化用):将300g新鲜马铃薯去皮切块，在
1000mL水中煮沸20min～30min；过滤取汁，向滤液中加入20g葡萄糖、0.1g氯霉素、20g琼脂后定容至1000mL；
(6)ATP荧光反应试剂(或用市售试剂)：除磷酸盐缓冲溶液外，所配ATP荧光反应试剂-
20℃～-70℃保存，6个月内使用；
稀释缓冲溶液：0.005mol/L且含0.037％蔗糖的磷酸氢二钠溶液，调节pH至7.2±0.2；
121℃高压灭菌15min，2℃～8℃存放30d；
ATP荧光试剂缓冲溶液：将1117mg三羟甲基氨基甲烷、183mg乙二胺四乙酸二钠、808mg乙酸镁、6.7mg二巯基苏糖醇、25000mg的β-环糊精和925mg葡萄糖加热溶解于250mL水中，调节pH至7.5±0.2；8h内使用；
ATP裂解液：将4.6国际单位/ml的三磷酸腺苷双磷酸酶(EC:3.6.1.5)和46国际单位/ml的磷酸腺苷脱氨酶(EC:3.5.4.6或EC:3.5.4.17)、37mg蔗糖、20mg牛血清蛋白溶解于10mL浓度为0.05mol/L的2-吗啉乙磺酸缓冲溶液中，调节pH至6.0±0.5，8h内使用(1mL裂解液在
15min内可将沙氏培养液中的ATP浓度降至10-11mol/L以下)；
ATP提取液：将45mg三羟甲基氨基甲烷加热溶解于9.8ml水中，与0.2ml浓度为10％的苯扎氯铵溶液混匀后，调节pH至12.0±0.5(真菌细胞ATP提取效率不低于80％)；
ATP荧光试剂：将0.7mg荧光素酶、12.6mg的D-荧光素、56mg牛血清蛋白溶解于30mL的ATP荧光试剂缓冲溶液，混匀后室温静置15min，3h内使用。
4.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的菌种保藏、活化及菌悬液制备，按下述步骤进行：
(1)试验菌种：白色念珠菌ATCC 10231；黑曲霉ATCC 16404；球毛壳霉ATCC6205；产黄青霉ATCC 9179(或由国家微生物菌种保藏中心提供并可溯源的其他菌种)；
(2)菌种保藏：白色念珠菌——以无菌操作打开冻干菌种管，用毛细吸管向管内注入适量沙氏培养液，吹吸数次使菌种融化分散；将少许菌种悬液滴入装有5mL～10mL沙氏培养液的试管中，37℃培养18h～24h，霉菌——以无菌操作将霉菌试验菌种接种于马铃薯—葡萄糖培养基斜面并标明接种日期，28℃～30℃培养至斜面长满霉菌孢子(7d～14d)；3℃～10℃保藏4个月，作为保藏菌；
(3)菌种活化：白色念珠菌——用接种环刮取第1代培养物中的典型菌落，划线接种于沙氏培养基平板；37℃培养18h～24h后，挑取第2代培养物中的典型菌落接种于沙氏培养基斜面；37℃培养18h～24h后，4℃密封存放，6周内使用，霉菌——用接种环刮取保藏菌孢子，接种马铃薯—葡萄糖培养基斜面，28℃～30℃培养7d～14d，直至生成大量孢子，制备孢子悬浮液前不得拔出霉菌菌种的试管塞，每支试管打开后只供制备一次孢子液，每次均使用新培养的霉菌孢子制备悬液；
(4)菌悬液制备：白色念珠菌试验——用接种环从斜面上挑取新鲜菌种培养物接种于装有50mL沙氏培养液的无菌锥形瓶中，置于(30±1)℃的恒温振荡器内150r/min培养18h～
24h，4℃密封存放，当天使用，霉菌试验——向菌种试管中加入10mL的无菌水，用接种环轻刮培养基表面的新鲜霉菌孢子，将洗出的孢子原液注入装有15粒玻璃珠和45mL察氏培养液的无菌加塞锥形瓶中，3000r/min振摇试管2min，打散孢子团，混匀孢子液，然后，将覆有无菌药棉或八层纱布的玻璃漏斗置于锥形瓶上，过滤孢子悬浮液除去菌丝和培养基碎片；将滤液移至灭菌离心管中，室温下8000r/min分离处理至少10min，去上清液；再用50mL察氏培养液清洗孢子沉淀物并离心，重复清洗3次后，用察氏培养液稀释离心后的孢子沉淀物，每种试验霉菌均按照上述方法制备孢子悬液，并将各菌种的孢子液等体积混合；0℃～7℃存放，当天或4d内使用。
5.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数及接种菌液CB标定，按下述步骤进行：
