本发明涉及植物中的广谱病害抗性、包括系统获得性抗性(SAR) 的现象。更具体地说，本发明涉及与可导致植物中系统获得性抗性 (SAR)的信号转导级联相关的鼠耳芥属NIM1基因同源物的鉴定、分 离和表征。

植物经常受到包括病毒、细菌、真菌和线虫在内的各种致病生物 体的攻击。农作物植物特别脆弱，因为它们通常生长成遗传均匀的单 种栽培物；当病害发作时，损失可能是严重的。然而，大部分植物具 有其抵抗致病生物体的先天机制。植物培育者和病理学家已经鉴定了 对植物病原体具有抗性的天然变化形式并将其培育成许多农作物植 物。这些天然病害抗性基因通常提供了抵抗病原体的高水平抗性或免 疫性。

系统获得性抗性(SAR)是一种用于自身抵抗病原体的复合系统植 物的组成部分(Hunt和Ryals，1996；Ryals等，1996)。另外参见美国 专利号5,614,395。SAR是植物病原体反应的一个特别重要的方面，因 为它是病原体诱导的对包括病毒、细菌和真菌在内的广谱感染性病原 体的系统抗性。当SAR信号转导途径被阻断时，植物变得对通常导致 病害的病原体更为敏感且它们对不经常导致病害的某些感染性病原体 也变得敏感(Gaffney等，1997；Delaney等，1994；Delaney等，1997； Bi等，1995；Mauch-Mani和Slusarenko，1996)。这些观察结果表 明SAR信号转导途径对维持植物健康是关键的。

在理论上，SAR反应可以被分成两个阶段。在初始阶段中，识别 病原体感染且释放通过韧皮部传输到远端组织的信号。这种系统性信 号被因SAR基因和病害抗性的表达而起反应的靶细胞觉察。SAR的维 持期是指从数周到植物的整个生命期的时间期限，在此过程中该植物 是准稳态的且病害抗性得到控制(Ryals等，1996)。

水杨酸(SA)的累积看起来是SAR信号转导所需的。不能因用特 异性抑制剂处理，即，苯丙氨酸解氨酶的后生阻抑或特异性降解SA的 水杨酸羟化酶的转基因表达而累积SA的植物也不能诱导SAR基因表达 或病害抗性(Gaffney等，1993；Delaney等，1994；Mauch-Mani和 Slusaerenko，1996；Maher等，1994；Pallas等，1996)。尽管已 经建议SA可以用作系统性信号，但是目前这是有争议的；且迄今为 止，确切已知所有情况是：如果SA不能累积，那么SAR信号转导将被 阻断(Pallas等1996；Shulaev，1995；Vernooij等，1994)。

近来，鼠耳芥属已经表现出可作为研究SAR的模型系统(Uknes 等，1992；Uknes等，1993；Cameron等，1994；Mauch-Mani和 Slusarenko，1994；Dempsey和Klessig，1995)。已经证实鼠耳芥 属中的SAR可以被病原体和诸如SA、2，6-二氯异烟酸(INA)和苯并 (1，2，3)噻二唑-7-硫代羧酸S-甲酯(BTH)这样的化学药品所激活 (Uknes等，1992；Vernooij等，1995；Lawton等，1996)。在用 INA或BTH进行处理或病原体感染后，至少三种与病理相关的(PR) 蛋白质基因即PR-1、PR-2和PR-5同时被诱导且伴随抗性发作(Uknes 等，1992，1993)。在烟草中，用病原体或免疫化合物处理的最佳特 征化物种诱导至少9组基因的表达(Ward等，1991)。通过用不同的 SAR基因转化植物已经产生了转基因病害抗性植物(美国专利号 5,614,395)。

已经分离出了具有改良的SAR信号转导的大量鼠耳芥属突变体 (Delaney，1997)。这些突变体中最重要的是所谓的1sd(病变模拟 病害)突变体和acd2(加速的细胞死亡)(Dietrich等，1994；Greenberg 等，1994)。这些突变体均在其叶上具有一定程度的自发性坏死病变 形成、SA水平升高、SAR基因的mRNA累积和病害抗性显著提高。已经 分离并表征了至少7种不同的1sd突变体(Dietrich等；1994；Weymann 等，1995)。另一种有意义类型的突变体是cim(组成型免疫)突变 体(Lawton等，1993)。另外参见美国专利号5,792,904和国际PCT 申请WO 94/16077。类似于1sd突变体和acd2，cim突变体具有升高 的SA和SAR基因表达和抗性，不过，与1sd或acd2相反，在其叶上 不会表现出可检测到的病变。cpr1(PR基因的组成型表达子)可以是 一类cim突变体；然而，因为尚未消除cpr1叶上存在的显微病变，所 以cpr1可能是一类1sd突变体(Bowling等，1994)。

已经分离了在SAR信号传输中被阻断的突变体。ndr1(非物种特 异性病害抗性)是一种使含有不同无毒力基因的丁香假单胞菌和寄生 霜霉的一般无毒性分离物生长的突变体(Century等；1995)。显然 这种突变体在SAR信号传输中的早期被阻断。npr1(PR基因的非表达 子)是一种不能在INA处理后诱导SAR信号途径表达的突变体(Cao 等，1994)。已经根据eds(增强的病害敏感性)突变体在接种低浓 度细菌后维持细菌感染的能力分离了它们(Glazebrook等，1996； Parker等，1996)。某些eds突变体在表型上非常类似于npr1且近 来已经证实eds5和eds53是npr1的等位基因(Glazebrook等，1996)。 nim1(非诱导型免疫)是一种在用INA处理后维持寄生霜霉(即霜霉 病致病病原体)生长的突变体(Delaney等，1995；美国专利号 5,792,904)。尽管nim1可以在病原体感染后累积SA，但是它不能诱 导SAR基因表达或病害抗性，这提示这种突变阻断了SA下游的途径。 nim1在其对INA或BTH反应的能力上也受到了削弱，这提示在这些化 学药品作用的下游存在阻断作用(Delaney等，1995；Lawton等， 1996)。

已经分离并表征了鼠耳芥属的等位基因，它们的突变体分别对 nim1和npr1表型负责(Ryals等，1997；Cao等，1997)。野生型NIM1 基因产物与导致鼠耳芥属中SAR和基因对基因病害抗性的信号转导级 联有关(Ryals等，1997)。Ryals等，1997还报导了nim1的另外5 种等位基因的分离方法，这些等位基因显示出在化学诱导的PR-1基因 表达和真菌抗性方面从每周削弱到被强力阻断的一系列的表型。将野 生型NPR1基因转化成npr1突变体不仅补充了突变，从而恢复了SAR 诱导作用对PR-基因表达和病害抗性的反应性，而且在没有SAR诱导 作用存在的情况下赋予了所述的转基因植物对丁香假单胞菌导致的感 染更高的抗性(Cao等，1997)。WO 98/06748中描述了从鼠耳芥属中 分离NPR1和从Nicotiana glutinosa中分离同源物的方法。另外参见 WO 97/49822、WO 98/26082和WO 98/29537。

尽管作了大量研究且应用了包括植物的遗传转化在内的完善和深 入细致的农作物保护措施，但是每年因病害导致的损失仍保持在10亿 美元。因此，存在对开发基于植物中病害抗性的遗传基础不断增加的 了解的新的农作物保护措施的持续需求。特别地，存在对鉴定、分离 和表征来自其它植物物种的鼠耳芥属NIM1基因的同源物的需求。

在描述本发明的过程中，使用下列术语且这些术语的定义如下所 示。

相关/可操作地连接：指的是物理或功能相关的两个DNA序列。例 如，认为启动子或调节DNA序列与编码RNA或蛋白质的DNA序列“相 关”，条件是这两个序列可操作地连接或定位以使调节DNA序列影响 编码或结构DNA序列的表达水平。

嵌合基因：一种重组DNA序列，其中启动子或调节DNA序列可操 作地与编码mRNA或表达为蛋白质的DNA序列连接或相关，使得调节 DNA序列能够调节相关DNA序列的转录或表达。嵌合基因的调节DNA 序列通常不与在自然界中发现的相关的DNA序列可操作地连接。

编码序列：转录成诸如mRNA、rRNA、tRNA、snRNA、有义RNA或 反义RNA这样的RNA的核酸序列。优选随后在生物体中翻译所述的RNA 以便产生蛋白质。

互补：指的是包括反平行核苷酸序列的两个核苷酸序列，所述的 反平行核苷酸序列能够在反平行核苷酸序列中的互补碱基对残基之间 形成氢键时彼此配对。

表达：指的是植物中内源性基因或转基因的转录和/或翻译。例 如，就反义构建体而言，表达可能指的仅是反义DNA的转录。

表达弹夹：能够指导特定核苷酸序列在合适的宿主细胞中的表达 的核酸序列，它包括与感兴趣的核苷酸序列可操作地连接的启动子， 所述的感兴趣的核苷酸序列与终止信号可操作地连接。它一般还包括 适当翻译所述核苷酸序列所需的序列。包括感兴趣的核苷酸序列的表 达弹夹可以是嵌合的，即其成分中的至少一种相对于其其它成分中的 至少一种而言是异源的。该表达弹夹还可以是一种天然出现但已经以 用于异源表达的重组形式获得的表达弹夹。然而，一般来说，该表达 弹夹相对于宿主而言是异源的，即所述表达弹夹的特定核酸序列不会 在宿主细胞中天然出现且必须通过转化事件将其引入宿主细胞或宿主 细胞的祖先。表达弹夹中核苷酸序列的表达可以在组成型启动子或仅 当宿主细胞接触某些特定的外部刺激物时启动转录的诱导型启动子的 控制下进行。就诸如植物这样的多细胞生物体而言，所述的启动子对 特定的组织或器官或发育阶段也具有特异性。

基因：位于基因组内且除上述编码核酸序列外还包括对控制编码 部分的表达、即转录和翻译来说是必不可少的其它主要调节核酸序列 的确定区。基因还可以包括其它的5’和3’未翻译序列和终止序列。可 以存在的其它元件例如是内含子。

异源DNA序列：本文所用的术语“异源DNA序列”、“外源DNA 片段”或“异源核酸”各自指的是来源于对特定宿主细胞而言是外来 的来源的序列或如果来自相同来源那么是根据其原始形式修饰的序 列。因此，宿主细胞中的异源基因包括对特定宿主细胞而言是内源性 的但例如已经通过应用DNA改组修饰的基因。该术语还包括天然出现 的DNA序列的非天然出现的多拷贝。因此，该术语指的是一种DNA片 段，它对所述细胞而言是外源的或异源的或与所述细胞同源但位于通 常未发现所述元件的所述宿主细胞核酸内的某一位置上。表达外源DNA 片段以便产生外源性多肽类。

同源DNA序列：天然与引入其中的宿主细胞相关的DNA序列。

同类编码：当核酸序列编码与由参比核酸序列编码的多肽具有相 同的氨基酸序列的多肽时该核酸序列与参比核酸序列一起同类编码。

分离的：在本发明的上下文中，分离的核酸分子或分离的酶是一 种脱离其天然环境存在且因此不是天然产物的受人控制的核酸分子或 酶。分离的核酸分子或酶可以以纯化形式存在或可以存在于诸如例如 重组宿主细胞这样的非天然环境中。

最小启动子：启动子元件、特别是TATA元件，它们是无活性的或 在没有上游激活的情况下具有显著降低的启动子活性。在有合适的转 录因子存在的情况下，最小启动子的功能是启动转录。

天然的：指的是存在于未转化细胞基因组中的基因。

天然出现的：术语“天然出现的”用于描述与由人通过人工方式 生产不同的能在自然界中发现的物体。例如，存在于生物体(包括病 毒)中的蛋白质或核苷酸序列是天然出现的，它们可以分离自天然来 源且没有被人在实验室中进行过人为修饰。

NIM1：Ryals等，1997中描述的基因，它与SAR信号转导级联有 关。

NIM1：由NIM1基因编码的蛋白质。

核酸：术语“核酸”指的是脱氧核苷酸或核糖核苷酸及其单或双 链形式的聚合物。除非另有限定，该术语包括含有天然核苷酸的已知 类似物的核酸，它们与参比核酸具有相似的结合特性且以与天然出现 的核苷酸相似的方式被代谢。除非另有说明，特定的核酸序列无疑还 包括其保守修饰的变化形式(例如简并密码子取代)和互补序列以及 明确指定的序列。具体地，可以通过生成其中一种或多种选择的(或 全部)密码子的第三位被混合的碱基和/或脱氧肌苷残基取代的序列来 实现简并密码子取代(Batzer等，《核酸研究》(Nucleic Acid Res.)19： 5081(1991)；Ohtsuka等，《生化杂志》(J.Biol.Chem.)260： 2605-2608(1985)；Rossolini等，《分子细胞探针》(Mol.Cell. Probes)8：91-98(1994))。也可以将术语“核酸”或“核酸序列”与 基因、cDNA和由基因编码的mRNA互换使用。在本发明的上下文中， 核酸分子优选是DNA片段。核苷酸由下列标准缩写的其碱基来表示： 腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)和鸟嘌呤(G)。

ORF：可读框。

植物：任何完整的植物。

植物细胞：植物的结构和生理单位，它包括原生质体和细胞壁。 植物细胞可以是分离的单细胞或培养的细胞形式或作为诸如例如植物 组织、植物器官或完整植物这样的高级机体构造单位的一部分。

植物细胞培养物：植物单位培养物，诸如：例如原生质体、细胞 培养物细胞、植物组织中的细胞、花粉、花粉管、胚珠、胚囊、合子 和不同发育阶段的胚。

植物材料：指的是叶、茎、根、花或花的部分、果实、花粉、卵 细胞、合子、种子、插条、细胞或组织培养物、或植物的任何其它部 分或产物。

植物器官：植物明显的和可见的结构和分化部分，诸如根、茎、 叶、花芽或胚。

植物组织：组织成结构和功能单位的一组植物细胞。包括植物或 培养物中的植物的任何组织。本术语包括但不限于完整植物、植物器 官、植物种子、组织培养物和组织成结构和/或功能单位的任何组的植 物细胞。该术语连同如上所述的或由本定义包括的任何特殊类型的植 物组织一起使用或在没有如上所述的或由本定义包括的任何特殊类型 的植物组织的情况下使用并不排除任何其它类型的植物组织。

启动子：含有RNA聚合酶II的结合位点并启动DNA转录的编码区 上游的未翻译的DNA序列。启动子区还可以包括起基因表达调节物作 用的其它元件。

原生质体：不含细胞壁或仅含部分细胞壁的分离的植物细胞。

纯化的：术语“纯化的”在用于核酸或蛋白质时指的是基本上不 含其它在天然状态下与其相关的细胞成分的核酸或蛋白质。优选它是 在同源状态下，不过，它可以处于无水的或含水的溶液中。一般使用 诸如聚丙烯酰胺凝胶电泳或高效液相层析这样的分析型化学技术来测 定纯度和均匀性。属于存在于制品中的主要物质的蛋白质基本上是纯 化的。术语“纯化的”指的是核酸或蛋白质在电泳凝胶中主要产生一 条带。特别地，它指的是核酸或蛋白质的纯度至少约为50％、更优选 纯度至少约为85％且最优选纯度至少约为99％。

重组DNA分子：使用重组DNA技术彼此连接的DNA分子的组合。

调节元件：在控制核苷酸序列表达中所涉及的序列。调节元件包 括可操纵地与感兴趣的核苷酸序列和终止信号连接的启动子。它们一 般还包括正确翻译所述核苷酸序列所需的序列。

选择性标记基因：其在植物细胞中的表达使细胞产生选择优势的 基因。用选择性标记基因转化的细胞所具有的选择优势可能是由于与 未转化细胞的生长相比它们在有诸如抗生素或除草剂这样的负选择剂 存在情况下的生长能力所造成的。与未转化的细胞相比，转化细胞所 具有的选择优势也可能是由于它们将添加的化合物用作营养物、生长 因子或能源的增强的或新的能力所造成的。选择性标记基因还指其在 植物细胞中的表达使细胞产生负的和正的选择优势的基因或基因组 合。

显著提高：大于测定技术中固有的误差限度的酶活性的提高，优 选在有抑制剂存在的情况下使野生型酶的活性提高约2倍或2倍以 上、更优选提高约5倍或5倍以上且最优选提高约10倍或10倍以上。

就两种或多种核酸或蛋白质序列而言所用的术语“相同”或“同 一性”百分比指的是当进行最大相应性比较和序列对比时相同或具有 规定的氨基酸残基或核苷酸百分比的两种或多种序列或亚序列，正如 使用下列序列对比算法或通过目测检查所测得。

基本上相同：就两种核酸或蛋白质序列而言所用的术语“基本上 相同”指的是当进行最大相应性比较和序列对比时具有至少60％、优 选80％、更优选90-95％且最优选99％的核苷酸或氨基酸残基同一 性的两种或多种序列或亚序列，正如使用下列序列对比算法或通过目 测检查所测得的。在至少约50个残基长的序列区内、更优选在约100 个残基区内存在基本的同一性且最优选在约150个残基内序列基本上 相同。在一个最优选的实施方案中，序列在全长编码区内基本上相同。 此外，基本上相同的核酸或蛋白质序列具有基本上相同的功能。

为了进行序列比较，一般一个序列起参比序列的作用，将测试序 列与其进行比较。当使用序列比较算法时，将测试和参比序列输入计 算机，如果需要指定亚序列等同物并指定序列算法程序参数。然后序 列比较算法以指定的程序参数为基准计算出测试序列与参比序列相比 较的序列同一性百分比。

例如，可以通过下列方法进行用于比较的序列最佳排列：Smith& Waterman的局部同源性算法《数学应用发展》(Adv.Appl.Math.) 2：482(1981)；Needleman&Wunsch的同源性序列对比算法《分 子生物学杂志》(J.Mol.Biol.)443(1970)；Pearson&Lipman 的相似性方法检索《美国国家科学院院报》(Proc.Nat’l.Acad.Sci. USA)85：2444(1988)；这些算法的计算机化应用(Wisconsin Genetics Sofware Package中的GAP，BESTFIT，FASTA和TFASTA，Genetics Computer Group，575 Science Dr.，Madison，WI)；或目测检查(通 常参见Ausubel等，参见下文)。

适合于确定序列同一性和序列相似性百分比的算法的一个实例是 BLAST算法，它描述在Altschul等的《分子生物学杂志》(J.Mol. Biol.)215：403-410(1990)中。公众可以通过国家生物技术信息中 心  (National  Center  for  Biotechnology  Information) (http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)进行BLAST分析的软件。该算法 包括：首先通过确定查询序列中长度W的短词来确定主要划线的序列 对(HSPs)，当用数据库序列中相同长度的词进行序列对比时，它们 与某些正值阈值得分T相适应或满足它们。T指的是邻近词得分阈值 (Altschul等，1990)。命中这些起始的邻近词为启动检索程序打下 基础以便找到含有它们的更长的HSPs。然后沿各序列的两个方向扩展 命中的词，直到累积的序列对比得分得到增加为止。就核苷酸序列而 言，使用参数M(配对残基对的有利结果得分；总＞0)和N(错配残基 的不利结果得分；总＜0)来计算累积得分。就氨基酸序列而言，将得 分矩阵用于计算累积得分。当累积序列对比得分从其获得的最大值下 降到X量时停止在各方向上扩展命中词，累积得分达到0或0以下， 这是因为累积了一种或多种负得分的残基序列对比或达到各序列的末 端所导致的。BLAST算法的参数W、T和X确定了序列对比的敏感性和 速度。BLATN程序(就核苷酸序列而言)使用词长度(W)为11、期望 值(E)为10、截止值为100、M＝5、N＝4和两链比较作为默认值。 就氨基酸序列而言，BLASTP程序使用词长度(W)为3、期望值(E) 为10和BLOSUM62得分矩阵作为默认值(参见Henikoff&Henikoff 《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)89： 10915(1989)。

除计算序列同一性百分比外，BLAST算法还进行了两种序列之间 相似性的统计分析(参见，例如Karlin&Altschul《美国国家科学 院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)90：5873-5787(1993))。 由BLAST算法提供的相似性的一个测定值是最小的和数概率(P(N))， 它产生了一个概率的示数，通过该示数也许会出现两个核苷酸或氨基 酸序列之间的配对。例如，如果在测试核酸序列与参比核酸序列进行 比较过程中的最小和数概率约小于0.1、更优选约小于0.01且最优选 约小于0.001，那么认为测试核酸序列与参比序列相似。

两个核酸序列基本上相同的另一种表示方式是两个分子在严格条 件下彼此杂交。术语“特异性地与…杂交”指的是分子仅与特定的核 苷酸序列在严格条件下的结合、双重组合或杂交，此时所述的序列存 在于复合的混合物(例如总细胞)DNA或RNA中。“基本上结合”指 的是探针核酸与靶核酸之间的互补杂交且包括可以通过降低杂交培养 基的严格性而容纳的最小错配以便实现对靶核酸序列进行所需检测。

就诸如DNA杂交和Northern杂交这样的核酸杂交实验而言所用的 “严格杂交条件”和“严格杂交洗涤条件”具有序列依赖性且在不同 的环境参数下是不同的。较长的序列特别在较高的温度下杂交。关于 核酸杂交的广泛指导原则可以在下列文献中找到：Tijssen(1993)《生 化实验室技术和分子生物学-使用核酸探针的杂交》(Laboratory Techniques in Biochemistry and  Molecular Biology-Hybridization with Nucleic Acid Probes)第1部分第2章“杂交原理和核酸探针测 定策略的综述”(Overview of principles of hybridization and the strategy of nucleic acid probe assays)，Elsevier，New York。 一般来说，就在规定的离子强度和pH下的特定序列而言，将高度严格 杂交和洗涤条件选择为低于热熔点(Tm)约5℃。一般来说，在“严格 条件”下探针与其靶亚序列杂交而不与其它序列杂交。

Tm是50％的靶序列与完好配对探针杂交的温度(在指定的离子强 度和pH下)。将非常严格的条件选择为等于特定探针的Tm。用于在 DNA或RNA印迹中的滤膜上杂交具有100个以上互补残基的互补核酸 的严格杂交条件的一个实例是在42℃下50％甲酰胺与1mg肝素杂交， 其中将杂交过程进行过夜。高度严格的洗涤条件的一个实例是在72℃ 下用0.15M NaCl洗涤约15分钟。一个洗涤条件的一个实例是在65℃ 下用0.2×SSC洗涤15分钟(参见下文Sambrook对SSC缓冲液的描 述)。通常在高度严格性洗涤前是低度严格性洗涤以便除去背景探针 信号。就双链体、例如100个以上核苷酸而言，中度严格性洗涤的一 个实例是在45℃下用1×SSC洗涤15分钟。就双链体、例如100个以 上核苷酸而言，低度严格性洗涤的一个实例是在40℃下用4-6×SSC 洗涤15分钟。就短探针(例如约10-50个核苷酸)而言，严格条件 一般包括在pH 7.0-8.3下盐浓度低于约1.0M Na离子、一般约为 0.01-1.0M Na离子浓度(或其它盐)且温度一般至少约为30℃。还 可以通过添加诸如甲酰胺这样的去稳定剂来实现严格条件。一般来 说，在特定杂交测定试验中对不相关探针所观察到的2倍(或2倍以 上)的信噪比表明了检测特异性杂交。如果核酸编码的蛋白质基本上 相同，那么在严格条件下无法彼此杂交的核酸仍基本上相同。例如， 这种情况在使用遗传密码所允许的最大密码简并产生核酸拷贝时发 生。

下面是可以用于克隆基本上与本发明参比核苷酸序列相同的同源 核苷酸序列的杂交/洗涤条件组的实例：参比核苷酸序列与参比核苷酸 序列优选在50℃下的7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA 中杂交、其中在50℃下用2×SSC洗涤；更理想的是在50℃下的7％ 十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA中杂交、其中在50 ℃下用1×SSC、0.1％SDS洗涤；更理想的是在50℃下的7％十二烷基 硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、1mM EDTA中杂交、其中在50℃下用0.5 ×SSC、0.1％SDS洗涤；优选在50℃下的7％十二烷基硫酸钠(SDS)、 0.5M NaPO4、1mM EDTA中杂交、其中在50℃下用0.1×SSC、0.1％SDS 洗涤；更优选在50℃下的7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4、 1mM EDTA中杂交、其中在65℃下用0.1×SSC、0.1％SDS洗涤。

两种核酸序列或蛋白质基本上相同的进一步证明方式是由第一种 核酸编码的蛋白质与由第二种核酸编码的蛋白质发生交叉免疫反应或 特异性地与之结合。因此，一种蛋白质通常与第二种蛋白质基本上相 同，例如，其中两种蛋白质的区别仅在于保守取代。

术语“特异性地(或选择性地)与抗体结合”或“特异性地(或 选择性地)与…发生免疫反应”在涉及蛋白质或肽时指的是结合反应 是在有蛋白质和其它生物制品的异源群体存在的情况下蛋白质存在的 决定因素。因此，在指定的免疫测定条件下，特异性抗体结合特定的 蛋白质而不以显著量结合存在于样品中的其它蛋白质。在这类条件下 与抗体的特异性结合可能需要根据其对特定蛋白质的特异性来选择的 抗体。例如，可以选择针对具有由本发明任何核酸序列编码的氨基酸 序列的蛋白质产生的抗体以便获得与该蛋白质发生特异性免疫反应而 不与除多态变体外的其它蛋白质发生免疫反应的抗体。可以将多种免 疫测定方式用于选择与特定蛋白质发生特异性免疫反应的抗体。例 如，通常将固相ELISA免疫测定法、蛋白质印迹或免疫组织化学法用 于选择与蛋白质发生特异性免疫反应的单克隆抗体。参见Harlow和 Lane((1988)《抗体-实验室手册》(Antibodies，A Laboratory Manual)，Cold Spring Harbor Publications，New York“Harlow 和Lane”)对可以用于测定特异性免疫反应性的免疫测定方式和条件 的描述。一般来说，特异性或选择性反应将是背景信号或噪声的至少2 倍且更常见的是背景的10-100倍以上。

特定核酸序列的“保守修饰的变化形式”指的是编码相同或基本 上相同的氨基酸序列或其中核酸序列不编码氨基酸序列的那些核酸序 列。由于遗传密码的简并性，所以大量功能相同的核酸编码任何给定 的多肽。例如，密码子CGT、CGC、CGA、CGG、AGA和AGG均编码氨基 酸精氨酸。因此，在用密码子表示的精氨酸的每一位上，可以将密码 子改变成任何相应的所述密码子而不会改变所编码的蛋白质。这类核 酸变化形式是“沉默变化形式”，它们是“保守修饰变化形式”的一 个种类。除非另有说明，编码蛋白质的本文所述的每个核酸序列也描 述了每一种可能的沉默变化形式。本领域技术人员认为可以修饰核酸 中的各密码子(ATG除外，它通常仅是甲硫氨酸的密码子)以便通过 标准技术得到功能相同的分子。因此，编码蛋白质的核酸的各“沉默 变化形式”在各所述序列中是隐含的。

此外，本领域技术人员认识到在所编码的序列中改变、添加或缺 失单个氨基酸或较小百分比的氨基酸(一般低于5％、更常见的是低 于1％)的各个取代、缺失或添加是“保守修饰的变化形式”，其中 这种改变导致氨基酸被化学上相似的氨基酸所取代。提供功能相似氨 基酸的保守取代表在本领域中是众所周知的。下列5组中各包含属于 相互保守取代的氨基酸：脂族：甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、缬氨酸 (V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)；芳香族：苯丙氨酸(F)、酪 氨酸(Y)、色氨酸(W)；含硫的：甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)； 碱性的：精氨酸(R)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)；酸性的：天冬氨 酸(D)、谷氨酸(E)、天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)。另外参见 Creighton(1984)《蛋白质》(Proteins)，W.H.Freeman和Company。 此外，在所编码的序列中改变、添加或缺失单个氨基酸或较小百分比 的氨基酸的各个取代、缺失或添加也是“保守修饰的变化形式”。

“亚序列”指的是分别包括核酸或氨基酸的较长序列(例如蛋白 质)的一部分的核酸或氨基酸序列。

当将其它核苷酸(或其它类似分子)引入核酸时核酸是“延长的”。 最常见的是使用聚合酶(例如DNA聚合酶)、例如在核酸3’末端添加 序列的聚合酶进行该过程。

当将来自两种核酸中每一种的序列在子代核酸中组合时两种核酸 被“重组”。当这两种核酸是用于重组的底物时可“直接”重组两条 序列。当使用诸如交换寡核苷酸这样的中间体重组所述序列时可“间 接重组”两条序列。就间接重组而言，仅仅一条序列是用于重组的真 正底物且在某些情况下两条序列都不是用于重组的底物。

例如配体和受体这样的两种分子之间的“特异性结合亲和力”指 的是在分子混合物中一种分子对另一种分子的优先结合。如果结合亲 和力约为1×104M-1-约1×106M-1或1×106M-1以上，那么可以将该分子 的结合看作是特异性的。

转化：一种用于将异源DNA引入宿主细胞或生物体的过程。

“转化的”、“转基因的”和“重组的”指的是诸如细菌或植物 这样已经引入了异源核酸分子的宿主生物体。核酸分子可以被稳定地 整合入宿主的基因组或也可以作为染色体外分子存在。这类染色体外 分子可以是自体复制的。认为转化的细胞、组织或植物不仅包括转化 过程的终产物而且包括其转基因子代。“非转化的”、“非转基因的” 或“非重组的”宿主指的是例如细菌或植物这样不含异源核酸分子的 野生型生物体。

本发明通过提供几种来自另外的植物物种的鼠耳芥属NIM1基因 同源物而满足了上述需求。特别地，本发明涉及NIM1基因的烟草 (Nicotiana tabacum)、番茄(Lycopericon esculentum)、欧洲 油菜(Brassica napus)、鼠耳芥(Arabidopsis thaliana)、甜菜 (Beta vulgaris)、向日葵(Helianthus annuus)和马铃薯(Solanum tuberosum)的同源物的分离，这些同源物编码认为与信号转导级联有 关的蛋白质，所述的信号转导级联对可导致植物中系统获得性抗性的 生物和化学诱导物敏感。

因此，本发明涉及一种分离的核酸分子，它包括编码SEQ ID NO：2、 4、6、8、16、18、20、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、 50、52、54、56、58、62、64、66、68、70、72或74的核苷酸序列。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括SEQ ID NO：1、3、5、 7、15、17、19、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、 51、53、55、57、61、63、65、67、69、71或73的分离的核酸分子。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，所述的核苷酸序列在序列中包括与SEQ ID NO：1、3、5、7、 15、17、19、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、 53、55、57、61、63、65、67、69、71或73的至少20、25、30、35、 40、45或50个(优选20个)连续碱基对部分相同的至少20、25、30、 35、40、45或50个(优选20个)连续的碱基对部分。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：9和10、SEQ ID NO：21 和24、SEQ ID NO：22和24、SEQ ID NO：25和28、SEQ ID NO：26和 28或SEQ ID NO：59和60的引物对的聚合酶链反应从番茄DNA文库扩 增所述的核苷酸序列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：22和24或SEQ ID NO：26 和28的引物对的聚合酶链反应从甜菜DNA文库扩增所述的核苷酸序 列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：26和28的引物对的聚合 酶链反应从向日葵DNA文库扩增所述的核苷酸序列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：21和24、SEQ ID NO：21 和23、SEQ ID NO：22和24、SEQ ID NO：25和28或SEQ ID NO：26和 28的引物对的聚合酶链反应从马铃薯DNA文库扩增所述的核苷酸序 列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：9和10或SEQ ID NO：26 和28的引物对的聚合酶链反应从欧洲油菜DNA文库扩增所述的核苷酸 序列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：13和14、SEQ ID NO：21 和24或SEQ ID NO：22和24的引物对的聚合酶链反应从鼠耳芥DNA 文库扩增所述的核苷酸序列；

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用表示为SEQ ID NO：9和10、SEQ ID NO：11 和12、SEQ ID NO：21和24、SEQ ID NO：22和24、SEQ ID NO：25和 28或SEQ ID NO：26和28的引物对的聚合酶链反应从烟草DNA文库扩 增所述的核苷酸序列；或

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包括核苷酸序列的分离的 核酸分子，可以使用应用引物对的聚合酶链反应从植物DNA文库扩增 所述的核苷酸序列，所述的引物对包括SEQ ID NO：1、3、5、7、15、 17、19、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、 55、57、61、63、65、67、69、71或73编码序列(CDS)的前20个 核苷酸和最后20个核苷酸的反向补体。

本发明还包括一种嵌合基因，它包括在植物中具有活性的与本发 明NIM1同源物编码序列可操作地连接的启动子；本发明还包括含有这 类嵌合基因的重组载体，其中所述的载体能够稳定地转化入宿主且可 以用这类载体稳定地转化宿主。优选所述的宿主是诸如下列农学上重 要的农作物之一的植物：水稻、小麦、大麦、黑麦、玉米、马铃薯、 canola、向日葵、胡萝卜、甘薯、甜菜、菜豆、豌豆、菊苣、莴苣、 甘蓝、花椰菜、嫩茎花椰菜、芜菁、萝卜、菠菜、芦笋、洋葱、大蒜、 茄子、胡椒、芹菜、南瓜、南瓜、黄瓜、苹果、梨、温柏、甜瓜、洋 李、樱桃、桃、油桃、杏、草莓、葡萄、覆盆子、黑莓、凤梨、鳄梨、 番瓜、芒果、香蕉、大豆、烟草、番茄、高粱和糖甘蔗。本发明还包 括来自本发明植物的种子。

此外，本发明涉及一种增加植物中SAR基因表达的方法，该方法 通过在所述植物中表达自身含有在植物中具有活性的与本发明NIM1 同源物编码序列可操作地连接的启动子的嵌合基因来进行，其中在转 化的植物中以高于野生型植物的水平表达所编码的蛋白质。

此外，本发明涉及一种提高植物中病害抗性的方法，该方法通过 在所述植物中表达自身含有在植物中具有活性的与本发明NIM1同源 物编码序列可操作地连接的启动子的嵌合基因来进行，其中在转化的 植物中以高于野生型植物的水平表达所编码的蛋白质。

此外，本发明涉及一种选自SEQ ID NO：9-14、21-28、59和60 组成的组的PCR引物。

本发明还包括一种用于分离与可导致植物中系统获得性抗性的信 号转导级联相关的NIM1同源物的方法，该方法包括使用应用引物对的 聚合酶链反应从植物DNA文库扩增DNA分子，其中所述的引物对相当 于SEQ ID NO：1、3、5、7、15、17、19、29、31、33、35、37、39、 41、43、45、47、49、51、53、55、57、61、63、65、67、69、71或 73编码序列(CDS)的前20个核苷酸和最后20个核苷酸的反向补体； 或所述的引物对表示为SEQ ID NO：9和10、SEQ ID NO：11和12、SEQ ID NO：13和14、SEQ ID NO：21和24、SEQ ID NO：22和24、SEQ ID NO：21 和23、SEQ ID NO：25和28、SEQ ID NO：26和28或SEQ ID NO：59和 60。在一个优选的实施方案中，所述的植物DNA文库是烟草(Nicotiana tabacum)、番茄(Lycopericon esculentum)、欧洲油菜(Brassica napus)、鼠耳芥(Arabidopsis thaliana)、甜菜(Beta vulgaris)、 向日葵(Helianthus annuus)和马铃薯(Solanum tuberosum)的DNA 文库。

有关本文所述的几种NIM1同源物的Northern数据表示了组成型 表达或BTH-诱导性。据推定本文所述的NIM1基因同源物编码对生物 和化学诱导物敏感的信号转导级联中所涉及的蛋白质，所述的信号转 导级联可在植物中产生系统获得性抗性。本发明还涉及植物中这类 NIM1同源物的转基因表达以便增加SAR基因表达并增强病害抗性。

可以使用下面的实施例中所述的技术或通过使用作为构建PCR引 物基础的序列表中所示的序列的PCR来分离本发明的DNA序列。例如， 可以将具有SEQ ID NO：7的大约前和最后20-25个连续核苷酸的序列 的寡核苷酸用作PCR引物以便从来自植物来源(鼠耳芥)的cDNA文库 直接扩增cDNA序列(SEQ ID NO：7)。同样可以使用作为PCR引物基 础的序列表中所示的DNA序列末端、通过PCR从相应植物的cDNA或基 因组DNA文库中扩增本发明的其它DNA序列。

据推定在植物中转基因表达本发明的NIM1同源物可使一系列广 泛的植物病原体产生免疫性，所述的植物病原体包括但不限于：病毒 或类病毒，例如烟草或黄瓜花叶病毒、环斑病毒或坏死病毒、天竺葵 叶卷曲病毒、红色三叶草环斑病毒、番茄丛矮病毒等病毒；真菌，例 如卵菌诸如寄生疫霉和烟草霜霉；细菌，例如丁香假单胞菌和烟草野 火病假单胞菌；昆虫、诸如蚜虫，例如桃短尾蚜；和鳞翘目，例如 Heliothus的种类；以及线虫，例如南方根结线虫。本发明的载体和 方法对大量玉米病害生物体来说是有用的、包括但不限于霜霉：诸如； 大孢指疫霉、Sclerophthora rayissiae、禾生指梗霉、 Pernosclerospora sorghi、Peronosclerospora philippinensis、 Peronosclerospora sacchari和Peronosclerospora maydis；锈菌 诸如高粱柄锈菌、多堆柄锈菌和Physopella zeae；其它真菌诸如 Cercospora zeae-maydis、禾生刺盘孢、串珠镰孢、玉蜀黍赤霉、 Exerohilum turcicum、玉蜀黍球梗孢、禾白粉菌、壳针孢属和 Bipolaris maydis；和细菌诸如斯获氏欧文氏杆菌。

