本发明为了解决现有方法制备的玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量低的问 题,而提供
一种玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法。
玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以下步骤实现:一、以
磁性壳聚糖 微球作为载体固定
微生物脂肪酶,固定化
温度为30~40℃,pH值为6~9,微 生物脂肪酶浓度800~1200U/ml,固定10~20h后得固定化微生物脂肪酶;二、 将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后置于的恒温水浴 锅中加热,并以180~220r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时再加入10g 固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别加入10ml 甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用
蠕动泵出料,然后将料液放入 1000ml分液漏斗中静置沉淀3~5h后取上层清液;四、将上层清液转入到500ml 蒸馏烧瓶中,然后置于旋转
蒸发器上,在温度为65℃、压强为200mmHg的条 件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温,在温度为72℃、 压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽油中共轭亚油酸 的富集。
本发明采用高
密度的磁性微球固定化微生物脂肪酶,催化玉米胚芽油与甲 醇之间进行酯交换,催化反应完成后经蒸馏、脱
水处理,制得高共轭亚油酸含 量的玉米胚芽油;因采用了固定化酶技术,从而减少了甲醇对酶的抑制作用。 而且催化反应后分离工艺操作简单、回收率高,而且回收的固定化微生物脂肪 酶可以重复利用,降低生产成本,简化生产工艺。
本发明玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法简单,成本低;本发明中富集 后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米胚芽油中含 8.10~10.51mg,能够满足人体所需,即通过食用玉米胚芽油即可摄取丰富的共 轭亚油酸,长期食用有益健康。
具体实施方式一:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以下 步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度为 30~40℃,pH值为6~9,微生物脂肪酶浓度800~1200U/ml,固定10~20h 后得固定化微生物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml 三口瓶中,然后置于的恒温水浴锅中加热,并以180~220r/min的速度搅拌, 当温度升高到52℃时再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应 进行到10h和20h分别加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后 用
蠕动泵出料,然后将料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀3~5h后取上层 清液;四、将上层清液转入到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于
旋转蒸发器上,在 温度为65℃、压强为200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的 接收装置,继续升温,在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集 馏分,即完成玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式步骤一中磁性壳聚糖微球的制备:采用化学共沉淀法制备磁流 体-Fe3O4水合物,然后采用反相悬浮聚合法合成磁性壳聚糖微球,壳聚糖的体 积浓度1.0%~5.0%,磁
流体的含
铁量为40wt%~70wt%,戊二
醛的体积浓度 为10%~25%。
本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集完成后,固定化微生物脂肪酶 可以留在三口瓶中,直接加入料液,进行下一批反应;也可取出固定化微生物 脂肪酶,洗涤后回收,洗涤液为
乙醇和乙醚按1∶1体积比混合所得溶液。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中固定化 温度为32~38℃,pH值为6.5~8.5,微生物脂肪酶浓度850~1150U/ml,固 定12~18h。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中固定化 温度为30℃,pH值为6,微生物脂肪酶浓度800U/ml,固定10h。其它步骤及 参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中固定化 温度为40℃,pH值为9,微生物脂肪酶浓度1200U/ml,固定20h。其它步骤 及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中固定化 温度为35℃,pH值为7,微生物脂肪酶浓度900U/ml,固定12h。其它步骤及 参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式六:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中固定化 温度为38℃,pH值为8,微生物脂肪酶浓度1100U/ml,固定16h。其它步骤 及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式七:本实施方式与具体实施方式二、三、四、五或六不同的 是步骤二中以190~210r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式二、 三、四、五或六相同。
具体实施方式八:本实施方式与具体实施方式七不同的是步骤二中以 180r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式七相同。
具体实施方式九:本实施方式与具体实施方式七不同的是步骤二中以 220r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式七相同。
具体实施方式十:本实施方式与具体实施方式七不同的是步骤二中以 190r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式七相同。
具体实施方式十一:本实施方式与具体实施方式七不同的是步骤二中以 200r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式七相同。
具体实施方式十二:本实施方式与具体实施方式八、九、十或十一不同的 是步骤二中甲醇均为化学纯。其它步骤及参数与具体实施方式八、九、十或十 一相同。
具体实施方式十三:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度 为35℃,pH值为7,微生物脂肪酶浓度1000U/ml,固定15h后得固定化微生 物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后 置于的恒温水浴锅中加热,并以180r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时 再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用蠕动泵出料,然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀3h后取上层清液;四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于旋转
蒸发器上,在温度为65℃、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温, 在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米 胚芽油中含8.10mg,能够满足人体所需。
具体实施方式十四:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度 为30℃,pH值为6,微生物脂肪酶浓度800U/ml,固定10h后得固定化微生 物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后 置于的恒温水浴锅中加热,并以190r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时 再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用蠕动泵出料,然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液;四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于旋转蒸发器上,在温度为65℃、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温, 在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米 胚芽油中含8.56mg,能够满足人体所需。
具体实施方式十五:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度 为40℃,pH值为8,微生物脂肪酶浓度1200U/ml,固定10h后得固定化微生 物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后 置于的恒温水浴锅中加热,并以200r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时 再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用蠕动泵出料,然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液;四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于旋转蒸发器上,在温度为65℃、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温, 在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米 胚芽油中含9.28mg,能够满足人体所需。
具体实施方式十六:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度 为35℃,pH值为9,微生物脂肪酶浓度800U/ml,固定20h后得固定化微生 物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后 置于的恒温水浴锅中加热,并以210r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时 再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用蠕动泵出料,然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液;四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于旋转蒸发器上,在温度为65℃、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温, 在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米 胚芽油中含9.83mg,能够满足人体所需。
具体实施方式十七:本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现:一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶,固定化温度 为38℃,pH值为7,微生物脂肪酶浓度1100U/ml,固定18h后得固定化微生 物脂肪酶;二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中,然后 置于的恒温水浴锅中加热,并以200r/min的速度搅拌,当温度升高到52℃时 再加入10g固定化微生物脂肪酶,开始计时反应,反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇,进行到26h时停止;三、反应停止后用蠕动泵出料,然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀5h后取上层清液;四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中,然后置于旋转蒸发器上,在温度为65℃、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min,弃去馏头,然后换新的接收装置,继续升温, 在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分,即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高,为每克玉米 胚芽油中含10.51mg,能够满足人体所需。