(1)美蓝染色：以无菌操作将50μL稀释度为10-2～10-3的白色念珠菌悬浮液或霉菌混合孢子液和30μL浓度为0.05％的吕氏碱性美蓝染色液分别移至同一支无菌试管中(菌液稀释度以血球计数板每个小方格内含4～5个白色念珠菌细胞或霉菌孢子为宜)，1000r/min振摇试管1min，使菌悬液与染色液充分混匀；
(2)血球板计数：用无菌吸管将5μL±0.5μL染色后的菌悬液置于盖玻片边缘，使其沿玻片间隙缓慢渗入血球计数板，计数板与玻片之间不可产生气泡，否则重新操作，用无菌滤纸吸净槽中多余菌液，静置2min±20s，使其全部沉降至计数室内，当使用16中格计数板时,在对角线方位取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个小方格)内的白色念珠菌细胞或霉菌孢子进行计数；如使用25中格计数板,除计数上述4个对角方位外,还需计数中央的1个中格(即80个小方格)；当试验菌种位于中格的双线上时，则只计数上线和右线或下线和左线上的白色念珠菌细胞或霉菌孢子；
(3)活菌含量CB计算：将生物光学显微镜放大倍数自低向高调至400×后，立即对血球计数板相应空间位置处的白色念珠菌细胞或霉菌孢子进行计数；其中无色的白色念珠菌细胞为活菌，蓝色或淡蓝色者为死菌；边缘呈深蓝色、内部呈无色或淡蓝色及淡红色的霉菌孢子为活菌，边缘与内部均呈深蓝色者为死菌，故只计数边缘与内部颜色不同的孢子，若霉菌孢子悬液中无菌丝单孢子的数量低于90％，则重新制备孢子液，对血球计数板每个小方格中的白色念珠菌细胞或霉菌孢子重复镜检计数三次，取平均值，当血球计数板规格为16×25时，1mL菌液的活菌含量(菌落形成单位每毫升，CFU/mL)CB＝N÷5×16×K×104；当血球计数板规格为25×16时，CB＝N÷5×25×K×104；其中N为血球计数板五个中格内白色念珠菌细胞或霉菌孢子的活菌总数，K为菌液稀释倍数，然后，用察氏培养液对已知活菌含量CB的白色念珠菌悬浮液或霉菌混合孢子液进行稀释，得到CB范围为5.0×105CFU/mL～9.0×
105CFU/mL的接种菌液。
6.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的活菌含量对数值lgCB-相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立，按下述步骤进行：
用察氏培养液对已知活菌含量CB的白色念珠菌悬浮液或霉菌混合孢子液进行连续梯度稀释后，得到标准系列菌悬液：2.1×103CFU/mL、2.1×104CFU/mL、2.1×105CFU/mL并混匀，根据本专利中相对荧光强度值IB测定方法，按照活菌含量CB从低到高的顺序，测定并记录上述标准溶液及0.3mL接种菌液经4.6mL洗脱液稀释后1min内的相对荧光强度值(将后者记为IB0)，然后，以标准系列菌悬液的相对荧光强度对数值lgIB作为横坐标，以相应的活菌含量对数值lgCB为纵坐标作图；对二者之间的数学关系进行曲线标定，应用最小二乘拟合法推
2 2
导得出曲线方程式Y＝aBX+bB及线性相关系数RB ；当RB≥0.98、置信水平≥0.95时，按照本专利方法所做的测定有效。
7.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的样品接种、培养及洗脱回收，按下述步骤进行：
(1)接种培养：用灭菌移液枪向各组对照样品和抗菌样品待测表面分别滴加0.3mL接种菌液(与lgCB-lgIB曲线标定用菌液取自同一支试验菌种原液试管，0℃±1℃保存，2h内使用)，用L棒(附着接种菌液但不挂滴)将菌液涂抹均匀，使其覆盖样品整个表面，盖上皿盖，用医用胶带将装有6组24h或48h接触样品的平皿密封；在(95±2)％RH的湿度条件下，(30±
2)℃培养24h±2h(白色念珠菌)或(28±2)℃培养48h±2h(霉菌)；
(2)洗脱回收：6组0h接触样品接种白色念珠菌或霉菌后，立即用灭菌移液枪吸取4.6mL洗脱液(即察氏培养液)，在平皿内反复冲洗每个样品接种表面至少4次，充分洗脱并将洗液移入无菌试管中(用移液枪头反复吹吸平皿内霉菌洗液，直至菌苔被打散后再将其移入试管)，3000r/min振摇试管2min；充分混匀后将其作为待测样品回收液(若回收液不足4.9mL，添加洗脱液至4.9mL)，各组经24h或48h培养后的样品采用与0h接触样品相同的洗脱方式回收真菌。