本发明的方法可以用于将病害抗性赋予各种植物，包括裸子植 物、单子叶植物和双子叶植物。尽管可以使属于这些宽类别的任何植 物产生病害抗性，但是它特别适用于农学上重要的农作物植物，诸如水 稻、小麦、大麦、黑麦、油菜、玉米、马铃薯、胡萝卜、甘薯、甜菜、 菜豆、豌豆、菊苣、莴苣、甘蓝、花椰菜、嫩茎花椰菜、芜菁、萝卜、 菠菜、芦笋、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、芹菜、胡萝卜、南瓜、南瓜、 绿皮密生西葫芦、黄瓜、苹果、梨、温柏、甜瓜、杧果、李子、樱桃、 桃、蜜桃、杏、草莓、葡萄、覆盆子、黑莓、凤梨、鳄梨、番瓜、杧 果、香蕉、大豆、烟草、番茄、高粱和甘蔗。

可以将本发明的NIM1同源物编码序列插入为植物设计的表达弹 夹以便使用标准遗传工程技术构建本发明的嵌合基因。对适合于实现 所选植物宿主中所需模式和水平的表达的诸如启动子、信号序列、5’ 和3’未翻译序列和增强子这样的特异性调节序列的选择属于本领域普 通技术人员的水平范围内。可以将含有在合适读框中连接的各个元件 的所得分子插入能够转化至宿主植物细胞的载体中。

能够在植物或植物细胞中起作用的启动子的实例(即那些能够启 动相关编码序列表达的启动子、诸如那些编码植物细胞中NIM1同源物 的启动子)包括：鼠耳芥属和玉米遍在蛋白质启动子；花椰菜花叶病 毒(CaMV)19S或35S启动子和CaMV双启动子；水稻肌动蛋白启动子； 来自烟草、鼠耳芥属或玉米的PR-1启动子；胭脂氨酸合酶启动子；核 酮糖-1，5-二磷酸羧化酶小亚单位(ssuRUBISCO)启动子等。特别优选 的是鼠耳芥属遍在蛋白质启动子。可以修饰启动子自身以便控制启动 子强度，从而按照本领域已知的方法提高相关编码序列的表达。优选 用于本发明的启动子是那些产生高水平组成型表达的启动子。

可以使信号或转运肽类与本发明的嵌合DNA构建体中的NIM1同源 物编码序列融合以便使所表达的蛋白质定向转运至所需的作用部位。 信号肽类的实例包括那些与植物发病机理相关蛋白质天然连接的信号 肽，例如PR-1、PR-2等。参见，例如Payne等，1988。转运肽类的实 例包括诸如那些在Von Heijne等(1991)、Mazur等(1987)和Vorst 等(1988)中所述的叶绿体转运肽类；以及诸如那些在Boutry等 (1987)中所述的线粒体转运肽类。另外还包括使所编码的蛋白质集 中于诸如液泡这样的各种细胞区室中的序列。例如，参见Neuhaus等 (1991)和Chrispeels(1991)。

本发明的嵌合DNA构建体可以含有本发明的多拷贝的启动子或多 拷贝的NIM1同源物编码序列。此外，该构建体可以包括标记物的编码 序列和诸如信号或转运肽类这样的其它肽类的编码序列，它们各自在 带有DNA分子中的其它功能元件的合适的读框中。这类构建体的制备 方法属于本领域普通技术人员的水平范围内。

有用的标记物包括提供除草剂、抗生素或药物抗性的肽类，诸如： 例如耐原卟啉原氧化酶抑制剂、潮霉素、卡那霉素、G418、庆大霉素、 洁霉素、氨甲蝶呤、草甘膦、膦丝菌素等。可以将这些标记物用于从 来转化的细胞中筛选用本发明嵌合DNA构建体转化的细胞。其它有用 的标记物是可以通过例如颜色反应这样的可肉眼观察的反应方便检测 的肽酶，例如荧光素酶、β-葡糖醛酸糖苷酶或β-半乳糖苷酶。

可以用多种已知方法将诸如本文所述的那些用于植物表达的嵌合 基因引入植物细胞。本领域技术人员会理解对方法的选择可能取决于 为转化而靶向的植物(即单子叶植物或双子叶植物)和/或细胞器(即 细胞核、叶绿体、线粒体)的类型。转化植物细胞的适宜方法包括微 量注射(Crossway等，1986)、电穿孔(Riggs等，1986)、农杆菌 属介导的转化(Hinchee等，1988；Ishida，1996)、定向基因转移 (Paszkowski等，1984；Hayashimoto等，1990)和使用获自Agracetus， Inc.，Madison，Wisconsin and Dupont，Inc.，Wilmington，Delaware 的装置进行的冲击粒子加速(参见，例如美国专利4,945,050和McCabe 等，1988)。另外参见：Weissinger等(1988)；Sanford等(1987) (洋葱)；Christou等(1988)(大豆)；McCabe等(1988)(大豆)； Datta等(1990)(水稻)；Klein等(1988)(玉米)；Klein等(1988) (玉米)；Klein等(1988)(玉米)；Fromm等(1990)；和Gordon-Kamm 等(1990)(玉米)；Svab等(1990)(烟草叶绿体)；Gordon-Kamm 等(1993)(玉米)；Shimamoto等(1989)(水稻)；Christou等 (1991)(水稻)；Datta等(1990)(水稻)；欧洲专利申请EP 0 332 581(鸭茅属和其它Pooideae)；Vasil(1993)(小麦)；Weeks等 (1993)(小麦)；Wan等(1994)(大麦)；Jahne等(1994)(大 麦)；Umbeck等(1987)(棉花)；Casas等(1993)(高粱)；Somers 等(1992)(燕麦)；Torbert等(1995)(燕麦)；Weeks等(1993) (小麦)；WO 94/13822(小麦)；和Nehra等(1994)(小麦)。在 Koziel等(1993)、Hill等(1995)和Koziel等(1996)中可以找 到通过微粒轰击将重组DNA分子引入玉米的一组特别优选的实施方 案。另一个优选的实施方案是公开在EP 0 292 435中的玉米的原生质 体转化方法。

一旦将包括NIM1同源物编码序列的嵌合基因转化入特定的植物 物种，则可以使用传统的育种技术使之在该物种中繁殖或将其移入相 同物种的其它的变种、特别包括商品变种中。本发明特别优选的植物 包括上面所列的农学上重要的农作物。通过有性繁殖来传递上述基因 工程的转基因种子和植物的遗传特性且这些特性由此可以在子代植物 中得到维持和传播。

实施例

通过下列具体的步骤、制备方法和实施例来进一步具体地解释本 发明。这些实施例仅用于解释目的而非用来限定本发明的范围。本文 所用的标准重组DNA和分子克隆技术在本领域中是众所周知的，并且 在Sambrook等人1989；T.J.Silhavy，M.L.Berman；L.W.Enquist， 1984和Ausubel，F.M.等人1987中有描述。

I.鼠耳芥属NIMI基因同源物的分离

实施例1：来自烟草的NIM1同源物的分离

将来自从烟草cDNA文库的噬菌体切下的团块的质粒DNA用作使用 下列引物对进行的PCR的模板：5’-AGATTATTGTCAAGTCTAATG-3’(SEQ ID NO：9)+5’-TTCCATGTACCTTTGCTTC-3’(SEQ ID NO：10)和5’-GCGGATCCAT GGATAATAGTAGG-3’(SEQ ID NO：11)+5’-GCGGATCCTATTTCCTAAAAGGG-3’ (SEQ ID NO：12)。循环条件优选94℃下1分钟、40℃下1分钟和72 ℃下1.5分钟，并且该反应优选进行40个循环。将琼脂糖凝胶上的 PCR产物放出、切下并克隆入pCRII-TOPO(Invitrogen)。

这种烟草NIM1同源物的全长cDNA序列表示为SEQ ID NO：1，并 且由该cDNA序列编码的蛋白质表示为SEQ ID NO：2。已经在1998年 8月17日将包含SEQ IDNO：1的烟草NIM1同源物在NRRhL(Agricultural Research Service，Patent Culture Collection，Northern Regional Research Center，1815 North University Street，Peoria，lllinois 61604，U.S.A.)以pNOV1206保藏，并给予其保藏号为NRRL B-30051。

实施例2：来自番茄的NIM1同源物的分离

使用来自Stratagene的方案从番茄的λZAPII cDNA文库中切下 噬菌粒。将噬菌粒(质粒)大量转化入各含有约80,000个克隆的10 个库内的大肠杆菌XL1-Blue中，并从这些库中提取DNA。通过使用下 列引物进行的PCR筛选所述库中存在的NIM1同源物：5’- AGATTATTGTCAAGTCTAATG-3’(SEQ ID NO：9)和5’-TTCCATGTACCTTTGCTTC -3’(SEQ ID NO：10)。

通过克隆PCR-扩增的DNA片段并测序证实了从所述库中扩增的序 列含有NIM1同源物。连续制备较小的库并通过使用上述相同引物的 PCR来筛选存在的NIM1同源物，直到获得含有该同源物的单克隆为 止。在cDNA克隆含有缺少5’端的部分基因的情况中，采用5’RACE(cDNA 末端的快速扩增)获得所述基因的全长序列。

这种番茄NIM1同源物的全长cDNA序列表示为SEQ ID NO：3，并 且由该cDNA序列编码的蛋白质表示为SEQ ID NO：4。已经在1998年 8月17日将包含SEQ IDNO：3的番茄NIM1同源物在NRRL(Agricultural Research Service，Patent Culture Collection，Northern Regional Research Center，1815 North University Street，Peoria，lllinois 61604，U.S.A.)以pNOV1204保藏，并给予其保藏号为NRRL B-30050。 实施例3：来自欧洲油菜的NIM1同源物的分离

使用来自Stratagene的方案从欧洲油菜的λZAPII cDNA文库中 切下噬菌粒。将噬菌粒(质粒)大量转化入各含有约80,000个克隆的 10个库内的大肠杆菌XL1-Blue中，并从这些库中提取DNA。通过PCR 筛选所述库中通过使用序列引物进行的PCR而存在的NIM1同源物： 5’-AGATTATTGTCAAGTCTAATG-3’(SEQ ID NO：9)和5’- TTCCATGTACCTTTGCTTC-3’(SEQ ID NO：10)。

通过克隆PCR-扩增的DNA片段并测序证实了从所述库中扩增的序 列含有NIM1同源物。连续制备较小的库并通过使用上述相同引物的 PCR来筛选存在的NIM1同源物，直到获得含有该同源物的单克隆为 止。在cDNA克隆含有缺少5’端的部分基因的情况中，采用5’RACE(cDNA 末端的快速扩增)获得所述基因的全长序列。

这种欧洲油菜NIM1同源物的部分cDNA序列表示为SEQ ID NO：5， 并且由该cDNA序列编码的蛋白质表示为SEQ ID NO：6。已经在1998 年8月17日将包含SEQ IDNO：5的欧洲油菜NIM1同源物在NRRL (Agricultural Research Service，Patent Culture Collection， Northern Regional Research Center，1815 North University Street， Peoria，lllinois 61604，U.S.A.)以pNOV1203保藏，并给予其 保藏号为NRRL B-30049。

实施例4：来自鼠耳芥的NIM1同源物的分离

BLAST在查询检测GenBank条目B26306时使用鼠耳芥属或番茄 NIM1氨基酸序列检索，B26306含有来自细菌人工染色体(Bacterial Artifical Chromosome)(BAC)F18D8的鼠耳芥属基因组序列。预测 部分BAC序列编码与NIM1具有显著相似性(47％氨基酸同一性)的蛋 白质。将下列引物用于F18D8序列区：5’-TCAAGGCCTTGGATTCAGATG-3’ (SEQ ID NO：13)和5’-ATTAACTGCGCTACGTCCGTC-3’(SEQ ID NO：14)。

将所述引物用于与作为模板的来自以pFL61-为基础的鼠耳芥属 cDNA文库的DNA的PCR反应。循环条件优选94℃下30秒、53℃下30 秒、72℃下30秒。该反应优选进行40个循环。检测预测大小(290 个碱基对)的PCR产物并通过使逐渐减小量的文库经过大肠杆菌的连 续纯化和重新鉴别通过PCR存在的克隆而从cDNA文库中纯化相应于 F18D8引物的cDNA克隆。最终获得单一阳性克隆并测序。该克隆的序 列证实了存在与NIM1具有显著同源性的可读框。

这种鼠耳芥NIM1同源物的全长cDNA序列表示为SEQ ID NO：7， 并且由该cDNA序列编码的蛋白质表示为SEQ ID NO：8。已经在1999 年5月25日将包含SEQ IDNO：7的鼠耳芥NIM1同源物在NRRL (Agricultural Research Service，Patent Culture Collection， Northern Regional Research Center，1815 North University Street， Peoria，lllinois 61604，U.S.A.)以AtNMLc5保藏，并给予其保 藏号为NRRL B-30139。

实施例5：简并引物的设计

除NIM1基因(Ryals等人，1997)和上述实施例4中所述的NIM- 样基因(AtNMLc5-SEQ ID NO：7)外，鼠耳芥还含有三种其它NIM-样 (NML)基因组序列：AtNMLc2(SEQ ID NO：15)、AtNMLc4-1(SEQ ID NO：17)和AtNMLc4-2(SEQ ID NO：19)，其中c[#]代表特定NML基因 位于其上的染色体号。使用GCG Seqweb多重序列对比程序(Pretty， Wisconsin Genetics Computer Group)，将来自鼠耳芥(Ryals等， 1997)、烟草(实施例1-SEQ ID NO：1)和番茄(实施例2-SEQ ID NO：3) 的NIM1序列以及来自鼠耳芥的NML序列(SEQ ID NO：7、15、17和19) 进行序列对比。以这种序列对比为基础，三个区显示出充分的保守性 以便设计对来自包括甜菜、向日葵、马铃薯和canola在内的其它农作 物物种的NIM1同源物进行PCR扩增所用的简并PCR引物。将根据这些 保守区设计的引物列于下面的表1中。使用仅带有来自鼠耳芥(Ryals 等，1997)、烟草(实施例1-SEQ ID NO：1)和番茄(实施例2-SEQ ID NO：3)的NIM1序列的序列组来设计NIM1(A-D)引物。使用除来 自鼠耳芥的四种NML序列(SEQ ID NO：7、15、17和19)之外还带有 上述三种序列的序列组来设计NIM2(A-D)引物。优选由Genosys Biotechnologies，Inc.(The Woodlands，Texas)来合成引物。根 据寡核苷酸中单一位点上一种以上碱基的标志将简并位置列在表1 中。“取向”指的是所述引物是否定向于cDNA的3’端(下游)或5’ 端(上游)。 表1：简并引物 引物 序列(5’-3’) SEQ ID NO： 取向 NIM 1A GAGATTATTGTCAAGTCTAATGTAGATA   T                    T SEQ ID NO：21 下游 NIM 1B  ACTGGACTCGGATGATATTGAATTA   T T  T  T      G    G SEQ ID NO：22 下游 NIM 1C  TAACTCAACATCATCAGAATCAAATGC     T    T      C  G  C G SEQ ID NO：23 上游 NIM 1D  GTTGAGCAAGAGCAACTCTATTTTCAAG     T   C  CC            G            T SEQ ID NO：24 上游 NIM 2A TGCATAGAAATAATTGTGAAGTCTAATGTAGA      T  G  TG    C      G    T SEQ ID NO：25 下游 NIM 2B  GGCACTGGACTCAGATGATGTTGAACT      T    T    T         GT SEQ ID NO：26 下游 NIM 2C AACTCAACATCATCAGAATCCAATGCC  GT           T  G    G SEQ ID NO：27 上游 NIM 2D AGTTGAGCAAGGCCAACTCGATTTTCAAAAT     T   C  A       T        GG            T SEQ ID NO：28 上游

实施例6：对来自农作物物种NIM-样DNA片段的PCR扩增

使用基因组DNA或cDNA作为模板从鼠耳芥属、番茄、烟草、甜菜、 向日葵、马铃薯和canola扩增NIM-样DNA片段。将所用的引物组合 以及预计的片段大小列在下面的表2中。 表2：引物组合和DNA片段大小 左引物 右引物 片段大小(bp) NIM 1A NIM 1D 669 NIM 1A NIM 1C 195 NIM 1B NIM 1D 499 NIM 2A NIM 2D 676 NIM 2A NIM 2C 200 NIM 2B NIM 2D 503

优选在GeneAmp PCR System 9700(PE Applied Biosystems， Foster City，CA)中使用Ready-To-Go PCR Beads(Amersham， Piscataway，NJ)进行简并引物的PCR。在各反应中使用20-40ng的 基因组DNA或5-10ng的cDNA，其中各引物的终浓度为0.8μM。优选 的循环参数如下：94℃1分钟；3个循环的[94℃30秒；37℃30秒；72 ℃2分钟]；35个循环的[94℃30秒；60℃30秒；72℃2分钟]；72℃7分 钟；4℃保持。在2％琼脂糖凝胶上分析反应产物并切下适当大小的 DNA片段。例如使用Geneclean III试剂盒(BIO 101，Inc.，Carlsbad， CA)从琼脂糖带上分离DNA片段，例如使用TOPO TA克隆试剂盒 (Invitrogen Corporation，Carlsbad，CA)对其进行克隆。例如， 使用CONCERT快速质粒小量制备系统(Life Technologies，Inc.， Rockyille，MD)分离质粒并通过标准方案测序。

NIM-样DNA片段获自所尝试的所有植物物种且在许多情况中分离 了多种单一NIM-样序列。表3和附图2具体描述了所分离的NIM-样片 段。 表3：NIM-样PCR片段 物种 成功的引物对 PCR模板 单一克隆 SEQ ID NO： 鼠耳芥属 1A/1D；1B/1D 基因组DNA 1 烟草 1A/1D； 1B/1D；2A/2D；2B/2D cDNA 4 SEQ ID NO：29、 31、33和35 番茄 1A/1D； 1B/1D；2A/2D；2B/2D 基因组DNA， cDNA 1 SEQ ID NO：37 甜菜 1B/1D；2B/2D 基因组DNA， cDNA 1 SEQ ID NO：39 向日葵 2B/2D cDNA 2 SEQ ID NO：41 和43 马铃薯 1A/1D； 1A/1C；1B/1D；2A/2D； 2B/2D cDNA 3 SEQ ID NO：45、 47和49 Canola 2B/2D cDNA 4 SEQ ID NO：51、 53、55和57

以这些结果为基础，上述简并引物PCR可以从各种植物物种扩增 NIM-样片段。特别地，使用来自所尝试的所有物种的cDNA作为模板的 NIM 2B/NIM 2D的引物组合是成功的。特别优选使用Ready-To-Go PCR Beads来获得产物。此外，对除鼠耳芥属、番茄和甜菜外的所有样品 来说优选使用cDNA作为模板，其中基因组DNA是充分的。

实施例7：其它简并引物

以4种烟草片段(SEQ ID NO：29、31、33和35)和用于测定番 茄是否还含有不使用表1中所列简并引物扩增的相似NIM-样序列的番 茄序列(SEQ ID NO：37)的序列对比为基础设计新简并引物对。将由 这些片段设计的引物列在下面的表3中且优选由Genosys Biotechnologies，Inc.(The Woodlands，Texas)合成。根据寡核 苷酸中单一位点上一种以上碱基的标志将简并位置列在表3中。“取 向”指的是所述引物是否定向于cDNA的3’端(下游)或5’端(上游)。 表4：其它简并引物 引物 序列(5’-3’) SEQ ID NO： 取 向 NIM 3A TAGATGAAGCATACGCTCTCCACTATGCTGT        T  C  T     T  T SEQ ID NO：59 下 游 NIM 3B GGCTCCTTACGCATGGCAGCAACATGAAGGAC      T  C T           TG     C SEQ ID NO：60 上 游

如上所述使用番茄cDNA进行简并引物的PCR并克隆和测序可能的 产物。序列分析显示了两类NIM-样片段：第一种与用SEQ ID NO：37 表示的番茄序列相同，而第二种在番茄中是唯一的，并且与用SEQ ID NO：31和33表示的烟草序列具有88％的同一性。这种新型番茄序列 的序列用SEQ ID NO：61表示。

实施例8：全长NIM-样cDNA’s

优选通过使用SMART RACE cDNA扩增试剂盒(Clontech，Palo Alto， CA)的RACE PCR从NIM-样PCR片段中获得相应的cDNA序列上游和下 游。优选对至少三种独立的RACE产物的每个5’-或3’-末端测序，以 便消除PCR误差。分别将所得的符合用SEQ ID NO：39、43和31表示 的NIM-样PCR片段的甜菜、向日葵B和烟草B NIM1同源物的全长cDNA 序列表示为SEQ ID NO：63、65和73。

优选通过RT-PCR克隆符合NIM-样基因组序列AtNMLc2(SEQ ID NO：15)、AtNMLc4-1(SEQ ID NO：17)和AtNMLc4-2(SEQ ID NO：19) 的NIM-样鼠耳芥cDNA’s。使用寡脱氧胸苷酸引物反转录来自鼠耳芥的 总RNA。使用以各基因组序列(SEQ ID NO：15、17和19)编码区的 5’和3’末端为基础设计的特异性有义和反义寡核苷酸引物、通过PCR 来扩增所得的第一链cDNA。将预测大小的PCR片段克隆入载体并测序 以便证实这些cDNA克隆与NIM-样基因组序列一致。将与NIM-样基因 组序列AtNMLc2(SEQ ID NO：15)一致的cDNA序列表示为SEQ ID NO： 67；将与NIM-样基因组序列AtNMLc4-1(SEQ ID NO：17)一致的全长 cDNA序列表示为SEQ ID NO：69；并将与NIM-样基因组序列AtNMLc4-2 (SEQ ID NO：19)一致的全长cDNA序列表示为SEQ ID NO：71。

实施例9：Northern分析

Northern数据表明在用100μM或300μM BTH(苯并(1，2，3)噻二 唑-7-硫代羧酸S-甲酯)处理后甜菜NIM-样克隆(SEQID NO：39和63) 的表达提高了3-7倍。此外，Northern数据表明向日葵A NIM-样克 隆(SEQ ID NO：41)的表达是组成型的。此外，Northern数据表明 在用100μM或300μM BTH处理后向日葵B NIM-样克隆(SEQ ID NO： 43和65)的表达提高了2倍。

II.植物中本发明基因序列的表达

可以使用常规的重组DNA技术将本发明的NIM1同源物引入植物细 胞。一般来说，这一过程包括使用本领域中公知的标准克隆步骤将本 发明的编码序列插入与该编码序列是异源的(即正常情况下不存在 的)表达系统。所述载体含有转录和翻译所插入编码蛋白质的序列所 必不可少的元件。可以使用本领域中公知的大量载体系统，诸如质粒、 噬菌体病毒和其它修饰的病毒。合适的载体包括但不限于：病毒载体， 诸如λ载体系统λgtl1、λgtl0和卡隆4；质粒载体，诸如pBI121、 pBR322、pACYC177、pACYC184、pAR系列、pKK223-3、pUC8、pUC9、 pUC18、pUC19、pLG339、pRK290、pKC37、pKC101、pCDNAII和其它相 似系统。还可以修饰所述表达系统的成分以便增加表达。例如，可以 使用截短的序列、核苷酸取代或其它修饰方法。在合适的条件下可以 采用本文所述的表达系统转化实际上任何的农作物植物细胞。可以使 转化的细胞再生成完整植物，使得NIM1同源物增加SAR基因表达并提 高转基因植物中的病害抗性。

实施例10：植物表达弹夹的构建

首先在表达弹夹中将用于转基因植物中表达的编码序列装配在植 物中可表达的合适启动子之后。该表达弹夹还可以包括表达转基因所 需或筛选的任何其它序列。这类序列包括但不限于：转录终止子；诸 如内含子这样促进表达的外部序列；活性序列和用于将基因产物靶向 至特定细胞器和细胞区室的序列。然后便利地将这些表达弹夹转入下 述植物转化载体。下面是典型表达弹夹中各种成分的描述。

1.启动子

对表达弹夹中所用启动子的选择决定转基因植物中转基因的空间 和时间分布型。所选择的启动子表达特殊细胞类型(诸如叶表皮细胞、 叶肉细胞、根皮层细胞)或特殊组织或器官(例如，根、叶或花)中 的转基因，并且这种选择反映出累积基因产物所需的位置。另一方面， 所选择的启动子可以在不同诱导条件下启动基因的表达。启动子在其 强度即促进转录的能力上是可变的。根据所用宿主细胞系统的不同， 可以使用包括基因的天然启动子在内的许多合适启动子中的任何一 种。下面是可以用于表达弹夹中的启动子的非限制性实例。

a.组成型表达、遍在蛋白质启动子：

遍在蛋白质是一种已知累积在许多细胞类型中的基因产物且已经 从用于转基因植物的几个物种中克隆了其启动子(例如向日葵-Binet 等人，1991；玉米-Christensen等人，1989；和鼠耳芥属-Norris 等人，1993)。已经在转基因单子叶植物系统中研发了玉米遍在蛋白 质启动子且为单子叶植物转化而构建的其序列和载体公开在专利申请 EP 0342 926(Lubrizol)中。Taylor等人(1993)描述了包括玉米 遍在蛋白质启动子和第一种内含子的载体(pAHC25)及其在通过微射 轰击引入时大量单子叶植物的细胞混悬液中的高活性。特别优选将鼠 耳芥属遍在蛋白质启动子用于本发明的NIM1同源物中。这种遍在蛋白 质启动子适合于包括单子叶植物和双子叶植物在内的转基因植物中的 基因表达。合适的载体是pAHC25的衍生物或在该申请中记载的通过引 入合适的遍在蛋白质启动子和/或内含子序列而修饰的任何转化载 体。

b.组成型表达，CaMV35S启动子：

质粒pCGN1761的构建记载在公开的专利申请EP 0392 225(实施 例23)中。pCGN1761含有“双”CaMV35S启动子和tml转录终止子(在 该启动子和该终止子之间具有单一EcoRI位点)并带有pUC-型主链。 构建带有修饰的多接头的pCGN1761衍生物，所述的多接头除包括存在 的EcoRI位点外还包括Notl和Xhol位点。将这种衍生物命名为 pCGN1761ENX。pCGN1761ENX用于克隆其多接头内的cDNA序列或编码 序列(包括微生物ORF序列)以便在转基因植物中在35S启动子控制 下表达所述的序列。可以用与启动子5’连接的Hindlll、Sphl、Sall 和Xbal位点和与终止子3’连接的Xbal、BamHl和Bgll位点切割如此 构建的完整35S启动子-编码序列-tml终止子弹夹以便转入诸如下述 的转化载体。此外，可以通过用Hindlll、Sphl、Sall、Xbal或Pstl 进行5’切割并用任何的多接头限制位点(EcoRI、Notl或Xhol)进行 3’切割来除去双35S启动子片段，以便用另一启动子进行取代。如果 需要，通过引入可以促进翻译的序列来进行克隆位点周围的修饰。这 在需要超表达时特别有用。例如，可以如美国专利号5,639,949的实 施例37中所述通过使翻译起始位点最佳化来修饰pCGN1761ENX。

c.组成型表达，肌动蛋白启动子

已知在大多数细胞类型中表达了几种肌动蛋白的同种型且由此肌 动蛋白启动子对组成型启动子来说是一种良好的选择。特别地，已经 克隆和表征了来自水稻Actl基因的启动子(McElroy等人，1990)。 发现1.3kb的该启动子片段含有水稻原生质体中表达所需的全部调节 元件。此外，已经特异性构建了用于单子叶植物的基于Actl启动子的 大量表达载体(McElroy等人，1991)。它们结合了Actl-内含子1、 Adhl 5’侧翼序列和Adhl-内含子1(来自玉米醇脱氢酶基因)和来自 CaMV35S启动子的序列。显示出最高程度表达的载体是35S和Actl内 含子或Actl 5’侧翼序列和Actl内含子的融合体。使起始ATG(GUS 报道基因的)周围的序列最佳化也会促进表达。可以方便地修饰由 McElroy等人(1991)所述的启动子表达弹夹以用于基因表达，并且 这些启动子表达弹夹特别适用于单子叶植物宿主。例如，可以从 McElroy构建体中除去含启动子的片段并将其用于取代pCGN1761ENX 中的双35S启动子，然后将它用于插入特异性基因序列。接着可以将 由此构建的融合基因转入合适的转化载体。在一个独立的报导中，还 发现带有第一种内含子的水稻Actl启动子指导经培养的大麦细胞中 的高度表达(Chibbar等人，1993)。

d.诱导型表达，PR-1启动子：

可以用产生适宜的高度表达水平的所选择的任何其它启动子来取 代pCGN1761ENX中的双35S启动子。根据实例，美国专利号5,614,395 中所述的化学调节启动子之一可以取代双35S启动子。优选用限制酶 从所选择的启动子来源中切割选择的启动子，不过，可以另外选择使 用携带合适终止限制位点的引物来对所选择的启动子进行PCR扩增。 应进行PCR扩增，然后应对所述启动子重新进行测序以便检查在靶载 体中克隆扩增的启动子后的扩增误差。从质粒pCIB1004中切割化学/ 病原体调节烟草PR-1a启动子(用于构建，参见：例如EP 0332 104 中的实施例21)并将其转入质粒pCGN1761ENX(Uknes等人，1992)。 用Ncol切割pCIB1004并通过用T4 DNA聚合酶处理使所得线性化片段 的3’突出端钝端化。然后用Hindlll切割该片段并将所得的含PR-1a 的启动子片段进行凝胶纯化，并克隆入已经除去了双35S启动子的 pCGN1761ENX中。该过程通过下列步骤来进行：用Xhol切割和用T4 聚合酶钝端化处理；随后用Hindlll切割并分离含有pCIB1004启动子 片段被克隆入的片段的较大载体-终止子。这一过程产生一种 pCGN1761ENX衍生物，它带有PR-1a启动子和tml终止子以及带有单 一EcoRI和Notl位点的间插多接头。可以将所选择的编码序列插入该 载体，随后可以将融合产物(即启动子-基因-终止子)转入包括下文 所述的那些载体在内的任何选择的转化载体。可以采用各种化学调节 物来诱导所选择的编码序列在按照本发明转化的植物中的表达，这些 化学调节物包括美国专利号5,523,311和5,614,395中公开的苯并噻 二唑、异烟酸和水杨酸化合物。

e.诱导型表达，一种乙醇-诱导型启动子：

还可以将诸如乙醇这样的某些醇类或酮类诱导的启动子用于使本 发明的编码序列产生诱导型表达。这类启动子例如是来自构巢曲霉的 alcA基因启动子(Caddick等人，1998)。在构巢曲霉中，alcA基因 编码醇脱氢酶I，其表达在有化学诱导物存在的情况下由AlcR转录因 子来调节。为了本发明的目的，用本发明的编码序列来取代包括与最 小35S启动子(Caddick等人，1998)融合的alcA基因启动子序列的 质粒palcA：CAT中的CAT编码序列以便形成带有在alcA基因启动子控 制下的编码序列的表达弹夹。可以使用本领域中众所周知的方法来进 行该过程。

f.诱导型表达、一种糖皮质激素诱导型启动子：

使用基于类固醇激素的系统诱导本发明NIM1同源物的表达也是 所关注的。例如，可以使用糖皮质激素介导的诱导系统(Aoyama和 Chua，1997)并且通过应用糖皮质激素诱导基因表达，例如一种合成 的糖皮质激素，优选地塞米松，优选的浓度范围在0.1mM-1mM、更优 选10mM-100mM。为了本发明的目的，用编码NIM1同源物的基因序列 取代荧光素酶基因序列以便在与35S最小启动子融合的GAL4上游活化 序列6个拷贝的控制下形成带有编码NIM1同源物的基因序列的表达弹 夹。使用本领域中众所周知的方法来进行该过程。反式作用因子包括 GAL4 DNA的结合结构域(Keegan等人，1986)，该结构域与疱疹病毒 蛋白VP16(Triezenberg等人，1988)的反式激活域融合，这种反式 激活域与大鼠糖皮质激素受体(Picard等人，1988)的激素结合结构 域融合。融合蛋白的表达由适合于本领域中公知或本文所述植物中的 表达的任何启动子来控制。这种表达弹夹还包括在含有编码与6xGAL4/ 最小启动子融合的NIM1同源物的基因序列的植物中。因此，获得融合 蛋白的组织或器官特异性可导致NIM1同源物的诱导型组织或器官特 异性。

g.根特异性表达：

基因表达的另一种模式是根表达。合适的根启动子由de Framond (1991)描述并且也记载于公开的专利申请EP 0452 269中。将这种 启动子转入诸如pCGN1761ENX这样合适的载体以便插入所选择的基 因，随后将完整的启动子-基因-终止子弹夹转入有意义的转化载体 中。

h.创伤诱导型启动子：

创伤诱导型启动子也适合于基因表达。已经描述了大量这类启动 子(例如Xu等人，1993)；Logemann等人，1989；Rohrmeier&Lehle， 1993；Firek等人，1993；Warner等人，1993)，它们均适用于本发 明。Logemann等人描述了双子叶植物马铃薯wunl基因的5’上游序列。 Xu等人证实来自双子叶植物马铃薯的创伤诱导型启动子(pin2)在单 子叶植物水稻中具有活性。此外，Rohrmeier&Lehle描述了玉米Wipl cDNA的克隆，它是创伤诱导型的且可以将其用于使用标准技术分离关 连启动子。类似地，Firek等人和Warner等人已经描述了来自单子叶 植物石刁柏的创伤诱导型基因，将它在局部创伤和病原体侵害部位表 达。使用本领域中众所周知的克隆技术可以将这些启动子转入与涉及 本发明基因融合的合适载体，并用于在植物创伤部位上表达这些基 因。

i.髓优选的表达：

专利申请WO 93/07278中描述了优选在髓细胞中表达的玉米trpA 基因的分离。列出了从转录起点扩展至-1726bp的基因序列和启动子。 使用标准分子生物学技术可以将这种启动子或其部分转入诸如 pCGN1761这样的载体，其中它可以取代35S启动子，并可用于以髓优 选方式启动外源基因的表达。实际上，可以将含有髓优选的启动子或 其部分的片段转入任何载体并修饰以便在转基因植物中的应用。

j.叶特异性表达：

Hudspeth&Grula(1989)已经描述了编码磷酸烯醇羧酶(PEPC) 的玉米基因。使用标准分子生物学技术可以将用于该基因的启动子用 于以叶特异性方式启动转基因植物中任何基因的表达。

k.花粉特异性表达：

WO 93/07278中描述了在花粉细胞中表达的玉米钙依赖性蛋白激 酶(CDPK)的分离。基因序列和启动子从转录起点扩展至1400bp。使 用标准分子生物学技术可以将这种启动子或其部分转入诸如 pCGN1761这样的载体，其中它可以取代35S启动子，并可用于以花粉 特异性方式启动本发明NIM1同源物的表达。

2.转录终止子

各种转录终止子可以应用于表达弹夹。它们负责转基因及其正确 聚腺苷酸化后的转录终止。合适的转录终止子是那些已知在植物中起 作用的终止子且包括CaMV 35S终止子、tml终止子、胭脂氨酸合酶终 止子和豌豆rbcS E9终止子。它们可用于单子叶植物和双子叶植物。 此外，可以使用一种基因的天然转录终止子。

3.用于表达的增强或调节的序列

已经发现了大量来自转录单位内的可促进基因表达的序列，并且 可以将这些序列与本发明的基因联合使用以便增加其在转基因植物中 的表达。

已经证实不同的内含子序列可促进表达、特别是在单子叶植物细 胞中。例如，已经发现玉米Adhl基因的内含子可显著促进野生型基因 在引入玉米细胞时在其关连启动子控制下的表达。发现内含子1特别 有效且在与氯霉素乙酰基转移酶基因的融合构建体中的表达得到提高 (Callis等，1987)。在相同的实验系统中，来自玉米bronzel基因 的内含子在促进表达方面具有相似的作用。通常将内含子序列引入植 物转化载体、一般是未翻译的前导区内。

已知许多来源于病毒的未翻译前导序列也可促进表达，并且它们 在双子叶植物细胞中特别有效。特别地，已经证实来自烟草花叶病毒 (TMV，“W-序列”)、玉米褪绿斑驳病(MCMV)和苜蓿花叶病毒(AMV) 的前导序列可有效促进表达(例如Gallie等人，1987；Skuzeski等 人，1990)。

4.细胞内基因产物的靶向

已知在植物中存在靶向基因产物的不同机理，并且已经以一定的 具体方式表征了控制这些机理起作用的序列。例如，由在进入叶绿体 以产生成熟蛋白质的过程中被切割的不同蛋白质氨基酸末端发现的信 号序列控制将基因产物靶向至叶绿体(例如Comao等人，1988)。这 些信号序列可以与异源基因产物融合以便影响异源产物引入叶绿体 (van den Broeck等人，1985)。编码合适的信号序列的DNA可以分 离自编码RUBISCO蛋白质、CAB蛋白质、EPSP合酶、GS2蛋白质和已 知是叶绿体定位的许多其它蛋白质的5’末端。另外参见美国专利号 5,639,949的实施例37中的小标题“使用叶绿体靶向的表达”。

其它基因产物定位于其它诸如线粒体和过氧化物酶体这样的细胞 器(例如Unger等人，1989)。还可以操纵编码这些产物的cDNAs以 便使异源基因产物靶向至这些细胞器。这类序列的实例是核编码的腺 苷三磷酸酶和特异性线粒体用的天冬氨酸转氨酶同种型。Rogers等人 (1985)已经描述了靶向细胞蛋白质体。

