一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用
阅读：1发布：2020-06-27
专利汇可以提供一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属于 植物 提取 技术领域，尤其涉及一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用。本发明提供了一种袋鼠爪提取物的制备方法，包括以下步骤：将袋鼠爪粉末与提取 溶剂 混合后，进行微射流提取，得到袋鼠爪提取物。本发明制备方法对袋鼠爪进行微射流提取，制备得到的袋鼠爪提取物中多酚含量高，活性成分得到最大保留，袋鼠爪提取物具有显著的美白、舒缓和抗 氧 化功效，能够广泛地应用在 化妆品 领域，让目前主要作为家庭观赏花用途的袋鼠爪植物扩大需求应用范围，增加袋鼠爪植物的市场价值。并且，该制备方法易于操作，适用于产业化推广应用。，下面是一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用专利的具体信息内容。
1.一种袋鼠爪提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将袋鼠爪粉末与提取溶剂混合后，进行微射流提取，得到袋鼠爪提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述提取溶剂为水和/或低级醇；
所述提取溶剂与所述袋鼠爪粉末的质量比为2～100：1。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取的冷媒温度为0～30℃；
所述微射流提取的进料速度为5～30L/min。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取之后，所述得到袋鼠爪提取物之前，还包括：
依次进行固液分离、除杂、纯化和浓缩。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述固液分离具体为采用高速离心进行固液分离；
所述除杂具体为采用微孔滤膜除去杂质；
所述纯化具体为采用超滤膜进行纯化；
所述浓缩具体为膜浓缩至25℃时相对密度为1.010～1.200。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述高速离心的离心速度为10000～
20000rpm，所述高速离心的离心时间为10～80min，所述高速离心的离心次数为1～2次；
所述微孔滤膜的孔径为0.1～1μm；
所述超滤膜的孔径为1000～15000Da；
所述膜浓缩的操作压力为0.20～0.50MPa，所述膜浓缩的流量20～50L/h，所述膜浓缩的温度为20～40℃。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
所述微射流提取器包括：微射流提取单元；
所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环和微射流环；
所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；
所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；
所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；
所述微射流环开有微射流孔。
8.一种袋鼠爪提取物，其特征在于，由权利要求1至7任意一项所述制备方法制得。
9.权利要求8所述袋鼠爪提取物在化妆品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述化妆品的剂型选自霜剂、乳液、水剂、凝胶、面膜或洗剂；
所述袋鼠爪提取物在所述化妆品中的含量为0.1wt％～100wt％。
一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用
技术领域
背景技术
[0002] 袋鼠爪(Anigozanthos flavidus)是一种血皮草科(Haemodoraceae)、鼠爪花属植物，其原产于澳大利亚西南部，典型特征是其黄色或红色的管状花表面密生绒毛，顶端6裂，形似袋鼠的爪子，故命名袋鼠爪。袋鼠爪发达的地下根状茎能让该物种在干旱或火灾后再生，在适宜的环境下，一株成熟的植株可能会开出350多朵花，最多10根长茎，可见繁殖能力强。另外，袋鼠爪具耐旱、喜阳和抗菌性等特点，杂交育种成功率高。世界范围内已有约50个栽培品种，是澳大利亚第二个最大的出口花卉种类，至少有40个品种被出口，作为稀有的切花出口到世界许多国家，如美国、以色列和日本。我国云南省农科院花卉研究所于2002年从国外引进了4个品种进行试种栽培，现亟待发掘袋鼠爪植物潜在的市场价值。
[0003] 目前，对于袋鼠爪的研究集中在种苗栽培、组织培养等，申请号专利CN201780063805.2《用于美容用途的袋鼠爪提取物》只公开其作为抗老化剂的应用，袋鼠爪提取物的其它功效及应用有待于开发。
发明内容
[0005] 本发明的具体技术方案如下：
