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包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法

阅读：891发布：2023-02-23

专利汇可以提供包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明采用生物工程的手段对鲍鱼进行精加工处理，通过自溶酶解、活性菌种发酵、脉冲超声处理和酶解工艺的组合，使得鲍鱼中的蛋白质等大分子物质最大化地降解为活性小分子，进而将所述的鲍鱼酶法提取物制备成为包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，所制得的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁具有良好的风味和营养保健功效，具有广阔的市场前景。，下面是包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其特征在于，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物15 30%，老抽5 10%，生抽25-40%，~ ~
食盐3 5%，白糖1 3%，料酒1 2%，肉桂粉0.1 0.3%，八角粉0.1-0.3%，余量为水，以上各成分~ ~ ~ ~
的质量百分比为100%。
2.根据权利要求1所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，优选地，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物20%，老抽8%，生抽
32%，食盐5%，白糖2%，料酒2%，肉桂粉0.1%，八角粉0.1%，水30.8%。
3.根据权利要求1所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，优选地，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物30%，老抽10%，生抽
25%，食盐5%，白糖3%，料酒1%，肉桂粉0.3%，八角粉0.3%，水25.4%。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其特征在于，所述鲍鱼酶法提取物经由以下方法制备得到：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液采用紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，进行发酵处理，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩，即为鲍鱼酶法提取物。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其特征在于，所述鲍鱼酶法提取物经由以下方法制备得到：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2-3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2-4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过30-50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于2-4℃的温度下，采用波长为200-280nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解3-4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:（0.5-1):（2-3），而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于28-32℃的温度下，发酵处理20-24小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间10-12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物。
6.一种制备权利要求1-5任一项所述包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（一）鲍鱼酶法提取物的制备：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2-3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2-4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过30-50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于2-4℃的温度下，采用波长为200-280nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解3-4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:（0.5-1):（2-3），而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于28-32℃的温度下，发酵处理20-24小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间10-12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至原体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物；
（二）所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备：
步骤八，配料：按质量百分比称取鲍鱼酶法提取物、老抽、生抽、食盐、白糖、料酒、肉桂粉、八角粉和水，以上各成分的质量百分比为100%，将称取的以上物质搅拌混合均匀；
步骤九，封装、灭菌、贴标签、装箱：将步骤八配好的调味汁分装到容器中，而后灭菌、贴标签、装箱。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，优选地，步骤四中自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2或100:0.5:3。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，优选地，步骤六中复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3或3:1:2:2。

说明书全文

包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法

[0001] 技术领域：本发明属于生物工程领域，涉及酶工程和发酵工程技术，具体涉及一种包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法，通过酶解和发酵工艺制备具有高生物活性的鲍鱼酶法提取物，进而与调味成分组合而成为具有一定保健功效的调味酱汁。

[0002] 背景技术：鲍鱼是一种软体动物，为腹足纲、前鳃亚纲、原始腹足目、鲍科、鲍属，是一种名贵的海产品。鲍鱼地理分布广，其主要场地有澳大利亚、日本、中国、新西兰、美国、欧洲和中东一带，鲍鱼是传统高档滋补食品，被誉为餐桌上的“软黄金”，药食兼用，据《名医别录》记载，鲍鱼性甘咸温，功能滋补肝肾、益精明目；《本草纲目》中记载，鲍鱼性平，味甘、咸，有明目补虚、清热滋阴、养血益胃、滋补肝肾的作用。

[0003] 随着鲍鱼人工养殖技术的应用, 福建省和广东省成为了我国最大的鲍鱼养殖基地，其中广东省汕尾市形成了全国最大的鲍鱼养殖基地之一, 年产鲍鱼900 t, 并呈持续上升趋势；而福建省部分海域海水纯净，海藻丰富，非常适合鲍鱼生长，鲍鱼产量占到全国产量四分之三左右，同时福建鲍鱼品种多为杂交鲍，个体较大，适应南方海区的生长环境，养成时间短，成活率较高，质优量大的鲍鱼产业基础，给福建鲍鱼带来了蓬勃发展机会，“漳州鲍鱼”和“连江鲍鱼”已经成为中国鲍鱼行业的知名品牌。