8.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的回收液相对荧光强度值IB测定，按下述步骤进行：
(1)仪器及试剂组相对荧光强度本底值校准：用灭菌移液枪将0.1mL察氏培养液、
0.35mL生理盐水和0.05mL的ATP裂解液分别加入同一支无菌试管中，3000r/min振摇试管
30s；静置10min～20min，作为一级空白样；再将0.1mL一级空白样移至另外一支无菌试管中，滴加0.4mL生理盐水并混匀，作为二级空白样，然后，用灭菌移液枪将0.1mL二级空白样依次移至三支仪器专用无菌试管中，作为空白测试平行样；向三个平行样中各滴加0.1mL的ATP提取试剂，混匀后滴入0.1mL的ATP荧光试剂，3000r/min振摇试管5s，立即用ATP荧光光度计测定其相对荧光强度值IB并记录(确保各环节操作时间一致，避免交叉污染)，每个平行样测定时间不超过15s，以三个空白测试平行样相对荧光强度值的算术平均值作为仪器和试剂组本底值(或按照仪器使用说明校准本底)；
(2)回收液相对荧光强度值IB测定：如空白试剂组本底水平符合仪器使用要求，用灭菌移液枪将4.9mL回收液和0.1mL的ATP裂解液分别加入同一支无菌试管中，3000r/min振摇试管30s；室温静置20min后，滴加5.0mL的ATP提取试剂并再次混匀；室温静置10min，用灭菌移液枪将0.1mL上述混和溶液依次移至三支仪器专用无菌试管中，作为ATP生物荧光测试平行样，向三个平行样中各滴加0.1mL的ATP荧光试剂，3000r/min振摇试管5s，立即用ATP荧光光度计测定其相对荧光强度值IB并记录(确保各环节操作时间一致，避免交叉污染)，每个平行样测定时间不超过15s，以三个ATP生物荧光测试平行样相对荧光强度值的算术平均值作为待测样品回收液的IB测定值。
9.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的回收液活菌含量CB和TB推算以及抗菌率R和抗菌活性值A计算，按下述步骤进行：
(1)回收液活菌含量CB及TB推算
根据试验菌种标准曲线lgCB-lgIB的线性方程式Y＝aBX+bB，推算各组样品经0h接触及
24h或48h培养后回收液的活菌含量CB和TB，相关计算见公式(1)～(12)：
式中：
CB0和CBt—3组0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收的平均活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；
CB0i和CBti—每组0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收的平均活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；
CB0ij和CBtij—每件0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收的活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
aB—标准曲线lgCB-lgIB斜率；bB—标准曲线lgCB-lgIB在纵轴截距；
TB0和TBt—3组0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收的平均活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；
TB0i和TBti—每组0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收的平均活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；