[0006] 一种袋鼠爪提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0007] 将袋鼠爪粉末与提取溶剂混合后，进行微射流提取，得到袋鼠爪提取物。
[0008] 优选的，所述提取溶剂为水和/或低级醇；
[0009] 所述提取溶剂与所述袋鼠爪粉末的质量比为2～100：1。
[0010] 优选的，所述微射流提取的冷媒温度为0～30℃；
[0011] 所述微射流提取的进料速度为5～30L/min。
[0012] 优选的，所述微射流提取之后，所述得到袋鼠爪提取物之前，还包括：
[0013] 依次进行固液分离、除杂、纯化和浓缩。
[0014] 优选的，所述固液分离具体为采用高速离心进行固液分离；
[0015] 所述除杂具体为采用微孔滤膜除去杂质；
[0016] 所述纯化具体为采用超滤膜进行纯化；
[0017] 所述浓缩具体为膜浓缩至25℃时相对密度为1.010～1.200。
[0018] 优选的，所述高速离心的离心速度为10000～20000rpm，所述高速离心的离心时间为10～80min，所述高速离心的离心次数为1～2次；
[0019] 所述微孔滤膜的孔径为0.1～1μm；
[0020] 所述超滤膜的孔径为1000～15000Da；
[0021] 所述膜浓缩的操作压力为0.20～0.50MPa，所述膜浓缩的流量20～50L/h，所述膜浓缩的温度为20～40℃。
[0022] 优选的，所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
[0023] 所述微射流提取器包括：微射流提取单元；
[0024] 所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环和微射流环；
[0025] 所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
[0026] 所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；
[0027] 所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；
[0028] 所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；
[0029] 所述微射流环开有微射流孔。
[0030] 本发明还提供了一种袋鼠爪提取物，由上述技术方案所述制备方法制得。
[0031] 本发明还提供了上述技术方案所述袋鼠爪提取物在化妆品中的应用。
[0032] 优选的，所述化妆品的剂型选自霜剂、乳液、水剂、凝胶、面膜或洗剂；
[0033] 所述袋鼠爪提取物在所述化妆品中的含量为0.1wt％～100wt％。
[0034] 综上所述，本发明提供了一种袋鼠爪提取物的制备方法，包括以下步骤：将袋鼠爪粉末与提取溶剂混合后，进行微射流提取，得到袋鼠爪提取物。本发明中制备方法对袋鼠爪进行微射流提取，制备得到的袋鼠爪提取物中多酚含量高，活性成分得到最大保留，该袋鼠爪提取物具有显著的美白、舒缓和抗氧化功效，能够广泛地应用在化妆品领域，让目前主要作为家庭观赏花用途的袋鼠爪植物扩大应用范围，增加袋鼠爪植物的市场价值，并且制备方法易于操作，适用于产业化推广应用。附图说明
[0036] 图1为本发明中的一种微射流提取器的结构示意图；
[0037] 图2为本发明中的一种微射流提取单元中的引导环、内齿环、内外齿环和微射流环的局部主视图；
[0038] 图3为本发明中提供的一种微射流环的示意图；
[0039] 图4为本发明实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液对皮肤纹理的改善效果-时间图，从上方第一张皮肤影像开始时间间隔分别是：涂抹前0h，涂抹后1h，涂抹后2h，涂抹后4h，竖排合并不同时间的皮肤影像记录图；
[0040] 图5为本发明实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液涂抹前0h和涂抹后4h的皮肤纹理对比图；
[0041] 图示说明：1.驱动单元；2.吊拉环状物；3.电源接口；4.联轴器；5.第二冷媒出口；6.进料口；7.一级微射流提取腔室；8.螺旋推进叶片；9.二级微射流提取腔室；10.第一冷媒出口；11.出料口；12.三级微射流提取腔室；13.转轴；14.清洗排污出口；15.支架；16.引导环；17.第一冷却环；18.壳体；19.第一冷媒进口；20.第二冷媒进口；21.第二冷却环；22.底座；23.减震片；711.内齿环；712.微射流孔；713.微射流环；714.内外齿环。
具体实施方式
[0042] 本发明提供了一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用，本发明制备方法制得的袋鼠爪提取物多酚含量高，具有美白、舒缓和抗氧化功效。
[0043] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0044] 一种袋鼠爪提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0045] 将袋鼠爪粉末与提取溶剂混合后，进行微射流提取，得到袋鼠爪提取物。