此外，已经表征了可使基因产物靶向至其它细胞区室的序列。氨 基末端序列负责靶向至ER、质外体和从糊粉细胞进行胞外分泌 (Koehler&Ho，1990)。另外，氨基末端序列与羧基末端序列负责 基因产物的液泡靶向(Shinshi等人，1990)。

通过将上述合适的靶向序列与有意义的转基因序列融合，有可能 使得转基因产物定向于任何细胞器或细胞区室。例如，为了进行叶绿 体靶向，使来自RUBISCO基因、CAB基因、EPSP合酶基因或GS2基因 的叶绿体信号序列与转基因的氨基末端ATG进行框内融合。所选择的 信号序列应包括已知的切割位点，并且所构建的融合体应考虑到切割 所需的切割位点后的任何氨基酸。在某些情况中，通过在切割位点与 转基因ATG之间添加少量氨基酸或在转基因序列中取代某些氨基酸可 以满足这种要求。通过体外翻译体外转录的构建体、随后使用由 Bartlett等人(1982)和Wasmann等人(1986)所述的技术，通过叶 绿体体外摄取来测试为引入叶绿体所构建的融合体的叶绿体摄入功 效。这些构建技术在本领域中是众所周知的且同样可用于线粒体和过 氧化物酶体。

上述细胞靶向机理不仅可以与其关连启动子共同使用，而且可以 与异源启动子一起使用，从而在与靶向信号来源的启动子不同的表达 模式的启动子转录调节下实现特异性靶向细胞的目的。

实施例11：植物转化载体的构建

大量可以应用于植物转化的转化载体对于植物转化领域的普通技 术人员来说是公知的，并且可以将涉及本发明的基因与任何这类载体 一起使用。对载体的选择将取决于优选的转化技术和用于转化的靶物 种。就某些靶物种而言，可以优选不同的抗生素或除草剂选择标记。 在转化中通常使用的选择标记包括产生卡那霉素和相关抗生素抗性的 nptll基因(Messing&Vierra，1982；Bevan等人，1983)、产生 除草剂膦丝菌素抗性的bar基因(White等人，1990；Spencer等人， 1990)、产生抗生素潮霉素抗性的hph基因(Blochinger& Diggelmann)和产生氨甲蝶呤抗性的dhfr基因(Bourouis等人，1983) 以及产生草甘膦抗性的EPSPS基因(美国专利号4,940,935和 5,188,642)。

1.适合于农杆菌属转化的载体

许多载体可以应用于使用根癌土壤杆菌的转化。它们一般携带至 少一种T-DNA边缘序列且包括诸如pBIN19(Bevan，《核酸研究》(Nucl. Acids Res.)(1984))和pXYZ这样的载体。下面描述了适合于农杆 菌属转化的两种典型载体的构建。

a.pCIB200和pCIB2001：

二元载体pCIB200和pCIB2001用于构建适用于农杆菌属的重组载 体，且以下列方式构建它们。通过Narl消化pTJS75而生成pTJS75kan (Schmidhauser&Helinski，1985)，从而切下四环素抗性基因， 随后插入来自携带NPTII的pUC4K的Accl片段(Messing&Vierra， 1982；Bevan等人，1983；McBride等人，1990)。将Xhol接头与含 有左和右T-DNA边缘、植物选择性nos/nptll嵌合基因和pUC多接头 的PCIB7的EcoRV片段连接(Rothstein等人，1987)，并将Xhol- 消化的片段克隆入Sall-消化的pTJS75kan中，以便生成pCIB200(还 可参见EP 0 332 104，实施例19)。pCIB200含有下列单一多接头限 制位点：EcoRI、Sstl、Kpnl、Bglll、Xbal和Sall。pCIB2001是通 过插入其它限制位点的多接头而生成的pCIB200的衍生物。在 pCIB2001的多接头中的单一限制位点有：EcoRI、Sstl、Kpnl、Bglll、 Xbal、Sall、Mlul、Bcll、Avrll、Apal、Hpal和Stul。pCIB2001 除含有这些单一限制位点外还具有植物和细菌卡那霉素选择性、用于 农杆菌属介导的转化的左和右T-DNA边缘、用于大肠杆菌与其它宿主 之间转移的RK2-衍生的trfA功能和同样来自RK2的OriT和OriV功 能。pCIB2001多接头适合于克隆含有其自身调节信号的植物表达弹 夹。

b.pCIBi0及其潮霉素选择衍生物：

二元载体pCIB10含有编码植物中筛选用的卡那霉素抗性的基因 和T-DNA右和左边缘序列并引入来自广泛宿主范围质粒pRK252的序 列，使它在大肠杆菌和农杆菌属中复制。Rothstein等人(1987)描 述了其构建。构建了引入潮霉素B磷酸转移酶的基因(Gritz等人， 1983)的pCIB10的各种衍生物。这些衍生物能够选择仅针对潮霉素 (pCIB743)或针对潮霉素和卡那霉素(pCIB715、pCIB717)的转基因 植物细胞。

2.适合于非农杆菌属转化的载体

不使用根癌土壤杆菌的转化避开了在选择的转化载体中对T-DNA 序列的需求，结果除了诸如上述含有T-DNA序列的载体之外，还可以 使用缺乏这些序列的载体。不依赖于农杆菌属的转化技术包括通过粒 子轰击、原生质体吸收(例如PEG和电穿孔)和微注射的转化。对载 体的选择主要取决于对所转化物种的优先选择。下面描述了适合于非 农杆菌属转化的典型载体的构建。

a.pCIB3064：

pCIB3064是一种适合于与通过除草剂basta(或膦丝菌素)选择 联用的定向基因转移技术的pUC-衍生的载体。质粒pCIB246包括可操 作地与大肠杆菌GUS基因融合的CaMV 35S启动子和CaMV 35S转录终 止子，在PCT公开申请WO 93/07278中有描述。这种载体的35S启动 子含有两个起始位点的ATG序列5’。使用标准PCR技术使这些位点发 生突变，以这样一种方式以便除去ATGs并生成限制位点Sspl和 Pvull。新的限制位点是离单一Sall位点96和37bp和离实际起始位 点101和42bp。将所得的pCIB246衍生物命名为pCIB3025。然后通 过用Sall和Sacl消化从pCIB3025上切下GUS基因，使末端钝端化并 重新连接而生成质粒pCIB3060。质粒pJIT82获自John Innes Centre， Norwich，切下含有来自产绿色链霉菌的bar基因的400bp Saml片段 并将其插入pCIB3060的Hpal位点(Thompson等人，1987)。该过程 生成pCIB3064，它包括在除草剂筛选用的CaMV 35S启动子和终止子 控制下的bar基因、氨苄青霉素抗性基因(用于大肠杆菌中的筛选) 和带有单一位点Sphl、Pstl、Hindlll和BamHl的多接头。这种载体 适合于克隆含有其自身调节信号的植物表达弹夹。

b.pSOG19和pSOG35：

pSOG35是一种使用大肠杆菌基因二氢叶酸还原酶(DFR)作为产 生氨甲蝶呤抗性的选择标记的转化载体。将PCR用于扩增35S启动子 (-800bp)、来自玉米Adh1基因的内含子6(-550bp)和18bp来自 pSOG10的GUS未翻译前导序列。另外通过PCR扩增编码大肠杆菌二氢 叶酸还原酶II型基因的250-bp片段，并给这两种PCR片段装配来自 包括pUC19载体主链和胭脂氨酸合酶终止子的pB1221(Clontech)的 Sacl-Pstl片段。装配这些片段产生含有与内含子6序列融合的35S 启动子、GUS前导区、DHFR基因和胭脂氨酸合酶终止子的pSOG19。来 自玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)的前导序列对pSOG19中的GUS前导区取 代的产生了pSOG35载体。pSOG19和pSOG35携带用于氨苄青霉素抗性 的pUC基因并具有用于克隆外来物质的Hindlll、Sphl、Pstl和EcoRl 位点。

实施例12：转化

一旦将有意义的基因序列克隆入表达系统，则将它转化入植物细 胞。用于植物转化和再生的方法在本领域中是众所周知的。例如，已 经将Ti质粒载体用于转运外源DNA以及直接DNA吸收、脂质体、电穿 孔、微注射和微粒。此外，可以将来自农杆菌属的细菌用于转化植物 细胞。下面是用于转化双子叶植物和单子叶植物的有代表性技术的描 述。

1.双子叶植物的转化

用于双子叶植物的转化技术在本领域中是众所周知的且包括基于 农杆菌属的技术和不需要农杆菌属的技术。非农杆菌属技术包括由原 生质体或细胞直接摄入外源性遗传物质。该过程可以通过PEG或电穿 孔介导的吸收、粒子轰击介导的转运或微注射来完成。这些技术的实 例由Paszkowski等人，1984；Potrykus等人，1985；Reich等人， 1986和Klein等人，1987描述。在每种情况中，使用本领域中公知的 标准技术使转化的细胞再生成完整植物。

农杆菌属介导的转化是一种用于转化双子叶植物的优选技术，这 是由于其高转化效率及其在许多不同物种的广泛应用所导致的。农杆 菌属转化一般包括将携带有意义的外源DNA的二元载体(例如pCIB200 或pCIB2001)转入合适的农杆菌属菌株的步骤，这种合适的农杆菌属 菌株可以依赖于共存Ti质粒上由宿主农杆菌属菌株携带的vir基因补 体或染色体的存在方式(例如pCIB200和pCIB2001所用的菌株 CIB542)(Uknes等人，1993)。将重组二元载体转入农杆菌属的过 程通过使用携带重组二元载体的大肠杆菌进行的三亲交配步骤来完 成，所述的大肠杆菌是一种携带诸如pRK2013且能够使重组二元载体 达到靶农杆菌属菌株的质粒的辅助大肠杆菌菌株。另一方面，可以通 过DNA转化将重组二元载体转入农杆菌属(H_fgen&Willmitzer， 1988)。

通过重组农杆菌属转化靶植物物种通常包括农杆菌属与来自植物 的外植体的共培养，并按照本领域中众所周知的方案进行。在携带二 元质粒T-DNA边缘之间存在的抗生素或除草剂抗性标记的选择培养基 上使转化的组织再生。

另一种使用基因转化植物细胞的手段包括使惰性或生物活性颗粒 推进到植物组织和细胞上。这项技术公开在美国专利号4,945,050、 5,036,006和5,100,792中。一般来说，该过程包括在有效透过细胞 外表面并在其内部产生结合的条件下将惰性或生物活性颗粒推进到细 胞中。当使用惰性颗粒时，可以通过给颗粒包裹含有所需基因的载体 而将所述载体引入细胞。另一方面，靶细胞可被载体包围，使得该载 体尾随颗粒进入细胞。也可以将生物活性颗粒(例如各自含有试图引 入的DNA的干燥的酵母细胞、干燥的细菌或噬菌体)推进到植物细胞 组织中。

2.单子叶植物的转化

目前大多数单子叶植物物种的转化已经成为常规的。优选的技术 包括使用PEG或电穿孔技术将基因直接转入原生质体和粒子轰击入愈 伤组织。可以使用单DNA物种或多DNA物种进行转化(即共转化)且 这两项技术均适用于本发明。共转化可以具有避免完全载体构建和生 成带有感兴趣基因的未连锁的基因座和选择性标记的转基因植物的优 点，从而能够在随后的生产过程中除去所述的选择性标记，应将这一 过程看作是理想的。然而，使用共转化的缺点在于整合入基因组的单 一DNA种类的频率低于100％(Schocher等人，1986)。

专利申请EP 0292 435、EP 0392 225和WO 93/07278中描述了 用于来自玉米原种近交系的愈伤组织和原生质体的制备、使用PEG或 电穿孔转化原生质体和由转化的原生质体再生玉米植物的技术。 Grodon-Kamm等人(1990)和Fromm等人(1990)已经公开了使用粒 子轰击转化A188-衍生的玉米品系的技术。此外，WO 93/07278和 Koziel等人(1993)中描述了通过粒子轰击转化玉米原种近交系的技 术。这项技术使用传粉后14-15天从玉米穗上切下的1.5-2.5mm长的 未成熟胚和轰击用PDS-1000He Biolstics装置。

还可以通过使用原生质体或粒子轰击的定向基因转移技术来进行 水稻的转化。已经描述了针对日本型和印度型的原生质体介导的转化 (Zhang等人，1988；Shimamoto等人，1989；Datta等人，1990)。 两种类型也通常是使用粒子轰击转化的(Christou等，1991)。此外， WO 93/21335中描述了通过电穿孔转化水稻的技术。

专利申请EP 0 332 581中描述了Pooideae原生质体的生成、转 化和再生。这些技术用于转化鸭茅属和小麦。此外，Vasil等人(1992) 已经描述了使用粒子轰击入C型长期再生性愈伤组织的细胞进行小麦 的转化，Vasil等人(1993)和Weeks等人(1993)也描述了使用粒 子轰击未成熟胚和成熟胚衍生的愈伤组织来进行小麦的转化。然而， 优选的小麦转化技术涉及通过粒子轰击未成熟胚转化小麦并包括在基 因递送之前的高蔗糖或高麦芽糖步骤。在轰击前，将任何数量的胚 (0.75-1mm长)平板固定在含有3％蔗糖(Murashiga&Skoog，1962) 和3mg/l 2，4-D的MS培养基上以便诱导体细胞胚，使该步骤在黑暗中 进行。在选择进行轰击的当天，从诱导培养基中取出胚并置于渗压剂 (即含有一般以15％的所需浓度添加的蔗糖或麦芽糖的诱导培养基) 上。使胚进行质壁分离2-3小时，然后进行轰击。虽然并不关键，但 通常是每个靶平板上有20个胚。应用标准程序使一种合适的携带基因 的质粒(诸如pCIB3064或pSG35)沉淀在微米大小的金粒子上。用使 用～1000psi的破裂压力并使用标准80目筛的DuPont Biolistics_ 氦装置向各平板的胚发射。在轰击后，将胚放回黑暗处以便恢复约24 小时(仍然在渗压剂上)。24小时后，从渗压剂上取出胚并放回诱导 培养基上，在此它们在再生前稳定约1个月。约1个月后，将带有发 育中的胚发生愈伤组织的胚外植体转入再生培养基(MS+1mg/升 NAA、5mg/升GA)，该培养基进一步含有合适的选择剂(就pCIB3064 而言是10mg/l basta，就pSOG35而言是2mg/l氨甲蝶呤)。约1个 月后，将发育的枝条转入称作“GA7s”的含有半数浓度的MS、2％蔗 糖和相同浓度的选择剂的较大无菌容器中。

还描述了使用农杆菌属转化单子叶植物的技术方案。参见， WO94/00977和美国专利号5,591,616。

III.培育和种子生产

实施例13：培育

通过用本发明基因转化获得的植物可以是任何广泛的植物物种， 包括那些单子叶植物和双子叶植物；然而，本发明方法中所用的植物 优选自上文所述的农学上重要的靶农作物。可以通过培育将本发明基 因的表达与对生产和质量来说重要的其它特征一起引入植物品系。培 育手段和技术在本领域中是公知的。例如，参见Welsh J.R.(1981)； Wood D.R.(编辑)(1983)；Mayo O.(1987)；Singh，D.P.(1986)； 和Wricke和Weber(1986)。

通过有性繁殖或营养生长传递上述基因工程的转基因种子和植物 的遗传特性，由此可以在子代植物中维持并传播这些特性。通常所述 的维持和传播充分利用了为适合特殊目的发展的农业方法，诸如耕 种、播种或收获。还可以应用诸如水培或温室技术这样的特殊方法。 当生长的农作物易受到由昆虫或感染以及杂草植物竞争所导致的损害 和破坏时，实施某些措施以便控制杂草、植物病害、昆虫、线虫和其 它不良条件以改善产量。它们包括耕作土壤或除去杂草和感染植物这 样的机械措施以及施用诸如除草剂、杀真菌剂、杀配子剂、杀线虫剂、 生长调节剂、催熟剂和杀虫剂这样的农用化学品。

在植物培育中可以进一步应用本发明的有利遗传特性的转基因植 物和种子，其目的在于开发具有改善特性的植物，所述的改善特性诸 如害虫、除草剂或应激耐受性、改善的营养价、产量提高或使倒伏或 脱落损失减小的改进结构。不同培育步骤的特征在于充分确定的人的 干预诸如选择杂交品系、亲本品系的定向传粉或选择合适的子代植 物。根据所需特性的不同，制定不同的培育措施。相关技术在本领域 中是众所周知的，而且包括但不限于杂交、近交、回交培育、多线培 育、变种混合、种间杂交、非整倍体技术等。杂交技术还包括植物不 育化以便通过机械、化学或生化方式产生雄性或雌性不育植物。带有 不同品系花粉的雄性不育植物的交叉传粉确保了雄性不育的基因组， 而雌性不育植物均匀地获得了两亲本品系的特性。因此，可以将本发 明的转基因种子和植物用于改善的植物品系的培育，例如，这种培育 方法提高了诸如除草剂或杀虫剂(pestidice)处理这样的常规方法的 有效性，或因其改进的遗传特性而不再需要所述的方法。另一方面， 可以获得具有改善的应激特性的新型农作物，由于它们具有最佳化遗 传“设备”，从而使收获产品的质量优于不能耐受类似的不良发育条 件的产品。

实施例14：种子的生产

在种子的生产过程中，发芽的质量和种子的均匀度是主要的产品 特征，而由农场主收获和销售的发芽的质量和种子的均匀度并不重 要。当难以保持农作物不含其它农作物和杂草种子来控制种子生长病 害和生产发芽良好的种子时，在生长、调节和销售纯种子领域中富有 经验的种子生产者已经进行了相当广泛而明确的种子生产实践。因 此，对农场主而言通常的做法是购买满足特定质量标准的保质种子而 不是使用从其拥有的农作物中收获的种子。通常将用作种子的繁殖物 质用包括除草剂、杀昆虫剂、杀真菌剂、杀细菌剂、杀线虫剂、杀软 体动物剂或其混合物的保护剂包裹材料进行处理。通常使用的保护剂 包裹材料包括诸如克菌丹、萎锈灵、福美双(TMTD_)、methalaxyl (Apron_)、虫螨磷(Actellic_)这样的化合物。如果需要，可以 将这些化合物与通常在制剂领域使用的其它载体、表面活性剂或促进 施用的佐剂一起配制以便产生抵抗由细菌、真菌或动物昆虫导致的破 坏的保护作用。可以通过用液体制剂浸渗繁殖物质或通过用组合的湿 或干制剂包裹来施用所述的保护剂包裹材料。诸如定向于芽或果实的 处理这样的其它施用方法也是可行的。

本发明的再一个方面是提供诸如上述典型方法这样的新型农用方 法，其特征在于使用本发明的转基因植物、转基因植物物质或转基因 种子。

可以将种子装入由合适的包装材料构成的包、容器或管中，所述 的包、容器或管能够密封以包含种子。可以将包、容器或管设计成种 子的短期或长期包装或两者均有的包装。合适的包装材料的实例包括 诸如牛皮纸这样的纸、硬质塑料或柔顺塑料或其它聚合材料、玻璃或 金属。理想的情况是所述的包、容器或管由多层相同或不同类型的包 装材料构成。在一个优选的实施方案中，提供所述的包、容器或管以 便防止或限制水和湿气接触种子。在一个实例中，将所述的包、容器 或管密封、例如加热密封以便防止水或湿气进入。在另一个实施方案 中，将吸水物质置于包装材料层之间或接近包装材料层。在另一个实 施方案中，将包、容器或管或构成的包装材料进行处理以便限制、抑 制或防止种子储存或运输过程中的病害、污染或其它不利影响。这类 处理方法的一个实例是例如通过化学方式或通过接触射线进行不育 化。本发明包括的是一种商品包，它装有包含本发明基因的转基因植 物的种子、合适的载体及其用于使植物产生广谱病害抗性的标记说明 书，其中所述转基因植物种子中包含本发明基因，其在所述转化植物 中的表达水平高于在野生型植物中的表达水平。

IV.病害抗性评价

用本领域中公知的方法抗性病害抗性评价。参见：Uknes等人 (1993)；G_rlach等人(1996)；Alexander等人(1993)。例如， 几种有代表性的病害抗性测定如下所述。

实施例15：寄生疫霉(黑胫病)抗性测定

对如Alexander等人(1993)中所述生长的6周龄植物进行黑胫 病致病生物体寄生疫霉抗性测定。给植物浇水、排干水且然后通过给 土壤施用10ml孢子囊混悬液(300孢子囊/ml)进行接种。将接种的 植物保存在维持在日温度23-25℃和夜温度20-22℃的温室内。本试 验用枯萎指数如下：0＝无症状；1＝无症状；1＝有一定枯萎征兆、膨 胀度下降；2＝明显的枯萎症状、但无腐烂或矮化；3＝明显的枯萎症 状、伴有矮化，但无明显的茎腐烂；4＝严重枯萎、肉眼可见茎腐烂和 一定的对根系的损害；5＝如4所述，但植物接近死亡或已经死亡并伴 有根系的严重减少。在对以随机设计方式排列的植物全盲的情况下取 得全部测定得分。 实施例16：丁香假单胞菌抗性测定

给几种6-7周龄植物的两个下部的叶子注入浓度为106或3× 106/ml水溶液的丁香假单胞菌变种烟草野火病假单胞菌 (Pseuodomonas syringae pv.tabaci)菌株#551。在各个时间点评 价6株单独的植物。给烟草野火病假单胞菌感染的植物定为5点病害 严重等级：5＝100％死亡的组织；0＝无症状。对每天的评价结果进行 T-检验(LSD)并在平均病害等级值后显示分型。在评价当天后面跟着 相同字母的数值在统计学上没有显著差异。

实施例17：烟草尾孢抗性测定

将烟草尾孢(ATCC#18366)的孢子混悬液(100,000-150,000个 孢子/ml)喷洒在叶表面的紧急溢放口上。将植物维持在100％湿度下 5天。此后给植物喷水雾、每天5-10次。在各时间点处评价6株单 独的植物。给烟草尾孢定级为显示病害主要症状的叶面积百分比a％。 对每天的评价结果进行T-检验(LSD)并在平均病害等级值后显示分 型。在评价当天后面跟着相同字母的数值在统计学上没有显著差异。

实施例18：寄生霜霉抗性测定

对如Uknes等人(1993)中所述的植物进行寄生霜霉抗性测定。 通过喷洒分生孢子混悬液(大约5×104个孢子/毫升)给植物接种寄 生霜霉的相容分离物。在17℃下的生长室内的湿度下通过14小时-日 /10小时-夜循环培养接种植物。在有分生孢子梗存在的情况下接种后 的3-14天、优选7-12天时检查植物。此外，随机选择经各种处理 的几种植物并用乳酚-锥虫蓝染色(Keogh等人，1980)以便于镜检。

上述公开的实施方案是解释性的。对本领域技术人员来说本发明 的该公开内容仅是本发明许多变化形式的一部分。所有这类显而易见 和可预测的变化形式均包括在权利要求中。

序列表中序列的简要描述 SEQ ID NO：1-来自烟草的NIM1同源物的全长cDNA序列。 SEQ ID NO：2-由SEQ ID NO：1编码的烟草NIM1同源物的蛋白质序 列。 SEQ ID NO：3-来自番茄的NIM1同源物的全长cDNA序列。 SEQ ID NO：4-由SEQ ID NO：3编码的番茄NIM1同源物的蛋白质序 列。 SEQ ID NO：5-来自欧洲油菜的NIM1同源物的部分cDNA序列。 SEQ ID NO：6-由SEQ ID NO：5编码的欧洲油菜NIM1同源物的部分 蛋白质序列。 SEQ ID NO：7-来自鼠耳芥的NIM1同源物(AtNMLc5)的全长cDNA 序列。 SEQ ID NO：8-由SEQ ID NO：7编码的鼠耳芥NIM1同源物AtNMLc5 的全长蛋白质序列。 SEQID NO：9-14-实施例1-4中使用的寡核苷酸引物。 SEQ ID NO：15-来自鼠耳芥的NIM1同源物(AtNMLc2)的基因组DNA 序列。 SEQ ID NO：16-由SEQ ID NO：15编码的鼠耳芥NIM1同源物AtNMLc2 的蛋白质序列。 SEQ ID NO：17-来自鼠耳芥的NIM1同源物(AtNMLc4-1)的基因组 DNA序列。 SEQ ID NO：18-由SEQ ID NO：17编码的鼠耳芥NIM1同源物AtNMLc4-1 的蛋白质序列。 SEQID NO：19-来自鼠耳芥的NIM1同源物(AtNMLc4-2)的基因组 DNA序列。 SEQ ID NO：20-由SEQ ID NO：19编码的鼠耳芥NIM1同源物AtNMLc4-2 的蛋白质序列。 SEQ ID NO：21-PCR引物NIM 1A。 SEQ ID NO：22-PCR引物NIM 1B。 SEQ ID NO：23-PCR引物NIM 1C。 SEQ ID NO：24-PCR引物NIM 1D。 SEQ ID NO：25-PCR引物NIM 2A。 SEQ ID NO：26-PCR引物NIM 2B。 SEQ ID NO：27-PCR引物NIM 2C。 SEQ ID NO：28-PCR引物NIM 2D。 SEQ ID NO：29-由烟草(烟草A)扩增的659bp NIM-样DNA片段， 它是36个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有67％的序列同 一性。 SEQ ID NO：30-由SEQ ID NO：29编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：31-由烟草(烟草B)扩增的498bp NIM-样DNA片段， 它是2个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有62％的序列同 一性。 SEQ ID NO：32-由SEQ ID NO：31编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：33-由烟草(烟草C)扩增的498bp NIN-样DNA片段， 它是3个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有63％的序列同 一性。 SEQ ID NO：34-由SEQ ID NO：33编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：35-由烟草(烟草D)扩增的399bp NIM-样DNA片段， 它与鼠耳芥NIM1基因序列具有59％的序列同一性。 SEQ ID NO：36-由SEQ ID NO：35编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：37-由番茄(番茄A)扩增的498bp NIM-样DNA片段， 它是8个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有63％的序列同 一性。 SEQ ID NO：38-由SEQ ID NO：37编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：39-由甜菜(Beta vulgaris)扩增的498bp NIM-样DNA 片段，它是24个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有66％的 序列同一性。 SEQ ID NO：40-由SEQ ID NO：39编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：41-由向日葵(向日葵A)扩增的498bp NIM-样DNA片 段，它是9个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有61％的序 列同一性。 SEQ ID NO：42-由SEQ ID NO：41编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：43-由向日葵(向日葵B)扩增的498bp NIM-样DNA片 段，它是10个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有59％的序 列同一性。 SEQ ID NO：44-由SEQ ID NO：43编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：45-由马铃薯(马铃薯A)扩增的653bp NIM-样DNA片 段，它是15个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有68％的序 列同一性。 SEQ ID NO：46-由SEQ ID NO：45编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：47-由马铃薯(马铃薯B)扩增的498bp NIM-样DNA片 段，它是3个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有61％的序 列同一性。 SEQ ID NO：48-由SEQ ID NO：47编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：49-由马铃薯(马铃薯C)扩增的477bp NIM-样DNA片 段，它是2个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有62％的序 列同一性。 SEQ ID NO：50-由SEQ ID NO：49编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：51-由欧洲油菜(Canola A)扩增的501bp NIM-样DNA 片段，它是5个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有59％的 序列同一性。 SEQ ID NO：52-由SEQ ID NO：51编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：53-由欧洲油菜(Canola B)扩增的501bp NIM-样DNA 片段，它是5个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有58％的 序列同一性。 SEQ ID NO：54-由SEQ ID NO：53编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：55-由欧洲油菜(Canola C)扩增的498bp NIM-样DNA 片段，它与鼠耳芥NIM1基因序列具有56％的序列同一性。 SEQ ID NO：56-由SEQ ID NO：55编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：57-由欧洲油菜(Canola D)扩增的498bp NIM-样DNA 片段，它与鼠耳芥NIM1基因序列具有73％的序列同一性。 SEQ ID NO：58-由SEQ ID NO：57编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：59-PCR引物NIM 3A。 SEQ ID NO：60-PCR引物NIM 3B。 SEQ ID NO：61-由番茄(番茄B)扩增的148bp NIM-样DNA片段， 它是3个序列的共有区且与鼠耳芥NIM1基因序列具有72％的序列同 一性。 SEQ ID NO：62-由SEQ ID NO：61编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：63-来自甜菜(Beta vulgaris)的NIM1同源物的全长 cDNA序列，它与SEQ ID NO：39的PCR片段一致。 SEQ ID NO：64-由SEQ ID NO：62编码的甜菜NIM1同源物的蛋白质 序列。 SEQ ID NO：65-来自向日葵(向日葵B)的NIM1同源物的全长cDNA 序列，它与SEQ ID NO：43的PCR片段一致。 SEQ ID NO：66-由SEQ ID NO：65编码的向日葵NIM1同源物的蛋白 质序列。 SEQ ID NO：67-与鼠耳芥NIM-样基因组序列AtNMLc2(SEQ ID NO： 15)一致的cDNA序列。 SEQ ID NO：68-由SEQ ID NO：67编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：69-与鼠耳芥NIM-样基因组序列AtNMLc4-1(SEQ ID NO： 17)一致的cDNA序列。 SEQ ID NO：70-由SEQ ID NO：69编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：71-与鼠耳芥NIM-样基因组序列AtNMLc4-2(SEQ ID NO： 19)一致的cDNA序列。 SEQ ID NO：72-由SEQ ID NO：71编码的蛋白质序列。 SEQ ID NO：73-来自烟草(烟草B)的NIM1同源物的全长cDNA序列， 它与SEQ ID NO：31的PCR片段一致。 SEQ ID NO：74-由SEQ ID NO：73编码的烟草NIM1同源物的蛋白质 序列。 寄存

根据有关国际公认的用于专利程序目的的微生物寄存布达佩斯条 约，已经将下列材料寄存在Agricultural Research Service，Patent Culture Collection(NRRL)，1815 North University Street，Peoria， lllinois 61604，USA。对所寄存材料的可得到性的所有限制在专利授 权后最终将被取消。

  克隆              保藏号             寄存日

pNOV1203          NRRL B-30049      1998年8月17日 pNOV1204    NRRL B-30050    1998年8月17日 pNOV1206    NRRL B-30051    1998年8月17日 AtNMLc5     NRRL B-30139    1999年5月25日 参考文献

本文引入的参考文献表示本领域中目前的状况。将下列各文献引 入本公开说明书中作为参考。

美国专利号4,940,935

美国专利号4,945,050

美国专利号5,036,006

美国专利号5,100,792

美国专利号5,188,642

美国专利号5,523,311

美国专利号5,591,616

美国专利号5,614,395

美国专利号5,639,949

美国专利号5,792,904

EP 0 292 435

EP 0 332 104

EP 0 332 581

EP 0 342 926

EP 0 392 225

EP 0 452 269

国际PCT申请WO 93/07278

国际PCT申请WO 93/21335

国际PCT申请WO 94/00977

国际PCT申请WO 94/13822

国际PCT申请WO 94/16077

国际PCT申请WO 97/49822

国际PCT申请WO 98/06748

国际PCT申请WO 98/26082

国际PCT申请WO 98/29537

Alexander等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci. USA)90：7327-7331(1993)

Aoyama和Chua《植物杂志》(The Plant Journal)11：605- 612(1997)

Ausubel，F.M.等《分子生物学最新方案》(Current Protocols in Molecular Biology)，Greene Publishing Assoc.和Wiley- Interscience(1987)出版

Bartlett等、Edelmann等(编辑)《叶绿体分子生物学方法》 (Methods in Chloroplast Molecular Biology)，Elsevier pp：1081-1091(1982)

Bevan等《自然》(Nature)304：184-187(1983)

Bevan等《核酸研究》(Nucl.Acids Res.)(1984)

Bi等《植物杂志》(Plant J.)8：235-245(1995)

Binet等《植物科学》(Plant Science)79：87-94(1991)

Blochinger&Diggelmann《细胞分子生物学》(Mol.Cell. Biol.)4：2929-2931

Bourouis等《欧洲分子生物学杂志》(EMBO J.)2(7)：1099-1104 (1983)

Boutry等《自然》(Nature)328：340-342(1987)

Caddick等《天然生物技术》(Nat.Biotechnol.)16：177-180 (1998)

Callis等《基因开发》(Genes Develop.)1：1183-1200(1987)

Cameron等《植物杂志》(Plant J.)5：715-725(1994)

Cao等《植物细胞》(Plant Cell)6：1583-1592(1994)

Cao等《细胞》(Cell)88：57-63(1997)

Casas等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 90：11212-11216(1993)

Century等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci. USA)92：6597-6601(1995)

Chibbar等《植物细胞繁殖》(Plant Cell Rep.)12：506-509 (1993)

Chrispeels《植物生理学和植物分子生物学年鉴》(Ann.Rev. Plant Physiol.Plant Mol.Biol.)42：21-53(1991)

Christou等《植物生理学》(Plant Physiol.)87：671-674(1988)

Christou等《生物技术》(Biotechnology)9：957-962(1991)

Christensen等《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.)12： 619-632(1989)

Comai等《生物化学杂志》《J.Biol.Chem.》263：15104-15109 (1988)

Crossway等《生物技术》(BioTechniques)4：320-334(1986)

Datta等《生物技术》(Biotechnology)8：736-740(1990)

de Framond FEBS 290：103-106(1991)

Delaney等《科学》(Science)266：1247-1250(1994)

Delaney等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci. USA)92：6602-6606(1995)

Dempsey和Klessig，Bulletin de L’Institut Pasteur 93： 167-186(1995)

Dietrich等《细胞》(Cell)77：565-577(1994)

Friek等《植物分子生物学》(Pant Molec.Biol.)22：129-142 (1993)

Fromm等《生物技术》(Biotechnology)8：833-839(1990)

Gaffney等《科学》(Science)261：754-756(1993)

Gallie等《核酸研究》(Nucl.Acids Res.)15：8693-8711(1987)

Glazebrook等《遗传学》(Genetics)143：973-982(1996)

Gordon-Kamm等《植物细胞》(Plant Cell)2：603-618(1990)

Gordon-Kamm等《转基因植物》(Transgenic Plants)第2卷 pp.21-33，Academic Press(1993)出版

G_rlach等《植物细胞》(Plant Cell)8：629-643(1996)

Greenberg等《细胞》(Cell)77：551-563(1994)

Gritz等《基因》(Gene)25：179-188(1983)

Hayashimoto等《植物生理学》(Plant Physiol.)93：857-863 (1990)

Hill等Euphytica 85：119-123(1995)

Hinchee等《生物技术》(Biotechnology)6：915-921(1988)

H_fgen&Willmitzer《核酸研究》(Nucl.Acids Res.)16：9877 (1988)

Hudspeth&Grula《植物分子生物学》(Pant Molec.Biol.) 12：579-589(1989)

Hunt和Ryals《植物科学评述》(Crit.Rev.in Plant Sci.) 15：583-606(1996)

Innis等《PCR方案-方法和应用指南》(PCR Protocols，a Guide to Methods and Applications)编辑，Academic Press(1990)

Ishida等《天然生物技术》(Nature Biotechnology)14：745-750 (1996)

Jahne等《应用遗传学原理》(Theor.Appl.Genet.)89：525-533 (1994)

Keegan等《科学》(Science)231：699-704(1986)

Keogh等《英国真菌学协会会报》(Trans.Br.Mycol.Soc.) 74：329-333(1980)

Klein等《自然》(Nature)327：70-73(1987)

Klein等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 85：4305-4309(1988)

Klein等《生物/技术》(Bio/Technology)6：559-563(1988)

Klein等《植物生理学》(Plant Physiol.)91：440-444(1988)

Koziel等《生物技术》(Biotechnology)11：194-200(1993)

Koziel等《纽约科学院年鉴》(Annals of the New York Academy of Science)792：164-171(1996)

Lawton等“系统获得性抗性的分子生物学”(The molecular biology of systemic aquired resistance)-《植物中的防御反应 机理》(Mechanisms of Defence Responses in Plants)B.Fritig 和M.Legrand编辑(Dordrecht，The Netherlands：Kluwer Academic Publishers)pp.422-432(1993)

Lawton等《植物杂志》(Plant J.)10：71-82(1996)

Logemann等《植物细胞》(Plant Cell)1：151-158(1989)

Maher等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 91：7802-7806(1994)

Mauch-Mani和Slusarenko《分子植物-微生物相互作用》(Mol. Plant-Microbe Interact.)7：378-383(1994)

Mauch-Mani和Slusarenko《植物细胞》(Plant Cell)8：203-212 (1996)

Mayo O.《植物育种原理》(The Theory of Plant Breeding) 第2版，Clarendon Press，Oxford(1987)

Mazur等《植物生理学》(Plant Physiol.)85：1110(1987)

McBride等《植物分子生物学》(Plant Molecular Biology)14： 266-276(1990)

McCabe等《生物技术》(Biotechnology)6：923-926(1988)

McElroy等《植物细胞》(Plant Cell)2：163-171(1990)

McElroy等《分子基因遗传学》(Mol.Gen.Genet.)231：150-160 (1991)

Messing&Vierra《基因》(Gene)19：259-268(1982)

Murashiga&Skoog《植物生理学》(Physiollogia Plantarum) 15：473-497(1962)

Nehra等《植物杂志》(The Plant Journal)5：285-297(1994)

Neuhaus等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci. USA)88：10362-10366(1991)

Norris等《植物分子生物学》(Plant Mol.Biol.)21：895-906 (1993)

Pallas等《植物杂志》(Plant J.)10：281-293(1996)

Parker等《植物细胞》(Plant Cell)8：2033-2046(1996)

Paszkowski等《欧洲分子生物学杂志》(EMBO J.)3：2717-2722 (1984)

Payne等《植物分子生物学》(Plant Mol.Biol.)11：89-94 (1988)