TB0ij和TBtij—每件0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收的活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
(2)试验有效条件
如果每件0h接触对照样品的回收液与0.3mL接种菌液经4.6mL洗脱液稀释后1min内的相对荧光强度测定值接近，即 每件经24h或48h培养后对照样品回收液相对荧光强度测定值的对数 即CBtij≥0.1×CB0ij，则当3组0h接触对照样品回收液相
对荧光强度测定值 的组内及组间变异系数C·V≤10％时(所涉计算公式见本专利相关测量不确定度要求)，按照本专利方法进行的测定有效；
(3)真菌增长值Fij、Gij计算
每件对照样品和抗菌样品经24h或48h培养后，真菌增长值Fij、Gij分别按照公式(13)、(14)计算：
式中：
Fij和Gij—每件对照样品和抗菌样品经24h或48h培养后的真菌增长值，样品组别i＝1,
2,3，每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
CB0ij和CBtij—每件0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收的活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
TB0ij和TBtij—每件0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收的活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
aB—标准曲线lgCB-lgIB斜率；
(4)抗菌率R计算
试验有效条件下，每件抗菌不锈钢样品的抗菌率Rij、每组及每批样品的抗菌率Ri和R分别按照公式(15)、(16)、(17)计算：
式中：
Rij—每件抗菌不锈钢样品的抗菌率，％；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,
4,5；
Ri—每组抗菌不锈钢样品的抗菌率，％；样品组别i＝1,2,3；
R—每批抗菌不锈钢样品的抗菌率，％；
TBtij和CBtij—每件抗菌样品和对照样品经24h或48h培养后回收的活菌量，单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL)；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件抗菌样品和对照样品经24h或48h培养后，回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
aB—标准曲线lgCB-lgIB斜率；
(5)抗菌活性值A计算
试验有效条件下，每件抗菌不锈钢样品的抗菌活性值Aij、每组及每批样品的抗菌活性值Ai和A分别按照公式(18)、(19)、(20)计算：
式中：
Aij—每件抗菌不锈钢样品的抗菌活性值；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,
4,5；
Ai—每组抗菌不锈钢样品的抗菌活性值，样品组别i＝1,2,3；
A—每批抗菌不锈钢样品的抗菌活性值；
Fij和Gij—每件对照样品和抗菌样品经24h或48h培养后的真菌增长值，样品组别i＝1,
2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后对照样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
和 —每件0h接触和经24h或48h培养后抗菌样品回收液的相对荧光强度测定值，RLU；样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；
aB—标准曲线lgCB-lgIB斜率；