[0046] 本发明中制备方法对袋鼠爪进行微射流提取，制备得到的袋鼠爪提取物中多酚含量高，活性成分得到最大保留，袋鼠爪提取物具有美白、舒缓和抗氧化功效，效果显著，能够拓展袋鼠爪提取物的应用，增加袋鼠爪植物的市场价值。并且，该制备方法易于操作，适用于产业化推广应用。
[0047] 本发明中，提取溶剂为水和/或低级醇；
[0048] 提取溶剂与袋鼠爪粉末的质量比为2～100：1，优选为5～100：1。
[0049] 本发明中，微射流提取的冷媒温度为0～30℃，优选为10～20℃；
[0050] 微射流提取的进料速度为5～30L/min，优选为15～30L/min。
[0051] 本发明中，低级醇为丙二醇或丁二醇；
[0052] 丙二醇为质量分数为20-70％的丙二醇；
[0053] 丙二醇为1，2-丙二醇和/或1，3-丙二醇；
[0054] 丁二醇为1，2-丁二醇、1，3-丁二醇和/或1，4-丁二醇；
[0055] 更优选为，丙二醇为1，2-丙二醇，丁二醇是1，3-丁二醇。
[0056] 本发明中，微射流提取之后，得到袋鼠爪提取物之前，还包括：
[0057] 依次进行固液分离、除杂、纯化和浓缩。
[0058] 本发明中，固液分离具体为采用高速离心进行固液分离；
[0059] 除杂具体为采用微孔滤膜除去杂质；
[0060] 纯化具体为采用超滤膜进行纯化；
[0061] 浓缩具体为膜浓缩至25℃时相对密度为1.010～1.200，更优选为膜浓缩至25℃时相对密度为1.050～1.200。
[0062] 本发明中，高速离心的离心速度为10000～20000rpm，更优选为14000～20000rpm，进一步优选为14000～18000rpm；高速离心的离心时间为10～80min，更优选为20～60min；高速离心的离心次数为1～2次；
[0063] 微孔滤膜的孔径为0.1～1μm，更优选为0.2～0.8μm；
[0064] 超滤膜的孔径为1000～15000Da，更优选为2000～10000Da；
[0065] 膜浓缩的操作压力为0.20～0.50MPa，更优选为0.30～0.45MPa；膜浓缩的流量20～50L/h，更优选为25～40L/h；膜浓缩的温度为20～40℃，更优选为20～30℃。
[0066] 本发明中，将袋鼠爪粉末与提取溶剂混合之前，还包括：将干燥或新鲜的袋鼠爪依次进行切片和粉碎，得到袋鼠爪粉末，袋鼠爪粉末的目数为20～100目，袋鼠爪粉末的目数更优选为50～90目。
[0067] 本发明中，微射流提取为采用微射流提取器进行提取。
[0068] 请参阅图1至图3，图1为本发明中的一种微射流提取器的结构示意图，图2为本发明中的一种微射流提取单元中的引导环、内齿环、内外齿环和微射流环的局部主视图，图3为本发明中提供的一种微射流环的示意图。
[0069] 本发明中，微射流提取器包括：微射流提取单元；
[0070] 微射流提取单元包括：壳体18、内齿环711和微射流环713；
[0071] 壳体18为具有中空结构的圆柱体；
[0072] 内齿环711和微射流环713径向贴附于壳体18的内壁；
[0073] 内齿环711无间隙地设置于微射流环713的工作前端；
[0074] 微射流环713将壳体18隔成微射流提取腔室；
[0075] 微射流环713开有微射流孔712。
[0076] 本发明中，微射流提取单元还包括：内外齿环714、引导环16、螺旋推进叶片8、转轴13、密封环和第一冷却环17；
[0077] 内外齿环714设置于内齿环711内并与内齿环711同轴，内外齿环714固定于微射流环713的工作前端；
[0078] 引导环16径向贴附于壳体18的内壁并无间隙地位于内齿环711的工作前端；
[0079] 引导环16的内径由引导环16的第一端到引导环16的第二端逐渐减小；
[0080] 引导环16的第二端与内齿环711相接；
[0081] 螺旋推进叶片8和转轴13设置于壳体18内，螺旋推进叶片8固定于转轴13的外壁；
[0082] 转轴13位于微射流环713的中空部并通过密封环与微射流环713连接；
[0083] 引导环16设置于螺旋推进叶片8的推进方向端；
[0084] 第一冷却环17套于壳体18的外壁。
[0085] 需要说明的是，内齿环711为可拆卸式径向贴附于壳体18的内壁，内外齿环714为可拆卸式固定于微射流环713的工作前端。
[0086] 引导环16能够将螺旋推送叶片8传递的提取物料进行引流、避免死角；内齿环711、内外齿环714和微射流环713对提取物料也具有引流作用；第一冷却环17设置于壳体18的外壁并包括第一冷媒进口19和第一冷媒出口10，用于控制微射流提取过程中袋鼠爪粉末的温度。
[0087] 本发明中，微射流提取器还包括：传动单元和驱动单元1；
[0088] 传动单元包括联轴器4和第二冷却环21；
[0089] 联轴器4的第一端与转轴13连接。
[0090] 第二冷却环21套于联轴器4的外壁；
[0091] 第二冷却环21上设置第二冷媒进口20和第二冷媒出口5，用于引入冷媒给转轴13降温；
[0093] 本发明中，微射流孔712的直径为0.1～1.0cm；
[0094] 微射流孔712的孔壁设有不规则突起；
[0095] 内齿环711的内齿为不规则齿；
[0096] 内外齿环714的内齿和外齿为不规则齿。
[0097] 微射流孔712的0.1～1.0cm直径适合于袋鼠爪粉末的提取加工，微射流孔712孔壁的不规则突起，对提取物料有絮流、切割等作用。
