防治类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的制剂
专利汇可以提供防治类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的制剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种 预防 和 治疗 类 风 湿性关节炎等自身免疫性 疾病 的方法及制剂，尤其涉及一种通过采用与类风湿性关节炎等 自身免疫性疾病 发病相关病原菌制备的多价 抗原 疫苗 免疫接种健康妊娠母 牛 ，并收集其分泌的牛奶，制备能有效预防和治疗类风湿性关节等自身免疫性疾病的制剂。，下面是防治类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的制剂专利的具体信息内容。
1.本发明涉及一种预防和治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的方法及制剂，尤其涉及 一种通过采用与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病发病相关病原菌制备的多价抗原疫 苗免疫接种健康妊娠母牛，并收集其分泌的牛奶，制备能有效预防和治疗类风湿性关节 等自身免疫性疾病的制剂，其特征是，选择与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病相关的 致病菌，应用已知的细菌培养方法培养足够量的细菌并灭活后，制备多价性抗原疫苗， 定期免疫接种健康妊娠乳牛，通过检测接种乳牛血清中特异性抗体滴度，确定已产生特 异性抗体，从免疫接种乳牛的初乳或牛奶中制备抗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病致 病菌的特异性免疫球旦白制剂，应用于预防和治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。
2.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明选择用于制备疫苗的细菌， 可能与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的发病有关，这些病原菌包括(这些病原菌均 可以从美国细胞培养收集中心获取，细菌名称后面的数字代表其编号)：金黄色葡萄球 菌(staphylococcus aureus，11631)，表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis. 155)，酿脓链球菌A.type1(streptococcus pyogenes.Typel.8671)，type 8(12349)， type 12(11434)，type 14(12972)，TYPE 18(12357)，22型(type 22.10404)，产 气杆菌(Aerobacter aerogenes.884)，大肠杆菌(Escherichia Coli.26)，肠炎(沙门) 杆菌(Salmonella enteritidis 13076)，绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa 7700)，肺 炎杆菌(Klebsiella pneumoniae.9590)，鼠伤寒(沙门)杆菌(Salmonella typhimurium. 13311)，草绿色链球菌(Streptococcus viridaus，6249)，普通变形杆菌(Proteus vulgaris 13315)，志贺痢疾杆菌(Ahigella dysenteriae，11835).
3.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，制备上述灭活细菌多价抗原疫苗时， 每个菌种被单独培养，采用静止的、标准的细菌培养基对每个菌种进行单独培养，细菌 培养容器在37℃温度下，孵育48小时，然后在60℃温度下，持续2小时以灭活培养的 细菌，每个培养基的取样标本，重新在37℃温度下培养24小时，以确定无细菌生存， 只有完全灭活的细菌培养物才可以进入下一步骤，分别用双蒸馏水冲洗五次后，用离心 机分离，用液氮冷冻后，用真空冷冻干燥设备制备粉状物，并分包装冷藏，每个菌种干 粉称取1克，干粉被混合后，在无菌生理盐水内搅拌形成悬浮液，500ml的溶液内含有 20克细菌干粉，反复用生理盐水稀释至4.times.10.sup.8 cells/ml，疫苗悬浮液在 接种前24小时配制，每次每头健康妊娠母牛接种剂量为5ml。
