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一种提取纯化构树醇G的方法

阅读:1156发布:2020-05-11

专利汇可以提供一种提取纯化构树醇G的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种提取纯化构树 黄 酮 醇 G的方法,包括以下步骤:(1)以构树根皮为原料,进行干燥、 粉碎 ,采用超临界二 氧 化 碳 技术萃取构树根皮中的油脂类物质;(2)残渣加丙酮溶液进行超声循环提取;(3)提取液浓缩后上大孔 树脂 柱,先用 水 和30-50% 乙醇 溶液洗脱,再用85-95%乙醇溶液洗脱,收集85-95%乙醇洗脱液;(4)洗脱液浓缩,上 硅 胶短粗柱,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,收集洗脱液,浓缩,放置结晶;(5)分出结晶,丙酮-正己烷混合 溶剂 重结晶,滤出结晶, 冷冻干燥 即得构树黄酮醇G。本发明方法操作简单,可实现规模化生产。,下面是一种提取纯化构树醇G的方法专利的具体信息内容。

1.一种提取纯化构树醇G的方法,其特征在于按如下工艺步骤进行:
(1)以构树根皮为原料,进行干燥、粉碎,采用超临界二技术萃取构树根皮中的油脂类物质;
(2)残渣加6-10倍(V/W)70-90%丙酮溶液进行超声循环提取1-3次,每次1-2h,合并提取液;
(3)提取液浓缩后上大孔树脂柱,先用和30-50%乙醇溶液洗脱,再用85-95%乙醇溶液洗脱,收集85-95%乙醇洗脱液;
(4)洗脱液浓缩,上胶短粗柱,柱径高比为1:3-5,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,收集洗脱液,浓缩,放置结晶;
(5)分出结晶,丙酮-正己烷混合溶剂重结晶,滤出结晶,冷冻干燥即得构树黄酮醇G。
2.如权利要求1所述的一种提取纯化构树黄酮醇G的方法,其特征在于,所述步骤(1)中超临界二氧化碳萃取温度为35-50℃,压为20-32MPa,萃取时间为0.5-1h。
3.如权利要求1所述的一种提取纯化构树黄酮醇G的方法,其特征在于,所述步骤(3)中大孔树脂可选HPD100、ADS-17、D101或HZ801型。
4.如权利要求1所述的一种提取纯化构树黄酮醇G的方法,其特征在于,所述步骤(4)中乙酸乙酯-丙酮混合溶液体积比为1:5-15。
5.如权利要求1所述的一种提取纯化构树黄酮醇G的方法,其特征在于,所述步骤(5)中丙酮-正己烷混合溶剂体积比为1-1.5:1。

说明书全文

一种提取纯化构树醇G的方法

技术领域

[0001] 本发明属于天然药物领域,具体而言,本发明涉及一种提取纯化构树黄酮醇G的方法。

背景技术

[0002] 构树黄酮醇G(Broussoflavonol G),是一种黄酮醇类化合物,分子式:C30H34O7,分子量:506.6,黄色棱晶(丙酮-正己烷),mp195-196℃。主要存在于桑科(Moraceae)构树的根皮中。
[0003] 现代药理研究表明,构树黄酮醇G能抑制脂质化,在鼠脑匀浆中,抑制由Fe2+引起的硫巴比妥酸反应物生成,其IC50为1.0μM;抑制大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,使由下列三物刺激[3H]-胸苷与DNA掺合百分率降为:胎血清(FCS,10%),0%;ADP(10μM),0.4%;5-HT(10μM),0%;抗血小板聚集,抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集,其IC50为
39.9μM。
[0004] 经文献检索,尚无适用于高纯度构树黄酮醇G的提取纯化方法报道。