[0098] 微射流提取腔室的数量为两个或两个以上。
[0099] 本发明中，壳体18具体为抗压金属材料制成的中空筒状容器，壳体18在塔纳卡进行提取后的流通方向端设置有清洗排污出口14。
[0100] 袋鼠爪提取物制备时，在驱动单元1的带动下，通过螺旋推进叶片8，使袋鼠爪物料形成了巨大的离心力，袋鼠爪物料瞬间通过狭小的微射流孔712，进行了二次加速，形成高频的微射流，袋鼠爪物料在纯物理状态下经高速射流撞击、挤压，强烈涡流混合和强力振动扩散的作用，导致袋鼠爪物料组织细胞破碎，从而实现低温、快速、全成分提取，保持了袋鼠爪的色、香、味，且效率极高。
[0101] 本发明中，微射流提取腔室的数量为三个，包括一级微射流提取腔室7、二级微射流提取腔室9和三级微射流提取腔室12。
[0102] 进一步的，还包括：减震片23；
[0103] 驱动单元1设置于减震片23上，减震片23用于减少驱动单元1的震动和噪音。
[0104] 本发明中，还包括：支架15和底座22，壳体18通过支架15安装于底座22上，驱动单元1垫有减震片23后设置于底座22上。
[0105] 本发明中，驱动单元1包括旋转电机，在旋转电机上设置有吊拉环状物2以便于安装，并在旋转电机上设置有电源接口3。
[0106] 本发明中，壳体18上设置有进料口6和出料口11，用于微射流提取器中塔纳卡物料的进出。
[0107] 本发明中，采用微射流提取，微射流提取的冷媒温度较低，低温微射流提取能够使破壁更充分，低温高流速的提取溶剂与袋鼠爪的溶出成分充分接触，接触面积更大，多酚、类黄酮和多糖等热敏活性成分能够得到最大的保留，而杂质如粗纤维等则通过固液分离、纯化等操作去除，能够实现快速安全准确地提取袋鼠爪的目标成分，应用在化妆品中安全、有效。
[0108] 本发明制备方法制得的袋鼠爪提取物多酚含量高，通过体外功效测试实验表明其具有显著的清除ABTS+·自由基和DPPH自由基能力，酪氨酸酶抑制实验和透明质酸酶抑制实验及人体皮肤测试结果进一步表明本发明制备方法制得的袋鼠爪提取物舒缓、美白、淡化细纹和抗氧化功效显著，能够拓展袋鼠爪提取物的应用，增加袋鼠爪植物的市场价值。
[0109] 本发明还提供了一种袋鼠爪提取物，由上述技术方案制备方法制得。
[0110] 本发明袋鼠爪提取物舒缓、美白、淡化细纹和抗氧化功效显著，能够拓展袋鼠爪提取物的应用，增加袋鼠爪植物的市场价值。
[0111] 本发明还提供了上述技术方案袋鼠爪提取物在化妆品中的应用。
[0112] 本发明袋鼠爪提取物不仅能够使化妆品具有抗皱功效，还能够使其具有显著的美白、舒缓和抗氧化功效。
[0113] 本发明中，化妆品的剂型选自霜剂、乳液、水剂、凝胶、面膜或洗剂；
[0114] 袋鼠爪提取物在化妆品中的含量为0.1wt％～100wt％。
[0115] 为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。
[0116] 具体实施例中，袋鼠爪具体指的是新鲜或干燥的袋鼠爪(Anigozanthos flavidus)植物的地上部分，包括花和/或茎部分。
[0117] 实施例1
[0118] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯化水，搅拌均匀，置于微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min条件下进行提取，得到提取液。将上述提取液泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0119] 实施例2
[0120] 将5kg干燥的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯化水，搅拌均匀，置于微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min条件下进行提取，得到提取液。将上述提取液泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0121] 实施例3
[0122] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯化水，搅拌均匀，置于微射流提取器中，在冷媒温度30℃、进料速度20L/min条件下进行提取，得到提取液。将上述提取液泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0123] 实施例4
[0124] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯化水，搅拌均匀，置于微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度5L/min条件下进行提取，得到提取液。将上述提取液泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0125] 对比例1
[0127] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯化水，搅拌均匀，置于超声提取器中，在温度20℃、频率40KHz条件下提取30min，得到提取液。将上述提取液泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0128] 对比例2