4.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，选择健康妊娠母牛进行免疫接种， 免疫接种时间选择在预期分娩日前2～3周，每周重复接种一次，连续接种四周，共进 行五次免疫接种，在第一阶段接种完成后，以后每两周追加接种一次，直至产奶期结束， 每次接种给每头乳牛的剂量是5ml(含有多价抗原20.times，10.sup.8 bacterial cells)，在首次免疫接种后3～4天开始检测血清中抗体滴度，只有产生了高抗体滴度， 其牛奶才能作为原料。
5.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，收集被接种乳牛的牛奶可以采用传 统方式，但必须注意保护牛奶中有效成份不受破坏，由于这些有效成份都是属于热敏感 物质，低温的巴氏消毒法被优选，巴氏消毒法温度应该低于140°F，采用真空冷冻干燥 制备粉状物，也是一种良好的选择，可以更好的保护其有效成份不被高温破坏，也可以 采用其他方法来获得更高纯度有效成份，在这种方法中通过酸化脱脂牛奶至PH4.7～ 4.8，在30℃～50℃加热20～50分钟，酪旦白凝结后，采用离心或滤布过滤方式除去酪 旦白，最后用超微滤膜浓缩，通过喷雾干燥或真空冷冻干燥制备干粉，选用何种方法取 决于对制剂纯度的需求，上述两种方式制备的制剂中都含有防治类风湿性关节炎等自身 免疫性疾病的有效成份，后一种方法制备的制剂纯度更高，含量更丰富。
6.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的制剂既可以用来 预防类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的发生，尤其对高风险发病人群，通过阻断其致 病因素而预防疾病的发生，也可以用于治疗上述疾病的患者，防止其病情加重，改善其 症状和体征，延缓或防止并发症，其适用范围除类风湿性关节炎外，还包括其他免疫性 疾病，包括但不限于系统性红斑狼疮、多发性硬化症、肾小球肾炎、哮喘等疾病。
7.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明制剂与其他治疗类风湿性关 节炎等自身免疫性疾病的治疗药物有协同作用，尤其与免疫抑制剂联合应用，还可以防 治免疫功能低下引起的各类细菌感染，与抗炎症制剂联合应用，能够有效减轻患者症状 和体征。
8.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的防治类风湿性关 节炎等自身免疫性疾病的制剂可以单独应用，也可以与其他有效成份联合应用，其应用 的方式，可以直接服用免疫乳牛的牛奶，或用水冲服免疫乳牛的奶粉，也可以将上述方 法制备的粉状物质添加到其他辅料或其他食物成份中，制备成其他制剂或食品，这些制 剂包括片剂、胶囊、粉剂、口服液、散剂、含片等，这些食品包括各种颗粒型冲剂，饮 料、酸奶、无糖冰琪淋及其他食品，但在制备上述任何产品的过程中，温度均不能超过 140°F。
所属技术领域
本发明涉及一种预防和治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的方法及制剂，尤其涉 及一种通过采用与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病发病相关病原菌制备的多价抗原疫苗 免疫接种健康妊娠母牛，并收集其分泌的牛奶，制备能有效预防和治疗类风湿性关节等自 身免疫性疾病的制剂。
发明技术背景
类风湿性关节炎是一种自身免疫性疾病，其发生和发展与自身免疫反应调节失衡有 关，而与其发病密切相关的原因，是某些病原菌通过胃肠道侵犯患者机体，由于患者胃肠 道局部免疫防御机制减弱，导致局部病原菌感染，这些外来致病菌及其毒素作为外来抗原 刺激患者机体免疫系统反应过度，导致类风湿性关节炎的发生和发展。
临床观察证实，在很多类风湿性关节炎患者体内往往同时存在细菌感染的过程，而且 这种类型的细菌感染与类风湿性关节炎的发生和发展密切相关。
