一种促进公畜性器官发育和精子发育的方法
阅读：182发布：2020-06-14
专利汇可以提供一种促进公畜性器官发育和精子发育的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种促进 公畜 性器官发育和精子发育的方法，本发明方法是从公畜断奶起开始饲喂维生素E，直至性成熟。本发明方法能够增加附睾的重量，曲细精管的 密度 ，增加附睾直径、生精细胞数量，提早利用公畜，提高种公畜的繁殖能 力 和利用年限。此外，还可以减少人工授精中为保持和提高精液品质和精子活力而进行的繁琐的操作，提高人工授精以及冷冻精液所用的鲜精品质，进而可提高人工授精以及冷冻精液品质，从源头提高生产效率。本发明方法简单易行，经济效益显著。，下面是一种促进公畜性器官发育和精子发育的方法专利的具体信息内容。
技术领域
本发明涉及畜牧学，具体地说涉及一种促进公畜性器官发育和精 子发育的方法。
背景技术
公畜作为精子的提供者，对于母畜的繁殖性能有着重要影响，精 液品质的好坏直接影响母畜的受精、产羔情况。
精子(Sperm)是雄性动物性腺产生出来的特殊细胞。只有有活 力的精子才可以到达母畜生殖器官内发挥作用，并可在其中存活一段 时间。精子为了维持其生命，在体内、体外都要进行复杂的物质代谢 活动，其中主要是精子的糖酵解作用和呼吸作用。在代谢过程中存在 着大量的氧化作用，氧化产物若不及时清除对机体会产生很大的损 伤。维生素E既可以作为抗氧化剂直接清除体力代谢产生的自由基， 同时也可以通过提高抗氧化酶的活性和减少氧化产物的含量来减少 过氧化带来的伤害，提高机体的抗氧化能力。
研究表明，维生素E能促进精子的生成与活力。公鸡缺乏维生素 E时睾丸变性萎缩，精子活动异常，甚至不能产生精子，不利于精子 活动(Marin-Guzman等，1997)。Brzezinska等(1995)和Marin等 (1997)发现，补饲维生素E能显著提高猪精液中精子数。补饲维生 素E(7500mg/d)1周后可以使公牛鲜精活率从0.6提高到0.7以上， 冻精活率达0.4左右(张坚中，1988)。波尔山羊冻精稀释液添加2.5 g/L的维生素E，解冻后精子的活力由原来的34％提高到41％(赵晓 娥等，1999)。绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E可以减缓冷冻对 精子的伤害，提高颗粒冻精的活率，降低冷刺激对精子顶体的损害程 度；在绵羊日粮中添加维生素E也可以提高鲜精精液质量(罗海玲 等2003)。
现有有关维生素E提高精液品质的研究都是基于成年公畜，对幼 年时的性器官发育和精子发育鲜有研究。
精子(Sperm)是雄性动物性腺产生出来的特殊细胞。只有有活 力的精子才可以到达母畜生殖器官内发挥作用，并可在其中存活一段 时间。精子为了维持其生命，在体内、体外都要进行复杂的物质代谢 活动，其中主要是精子的糖酵解作用和呼吸作用。在代谢过程中存在 着大量的氧化作用，氧化产物若不及时清除对机体会产生很大的损 伤。维生素E既可以作为抗氧化剂直接清除体力代谢产生的自由基， 同时也可以通过提高抗氧化酶的活性和减少氧化产物的含量来减少 过氧化带来的伤害，提高机体的抗氧化能力。
研究表明，维生素E能促进精子的生成与活力。公鸡缺乏维生素 E时睾丸变性萎缩，精子活动异常，甚至不能产生精子，不利于精子 活动(Marin-Guzman等，1997)。Brzezinska等(1995)和Marin等 (1997)发现，补饲维生素E能显著提高猪精液中精子数。补饲维生 素E(7500mg/d)1周后可以使公牛鲜精活率从0.6提高到0.7以上， 冻精活率达0.4左右(张坚中，1988)。波尔山羊冻精稀释液添加2.5 g/L的维生素E，解冻后精子的活力由原来的34％提高到41％(赵晓 娥等，1999)。绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E可以减缓冷冻对 精子的伤害，提高颗粒冻精的活率，降低冷刺激对精子顶体的损害程 度；在绵羊日粮中添加维生素E也可以提高鲜精精液质量(罗海玲 等2003)。