[0129] 本对比例与实施例1相同，区别在于提取方法为煎煮法。
[0130] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入100kg的纯水，搅拌均匀，置于加热釜中，煎煮提取2h，过滤，得到第一提取液后将药渣再加入相当于原药材重量10倍的纯水，同法煎煮提取1h，得到第二提取液。将上述两份提取液合并降温处理，泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0131] 对比例3
[0132] 本对比例与实施例1相同，区别在于提取方法为酶解法。
[0133] 将5kg新鲜的袋鼠爪机械粉碎，过80目筛网，得平均目数为80目的袋鼠爪粉末，向袋鼠爪粉末中加入150kg的纯水，搅拌均匀，置于加热釜中，在60℃、pH5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与袋鼠爪粉末的质量比为1：50，恒温搅拌1h后，95℃灭酶5min，得到提取液；将上述提取液降温处理，泵入高速离心机进行固液分离，离心速度为17000rpm，收集分离液。然后将分离液泵入膜处理系统采用0.5μm微孔滤膜和7000Da超滤膜依次进行除杂、纯化，得到膜分离液。将上述膜分离液进行膜浓缩，膜浓缩条件为温度25℃，操作压力为0.40～0.45MPa，流量为25～30L/h，浓缩至浓缩液相对密度为1.050(25℃)，即得袋鼠爪提取物。
[0134] 实施例5
[0135] 本实施例对实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物进行多酚含量定量分析，具体包括：
[0136] 1)对照品溶液的配制
[0137] 精密称取0.110g没食子酸单水合物，于100mL棕色容量瓶中，加入纯化水溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为1000μg/mL的没食子酸对照品溶液。
[0138] 2)标准曲线的制备
[0139] 没食子酸标准液：用移液管分别移取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL的没食子酸溶液(1000μg/mL)于100mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀(其浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL)。
[0140] 实验过程：用移液管分别移取没食子酸标准液、水各1.0mL于10mL试管中，在每个试管中分别加入5.0mL10％福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂，摇匀，反应8min，加入4.0mL7.5％Na2CO3溶液，加水定容至刻度(V)，摇匀。室温下放置60min。在765nm波长条件下用分光光度计测定其对应吸光度。以各没食子酸标准液的浓度为横坐标，各标准液的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
[0141] 3)测定方法
[0142] 分别精密量取1.0mL实施例1～4和对比例1～3的袋鼠爪提取物(如果试样中的多酚浓度高则应适当稀释再取1.0mL用于显色测定)，置25mL容量瓶中，得到样品测试液，按照“标准曲线的制备”项下的方法进行实验，从标准曲线上读出样品测定液中多酚的浓度(mg/mL)，通过计算公式计算即得样品中多酚含量。
[0143] 样品中多酚含量按下式计算：
[0144] C＝N*V2/V1
[0145] 式中：
[0146] C：样品中的多酚含量，单位为mg/mL；
[0147] N：从标准曲线上查得样品测定液中多酚的浓度，单位为mg/mL；
[0148] V1：样品的测定体积，单位为mL。
[0149] V2：样品的定容体积，单位为mL；
[0150] 所得结果保留两位小数表示。
[0151] 4)结果分析
[0152] 结果如表1所示，从表1可知，本发明实施例1～4的袋鼠爪提取物的多酚含量相对于对比例1～3高出80％～200％，表明采用本发明制备方法制备袋鼠爪提取物，袋鼠爪提取物中多酚的提取效率显著提高。
[0153] 表1实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物中多酚含量
[0154]
[0155] 实施例6
[0156] 本实施例对实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物进行抗氧化测试，具体为DPPH自由基清除实验测试，具体包括：
[0157] 1)DPPH试剂的配制
[0158] 精密称取DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)粉末(分子量约394)0.00990g，置于250mL容量瓶，用适量95％乙醇溶解定容至250mL，得浓度为0.10mmol/L的DPPH试剂。
[0159] 2)供试品的制备