Picard等《细胞》(Cell)54：1073-1080(1988)

Potrykus等《分子基因遗传学》(Mol.Gen.Genet.)199：169-177 (1985)

Reich等《生物技术》(Biotechnology)4：1001-1004(1986)

Riggs等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 83：5602-5606(1986)

Rogers等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 82：6512-6516(1985)

Rohrmeier&Lehle《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.) 22：783-792(1993)

Rothstein等《基因》(Gene)53：153-161(1987)

Ryals等《植物细胞》(Plant Cell)8：1809-1819(1996)

Ryals等《植物细胞》(Plant Cell)9：425-439(1997)

Sambrook等《分子克隆》(Molecular Cloning)，编辑，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1987)

Sanford等《微粒科学与技术》(Particulate Science and Technology)5：27-37(1987)

Schmidhauser&Helinski《细菌学杂志》(J.Bacteriol.)164： 446-455(1985)

Schocher等《生物技术》(Biotechnology)4：1093-1096(1986)

Shimamoto等《自然》(Nature)338：274-277(1989)

Shinshi等《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.)14：357-368 (1990)

Shulaev等《植物细胞》(Plant Cell)7：1691-1701(1995)

Silhavy等《使用基因融合体的实验》(Experiments with Gene Fusions)，编辑，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1984)

Singh，D.P.《病害与昆虫害虫抗性的培育》(Breeding for Resistance to Diseases and Insect Pests)，Springer-Verlag，NY (1986)

Skuzeski等《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.)15：65-79 (1990)

Somers等《生物/技术》(Bio/Technology)10：1589-1594(1992)

Spencer等《应用遗传学原理》(Theor.Appl.Genet.)79：625-631 (1990)

Stanford等《分子基因遗传学》(Mol.Gen.Genet.)215：200-208 (1989)

Svab等《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA) 87：8526-8530(1990)

Taylor等《植物细胞繁殖》(Plant Cell Rep.)12：491-495 (1993)

Thompson等《欧洲分子生物学杂志》(EMBO J.)6：2519-2523 (1987)

Torbert等《基因开发》(Genes Develop.)2：718-729(1988)

Triezenberg等《植物细胞》(Plant Cell)4：645-656(1992)

Uknes等《植物细胞》(Plant Cell)5：159-169(1993)

Uknes等《分子植物微生物相互作用》(Molecular Plant Microbe Interactions)6：680-685(1993)

Uknes等《分子植物-微生物相互作用》(Mol.Plant-Microbe Interact.)6：692-698(1993)

Umbeck等《生物/技术》(Bio/Technology)5：263-266(1987)

Unger等《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.)13：411- 418(1989)

van den Broeck等《自然》(Nature)313：358-363(1985)

Vasil等《生物技术》(Biotechnology)10：667-674(1992)

Vasil等《生物技术》(Biotechnology)11：1553-1558(1993)

Vernooij等《植物细胞》(Plant Cell)6：959-965(1994)

Vernooij等《分子植物-微生物相互作用》(Mol.Plant-Microbe Interact.)8：228-234(1995)

Von Heijne等《植物分子生物学报告》(Plant Mol.Biol.Rep.) 9：104-126(1991)

Vorst等《基因》(Gene)65：59(1988)

Wan等《植物生理学》(Plant Physiol.)104：37-48(1994)

Ward等《植物细胞》(Plant Cell)3：1085-1094(1991)

Warner等《植物杂志》(Plant J.)3：191-201(1993)

Wasmann等《分子基因遗传学》(Mol.Gen.Genet.)205：446-453 (1986)

Weeks等《植物生理学》(Plant Physiol.)102：1077-1084(1993)

Weissinger等《遗传学年鉴》(Annual Rev.Genet.)22：421-477 (1988)

Welsh J.R.《植物遗传学和育种基础》(Fundamentals of Plant Gnentics and Breeding)，John Wiley&Sons，NY(1981)

Weymann等《植物细胞》(Plant Cell)7：2013-2022(1995)

White《核酸研究》(Nucl.Acids Res.)18：1062(1990)

Wood D.R.(编辑)《农作物育种》(Crop Breeding)，American Society of Agronomy Madison，Wisconsin(1983)

Wricek和Weber《定量遗传学和选择植物育种》(Quantitative Genetics and Selection Plant Breeding)，Walter de Gruyter和 Co.Berlin(1986)

Xu等《植物分子生物学》(Plant Molec.Biol.)22：573-588(1993)

Zhang等《植物细胞繁殖》(Plant Cell Rep.)7：379-384(1998)

序列表 <110>Novartis AG <120>新型植物基因及其用途 <130>S-30857A/RTP2095 <140> <141> <160>74 <170>PatentIn 2.1版 <210>1 <211>1767 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(1)..(1764) <223>全长烟草cDNA序列 <400>1 atg gat aat agt agg act gcg ttt tct gat tcg aat gac atc agc gga    48 Met Asp Asn Ser Arg Thr Ala Phe Ser Asp Ser Asn Asp Ile Ser Gly   1               5                  10                  15 agc agt agt ata tgc tgc atc ggc ggc ggc atg act gaa ttt ttc tcg    96 Ser Ser Ser Ile Cys Cys Ile Gly Gly Gly Met Thr Glu Phe Phe Ser

         20                  25                  30 ccg gag act tcg ccg gcg gag atc act tca ctg aaa cgc cta tcg gaa    144 Pro Glu Thr Ser Pro Ala Glu Ile Thr Ser Leu Lys Arg Leu Ser Glu

     35                  40                  45 aca ctg gaa tct atc ttc gat gcg tct ttg ccg gag ttt gac tac ttc    192 Thr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ala Ser Leu Pro Glu Phe Asp Tyr Phe

 50                  55                  60 gcc gac gct aag ctt gtg gtt tcc ggc ccg tgt aag gaa att ccg gtg    240 Ala Asp Ala Lys Leu Val Val Ser Gly Pro Cys Lys Glu Ile Pro Val  65                  70                  75                  80 cac cgg tgc att ttg tcg gcg agg agt ccg ttc ttt aag aat ttg ttc    288 His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser Pro Phe Phe Lys Asn Leu Phe

             85                  90                  95 tgc ggt aaa aag gag aag aat agt agt aag gtg gaa ttg aag gag gtg    336 Cys Gly Lys Lys Glu Lys Asn Ser Ser Lys Val Glu Leu Lys Glu Val

        100                 105                 110 atg aaa gag cat gag gtg agc tat gat gct gta atg agt gta ttg gct    384 Met Lys Glu His Glu Val Ser Tyr Asp Ala Val Met Ser Val Leu Ala

    115                 120                 125 tat ttg tat agt ggt aaa gtt agg cct tca cct aaa gat gtg tgt gtt    432 Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Pro Ser Pro Lys Asp Val Cys Val

130                 135                 140 tgt gtg gac aat gac tgc tct cat gtg gct tgt agg cca gct gtg gca   480 Cys Val Asp Asn Asp Cys Ser His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Ala 145                 150                 155                 160 ttc ctg gtt gaggtt ttg tac aca tca ttt acc ttt cag atc tct gaa    528 Phe Leu Val Glu Val Leu Tyr Thr Ser Phe Thr Phe Gln Ile Ser Glu

            165                 170                 175 ttg gtt gac aag ttt cag aga cac cta ctg gat att ctt gac aaa act   576 Leu Val Asp Lys Phe Gln Arg His Leu Leu Asp Ile Leu Asp Lys Thr

        180                 185                 190 gca gca gac gat gta atg atg gtt tta tct gtt gca aac att tgt ggt   624 Ala Ala Asp Asp Val Met Met Val Leu Ser Val Ala Asn Ile Cys Gly

    195                 200                 205 aaa gca tgc gag aga ttg ctt tca agc tgc att gag att att gtc aag   672 Lys Ala Cys Glu Arg Leu Leu Ser Ser Cys Ile Glu Ile Ile Val Lys

210                 215                 220 tct aat gtt gat atc ata acc ctt gat aaa gcc ttg cct cat gac att   720 Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ala Leu Pro His Asp Ile 225                 230                 235                 240 gta aaa caa att act gat tca cga gcg gaa ctt ggt cta caa ggg cct   768 Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu Gly Leu Gln Gly Pro

            245                 250                 255 gaa agc aac ggt ttt cct gat aaa cat gtt aag agg ata cat agg gca   816 Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys Arg Ile His Arg Ala

        260                 265                 270 ttg gat tct gat gat gtt gaa tta cta caa atg ttg cta aga gag ggg   864 Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Gln Met Leu Leu Arg Glu Gly

    275                 280                 285 cat act acc cta gat gat gca tat gct ctc cat tat gct gta gcg tat   912 His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala Tyr

290                 295                 300 tgc gat gca aag act aca gca gaa ctt cta gat ctt gca ctt gct gat   960 Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Ala Asp 305                 310                 315                 320 att aat cat caa aat tca agg gga tac acg gtg ctg cat gtt gca gcc   1008 Ile Asn His Gln Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala

            325                 330                 335 atg agg aaa gag cct aaa att gta gtg tcc ctt tta acc aaa gga gct   1056 Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Val Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly Ala

        340                 345                 350 aga cct tct gat ctg aca tcc gat gga aga aaa gca ctt caa atc gcc   1104 Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Arg Lys Ala Leu Gln Ile Ala

    355                 360                 365 aag agg ctc act agg ctt gtg gat ttc agt aag tct ccg gag gaa gga   1152 Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Ser Lys Ser Pro Glu Glu Gly

370                 375                 380 aaa tct gct tcg aat gat cgg tta tgc att gag att ctg gag caa gca    1200 Lys Ser Ala Ser Asn Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln Ala 385                 390                 395                 400 gaa aga aga gac cct ctg cta gga gaa gct tct gta tct ctt gct atg    1248 Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Val Ser Leu Ala Met

            405                 410                 415 gca ggc gat gat ttg cgt atg aag ctg tta tac ctt gaa aat aga gtt    1296 Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val

        420                 425                 430 ggc ctg gct aaa ctc ctt ttt cca atg gaa gct aaa gtt gca atg gac    1344 Gly Leu Ala Lys Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala Lys Val Ala Met Asp

    435                 440                 445 att gct caa gtt gat ggc act tct gag ttc cca ctg gct agc atc ggc    1392 Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Phe Pro Leu Ala Ser Ile Gly

450                 455                 460 aaa aag atg gct aat gca cag agg aca aca gta gat ttg aac gag gct    1440 Lys Lys Met Ala Asn Ala Gln Arg Thr Thr Val Asp Leu Asn Glu Ala 465                 470                 475                 480 cct ttc aag ata aaa gag gag cac ttg aat cgg ctt aga gca ctc tct    1488 Pro Phe Lys Ile Lys Glu Glu His Leu Asn Arg Leu Arg Ala Leu Ser

            485                 490                 495 aga act gta gaa ctt gga aaa cgc ttc ttt cca cgt tgt tca gaa gtt    1536 Arg Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Glu Val

        500                 505                 510 cta aat aag atc atg gat gct gat gac ttg tct gag ata gct tac atg    1584 Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Asp Asp Leu Ser Glu Ile Ala Tyr Met

    515                 520                 525 ggg aat gat acg gca gaa gag cgt caa ctg aag aag caa agg tac atg    1632 Gly Asn Asp Thr Ala Glu Glu Arg Gln Leu Lys Lys Gln Arg Tyr Met

530                 535                 540 gaa ctt caa gaa att ctg act aaa gca ttc act gag gat aaa gaa gaa    1680 Glu Leu Gln Glu Ile Leu Thr Lys Ala Phe Thr Glu Asp Lys Glu Glu 545                 550                 555                 560 tat gat aag act aac aac atc tcc tca tct tgt tcc tct aca tct aag    1728 Tyr Asp Lys Thr Asn Asn Ile Ser Ser Ser Cys Ser Ser Thr Ser Lys

            565                 570                 575 gga gta gat aag ccc aat aag ctc cct ttt agg aaa tag                1767 Gly Val Asp Lys Pro Asn Lys Leu Pro Phe Arg Lys

        580                 585 <210>2 <211>588 <212>PRT <213>烟草 <400>2 Met Asp Asn Ser Arg Thr Ala Phe Ser Asp Ser Asn Asp Ile Ser Gly   1               5                      10              15 Ser Ser Ser Ile Cys Cys Ile Gly Gly Gly Met Thr Glu Phe Phe Ser

         20                  25                  30 Pro Glu Thr Ser Pro Ala Glu Ile Thr Ser Leu Lys Arg Leu Ser Glu

     35                  40                  45 Thr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ala Ser Leu Pro Glu Phe Asp Tyr Phe

 50                  55                  60 Ala Asp Ala Lys Leu Val Val Ser Gly Pro Cys Lys Glu Ile Pro Val  65                  70                  75                  80 His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser Pro Phe Phe Lys Asn Leu Phe

             85                  90                  95 Cys Gly Lys Lys Glu Lys Asn Ser Ser Lys Val Glu Leu Lys Glu Val

        100                 105                 110 Met Lys Glu His Glu Val Ser Tyr Asp Ala Val Met Ser Val Leu Ala

    115                 120                 125  Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Pro Ser Pro Lys Asp Val Cys Val

130                 135                 140 Cys Val Asp Asn Asp Cys Ser His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Ala 145                 150                 155                 160 Phe Leu Val Glu Val Leu Tyr Thr Ser Phe Thr Phe Gln Ile Ser Glu

            165                 170                 175 Leu Val Asp Lys Phe Gln Arg His Leu Leu Asp Ile Leu Asp Lys Thr

        180                 185                 190 Ala Ala Asp Asp Val Met Met Val Leu Ser Val Ala Asn Ile Cys Gly

    195                 200                 205 Lys Ala Cys Glu Arg Leu Leu Ser Ser Cys Ile Glu Ile Ile Val Lys

210                 215                 220 Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ala Leu Pro His Asp Ile 225                 230                 235                 240 Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu Gly Leu Gln Gly Pro

            245                 250                 255 Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys Arg Ile His Arg Ala

        260                 265                 270 Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Gln Met Leu Leu Arg Glu Gly

    275                 280                 285 His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala Tyr

290                 295                 300 Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Ala Asp 305                 310                 315                 320 Ile Asn His Gln Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala

            325                 330                 335 Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Val Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly Ala

        340                 345                 350 Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Arg Lys Ala Leu Gln Ile Ala

    355                 360                 365 Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Ser Lys Ser Pro Glu Glu Gly

370                 375                 380 Lys Ser Ala Ser Asn Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln Ala 385                 390                 395                 400 Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Val Ser Leu Ala Met

            405                 410                 415 Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val

        420                 425                 430 Gly Leu Ala Lys Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala Lys Val Ala Met Asp

    435                 440                 445 Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Phe Pro Leu Ala Ser Ile Gly

450                 455                 460 Lys Lys Met Ala Asn Ala Gln Arg Thr Thr Val Asp Leu Asn Glu Ala 465                 470                 475                 480 Pro Phe Lys Ile Lys Glu Glu His Leu Asn Arg Leu Arg Ala Leu Ser

            485                 490                 495 Arg Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Glu Val

        500                 505                 510 Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Asp Asp Leu Ser Glu Ile Ala Tyr Met

    515                 520                 525 Gly Asn Asp Thr Ala Glu Glu Arg Gln Leu Lys Lys Gln Arg Tyr Met

530                 535                 540 Glu Leu Gln Glu Ile Leu Thr Lys Ala Phe Thr Glu Asp Lys Glu Glu 545                 550                 555                 560 Tyr Asp Lys Thr Asn Asn Ile Ser Ser Ser Cys Ser Ser Thr Ser Lys

            565                 570                 575 Gly Val Asp Lys Pro Asn Lys Leu Pro Phe Arg Lys

        580                 585 <210>3 <211>1731 <212>DNA <213>番茄 <220> <221>CDS <222>(1)..(1728) <223>全长番茄cDNA序列 <400>3 atg gat agt aga act gct ttt tcg gat tcc aat gat att agt gga agc    48 Met Asp Ser Arg Thr Ala Phe Ser Asp Ser Asn Asp Ile Ser Gly Ser   1               5                  10                  15 agt agt ata tgc tgc atg aac gaa tcg gaa act tca ctg gca gac gtc    96 Ser Ser Ile Cys Cys Met Asn Glu Ser Glu Thr Ser Leu Ala Asp Val

         20                  25                  30 aat tcc ctc aaa cgt cta tca gaa aca cta gag tct atc ttc gat gcg    144 Asn Ser Leu Lys Arg Leu Ser Glu Thr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ala

     35                  40                  45 tct gcg ccg gat ttc gac ttc ttc gct gat gct aag ctt ctg gct cca    192 Ser Ala Pro Asp Phe Asp Phe Phe Ala Asp Ala Lys Leu Leu Ala Pro

 50                  55                  60 ggc ggt aag gaa att ccg gtg cat cgg tgc att ttg tcg gcg agg agt    240 Gly Gly Lys Glu Ile Pro Val His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser  65                  70                  75                  80 cct ttt ttt aag aat gta ttc tgt ggg aaa gat agc agc acg aag ctg    288 Pro Phe Phe Lys Asn Val Phe Cys Gly Lys Asp Ser Ser Thr Lys Leu

             85                  90                  95 gaa ctc aaa gag ctg atg aaa gag tat gag gtg agt ttt gat gcc gtg    336 Glu Leu Lys Glu Leu Met Lys Glu Tyr Glu Val Ser Phe Asp Ala Val

        100                 105                 110 gtc agt gtg ctc gcc tat ttg tat agt gga aaa gtt agg cct gca tct    384 Val Ser Val Leu Ala Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Pro Ala Ser

    115                 120                 125 aaa gat gtg tgt gtt tgt gtg gac aat gag tgc ttg cat gta gct tgt    432 Lys Asp Val Cys Val Cys Val Asp Asn Glu Cys Leu His Val Ala Cys

130                 135                 140 agg cca gct gtg gcc ttc atg gtt cag gtt ttg tac gca tcc ttt acc    480 Arg Pro Ala Val Ala Phe Met Val Gln Val Leu Tyr Ala Ser Phe Thr 145                 150                 155                 160 ttt cag atc tct caa ttg gtc gac aag ttt cag aga cac cta ttg gat    528 Phe Gln Ile Ser Gln Leu Val Asp Lys Phe Gln Arg His Leu Leu Asp

            165                 170                 175 att ctt gac aaa gct gta gca gat gat gta atg atg gtt tta tcc gtt    576 Ile Leu Asp Lys Ala Val Ala Asp Asp Val Met Met Val Leu Ser Val

        180                 185                 190 gca aac att tgc ggt aaa gca tgt gaa aga tta ctt tca aga tgc att    624 Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala Cys Glu Arg Leu Leu Ser Arg Cys Ile

    195                 200                 205 gat att att gtc aag tct aat gtt gat atc ata acc ctt gat aag tcc    672 Asp Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ser

210                 215                 220 ttg cct cat gac att gta aaa caa atc act gat tca cgt gct gaa ctt    720 Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu 225                 230                 235                 240 ggt ctg caa ggg cct gaa agc aat ggt ttt cct gat aaa cat gtt aag    768 Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys

            245                 250                 255 agg ata cat aga gca ttg gac tct gat gat gtt gaa tta cta agg atg    816 Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met

        260                 265                 270 ttg ctt aaa gag ggg cat act act ctt gat gat gca tat gct ctc cac    864 Leu Leu Lys Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His

    275                 280                 285 tat gct gta gca tat tgc gat gca aag act aca gca gaa ctt tta gat    912 Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp

290                 295                 300 ctt tca ctt gct gat gtt aat cat caa aat cct aga gga cac acg gta    960 Leu Ser Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly His Thr Val 305                 310                 315                 320 ctt cat gtt gct gcc atg agg aaa gaa cct aaa att ata gtg tcc ctt    1008 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu

            325                 330                 335 tta acc aaa gga gct aga cct tct gat ctg aca tcc gat ggc aaa aaa    1056 Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys

        340                 345                 350 gca ctt caa att gct aag agg ctc act agg ctt gta gat ttt acc aag    1104 Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys

    355                 360                 365 tct aca gag gaa gga aaa tct gct cca aag gat cgg tta tgc att gag    1152 Ser Thr Glu Glu Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu

370                 375                 380 att ctg gag caa gca gaa aga aga gat cca cta cta gga gaa gct tca    1200 Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser 385                 390                 395                 400 tta tct ctt gct atg gca ggc gat gat ttg cgt atg aag ctg tta tac    1248 Leu Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr

            405                 410                 415 ctt gaa aat aga gtt ggt ctg gct aaa ctc ctt ttt ccc atg gaa gca    1296 Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Lys Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala

        420                 425                 430 aaa gtt gca atg gac att gca caa gtt gat ggc acg tct gaa tta ccc    1344 Lys Val Ala Met Asp Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Leu Pro

    435                 440                 445 ctg gct agc atg agg aag aag ata gct gat gca cag agg aca aca gtg    1392 Leu Ala Ser Met Arg Lys Lys Ile Ala Asp Ala Gln Arg Thr Thr Val

450                 455                 460 gat ttg aac gag gct cct ttc aag atg aaa gag gag cac ttg aat cgg    1440 Asp Leu Asn Glu Ala Pro Phe Lys Met Lys Glu Glu His Leu Asn Arg 465                 470                 475                 480 ctt agg gct ctc tct aga act gtg gaa ctt gga aaa cgg ttc ttt cca    1488 Leu Arg Ala Leu Ser Arg Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro

            485                 490                 495 cgt tgt tca gaa gtt cta aat aag atc atg gat gct gat gac ttg tct    1536 Arg Cys Ser Glu Val Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Asp Asp Leu Ser

        500                 505                 510 gag ata gct tac atg ggg aat gat aca gta gaa gag cgt caa ctg aag    1584 Glu Ile Ala Tyr Met Gly Asn Asp Thr Val Glu Glu Arg Gln Leu Lys

    515                 520                 525 aag caa agg tac atg gaa ctt caa gaa att ttg tct aaa gca ttc acg    1632 Lys Gln Arg Tyr Met Glu Leu Gln Glu Ile Leu Ser Lys Ala Phe Thr

530                 535                 540 gag gat aaa gaa gaa ttt gct aag act aac atg tcc tca tct tgt tcc    1680 Glu Asp Lys Glu Glu Phe Ala Lys Thr Asn Met Ser Ser Ser Cys Ser 545                 550                 555                 560 tct aca tct aag gga gta gat aag ccc aat aat ctc cca ttt agg aaa    1728 Ser Thr Ser Lys Gly Val Asp Lys Pro Asn Asn Leu Pro Phe Arg Lys

            565                 570                 575 tag                                                                1731 <210>4 <211>576 <212>PRT <213>番茄 <400>4 Met Asp Ser Arg Thr Ala Phe Ser Asp Ser Asn Asp Ile Ser Gly Ser   1               5                  10                  15 Ser Ser Ile Cys Cys Met Asn Glu Ser Glu Thr Ser Leu Ala Asp Val

         20                  25                  30 Asn Ser Leu Lys Arg Leu Ser Glu Thr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ala

     35                  40                  45 Ser Ala Pro Asp Phe Asp Phe Phe Ala Asp Ala Lys Leu Leu Ala Pro

 50                  55                  60 Gly Gly Lys Glu Ile Pro Val His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser  65                  70                  75                  80 Pro Phe Phe Lys Asn Val Phe Cys Gly Lys Asp Ser Ser Thr Lys Leu

             85                  90                  95 Glu Leu Lys Glu Leu Met Lys Glu Tyr Glu Val Ser Phe Asp Ala Val

        100                 105                 110 Val Ser Val Leu Ala Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Pro Ala Ser

    115                 120                 125 Lys Asp Val Cys Val Cys Val Asp Asn Glu Cys Leu His Val Ala Cys

130                 135                 140 Arg Pro Ala Val Ala Phe Met Val Gln Val Leu Tyr Ala Ser Phe Thr 145                 150                 155                 160 Phe Gln Ile Ser Gln Leu Val Asp Lys Phe Gln Arg His Leu Leu Asp

            165                 170                 175 Ile Leu Asp Lys Ala Val Ala Asp Asp Val Met Met Val Leu Ser Val

        180                 185                 190 Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala Cys Glu Arg Leu Leu Ser Arg Cys Ile

    195                 200                 205 Asp Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ser

210                 215                 220 Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu 225                 230                 235                 240 Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys

            245                 250                 255 Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met

        260                 265                 270 Leu Leu Lys Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His

    275                 280                 285 Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp

290                 295                 300 Leu Ser Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly His Thr Val 305                 310                 315                 320 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu

            325                 330                 335 Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys

        340                 345                 350 Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys

    355                 360                 365 Ser Thr Glu Glu Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu

370                 375                 380 Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser 385                 390                 395                 400 Leu Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr

            405                 410                 415 Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Lys Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala

        420                 425                 430 Lys Val Ala Met Asp Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Leu Pro

    435                 440                 445 Leu Ala Ser Met Arg Lys Lys Ile Ala Asp Ala Gln Arg Thr Thr Val

450                 455                 460 Asp Leu Asn Glu Ala Pro Phe Lys Met Lys Glu Glu His Leu Asn Arg 465                 470                 475                 480 Leu Arg Ala Leu Ser Arg Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro

            485                 490                 495 Arg Cys Ser Glu Val Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Asp Asp Leu Ser

        500                 505                 510 Glu Ile Ala Tyr Met Gly Asn Asp Thr Val Glu Glu Arg Gln Leu Lys

    515                 520                 525 Lys Gln Arg Tyr Met Glu Leu Gln Glu Ile Leu Ser Lys Ala Phe Thr

530                 535                 540 Glu Asp Lys Glu Glu Phe Ala Lys Thr Asn Met Ser Ser Ser Cys Ser 545                 550                 555                 560 Ser Thr Ser Lys Gly Val Asp Lys Pro Asn Asn Leu Pro Phe Arg Lys

            565                 570                 575 <210>5 <211>1740 <212>DNA <213>欧洲油菜 <220> <221>CDS <222>(1)..(1737) <223>Canola cDNA序列 <400>5 atg gag acc att gct rga ttt gat gat ttc tat gag atc agc agc act    48 Met Glu Thr Ile Ala Xaa Phe Asp Asp Phe Tyr Glu Ile Ser Ser Thr   1               5                  10                  15 agc ttc cyc gcc gca ccg gcg cca acc gat aac tcc gga tca tcc acc    96 Ser Phe Xaa Ala Ala Pro Ala Pro Thr Asp Asn Ser Gly Ser Ser Thr

         20                  25                  30 gtc twc ccg acg gag ctt ytc acc aga ccc gag gta tcc gcg ttt caa   144 Val Xaa Pro Thr Glu Leu Xaa Thr Arg Pro Glu Val Ser Ala Phe Gln

     35                  40                  45 ctc ctc tcc aac agc ctc gag tcc gtc ttc gac tcg ccg gaa gcg ttc   192 Leu Leu Ser Asn Ser Leu Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Glu Ala Phe

 50                  55                  60 tac agc gac gcc aag ctt gtt ctc tcc gac gac aag gaa gta tcc ttc   240 Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp Asp Lys Glu Val Ser Phe  65                  70                  75                  80 cac cgt tgc att ctc tcg gcg aga agc ctc ttc ttc aag gcc gct ttg   288 His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser Leu Phe Phe Lys Ala Ala Leu

             85                  90                  95 rca gcc gcc gag aag gtg cag aag tcc acc ccc gtg aag ctc gag ctg   336 Xaa Ala Ala Glu Lys Val Gln Lys Ser Thr Pro Val Lys Leu Glu Leu

        100                 105                 110 aag aca ctc gcg gcg gaa tac gac gtc ggg ttc gat tct gtg gtg gct   384 Lys Thr Leu Ala Ala Glu Tyr Asp Val Gly Phe Asp Ser Val Val Ala

    115                 120                 125 gtt ctg gcg tac gtt tac agc ggc aga gtg agg ccg cct ccg aag gga    432 Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly

130                 135                 140 gtt tct gaa tgc gca gac gak agc tgc tgc cac gtg gcg tgc cgt ccg    480 Val Ser Glu Cys Ala Asp Xaa Ser Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro 145                 150                 155                 160 gct gtg gat ttc atg gtg gag gtt ctc tac ttg gct ttc gtc ttc cag    528 Ala Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Val Phe Gln

            165                 170                 175 att cag gaa ctg gtt acc atg tat cag agg cat tta ctg gat gtt gta    576 Ile Gln Glu Leu Val Thr Met Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val

        180                 185                 190 gac aaa gtt awc ata gaa gac act ttg gtc gtc ctc aag ctt gct aac    624 Asp Lys Val Xaa Ile Glu Asp Thr Leu Val Val Leu Lys Leu Ala Asn

    195                 200                 205 atc tgc ggt aaa gcg tgc aag aag cta ttc gat aag tgc aga gag atc    672 Ile Cys Gly Lys Ala Cys Lys Lys Leu Phe Asp Lys Cys Arg Glu Ile

210                 215                 220 att gtc aag tct aac gtg gat gtt gtt act cta aag aag tca ttg cct    720 Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Val Val Thr Leu Lys Lys Ser Leu Pro 225                 230                 235                 240 gag rac att gcc aag caa gta atc gat atc cgc aaa gag ctc ggc ttg    768 Glu Xaa Ile Ala Lys Gln Val Ile Asp Ile Arg Lys Glu Leu Gly Leu

            245                 250                 255 gag gta gct gaa cca gag aaa cat gtc tcc aac ata cac aag gcg ctt    816 Glu Val Ala Glu Pro Glu Lys His Val Ser Asn Ile His Lys Ala Leu

        260                 265                 270 gag tca gac gat ctt gac ctt gtc gtt atg ctt ttg aaa gag ggc cac    864 Glu Ser Asp Asp Leu Asp Leu Val Val Met Leu Leu Lys Glu Gly His

    275                 280                 285 acg aat cta gac gaa gcg tat gct ctc cat ttt gct gtt gcg tat tgc    912 Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys

290                 295                 300 gat gag aag aca gcg agg aat ctc ctg gaa ctg ggg ttt gcg gat gtc     960 Asp Glu Lys Thr Ala Arg Asn Leu Leu Glu Leu Gly Phe Ala Asp Val 305                 310                 315                 320 aac cgg aga aac ccg aga ggg tac acg gta att cac gtc gct gcg atg    1008 Asn Arg Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Ile His Val Ala Ala Met

            325                 330                 335 agg aaa gag ccg aca ctg ata gca ttg ttg ttg acg aaa ggg gct aat    1056 Arg Lys Glu Pro Thr Leu Ile Ala Leu Leu Leu Thr Lys Gly Ala Asn

        340                 345                 350 gca tta gaa atg tct ttg gac ggg aga act gct ctg ttg atc gcg aaa    1104 Ala Leu Glu Met Ser Leu Asp Gly Arg Thr Ala Leu Leu Ile Ala Lys

    355                 360                 365 caa gtc act aag gcg gcc gag tgt tgt att ctg gag aaa ggg aag tta   1152 Gln Val Thr Lys Ala Ala Glu Cys Cys Ile Leu Glu Lys Gly Lys Leu

370                 375                 380 gct gcc aaa ggc gga gta tgt gta gag ata ctc aag caa cca gac aac   1200 Ala Ala Lys Gly Gly Val Cys Val Glu Ile Leu Lys Gln Pro Asp Asn 385                 390                 395                 400 aca cga gaa cca ttt cct gaa gat gtt tct ccc tcc ctt gca gtg gct   1248 Thr Arg Glu Pro Phe Pro Glu Asp Val Ser Pro Ser Leu Ala Val Ala

            405                 410                 415 gct gat caa ttc aag ata agg ttg att gat ctt gaa aac aga gtt caa   1296 Ala Asp Gln Phe Lys Ile Arg Leu Ile Asp Leu Glu Asn Arg Val Gln

        420                 425                 430 atg gct cga tgt ctc tat cca atg gaa gca caa gtt gca atg gat ttc   1344 Met Ala Arg Cys Leu Tyr Pro Met Glu Ala Gln Val Ala Met Asp Phe

    435                 440                 445 gcc cga atg aag gga aca cgc gag ttt gtc gtg acg aca gca act gac   1392 Ala Arg Met Lys Gly Thr Arg Glu Phe Val Val Thr Thr Ala Thr Asp

450                 455                 460 cta cac atg gaa cct ttc aag ttc gta gaa atg cat cag agt aga cta   1440 Leu His Met Glu Pro Phe Lys Phe Val Glu Met His Gln Ser Arg Leu 465                 470                 475                 480 aca gcg ctt tct aaa act gtg gaa ttc ggg aaa cgc ttc ttc cca cgc   1488 Thr Ala Leu Ser Lys Thr Val Glu Phe Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg

            485                 490                 495 tgt tcg aaa gtg ctc gat gat att gtg gac tct gag gac ttg act ata   1536 Cys Ser Lys Val Leu Asp Asp Ile Val Asp Ser Glu Asp Leu Thr Ile

        500                 505                 510 ctg gct ctc gta gaa gaa gac act cct gag caa cga caa caa aag agg   1584 Leu Ala Leu Val Glu Glu Asp Thr Pro Glu Gln Arg Gln Gln Lys Arg

    515                 520                 525 cag agg ttc atg gaa ata cag gag att gtt caa atg gcg ttt agt aaa   1632 Gln Arg Phe Met Glu Ile Gln Glu Ile Val Gln Met Ala Phe Ser Lys

530                 535                 540 gac aag gag gat ctt gga aag tcg tct ctc tca gct tcg tct tct tcc   1680 Asp Lys Glu Asp Leu Gly Lys Ser Ser Leu Ser Ala Ser Ser Ser Ser 545                 550                 555                 560 aca tcc aaa tta act ggt aaa aag agg tct att gct aaa ccc tct cac   1728 Thr Ser Lys Leu Thr Gly Lys Lys Arg Ser Ile Ala Lys Pro Ser His

            565                 570                 575 cgg cgt cgg tga                                                   1740 ArgArg Arg <210>6 <211>579 <212>PRT <213>欧洲油菜 <400>6 Met Glu Thr Ile Ala Xaa Phe Asp Asp Phe Tyr Glu Ile Ser Ser Thr   1               5                  10                 15 Ser Phe Xaa Ala Ala Pro Ala Pro Thr Asp Asn Ser Gly Ser Ser Thr

         20                  25                  30 Val Xaa Pro Thr Glu Leu Xaa Thr Arg Pro Glu Val Ser Ala Phe Gln

     35                  40                  45 Leu Leu Ser Asn Ser Leu Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Glu Ala Phe

 50                  55                  60 Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp Asp Lys Glu Val Ser Phe  65                  70                  75                  80 His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ser Leu Phe Phe Lys Ala Ala Leu

             85                  90                  95 Xaa Ala Ala Glu Lys Val Gln Lys Ser Thr Pro Val Lys Leu Glu Leu

        100                 105                 110 Lys Thr Leu Ala Ala Glu Tyr Asp Val Gly Phe Asp Ser Val Val Ala

    115                 120                 125 Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly

130                 135                 140 Val Ser Glu Cys Ala Asp Xaa Ser Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro 145                 150                 155                 160 Ala Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Val Phe Gln

            165                 170                 175 Ile Gln Glu Leu Val Thr Met Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val

        180                 185                 190 Asp Lys Val Xaa Ile Glu Asp Thr Leu Val Val Leu Lys Leu Ala Asn

    195                 200                 205 Ile Cys Gly Lys Ala Cys Lys Lys Leu Phe Asp Lys Cys Arg Glu Ile

210                 215                 220 Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Val Val Thr Leu Lys Lys Ser Leu Pro 225                 230                 235                 240 Glu Xaa Ile Ala Lys Gln Val Ile Asp Ile Arg Lys Glu Leu Gly Leu

            245                 250                 255 Glu Val Ala Glu Pro Glu Lys His Val Ser Asn Ile His Lys Ala Leu

        260                 265                 270 Glu Ser Asp Asp Leu Asp Leu Val Val Met Leu Leu Lys Glu Gly His

    275                 280                 285 Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys

290                 295                 300 Asp Glu Lys Thr Ala Arg Asn Leu Leu Glu Leu Gly Phe Ala Asp Val 305                 310                 315                 320 Asn Arg Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Ile His Val Ala Ala Met

            325                 330                 335 Arg Lys Glu Pro Thr Leu Ile Ala Leu Leu Leu Thr Lys Gly Ala Asn

        340                 345                 350 Ala Leu Glu Met Ser Leu Asp Gly Arg Thr Ala Leu Leu Ile Ala Lys

    355                 360                 365 Gln Val Thr Lys Ala Ala Glu Cys Cys Ile Leu Glu Lys Gly Lys Leu

370                 375                 380 Ala Ala Lys Gly Gly Val Cys Val Glu Ile Leu Lys Gln Pro Asp Asn 385                 390                 395                 400 Thr Arg Glu Pro Phe Pro Glu Asp Val Ser Pro Ser Leu Ala Val Ala

            405                 410                 415 Ala Asp Gln Phe Lys Ile Arg Leu Ile Asp Leu Glu Asn Arg Val Gln

        420                 425                 430 Met Ala Arg Cys Leu Tyr Pro Met Glu Ala Gln Val Ala Met Asp Phe

    435                 440                 445 Ala Arg Met Lys Gly Thr Arg Glu Phe Val Val Thr Thr Ala Thr Asp

450                 455                 460 Leu His Met Glu Pro Phe Lys Phe Val Glu Met His Gln Ser Arg Leu 465                 470                 475                 480 Thr Ala Leu Ser Lys Thr Val Glu Phe Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg

            485                 490                     495 Cys Ser Lys Val Leu Asp Asp Ile Val Asp Ser Glu Asp Leu Thr Ile

        500                 505                 510 Leu Ala Leu Val Glu Glu Asp Thr Pro Glu Gln Arg Gln Gln Lys Arg

    515                 520                 525 Gln Arg Phe Met Glu Ile Gln Glu Ile Val Gln Met Ala Phe Ser Lys