现有有关维生素E提高精液品质的研究都是基于成年公畜，对幼 年时的性器官发育和精子发育鲜有研究。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进促进性器官早期发育和精子发 育的方法。本发明方法能够提高精液品质，提早利用公畜，提高种公 畜的繁殖能力和利用年限。
本发明方法是从公畜幼年起饲喂维生素E。根据不同牲畜选择适 当的剂量。饲喂时通常从公畜断奶起即可饲喂维生素E，随着公畜的 成长，可以适当增加剂量，至公畜性成熟时即可停止饲喂。饲喂时可 将维生素E粉添加到幼龄公畜日粮的精料中，充分拌匀，分早晚饲喂。
对于公羔而言，维生素E的饲喂量以每天每只80～880IU为宜， 优选为每只每天320IU。
试验表明，公畜从幼龄开始饲喂维生素E，能够增加附睾的重量， 曲细精管的密度，增加附睾直径、生精细胞数量，提早利用公畜，提 高种公畜的繁殖能力和利用年限。
此外，还可以减少工授精中为保持和提高精液品质和精子活力而 进行的繁琐的操作，提高人工授精以及冷冻精液所用的鲜精品质，进 而可提高人工授精以及冷冻精液品质，从源头提高生产效率。本发明 方法简单易行，经济效益显著。
附图说明
图1、维生素E对睾丸组织结构的影响；
图2、维生素E对附睾组织结构的影响；
图3、维生素E对输精管组织结构的影响。
其中，G1、G2、G3和G4分别代表试验的四个组，维生素E添 加量分别为0，80，320和880IU·只-1·天-1。
本发明方法是从公畜幼年起饲喂维生素E。根据不同牲畜选择适 当的剂量。饲喂时通常从公畜断奶起即可饲喂维生素E，随着公畜的 成长，可以适当增加剂量，至公畜性成熟时即可停止饲喂。饲喂时可 将维生素E粉添加到幼龄公畜日粮的精料中，充分拌匀，分早晚饲喂。
对于公羔而言，维生素E的饲喂量以每天每只80～880IU为宜， 优选为每只每天320IU。
试验表明，公畜从幼龄开始饲喂维生素E，能够增加附睾的重量， 曲细精管的密度，增加附睾直径、生精细胞数量，提早利用公畜，提 高种公畜的繁殖能力和利用年限。
此外，还可以减少工授精中为保持和提高精液品质和精子活力而 进行的繁琐的操作，提高人工授精以及冷冻精液所用的鲜精品质，进 而可提高人工授精以及冷冻精液品质，从源头提高生产效率。本发明 方法简单易行，经济效益显著。
附图说明
图1、维生素E对睾丸组织结构的影响；
图2、维生素E对附睾组织结构的影响；
图3、维生素E对输精管组织结构的影响。
其中，G1、G2、G3和G4分别代表试验的四个组，维生素E添 加量分别为0，80，320和880IU·只-1·天-1。
具体实施方式
下面实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限 制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条 件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
实施例1
本例以公羔为研究对象，说明本发明的方法。
选取同一品系、体重相近、健康的断奶三月龄波尔山羊24只随 机分为4组，其中三组为实验组，1组为对照组，实验组饲喂不同浓 度维生素E日粮，具体如表1所示。
表1 不同组别维生素E的饲喂量
组别 1 2 3 对照组 饲喂量(IU·只-1·天-1) 80 320 880 -------
5个月后(性成熟时)屠宰，取相同侧睾丸进行组织切片制作， 通过显微镜观察精子发育情况。
切片制作过程：取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→ 染色→封固→观察(MOTIC病理图像分析系统)。
具体操作为：