(6)数据修约要求：采用血球计数板标定菌悬液活菌含量CB时，参考GB4789.2—2016中相关规定，当CB小于100CFU/mL时，“四舍五入”取整数；当CB不小于100CFU/mL时，第3位数字“四舍五入”后取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式表示，“四舍五入”后采用两位有效数字，对照样品和抗菌样品经0h和24h/48h接触后，回收液相对荧光强度测定值和 取整数，抗菌率Rij、Ri、R计算结果取三位有效数字；真菌增长值Fij、Gij和抗菌活性值Aij、Ai、A计算结果取两位有效数字；
(7)测量不确定度：本专利方法主要通过计算对照样品和抗菌样品经0h接触及24h或
48h培养后，回收液相对荧光强度测定值的组内及组间变异系数C·V＝σ÷μ×100％(μ、σ和C·V计算结果保留到小数点后两位)，判断将ATP生物荧光分析法应用于不锈钢抗真菌性能测试的重现性；规定组内及组间变异系数C·V≤10％；
每组0h接触的5件对照样品、5件抗菌样品以及经24h或48h培养后的5件对照样品、5件抗菌样品，其回收液相对荧光强度测定值的算术平均值 及 分别按照公式
(21)、(22)计算(样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；ATP测试平行样编号k＝
1,2,3；式中 和 分别为每组对照样品和抗菌样品经0h接触及24h或
48h培养后，各平行样的相对荧光强度测定值)：
3组0h接触的15件对照样品、15件抗菌样品以及经24h或48h培养后的15件对照样品、15件抗菌样品，其回收液相对荧光强度测定值的算术平均值 及 分别按照公式(23)、(24)计算(样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；ATP测试平行样编号k＝
1,2,3；式中 和 分别为每组对照样品和抗菌样品经0h接触及24h或
48h培养后，各平行样的相对荧光强度测定值)：
每组0h接触的5件对照样品、5件抗菌样品以及经24h或48h培养后的5件对照样品、5件抗菌样品，其回收液的相对荧光强度测定值的标准偏差 及 分别按照公
式(25)和(26)计算(样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；ATP测试平行样编号k＝1,2,3；式中 和 分别为每组对照样品和抗菌样品经0h接触及24h或
48h培养后，各平行样的相对荧光强度测定值)：
3组0h接触的15件对照样品、15件抗菌样品以及经24h或48h培养后的15件对照样品、15件抗菌样品，其回收液的相对荧光强度测定值的标准偏差 及 分别按照
公式(27)和(28)计算(样品组别i＝1,2,3；每组样品编号j＝1,2,3,4,5；ATP测试平行样编号k＝1,2,3；式中 和 分别为每组对照样品和抗菌样品经0h接触及
24h或48h培养后，各平行样的相对荧光强度测定值)：
10.根据权利要求1所述的抗菌不锈钢抗真菌性能的检测方法，其特征在于，所述的结果评价，按下述步骤进行：
(1)参考卫生行业通用做法和相关抗菌产品标准要求，采取以下分级判定标准：
如采用抗菌率R作为相关性能评价指标：当Rij/Ri/R＜80％时，样品无抗真菌作用；当
80％≤Rij/Ri/R＜90％时，样品具有抗真菌作用；当90％≤Rij/Ri/R＜99％时，样品抗真菌作用适中；当99％≤Rij/Ri/R＜99.9％时，样品抗真菌作用较强；当Rij/Ri/R≥99.9％时，样品抗真菌作用极强；
如采用抗菌活性值A作为相关性能评价指标：当Aij/Ai/A＜0.5时，样品无抗真菌作用；
当0.5≤Aij/Ai/A＜1.0时，样品具有抗真菌作用；当1.0≤Aij/Ai/A＜2.0时，样品抗真菌作用适中；当2.0≤Aij/Ai/A＜3.0时，样品抗真菌作用较强；当Aij/Ai/A≥3.0时，样品抗真菌作用极强；
(2)当某组(件)抗菌不锈钢样品的抗菌率Ri(Rij)或抗菌活性值Ai(Aij)与其他两组(四件)样品的抗真菌性能相比至少相差一个水平级时，重新提取一组(件)样品重复实验；计算其经ATP生物荧光lgCB─lgIB标准曲线法测得的抗菌率或抗菌活性值，如果前后两组(件)抗菌不锈钢样品抗真菌性能水平相同，则弃之；取另外两组(四件)剩余样品抗菌率Ri(Rij)或抗菌活性值Ai(Aij)的算术平均值作为该批次(组)抗菌不锈钢样品抗真菌性能的评价结果。