[0004] 然而，目前对于鲍鱼的加工利用尚处于初级阶段，现有鲍鱼的加工主要集中在干制和即食鲍鱼，其产品开发的重点在于提升鲍鱼个体大小、干制品的复水技术、即食鲍鱼的风味等。目前有关鲍鱼的加工、营养成分和生理活性的研究甚少报道, 极少的文献报道提到将鲍鱼加工为鲍鱼汁或者通过酶解技术加工为酶解提取物，然而，对于鲍鱼的加工利用尚未发挥最大的经济效益，且综合开发利用程度不够。

[0005] 发明内容：基于现有鲍鱼生产加工技术的发展状况，本发明旨在提供一种包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法，其通过对鲍鱼进行深度酶解加工处理制备得到高活性的鲍鱼酶法提取物，其中富含鲍鱼多肽，具有多项生理保健功能，且风味良好，相比传统的酶解产物，其苦味肽含量少，基本没有苦味，进而，将所制得的该鲍鱼酶法提取物可以调味酱汁的生产，所制得的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁具有良好的风味和营养保健功效，具有广阔的市场前景。

[0006] 为解决以上技术问题，本发明采用如下技术方案：一种包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其特征在于，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物15 30%，老抽5 10%，生抽25-40%，食~ ~
盐3 5%，白糖1 3%，料酒1 2%，肉桂粉0.1 0.3%，八角粉0.1-0.3%，余量为水，以上各成分的~ ~ ~ ~
质量百分比为100%。

[0007] 优选地，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物20%，老抽8%，生抽32%，食盐5%，白糖2%，料酒2%，肉桂粉0.1%，八角粉0.1%，水30.8%。

[0008] 优选地，所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物30%，老抽10%，生抽25%，食盐5%，白糖3%，料酒1%，肉桂粉0.3%，八角粉0.3%，水25.4%。

[0009] 本发明中所述的鲍鱼酶法提取物通过以下方法制备得到：步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液采用紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，进行发酵处理，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩，即为鲍鱼酶法提取物。

[0010] 优选地所述鲍鱼酶法提取物通过以下方法制备得到：步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2-3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2-4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过30-50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于2-4℃的温度下，采用波长为200-280nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解3-4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:（0.5-1):（2-3），而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于28-32℃的温度下，发酵处理20-24小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间10-12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至原体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物。

[0011] 优选地，步骤四中自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2或100:0.5:3。

[0012] 优选地，步骤六中复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3或3:1:2:2。其中所述碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶均为市售的食品加工用酶，例如购自诺维信的相关酶类。

[0013] 本发明所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备方法包括如下步骤：（一）鲍鱼酶法提取物的制备：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2-3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2-4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过30-50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于2-4℃的温度下，采用波长为200-280nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解3-4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:（0.5-1):（2-3），而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于28-32℃的温度下，发酵处理20-24小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间10-12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5-8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40-42℃，酶解处理3.5-4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:（1-1.5）:（1-2）:（2-3），复合酶的添加量为0.5-0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至原体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物；
（二）所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备：
步骤八，配料：按质量百分比称取鲍鱼酶法提取物、老抽、生抽、食盐、白糖、料酒、肉桂粉、八角粉和水，以上各成分的质量百分比为100%，将称取的以上物质搅拌混合均匀；
步骤九，封装、灭菌、贴标签、装箱：将步骤八配好的调味汁分装到容器中，而后灭菌、贴标签、装箱。