530                 535                 540 Asp Lys Glu Asp Leu Gly Lys Ser Ser Leu Ser Ala Ser Ser Ser Ser 545                 550                 555                 560 Thr Ser Lys Leu Thr Gly Lys Lys Arg Ser Ile Ala Lys Pro Ser His

            565                 570                 575 Arg Arg Arg <210>7 <211>1761 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(1758) <223>AtNMLC5    cDNA序列 <400>7 atg gct act ttg act gag cca tca tca tct ttg agt ttc aca tct tct    48 Met Ala Thr Leu Thr Glu Pro Ser Ser Ser Leu Ser Phe Thr Ser Ser   1               5                  10                  15 cat ttc tct tat ggt tct att ggg tcc aat cac ttc tca tca agc tca    96 His Phe Ser Tyr Gly Ser Ile Gly Ser Asn His Phe Ser Ser Ser Ser

         20                  25                  30 gct tct aat cct gaa gtt gtt agt cta acc aaa ctc agc tcc aat ctt    144 Ala Ser Asn Pro Glu Val Val Ser Leu Thr Lys Leu Ser Ser Asn Leu

     35                  40                  45 gag cag ctt ctt agt aat tca gat tgt gat tac agt gat gca gag atc    192 Glu Gln Leu Leu Ser Asn Ser Asp Cys Asp Tyr Ser Asp Ala Glu Ile

 50                  55                  60 att gtt gat ggt gtt cca gtt ggt gtt cat aga tgc att tta gct gca    240 Ile Val Asp Gly Val Pro Val Gly Val His Arg Cys Ile Leu Ala Ala  65                  70                  75                  80 aga agt aag ttt ttc caa gat ttg ttt aag aaa gaa aag aaa att tcg    288 Arg Ser Lys Phe Phe Gln Asp Leu Phe Lys Lys Glu Lys Lys Ile Ser

             85                  90                  95 aaa act gag aaa cca aag tat cag ttg aga gag atg tta cct tat gga    336 Lys Thr Glu Lys Pro Lys Tyr Gln Leu Arg Glu Met Leu Pro Tyr Gly

        100                 105                 110 gct gtt gct cat gaa gct ttc ttg tat ttc ttg agt tat ata tat act    384 Ala Val Ala His Glu Ala Phe Leu Tyr Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr

    115                 120                 125 ggg aga tta aag cct ttt cca ttg gag gtt tcg act tgt gtt gat cca    432 Gly Arg Leu Lys Pro Phe Pro Leu Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Pro

130                 135                 140 gtt tgt tct cat gat tgt tgt cga cct gcc att gat ttt gtt gtt caa    480 Val Cys Ser His Asp Cys Cys Arg Pro Ala Ile Asp Phe Val Val Gln 145                 150                 155                 160 ttg atg tat gct tcc tct gtt ctc caa gtg cct gag cta gtt tca tct    528 Leu Met Tyr Ala Ser Ser Val Leu Gln Val Pro Glu Leu Val Ser Ser

            165                 170                 175 ttt cag cgg cgg ctt tgt aac ttt gtg gag aag acc ctt gtt gag aat    576 Phe Gln Arg Arg Leu Cys Asn Phe Val Glu Lys Thr Leu Val Glu Asn

        180                 185                 190 gtt ctt ccc att ctt atg gtt gct ttc aat tgt aag ttg act cag ctt    624 Val Leu Pro Ile Leu Met Val Ala Phe Asn Cys Lys Leu Thr Gln Leu

    195                 200                 205 ctt gat cag tgt att gag aga gtg gcg agg tca gat ctt tac agg ttc    672 Leu Asp Gln Cys Ile Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Tyr Arg Phe

210                 215                 220 tgt att gaa aag gaa gtt cct ccc gaa gta gca gag aag att aaa cag    720 Cys Ile Glu Lys Glu Val Pro Pro Glu Val Ala Glu Lys Ile Lys Gln 225                 230                 235                 240 ctt cga ctt ata tcc ccg caa gac gaa gaa acc agt ccc aag att tcg    768 Leu Arg Leu Ile Ser Pro Gln Asp Glu Glu Thr Ser Pro Lys Ile Ser

            245                 250                 255 gag aaa ttg ctt gaa aga atc ggt aaa att ctc aag gcc ttg gat tca    816 Glu Lys Leu Leu Glu Arg Ile Gly Lys Ile Leu Lys Ala Leu Asp Ser

        260                 265                 270 gat gat gtt gag ctt gtg aag ctt ctt ttg act gag tca gat atc act    864 Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr

    275                 280                 285 cta gat caa gcc aat ggt ctg cat tat tct gtt gtg tat agt gat ccg    912 Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val Tyr Ser Asp Pro

290                 295                 300 aaa gtt gtt gcc gag att ctt gct ctg gat atg ggt gat gtg aac tac    960 Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Ala Leu Asp Met Gly Asp Val Asn Tyr 305                 310                 315                 320 agg aat tcc cgg ggt tac acg gtt ctt cat ttt gct gcg atg cgt aga    1008 Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Phe Ala Ala Met Arg Arg

            325                 330                 335 gag cca tcg atc att ata tcg ctt atc gat aaa ggc gcc aat gca tct    1056 Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Ile Asp Lys Gly Ala Asn Ala Ser

        340                 345                 350 gag ttt aca tct gac gga cgc agc gca gtt aat ata ttg aga aga ctg    1104 Glu Phe Thr Ser Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile Leu Arg Arg Leu

    355                 360                 365 aca aat cca aag gat tat cat acc aaa aca gca aaa ggg cgt gaa tct    1152 Thr Asn Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Lys Gly Arg Glu Ser

370                 375                 380 agt aag gcc agg cta tgc atc gat ata ttg gaa aga gaa atc agg aag    1200 Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu Glu Arg Glu Ile Arg Lys 385                 390                 395                 400 aac ccc atg gtt cta gat aca cca atg tgt tcc att tct atg cct gaa    1248 Asn Pro Met Val Leu Asp Thr Pro Met Cys Ser Ile Ser Met Pro Glu

            405                 410                 415 gat ctc cag atg aga ctg ttg tac cta gaa aag aga gtg ggt ctt gct    1296 Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Lys Arg Val Gly Leu Ala

        420                 425                 430 cag ttg ttc ttt cca acg gaa gct aaa gtg gct atg gac att ggt aac    1344 Gln Leu Phe Phe Pro Thr Glu Ala Lys Val Ala Met Asp Ile Gly Asn

    435                 440                 445 gta gaa ggt aca agt gag ttc aca ggg ttg tca cct cct tca agt ggg    1392 Val Glu Gly Thr Ser Glu Phe Thr Gly Leu Ser Pro Pro Ser Ser Gly

450                 455                 460 tta acc gga aac ttg agt cag gtt gat tta aac gaa act cct cat atg    1440 Leu Thr Gly Asn Leu Ser Gln Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro His Met 465                 470                 475                 480 caa acc caa aga ctt ctt act cgt atg gtg gct cta atg aaa aca gtt    1488 Gln Thr Gln Arg Leu Leu Thr Arg Met Val Ala Leu Met Lys Thr Val

            485                 490                 495 gag act ggt cga agg ttt ttt cca tat ggt tca gag gtt cta gat aag    1536 Glu Thr Gly Arg Arg Phe Phe Pro Tyr Gly Ser Glu Val Leu Asp Lys

        500                 505                 510 tac atg gct gag tat ata gac gac gac atc ctc gac gat ttc cat ttt    1584 Tyr Met Ala Glu Tyr Ile Asp Asp Asp Ile Leu Asp Asp Phe His Phe

    515                 520                 525 gag aag gga tct aca cat gaa aga aga ttg aaa aga atg aga tat aga    1632 Glu Lys Gly Ser Thr His Glu Arg Arg Leu Lys Arg Met Arg Tyr Arg

530                 535                 540 gag ctt aag gat gat gtc caa aag gca tat agc aaa gac aaa gag tct    1680 Glu Leu Lys Asp Asp Val Gln Lys Ala Tyr Ser Lys Asp Lys Glu Ser 545                 550                 555                 560 aag att gcg cgg tct tgt ctt tct gct tca tct tct cct tct tct tct    1728 Lys Ile Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ala Ser Ser Ser Pro Ser Ser Ser

            565                 570                 575 tcc ata aga gat gat ctg cac aac aca aca tga                        1761 Ser Ile Arg Asp Asp Leu His Asn Thr Thr

        580                 585 <210>8 <211>586 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>8 Met Ala Thr Leu Thr Glu Pro Ser Ser Ser Leu Ser Phe Thr Ser Ser   1               5                  10                  15 His Phe Ser Tyr Gly Ser Ile Gly Ser Asn His Phe Ser Ser Ser Ser

         20                  25                  30 Ala Ser Asn Pro Glu Val Val Ser Leu Thr Lys Leu Ser Ser Asn Leu

     35                  40                  45 Glu Gln Leu Leu Ser Asn Ser Asp Cys Asp Tyr Ser Asp Ala Glu Ile

 50                  55                  60 Ile Val Asp Gly Val Pro Val Gly Val His Arg Cys Ile Leu Ala Ala  65                  70                  75                  80 Arg Ser Lys Phe Phe Gln Asp Leu Phe Lys Lys Glu Lys Lys Ile Ser

             85                  90                  95 Lys Thr Glu Lys Pro Lys Tyr Gln Leu Arg Glu Met Leu Pro Tyr Gly

        100                 105                 110 Ala Val Ala His Glu Ala Phe Leu Tyr Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr

    115                 120                 125 Gly Arg Leu Lys Pro Phe Pro Leu Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Pro

130                 135                 140 Val Cys Ser His Asp Cys Cys Arg Pro Ala Ile Asp Phe Val Val Gln 145                 150                 155                 160 Leu Met Tyr Ala Ser Ser Val Leu Gln Val Pro Glu Leu Val Ser Ser

            165                 170                 175 Phe Gln Arg Arg Leu Cys Asn Phe Val Glu Lys Thr Leu Val Glu Asn

        180                 185                 190 Val Leu Pro Ile Leu Met Val Ala Phe Asn Cys Lys Leu Thr Gln Leu

    195                 200                 205 Leu Asp Gln Cys Ile Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Tyr Arg Phe

210                 215                 220 Cys Ile Glu Lys Glu Val Pro Pro Glu Val Ala Glu Lys Ile Lys Gln 225                 230                 235                 240 Leu Arg Leu Ile Ser Pro Gln Asp Glu Glu Thr Ser Pro Lys Ile Ser

            245                 250                 255 Glu Lys Leu Leu Glu Arg Ile Gly Lys Ile Leu Lys Ala Leu Asp Ser

        260                 265                 270 Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr

    275                 280                 285 Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val Tyr Ser Asp Pro

290                 295                 300 Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Ala Leu Asp Met Gly Asp Val Asn Tyr 305                 310                 315                 320 Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Phe Ala Ala Met Arg Arg

            325                 330                 335 Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Ile Asp Lys Gly Ala Asn Ala Ser

        340                 345                 350 Glu Phe Thr Ser Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile Leu Arg Arg Leu

    355                 360                 365 Thr Asn Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Lys Gly Arg Glu Ser

370                 375                 380 Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu Glu Arg Glu Ile Arg Lys 385                 390                 395                 400 Asn Pro Met Val Leu Asp Thr Pro Met Cys Ser Ile Ser Met Pro Glu

            405                 410                 415 Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Lys Arg Val Gly Leu Ala

        420                 425                 430 Gln Leu Phe Phe Pro Thr Glu Ala Lys Val Ala Met Asp Ile Gly Asn

    435                 440                 445 Val Glu Gly Thr Ser Glu Phe Thr Gly Leu Ser Pro Pro Ser Ser Gly

450                 455                 460 Leu Thr Gly Asn Leu Ser Gln Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro His Met 465                 470                 475                 480 Gln Thr Gln Arg Leu Leu Thr Arg Met Val Ala Leu Met Lys Thr Val

            485                 490                 495 Glu Thr Gly Arg Arg Phe Phe Pro Tyr Gly Ser Glu Val Leu Asp Lys

        500                 505                 510 Tyr Met Ala Glu Tyr Ile Asp Asp Asp Ile Leu Asp Asp Phe His Phe

    515                 520                 525 Glu Lys Gly Ser Thr His Glu Arg Arg Leu Lys Arg Met Arg Tyr Arg

530                 535                 540 Glu Leu Lys Asp Asp Val Gln Lys Ala Tyr Ser Lys Asp Lys Glu Ser 545                 550                 555                 560 Lys Ile Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ala Ser Ser Ser Pro Ser Ser Ser

            565                 570                 575 Ser Ile Arg Asp Asp Leu His Asn Thr Thr

        580                 585 <210>9 <211>21 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人T序列描述：PCR引物 <400>9 agattattgt caagtctaat g                               21 <210>10 <211>19 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物 <400>10 ttccatgtac ctttgcttc                                  19 <210>11 <211>23 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物 <400>11 gcggatccat ggataatagt agg                             23 <210>12 <211>23 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人T序列描述：PCR引物 <400>12 gcggatccta tttcctaaaa ggg                             23 <210>13 <211>21 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物 <400>13 tcaaggcctt ggattcagat g                               21 <210>14 <211>21 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物 <400>14 attaactgcg ctacgtccgt c                               21 <210>15 <211>1477 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(1476) <23>AtNMLc2基因组序列 <400>15 atg agc aat ctt gaa gaa tct ttg aga tct cta tcg ttg gat ttc ctg    48 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu   1               5                  10                  15 aac cta cta atc aac ggt caa gct ttc tcc gac gtg act ttc agc gtt    96 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

         20                  25                  30 gaa ggt cgt tta gtc cac gct cac cgt tgt atc ctc gcc gca cgg agt    144 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser

     35                  40                  45 ctt ttc ttc cgc aaa ttc ttt tgt ggg aca gac tca cca caa cct gtc   192 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

 50                  55                  60 aca ggt ata gac ccg acc caa cat ggg tcc gta ccc gct agc cca aca   240 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr  65                  70                  75                  80 aga ggc tcc acg gcc cca gct gga att ata cca gtg aac tca gtc ggt   288 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly

             85                  90                  95 tat gag gtt ttt ctg ttg cta ctt cag ttt ctt tat agc gga caa gtc   336 Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val

        100                 105                 110 tcc atc gtg ccg cag aaa cac gag cct aga cct aat tgt ggc gag aga   384 Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg

    115                 120                 125 gga tgt tgg cac act cat tgc tca gcc gcc gtt gat ctt gct ctt gat   432 Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp

130                 135                 140 act ctc gcc gcc tct cgt tac ttc ggc gtc gag cag ctc gca ttg ctc   480 Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu 145                 150                 155                 160 acc cag aaa caa ttg gca agc atg gtg gag aaa gcc tct atc gaa gat   528 Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp

            165                 170                 175 gtg atg aaa gtt tta ata gca tca aga aag caa gac atg cat caa tta   576 Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu

        180                 185                 190 tgg acc acc tgc tct cac tta gtt atg agc aat ctt gaa gaa tct ttg   624 Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu

    195                 200                 205 aga tct cta tcg ttg gat ttc ctg aac cta cta atc aac ggt caa gct   672 Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala

210                 215                 220 ttc tcc gac gtg act ttc agc gtt gaa ggt cgt tta gtc cac gct cac   720 Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val Glu Gly Arg Leu Val His Ala His 225                 230                 235                 240 cgt tgt atc ctc gcc gca cgg agt ctt ttc ttc cgc aaa ttc ttt tgt   768 Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys

            245                 250                 255 ggg aca gac tca cca caa cct gtc aca ggt ata gac ccg acc caa cat   816 Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His

        260                 265                 270 ggg tcc gta ccc gct agc cca aca aga ggc tcc acg gcc cca gct gga   864 Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly

    275                 280                 285 att ata cca gtg aac tca gtc ggt tat gag gtt ttt ctg ttg cta ctt   912 Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu

290                 295                 300 cag ttt ctt tat agc gga caa gtc tcc atc gtg ccg cag aaa cac gag   960 Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu 305                 310                 315                 320 cct aga cct aat tgt ggc gag aga gga tgt tgg cac act cat tgc tca   1008 Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser

            325                 330                 335 gcc gcc gtt gat ctt gct ctt gat act ctc gcc gcc tct cgt tac ttc   1056 Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe

        340                 345                 350 ggc gtc gag cag ctc gca ttg ctc acc cag aaa caa ttg gca agc atg   1104 Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met

    355                 360                 365 gtg gag aaa gcc tct atc gaa gat gtg atg aaa gtt tta ata gca tca   1152 Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser

370                 375                 380 aga aag caa gac atg cat caa tta tgg acc acc tgc tct cac tta gtt   1200 Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val 385                 390                 395                 400 atg agc aat ctt gaa gaa tct ttg aga tct cta tcg ttg gat ttc ctg   1248 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu

            405                 410                 415 aac cta cta atc aac ggt caa gct ttc tcc gac gtg act ttc agc gtt   1296 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

        420                 425                 430 gaa ggt cgt tta gtc cac gct cac cgt tgt atc ctc gcc gca cgg agt   1344 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser

    435                 440                 445 ctt ttc ttc cgc aaa ttc ttt tgt ggg aca gac tca cca caa cct gtc   1392 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

450                 455                 460 aca ggt ata gac ccg acc caa cat ggg tcc gta ccc gct agc cca aca    1440 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr 465                 470                 475                 480 aga ggc tcc acg gcc cca gct gga att ata cca gtg a                  1477 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val

            485                 490 <210>16 <211>492 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>16 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu   1               5                  10                  15 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

         20                  25                  30 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser

     35                  40                  45 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

 50                  55                  60 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr  65                  70                  75                  80 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly

             85                  90                  95 Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val

        100                 105                 110 Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg

    115                 120                 125 Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp

130                 135                 140 Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu 145                 150                 155                 160 Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp

            165                 170                 175 Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu

        180                 185                 190 Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val Met Ser Ash Leu Glu Glu Ser Leu

    195                 200                 205 Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala

210                 215                 220 Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val Glu Gly Arg Leu Val His Ala His 225                 230                 235                 240 Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys

            245                 250                 255 Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His

        260                 265                 270 Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly

    275                 280                 285 Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu

290                 295                 300 Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu 305                 310                 315                 320 Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser

            325                 330                 335 Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe

        340                 345                 350 Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met

    355                 360                 365 Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser

370                 375                 380 Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val 385                 390                 395                 400 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu

            405                 410                 415 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

        420                 425                 430 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser

    435                 440                 445 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

450                 455                 460 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr 465                 470                 475                 480 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val

            485                 490 <210>17 <211>1804 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(1803) <223>AtNMLc 4-1基因组序列 <400>17 atg gct gca act gca ata gag cca tct tca tct ata agt ttc aca tct   48 Met Ala Ala Thr Ala Ile Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser   1               5                  10                  15 tct cac tta tca aac cct tct cct gtt gtt act act tat cac tca gct    96 Ser His Leu Ser Asn Pro Ser Pro Val Val Thr Thr Tyr His Ser Ala

         20                  25                  30 gct aat ctt gaa gag ctc agc tct aac ttg gag cag ctt ctc act aat    144 Ala Asn Leu Glu Glu Leu Ser Ser Asn Leu Glu Gln Leu Leu Thr Asn

     35                  40                  45 cca gat tgc gat tac act gac gca gag atc atc att gaa gaa gaa gct    192 Pro Asp Cys Asp Tyr Thr Asp Ala Glu Ile Ile Ile Glu Glu Glu Ala

 50                  55                  60 aac cct gtg agt gtt cat aga tgt gtt tta gct gct agg agc aag ttt    240 Asn Pro Val Ser Val His Arg Cys Val Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe  65                  70                  75                  80 ttt ctt gat ctg ttt aag aaa gat aaa gat agt agt gag aag aaa cct    288 Phe Leu Asp Leu Phe Lys Lys Asp Lys Asp Ser Ser Glu Lys Lys Pro

             85                  90                  95 aag tat caa atg aaa gat tta tta cca tat gga aat gtg gga cgt gag    336 Lys Tyr Gln Met Lys Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Asn Val Gly Arg Glu

        100                 105                 110 gca ttt ctg cat ttc ttg agc tat atc tac act ggg agg tta aag cct    384 Ala Phe Leu His Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr Gly Arg Leu Lys Pro

    115                 120                 125 ttt cct atc gag gtt tca act tgt gtt gat tca gtt tgt gct cat gat    432 Phe Pro Ile Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Ser Val Cys Ala His Asp

130                 135                 140 tct tgt aaa ccg gcc att gat ttt gct gtt gag ttg atg tat gct tca    480 Ser Cys Lys Pro Ala Ile Asp Phe Ala Val Glu Leu Met Tyr Ala Ser 145                 150                 155                 160 ttt gtg ttc caa atc ccg gat ctt gtt tcg tca ttt cag cgg aag ctt    528 Phe Val Phe Gln Ile Pro Asp Leu Val Ser Ser Phe Gln Arg Lys Leu

            165                 170                 175 cgt aac tat gtt gag aag tca cta gta gag aat gtt ctt cct atc ctc    576 Arg Asn Tyr Val Glu Lys Ser Leu Val Glu Asn Val Leu Pro Ile Leu

        180                 185                 190 tta gtt gcg ttt cat tgt gat ttg aca cag ctt ctt gat caa tgc att    624 Leu Val Ala Phe His Cys Asp Leu Thr Gln Leu Leu Asp Gln Cys Ile

    195                 200                 205 gag aga gtg gcg aga tca gac tta gac aga ttc tgt atc gaa aag gag    672 Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Asp Arg Phe Cys Ile Glu Lys Glu

210                 215                 220 ctt cct tta gaa gta ttg gaa aaa atc aaa cag ctt cga gtt aag tcg    720 Leu Pro Leu Glu Val Leu Glu Lys Ile Lys Gln Leu Arg Val Lys Ser 225                 230                 235                 240 gtg aac ata ccc gag gtg gag gat aaa tcg ata gag aga aca ggg aaa    768 Val Asn Ile Pro Glu Val Glu Asp Lys Ser Ile Glu Arg Thr Gly Lys

            245                 250                 255 gta ctc aag gca ttg gat tca gat gat gta gaa ctc gtg aag ctt ctt    816 Val Leu Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

        260                 265                 270 ttg act gag tca gat ata act cta gac caa gcc aat ggt cta cat tat    864 Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr

    275                 280                 285 gca gtg gca tac agt gat ccg aaa gtt gtg aca cag gtt ctt gat cta    912 Ala Val Ala Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Thr Gln Val Leu Asp Leu

290                 295                 300 gat atg gct gat gtt aat ttc aga aat tcc agg ggg tat acg gtt ctt    960 Asp Met Ala Asp Val Asn Phe Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu 305                 310                 315                 320 cat att gct gct atg cgt aga gag cca aca att atc ata cca ctt att   1008 His Ile Ala Ala Met Arg Arg Glu Pro Thr Ile Ile Ile Pro Leu Ile

            325                 330                 335 caa aaa gga gct aat gct tca gat ttc acg ttt gat gga cgc agt gcg   1056 Gln Lys Gly Ala Asn Ala Ser Asp Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala

        340                 345                 350 gta aat ata tgt agg aga ctc act agg ccg aaa gat tat cat acc aaa   1104 Val Asn Ile Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys

    355                 360                 365 acc tca agg aaa gaa cct agt aaa tac cgc tta tgc atc gat atc ttg   1152 Thr Ser Arg Lys Glu Pro Ser Lys Tyr Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu

370                 375                 380 gaa agg gaa att aga agg aat cca ttg gtt agt ggg gat aca ccc act   1200 Glu Arg Glu Ile Arg Arg Asn Pro Leu Val Ser Gly Asp Thr Pro Thr 385                 390                 395                 400 tgt tcc cat tcg atg ccc gag gat ctc caa atg agg ttg tta tac tta   1248 Cys Ser His Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu

            405                 410                 415 gaa aag cga tgg gac ttg cgt cag ttg ttc ttc cca gca gaa gcc aat   1296 Glu Lys Arg Trp Asp Leu Arg Gln Leu Phe Phe Pro Ala Glu Ala Asn

        420                 425                 430 gtg gct atg gac gtt gct aat gtt gaa ggg aca agc gag tgc aca ggt   1344 Val Ala Met Asp Val Ala Asn Val Glu Gly Thr Ser Glu Cys Thr Gly

    435                 440                 445 ctt cta act cca cct cca tca aat gat aca act gaa aac ttg ggt aaa   1392 Leu Leu Thr Pro Pro Pro Ser Asn Asp Thr Thr Glu Asn Leu Gly Lys

450                 455                 460 gtc gat tta aat gaa acg cct tat gtg caa acg aaa aga atg ctt aca   1440 Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro Tyr Val Gln Thr Lys Arg Met Leu Thr 465                 470                 475                 480 cgt atg aaa gcc ctc atg aaa aca ggt aaa agc tta agg aaa tgt act   1488 Arg Met Lys Ala Leu Met Lys Thr Gly Lys Ser Leu Arg Lys Cys Thr

            485                 490                 495 ttc aag ttt tat tct ctg acc aca aga ttg act gat tcg aaa ccg ttc   1536 Phe Lys Phe Tyr Ser Leu Thr Thr Arg Leu Thr Asp Ser Lys Pro Phe

        500                 505                 510 aac aac gca gtt gag aca ggt cgg aga tac ttc cca tct tgt tat gag    1584 Asn Asn Ala Val Glu Thr Gly Arg Arg Tyr Phe Pro Ser Cys Tyr Glu

    515                 520                 525 gtt ctg gat aag tac atg gat cag tat atg gac gaa gaa atc cct gat   1632 Val Leu Asp Lys Tyr Met Asp Gln Tyr Met Asp Glu Glu Ile Pro Asp

530                 535                 540 atg tcg tat ccc gag aaa ggc act gtg aaa gag aga aga cag aag agg   1680 Met Ser Tyr Pro Glu Lys Gly Thr Val Lys Glu Arg Arg Gln Lys Arg 545                 550                 555                 560 atg aga tat aac gag ctg aag aac gac gtt aaa aaa gca tat agc aaa   1728 Met Arg Tyr Asn Glu Leu Lys Asn Asp Val Lys Lys Ala Tyr Ser Lys

            565                 570                 575 gac aaa gtc gcg cgg tct tgt ctt tct tct tca tca cca gct tct tct   1776 Asp Lys Val Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ser Ser Ser Pro Ala Ser Ser

        580                 585                 590 ctt aga gaa gcc tta gag aat cca aca t                             1804 Leu Arg Glu Ala Leu Glu Asn Pro Thr

    595                 600 <210>18 <211>601 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>18 Met Ala Ala Thr Ala Ile Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser   1               5                  10                  15 Ser His Leu Ser Asn Pro Ser Pro Val Val Thr Thr Tyr His Ser Ala

         20                  25                  30 Ala Asn Leu Glu Glu Leu Ser Ser Asn Leu Glu Gln Leu Leu Thr Asn

     35                  40                  45 Pro Asp Cys Asp Tyr Thr Asp Ala Glu Ile Ile Ile Glu Glu Glu Ala

 50                  55                  60 Asn Pro Val Ser Val His Arg Cys Val Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe  65                  70                  75                  80 Phe Leu Asp Leu Phe Lys Lys Asp Lys Asp Ser Ser Glu Lys Lys Pro

             85                  90                  95 Lys Tyr Gln Met Lys Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Asn Val Gly Arg Glu

        100                 105                 110 Ala Phe Leu His Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr Gly Arg Leu Lys Pro

    115                 120                 125 Phe Pro Ile Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Ser Val Cys Ala His Asp

130                 135                 140 Ser Cys Lys Pro Ala Ile Asp Phe Ala Val Glu Leu Met Tyr Ala Ser 145                 150                 155                 160 Phe Val Phe Gln Ile Pro Asp Leu Val Ser Ser Phe Gln Arg Lys Leu

            165                 170                 175 Arg Asn Tyr Val Glu Lys Ser Leu Val Glu Asn Val Leu Pro Ile Leu

        180                 185                 190 Leu Val Ala Phe His Cys Asp Leu Thr Gln Leu Leu Asp Gln Cys Ile

    195                 200                 205 Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Asp Arg Phe Cys Ile Glu Lys Glu

210                 215                 220 Leu Pro Leu Glu Val Leu Glu Lys Ile Lys Gln Leu Arg Val Lys Ser 225                 230                 235                 240 Val Asn Ile Pro Glu Val Glu Asp Lys Ser Ile Glu Arg Thr Gly Lys

            245                 250                 255 Val Leu Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

        260                 265                 270 Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr

    275                 280                 285 Ala Val Ala Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Thr Gln Val Leu Asp Leu

290                 295                 300 Asp Met Ala Asp Val Asn Phe Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu 305                 310                 315                 320 His Ile Ala Ala Met Arg Arg Glu Pro Thr Ile Ile Ile Pro Leu Ile

            325                 330                 335 Gln Lys Gly Ala Asn Ala Ser Asp Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala

        340                 345                 350 Val Asn Ile Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys

    355                 360                 365 Thr Ser Arg Lys Glu Pro Ser Lys Tyr Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu

370                 375                 380 Glu Arg Glu Ile Arg Arg Asn Pro Leu Val Ser Gly Asp Thr Pro Thr 385                 390                 395                 400 Cys Ser His Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu

            405                 410                 415 Glu Lys Arg Trp Asp Leu Arg Gln Leu Phe Phe Pro Ala Glu Ala Asn

        420                 425                 430 Val Ala Met Asp Val Ala Asn Val Glu Gly Thr Ser Glu Cys Thr Gly

    435                 440                 445 Leu Leu Thr Pro Pro Pro Ser Asn Asp Thr Thr Glu Asn Leu Gly Lys

450                 455                 460 Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro Tyr Val Gln Thr Lys Arg Met Leu Thr 465                 470                 475                 480 Arg Met Lys Ala Leu Met Lys Thr Gly Lys Ser Leu Arg Lys Cys Thr

            485                 490                 495 Phe Lys Phe Tyr Ser Leu Thr Thr Arg Leu Thr Asp Ser Lys Pro Phe

        500                 505                 510 Asn Asn Ala Val Glu Thr Gly Arg Arg Tyr Phe Pro Ser Cys Tyr Glu

    515                 520                 525 Val Leu Asp Lys Tyr Met Asp Gln Tyr Met Asp Glu Glu Ile Pro Asp

530                 535                 540 Met Ser Tyr Pro Glu Lys Gly Thr Val Lys Glu Arg Arg Gln Lys Arg 545                 550                 555                 560 Met Arg Tyr Asn Glu Leu Lys Asn Asp Val Lys Lys Ala Tyr Ser Lys

            565                 570                 575 Asp Lys Val Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ser Ser Ser Pro Ala Ser Ser

        580                 585                 590 Leu Arg Glu Ala Leu Glu Asn Pro Thr

    595                 600 <210>19 <211>1803 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(1803) <223>AtNMLc4-2基因组序列 <400>19 atg gcc acc acc acc acc acc acc acc gct aga ttc tct gat tca tac    48 Met Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Arg Phe Ser Asp Ser Tyr   1               5                  10                  15 gag ttc agc aac aca agc ggc aat agc ttc ttc gcc gcc gag tca tct    96 Glu Phe Ser Asn Thr Ser Gly Asn Ser Phe Phe Ala Ala Glu Ser Ser

         20                  25                  30 ctt gat tat ccg acg gaa ttt ctc acg cca ccg gag gta tca gct ctt    144 Leu Asp Tyr Pro Thr Glu Phe Leu Thr Pro Pro Glu Val Ser Ala Leu

     35                  40                  45 aaa ctt ctg tct aac tgc ctc gag tct gtt ttc gac tcg ccg gag acg    192 Lys Leu Leu Ser Asn Cys Leu Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Glu Thr

 50                  55                  60 ttc tac agc gat gct aag cta gtt ctc gcc ggc ggc cgg gaa gtt tct    240 Phe Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ala Gly Gly Arg Glu Val Ser  65                  70                  75                  80 ttt cac cgt tgt att ctt tcc gcg aga att cct gtc ttc aaa agc gct    288 Phe His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ile Pro Val Phe Lys Ser Ala

             85                  90                  95 tta gcc acc gtg aag gaa caa aaa tcc tcc acc acc gtg aag ctc cag    336 Leu Ala Thr Val Lys Glu Gln Lys Ser Ser Thr Thr Val Lys Leu Gln

        100                 105                 110 ctg aaa gag atc gcc aga gat tac gaa gtc ggc ttt gac tcg gtt gtg    384 Leu Lys Glu Ile Ala Arg Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val

    115                 120                 125 gcg gtt ttg gcg tat gtt tac agc ggc aga gtg agg tcc ccg ccg aag    432 Ala Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg Ser Pro Pro Lys

130                 135                 140 gga gct tct gct tgc gta gac gac gat tgt tgc cac gtg gct tgc cgg    480 Gly Ala Ser Ala Cys Val Asp Asp Asp Cys Cys His Val Ala Cys Arg 145                 150                 155                 160 tca aag gtg gat ttc atg gtg gag gtt ctt tat ctg tct ttc gtt ttc    528 Ser Lys Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu Ser Phe Val Phe

            165                 170                 175 cag att caa gaa tta gtt act ctg tat gag agg cag ttc ttg gaa att    576 Gln Ile Gln Glu Leu Val Thr Leu Tyr Glu Arg Gln Phe Leu Glu Ile

        180                 185                 190 gta gac aaa gtt gta gtc gaa gac atc ttg gtt ata ttc aag ctt gat    624 Val Asp Lys Val Val Val Glu Asp Ile Leu Val Ile Phe Lys Leu Asp

    195                 200                 205 act cta tgt ggt aca aca tac aag aag ctt ttg gat aga tgc ata gaa    672 Thr Leu Cys Gly Thr Thr Tyr Lys Lys Leu Leu Asp Arg Cys Ile Glu

210                 215                 220 att atc gtg aag tct gat ata gaa cta gtt agt ctt gag aag tct tta    720 Ile Ile Val Lys Ser Asp Ile Glu Leu Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu 225                 230                 235                 240 cct caa cac att ttc aag caa atc ata gac atc cgc gaa gcg ctc tgt    768 Pro Gln His Ile Phe Lys Gln Ile Ile Asp Ile Arg Glu Ala Leu Cys

            245                 250                 255 cta gag cca cct aaa cta gaa agg cat gtc aag aac ata tac aag gcg    816  Leu Glu Pro Pro Lys Leu Glu Arg His Val Lys Asn Ile Tyr Lys Ala

        260                 265                 270 cta gac tca gat gat gtt gag ctt gtc aag atg ctt ttg cta gaa gga    864 Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu Leu Leu Glu Gly

    275                 280                 285 cac acc aat ctc gat gag gcg tat gct ctt cat ttt gct atc gct cac    912 His Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe Ala Ile Ala His

290                 295                 300 tgc gct gtg aag acc gcg tat gat ctc ctc gag ctt gag ctt gcg gat    960 Cys Ala Val Lys Thr Ala Tyr Asp Leu Leu Glu Leu Glu Leu Ala Asp   305                 310                 315                 320 gtt aac ctt aga aat ecg agg gga tac act gtg ctt cat gtt gct gcg    1008 Val Asn Leu Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala

            325                 330                 335 atg cgg aag gag ccg aag ttg ata ata tct ttg tta atg aaa ggg gca    1056 Met Arg Lys Glu Pro Lys Leu Ile Ile Ser Leu Leu Met Lys Gly Ala

        340                 345                 350 aat att tta gac aca aca ttg gat ggt aga acc gct tta gtg att gta    1104 Asn Ile Leu Asp Thr Thr Leu Asp Gly Arg Thr Ala Leu Val Ile Val

    355                 360                 365 aaa cga ctc act aaa gcg gat gac tac aaa act agt acg gag gac ggt    1152 Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Asp Tyr Lys Thr Ser Thr Glu Asp Gly

370                 375                 380 acg cct tct ctg aaa ggc gga tta tgc ata gag gta ctt gag cat gaa    1200 Thr Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val Leu Glu His Glu 385                 390                 395                 400 caa aaa cta gaa tat ttg tcg cct ata gag gct tca ctt tct ctt cca   1248 Gln Lys Leu Glu Tyr Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ser Leu Ser Leu Pro

            405                 410                 415 gta act cca gag Gag ttg agg atg agg ttg ctc tat tat gaa aac cga   1296 Val Thr Pro Glu Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr Tyr Glu Asn Arg

        420                 425                 430 gtt gca ctt gct cga ctt ctc ttt cca gtg gaa act gaa act gta cag   1344 Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Val Glu Thr Glu Thr Val Gln

    435                 440                 445 ggt att gcc aaa ttg gag gaa aca tgc gag ttt aca gct tct agt ctc   1392 Gly Ile Ala Lys Leu Glu Glu Thr Cys Glu Phe Thr Ala Ser Ser Leu

450                 455                 460 gag cct gat cat cac att ggt gaa aag cgg aca tca cta gac cta aat   1440 Glu Pro Asp His His Ile Gly Glu Lys Arg Thr Ser Leu Asp Leu Asn 465                 470                 475                 480 atg gcg ccg ttc caa atc cat gag aag cat ttg agt aga cta aga gca   1488 Met Ala Pro Phe Gln Ile His Glu Lys His Leu Ser Arg Leu Arg Ala

            485                 490                 495 ctt tgt aaa acc gtg gaa ctg ggg aaa cgc tac ttc aaa cga tgt tcg   1536 Leu Cys Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Tyr Phe Lys Arg Cys Ser

        500                 505                 510 ctt gat cac ttt atg gat act gag gac ttg aat cat ctt gct agc gta   1584 Leu Asp His Phe Met Asp Thr Glu Asp Leu Asn His Leu Ala Ser Val

    515                 520                 525 gaa gaa gat act cct gag aaa cgg cta caa aag aag caa agg tac atg   1632 Glu Glu Asp Thr Pro Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr Met

