技术领域
[0001] 本
发明涉及提取工艺技术领域，尤其涉及山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法。
背景技术
[0002] 山苍子(Litsea cubeba(Lour. )Pers. )又名山鸡椒，是樟科(Lauraceae)木姜子属
植物。山苍子各器官均可入药，是一味传统的中药材。山苍子的根、叶、花及
果皮均含有芳香油，是我国重要的芳香植物。从果实中提炼的芳香油，可广泛用于食品、医药、
农药、
化妆品以及其他日用品。提炼芳香油后的果实再经
压榨可获得核子油，是我国化工、轻工和环保等行业生产的重要原料。
[0003] 生物碱是自然界中一类广泛存在的具有碱性的含氮化合物，大多都具有生理活性，中草药含有很多种生物碱，其疗效大多是由所含的生物碱而来。到目前为止，运用于临床的生物碱药品已达到八十多种，多具有
镇痛、抗癌的作用，多用于
治疗心脑
血管疾病，相当多的生物碱具有抗
肿瘤活性、低毒性和成本低的特征。
[0004] 目前，山苍子主要用于山苍子油提取、开发利用，或者以山苍子油有原料制取柠檬
醛等方面。我国对山苍子花和梗中生物碱的研究开发尚未见报道，目前常用的提纯工艺无法从山苍子花中有效提取生物碱。
发明内容
[0006] 鉴于现有技术的不足，本发明在于提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，旨在解决目前无相应技术能从山苍子花中有效提取生物碱的问题。
[0007] 山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，其中，所述方法为：
[0008] 提取过程：将干燥后的山苍子花或梗
磨碎，用
乙醇回流提取总生物碱，回流提取2-4次，每次加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，提取1-3h,合并滤液，浓缩蒸干
溶剂，得到浸膏。
[0009] 上样液制备：将所述浸膏依次用HCI及浓
氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓
氨水将溶液调制碱性，得到上样液。
[0010] 纯化过程：对AB-8或ADS-17规格的大孔
吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。
[0011] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，提取过程中加入料液比为1: 6g/ml的乙醇。
[0012] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，其特征在于，所用乙醇的浓度为80%。
[0013] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，提取过程中回流提取次数为3次，每次2h。
[0014] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，上样液制备具体为：将所述浸膏用0.1%-1% 的HCI使pH为2-3，过滤后，向滤液中加入浓氨水，调节pH为5-7，静置过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，再用浓氨水调节pH为9-11，得到上样液。
[0015] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，采用为AB-8规格的大孔吸附树脂。
[0016] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，纯化过程中，上样液浓度为2.0mg/mL，吸附流速3BV/h。
[0017] 所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，纯化过程中，乙醇的体积浓度为90%，解析流速为1.5BV/h，洗脱剂的用量为3BV。
[0018] 有益效果：本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法操作简单，山苍子花和梗中生物碱的提取量高并且纯度高，提取周期短，不需要复杂的实验仪器，成本低廉，提高了山苍子花的经济价值，拓宽了其应用领域。
具体实施方式
[0019] 本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体
实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0020] 本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法为：
[0021] 提取过程：将干燥后的山苍子花或梗磨碎，用乙醇回流提取总生物碱，回流提取2-4次，每次加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，提取1-3h,合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0022] 采用乙醇回流法提取总生物碱，操作简便，但是不能一次完全提取生物碱，因此需要反复回流提取。提取3次时，山苍子花或梗中的总生物碱的提取量率最高。次数过多，会降低提取效率，并且引入过多杂质，加大纯化的难度。
[0023] 由于生物碱易溶于乙醇溶液，因此采用乙醇溶液进行生物碱的热回流提取。优选地，所用乙醇的浓度为80%时，总生物碱的提取效率最高。
[0024] 在一定范围内，生物碱的提取量随乙醇溶液的量增加而提高，但是当乙醇溶液的量过多时，生物碱的提取量基本不再改变，此时过多的乙醇溶液会提高提取的成本，造成浪费，并且加大纯化的难度。当加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，生物碱的提取效率高，成本较低。优选地，当加入料液比为1:6g/ml的乙醇时，生物碱的提取效率最高。
[0025] 上样液制备：将所述浸膏依次用HCI及浓氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓氨水将溶液调制碱性，得到上样液。
[0026] 优选地，上样液制备具体为：将所述浸膏用0.1%-1% 的HCI使pH为2-3，过滤后，向滤液中加入浓氨水，调节pH为5-7，静置过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，再用浓氨水调节pH为9-11，得到上样液。上述操作可有效去除浸膏中的脂溶性和中性杂质，还有酸性条件下析出的杂质。