[0014] 其中步骤九中的容器优选为玻璃瓶、PE塑料瓶。

[0015] 基于以上技术方案，本发明具有如下优点和有益效果：首先，本发提供一种包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法，其通过对鲍鱼进行深度酶解加工处理制备得到高活性的鲍鱼酶法提取物，其中富含鲍鱼多肽，具有多项生理保健功能，且风味良好，相比传统的酶解产物，其苦味肽含量少，基本没有苦味，进而，将所制得的该鲍鱼酶法提取物可以调味酱汁的生产，所制得的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁具有良好的风味和营养保健功效，具有广阔的市场前景。本发明中采用生物工程的手段对鲍鱼进行精加工处理，通过自溶酶解、活性菌种发酵、脉冲超声处理和酶解工艺的组合，使得鲍鱼中的蛋白质等大分子物质最大化地降解为活性小分子，提高了鲍鱼营养成分的利用程度和营养效价，所得到的鲍鱼酶法提取物具有良好的抗氧化活性和抗疲劳功效，可以作为相应功效保健食品、药品的加工原料，极大地提高了鲍鱼加工的附加值和产业价值。并且，针对目前鲍鱼生产过剩的状况，本发明的方法也能有效地去除鲍鱼生产的库存，避免由于鲍鱼产量提升导致鲍鱼价格下降。

[0016] 其次，本发明首创地采用自溶水解、活性菌种发酵、脉冲超声处理和酶解工艺联合的处理工艺，其中自溶水解是利用鲍鱼自身所含有的丰富的酶类，在磨浆处理后，鲍鱼组织和细胞被破坏，细胞内的蛋白酶等水解酶类释放到组织匀浆中，其所含有的酶类能够对鲍鱼的组织蛋白、多糖分子等进行酶解释放活性成分，在自溶水解过程中，采用特定波长的紫外线照射，能够激发自溶酶解的发生，同时也能够杀灭空气等周围环境中的污染菌，避免了污染的发生，自溶水解也能为下一步的活性菌种发酵提供良好的营养，保证活性菌种接种后能够极快地增殖、发酵；其次，活性菌种发酵过程中，本发明采用酿酒酵母和干酪乳杆菌结合的方式进行，并且在自溶水解产物中添加了低聚异麦芽糖和葡萄糖，两者的特定比例保证了两种菌能够相对均衡地增殖，特别是低聚异麦芽糖仅能为干酪乳杆菌利用，其能够促进干酪乳杆菌的增殖，进而降解鲍鱼的大分子营养成分为小分子活性物质，为酿酒酵母所利用，促进酿酒酵母的繁殖，在两种菌的增殖过程中，鲍鱼的大分子物质通过发酵进一步降解为活性小分子物质，并且产生一定的风味物质，保证了本发明的产品具有良好的风味；本发明中创造性地利用了脉冲超声处理，通过脉冲超声频率、功率、处理时间和脉冲频率的调整，获得了最佳的脉冲超声处理方式，该脉冲超声处理能够使得鲍鱼的组织细胞进一步破碎、蛋白质等大分子物质充分的释放，同时，脉冲超声处理能够破碎增殖的活性菌种—干酪乳杆菌和酿酒酵母，释放两者细胞中的组织酶类，用于下一步的酶解，同时，破碎的酵母细胞具有良好的鲜味，也充分保障了产品的风味良好；最后，本发明通过酶解加工获得鲍鱼酶解提取物，发明人通过大量的试验确定了复合酶由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成，其中各种酶的配比与脉冲超声处理的结果相互协同，即复合酶中各酶类与活性菌种破碎后释放的酶类共同发生作用，有效地促进了鲍鱼大分子物质的降解，保证了鲍鱼中大分子物质—蛋白质、多糖分子的充分水解，最终制得风味良好、活性很高的鲍鱼酶解提取物。