530                 535                 540 gaa cta caa gag act ctg atg aag acc ttt agt gag gac aag gag gaa   1680 Glu Leu Gln Glu Thr Leu Met Lys Thr Phe Ser Glu Asp Lys Glu Glu 545                 550                 555                 560 tgt gga aag tct tcc aca ccg aaa cca acc tct gcg gtg agg tct aat   1728 Cys Gly Lys Ser Ser Thr Pro Lys Pro Thr Ser Ala Val Arg Ser Asn

            565                 570                 575 aga aaa ctc tct cac cgg cgc cta aaa gtg gac aaa cgg gat ttt ttg   1776 Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys Arg Asp Phe Leu

        580                 585                 590 aaa cga cct tac ggg aac ggg gat taa                               1803 Lys Arg Pro Tyr Gly Asn Gly Asp

    595                 600 <210>20 <211>600 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>20 Met Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Arg Phe Ser Asp Ser Tyr   1               5                  10                  15 Glu Phe Ser Asn Thr Ser Gly Asn Ser Phe Phe Ala Ala Glu Ser Ser

         20                  25                  30 Leu Asp Tyr Pro Thr Glu Phe Leu Thr Pro Pro Glu Val Ser Ala Leu

     35                  40                  45 Lys Leu Leu Ser Asn Cys Leu Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Glu Thr

 50                  55                  60 Phe Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ala Gly Gly Arg Glu Val Ser  65                  70                  75                  80 Phe His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ile Pro Val Phe Lys Ser Ala

             85                  90                  95 Leu Ala Thr Val Lys Glu Gln Lys Ser Ser Thr Thr Val Lys Leu Gln

        100                 105                 110 Leu Lys Glu Ile Ala Arg Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val

    115                 120                 125 Ala Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg Ser Pro Pro Lys

130                 135                 140 Gly Ala Ser Ala Cys Val Asp Asp Asp Cys Cys His Val Ala Cys Arg 145                 150                 155                 160 Ser Lys Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu Ser Phe Val Phe

            165                 170                 175 Gln Ile Gln Glu Leu Val Thr Leu Tyr Glu Arg Gln Phe Leu Glu Ile

        180                 185                 190 Val Asp Lys Val Val Val Glu Asp Ile Leu Val Ile Phe Lys Leu Asp

    195                 200                 205 Thr Leu Cys Gly Thr Thr Tyr Lys Lys Leu Leu Asp Arg Cys Ile Glu

210                 215                 220 Ile Ile Val Lys Ser Asp Ile Glu Leu Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu 225                 230                 235                 240 Pro Gln His Ile Phe Lys Gln Ile Ile Asp Ile Arg Glu Ala Leu Cys

            245                 250                 255 Leu Glu Pro Pro Lys Leu Glu Arg His Val Lys Asn Ile Tyr Lys Ala

        260                 265                 270 Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu Leu Leu Glu Gly

    275                 280                 285 His Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe Ala Ile Ala His

290                 295                 300 Cys Ala Val Lys Thr Ala Tyr Asp Leu Leu Glu Leu Glu Leu Ala Asp 305                 310                 315                 320 Val Asn Leu Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala

            325                 330                 335 Met Arg Lys Glu Pro Lys Leu Ile Ile Ser Leu Leu Met Lys Gly Ala

        340                 345                 350 Asn Ile Leu Asp Thr Thr Leu Asp Gly Arg Thr Ala Leu Val Ile Val

    355                 360                 365 Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Asp Tyr Lys Thr Ser Thr Glu Asp Gly

370                 375                 380 Thr Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val Leu Glu His Glu 385                 390                 395                 400 Gln Lys Leu Glu Tyr Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ser Leu Ser Leu Pro

            405                 410                 415 Val Thr Pro Glu Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr Tyr Glu Asn Arg

        420                 425                 430 Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Val Glu Thr Glu Thr Val Gln

    435                 440                 445 Gly Ile Ala Lys Leu Glu Glu Thr Cys Glu Phe Thr Ala Ser Ser Leu

450                 455                 460 Glu Pro Asp His His Ile Gly Glu Lys Arg Thr Ser Leu Asp Leu Asn 465                 470                 475                 480 Met Ala Pro Phe Gln Ile His Glu Lys His Leu Ser Arg Leu Arg Ala

            485                 490                 495 Leu Cys Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Tyr Phe Lys Arg Cys Ser

        500                 505                 510 Leu Asp His Phe Met Asp Thr Glu Asp Leu Asn His Leu Ala Ser Val

    515                 520                 525 Glu Glu Asp Thr Pro Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr Met

530                 535                 540 Glu Leu Gln Glu Thr Leu Met Lys Thr Phe Ser Glu Asp Lys Glu Glu 545                 550                 555                 560 Cys Gly Lys Ser Ser Thr Pro Lys Pro Thr Ser Ala Val Arg Ser Asn

            565                 570                 575 Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys Arg Asp Phe Leu

        580                 585                 590 Lys Arg Pro Tyr Gly Asn Gly Asp

    595                 600 <210>21 <211>28 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM1A <400>21 gakattattg tcaagtctaa tgtwgata                         28 <210>22 <211>25 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM1B <400>22 aytkgaytck gatgatrttg artta                            25 <210>23 <211>27 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM1C <400>23     taaytcaaya tcatcmgart cmartgc                          27 <210>24 <211>28 <212>DNA <213>人工序列 <223>人工序列描述：PCR引物NIM1D <220> <221>misc_特征 <222>(1)..(28) <223>n＝a、t、c或g <400>24 gttkagcmag nscaactcta ttttcaag                 28 <210>25 <211>32 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM2A <400>25 tgcatwgara twrttgtsaa gtctratgtw ga             32 <210>26 <211>27 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM2B <400>26 ggcaytggay tcwgatgatg ttgaryt                   27 <210>27 <211>27 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM2C <400>27 arytcaacat catcwgartc cartgcc                   27 <210>28 <211>31 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM2D <400>28 agttkagcma gdccaactck attttcaarrt              31 <210>29 <211>659 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(1)..(657) <223>烟草A <400>29 tgc atg gag att att gtc aag tct aat gtt gat atc ata acc ctt gat   48 Cys Met Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp   1               5                  10                  15 aag gcc ttg cct cat gac att gta aaa caa att acc gat tca cga gca   96 Lys Ala Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala

         20                  25                  30 gaa ctt ggt cta caa ggg cct gaa agc aat ggt ttt cct gat aaa cat   144 Glu Leu Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His

     35                  40                  45 gtt aag agg ata cat agg gca tta gat tct gat gat gtt gaa tta ctg   192 Val Lys Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu

 50                  55                  60 cag atg ttg cta aga gag ggg cat act act cta gat gat gca tat gct   240 Gln Met Leu Leu Arg Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala  65                  70                  75                  80 ctc cac tat gct gta gca tat tgc gat gca aag act aca gca gaa ctt   288 Leu His Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu

             85                  90                  95 cta gat ctt gca ctt gct gat gtt aat cat caa aat tca aga gga tac   336 Leu Asp Leu Ala Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Ser Arg Gly Tyr

        100                 105                 110 aca gtg ctg cat gtt gca gcc atg agg aaa gag cct aaa att ata gtg   384 Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val

    115                 120                 125 tcc ctt tta acc aaa gga gct aga cct tct gat ctg aca tcc gat ggc   432 Ser Leu Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly

130                 135                 140 aga aaa gca ctt caa att gcc aag agg ctc act agg ctt gtg gat ttc   480 Arg Lys Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe 145                 150                 155                 160 agt aag tct cca gag gaa gga aaa tct gct tcg aag gat cgg tta tgc   528 Ser Lys Ser Pro Glu Glu Gly Lys Ser Ala Ser Lys Asp Arg Leu Cys

            165                 170                 175 att gag att ctg gag caa gca gaa aga aga gat cca ctg cta gga gaa   576 Ile Glu Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu

        180                 185                 190 gct tct gta tct ctt gct atg gcg ggc gat gat ttg cgt atg aag ctg    624 Ala Ser Val Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu

    195                 200                 205 tta tac ctt gaa aat aga gtt ggc ctt gct caa ct                     659 Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Gln

210                 215 <210>30 <211>219 <212>PRT <213>烟草 <400>30 Cys Met Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp   1               5                  10                  15 Lys Ala Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala

         20                  25                  30 Glu Leu Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His

     35                  40                  45 Val Lys Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu

 50                  55                  60 Gln Met Leu Leu Arg Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala  65                  70                  75                  80 Leu His Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu

             85                  90                  95 Leu Asp Leu Ala Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Ser Arg Gly Tyr

        100                 105                 110 Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val

    115                 120                 125 Ser Leu Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly

130                 135                 140 Arg Lys Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe 145                 150                 155                 160 Ser Lys Ser Pro Glu Glu Gly Lys Ser Ala Ser Lys Asp Arg Leu Cys

            165                 170                 175 Ile Glu Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu

        180                 185                 190 Ala Ser Val Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu

    195                 200                 205 Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Gln

210                 215 <210>31 <211>498 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>烟草B <400>31 g gca ctg gat tct gat gat gtt gag ctg gtc aag ctt cta ctc aac gag 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu

1               5                  10                  15 tct gag ata agc tta gat gaa gcc tac gct ctt cat tat gct gtt gca   97 Ser Glu Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tat tgt gat ccc aag gtt gtg act gag gtt ctt gga ctg ggt gtt gct   145 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 gat gtc aat cta cgt aat act cgc ggt tac act gtg ctt cac att gct   193 Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgt aag gag cca gca ata att gta tcg ctt ttg act aag gga   241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ala Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gct cat gtg tca gag att aca ttg gat ggg caa agt gct gtt agt atc   289 Ala His Val Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 tgt agg agg cta act agg cct aag gag tac cat gca aaa aca gaa caa   337 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 ggc cag gaa gca aac aaa gat cgg gta tgt att gat gtt ttg gag aga   385 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gag atg cgt cgc aac cca atg gct gga gat gca ttg ctt tct tcc caa   433 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Ala Gly Asp Ala Leu Leu Ser Ser Gln

130                 135                 140 atg ttg gcc gat gat ctg cac atg aaa ctg cac tat ttt gaa aat cga   481 Met Leu Ala Asp Asp Leu His Met Lys Leu His Tyr Phe Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt gga ctt gct caa ct                                            498 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>32 <211>165 <212>PRT <213>烟草 <400>32 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu   1               5                  10                  15 Ser Glu Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ala Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala His Val Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Ala Gly Asp Ala Leu Leu Ser Ser Gln

130                 135                 140 Met Leu Ala Asp Asp Leu His Met Lys Leu His Tyr Phe Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>33 <211>498 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>烟草C <400>33 g gca ctg gac tcw gat gat gtt gag ttt gtc aag ctt cta ctg agt gag 49   Ala Leu Asp Xaa Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Ser Glu

1               5                 10                  15 tct aac ata agc tta gat gaa gcc tac gct ctt cat tat gct gtg gca   97 Ser Asn Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tat tgt gat ccc aag gtt gtg act gag gtt ctt gga ctg ggt gtt gcg   145 TYr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 gat gtc aac cta cgt aat act cgt ggt tac act gtg ctt cac att gct   193 Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 tcc atg cgt aag gag cca gca gta att gta tcg ctt ttg act aag gga    241 Ser Met Arg Lys Glu Pro Ala Val Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gct cgt gca tca gag act aca ttg gat ggg cag agt gct gtt agt atc    289 Ala Arg Ala Ser Glu Thr Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 tgt agg agg ctg act agg cct aag gag tac cat gca aaa aca gaa caa    337 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 ggc cag gaa gca aac aaa gat cgg gta tgt att gat gtt ttg gag aga    385 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gag atg cgt cgc aac cca atg gct gga gat gca ttg ttt tct tcc cca    433 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Ala Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 atg ttg gcc gat gat ctg cac atg aaa ctg cac tac ctt gaa aat aga    481 Met Leu Ala Asp Asp Leu His Met Lys Leu His Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                        160 gtt ggc ctg gct caa ct                                             498 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>34 <211>165 <212>PRT <213>烟草 <400>34 Ala Leu Asp Xaa Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Ser Glu   1               5                  10                  15 Ser Asn Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 Ser Met Arg Lys Glu Pro Ala Val Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Arg Ala Ser Glu Thr Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Ala Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 Met Leu Ala Asp Asp Leu His Met Lys Leu His Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>35 <211>399 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(1)..(399) <223>烟草D <400>35 act gat tcg gat gat gtt gag tta ctt aag tta ctt ctt gaa gag tct    48 Thr Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Glu Glu Ser   1               5                  10                  15 aat gtc act tta gac gat gct tgt gct ctt cat tat gca gct gct tat    96 Asn Val Thr Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Tyr Ala Ala Ala Tyr

         20                  25                  30 tgt aac tcc aag gtt gtg aat gag gtc ctc gag ctg gat tta gct gat    144 Cys Asn Ser Lys Val Val Asn Glu Val Leu Glu Leu Asp Leu Ala Asp

     35                  40                  45 gtc aat ctt cag aac tcc cga gga tat aac gtc ctt cac gtt gct gct    192 Val Asn Leu Gln Asn Ser Arg Gly Tyr Asn Val Leu His Val Ala Ala

 50                  55                  60 aga aga aag gag cca tca ata ata atg gga cta ctt gaa aaa gga gca    240 Arg Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Met Gly Leu Leu Glu Lys Gly Ala  65                  70                  75                  80 tct ttc ttg aat act aca cgg gat gga aac aca gca cta tct atc tgt    288 Ser Phe Leu Asn Thr Thr Arg Asp Gly Asn Thr Ala Leu Ser Ile Cys

             85                  90                  95 cgg aga ttg act cgg cca aag gat tat aat gag cca aca aag caa ggg    336 Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr Asn Glu Pro Thr Lys Gln Gly

        100                 105                 110 aaa gaa act aat aag gac cgc ata tgc att gat att ttg gag aga gag    384 Lys Glu Thr Asn Lys Asp Arg Ile Cys Ile Asp Ile Leu Glu Arg Glu

    115                 120                 125 acg aat agg aat cct                                                399 Thr Asn Arg Asn Pro

130 <210>36 <211>133 <212>PRT <213>烟草 <400>36 Thr Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Glu Glu Ser   1               5                  10                  15 Asn Val Thr Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Tyr Ala Ala Ala Tyr

         20                  25                  30 Cys Asn Ser Lys Val Val Asn Glu Val Leu Glu Leu Asp Leu Ala Asp

     35                  40                  45 Val Asn Leu Gln Asn Ser Arg Gly Tyr Asn Val Leu His Val Ala Ala

 50                  55                  60 Arg Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Met Gly Leu Leu Glu Lys Gly Ala  65                  70                  75                  80 Ser Phe Leu Asn Thr Thr Arg Asp Gly Asn Thr Ala Leu Ser Ile Cys

             85                  90                  95 Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr Asn Glu Pro Thr Lys Gln Gly

        100                 105                 110 Lys Glu Thr Asn Lys Asp Arg Ile Cys Ile Asp Ile Leu Glu Arg Glu

    115                 120                 125 Thr Asn Arg Asn Pro

130 <210>37 <211>498 <212>DNA <213>番茄 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>番茄A <400>37 g gca ttg gat tct gat gat gtt gag tta cta agg atg ttg ctt aaa gag 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met Leu Leu Lys Glu

1               5                  10                  15 ggg cat act act ctt gat gat gca tat gct ctc cac tat gct gta gca   97 Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tat tgc gat gca aag act aca gca gaa ctt tta gat ctt tca ctt gct   145 Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp Leu Ser Leu Ala

     35                  40                  45 gat gtt aat cat caa aat cct aga gga cac acg gta ctt cat gtt gct   193 Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly His Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 gcc atg agg aaa gaa cct aaa att ata gtg tcc ctt tta acc aaa gga   241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gct aga cct tct gat ctg aca tcc gat ggc aaa aaa gca ctt caa att    289 Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 gct aag agg ctc act agg ctt gta gat ttt acc aag tct aca gag gaa    337 Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys Ser Thr Glu Glu

        100                 105                 110 gga aaa tct gct cca aag gat cgg tta tgc att gag att ctg gag caa    385 Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 gca gaa aga aga gat cca cta cta gga gaa gct tca tta tct ctt gct    433 Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Leu Ser Leu Ala

130                 135                 140 atg gca ggc gat gat ttg cgt atg aag ctg tta tac ctt gaa aat aga    481 Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctt gct aaa ct                                             498 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>38 <211>165 <212>PRT <213>番茄 <400>38 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met Leu Leu Lys Glu   1               5                  10                  15 Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp Leu Ser Leu Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly His Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys Ser Thr Glu Glu

        100                 105                 110 Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Leu Ser Leu Ala

130                 135                 140 Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>39 <211>498 <212>DNA <213>甜菜 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>甜菜 <400>39 g gca ttg gat tct gat gat gtt gag tta gtc aga atg ctt tta aaa gag  49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Arg Met Leu Leu Lys Glu

1               5                  10                  15 cgc cat aca act cta gat gat gca tat gcc ctt cac tat gct gtg gca    97 Arg His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 cat tgt gat gcc aag acc acc acg gag ctt ctt gag ctt ggg ctt gca    145 His Cys Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Glu Leu Gly Leu Ala

     35                  40                  45 gat gtt aat ctt aga aat cta agg ggt cac act gtg cta cat gtg gca    193 Asp Val Asn Leu Arg Asn Leu Arg Gly His Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 gcc atg aga aaa gag cct aag ata att gta tcc ttg tta acc aag gga    241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gcc cat ccg tct gat ata aca tca gat gat aaa aaa gca ctg cag ata    289 Ala His Pro Ser Asp Ile Thr Ser Asp Asp Lys Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 gca aag aga cta aca aaa gct gtg gac ttc tat aaa act aca gaa caa    337 Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Val Asp Phe Tyr Lys Thr Thr Glu Gln

        100                 105                 110 gga aaa gat gca cca aag gat cgg ttg tgc att gaa ata ctg gag caa    385 Gly Lys Asp Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 gct gaa aga aga gaa cca ttg cta gga gaa ggt tct gtt tct ctt gca    433 Ala Glu Arg Arg Glu Pro Leu Leu Gly Glu Gly Ser Val Ser Leu Ala

130                 135                 140 aag gca gga gat gat ctg cgt atg aag cta tta tac ctt gaa aat cga    481 Lys Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctt gct caa ct                                             498 Val Gly Leu Ala Gln

                             165 <210>40 <211>165 <212>PRT <213>甜菜 <400>40 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Arg Met Leu Leu Lys Glu   1               5                  10                  15 Arg His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 His Cys Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Glu Leu Gly Leu Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn Leu Arg Asn Leu Arg Gly His Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala His Pro Ser Asp Ile Thr Ser Asp Asp Lys Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Val Asp Phe Tyr Lys Thr Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Lys Asp Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 Ala Glu Arg Arg Glu Pro Leu Leu Gly Glu Gly Ser Val Ser Leu Ala

130                 135                 140 Lys Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>41 <211>498 <212>DNA <213>向日葵 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>向日葵A <400>41 g gca ttg gat tct gat gat gtt gag yta gtc aca atg tta tta cga gaa 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Xaa Val Thr Met Leu Leu Arg Glu

1               5                  10                  15 ggt cat act tca tta gac ggt tct tgc gct ctt cat tac gct gtt gcg   97 Gly His Thr Ser Leu Asp Gly Ser Cys Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tac gca gat gct aaa acg aca acc gaa tta ctg gat tta gca ctt gct   145 Tyr Ala Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Ala

     35                  40                  45 gac gta aat cat aaa aac tcg agg ggt ttt acc gta ctt cat gtt gcc   193 Asp Val Asn His Lys Asn Ser Arg Gly Phe Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 gct atg aga aaa gag ccg agt att atc gtt tcg ctt ctt acg aaa ggg   241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gcc cga ccc tcg gat ctc acc cct gat ggg aga aaa gca cta cag att   289 Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Pro Asp Gly Arg Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 tcg aag agg ttg acc aga gcg gtt gac tat tac aag tca aac gag gat   337 Ser Lys Arg Leu Thr Arg Ala Val Asp Tyr Tyr Lys Ser Asn Glu Asp

        100                 105                 110 gat aaa gag tca acg aaa ggt cgt ttg tgt att gag ata ttg gaa caa   385 Asp Lys Glu Ser Thr Lys Gly Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 gcc gaa aga aga aat cca ttg tta ggt gaa gct tcg gct tct ctt gca   433 Ala Glu Arg Arg Asn Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Ala Ser Leu Ala

130                 135                 140 atg gcc gga gat gat ttg cgt gga aag ttg ttg tac ctt gaa aat cga   481 Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Gly Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctg gct caa ct                                            498 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>42 <211>165 <212>PRT <213>向日葵 <400>42 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Xaa Val Thr Met Leu Leu Arg Glu   1               5                  10                  15 Gly His Thr Ser Leu Asp Gly Ser Cys Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Ala Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn His Lys Asn Ser Arg Gly Phe Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Pro Asp Gly Arg Lys Ala Leu Gln Ile

             85                  90                  95 Ser Lys Arg Leu Thr Arg Ala Val Asp Tyr Tyr Lys Ser Asn Glu Asp

        100                 105                 110 Asp Lys Glu Ser Thr Lys Gly Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu Glu Gln

    115                 120                 125 Ala Glu Arg Arg Asn Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser Ala Ser Leu Ala

130                 135                 140 Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Gly Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>43 <211>498 <212>DNA <213>向日葵 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>向日葵B <400>43 g gca ttg gac tct gat gat gtt gag ctt gtg aaa atg att tta gac gaa 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Ile Leu Asp Glu

1               5                 10                  15 tcc aaa atc acg tta gat gaa gcc tgc gct ctt cat tat gcg gtc atg   97 Ser Lys Ile Thr Leu Asp Glu Ala Cys Ala Leu His Tyr Ala Val Met

         20                  25                  30 tat tgt aat caa gaa gtt gct aag gag att ctt aac tta aac cgt gcg   145 Tyr Cys Asn Gln Glu Val Ala Lys Glu Ile Leu Asn Leu Asn Arg Ala

     35                  40                  45 gat gtt aat ctt aga aac tca cga gat tac acc gtg ctt cat gtt gct   193 Asp Val Asn Leu Arg Asn Ser Arg Asp Tyr Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgt aaa gaa cca tca ctt att gtt tcg att cta agc aaa ggc   241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Leu Ile Val Ser Ile Leu Ser Lys Gly  65                  70                  75                  80 gcg tgt gca tcg gat act act ttt gat gga caa agt gcg gtt agt att   289 Ala Cys Ala Ser Asp Thr Thr Phe Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 tgc agg aga cga aca agg ccc aag gat tat tat gtg aaa acc gaa cac   337 Cys Arg Arg Arg Thr Arg Pro Lys Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Glu His

        100                 105                 110 ggg caa gaa aca aat aaa gat cgt ata tgc atc gat gtt ttg gag cgg   385 Gly Gln Glu Thr Asn Lys Asp Arg Ile Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gaa ata aag agg aat ccg atg ata ggc gat gtt tcc gtg tgt tct tca   433 Glu Ile Lys Arg Asn Pro Met Ile Gly Asp Val Ser Val Cys Ser Ser

130                 135                 140 gca gtg gct gat gat ttg cat atg aat tta ctc tac ttt gaa aat cga   481 Ala Val Ala Asp Asp Leu His Met Asn Leu Leu Tyr Phe Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctt gct caa ct                                            498 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>44 <211>165 <212>PRT <213>向日葵 <400>44 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Ile Leu Asp Glu   1               5                  10                  15 Ser Lys Ile Thr Leu Asp Glu Ala Cys Ala Leu His Tyr Ala Val Met

         20                  25                  30 Tyr Cys Asn Gln Glu Val Ala Lys Glu Ile Leu Asn Leu Asn Arg Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asn Leu Arg Ash Ser Arg Asp Tyr Thr Val Leu His Val Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Leu Ile Val Ser Ile Leu Ser Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Cys Ala Ser Asp Thr Thr Phe Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Arg Thr Arg Pro Lys Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Glu His

        100                 105                 110 Gly Gln Glu Thr Asn Lys Asp Arg Ile Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Ile Lys Arg Asn Pro Met Ile Gly Asp Val Ser Val Cys Ser Ser

130                 135                 140 Ala Val Ala Asp Asp Leu His Met Asn Leu Leu Tyr Phe Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>45 <211>653 <212>DNA <213>马铃薯 <220> <221>CDS <222>(1)..(651) <223>马铃薯A <400>45 gak att att gtc aag tct aat gtt gat atc ata acc ctt gat aag tcc    48 Xaa Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ser   1               5                  10                  15 ttg cct cat gac atc gta aaa caa atc act gat tca cgt gct gaa ctt    96 Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu

         20                  25                  30 ggt cta caa ggg cct gaa agc aat ggt ttt cct gat aaa cat gtt aag    144 Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys

     35                  40                  45 agg ata cat agg gca ttg gac tct gat gat gtt gag tta cta agg atg    192 Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met

 50                  55                  60 ttg ctt aaa gaa ggg cat act act ctc gat gat gca tat gct ctc cac    240 Leu Leu Lys Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His  65                  70                  75                  80 tat gct gta gca tat tgc gat gca aag act aca gca gaa ctt tta gat    288 Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp

             85                  90                  95 ctt tca ctt gct gat gtt aat cat caa aat cct aga gga tac acg gta    336 Leu Ser Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val

        100                 105                 110 ctt cat gtt gct gcc atg agg aaa gag cct aaa att ata gtg tcc ctt    384 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu

    115                 120                 125 tta acc aaa gga gct aga cct tct gat ctg aca tct gat ggc aaa aaa    432 Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys

130                 135                 140 gca ctt caa att gct aag agg ctc act agg ctt gtg gat ttt act aag    480 Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys 145                 150                 155                 160 tct aca gag gaa gga aaa tct gct cca aaa gat cgg tta tgc att gag    528 Ser Thr Glu Glu Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu

            165                 170                 175 att ctg gag caa gca gaa aga aga gat cca cta cta gga gaa gct tca    576 Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser

        180                 185                 190 tta tct ctt gct atg gca ggc gat gat ttg cgt atg aag ctg tta tac    624 Leu Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr

    195                 200                 205 ctt gaa aat cga gtt ggc ctk gct caa ct                             653 Leu Glu Asn Arg Val Gly Xaa Ala Gln

210                 215 <210>46 <211>217 <212>PRT <213>马铃薯 <400>46 Xaa Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Ile Ile Thr Leu Asp Lys Ser   1               5                  10                  15 Leu Pro His Asp Ile Val Lys Gln Ile Thr Asp Ser Arg Ala Glu Leu

         20                  25                  30 Gly Leu Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Phe Pro Asp Lys His Val Lys

     35                  40                  45 Arg Ile His Arg Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Leu Arg Met

 50                  55                  60 Leu Leu Lys Glu Gly His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His  65                  70                  75                  80 Tyr Ala Val Ala Tyr Cys Asp Ala Lys Thr Thr Ala Glu Leu Leu Asp

             85                  90                  95 Leu Ser Leu Ala Asp Val Asn His Gln Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val

        100                 105                 110 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu

    115                 120                 125 Leu Thr Lys Gly Ala Arg Pro Ser Asp Leu Thr Ser Asp Gly Lys Lys

130                 135                 140 Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Arg Leu Val Asp Phe Thr Lys 145                 150                 155                 160 Ser Thr Glu Glu Gly Lys Ser Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu

            165                 170                 175 Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Asp Pro Leu Leu Gly Glu Ala Ser

        180                 185                 190 Leu Ser Leu Ala Met Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr

    195                 200                 205 Leu Glu Asn Arg Val Gly Xaa Ala Gln

210                 215 <210>47 <211>498 <212>DNA <213>马铃薯 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>马铃薯B <400>47 g gca ttg gat tca gat gat gtt gag ttt gtc aag ctt cta ctt aat gag  49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu

1                   5              10                  15 tct gac ata agt tta gat gga gcc tac gct ctt cat tac gct gtt gca    97 Ser Asp Ile Ser Leu Asp Gly Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tat tgt gac ccc aag gtt gtt act gag gtt ctt gga ctg ggt gtt gct    145 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 aat gtc aac ctt cgg aat aca cgt ggt tac act gtg ctt cac att gct    193 Asn Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgt aag gaa ccc tca atc att gta tca ctt ttg act aag gga    241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gct cat gca tca gaa att aca ttg gat ggg cag agt gct gtt ggc atc    289 Ala His Ala Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Gly Ile  

             85                  90                  95 tgt agg agg ctg agt agg cct aag gag tac cat gca aaa aca gaa caa    337 Cys Arg Arg Leu Ser Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 ggc cag gaa gca aac aaa gat cgg gta tgt att gat gtt ttg gag aga    385 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gag atg cgt cac aac cca atg acc gga gat gca tta ttt tct tcc ccc    433 Glu Met Arg His Asn Pro Met Thr Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 atg ttg gcc gat gat ctg ccc atg aaa ctg ctc tac ctt gaa aat cga    481 Met Leu Ala Asp Asp Leu Pro Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctt gct aaa ct                                             498 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>48 <211>165 <212>PRT <213>马铃薯 <400>48 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu   1               5                  10                  15 Ser Asp Ile Ser Leu Asp Gly Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 Asn Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala His Ala Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Gly Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Ser Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Met Arg His Asn Pro Met Thr Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 Met Leu Ala Asp Asp Leu Pro Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>49 <211>477 <212>DNA <213>马铃薯 <220> <221>CDS <222>(2)..(475) <223>马铃薯C <400>49 g gca ctg gac tct gat gat gtt gag ttt gtc aag ctt cta ctt aat gag  49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu

1               5                  10                  15 tct gac ata agt tta gat gga gcc tac gct ctt cat tac gct gtt gca    97 Ser Asp Ile Ser Leu Asp Gly Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 tat tgt gac ccc aag gtt gtt act gag gtt ctt gga ctg ggt gtt gct    145 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 aat gtc aac ctt cgg aat aca cgt ggt tac act gtg ctt cac att gct    193 Asn Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgt aag gaa ccc tca atc att gta tca ctt ttg act aag gga    241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gct cat gca tca gaa att aca ttg gat ggg cag agt gct gtt agc atc    289 Ala His Ala Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 tgt agg agg ctg act agg cct aag gag tac cat gca aaa aca gaa caa   337 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 ggc cag gaa gca aac aaa gat cgg gta tgt att gat gtt ttg gag aga   385 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gag atg cgt cgc aac cca atg acc gga gat gca tta ttt tct tcc ccc   433 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Thr Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 atg aaa cag ctc tac ctt gaa aat aga gtt ggc ctt gct aaa ct        477 Met Lys Gln Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Lys 145                 150                 155 <210>50 <211>158 <212>PRT <213>马铃薯 <400>50 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Asn Glu   1               5                  10                  15 Ser Asp Ile Ser Leu Asp Gly Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Ala

     35                  40                  45 Asn Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Ile Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala His Ala Ser Glu Ile Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Glu Tyr His Ala Lys Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Gln Glu Ala Asn Lys Asp Arg Val Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Met Arg Arg Asn Pro Met Thr Gly Asp Ala Leu Phe Ser Ser Pro

130                 135                 140 Met Lys Gln Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Gly Leu Ala Lys 145                 150                 155 <210>51 <211>501 <212>DNA <213>欧洲油菜 <220> <221>CDS <222>(2)..(499) <223>Canola A <400>51 g gca ttg gat tct gat gat gtt gag ttt gtg aag ttg ctt ttg act gag   49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu

1               5                  10                  15 tca gat atc act cta gat gaa gcc aat ggt ctt cat tac tca gtg gtg     97 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 tat agt gat ccc aaa gtt gtt gcc gag att ctt act ctt gat atg ggt     145 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Thr Leu Asp Met Gly

     35                  40                  45 gat gtc aac cac aga aac tca cgt ggc tac acg gtt ctt cat ctc gca     193 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Leu Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgc aaa gag ccg tcc atc atc ata tct ctt ctc aag aga ggt     241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Arg Gly  65                  70                  75                  80 gcc aat gcg tct ggc ttc acg tgt gat gga cgc agt gcg gtt aat ata     289 Ala Asn Ala Ser Gly Phe Thr Cys Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 tgt aga aga ttg aca act cca aag gat tat cat acg aaa aca gct gcg     337 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Ala

        100                 105                 110 aaa ggg agg gaa gct agt aaa gca cgg tta tgt ata gat ctc ttg gaa     385 Lys Gly Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu

    115                 120                 125 aga gaa gta agg agg aac cct atg gtt gtt gat tca cca atg tgt tcc     433 Arg Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Val Val Asp Ser Pro Met Cys Ser

130                 135                 140 ctt tct atg cct gaa gat ctc caa atg aga ctg tta tac ctt gaa aat     481 Leu Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn 145                 150                 155                 160 cga gtt ggc ctt gct caa ct                                          501 Arg Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>52 <211>166 <212>PRT <213>欧洲油菜 <400>52 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu   1               5                  10                  15 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Thr Leu Asp Met Gly

     35                  40                  45 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Leu Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Arg Gly  65                  70                  75                  80 Ala Asn Ala Ser Gly Phe Thr Cys Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Ala

        100                 105                 110 Lys Gly Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu

    115                 120                 125 Arg Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Val Val Asp Ser Pro Met Cys Ser

130                 135                 140 Leu Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn 145                 150                 155                 160 Arg Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>53 <211>501 <212>DNA <213>欧洲油菜 <220> <221>CDS <222>(2)..(499) <223>Canola B <400>53 g gca ttg gat tct gat gat gtt gag ttt gtg aag ctt ctt ttg acc gag 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu

1               5                  10                  15 tca gat atc act cta gat gaa gcc aat ggt ctt cat tac tca gtg gtg   97 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 tat agt gat ccc aaa gtt gtt gcc gag att ctt act ctt gat atg ggt   145 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Thr Leu Asp Met Gly

     35                  40                  45 gat gtt aac cac aga aac tca cgt ggc tac acg gtt ctg cat ctc gca   193 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Leu Ala

 50                  55                  60 gcc atg cgc aaa gag ccg tcc atc atc ata tct ctt ctc aag aaa ggt   241 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Lys Gly  65                  70                  75                  80 gcc aat gcg tct ggc ttc acc tgt gat gga cgc agt gcg gtt aat ata    289 Ala Asn Ala Ser Gly Phe Thr Cys Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 tgt aga aga ttg aca act cca aag gat tat cat act aaa aca gct gcg    337 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Ala

        100                 105                 110 aaa ggg agg gaa gct agt aaa gca cgg tta tgt ata gat ctc ttg gaa    385 Lys Gly Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu

    115                 120                 125 aga gaa gta agg agg aac cct atg gtt gtt gag tca cca atg tgt tct    433 Arg Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Val Val Glu Ser Pro Met Cys Ser

130                 135                 140 ctt tct atg cct gaa gat ctc caa atg aga ctg tta tac ctt gaa aat    481 Leu Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn 145                 150                 155                 160 cga gtt ggc ctg gct caa ct                                         501 Arg Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>54 <211>166 <212>PRT <213>欧洲油菜 <400>54 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Phe Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu   1               5                  10                  15 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Thr Leu Asp Met Gly

     35                  40                  45 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Leu Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Asn Ala Ser Gly Phe Thr Cys Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ala Ala

        100                 105                 110 Lys Gly Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu

    115                 120                 125 Arg Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Val Val Glu Ser Pro Met Cys Ser

130                 135                 140 Leu Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn 145                 150                 155                 160 Arg Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>55 <211>498 <212>DNA <213>欧洲油菜 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>Canola C <400>55 g gca ctg gat tct gat gat gtt gag ctt gtg aag ctt ctt ttg acc gag 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu

1               5                  10                  15 tca gat atc act cta gat gaa gcc aat ggt ctg cat tac tca gtg gtg   97 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 tat agt gat ccc aaa gtt gtt gca gag ata ctt gcc ctt ggt tta ggt   145 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Ala Leu Gly Leu Gly

     35                  40                  45 gat gtc aat cac aga aac tca cgt ggc tac tcg gtt ctt cat ttc gct   193 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Ser Val Leu His Phe Ala

 50                  55                 60 gcc atg cgt aga gag cct tcc atc atc ata tct ctt ctc aag gaa ggc   241 Ala Met Arg Arg Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Glu Gly  65                  70                  75                  80 gcc aat gcg tct agc ttc act ttt gat gga cgc agt gcg gtt aat ata   289 Ala Asn Ala Ser Ser Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 tgt agg aga ctg aca act cca aag gat tat cat aca aag aca tcc aaa   337 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ser Lys

        100                 105                 110 aag agg gaa gct agt aaa gca agg ctg tgc ata gat ctc ttg gaa aga   385 Lys Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu Arg

    115                 120                 125 gag gtt agg agg aac cct atg ctt gct gat acg cca atg tgt tca ctt   433 Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Leu Ala Asp Thr Pro Met Cys Ser Leu

130                 135                 140 act atg cct gaa gat ctc caa atg aga ctg tta tac ctt gaa aat cga   481 Thr Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggt ctt gct aaa ct                                            498 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>56 <211>165 <212>PRT <213>欧洲油菜 <400>56 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Thr Glu   1               5                  10                  15 Ser Asp Ile Thr Leu Asp Glu Ala Asn Gly Leu His Tyr Ser Val Val

         20                  25                  30 Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Ala Glu Ile Leu Ala Leu Gly Leu Gly

     35                  40                  45 Asp Val Asn His Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Ser Val Leu His Phe Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Arg Glu Pro Ser Ile Ile Ile Ser Leu Leu Lys Glu Gly  65                  70                  75                  80 Ala Asn Ala Ser Ser Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala Val Asn Ile

             85                  90                  95 Cys Arg Arg Leu Thr Thr Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys Thr Ser Lys

        100                 105                 110 Lys Arg Glu Ala Ser Lys Ala Arg Leu Cys Ile Asp Leu Leu Glu Arg

    115                 120                 125 Glu Val Arg Arg Asn Pro Met Leu Ala Asp Thr Pro Met Cys Ser Leu

130                 135                 140 Thr Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Lys

            165 <210>57 <211>498 <212>DNA <213>欧洲油菜 <220> <221>CDS <222>(2)..(496) <223>Canola D <400>57 g gca ctg gac tct gat gat gtt gag ctt gtc aag atg ctt ttg aca gaa 49   Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu Leu Thr Glu