动物实验表明，让实验动物感染致病菌，这些动物也会出现与类风湿性关节炎类似的 症状与体征，例如淋病菌，不仅能诱发淋病，还可以诱发类风湿性关节炎的症状和体征； 扁桃体炎和咽炎，在诱发风湿热后，也可以诱发类风湿性关节炎；病毒感染，例如风疹病 毒常发生于年轻妇女，也可以诱发多重关节炎症，包括小关节和大关节。
很多证据显示，类风湿性关节炎病因与慢性感染有关，慢性感染的发生与机体局部免 疫力减弱有关，类风湿性关节炎患者比正常人消化道分泌的免疫球旦白A明显减少；某些 病态型肥胖病人实施空肠旁路手术后血液中出现IgM，IgA，IgG的亚型3C、4C以及抗大肠 杆菌抗体，同时出现类风湿性关节炎的症状和体征，一旦空肠旁路拆除，类风湿性关节炎 的症状和体征消失，此外，某一种链球菌属的双链球菌分型被认为是类风湿性关节炎的致 病因素，这种类型细菌存在于已巴氏消毒的普通乳牛的牛奶中，却不存在于免疫乳牛的牛 奶中。某些类风湿性病症的遗传基因与HLA抗原有关，而这种抗原类别是与感染性抗原相 关的。研究表明，系统性红斑狼疮、肾小球肾炎等其他自身免疫性疾病发病因素和类风湿 性关节炎相似。
综上所述，类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的发病与慢性胃肠道感染有关，因此， 通过杀灭或抑制胃肠道内某些与类风湿性疾病相关的病原菌，就能有效预防和治疗类风湿 性关节炎等自身免疫性疾病。
目前治疗胃肠道病原菌感染常用各类抗菌素，这些抗菌素通常是具有广谱杀菌作用， 可以广泛杀灭各种类型细菌，长期使用可能会导致体内菌群失调和产生各种毒付作用，另 外一种杀灭或抑制患者胃肠道致病菌的方法是采用被动免疫方式，即采用这些病原菌的特 异性抗体，这些特异性抗体也能有效杀灭这些病原菌。
人体胃肠道主要通过分泌免疫球旦白A(IgA)来杀灭各类病原菌，但是由于类风湿性关 节炎的病人，其分泌IgA的能力下降，胃肠道内IgA含量减少，不能有效杀灭或抑制这些 病原菌，因而外源性补充这类免疫球旦白能帮助患者抵抗胃肠道的感染。
通过免疫接种乳牛产生特异性抗体已经被应用于生产多种抗病原菌抗体，美国专利 (4324782)介绍的技术中，公开了通过制备抗变异链球菌抗体治疗龋齿的方法，中国发明专 利(申请号96199507)介绍的技术中公开了采用抗中耳炎病原菌抗体治疗中耳炎的方法， 上述技术中均未提及用与类风湿性关节炎相关的病原菌作疫苗接种乳牛，并制备相应抗体 的方法和应用。
本发明所要解决的技术问题是，选择与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病发病相关的 病原菌作为疫苗接种乳牛，并收集其分泌的牛奶，制备对抗这些病原菌的特异性抗体，并 应用于预防和治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。
发明内容
本发明的技术特征是，本发明选择用于制备疫苗的细菌，可能与类风湿性关节炎等自 身免疫性疾病的发病有关，这些病原菌包括(这些病原菌均可以从美国细胞培养收集中心获 取，细菌名称后面的数字代表其编号)：金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus，11631)， 表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis.155)，酿脓链球菌A.type1(streptococcus pyogenes.Typel.8671)，type8(12349)，type12(11434)，type14(12972)，TYPE18 (12357)，22型(type22.10404)，产气杆菌(Aerobacter aerogenes.884)，大肠杆菌 (Escherichia Coli.26)，肠炎(沙门)杆菌(Salmonella enteritidis 13076)，绿脓杆菌 (Pseudomonas aeruginosa 7700)，肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae.9590)，鼠伤寒(沙 门)杆菌(Salmonella typhimurium.13311)，草绿色链球菌(Streptococcus viridaus， 6249)，普通变形杆菌(Proteus vulgaris 13315)，志贺痢疾杆菌(Ahigella dysenteriae， 11835).