1、取材：将取得的样品用生理盐水冲净后，用刀划几个小口以 让固定液渗入其中，加强固定效果。
2、固定：将处理好的样品放入磷酸盐缓冲溶液中待用。
3、脱水：采用酒精作为脱水剂，从低浓度开始，依次增加其浓 度。浓度和时间分别如表2所示：
表2 酒精的的使用浓度和脱水时间
浓度 50％ 70％ 80％ 85％ 90％ 95％ 100％ 时间 12小时 数分钟 2小时 2小时 2小时 2小时 ＜1小时
注：根据样品情况，时间可以适当变动。
4、透明：先将样品放入酒精和二甲苯1∶1的溶液中30min，再放 入二甲苯中20min。
5、浸蜡：分别再三种不同熔点的蜡中浸40min。
6、包埋：采用石蜡进行包埋，将熔化的石蜡倒入包埋框，然后 用加热的镊子将浸蜡的组织块放入。蜡块凝后，对蜡块进行修整备用。
7、切片：用切片机切取3μm左右的切片。
8、染色：将样品分别按顺序放入二甲苯、酒精二甲苯(1∶1)、 酒精、苏木素、伊红、纯酒精、酒精二甲苯、二甲苯中进行染色。
9、封固：然好的样品上滴上树脂，加上盖玻片。
10、观察：各高度、厚度采用MOTIC病理图像分析系统进行观 察，细胞数目采取在显微镜下人工数10个视野，取平均值。
试验结果见表3-6和图1-3。
表3.生殖器官重量(g)
组别 睾丸 附睾 输精管 对照 试验组1 试验组2 试验组3 90.00±38.00a 145.33±18.67a 146.00±11.02a 140.00±12.22a 7.00±1.00a 18.00±3.06b 20.67±0.67b 12.00±4.16ab 2.00±0.00a 2.00±0.00a 4.00±0.00bc 3.33±0.67c
注：同列字母相间表示差异显著，相隔表示极显著。下同。
表4.睾丸相关指标
组别 指标 生精上皮 厚度(μm) 曲细精管直 径(μm) 密度(单位：个/mm2) 曲细精管 间质细胞 支持细胞 生精细胞 对照 试验组1 试验组2 试验组3 64.67±4.80a 73.79±4.06a 74.27±3.56a 71.78±2.73a 182.98±7.53a 267.03±17.56c 213.76±8.45a 194.73±7.49a 66.96±2.63a 42.58±1.56b 48.09±8.75b 52.50±3.58ab 18.95±3.78a 19.98±2.61a 21.59±3.92a 17.91±6.02a 96.80±4.18ab 92.09±3.36a 92.32±10.09a 115.97±6.08b 782.63±107.00a 1241.23±43.60b 980.12±120.14ab 969.79±102.58ab
表5.附睾相关指标(μm)
组别 指标 附睾壁厚度 附睾管直径 对照 试验组1 试验组2 试验组3 52.92±3.42a 48.35±2.38a 36.71±2.14c 53.22±4.95a 541.48±48.61a 712.92±51.00c 659.92±34.27ac 580.82±42.70ad
表6.输精管指标(μm)
组别 指标 管壁厚度 黏膜厚度 对照 试验组1 试验组2 试验组3 599.40±263.92a 975.16±103.10a 878.57±148.19a 899.81±135.74a 33.58±2.88a 52.79±2.85a 48.98±13.31a 40.19±3.59a
试验结果表明，日粮中添加80和320IU·只-1·天-1的维生素E 能够增加附睾的重量，曲细精管的密度。当添加80IU·只-1·天-1的 维生素时，对曲细精管以及附睾直径、生精细胞数量的影响均好于其 他组。添加320IU·只-1·天-1的维生素E时，对输精管的重量，附睾 壁的厚度的影响好于其他组。添加880IU·只-1·天-1的维生素E时， 与添加量为80和320IU·只-1·天-1试验组相比，各指标有所下降， 但比对照组好。