1               5                  10                  15 gga cac acg agt cta gac gac gcc tac gct ctt cac tac gct gtt gca   97 Gly His Thr Ser Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 cat tcc gat gtg aag acg gcc tct gat ctc ata gac ctt gag ctt gcg   145 His Ser Asp Val Lys Thr Ala Ser Asp Leu Ile Asp Leu Glu Leu Ala

     35                  40                  45 gat gtt gac cat aga aac ctg agg ggg tac acg gcg ctt cac gtt gct   193 Asp Val Asp His Arg Asn Leu Arg Gly Tyr Thr Ala Leu His Val Ala

 50                  55                  60 gcg atg agg aac gag ccg aag ctg atg gtt tat tta ttg act aaa ggt   241 Ala Met Arg Asn Glu Pro Lys Leu Met Val Tyr Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 gcg aat gcg tcg gag aca acg ttt gac ggt aga acg gct ctt gtg att   289 Ala Asn Ala Ser Glu Thr Thr Phe Asp Gly Arg Thr Ala Leu Val Ile

             85                  90                  95 gca aaa aga ctc act aaa gct tct gag tat aat gct agt acg gag caa   337 Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Ser Glu Tyr Asn Ala Ser Thr Glu Gln

        100                 105                 110 ggg aag cct tct ctg aaa gga ggg cta tgc ata gag gta cta gag cat   385 Gly Lys Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val Leu Glu His

    115                 120                 125 gcg cgg aaa cta ggt agg ttg cct aga gat ggt tta cct tct ctt cca   433 Ala Arg Lys Leu Gly Arg Leu Pro Arg Asp Gly Leu Pro Ser Leu Pro

130                 135                 140 gct act cct gat gaa ctg agg atg agg ttg ctc tac ctt gaa aat cga   481 Ala Thr Pro Asp Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 gtt ggc ctg gct caa ct                                            498 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>58 <211>165 <212>PRT <213>欧洲油菜 <400>58 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu Leu Thr Glu   1               5                  10                  15 Gly His Thr Ser Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala Val Ala

         20                  25                  30 His Ser Asp Val Lys Thr Ala Ser Asp Leu Ile Asp Leu Glu Leu Ala

     35                  40                  45 Asp Val Asp His Arg Asn Leu Arg Gly Tyr Thr Ala Leu His Val Ala

 50                  55                  60 Ala Met Arg Asn Glu Pro Lys Leu Met Val Tyr Leu Leu Thr Lys Gly  65                  70                  75                  80 Ala Asn Ala Ser Glu Thr Thr Phe Asp Gly Arg Thr Ala Leu Val Ile

             85                  90                  95 Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Ser Glu Tyr Asn Ala Ser Thr Glu Gln

        100                 105                 110 Gly Lys Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val Leu Glu His

    115                 120                 125 Ala Arg Lys Leu Gly Arg Leu Pro Arg Asp Gly Leu Pro Ser Leu Pro

130                 135                 140 Ala Thr Pro Asp Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg 145                 150                 155                 160 Val Gly Leu Ala Gln

            165 <210>59 <211>31 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM3A <400>59 tagatgawgc mtaygctcty caytatgctg t                  31 <210>60 <211>32 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列描述：PCR引物NIM3B <400>60 ggctcyttmc kcatggcagc aayrtgaags ac                 32 <210>61 <211>148 <212>DNA <213>番茄 <220> <221>CDS <222>(4)..(147) <223>番茄B <400>61 tag atg atg cat atg ctc ttc att atg ctg ttg cat att gtg acc cca   48

Met Met His Met Leu Phe Ile Met Leu Leu His Ile Val Thr Pro

  1               5                  10                  15 agg ttg ttg ctg agg ttc ttg gac tgg gtg ttg cta atg tca acc ttc   96 Arg Leu Leu Leu Arg Phe Leu Asp Trp Val Leu Leu Met Ser Thr Phe

             20                  25                  30 gga atg cac gtg gtt aca ctg tcc ttc acg ttg ctg cca tgc gga aag   144 Gly Met His Val Val Thr Leu Ser Phe Thr Leu Leu Pro Cys Gly Lys

         35                  40                  45 agc c                                                             148 Ser <210>62 <211>48 <212>PRT <213>番茄 <400>62 Met Met His Met Leu Phe Ile Met Leu Leu His Ile Val Thr Pro Arg   1               5                  10                  15 Leu Leu Leu Arg Phe Leu Asp Trp Val Leu Leu Met Ser Thr Phe Gly

         20                  25                  30 Met His Val Val Thr Leu Ser Phe Thr Leu Leu Pro Cys Gly Lys Ser

     35                  40                  45 <210>63 <211>2296 <212>DNA <213>甜菜 <220> <221>CDS <222>(113)..(1927) <223>全长甜菜cDNA序列 <400>63 cacacacaca cccgacgccg tatgcgtatc cattctctct cctcaacctc cctttgactt 60 cctcttactc caccatcttc aatgtcgtcg atttccaatc tctaacattc ac atg aca 118

                                                      Met Thr

                                                        1 acc acc tcc aca aca atg gtg atc gat tct cgc acc gct ttc tcc gat   166 Thr Thr Ser Thr Thr Met Val Ile Asp Ser Arg Thr Ala Phe Ser Asp

      5                  10                  15 tcc aac gac atc agc aat ggc agt agc atc tgc tgc gtc gcc gca aca   214 Ser Asn Asp Ile Ser Asn Gly Ser Ser Ile Cys Cys Val Ala Ala Thr

 20                  25                  30 aca act aca aca aca acc gcc gca gaa aac tct ctc tcc ttt act ccc   262 Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Ala Glu Asn Ser Leu Ser Phe Thr Pro  35                  40                  45                  50 gac gcc gcc gct ctt ctc cgc ctc tct gaa aac ctc gac tcg ctt ttc   310 Asp Ala Ala Ala Leu Leu Arg Leu Ser Glu Asn Leu Asp Ser Leu Phe

             55                  60                  65 caa ccc tcg ctt tct ctc tcc gac tcc gac tct ttc gcc gac gct aaa   358 Gln Pro Ser Leu Ser Leu Ser Asp Ser Asp Ser Phe Ala Asp Ala Lys

         70                  75                  80 atc gtc gtt tcc ggt gat tcg cgt gaa gtc gcc gtt cat cgg tgt gtt   406 Ile Val Val Ser Gly Asp Ser Arg Glu Val Ala Val His Arg Cys Val

     85                  90                  95 ctc tcg tct cgg agc tcg ttc ttt cgg tcc gct ttt gct tcg aaa cga   454 Leu Ser Ser Arg Ser Ser Phe Phe Arg Ser Ala Phe Ala Ser Lys Arg

100                 105                 110 gag aag gag aag gag agg gat aaa gag aga gtg gtg aag ctt gag ctt   502 Glu Lys Glu Lys Glu Arg Asp Lys Glu Arg Val Val Lys Leu Glu Leu 115                 120                 125                 130 aag gat tta gct ggt gat ttt gag gtt gga ttt gat tcg gtt gtt gcg   550 Lys Asp Leu Ala Gly Asp Phe Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Ala

            135                 140                 145 gtt tta ggt tat ttg tat agt ggc aaa gtt agg aat ttg cct aga gga   598 Val Leu Gly Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Asn Leu Pro Arg Gly

        150                 155                 160 att tgt gtt tgt gtt gat gag gat tgc tct cat gaa gct tgt cgt cct   646 Ile Cys Val Cys Val Asp Glu Asp Cys Ser His Glu Ala Cys Arg Pro

    165                 170                 175 gct gtt gat ttt gtt gtt gag gtt ctc tat ttg tct cac aaa ttc gag   694 Ala Val Asp Phe Val Val Glu Val Leu Tyr Leu Ser His Lys Phe Glu

180                 185                 190 att gtc gaa ttg gtt tcg ctt tat cag agg cac cta ctg gat att ctt   742 Ile Val Glu Leu Val Ser Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Ile Leu 195                 200                 205                 210 gac aag att gca cca gat gac gtt cta gta gtg tta tct gtc gct gag   790 Asp Lys Ile Ala Pro Asp Asp Val Leu Val Val Leu Ser Val Ala Glu

            215                 220                 225 atg tgt gga aat gcg tgt gac gga ttg ctg gca agg tgt att gac aag   838 Met Cys Gly Asn Ala Cys Asp Gly Leu Leu Ala Arg Cys Ile Asp Lys

        230                 235                 240 att gtg agg tcc gat att gac gta acc acc att gat aaa tcc ttg ccg   886 Ile Val Arg Ser Asp Ile Asp Val Thr Thr Ile Asp Lys Ser Leu Pro

    245                 250                 255 cag aat gtt gtg aaa cag ata atc gac acg cga aag gaa ctt ggg ttt   934 Gln Asn Val Val Lys Gln Ile Ile Asp Thr Arg Lys Glu Leu Gly Phe

260                 265                 270 act gaa cct ggg cgt gtt gag ttt cct gat aag cat gtg aag aga ata   982 Thr Glu Pro Gly Arg Val Glu Phe Pro Asp Lys His Val Lys Arg Ile 275                 280                 285             290 cac aga gct ttg gaa tcc gat gat gta gag tta gtc aga atg ctt tta   1030 His Arg Ala Leu Glu Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Arg Met Leu Leu

            295                 300             305 aaa gag cgc cat aca act cta gat gat gca tat gcc ctt cac tat gct   1078 Lys Glu Arg His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His Tyr Ala

        310                 315             320 gtg gca cat tgt gat gcc aag acc acc acg gag ctt ctt gag ctt ggg   1126 Val Ala His Cys Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Glu Leu Gly

    325                 330                 335 ctt gca gat gtt aat ctt aga aat cta agg ggt cac act gtg cta cat   1174 Leu Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Leu Arg Gly His Thr Val Leu His

340                 345                 350 gtg gca gcc atg aga aaa gag cct aag ata att gta tcc ttg tta acc   1222 Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu Leu Thr 355                 360                 365                 370 aag gga gcc cat ccg tct gat ata aca tca gat gat aaa aaa gca ctg   1270 Lys Gly Ala His Pro Ser Asp Ile Thr Ser Asp Asp Lys Lys Ala Leu

            375                 380                 385 cag ata gca aag aga cta aca aaa gct gtg gac ttc tat aaa act aca   1318 Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Val Asp Phe Tyr Lys Thr Thr

        390                 395                 400 gaa caa gga aaa gat gca cca aag gat cgg ttg tgc att gaa ata ctg   1366 Glu Gln Gly Lys Asp Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu Ile Leu

    405                 410                 415 gag caa gct gaa aga aga gaa cca ttg cta gga gaa ggt tct gtt tct   1414 Glu Gln Ala Glu Arg Arg Glu Pro Leu Leu Gly Glu Gly Ser Val Ser

420                 425                 430 ctt gca aag gca gga gat gat ctg cgt atg aag cta tta tat ctt gaa   1462 Leu Ala Lys Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr Leu Glu 435                 440                 445                 450 aat aga gtt gca ctt gct cgg ttg ctc ttt cca atg gaa gcg aaa gtg   1510 Asn Arg Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala Lys Val

            455                 460                 465 gct atg gat att gct caa gtg gac gga act tct gaa ttc aca ttg tca   1558 Ala Met Asp Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Phe Thr Leu Ser

        470                 475                 480 aag aat ata gct gat gca cga aga aat gcg gtg gac ttg aat gag gct   1606 Lys Asn Ile Ala Asp Ala Arg Arg Asn Ala Val Asp Leu Asn Glu Ala

    485                 490                 495 ccc ttt ata ttg aaa gag gag cat ttg cag agg atg aaa gca ctg tct   1654 Pro Phe Ile Leu Lys Glu Glu His Leu Gln Arg Met Lys Ala Leu Ser

500                 505                 510 aaa act gtt gag ctt ggc aag cgt ttc ttt cca cgc tgc tcc gat gtt   1702 Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Asp Val 515                 520                 525                 530  ctt aat aag att atg gac gcc gaa gat cta tca cag ctt gca ttt tta   1750 Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Glu Asp Leu Ser Gln Leu Ala Phe Leu

            535                 540                 545 gga aaa gat act cca gag gaa cgg caa agg aag aga aaa cga tac ctt   1798 Gly Lys Asp Thr Pro Glu Glu Arg Gln Arg Lys Arg Lys Arg Tyr Leu

        550                 555                 560 gaa ctg caa gac gct tta act aag gct ttt aca gag gac aaa gaa gag   1846 Glu Leu Gln Asp Ala Leu Thr Lys Ala Phe Thr Glu Asp Lys Glu Glu

    565                 570                 575 ttt gac cgt tct aca tta tca tca tcg tcg tcg tcg act cca atg ggg   1894 Phe Asp Arg Ser Thr Leu Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Pro Met Gly

580                 585                 590 agg cca tat ggt aag acc aat ttc aag agg taa ctccttagca gctcaaagtt 1947 Arg Pro Tyr Gly Lys Thr Asn Phe Lys Arg 595                 600                 605 gcatacgacg tcacttgtat aatattcatg tatatgtatg aaaatttctt tttgttctcc 2007 ccttctattg atggccacgg tttcgatctt tttggtctgt attataattt ttgaccgatt 2067 acttgataga attgtattct atacatcttt ataagctcat agtaacacca gatttaggta 2127 ctatccgttg gagacacata ctcttgtgtg cgatgatgaa tcaatcatca gattacatta 2187 cacgagccat ttcctgccat attgtaattc atgtatcaag gtacaaataa atagcgtcgt 2247 ggggttgcac ctcttgcatt atcgaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa             2296 <210>64 <211>604 <212>PRT <213>甜菜 <400>64 Met Thr Thr Thr Ser Thr Thr Met Val Ile Asp Ser Arg Thr Ala Phe   1               5                  10                  15 Ser Asp Ser Asn Asp Ile Ser Asn Gly Ser Ser Ile Cys Cys Val Ala

         20                  25                  30 Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Ala Glu Asn Ser Leu Ser Phe

     35                  40                  45 Thr Pro Asp Ala Ala Ala Leu Leu Arg Leu Ser Glu Asn Leu Asp Ser

 50                  55                  60 Leu Phe Gln Pro Ser Leu Ser Leu Ser Asp Ser Asp Ser Phe Ala Asp  65                  70                  75                  80 Ala Lys Ile Val Val Ser Gly Asp Ser Arg Glu Val Ala Val His Arg

             85                  90                  95 Cys Val Leu Ser Ser Arg Ser Ser Phe Phe Arg Ser Ala Phe Ala Ser

        100                 105                 110 Lys Arg Glu Lys Glu Lys Glu Arg Asp Lys Glu Arg Val Val Lys Leu

    115                 120                 125 Glu Leu Lys Asp Leu Ala Gly Asp Phe Glu Val Gly Phe Asp Ser Val

130                 135                 140 Val Ala Val Leu Gly Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Val Arg Asn Leu Pro 145                 150                 155                 160 Arg Gly Ile Cys Val Cys Val Asp Glu Asp Cys Ser His Glu Ala Cys

            165                 170                 175 Arg Pro Ala Val Asp Phe Val Val Glu Val Leu Tyr Leu Ser His Lys

        180                 185                 190 Phe Glu Ile Val Glu Leu Val Ser Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp

    195                 200                 205 Ile Leu Asp Lys Ile Ala Pro Asp Asp Val Leu Val Val Leu Ser Val

210                 215                 220 Ala Glu Met Cys Gly Asn Ala Cys Asp Gly Leu Leu Ala Arg Cys Ile 225                 230                 235                 240 Asp Lys Ile Val Arg Ser Asp Ile Asp Val Thr Thr Ile Asp Lys Ser

            245                 250                 255 Leu Pro Gln Asn Val Val Lys Gln Ile Ile Asp Thr Arg Lys Glu Leu

        260                 265                 270 Gly Phe Thr Glu Pro Gly Arg Val Glu Phe Pro Asp Lys His Val Lys

    275                 280                 285 Arg Ile His Arg Ala Leu Glu Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Arg Met

290                 295                 300 Leu Leu Lys Glu Arg His Thr Thr Leu Asp Asp Ala Tyr Ala Leu His 305                 310                 315                 320 Tyr Ala Val Ala His Cys Asp Ala Lys Thr Thr Thr Glu Leu Leu Glu

            325                 330                 335 Leu Gly Leu Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Leu Arg Gly His Thr Val

        340                 345                 350 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Ile Ile Val Ser Leu

    355                 360                 365 Leu Thr Lys Gly Ala His Pro Ser Asp Ile Thr Ser Asp Asp Lys Lys

370                 375                 380 Ala Leu Gln Ile Ala Lys Arg Leu Thr Lys Ala Val Asp Phe Tyr Lys 385                 390                 395                 400 Thr Thr Glu Gln Gly Lys Asp Ala Pro Lys Asp Arg Leu Cys Ile Glu

            405                 410                 415 Ile Leu Glu Gln Ala Glu Arg Arg Glu Pro Leu Leu Gly Glu Gly Ser

        420                 425                 430 Val Ser Leu Ala Lys Ala Gly Asp Asp Leu Arg Met Lys Leu Leu Tyr

    435                 440                 445 Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Met Glu Ala

450                 455                 460 Lys Val Ala Met Asp Ile Ala Gln Val Asp Gly Thr Ser Glu Phe Thr 465                 470                 475                 480 Leu Ser Lys Asn Ile Ala Asp Ala Arg Arg Asn Ala Val Asp Leu Asn

        485                     490                 495 Glu Ala Pro Phe Ile Leu Lys Glu Glu His Leu Gln Arg Met Lys Ala

    500                     505                 510 Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser

515                     520                 525 Asp Val Leu Asn Lys Ile Met Asp Ala Glu Asp Leu Ser Gln Leu Ala 530                     535                 540 Phe Leu Gly Lys Asp Thr Pro Glu Glu Arg Gln Arg Lys Arg Lys Arg 545                 550                 555                 560 Tyr Leu Glu Leu Gln Asp Ala Leu Thr Lys Ala Phe Thr Glu Asp Lys

            565                 570                 575 Glu Glu Phe Asp Arg Ser Thr Leu Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Pro

        580                 585                 590 Met Gly Arg Pro Tyr Gly Lys Thr Asn Phe Lys Arg

    595                 600 <210>65 <211>2844 <212>DNA <213>向日葵 <220> <221>CDS <222>(737)..(2512) <223>全长向日葵B cDNA序列 <400>65 gacgataaaa cccctctctc tttttgctac caagaacctt cctactttct tgcaccaaag 60 tttctttgca ggttctttga agcttcttta tcatcatacg ttggtttgat attgtttttg 120 atgcatcttt tcacatgggt tttgcttatt gagtgattat ctgttgtggg tatttgatac 180 aaattgaaaa aaagatgatt agatttggta tttagggttt tggttattga agattttatt 240 aattagggtt tgattagggt ttgattaaga ttcttgtatt ggatgggttg atttagatcc 300 agctgtttgt gggtttcaaa tttttgtttt ggtatttgca tatctcattc taatctattc 360 agaggttgag gttctttagg tttgactttg actttgactt ttgggtactt tcttgtacat 420 gtataatgtt tgatttgatc cattatatgt gttttgtaat tgaatcatag caaattttct 480 tgcctgtata tatatgtttt attgaggatt tggttcaagt tttgaccttt ttgggaaaaa 540 aagtcaaaca catattcttg ttcatgtagt tttgcaaatc aatcatttca caaatctttc 600 tttatgttgg gaatccatct caatcataaa aaagtttctt tctttctttg agttcttgtt 660 agctatgaaa gtttatgatt tgtccttttt gtgataaagt caaaccccta atcatcctgg 720 gactttgact aaatcg atg gcg aat tca tcc gaa ccg tca tca tcc ata agc 772

              Met Ala Asn Ser Ser Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser

                1               5                  10 ttc acc tca tct tca cac ata tct aac ggc gca act agc tac aac ata   820 Phe Thr Ser Ser Ser His Ile Ser Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Asn Ile

     15                  20                  25 ccc cca cca tca atc ccc gag cca cgg tcg aat att gaa atc att ggc   868 Pro Pro Pro Ser Ile Pro Glu Pro Arg Ser Asn Ile Glu Ile Ile Gly

 30                  35                  40 tta aat aga ctc agc aca aac cta gag aag ctc gta ttc gat tca ggt   916 Leu Asn Arg Leu Ser Thr Asn Leu Glu Lys Leu Val Phe Asp Ser Gly  45                  50                  55                  60 tct gaa tct gat tgc aat tac agc gat gct gaa gtt gtt gtt gag ggt   964 Ser Glu Ser Asp Cys Asn Tyr Ser Asp Ala Glu Val Val Val Glu Gly

             65                  70                  75 att tct gta ggc att cat cgg tgt att tta gcc act aga agt acg ttt    1012 Ile Ser Val Gly Ile His Arg Cys Ile Leu Ala Thr Arg Ser Thr Phe

        80                  85                  90 ttt agc gat ttg ttt aag aag aac aaa ggt tgt gta gag aag gac agt    1060 Phe Ser Asp Leu Phe Lys Lys Asn Lys Gly Cys Val Glu Lys Asp Ser

     95                 100                 105 aag ccg aaa tat aac atg agt gat ttg ttg ccg tat ggg agc gtt ggg    1108 Lys Pro Lys Tyr Asn Met Ser Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Ser Val Gly

110                 115                 120 tat gat gcg ttt ctc gtg ttt tta agc tat gtt tat act ggg aaa ctg    1156 Tyr Asp Ala Phe Leu Val Phe Leu Ser Tyr Val Tyr Thr Gly Lys Leu 125                 130                 135                 140 aaa gcg tct cct ccg gag gtt tca acc tgc gtt gat gat ggg tgt ctt    1204 Lys Ala Ser Pro Pro Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Asp Gly Cys Leu

            145                 150                 155 cat gat gct tgt tgg cct gct att aac ttt gct gtt gag ttg act tat   1252 His Asp Ala Cys Trp Pro Ala Ile Asn Phe Ala Val Glu Leu Thr Tyr

        160                 165                 170 gcg tct tcg gtt ttt caa gtt ccg gaa tta gtt tcg ctt ttt cag cgt   1300 Ala Ser Ser Val Phe Gln Val Pro Glu Leu Val Ser Leu Phe Gln Arg

    175                 180                 185 cgt ctt ctc aac ttt gtg gac aag gct ctt gtt gaa gac gtg atc ccg   1348 Arg Leu Leu Asn Phe Val Asp Lys Ala Leu Val Glu Asp Val Ile Pro

190                 195                 200 atc ctt gtt gtg gcc ttt cac tgt cag ttg caa aac gtc tta tct cgt   1396 Ile Leu Val Val Ala Phe His Cys Gln Leu Gln Asn Val Leu Ser Arg 205                 210                 215                 220 tgc att gac cga gta gtt agg tca aag ctc gat act att tcc att gaa   1444 Cys Ile Asp Arg Val Val Arg Ser Lys Leu Asp Thr Ile Ser Ile Glu

            225                 230                 235 aaa gag ctt cca ttt gaa gtc acc caa atg atc aaa tcc att gat aac   1492 Lys Glu Leu Pro Phe Glu Val Thr Gln Met Ile Lys Ser Ile Asp Asn

        240                 245                 250 atc atc caa gaa gat gac gaa cat aca gtc gaa tca gaa gtc gtg tta   1540 Ile Ile Gln Glu Asp Asp Glu His Thr Val Glu Ser Glu Val Val Leu

    255                 260                 265 cgt gaa aag aga att aaa agc ata cac aaa gca tta gac tgt gac gat   1588 Arg Glu Lys Arg Ile Lys Ser Ile His Lys Ala Leu Asp Cys Asp Asp

270                 275                 280 gtt gag ctt gtg aaa atg att tta gac gaa tcc aaa atc acg tta gat   1636 Val Glu Leu Val Lys Met Ile Leu Asp Glu Ser Lys Ile Thr Leu Asp 285                 290                 295                 300 gaa gcc tgc gct ctt cat tat gcg gtc atg tat tgt aat caa gaa gtt   1684 Glu Ala Cys Ala Leu His Tyr Ala Val Met Tyr Cys Asn Gln Glu Val

            305                 310                 315 gct aag gag att ctt aac tta aac cgt gcg gat gtt aat ctt aga aac   1732 Ala Lys Glu Ile Leu Asn Leu Asn Arg Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn

        320                 325                 330 tca cga gat tac acc gtg ctt cat gtt gct gcc atg cgt aaa gaa cca   1780 Ser Arg Asp Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro

    335                 340                 345 tca ctt att gtt tcg att cta agc aaa ggc gcg tgt gca tcg gat act   1828 Ser Leu Ile Val Ser Ile Leu Ser Lys Gly Ala Cys Ala Ser Asp Thr

350                 355                 360 act ttt gat gga caa agt gcg gtt agt att tgc agg aga cga aca agg   1876 Thr Phe Asp Gly Gln Ser Ala Val Ser Ile Cys Arg Arg Arg Thr Arg 365                 370                 375                 380 ccc aag gat tat tat gtg aaa acc gaa cac ggg caa gaa aca aat aaa   1924 Pro Lys Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Glu His Gly Gln Glu Thr Asn Lys

            385                 390                 395 gat cgt ata tgc atc gat gtt ttg gag cgg gaa ata aag agg aat ccg   1972 Asp Arg Ile Cys Ile Asp Val Leu Glu Arg Glu Ile Lys Arg Asn Pro

        400                 405                 410 atg ata ggc gat gtt tcc gtg tgt tct tca gca gtg gct gat gat ttg   2020 Met Ile Gly Asp Val Ser Val Cys Ser Ser Ala Val Ala Asp Asp Leu

    415                 420                 425 cat atg aat tta ctc tac tta gaa aac cga gtg gca ttt gct cga ctg   2068 His Met Asn Leu Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Ala Phe Ala Arg Leu

430                 435                 440 tta ttt ccg tca gaa gcg aaa cta gca atg gaa att gcg cat gcc caa   2116 Leu Phe Pro Ser Glu Ala Lys Leu Ala Met Glu Ile Ala His Ala Gln  445                450                 455                 460 acg act gca cag tat ccg ggt cta ttg gca tcg aaa ggg tca aat ggt   2164 Thr Thr Ala Gln Tyr Pro Gly Leu Leu Ala Ser Lys Gly Ser Asn Gly

            465                 470                 475 aac tta agg gag atg gat ttg aac gag aca ccg ttg gtg cag aac aaa   2212 Asn Leu Arg Glu Met Asp Leu Asn Glu Thr Pro Leu Val Gln Asn Lys

        480                 485                 490 aga ttg ctt tca aga atg gaa gcc ctt tcc cgg aca gtg gaa atg ggt   2260 Arg Leu Leu Ser Arg Met Glu Ala Leu Ser Arg Thr Val Glu Met Gly

    495                 500                 505 agg cga tat ttc cct cat tgt tca gag gtt ctg gat aag ttc atg gag   2308 Arg Arg Tyr Phe Pro His Cys Ser Glu Val Leu Asp Lys Phe Met Glu

510                 515                 520 gac gat cta cag gat ctt ttt atc ctc gag aag ggt acc gaa gaa gaa   2356 Asp Asp Leu Gln Asp Leu Phe Ile Leu Glu Lys Gly Thr Glu Glu Glu 525                 530                 535                 540 caa gaa atc aaa agg acg cga ttt atg gag ctt aaa gaa gat gtc caa   2404 Gln Glu Ile Lys Arg Thr Arg Phe Met Glu Leu Lys Glu Asp Val Gln

            545                 550                 555 aga gcc ttt acc aag gac aag gcc gag ctt cat cgc ggt ttg tcc tca   2452 Arg Ala Phe Thr Lys Asp Lys Ala Glu Leu His Arg Gly Leu Ser Ser

        560                 565                 570 tca atg tac acc ccc aca gtg aga aac ggg tca aag agt aaa gcc cgc   2500 Ser Met Tyr Thr Pro Thr Val Arg Asn Gly Ser Lys Ser Lys Ala Arg

    575                 580                 585 aaa tac tca tga aacccccgtg tttctttgat gatcttttaa cacgctttta       2552 Lys Tyr Ser

590 cgtgcctaat attagaggca aaacatatgt atgaagaaat aatggtggtg catgatgatg 2612 tttagggctc aggtttaggg tttatatgta ctaaattttg tgatttgacg ctaaaaatgc 2672 tatgttgttt tttttttttt ttggataata tggtgtgaaa gctaacgcct tttactagta 2732 gcatgttaat gtttgtgttt gaatcatagt tttttatgca tgtttgtttt acttgcacaa 2792 caactaataa atataatttt tcataataaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa         2844 <210>66 <211>591 <212>PRT <213>向日葵 <400>66 Met Ala Asn Ser Ser Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser Ser   1               5                  10                  15 Ser His Ile Ser Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Asn Ile Pro Pro Pro Ser

         20                  25                  30 Ile Pro Glu Pro Arg Ser Asn Ile Glu Ile Ile Gly Leu Asn Arg Leu

     35                  40                  45 Ser Thr Asn Leu Glu Lys Leu Val Phe Asp Ser Gly Ser Glu Ser Asp

 50                  55                  60 Cys Asn Tyr Ser Asp Ala Glu Val Val Val Glu Gly lle Ser Val Gly  65                  70                  75                  80 Ile His Arg Cys Ile Leu Ala Thr Arg Ser Thr Phe Phe Ser Asp Leu

             85                  90                  95 Phe Lys Lys Asn Lys Gly Cys Val Glu Lys Asp Ser Lys Pro Lys Tyr

        100                 105                 110 Asn Met Ser Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Ser Val Gly Tyr Asp Ala Phe

    115                 120                 125 Leu Val Phe Leu Ser Tyr Val Tyr Thr Gly Lys Leu Lys Ala Ser Pro

130                 135                 140 Pro Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Asp Gly Cys Leu His Asp Ala Cys 145                 150                 155                 160 Trp Pro Ala Ile Asn Phe Ala Val Glu Leu Thr Tyr Ala Ser Ser Val

            165                 170                 175 Phe Gln Val Pro Glu Leu Val Ser Leu Phe Gln Arg Arg Leu Leu Asn

        180                 185                 190 Phe Val Asp Lys Ala Leu Val Glu Asp Val Ile Pro Ile Leu Val Val

    195                 200                 205 Ala Phe His Cys Gln Leu Gln Asn Val Leu Ser Arg Cys Ile Asp Arg

210                 215                 220 Val Val Arg ser Lys Leu Asp Thr Ile Ser Ile Glu Lys Glu Leu Pro   225                 230                 235                 240 Phe Glu Val Thr Gln Met Ile Lys Ser Ile Asp Asn Ile Ile Gln Glu

            245                 250                 255 Asp Asp Glu His Thr Val Glu Ser Glu Val Val Leu Arg Glu Lys Arg

        260                 265                 270 Ile Lys Ser Ile His Lys Ala Leu Asp Cys Asp Asp Val Glu Leu Val

    275                 280                 285 Lys Met Ile Leu Asp Glu Ser Lys Ile Thr Leu Asp Glu Ala Cys Ala

290                 295                 300 Leu His Tyr Ala Val Met Tyr Cys Asn Gln Glu Val Ala Lys Glu Ile 305                 310                 315                 320 Leu Asn Leu Asn Arg Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Ser Arg Asp Tyr

            325                 330                 335 Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Ser Leu Ile Val

        340                 345                 350 Ser Ile Leu Ser Lys Gly Ala Cys Ala Ser Asp Thr Thr Phe Asp Gly

    355                 360                 365 Gln Ser Ala Val Ser Ile Cys Arg Arg Arg Thr Arg Pro Lys Asp Tyr

370                 375                 380 Tyr Val Lys Thr Glu His Gly Gln Glu Thr Asn Lys Asp Arg Ile Cys 385                 390                 395                 400 Ile Asp Val Leu Glu Arg Glu Ile Lys Arg Asn Pro Met Ile Gly Asp

            405                 410                 415 Val Ser Val Cys Ser Ser Ala Val Ala Asp Asp Leu His Met Asn Leu

        420                 425                 430 Leu Tyr Leu Glu Asn Arg Val Ala Phe Ala Arg Leu Leu Phe Pro Ser

    435                 440                 445 Glu Ala Lys Leu Ala Met Glu Ile Ala His Ala Gln Thr Thr Ala Gln

450                 455                 460 Tyr Pro Gly Leu Leu Ala Ser Lys Gly Ser Asn Gly Asn Leu Arg Glu 465                 470                 475                 480 Met Asp Leu Asn Glu Thr Pro Leu Val Gln Asn Lys Arg Leu Leu Ser

            485                 490                 495 Arg Met Glu Ala Leu Ser Arg Thr Val Glu Met Gly Arg Arg Tyr Phe

        500                 505                 510 Pro His Cys Ser Glu Val Leu Asp Lys Phe Met Glu Asp Asp Leu Gln

    515                 520                 525 Asp Leu Phe Ile Leu Glu Lys Gly Thr Glu Glu Glu Gln Glu Ile Lys

530                 535                 540 Arg Thr Arg Phe Met Glu Leu Lys Glu Asp Val Gln Arg Ala Phe Thr 545                 550                 555                 560 Lys Asp Lys Ala Glu Leu His Arg Gly Leu Ser Ser Ser Met Tyr Thr

            565                 570                 575 Pro Thr Val Arg Asn Gly Ser Lys Ser Lys Ala Arg Lys Tyr Ser

        580                 585                 590 <210>67 <211>1477 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(804) <223>AtNMLc2 cDNA序列 <220> <221>misc_特征 <222>(1)..(1477) <223>n＝a、t、c或g <400>67 atg agc aat ctt gaa gaa tct ttg aga tct cta tcg ttg gat ttc ctg  48 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu   1               5                  10                  15 aac cta cta atc aac ggt caa gct ttc tcc gac gtg act ttc agc gtt   96 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

         20                  25                  30 gaa ggt cgt tta gtc cac gct cac cgt tgt atc ctc gcc gca cgg agg   144 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Arg

     35                  40                  45 ctt ttc ttc cgc aaa ttc ttt tgt ggg aca gac tca cca caa cct gtc   192 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

 50                  55                  60 aca ggt ata gac ccg acc caa cat ggg tcc gta ccc gct agc cca aca   240 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr  65                  70                  75                  80 aga ggc tcc acg gcc cca gct gga att ata cca gtg aac tca gtc ggt   288 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly

                     85          90                  95 tat gag gtt ttt ctg ttg cta ctt cag ttt ctt tat agc gga caa gtc   336 Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val

        100                 105                 110 tcc atc gtg ccg cag aaa cac gag cct aga cct aat tgt ggc gag aga   384 Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg

    115                 120                 125 gga tgt tgg cac act cat tgc tca gcc gcc gtt gat ctt gct ctt gat   432 Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp

130                 135                 140 act ctc gcc gcc tct cgt tac ttc ggc gtc gag cag ctc gca ttg ctc   480 Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu 145                 150                 155                 160 acc cag aaa caa ttg gca agc atg gtg gag aaa gcc tct atc gaa gat   528 Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp

            165                 170                 175 gtg atg aaa gtt tta ata gca tca aga aag caa gac atg cat caa tta   576 Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu

        180                 185                 190 tgg acc acc tgc tct cac tta gtt gct aaa tca ggt ctc cca cca gag   624 Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val Ala Lys Ser Gly Leu Pro Pro Glu

    195                 200                 205 att ctt gcc aag cat ctc cct att gac gtc gtc acc aaa ata gaa gag   672 Ile Leu Ala Lys His Leu Pro Ile Asp Val Val Thr Lys Ile Glu Glu

210                 215                 220 ctt cgt ctt aaa tct tct ata gct cgc cgt tct cta atg cct cac aac   720 Leu Arg Leu Lys Ser Ser Ile Ala Arg Arg Ser Leu Met Pro His Asn 225                 230                 235                 240 cac cac cat gat ctc agc ggn gnt caa nac cta aag ntc aaa gtt aga   768 His His His Asp Leu Ser Xaa Xaa Gln Xaa Leu Lys Xaa Lys Val Arg

            245                 250                 255 agg ttg agc cga ctt gga ttc ttc aac gnng aac tag taaagctgat       814 Arg Leu Ser Arg Leu Gly Phe Phe Asn Xaa Asn

        260                 265 ggtaatggan aaggactcca ttcttgatga agtcgtaagc attgcattac cgcttgttaa 874 aagctgtaga agagaagttg tgaagncttt ngcttgaagc ttggaagctg ccgatgtgaa 934 ttatccggcg ggtccggcaa ggnaaancac ctttgcactt cgcgggntga gatggtctct 994 ccagacatgg tggctgttct gttagcccnc catgcttgat cctaatgtga ggacagttgg 1054 tggaatcacg cctcttgata tccttagaac attaacttcg gatttcttgt tcaaggggca 1114 gttcctggat tgactcacat tgaaccgaat aaacttaggc tttgcctcga gcttgttcaa 1174 tccgctgcaa tggtgatatc tcgagaagaa ggaaacaata gcaacaacca aaacaatgat 1234 aacaataccg ggatttaccc tcatatgaat gaggagcaca atagtggaag cagtggaggg 1294 agcaataaca atttggattc aagattggtt tatctcaatc ttggagcagg tacgggtcag 1354 atgggtccag gtcgagatca aggggatgac cataacagtc agagggaagg tatgagtcgg 1414 catcatcatc atcatcaaga cccatctaca atgtatcatc accatcatca acatcacttc 1474 tag                                                               1477 <210>68 <211>267 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>68 Met Ser Asn Leu Glu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Ser Leu Asp Phe Leu   1               5                  10                  15 Asn Leu Leu Ile Asn Gly Gln Ala Phe Ser Asp Val Thr Phe Ser Val

         20                  25                  30 Glu Gly Arg Leu Val His Ala His Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Arg

     35                  40                  45 Leu Phe Phe Arg Lys Phe Phe Cys Gly Thr Asp Ser Pro Gln Pro Val

