一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用
专利汇可以提供一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 属 微 生物 技术领域，涉及一种 沼泽 红假单胞菌高 密度 发酵 方法及其应用。该沼泽红假单胞菌株来源为中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号为：CICC 23812。沼泽红假单胞菌的高密度发酵方法依次采用摇瓶进行 种子 活化，将活化好的摇瓶种液接入一级 发酵罐 进行扩培制备一级种子，将一级种子移入二级发酵罐进行发酵生产，发酵过程中采用流加补料以提高发酵液菌密度，发酵5天菌密度至少可达500亿CFU/ml。本发明解决了 现有技术 存在的需要光照、周期长、杂菌率高、产品 质量 不易得到控制等问题。具有发酵周期短、产品质量稳定、生产成本低等优点。通过此方法获得的沼泽红假单胞菌发酵液可进一步加工成微生态 饲料 添加剂、微生物 肥料 和微生物净 水 剂。，下面是一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是包括以下步骤：
a.将保藏号为CICC 23812的沼泽红假单胞菌生产种子以1-10‰接种量接种到600-
2000mL无菌液体种子培养基中，在温度25-33℃，湿度40-80％的恒温摇床上以转速80-
150rpm培养1-3天，得到活化种液；
b.将步骤a的沼泽红假单胞菌活化种子液接种于装有无菌液体种子培养基的一级发酵罐内，在温度25-33℃，搅拌转速80-200rpm，通气量1:0.1-1:1条件下培养1-3天，得到一级种液；
c.将步骤b的沼泽红假单胞菌活化一级种液以2-10％接种量接种于装有无菌液体发酵培养基的发酵罐内，在温度25-33℃，搅拌转速80-200rpm，通气量1:0.1-1:1条件下培养2-5天，发酵过程中采用流加补料培养基的方式来提高菌密度，即可获得菌密度不低于500亿CFU/ml的菌液，即为高密度沼泽红假单胞菌。
2.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述步骤a和步骤b中的无菌液体种子培养基为：包括可代谢碳源10-50g/L，可代谢蛋白氮源5-30g/L，磷酸氢二钾0.5-2.0g/L，七水合硫酸镁0.1-1.0g/L，并调整pH 5.0-8.0，在121℃灭菌30分钟。
3.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述步骤c中的无菌液体发酵培养基为：包括可代谢碳源10-50g/L，可代谢蛋白氮源5-30g/L，可代谢无机氮源5-30g/L，磷酸氢二钾0.5-2.0g/L，七水合硫酸镁0.1-1.0g/L，七水合硫酸亚铁0.1-0.4g/L，并调整pH 5.0-8.0，在121℃灭菌30分钟。
4.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述步骤c中的补料发酵培养基为：包括可代谢碳源100-500g/L，可代谢蛋白氮源50-300g/L，可代谢无机氮源50-300g/L，并调整pH 5.0-8.0，在121℃灭菌30分钟。
5.如权利要求2或3择一所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述可代谢碳源为葡萄糖、乙酸及其盐、丙酸及其盐、柠檬酸及其盐、苹果酸及其盐、丁二酸及其盐中的一种或几种的复配；
所述可代谢蛋白氮源为酵母粉、蛋白胨、牛肉膏、豆饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉中的一种或几种的复配；
所述可代谢无机氮源为硫酸铵、氯化铵、磷酸铵、尿素中的一种或几种的复配。
6.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述液体种子培养基或液体发酵培养基的pH为7.0-8.0。
7.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用，其特征是，所述步骤a中，将沼泽红假单胞菌以1‰接种量接种到1000mL液体种子培养基中，在温度28℃，湿度
60％的恒温摇床上以转速110-130rpm培养3天，得到沼泽红假单胞菌活化种液。
8.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用，其特征是，所述步骤b中，将步骤a的沼泽红假单胞菌活化种液接种于含有无菌液体种子培养基的一级发酵罐内培养，在温度28℃，搅拌转速100rpm，通气量1:0.5条件下培养2天，获得沼泽红假单胞菌一级种液。
9.如权利要求1所述的沼泽红假单胞菌高密度发酵方法，其特征是，所述步骤c中，将步骤b的沼泽红假单胞菌一级种液接种于含有无菌液体发酵培养基的发酵罐内培养，在温度
28℃，搅拌转速100rpm，通气量1:0.5条件下培养5天，发酵过中通过流加补料方式提供可代谢碳源和氮源，获得沼泽红假单胞菌发酵液，菌密度高达560亿CFU/ml。
10.如权利要求1所述的高密度沼泽红假单胞菌的应用，其作为饲料添加剂应用领域为禽、畜、水产动物、特种动物饲料添加剂；或者其作为微生物肥料应用领域为蔬菜、水果、粮食作物的微生物肥料；或者其作为净水剂应用领域为各行业废水、河道、池塘的微生物净水剂。
一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用
技术领域
背景技术
发明内容
150rpm培养1-3天，得到活化种液；
具体实施方式
150rpm培养1-3天，得到活化种液；
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