[0160] 取实施例1～4和对比例1～3所得袋鼠爪提取物加95％乙醇溶液定容，分别配制成10.0mg/mL试液。并同样方法配制1.0mg/mL维生素E对照液。
[0161] 3)测定方法
[0162] a.在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml95％乙醇，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为A0。
[0163] b.在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为Ar。
[0164] c.在10ml试管中依次加入4.0ml95％乙醇溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为As。
[0165] d.计算公式：样品对DPPH自由基的清除率：
[0166] 所得结果用百分数表示。
[0167] 测试结果如表2中所示，本发明实施例1～4袋鼠爪提取物添加量为10.0mg/mL时，具有相对更接近1.0mg/mL维生素E(1.0mg/mL浓度对应的DPPH自由基消除率为94％)的抗自由基效果。同等测试浓度下，对比例1～3袋鼠爪提取物的DPPH自由基清除率仅达到本发明实施例1～4袋鼠爪提取物的10～40％，表明采用本发明制备方法制备得到的袋鼠爪提取物的DPPH自由基清除能力更强。
[0168] 表2实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物的DPPH自由基消除率(10.0mg/mL)[0169]
[0170] 实施例7
[0171] 本实施例对实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物进行抗氧化测试，具体为ABTS+·自由基清除实验测试，具体包括：
[0172] 1)试剂配制
[0173] a.PBS溶液：称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，调pH＝7.2并定溶至1000mL。
[0175] c.7mmoL/L ABTS(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate))储备液：取0.0384gABTS，使用2.45mmol/L过硫酸钾溶解，定容10mL，溶液呈墨绿色，在室温、避光条件下静置12～16h，该储备液可稳定3～4d。
[0176] d.配制ABTS+·测定液：将ABTS储备液以磷酸盐缓冲液(pH＝7.2)稀释，使其吸光度在734nm波长处达到0.700±0.020。配制0.12mmol/L的ABTS+·时，测定的吸光值在0.716A(配制4mLABTS+1mL的PBS)--约取1.7mL的7mmoL/LABTS储备液稀释到100mL。
[0177] 2)供试品的制备
[0178] 取实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物加纯水定容，分别配制成10.0mg/mL试液。并同样方法配制5.0mg/mL维生素C对照液。
[0179] 3)测定方法
[0180] a.取4mL的ABTS+·工作液与1mL样品混合10s后25℃避光静置6min，在734nm处测定吸光值。以4mLPBS+1mL样品作为参比，记A样品。
[0181] b.取4ml的ABTS+·工作液与1mLPBS混合10s后25℃避光静置6min，在734nm处测定吸光值。以PBS作为参比，记A0。
[0182] 抑制率(％)＝((A0-A样品))/A0×100％
[0183] 所得结果用百分数表示。
[0184] 4)测试结果
[0185] 测试结果如表3所示，本发明实施例1～4袋鼠爪提取物添加量为10.0mg/mL时，具有相对接近5.0mg/mL维生素C消除ABTS+·自由基效果，呈现很强的总抗氧化性，实际应用中可有效降低对皮肤有负面影响的自由基活性，防止细胞释放炎症介质，保护表皮细胞。而同等测试浓度下，对比例1～3袋鼠爪提取物对ABTS+·自由基清除率仅达到本发明实施例1～4袋鼠爪提取物的40％～70％。
[0186] 表3实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物的ABTS+·自由基清除效果[0187] 测试样品 ABTS+·自由基清除率％5.0mg/mL维生素C 99
实施例1的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 96
实施例2的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 87
实施例3的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 93
实施例4的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 91
对比例1的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 60
对比例2的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 44