本发明的技术特征是，制备上述灭活细菌多价抗原疫苗时，每个菌种被单独培养，采 用静止的、标准的细菌培养基对每个菌种进行单独培养，细菌培养容器在37℃温度下，孵 育48小时，然后在60℃温度下，持续2小时以灭活培养的细菌，每个培养基的取样标本， 重新在37℃温度下培养24小时，以确定无细菌生存，只有完全灭活的细菌培养物才可以进 入下一步骤，分别用双蒸馏水冲洗五次后，用离心机分离，用液氮冷冻后，用真空冷冻干 燥设备制备粉状物，并分包装冷藏，每个菌种干粉称取1克，干粉被混合后，在无菌生理 盐水内搅拌形成悬浮液，500ml的溶液内含有20克细菌干粉，反复用生理盐水稀释至 4.times.10.sup.8cells/ml，疫苗悬浮液在接种前24小时配制，每次每头健康妊娠母 牛接种剂量为5ml。
本发明的技术特征是，选择健康妊娠母牛进行免疫接种，免疫接种时间选择在预期分 娩日前2～3周，每周重复接种一次，连续接种四周，共进行五次免疫接种，在第一阶段接 种完成后，以后每两周追加接种一次，直至产奶期结束，每次接种给每头乳牛的剂量是 5ml(含有多价抗原20.times，10.sup.8bacterial cells)，在首次免疫接种后3～4天 开始检测血清中抗体滴度，只有产生了高抗体滴度，其牛奶才能作为原料。
本发明的技术特征是，收集被接种乳牛的牛奶可以采用传统方式，但必须注意保护牛 奶中有效成份不受破坏，由于这些有效成份都是属于热敏感物质，低温的巴氏消毒法被优 选，巴氏消毒法温度应该低于140°F，采用真空冷冻干燥制备粉状物，也是一种良好的选择， 可以更好的保护其有效成份不被高温破坏，也可以采用其他方法来获得更高纯度有效成份， 在这种方法中通过酸化脱脂牛奶至PH4.7～4.8，在30℃～50℃加热20～50分钟，酪旦白 凝结后，采用离心或滤布过滤方式除去酪旦白，最后用超微滤膜浓缩，通过喷雾干燥或真 空冷冻干燥制备干粉，选用何种方法取决于对制剂纯度的需求，上述两种方式制备的制剂 中都含有防治类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的有效成份，后一种方法制备的制剂纯度 更高，含量更丰富。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的防治类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的制 剂可以单独应用，也可以与其他有效成份联合应用，其应用的方式，可以直接服用免疫乳 牛的牛奶，或用水冲服免疫乳牛的奶粉，也可以将上述方法制备的粉状物质添加到其他辅 料或其他食物成份中，制备成其他制剂或食品，这些制剂包括片剂、胶囊、粉剂、口服液、 散剂、含片等，这些食品包括各种颗粒型冲剂，饮料、酸奶、无糖冰琪淋及其他食品，但 在制备上述任何产品的过程中，温度均不能超过140°F。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的制剂既可以用来预防类风湿性关节炎等自身 免疫性疾病的发生，尤其对高风险发病人群，通过阻断其致病因素而预防疾病的发生，也 可以用于治疗上述疾病的患者，防止其病情加重，改善其症状和体征，延缓或防止并发症， 其适用范围除类风湿性关节炎外，还包括其他免疫性疾病，包括但不限于系统性红斑狼疮、 多发性硬化症、肾小球肾炎、哮喘等疾病。
本发明的技术特征是，本发明制剂与其他治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的治 疗药物有协同作用，尤其与免疫抑制剂联合应用，还可以防治免疫功能低下引起的各类细 菌感染，与抗炎症制剂联合应用，能够有效减轻患者症状和体征。
本发明的有益效果是，与现有技术相比，本发明的制剂通过阻断类风湿性关节炎等自 身免疫性疾病的发病因素而起到预防和治疗双重作用，而且属于天然制品，无毒付作用， 适合长期服用，在治疗自身免疫性疾病同时还能减少机体内感染的发生。
具体实施方案
下面结合实施例对本发明作进一步说明：
实施例1
制备多价细菌抗原疫苗及其免疫接种妊娠母牛
