专利汇可以提供基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂及检测方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及 生物 医学和生物检测技术领域,具体涉及一种测定血清中降 钙 素原的 试剂 及其检测方法,尤其是一种基于纳米 抗体 的降钙素原 化学发光 检测试剂、检测方法以及其在诊断中的应用。本发明检测试剂由发光底物液A、发光底物液B、包被板、酶结合物、浓缩洗涤液、校准品和质控品组成;其中包被板上包被有降钙素原纳米抗体,酶结合物中包含酶标记的降钙素原纳米抗体。实验表明,本发明检测试剂及检测方法具有操作简便、特异性强、灵敏度高、检测速度快、获得检测结果时间短、检测结果准确可靠等特点,实验中的检测准确率达到了100%。,下面是基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂及检测方法专利的具体信息内容。
1.一种基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其特征在于:所述检测试剂由发光底物液A、发光底物液B、包被板、酶结合物、浓缩洗涤液、校准品和质控品组成;
其中,所述包被板上包被有降钙素原纳米抗体,所述酶结合物中包含酶标记的降钙素原纳米抗体;
所述降钙素原纳米抗体具有如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的VHH链。
2.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述包被板经下述步骤制备而成:
(1)将5.8g十二水磷酸氢二钠和0.59g二水磷酸二氢钠混合后溶解在1L纯化水中,搅拌均匀得到包被缓冲液;
(2)向所得包被缓冲液中加入降钙素原纳米抗体1ml,混匀后按每孔100μl加入到空白包被板中,4℃静置过夜;
(3)倾倒出包被板中的液体,用纯化水洗板1次,按每孔150μl加入酪蛋白封闭液,室温放置2小时,然后倒出酪蛋白封闭液,室温晾干后即得。
3.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述酶结合物经下述步骤制备而成:将6.057g三羟甲基氨基甲烷、10g酪蛋白钠、3.35ml浓度为37.5%的盐酸、0.5ml防腐剂Proclin300、100ml新生牛血清、1ml酶标记的降钙素原纳米抗体混合后溶解在500ml纯化水中,充分搅拌均匀后用纯化水定容至1L,即得到酶结合物。
4.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述酶标记的降钙素原纳米抗体为辣根过氧化物酶标记的降钙素原纳米抗体。
5.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述发光底物液A和发光底物液B分别经下述步骤制备而成:
(1)将5.8g十二水磷酸氢二钠、0.59g二水磷酸二氢钠、8.5g氯化钠、0.1g鲁米诺、3g对碘苯酚、0.5ml防腐剂Proclin300混合后溶解在1L纯化水中,搅拌均匀即得到发光底物液A;
(2)将5.8g十二水磷酸氢二钠、0.59g二水磷酸二氢钠、8.5g氯化钠、0.1g过氧化氢脲、
0.5ml防腐剂Proclin300混合后溶解在1L纯化水中,搅拌均匀即得到发光底物液B。
6.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述浓缩洗涤液为含有吐温-20的磷酸盐缓冲液。
7.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂,其中所述校准品和质控品均为含有降钙素原的磷酸盐缓冲液。
8.如权利要求1-7任一项所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂在制备降钙素原检测试剂盒中的用途。
9.如权利要求1所述的基于纳米抗体的降钙素原化学发光检测试剂的检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)用纯化水将所述浓缩洗涤液稀释20倍,配制成工作浓度洗涤液,备用;
(2)取预先包被有降钙素原纳米抗体的包被板,在其上布设质控品孔1个、校准品孔6个,以及待检血液样品孔多个;
(3)将质控品、校准品、待检血液样品各50μl分别加入到对应的孔中;
(4)然后向每个孔中分别加入所述酶结合物50μl,将包被板用封板膜封好,在42-47℃条件下振荡温育10分钟;
(5)用上述工作浓度洗涤液洗板5次,然后向各个孔中加入至少350μl的工作浓度洗涤液,静置30-60秒后倒出工作浓度洗涤液,室温晾干;
(6)向各个孔中加入所述发光底物液A 50μl和发光底物液B 50μl,振荡混合均匀,室温避光放置5-10分钟,用化学发光免疫分析仪测量每孔的RLU值,即得到结果。
10.如权利要求9所述的检测方法,其中第(4)步骤中振荡温育的温度条件为45℃。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
一种缓释香精成型纸 | 2020-05-08 | 784 |
一种具有增加骨密度作用的药物组合物及其制剂 | 2020-05-08 | 416 |
一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法 | 2020-05-11 | 753 |
一种裂壶藻粉的制备方法 | 2020-05-08 | 474 |
检测TAT(凝血酶-抗凝血酶复合物)的电化学发光试剂盒、制法 | 2020-05-11 | 336 |
一种筛选植物根际土壤拮抗细菌的方法 | 2020-05-11 | 825 |
一种高载铁量的蛋白琥珀酸铁的制备方法 | 2020-05-11 | 125 |
一种亚麻水溶粉的配方及其工艺方法 | 2020-05-08 | 103 |
多孔材料、酪蛋白钙磷微球及其制备方法和应用 | 2020-05-08 | 168 |
一种牛奶乳清蛋白分离的陶瓷膜微滤设备 | 2020-05-08 | 750 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。