对比例3的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 38
实施例1的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 96
实施例2的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 87
实施例3的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 93
实施例4的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 91
对比例1的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 60
对比例2的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 44
对比例3的10.0mg/mL袋鼠爪提取物 38
[0188] 实施例8
[0189] 本实施例对实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物进行酪氨酸酶抑制实验测试，具体包括：
[0190] 1)试剂配制
[0191] a.PBS(pH＝6.8)的制备：精密称取6.80g磷酸二氢钾，溶于250mL的纯水，得0.2mol/L磷酸二氢钾溶液；精密称取0.94g氢氧化钠，溶于118mL的纯水,得0.2mol/L氢氧化钠溶液。取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL和0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL混合，纯水稀释定容至1000mL，即得PBS(pH＝6.8)。
[0192] b.L-酪氨酸溶液的配制：用PBS配制成1.5mmol/L的L-酪氨酸溶液，具体为用少许0.1mol/L HCl溶液溶解L-酪氨酸，然后再用PBS(pH＝6.8)稀释到pH＝7，即得。
[0194] 2)供试品的制备
[0195] 取实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物加纯水定容，分别配制成10.0mg/mL试液。并同样方法配制5.0mg/mL熊果苷对照液。
[0196] 3)测定方法
[0197] 精密量取样品溶液0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为A；精密量取样品溶液0mL、PBS 3.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为B；精密量取样品溶液1.0mL、PBS 1.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为C；精密量取样品溶液1.0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为D；混匀后在37℃水浴中恒温10min，然后各加入1.0mL的酪氨酸溶液，反应
15min后于490nm处测定吸光度。以B作为参比读取A，以D作为参比读取C。
15min后于490nm处测定吸光度。以B作为参比读取A，以D作为参比读取C。
[0198] 计算公式：T＝(A-C)/A×100％
[0199] A为未加样品的加酶混合液所测的吸光度；
[0200] B为未加样品亦未加酶的混合液所测的吸光度；
[0201] C为加样品和酶的混合液所测的吸光度；
[0202] D为加样品而未加酶的混合液所测的吸光度。
[0203] 所得结果用百分数表示。
[0204] 4)测试结果
[0205] 测试结果如表4所示，本发明实施例1～4袋鼠爪提取物添加量为10.0mg/mL时，具有与5.0mg/mL熊果苷相当的酪氨酸酶抑制效果，美白功效较显著。而同等测试浓度下，对比例1～3袋鼠爪提取物的酪氨酸酶抑制率仅达到本发明实施例1～4袋鼠爪提取物的30％～50％。
[0206] 表4实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物的酪氨酸酶抑制率
[0207]
[0208]
[0209] 实施例9
[0210] 本实施例对实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物进行透明质酸酶抑制实验测试，具体包括：
[0211] 1)试剂配制
[0212] a.醋酸缓冲溶液(pH＝5.6)的配制：量取1.155ml冰乙酸稀释至100mL，取4.8mL为A溶液；称取2.72g乙酸钠结晶加水溶解定容至100mL，取45.2mL为B溶液；混合A溶液和B溶液，以水定容至100mL混匀。精密测定其pH值，用A溶液(酸性)或B溶液(碱性)调至pH＝5.6即可。
[0213] b.透明质酸酶溶液的配制：称取透明质酸酶10mg置于烧杯中加入4ml醋酸缓冲溶液，浓度为1250unit/mL。
[0214] c.透明质酸钠溶液的配制：称取透明质酸钠5.0mg，加入10mL醋酸缓冲溶液，得透明质酸钠溶液(0.5mg/mL)。