发明内容

[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化构树黄酮醇G的方法。
[0006] 为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:(1)以构树根皮为原料,进行干燥、粉碎,采用超临界二氧化技术萃取构树根皮中的油脂类物质;
(2)残渣加6-10倍(V/W)70-90%丙酮溶液进行超声循环提取1-3次,每次1-2h,合并提取液;
(3)提取液浓缩后上大孔树脂柱,先用和30-50%乙醇溶液洗脱,再用85-95%乙醇溶液洗脱,收集85-95%乙醇洗脱液;
(4)洗脱液浓缩,上胶短粗柱,柱径高比为1:3-5,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,收集洗脱液,浓缩,放置结晶;
(5)分出结晶,丙酮-正己烷混合溶剂重结晶,滤出结晶,冷冻干燥即得构树黄酮醇G。
[0007] 所述步骤(1)中超临界二氧化碳萃取温度为35-50℃,压为20-32MPa,萃取时间为0.5-1h。
[0008] 所述步骤(3)中大孔树脂可选HPD100、ADS-17、D101或HZ801型。
[0009] 所述步骤(4)中乙酸乙酯-丙酮混合溶液体积比为1:5-15。
[0010] 所述步骤(5)中丙酮-正己烷混合溶剂体积比为1-1.5:1。
[0011] 综上所述,本发明存在以下优点:(1)采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质,快速、高效;
(2)采用超声循环提取的方法,提取效率高;
(3)采用大孔树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶,从而获得含量98%以上的构树黄酮醇G,成本低,分离效果好;
(4)本发明所用试剂乙酸乙酯、丙酮等,可替代通常柱层析采用的氯仿、甲醇,降低毒性和污染。
[0012] 下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例

具体实施方式

[0013] 实施例1:取构树根皮粗粉500g,采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质,萃取温度为35℃,压力为20MPa,萃取时间为1h,残渣加10倍(V/W)90%丙酮溶液进行超声循环提取1次,每次1h,合并提取液,浓缩后上HPD100型大孔树脂柱,先用水和30%乙醇溶液洗脱,再用85%乙醇溶液洗脱,收集85%乙醇洗脱液,浓缩,与100-200目的硅胶按重量比
1:1拌匀、阴干,上硅胶短粗柱,柱径高比为1:5,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,依次按1:5、1:10、1:15体积比进行洗脱,收集含构树黄酮醇G的洗脱液,回收试剂,将所得构树黄酮醇G浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶,过滤,分出结晶,采用丙酮-正己烷(1.5:1)混合溶剂重结晶,滤出结晶,冷冻干燥即得构树黄酮醇G1.1g,纯度为98.4%。
[0014] 实施例2:取构树根皮粗粉500g,采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质,萃取温度为40℃,压力为25MPa,萃取时间为0.5h,残渣加7倍(V/W)80%丙酮溶液进行超声循环提取2次,每次1h,合并提取液,浓缩后上HZ801型大孔树脂柱,先用水和35%乙醇溶液洗脱,再用90%乙醇溶液洗脱,收集90%乙醇洗脱液,浓缩,与100-200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干,上硅胶短粗柱,柱径高比为1:5,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,依次按
1:5、1:9、1:13体积比进行洗脱,收集含构树黄酮醇G的洗脱液,回收试剂,将所得构树黄酮醇G浓缩液置于结晶罐中静置24小时使其结晶,过滤,分出结晶,采用丙酮-正己烷(1:1)混合溶剂重结晶,滤出结晶,冷冻干燥即得构树黄酮醇G1.3g,纯度为98.3%。
[0015] 实施例3:取构树根皮粗粉500g,采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质,萃取温度为45℃,压力为28MPa,萃取时间为0.5h,残渣加10倍(V/W)90%丙酮溶液进行超声循环提取1次,每次2h,合并提取液,浓缩后上D101型大孔树脂柱,先用水和40%乙醇溶液洗脱,再用85%乙醇溶液洗脱,收集85%乙醇洗脱液,浓缩,与100-200目的硅胶按重量比
1:1拌匀、阴干,上硅胶短粗柱,柱径高比为1:5,以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂,依次按1:5、1:10、1:15体积比进行洗脱,收集含构树黄酮醇G的洗脱液,回收试剂,将所得构树黄酮醇G浓缩液置于结晶罐中静置12小时使其结晶,过滤,分出结晶,采用丙酮-正己烷(1.5:1)混合溶剂重结晶,滤出结晶,冷冻干燥即得构树黄酮醇G1.0g,纯度为98.6%。
[0016] 实施例4:取构树根皮粗粉1kg,采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质,萃取温度为50℃,压力为32MPa,萃取时间为0.5h,残渣加6倍(V/W)70%丙酮溶液进行超声循环提取3次,每次1h,合并提取液,浓缩后上ADS-17型大孔树脂柱,先用水和50%乙醇溶液
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