选择用于制备疫苗的细菌可能与类风湿性关节炎等自身免疫性疾病发病有关，这些病原 菌包括(这些病原菌均可以从美国细胞培养收集中心获取，细菌名称后面的数字代表其编 号)，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，11631)，表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis，155)，酿脓链球菌A.type1(streptococcus pyogenes A.type1.8671)， type8(12349)，type12(11434)，type14(12972)，type18(12357)，type22(10403)， 产气杆菌(Aerobacter aerogenes，884)，大肠杆菌(Escherichia coli.11126)，肠炎(沙 门)杆菌(Salmonella enteritidis，13076)，绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa，7700)， 肺炎杆菌(Klebsiella Pneumoniae，9590)，鼠伤寒(沙门)杆菌(Salmonella typhimurium， 13311)，草绿色链球菌(Streptococcus viridans，6249)，普通变形杆菌(Proteus vulgaris 13315)，志贺痢疾杆菌(Shigella dysenteriae，11835)。
上述菌种分别接种在血清细菌培养基，在37℃温度下培养38小时，然后加温至60℃ 维持2小时灭活细菌，用双蒸馏水冲洗五次后，离心收集沉淀细胞，冷冻干燥制备干粉， 称取上述细菌干粉，每种类别称取1克，相互混合后用500ml生理盐水搅拌混匀成为悬浮 液，用生理盐水稀释至4.times.10.sup.8 cells/ml浓度，选择健康妊娠母牛，在分娩 日前3周注射上述浓度疫苗5ml，每隔一周相同剂量重复1次，共重复4次。
实施例2
免疫接种母牛血清特异性抗体检测
在免疫接种母牛前，抽取其血清冷冻备用，作为对照组，免疫接种后第十天，抽取接种 母牛的血清作为试验组，测定实施例1所列出细菌抗原的特异性抗体，结果显示，试验组的 特异性抗体滴度显著增高，有明确的统计学上意义，试验组每种特异性抗体的滴度至少比 对照组升高百倍以上。
实施例3
制备抗类风湿性关节炎抗体制剂
取免疫乳牛分娩后10小时内的冰冻牛初乳13升，在5℃～10℃下化冻，用离心机以 3000转/分速度离心20分钟脱脂，用700ml 1N HCL酸化初乳，调节PH至4.8，于40℃ 温度加热30分钟，于4℃静置贮存过夜，用泵抽上清液通过尼龙布过滤器进入贮存容器， 滤除酪旦白，用0.9％氯化钠溶液稀释至26升。用稀释上清液通过中空纤维柱过滤，中空 纤维柱孔径为0.4μm，表面积为3m2，纤维直径1.2mm，用100升0.9％浓度的氯化钠溶液滤 过，使用压力超过大气压0.2～0.6Bar，在进行第一次粗滤同时，产生的滤液再通过由三个 中空纤维柱组成的系统进行第二次粗滤，每个柱的分离极限为10,000D，表面积为14M2，在 此系统中，第一次粗滤的滤液得到初步浓缩，然后且100升0.9％浓度的氯化钠溶液透析过 滤，最后再浓缩到23升。所得到特异性免疫球旦白含量为6％，用已知方法过滤消毒，用 冷冻干燥方法制备干粉。
实施例4
临床验证治疗类风湿性关节炎效果
随机选取12名临床诊断类风湿性关节炎患者，并有血沉增快，类风湿因子阳性的化验 报告作为依据，让上述病人服用实施例3制备的制剂10g/天，用水冲服，连续使用6个月， 结果显示，91.6％病人关节疼痛、肿胀现象明显好转，83.3％患者显示小关节僵直症状改 善，活动及工作能力增强，75％患者主诉服用治疗类风湿性关节炎的药物显著减少，尤其 是用于消除炎症药物剂量明显减少。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 药丸天线系统 | 2020-05-11 | 117 |
| 一种水性复合佐剂、其应用及猫用疫苗 | 2020-05-12 | 516 |
| 一种母牛诱导发情方法 | 2020-05-14 | 697 |
| 在动物中促进生长和提高饲料转化率的方法 | 2020-05-17 | 355 |
| 一种土母牛育肥精料的制作方法 | 2020-05-15 | 730 |
| 最终消毒的来自细胞外基质的水凝胶的制备方法 | 2020-05-08 | 402 |
| 骨骼和软骨损害或疾病的预防和治疗 | 2020-05-14 | 693 |
| 用于改善反刍动物健康和/或性能的菌株和方法 | 2020-05-16 | 688 |
| 一种能提高雪花牛肉的肉牛养殖方法 | 2020-05-12 | 59 |
| 一种犊母分离饲喂槽 | 2020-05-17 | 168 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