[0217] f.氢氧化钠溶液的配制：称取16g氢氧化钠溶于纯水中，用纯水定容至1L。
[0218] 2)供试品的制备
[0220] 3)测定方法
[0221] 取0.1mL 0.25mmol/L CaCl2溶液和0.5mL透明质酸酶液(醋酸缓冲液)37℃保温培养20min；加入0.5mL测试液(醋酸缓冲液)，继续37℃保温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠液37℃保温30min，常温放置5min；加入0.1mL NaOH溶液(0.4mol/L)和0.5mL乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释，放置20min显色即可，各组试样添加的试剂具体参照表5。用紫外-可见分光光度计先对A组试样进行 波长扫描，记录最大吸收波长，然后以去离子水作为参比，在该最大吸收波长处分别对各试样进行ABS值测定。
[0222] 抗过敏活性计算公式:
[0223] 透明质酸酶抑制率(％)＝((A-B)-(C-D))/(A-B)*100％
[0224] 式中:
[0225] A——对照溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液)；
[0226] B——对照空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液)；
[0227] C——试样溶液ABS值；
[0228] D——试样空白溶液ABS值(用醋酸缓冲溶液代替酶液)；
[0229] 所得结果用百分数表示。
[0230] 表5透明质酸酶抑制实验各试样添加的试剂
[0231]
[0232]
[0233] 4)测试结果
[0234] 测试结果如表6所示，本发明实施例1～4袋鼠爪提取物添加量为15.0mg/mL时，具有接近0.5mg/mL甘草酸二钾的透明质酸酶抑制效果，说明其能有效地阻止组胺的释放，对皮肤有一定的舒敏修复作用。而同等测试浓度下，对比例1～3袋鼠爪提取物的透明质酸酶抑制率仅达到本发明实施例1～4的袋鼠爪提取物的18％～40％。
[0235] 表6实施例1～4和对比例1～3袋鼠爪提取物的透明质酸酶抑制率
[0236]
[0237]
[0238] 实施例10
[0239] 本实施例提供一种包含实施例1袋鼠爪提取物的膏霜，膏霜的配方如表7所示，本实施例膏霜的制备方法如下：
[0240] 称取A1相预先分散溶解至透明，后加入A2相，加热至80～85℃，均质均匀3min；称取B相，加热搅拌至80～85℃；将B相加入A相，搅拌均匀均质5min，保温搅拌20min；搅拌降温至45℃，加入C、D相，搅拌均匀即得。
[0241] 表7实施例10膏霜的配方
[0242]
[0243]
[0244] 实施例11
[0245] 本实施例提供一种包含实施例1袋鼠爪提取物的面膜液，面膜液的配方如表8所示，本实施例面膜液的制备方法如下：
[0246] 称取A相原料，将A相混合均匀并确保各组分溶解完全，加热至70～75℃，保温20min，边搅拌边降温至45℃时，加入B相，搅拌均匀即得。
[0247] 表8实施例11面膜液的配方
[0248]
[0249] 实施例12
[0250] 本实施例提供一种包含实施例1袋鼠爪提取物的精华液，精华液的配方如表9所示，本实施例精华液的制备方法如下：
[0251] 称取A相原料，将A相混合均匀并确保各组分溶解完全，加热至60～65℃，保温20min。边搅拌边降温至45℃时，加入B相，搅拌均匀即得。
[0252] 表9实施例12精华液的配方
[0253]
[0254] 实施例13
[0255] 本实施例采用实施例11面膜液进行人体皮肤肌肤纹理改善测试，具体包括：
[0256] 1)受试对象：男13人，女18人，共31人，年龄18～35岁。
[0257] 2)测试物：本发明实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液、纯水。
[0258] 3)测试方法：在受试者手臂曲侧取2*2cm的范围，受试前用清水轻拭干净，2h后，用皮肤检测仪(CBS-805)先检测记录受试对象左右手受试区域的皮肤表观影像；然后在左手受试区域内涂抹1.0mL的实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液，随后在右手受试区域内同样涂抹1.0mL纯水，每间隔一定时间进行过一次影像记录，做好记录，记录时长4h。
[0259] 4)结果分析：图4为本发明实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液对皮肤纹理的改善效果-时间图，从上方第一张皮肤影像开始时间间隔分别是：涂抹前0h，涂抹后1h，涂抹后2h，涂抹后4h，竖排合并不同时间的皮肤影像记录图。图5为本发明实施例11包含袋鼠爪提取物的面膜液涂抹前0h和涂抹后4h的皮肤纹理对比图，图4和图5表明，涂抹了本发明实施例11中包含袋鼠爪提取物的面膜液后，皮肤褶皱明显减少、变浅，并且可以持续保持效果。
[0260] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
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