 50                  55                  60 Thr Gly Ile Asp Pro Thr Gln His Gly Ser Val Pro Ala Ser Pro Thr  65                  70                  75                  80 Arg Gly Ser Thr Ala Pro Ala Gly Ile Ile Pro Val Asn Ser Val Gly

             85                  90                  95 Tyr Glu Val Phe Leu Leu Leu Leu Gln Phe Leu Tyr Ser Gly Gln Val

        100                 105                 110 Ser Ile Val Pro Gln Lys His Glu Pro Arg Pro Asn Cys Gly Glu Arg

    115                 120                 125 Gly Cys Trp His Thr His Cys Ser Ala Ala Val Asp Leu Ala Leu Asp

130                 135                 140 Thr Leu Ala Ala Ser Arg Tyr Phe Gly Val Glu Gln Leu Ala Leu Leu 145                 150                 155                 160 Thr Gln Lys Gln Leu Ala Ser Met Val Glu Lys Ala Ser Ile Glu Asp

            165                 170                 175 Val Met Lys Val Leu Ile Ala Ser Arg Lys Gln Asp Met His Gln Leu

        180                 185                 190 Trp Thr Thr Cys Ser His Leu Val Ala Lys Ser Gly Leu Pro Pro Glu

    195                 200                 205 Ile Leu Ala Lys His Leu Pro Ile Asp Val Val Thr Lys Ile Glu Glu

210                 215                 220 Leu Arg Leu Lys Ser Ser Ile Ala Arg Arg Ser Leu Met Pro His Asn 225                 230                 235                 240 His His His Asp Leu Ser Xaa Xaa Gln Xaa Leu Lys Xaa Lys Val Arg

            245                 250                 255 Arg Leu Ser Arg Leu Gly Phe Phe Asn Xaa Asn

        260                 265 <210>69 <211>1725 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(1)..(1725) <223>AtNMLC4-1 cDNA序列 <400>69 atg gct gca act gca ata gag cca tct tca tct ata agt ttc aca tct   48 Met Ala Ala Thr Ala Ile Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser   1               5                  10                  15 tct cac tta tca aac cct tct cct gtt gtt act act tat cac tca gct   96 Ser His Leu Ser Asn Pro Ser Pro Val Val Thr Thr Tyr His Ser Ala

         20                  25                  30 gcc aat ctt gaa gag ctc agc tct aac ttg gag cag ctt ctc act aat   144 Ala Asn Leu Glu Glu Leu Ser Ser Asn Leu Glu Gln Leu Leu Thr Asn

     35                  40                  45 cca gat tgc gat tac act gac gca gag atc atc att gaa gaa gaa gct   192 Pro Asp Cys Asp Tyr Thr Asp Ala Glu Ile Ile Ile Glu Glu Glu Ala

 50                  55                  60 aac cct gtg agt gtt cat aga tgt gtt tta gct gct agg agc aag ttt   240 Asn Pro Val Ser Val His Arg Cys Val Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe  65                  70                  75                  80 ttt ctt gat ctg ttt aag aaa gat aaa gat agt agt gag aag aaa cct   288 Phe Leu Asp Leu Phe Lys Lys Asp Lys Asp Ser Ser Glu Lys Lys Pro

             85                  90                  95 aag tat caa atg aaa gat tta tta cca tat gga aat gtg gga cgt gag   336 Lys Tyr Gln Met Lys Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Asn Val Gly Arg Glu

        100                 105                 110 gca ttt ctg cat ttc ttg agc tat atc tac act ggg agg tta aag cct   384 Ala Phe Leu His Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr Gly Arg Leu Lys Pro

    115                 120                 125 ttt cct atc gag gtt tca act tgt gtt gat tca gtt tgt gct cat gat   432 Phe Pro Ile Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Ser Val Cys Ala His Asp

130                 135                 140 tct tgt aaa ccg gcc att gat ttt gct gtt gag ttg atg tat gct tca   480 Ser Cys Lys Pro Ala Ile Asp Phe Ala Val Glu Leu Met Tyr Ala Ser 145                 150                 155                 160 ttt gtg ttc caa atc ccg gat ctt gtt tcg tca ttt cag cgg aag ctt   528 Phe Val Phe Gln Ile Pro Asp Leu Val Ser Ser Phe Gln Arg Lys Leu

            165                 170                 175 cgt aac tat gtt gag aag tca cta gta gag aat gtt ctt cct atc ctc   576 Arg Asn Tyr Val Glu Lys Ser Leu Val Glu Asn Val Leu Pro Ile Leu

        180                 185                 190 tta gtt gcg ttt cat tgt gat ttg aca cag ctt ctt gat caa tgc att   624 Leu Val Ala Phe His Cys Asp Leu Thr Gln Leu Leu Asp Gln Cys Ile

    195                 200                 205 gag aga gtg gcg aga tca gac tta gac aga ttc tgt atc gaa aag gag   672 Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Asp Arg Phe Cys Ile Glu Lys Glu

210                 215                 220 ctt cct tta gaa gta ttg gaa aaa atc aaa cag ctt cga gtt aag tcg   720 Leu Pro Leu Glu Val Leu Glu Lys Ile Lys Gln Leu Arg Val Lys Ser 225                 230                 235                 240 gtg aac ata ccc gag gtg gag gat aaa tcg ata gag aga aca ggg aaa   768 Val Asn Ile Pro Glu Val Glu Asp Lys Ser Ile Glu Arg Thr Gly Lys

            245                 250                 255 gta ctc aag gca ttg gat tca gat gat gta gaa ctc gtg aag ctt ctt   816 Val Leu Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

        260                 265                 270 ttg act gag tca gat ata act cta gac caa gcc aat ggt cta cat tat   864 Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr

    275                 280                 285 gca gtg gca tac agt gat ccg aaa gtt gtg aca cag gtt ctt gat cta   912 Ala Val Ala Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Thr Gln Val Leu Asp Leu

290                 295                 300 gat atg gct gat gtt aat ttc aga aat tcc agg ggg tat acg gtt ctt   960 Asp Met Ala Asp Val Asn Phe Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu 305                 310                 315                 320 cat att gct gct atg cgt aga gag cca aca att atc ata cca ctt att   1008 His Ile Ala Ala Met Arg Arg Glu Pro Thr Ile Ile Ile Pro Leu Ile

            325                 330                 335 caa aaa gga gct aat gct tca gat ttc acg ttt gat gga cgc agt gcg   1056 Gln Lys Gly Ala Asn Ala Ser Asp Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala

        340                 345                 350 gta aat ata tgt agg aga ctc act agg ccg aaa gat tat cat acc aaa   1104 Val Asn Ile Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys

    355                 360                 365 acc tca agg aaa gaa cct agt aaa tac cgc tta tgc atc gat atc ttg   1152 Thr Ser Arg Lys Glu Pro Ser Lys Tyr Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu

370                 375                 380 gaa agg gaa att aga agg aat cca ttg gtt agt ggg gat aca ccc act   1200 Glu Arg Glu Ile Arg Arg Asn Pro Leu Val Ser Gly Asp Thr Pro Thr 385                 390                 395                 400 tgt tcc cat tcg atg ccc gag gat ctc caa atg agg ttg tta tac tta   1248 Cys Ser His Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu

            405                 410                 415 gaa aag cga gtg gga ctt gct cag ttg ttc ttc cca gca gaa gcc aat   1296 Glu Lys Arg Val Gly Leu Ala Gln Leu Phe Phe Pro Ala Glu Ala Asn

        420                 425                 430 gtg gct atg gac gtt gct aat gtt gaa ggg aca agc gag tgc aca ggt   1344 Val Ala Met Asp Val Ala Asn Val Glu Gly Thr Ser Glu Cys Thr Gly

    435                 440                 445 ctt cta act cca cct cca tca aat gat aca act gaa aac ttg ggt aaa   1392 Leu Leu Thr Pro Pro Pro Ser Asn Asp Thr Thr Glu Asn Leu Gly Lys

450                 455                 460 gtc gat tta aat gaa acg cct tat gtg caa acg aaa aga atg ctt aca   1440 Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro Tyr Val Gln Thr Lys Arg Met Leu Thr 465                 470                 475                 480 cgt atg aaa gcc ctc atg aaa aca gtt gag aca ggt cgg aga tac ttc    1488 Arg Met Lys Ala Leu Met Lys Thr Val Glu Thr Gly Arg Arg Tyr Phe

            485                 490                 495 cca tct tgt tat gag gtt ctg gat aag tac atg gat cag tat atg gac    1536 Pro Ser Cys Tyr Glu Val Leu Asp Lys Tyr Met Asp Gln Tyr Met Asp

        500                 505                 510 gaa gaa atc cct gat atg tcg tat ccc gag aaa ggc act gtg aaa gag    1584 Glu Glu Ile Pro Asp Met Ser Tyr Pro Glu Lys Gly Thr Val Lys Glu

    515                 520                 525 aga aga cag aag agg atg aga tat aac gag ctg aag aac gac gtt aaa    1632 Arg Arg Gln Lys Arg Met Arg Tyr Asn Glu Leu Lys Asn Asp Val Lys

530                 535                 540 aaa gca tat agc aaa gac aaa gtc gcg cgg tct tgt ctt tct tct tca    1680 Lys Ala Tyr Ser Lys Asp Lys Val Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ser Ser 545                 550                 555                 560 tca cca gct tct tct ctt aga gaa gcc tta gag aat cca aca tga        1725 Ser Pro Ala Ser Ser Leu Arg Glu Ala Leu Glu Asn Pro Thr

            565                 570                 575 <210>70 <211>574 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>70 Met Ala Ala Thr Ala Ile Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser   1               5                  10                  15 Ser His Leu Ser Asn Pro Ser Pro Val Val Thr Thr Tyr His Ser Ala

         20                  25                  30 Ala Asn Leu Glu Glu Leu Ser Ser Asn Leu Glu Gln Leu Leu Thr Asn

     35                  40                  45 Pro Asp Cys Asp Tyr Thr Asp Ala Glu Ile Ile Ile Glu Glu Glu Ala

 50                  55                  60 Asn Pro Val Ser Val His Arg Cys Val Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe  65                  70                  75                  80 Phe Leu Asp Leu Phe Lys Lys Asp Lys Asp Ser Ser Glu Lys Lys Pro

             85                  90                  95 Lys Tyr Gln Met Lys Asp Leu Leu Pro Tyr Gly Asn Val Gly Arg Glu

        100                 105                 110 Ala Phe Leu His Phe Leu Ser Tyr Ile Tyr Thr Gly Arg Leu Lys Pro

    115                 120                 125 Phe Pro Ile Glu Val Ser Thr Cys Val Asp Ser Val Cys Ala His Asp

130                 135                 140 Ser Cys Lys Pro Ala Ile Asp Phe Ala Val Glu Leu Met Tyr Ala Ser 145                 150                 155                 160 Phe Val Phe Gln Ile Pro Asp Leu Val Ser Ser Phe Gln Arg Lys Leu

            165                 170                 175 Arg Asn Tyr Val Glu Lys Ser Leu Val Glu Asn Val Leu Pro Ile Leu

        180                 185                 190 Leu Val Ala Phe His Cys Asp Leu Thr Gln Leu Leu Asp Gln Cys Ile

    195                 200                 205 Glu Arg Val Ala Arg Ser Asp Leu Asp Arg Phe Cys Ile Glu Lys Glu

210                 215                 220 Leu Pro Leu Glu Val Leu Glu Lys Ile Lys Gln Leu Arg Val Lys Ser 225                 230                 235                 240 Val Asn Ile Pro Glu Val Glu Asp Lys Ser Ile Glu Arg Thr Gly Lys

            245                 250                 255 Val Leu Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

        260                 265                 270 Leu Thr Glu Ser Asp Ile Thr Leu Asp Gln Ala Asn Gly Leu His Tyr

    275                 280                 285 Ala Val Ala Tyr Ser Asp Pro Lys Val Val Thr Gln Val Leu Asp Leu

290                 295                 300 Asp Met Ala Asp Val Asn Phe Arg Asn Ser Arg Gly Tyr Thr Val Leu 305                 310                 315                 320 His Ile Ala Ala Met Arg Arg Glu Pro Thr Ile Ile Ile Pro Leu Ile

            325                 330                 335 Gln Lys Gly Ala Asn Ala Ser Asp Phe Thr Phe Asp Gly Arg Ser Ala

        340                 345                 350 Val Asn Ile Cys Arg Arg Leu Thr Arg Pro Lys Asp Tyr His Thr Lys

    355                 360                 365 Thr Ser Arg Lys Glu Pro Ser Lys Tyr Arg Leu Cys Ile Asp Ile Leu

370                 375                 380 Glu Arg Glu Ile Arg Arg Asn Pro Leu Val Ser Gly Asp Thr Pro Thr 385                 390                 395                 400 Cys Ser His Ser Met Pro Glu Asp Leu Gln Met Arg Leu Leu Tyr Leu

            405                 410                 415 Glu Lys Arg Val Gly Leu Ala Gln Leu Phe Phe Pro Ala Glu Ala Asn

        420                 425                 430 Val Ala Met Asp Val Ala Asn Val Glu Gly Thr Ser Glu Cys Thr Gly

    435                 440                 445 Leu Leu Thr Pro Pro Pro Ser Asn Asp Thr Thr Glu Asn Leu Gly Lys

450                 455                 460 Val Asp Leu Asn Glu Thr Pro Tyr Val Gln Thr Lys Arg Met Leu Thr 465                 470                 475                 480 Arg Met Lys Ala Leu Met Lys Thr Val Glu Thr Gly Arg Arg Tyr Phe

            485                 490                 495 Pro Ser Cys Tyr Glu Val Leu Asp Lys Tyr Met Asp Gln Tyr Met Asp

        500                 505                 510 Glu Glu Ile Pro Asp Met Ser Tyr Pro Glu Lys Gly Thr Val Lys Glu

    515                 520                 525 Arg Arg Gln Lys Arg Met Arg Tyr Asn Glu Leu Lys Asn Asp Val Lys

530                 535                 540 Lys Ala Tyr Ser Lys Asp Lys Val Ala Arg Ser Cys Leu Ser Ser Ser 545                 550                 555                 560 Ser Pro Ala Ser Ser Leu Arg Glu Ala Leu Glu Asn Pro Thr

            565                 570 <210>71 <211>1818 <212>DNA <213>鼠耳芥 <220> <221>CDS <222>(13)..(1818) <223>AtNMLc4-2 cDNA序列 <400>71 gccgatctcg tg atg atg gcc acc acc acc acc acc acc acc gct aga ttc 51

          Met Met Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Arg Phe

            1               5                  10 tct gat tca tac gag ttc agc aac aca agc ggc aat agc ttc ttc gcc    99 Ser Asp Ser Tyr Glu Phe Ser Asn Thr Ser Gly Asn Ser Phe Phe Ala

 15                  20                  25 gcc gag tca tct ctt gat tat ccg acg gaa ttt ctc acg cca ccg gag    147 Ala Glu Ser Ser Leu Asp Tyr Pro Thr Glu Phe Leu Thr Pro Pro Glu  30                  35                  40                  45 gta tca gct ctt aaa ctt ctg tct aac tgc ctc gag tct gtt ttc gac    195 Val Ser Ala Leu Lys Leu Leu Ser Asn Cys Leu Glu Ser Val Phe Asp

             50                  55                  60 tcg ccg gag acg ttc tac agc gat gct aag cta gtt ctc gcc ggc ggc    243 Ser Pro Glu Thr Phe Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ala Gly Gly

         65                  70                  75 cgg gaa gtt tct ttt cac cgt tgt att ctt tcc gcg aga att cct gtc    291 Arg Glu Val Ser Phe His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ile Pro Val

     80                  85                  90 ttc aaa agc gct tta gcc acc gtg aag gaa caa aaa tcc tcc acc acc    339 Phe Lys Ser Ala Leu Ala Thr Val Lys Glu Gln Lys Ser Ser Thr Thr

 95                 100                 105 gtg aag ctc cag ctg aaa gag atc gcc aga gat tac gaa gtc ggc ttt    387 Val Lys Leu Gln Leu Lys Glu Ile Ala Arg Asp Tyr Glu Val Gly Phe 110                 115                 120                 125 gac tcg gtt gtg gcg gtt ttg gcg tat gtt tac agc ggc aga gtg agg    435 Asp Ser Val Val Ala Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg

            130                 135                 140 tcc ccg ccg aag gga gct tct gct tgc gta gac gac gat tgt tgc cac    483 Ser Pro Pro Lys Gly Ala Ser Ala Cys Val Asp Asp Asp Cys Cys His

        145                 150                 155 gtg gct tgc cgg tca aag gtg gat ttc atg gtg gag gtt ctt tat ctg    531 Val Ala Cys Arg Ser Lys Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu

    160                 165                 170 tct ttc gtt ttc cag att caa gaa tta gtt act ctg tat gag agg cag    579 Ser Phe Val Phe Gln Ile Gln Glu Leu Val Thr Leu Tyr Glu Arg Gln

175                 180                 185 ttc ttg gaa att gta gac aaa gtt gta gtc gaa gac atc ttg gtt ata    627 Phe Leu Glu Ile Val Asp Lys Val Val Val Glu Asp Ile Leu Val Ile 190                 195                 200                 205 ttc aag ctt gat act cta tgt ggt aca aca tac aag aag ctt ttg gat    675 Phe Lys Leu Asp Thr Leu Cys Gly Thr Thr Tyr Lys Lys Leu Leu Asp

            210                 215                 220 aga tgc ata gaa att atc gtg aag tct gat ata gaa cta gtt agt ctt    723 Arg Cys Ile Glu Ile Ile Val Lys Ser Asp Ile Glu Leu Val Ser Leu

        225                 230                 235 gag aag tct tta cct caa cac att ttc aag caa atc ata gac atc cgc    771 Glu Lys Ser Leu Pro Gln His Ile Phe Lys Gln Ile Ile Asp Ile Arg

    240                 245                 250 gaa gcg ctc tgt cta gag cca cct aaa cta gaa agg cat gtc aag aac   819 Glu Ala Leu Cys Leu Glu Pro Pro Lys Leu Glu Arg His Val Lys Asn

255                 260                 265 ata tac aag gcg cta gac tca gat gat gtt gag ctt gtc aag atg ctt   867 Ile Tyr Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu 270                 275                 280                 285 ttg cta gaa gga cac acc aat ctc gat gag gcg tat gct ctt cat ttt   915 Leu Leu Glu Gly His Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe

            290                 295                 300 gct atc gct cac tgc gct gtg aag acc gcg tat gat ctc ctc gag ctt   963 Ala Ile Ala His Cys Ala Val Lys Thr Ala Tyr Asp Leu Leu Glu Leu

        305                 310                 315 gag ctt gcg gat gtt aac ctt aga aat ccg agg gga tac act gtg ctt   1011 Glu Leu Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu

    320                 325                 330 cat gtt gct gcg atg cgg aag gag ccg aag ttg ata ata tct ttg tta   1059 His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Leu Ile Ile Ser Leu Leu

335                 340                 345 atg aaa ggg gca aat att tta gac aca aca ttg gat ggt aga acc gct   1107 Met Lys Gly Ala Asn Ile Leu Asp Thr Thr Leu Asp Gly Arg Thr Ala 350                 355                 360                 365 tta gtg att gta aaa cga ctc act aaa gcg gat gac tac aaa act agt   1155 Leu Val Ile Val Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Asp Tyr Lys Thr Ser

            370                 375                 380 acg gag gac ggt acg cct tct ctg aaa ggc gga tta tgc ata gag gta   1203 Thr Glu Asp Gly Thr Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val

        385                 390                 395 ctt gag cat gaa caa aaa cta gaa tat ttg tcg cct ata gag gct tca   1251 Leu Glu His Glu Gln Lys Leu Glu Tyr Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ser

    400                 405                 410 ctt tct ctt cca gta act cca gag gag ttg agg atg agg ttg ctc tat   1299 Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Glu Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr

415                 420                 425 tat gaa aac cga gtt gca ctt gct cga ctt ctc ttt cca gtg gaa act   1347 Tyr Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Val Glu Thr 430                 435                 440                 445 gaa act gta cag ggt att gcc aaa ttg gag gaa aca tgc gag ttt aca   1395 Glu Thr Val Gln Gly Ile Ala Lys Leu Glu Glu Thr Cys Glu Phe Thr

            450                 455                 460 gct tct agt ctc gag cct gat cat cac att ggt gaa aag cgg aca tca   1443 Ala Ser Ser Leu Glu Pro Asp His His Ile Gly Glu Lys Arg Thr Ser

        465                 470                 475 Cta gac cta aat atg gcg ccg ttc caa atc cat gag aag cat ttg agt   1491 Leu Asp Leu Asn Met Ala Pro Phe Gln Ile His Glu Lys His Leu Ser

    480                 485                 490 aga cta aga gca ctt tgt aaa acc gtg gaa ctg ggg aaa cgc tacttc    1539 Arg Leu Arg Ala Leu Cys Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Tyr Phe

495                 500                 505 aaa cga tgt tcg ctt gat cac ttt atg gat act gag gac ttg aat cat   1587 Lys Arg Cys Ser Leu Asp His Phe Met Asp Thr Glu Asp Leu Asn His 510                 515                 520                 525 ctt gct agc gta gaa gaa gat act cct gag aaa cgg cta caa aag aag   1635 Leu Ala Ser Val Glu Glu Asp Thr Pro Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys

            530                 535                 540 caa agg tac atg gaa cta caa gag act ctg atg aag acc ttt agt gag   1683 Gln Arg Tyr Met Glu Leu Gln Glu Thr Leu Met Lys Thr Phe Ser Glu

        545                 550                 555 gac aag gag gaa tgt gga aag tct tcc aca ccg aaa cca acc tct gcg   1731 Asp Lys Glu Glu Cys Gly Lys Ser Ser Thr Pro Lys Pro Thr Ser Ala

    560                 565                 570 gtg agg tct aat aga aaa ctc tct cac cgg cgc cta aaa gtg gac aaa   1779 Val Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys

575                 580                 585 cgg gat ttt ttg aaa cga cct tac ggg aac ggg gat taa               1818 Arg Asp Phe Leu Lys Arg Pro Tyr Gly Asn Gly Asp 590                 595                 600 <210>72 <211>601 <212>PRT <213>鼠耳芥 <400>72 Met Met Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Arg Phe Ser Asp Ser   1               5                  10                  15 Tyr Glu Phe Ser Asn Thr Ser Gly Asn Ser Phe Phe Ala Ala Glu Ser

         20                  25                  30 Ser Leu Asp Tyr Pro Thr Glu Phe Leu Thr Pro Pro Glu Val Ser Ala

     35                  40                   45 Leu Lys Leu Leu Ser Asn Cys Leu Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Glu

 50                  55                  60 Thr Phe Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ala Gly Gly Arg Glu Val  65                  70                  75                  80 Ser Phe His Arg Cys Ile Leu Ser Ala Arg Ile Pro Val Phe Lys Ser

             85                  90                  95 Ala Leu Ala Thr Val Lys Glu Gln Lys Ser Ser Thr Thr Val Lys Leu

        100                 105                 110 Gln Leu Lys Glu Ile Ala Arg Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val

    115                 120                 125 Val Ala Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Gly Arg Val Arg Ser Pro Pro

130                 135                 140 Lys Gly Ala Ser Ala Cys Val Asp Asp Asp Cys Cys His Val Ala Cys 145                 150                 155                 160 Arg Ser Lys Val Asp Phe Met Val Glu Val Leu Tyr Leu Ser Phe Val

            165                 170                 175 Phe Gln Ile Gln Glu Leu Val Thr Leu Tyr Glu Arg Gln Phe Leu Glu

        180                 185                 190 Ile Val Asp Lys Val Val Val Glu Asp Ile Leu Val Ile Phe Lys Leu

    195                 200                 205 Asp Thr Leu Cys Gly Thr Thr Tyr Lys Lys Leu Leu Asp Arg Cys Ile

210                 215                 220 Glu Ile Ile Val Lys Ser Asp Ile Glu Leu Val Ser Leu Glu Lys Ser 225                 230                 235                 240 Leu Pro Gln His Ile Phe Lys Gln Ile Ile Asp Ile Arg Glu Ala Leu

            245                 250                 255 Cys Leu Glu Pro Pro Lys Leu Glu Arg His Val Lys Asn Ile Tyr Lys

        260                 265                 270 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Met Leu Leu Leu Glu

    275                 280                 285 Gly His Thr Asn Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Phe Ala Ile Ala

290                 295                 300 His Cys Ala Val Lys Thr Ala Tyr Asp Leu Leu Glu Leu Glu Leu Ala 305                 310                 315                 320 Asp Val Asn Leu Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala

            325                 330                 335 Ala Met Arg Lys Glu Pro Lys Leu Ile Ile Ser Leu Leu Met Lys Gly

        340                 345                 350 Ala Asn Ile Leu Asp Thr Thr Leu Asp Gly Arg Thr Ala Leu Val Ile

    355                 360                 365 Val Lys Arg Leu Thr Lys Ala Asp Asp Tyr Lys Thr Ser Thr Glu Asp

370                 375                 380 Gly Thr Pro Ser Leu Lys Gly Gly Leu Cys Ile Glu Val Leu Glu His 385                 390                 395                 400 Glu Gln Lys Leu Glu Tyr Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ser Leu Ser Leu

            405                 410                 415 Pro Val Thr Pro Glu Glu Leu Arg Met Arg Leu Leu Tyr Tyr Glu Asn

        420                 425                 430 Arg Val Ala Leu Ala Arg Leu Leu Phe Pro Val Glu Thr Glu Thr Val

    435                 440                 445 Gln Gly Ile Ala Lys Leu Glu Glu Thr Cys Glu Phe Thr Ala Ser Ser

450                 455                 460 Leu Glu Pro Asp His His Ile Gly Glu Lys Arg Thr Ser Leu Asp Leu 465                 470                 475             480 Asn Met Ala Pro Phe Gln Ile His Glu Lys His Leu Ser Arg Leu Arg

            485                 490                 495 Ala Leu Cys Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Tyr Phe Lys Arg Cys

        500                 505                     510 Ser Leu Asp His Phe Met Asp Thr Glu Asp Leu Asn His Leu Ala Ser

    515                 520                 525 Val Glu Glu Asp Thr Pro Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr

530                 535                 540 Met Glu Leu Gln Glu Thr Leu Met Lys Thr Phe Ser Glu Asp Lys Glu 545                 550                 555                 560 Glu Cys Gly Lys Ser Ser Thr Pro Lys Pro Thr Ser Ala Val Arg Ser

            565                 570                 575 Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Leu Lys Val Asp Lys Arg Asp Phe

        580                 585                 590 Leu Lys Arg Pro Tyr Gly Asn Gly Asp

    595                 600 <210>73 <211>2673 <212>DNA <213>烟草 <220> <221>CDS <222>(661)..(1767) <223>全长烟草B cDNA序列 <220> <221>misc_特征 <222>(1)..(2673) <223>n＝a、t、c或g <400>73 tcgagcggcc gcccgggcag gtaaactcta acccttttaa tctttttttg gttgcatttc 60 ggatctaacc tcaggaaaaa aaacagtatt tttagcctct gcaattgcaa attttctcgt 120 ttttttagcc gaagtgaatg ttattccaat tgggtaagct gtgatcaagc agttgaagtt 180 ttttgttgca aaatttgcca gttatcttga ctttttgtga agttggtaaa tttttcattt 240 gggtaagttg tgatcaagca gttgaagatt tgcactttgt attcttactg tgaaattgca 300 gttttgttga ttatagatgg ggtggaattg ttaatttctt ctaaagtttt aaagggttga 360 tttggtttta cctgaaatag ggagaatatg acttgtagtt ttggaatttg cttcttttct 420 tggtctgcat agttgaatgt tattagaaaa cttatggaaa gttttggtca aacttttgtc 480 ctttgagaag aatttcttgt attggtgatt ggttatggtc ttggagaggt tctttttttt 540 tttgcataga gcctgtgcgg agaatattat acatggttaa aaacattaga ttttctggac 600 tttgactatc ttagatgtag ataaattttg tatatgtttt tagaccatta gaattgggaa 660 atg gct tgt tct gct gaa cca tca tca tct ata agc ttt act tca tct   708 Met Ala Cys Ser Ala Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser Ser   1               5                  10                  15 tcc att aca tcg aat ggg tcg att ggc gtt ggc caa aac act cat gct    756 Ser Ile Thr Ser Asn Gly Ser Ile Gly Val Gly Gln Asn Thr His Ala

         20                  25                  30 tat ggc ggc tct gag aca ggg agt agt tat gaa atc atc agc ttg agt    804 Tyr Gly Gly Ser Glu Thr Gly Ser SerTyr Glu Ile Ile Ser Leu Ser

     35                  40                 45 aaa ctc agt aac aat tta gag caa ctc ttg tca gat tcc agc tct gat    852 Lys Leu Ser Asn Asn Leu Glu Gln Leu Leu Ser Asp Ser Ser Ser Asp

 50                  55                  60 ttt act gat gct gag att gtt gtt gag ggt gtt tca ctt ggt gtt cac    900 Phe Thr Asp Ala Glu Ile Val Val Glu Gly Val Ser Leu Gly Val His  65                  70                  75                  80 cgt tgt ata tta gct gcc agg agt aaa ttt ttt cag gat ctt ttt agg    948 Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe Phe Gln Asp Leu Phe Arg

             85                  90                  95 aaa gag aag gga agt tgt gga aag gaa ggt aaa cca aga tat tct atg    996 Lys Glu Lys Gly Ser Cys Gly Lys Glu Gly Lys Pro Arg Tyr Ser Met

        100                 105                 110 acc gat att ttg cct tat ggt aag gtt gga tat gag gct ttc gtt acc    1044 Thr Asp Ile Leu Pro Tyr Gly Lys Val Gly Tyr Glu Ala Phe Val Thr

    115                 120                 125 ttc cta agc tat ttg tac tca gga aaa ttg aag cat ttc cct ccg gag    1092 Phe Leu Ser Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Leu Lys His Phe Pro Pro Glu

130                 135                 140 gta tca aca tgt atg gac act ata tgt gct cat gac tct tgc aga cca    1140 Val Ser Thr Cys Met Asp Thr Ile Cys Ala His Asp Ser Cys Arg Pro 145                 150                 155                 160 gca att aat ttt agt gtg gag ttg atg tat gcc tct tcc atg ttt cag    1188 Ala Ile Asn Phe Ser Val Glu Leu Met Tyr Ala Ser Ser Met Phe Gln

            165                 170                 175 gtt cca gag cta gta tca ctt ttc ctg aga cgc ctt atc aat ttt gtt    1236 Val Pro Glu Leu Val Ser Leu Phe Leu Arg Arg Leu Ile Asn Phe Val

        180                 185                 190 ggg aag gct ctt gtg gaa gat gtt atc cca ata ctt aga gtt gct ttt    1284 Gly Lys Ala Leu Val Glu Asp Val Ile Pro Ile Leu Arg Val Ala Phe

    195                 200                 205 cat tgc caa ttg agc gag ctt ctc act cat tcc gtt gat aga gta gca    1332 His Cys Gln Leu Ser Glu Leu Leu Thr His Ser Val Asp Arg Val Ala

210                 215                 220 cga tca gat ctt gaa atc aca tgc att gag aaa gag gtt ccc ttt gaa    1380 Arg Ser Asp Leu Glu Ile Thr Cys Ile Glu Lys Glu Val Pro Phe Glu 225                 230                 235                 240 gtt gca gag aat att aaa tta ttg tgg ccg aaa tgt cag gtt gat gaa    1428 Val Ala Glu Asn Ile Lys Leu Leu Trp Pro Lys Cys Gln Val Asp Glu

            245                 250                 255 agt aag gtt cta cct gtg gat ccc ttg cat gaa aag aga aaa aat agg    1476 Ser Lys Val Leu Pro Val Asp Pro Leu His Glu Lys Arg Lys Asn Arg

        260                 265                 270 ata tac aag gca ttg gat tcg gat gat gtt gaa ctt gtc aag ctt cta    1524 Ile Tyr Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

    275                 280                 285 ctg agt gag tct aac ata agc tta gat gaa gcc tac gct ctt cat tat    1572 Leu Ser Glu Ser Asn Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr

290                 295                 300 gct gtg gca tat tgt gat ccc aag gtt gtg act gag gtt ctt gga ctg    1620 Ala Val Ala Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu 305                 310                 315                 320 ggt gtt gcg gat gtc aac cta cgt aat act cgt ggt tac act gtg ctt    1668 Gly Val Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu

            325                 330                 335 cac att gct tcc atg cgt aag gag cca gca gta att gta tcg ctt ttg    1716 His Ile Ala Ser Met Arg Lys Glu Pro Ala Val Ile Val Ser Leu Leu

        340                 345                 350 act aag gga gct cgt gca tca gag act aca ttg gat ggg cag agt gct    1764 Thr Lys Gly Ala Arg Ala Ser Glu Thr Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala

    355                 360                 365 gtt agtatctgta ggaggctgac taggcctaag gagtaccatg caaaaacaga         1817 Val acaaggccag gaagcaaaca aagatcgggt atgtattgat gttttggaga gagagatgcg 1877 tcgcaaccca atggctggag atgcattgtt ttcttcccca atgttggccg atgatctgca 1937 catgaaactg cactacctgg aaaatagagt ggcatttgca cggttactgt tccctcttga 1997 agccagacta gccatgcaaa ttgcaaatgc tgagactgca gctgaagtag cagtccgttt 2057 ggcatctaaa agtacatctg ggaacttgag ggaggttgat ttgaatgaga cacccataaa 2117 gcagaaagaa agacttcttt caaggatgca agccctctcg aagacagttg aacttggcaa 2177 gcgctatttt ccacattgct ctcaagttct ggacaagttt atggaggatg acttacccga 2237 cttaattttc cttgagatgg gccctccaga ggagcaaaag atcaagagga agcgatttaa 2297 ggagctcaaa gatgacgttc ancgggcatt taacaaagac aaagctgaac ttcattgctc 2357 ccgcttgtcc tcatcatcat gttcctcttc ttttaaagat ggngcaagtg tcaaacttag 2417 gaaactatga gtaaataggg ttttgtccta tagtttctct nccatctcag ttttgaatgt 2477 aagattaata gtttttataa agacttgtct tgtacancct tcattagagc gcctgctttg 2537 tcgctatcca tttccctatt cagcttgtta aacttccatg tttncagtag aaagaaattt 2597 gcttaggaac aagcttttgg aatagcttat atggaaaatt gattgtaaaa aaaaaaaaaa 2657 aaaaaaaaaa aaaaaa                                                 2673 <210>74 <211>369 <212>PRT <213>烟草 <400>74 Met Ala Cys Ser Ala Glu Pro Ser Ser Ser Ile Ser Phe Thr Ser Ser   1               5                  10                  15 Ser Ile Thr Ser Asn Gly Ser Ile Gly Val Gly Gln Asn Thr His Ala

         20                  25                  30 Tyr Gly Gly Ser Glu Thr Gly Ser Ser Tyr Glu Ile Ile Ser Leu Ser

     35                  40                  45 Lys Leu Ser Asn Asn Leu Glu Gln Leu Leu Ser Asp Ser Ser Ser Asp

 50                  55                  60 Phe Thr Asp Ala Glu Ile Val Val Glu Gly Val Ser Leu Gly Val His  65                  70                  75                  80 Arg Cys Ile Leu Ala Ala Arg Ser Lys Phe Phe Gln Asp Leu Phe Arg

             85                  90                  95 Lys Glu Lys Gly Ser Cys Gly Lys Glu Gly Lys Pro Arg Tyr Ser Met

        100                 105                 110 Thr Asp Ile Leu Pro Tyr Gly Lys Val Gly Tyr Glu Ala Phe Val Thr

    115                 120                 125 Phe Leu Ser Tyr Leu Tyr Ser Gly Lys Leu Lys His Phe Pro Pro Glu

130                 135                 140 Val Ser Thr Cys Met Asp Thr Ile Cys Ala His Asp Ser Cys Arg Pro 145                 150                 155                 160 Ala Ile Asn Phe Ser Val Glu Leu Met Tyr Ala Set Ser Met Phe Gln

            165                 170                 175 Val Pro Glu Leu Val Ser Leu Phe Leu Arg Arg Leu Ile Asn Phe Val

        180                 185                 190 Gly Lys Ala Leu Val Glu Asp Val Ile Pro Ile Leu Arg Val Ala Phe

    195                 200                 205 His Cys Gln Leu Ser Glu Leu Leu Thr His Ser Val Asp Arg Val Ala

210                 215                 220 Arg Ser Asp LeuGlu Ile Thr Cys Ile Glu Lys Glu Val Pro Phe Glu 225                230                 235                 240 Val Ala Glu Asn Ile Lys Leu Leu Trp Pro Lys Cys Gln Val Asp Glu

            245                 250                 255 Ser Lys Val Leu Pro Val Asp Pro Leu His Glu Lys Arg Lys Asn Arg

        260                 265                 270 Ile Tyr Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Val Glu Leu Val Lys Leu Leu

    275                 280                 285 Leu Ser Glu Ser Asn Ile Ser Leu Asp Glu Ala Tyr Ala Leu His Tyr

290                 295                 300 Ala Val Ala Tyr Cys Asp Pro Lys Val Val Thr Glu Val Leu Gly Leu 305                 310                 315                 320 Gly Val Ala Asp Val Asn Leu Arg Asn Thr Arg Gly Tyr Thr Val Leu

            325                 330                 335 His Ile Ala Ser Met Arg Lys Glu Pro Ala Val Ile Val Ser Leu Leu

        340                 345                 350 Thr Lys Gly Ala Arg Ala Ser Glu Thr Thr Leu Asp Gly Gln Ser Ala

    355                 360                 365 Val