[0017] 具体实施方式：实施例1：包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其制备方法包括如下步骤：
（一）鲍鱼酶法提取物的制备：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于4℃的温度下，采用波长为220nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于30℃的温度下，发酵处理22小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至42℃，酶解处理3.5小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3，复合酶的添加量为0.6%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物；
（二）所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备：
步骤八，配料：按质量百分比称取鲍鱼酶法提取物、老抽、生抽、食盐、白糖、料酒、肉桂粉、八角粉和水，以上各成分的质量百分比为100%，将称取的以上物质搅拌混合均匀；
步骤九，封装、灭菌、贴标签、装箱：将步骤八配好的调味汁分装到容器中，而后灭菌、贴标签、装箱。

[0018] 所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物20%，老抽8%，生抽32%，食盐5%，白糖2%，料酒2%，肉桂粉0.1%，八角粉0.1%，水30.8%。

[0019] 实施例2：包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其制备方法包括如下步骤：（一）鲍鱼酶法提取物的制备：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1: 4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过30目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于2℃的温度下，采用波长为280nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:0.5:3，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于28℃的温度下，发酵处理24小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.5，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至40℃，酶解处理4小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3:1:2:2，复合酶的添加量为0.7%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物；
（二）所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备：
步骤八，配料：按质量百分比称取鲍鱼酶法提取物、老抽、生抽、食盐、白糖、料酒、肉桂粉、八角粉和水，以上各成分的质量百分比为100%，将称取的以上物质搅拌混合均匀；
步骤九，封装、灭菌、贴标签、装箱：将步骤八配好的调味汁分装到容器中，而后灭菌、贴标签、装箱。

[0020] 所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物30%，老抽10%，生抽25%，食盐5%，白糖3%，料酒1%，肉桂粉0.3%，八角粉0.3%，水25.4%。

[0021] 实施例3：包含鲍鱼酶法提取物的调味汁，其制备方法包括如下步骤：（一）鲍鱼酶法提取物的制备：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为2ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2-4混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过40目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于3℃的温度下，采用波长为250nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解3.5小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于30℃的温度下，发酵处理22小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间11分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为7.8，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至42℃，酶解处理3.5小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3，复合酶的添加量为0.5%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物；
（二）所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁的制备：
步骤八，配料：按质量百分比称取鲍鱼酶法提取物、老抽、生抽、食盐、白糖、料酒、肉桂粉、八角粉和水，以上各成分的质量百分比为100%，将称取的以上物质搅拌混合均匀；
步骤九，封装、灭菌、贴标签、装箱：将步骤八配好的调味汁分装到容器中，而后灭菌、贴标签、装箱。

[0022] 所述的包含鲍鱼酶法提取物的调味汁由以下质量百分比的组分复配而成：鲍鱼酶法提取物25%，老抽10%，生抽25%，食盐5%，白糖3%，料酒1%，肉桂粉0.3%，八角粉0.2%，水30.5%。

[0023] 实施例4：为了分别验证自溶水解、脉冲超声处理和复合酶组成对鲍鱼酶法提取物的影响，本发明试验过程中特设置以下三组对照实施例：对比实施例A（用于验证自溶水解对酶解提取物的影响）：
一种鲍鱼提取物A，其特征在于，通过以下方法制备得到：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，发酵处理：在步骤二制备得到的预处理浆液中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于30℃的温度下，发酵处理22小时，得到发酵产物；
步骤四，脉冲超声预处理：对步骤三得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤五，酶解：将步骤四制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至42℃，酶解处理3.5小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3，复合酶的添加量为0.6%；
步骤六，灭酶、浓缩：将步骤五制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼提取物A。

[0024] 对比实施例B（用于验证脉冲超声处理对酶解提取物的影响）：一种鲍鱼提取物B，其特征在于，通过以下方法制备得到：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于4℃的温度下，采用波长为220nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于30℃的温度下，发酵处理22小时，得到发酵产物；
步骤五，酶解：将步骤四制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至42℃，酶解处理3.5小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶的重量份配比为3: 1.5:2:3，复合酶的添加量为0.6%；
步骤六，灭酶、浓缩：将步骤五制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼提取物B。