[0027] 纯化过程：对AB-8或ADS-17规格的大孔吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。
[0028] 优选地，采用为AB-8规格的大孔吸附树脂。由于AB-8大孔树脂属于快速吸附树脂，可以节省时间，缩短生产周期。
[0029] 优选地，纯化过程中，当上样液浓度为2.0mg/mL，吸附流速3BV/h时，打孔吸附树脂吸附生物碱的效率最高，最大程度的吸附上样液中的生物碱。
[0030] 优选地，纯化过程中，乙醇的体积浓度为90%，解析流速为1.5BV/h，洗脱剂的用量为3BV，此时，生物碱的洗脱效果最好，最终得到的生物碱提取量最高。
[0031] 为了更详尽的描述本发明的制备方法，以下列举几个实施例更进一步的说明。
[0032] 实施例1
[0033] 本发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下：
[0034] 提取过程：将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取3次，每次加6倍量80%乙醇，提取2h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0035] 树脂的预处理：将树脂（ADS-17、AB-8）先用2倍左右体积的乙醇浸泡充分溶胀，然后装柱，以3-4BV/h的流速将5-8倍的乙醇通过树脂层，洗至
洗出液加适量的水无白色浑浊现象，再以6-8BV/h的流速将蒸馏水通过树脂层，洗尽醇，最后转入酸碱处理。即用4BV的5%HCl溶液，以5BV/h的流速通过树脂层，并浸泡3h，而后用蒸馏水以同样流速洗至出水pH值为中性；用4BV的5%Na0H溶液，以5BV/h的流速通过树脂层，并浸泡3h，而后用蒸馏水以同样流速洗至出水pH值中性。
[0036] 上样液制备：称取山苍子花、梗，将所述浸膏用0.5%HCI使pH为2。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节pH为6，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为10，定容至1000mL，即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0037] 纯化过程：吸附流速3BV/h；上样液pH值10.0；上样液浓度在2.0mg/mL；使用3倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂；解析流速为1.5BV/h。
[0038] 实验结果: 山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.71%、0.86%，山苍子花的总碱纯度为45.37%，山苍子梗的纯度为50.22%。
[0039] 实施例2
[0040] 发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下：
[0041] 提取过程：将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取4次，每次加4倍量80%乙醇，提取1.5h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0042] 树脂的预处理：方法与实施例1相同
[0043] 上样液制备：称取山苍子花、梗，将浸膏用0.5%HCI使pH为3。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节pH为5，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为9，定容至1000mL，即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0044] 纯化过程：吸附流速2BV/h；上样液pH值10.0；上样液浓度在2.5mg/mL；使用2倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂；解析流速为1BV/h。
[0045] 实验结果: 山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.69%、0.82%，山苍子花的总碱纯度为43.25%，山苍子梗的纯度为48.65%。
[0046] 实施例3
[0047] 发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下：
[0048] 提取过程：将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取2次，每次加5倍量80%乙醇，提取2.5h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0049] 树脂的预处理：方法与实施例1相同
[0050] 上样液制备：称取山苍子花、梗，将浸膏用0.5%HCI使pH为2。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节pH为7，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为11，定容至1000mL，即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0051] 纯化过程：吸附流速4BV/h；上样液pH值10.0；上样液浓度在1.5mg/mL；使用4倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂；解析流速为2BV/h。
[0052] 实验结果: 山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.68%、0.83%，山苍子花的总碱纯度为44.78%，山苍子梗的纯度为49.85%。
[0053] 本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法操作简单，山苍子花和梗中生物碱的提取量高并且纯度高，提取周期短，不需要复杂的实验仪器，成本低廉，提高了山苍子花的经济价值，拓宽了其应用领域。
[0054] 应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附
权利要求的保护范围。