[0025] 对比实施例C （用于验证复合酶组成对酶解提取物的影响）：一种鲍鱼提取物C，其特征在于，通过以下方法制备得到：
步骤一，预处理：取新鲜鲍鱼，去壳、去内脏后取鲍鱼肉，将鲍鱼肉浸泡在臭氧水溶液中进行消毒处理，处理时间为20min，处理温度为5℃，臭氧水溶液中臭氧浓度为3ppm；
步骤二，浆液的制备：将步骤一预处理好的鲍鱼肉与冰水混合物按照质量比1:2混合，置于胶体磨中进行磨浆处理，过50目筛，搅拌均匀，制备得到鲍鱼预处理浆液；
步骤三，自溶水解：将步骤二制备得到的鲍鱼预处理浆液置于4℃的温度下，采用波长为220nm的紫外线照射，在此过程中并不断搅拌，自溶水解4小时，通过鲍鱼自身所含的酶类对其自身的蛋白质等大分子进行自溶水解，得到自溶水解物；
步骤四，发酵处理：在步骤三制备得到的自溶水解物中加入低聚异麦芽糖和葡萄糖，自溶水解物、低聚异麦芽糖和葡萄糖的质量配比为100:1:2，而后向其中接种酿酒酵母和干酪乳杆菌，置于30℃的温度下，发酵处理22小时，得到发酵产物；
步骤五，脉冲超声预处理：对步骤四得到的发酵产物进行脉冲超声预处理，超声的频率为20kHz，功率为200W，超声时间12分钟，脉冲超声工作间隙时间比为2s/2s，得到脉冲超声预处理产物；
步骤六，酶解：将步骤五制得的脉冲超声预处理产物的pH调整为8.2，加入由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复合风味蛋白酶组成的复合酶，加热至42℃，酶解处理3.5小时，得到酶解液，复合酶中碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量份配比为3:2，复合酶的添加量为0.5%；
步骤七，灭酶、浓缩：将步骤六制得的酶解液水浴加热至80℃，灭酶处理10分钟，使得复合酶灭活，过滤后浓缩至酶解液体积的1/3，即为鲍鱼酶法提取物。

[0026] 实施例5：安全性试验小鼠急性毒性试验：采用本发明实施例1-3的产品部分替代小鼠的饲料进行饲喂，每天饲喂鲍鱼酶法提取物2-3mL，连续饲喂48天，试验期间未见死亡和异常毒性反应，试验结束，解剖试验小鼠，观察肝、肾、脾、胃、心、肺和肠，均未见异常改变。按急性毒性标准，实施例1-
3的产品属于无毒级。

[0027] 慢性毒性试验：采用本发明实施例1-3的产品部分替代小鼠的饲料进行饲喂，每天饲喂鲍鱼酶法提取物4-6mL，连续饲喂220天，结果显示：饲喂本发明实施例1-3的产品的小鼠皮毛光滑，行为活动正常，体重正常增加，摄食饮水正常，血液学和血液生化指标均在正常范围内波动，骨髓和尿常规指标均在正常范围内波动，组织脏器未见异常，整体而言未见毒理反应。

[0028] 由以上实验可知，本发明的产品是安全、无毒的。

[0029] 实施例6：感官评价（一）鲍鱼酶法提取物风味评价
分别对本发明实施例1、2、3的鲍鱼酶法提取物以及对比实施例A-C制得的鲍鱼提取物A-C进行感官风味评价，满分为10分，6分为合格，分别请10位专业感官评定师和随机邀请的
50位普通消费者进行风味感官评价，具体结果（平均分）见下表1：
表1 风味感官评分结果
组别实施例1 实施例2 实施例3 对比A 对比B 对比C
专业评定师评分 9.51 9.33 9.42 8.31 7.89 6.47
普通消费者评分 9.36 9.22 9.25 6.89 6.56 5.28
其中实施例1-3中的鲍鱼酶法提取物均具有良好的风味，且鲜味比较足；而对比例A的鲍鱼提取物A其风味略差于实施例1-3的产品，对比例B和C具有一定的苦味，特别是对比C，回味的苦味较浓。

[0030] （二）包含鲍鱼酶法提取物/鲍鱼提取物的调味汁的风味评价分别对对比实施例A-C所制备的鲍鱼提取物A-C按照实施例1的方法制备调味汁，命名为对比A汁、对比B汁、对比C汁，准备白灼菜心，在白灼菜心上分别浇上实施例1-3的调味汁和对比A汁、对比B汁、对比C汁，进行感官风味评价，满分为10分，6分为合格，分别请10位专业感官评定师和随机邀请的50位普通消费者进行风味感官评价，具体结果（平均分）见下表
2：
表2 风味感官评分结果
组别实施例1 实施例2 实施例3 对比A 对比B 对比C
专业评定师评分 9.33 9.25 9.17 8.04 8.27 7.47
普通消费者评分 9.09 9.14 8.67 7.58 7.41 6.65
实施例7：动物试验
取昆明种小鼠140只，雌雄各半，随机分为7组，每组10雄10雌。其中组1为空白对照组，采用常规小鼠饲料进行饲喂；组2-4为实验组，采用本发明实施例1-3的鲍鱼酶解提取物与常规小鼠饲料按1:4的比例混合后对小鼠进行饲喂，组5-7为对比试验组，采用以下对比试验例A-C鲍鱼提取物A-C与常规小鼠饲料按1:4的比例混合后对小鼠进行饲喂，七组除饲料组成不同外，其他饲喂条件相同，持续饲喂15天。而后进行各项试验：
（1）抗氧化酶活力水平测试：
在持续饲喂第10天时，分别通过鼠尾静脉取少量全血，测定全血中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力，经检测发现，组1（空白对照组）小鼠的GSH-Px的活力范围为25±4U/mL全血；组2-4（即实施例1-3）的鲍鱼酶法提取物饲喂小鼠的GSH-Px的活力范围为38±5U/mL全血；对照组5-7（即对比例A-C）的鲍鱼提取物饲喂小鼠的GSH-Px的活力范围为28±3U/mL全血（对比例A）、30±4U/mL全血（对比例B）、29±2U/mL全血（对比例C）。由此可见，本发明实施例1-3的鲍鱼酶解提取物均能提升小鼠的抗氧化水平，相比空白对照组和对比试验例A-C均取得了预料不到的技术效果，其抗氧化水平提高了30%以上。

[0031] （2）缓解体力疲劳功能动物实验：在持续饲喂15天后进行负重游泳实验，末次饲喂120min 后，将小鼠置游泳箱中，水深40cm、水箱长宽分别为0.75m*0.5m,水箱壁光滑，水温(25±0.5) ℃，鼠尾根部负荷5% 体重的铅皮。

[0032] 小鼠自游泳开始至死亡的时间为小鼠游泳时间，结果如下表3:表3缓解体力疲劳功能动物实验试验结果
组别游泳时间/min
组1（空白对照） 55.8±10.1
组2（实施例1） 232.5±15.7
组3（实施例2） 220.6±12.2
组4（实施例3） 210.5±11.3
组5（对比例A） 150.3±11.2
组6（对比例B） 138.9±9.7
组7（对比例C） 147.5±10.5
由以上试验结果可知，相比普通饲料饲喂的空白对照组，本发明实施例1-3的产品能极大地提高小鼠负重游泳的时间，饲喂本发明产品的小鼠的负重游泳时间接近饲喂普通饲料小鼠的3-4倍，说明本发明的产品有显著的缓解体力疲劳的功能；尽管对比例A-C也能提高小鼠负重游泳的时间，然而其抗疲劳的功效不及本发明实施例1-3的产品，正是由于本发明各工艺步骤之间的相互协同，使得本发明的产品取得了相对对比例A-C而言预料不到的抗疲劳功效。

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包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法

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