因此，综合看来，日粮中添加80-800IU·只-1·天-1的维生素E 可以较好的促进公羔性器官发育，促进精子发育。
实施例1
本例以公羔为研究对象，说明本发明的方法。
选取同一品系、体重相近、健康的断奶三月龄波尔山羊24只随 机分为4组，其中三组为实验组，1组为对照组，实验组饲喂不同浓 度维生素E日粮，具体如表1所示。
表1 不同组别维生素E的饲喂量
组别 1 2 3 对照组 饲喂量(IU·只-1·天-1) 80 320 880 -------
5个月后(性成熟时)屠宰，取相同侧睾丸进行组织切片制作， 通过显微镜观察精子发育情况。
切片制作过程：取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→ 染色→封固→观察(MOTIC病理图像分析系统)。
具体操作为：
1、取材：将取得的样品用生理盐水冲净后，用刀划几个小口以 让固定液渗入其中，加强固定效果。
2、固定：将处理好的样品放入磷酸盐缓冲溶液中待用。
3、脱水：采用酒精作为脱水剂，从低浓度开始，依次增加其浓 度。浓度和时间分别如表2所示：
表2 酒精的的使用浓度和脱水时间
浓度 50％ 70％ 80％ 85％ 90％ 95％ 100％ 时间 12小时 数分钟 2小时 2小时 2小时 2小时 ＜1小时
注：根据样品情况，时间可以适当变动。
4、透明：先将样品放入酒精和二甲苯1∶1的溶液中30min，再放 入二甲苯中20min。
5、浸蜡：分别再三种不同熔点的蜡中浸40min。
6、包埋：采用石蜡进行包埋，将熔化的石蜡倒入包埋框，然后 用加热的镊子将浸蜡的组织块放入。蜡块凝后，对蜡块进行修整备用。
7、切片：用切片机切取3μm左右的切片。
8、染色：将样品分别按顺序放入二甲苯、酒精二甲苯(1∶1)、 酒精、苏木素、伊红、纯酒精、酒精二甲苯、二甲苯中进行染色。
9、封固：然好的样品上滴上树脂，加上盖玻片。
10、观察：各高度、厚度采用MOTIC病理图像分析系统进行观 察，细胞数目采取在显微镜下人工数10个视野，取平均值。
试验结果见表3-6和图1-3。
表3.生殖器官重量(g)
组别 睾丸 附睾 输精管 对照 试验组1 试验组2 试验组3 90.00±38.00a 145.33±18.67a 146.00±11.02a 140.00±12.22a 7.00±1.00a 18.00±3.06b 20.67±0.67b 12.00±4.16ab 2.00±0.00a 2.00±0.00a 4.00±0.00bc 3.33±0.67c
注：同列字母相间表示差异显著，相隔表示极显著。下同。
表4.睾丸相关指标
组别 指标 生精上皮 厚度(μm) 曲细精管直 径(μm) 密度(单位：个/mm2) 曲细精管 间质细胞 支持细胞 生精细胞 对照 试验组1 试验组2 试验组3 64.67±4.80a 73.79±4.06a 74.27±3.56a 71.78±2.73a 182.98±7.53a 267.03±17.56c 213.76±8.45a 194.73±7.49a 66.96±2.63a 42.58±1.56b 48.09±8.75b 52.50±3.58ab 18.95±3.78a 19.98±2.61a 21.59±3.92a 17.91±6.02a 96.80±4.18ab 92.09±3.36a 92.32±10.09a 115.97±6.08b 782.63±107.00a 1241.23±43.60b 980.12±120.14ab 969.79±102.58ab
表5.附睾相关指标(μm)
组别 指标 附睾壁厚度 附睾管直径 对照 试验组1 试验组2 试验组3 52.92±3.42a 48.35±2.38a 36.71±2.14c 53.22±4.95a 541.48±48.61a 712.92±51.00c 659.92±34.27ac 580.82±42.70ad
表6.输精管指标(μm)
组别 指标 管壁厚度 黏膜厚度 对照 试验组1 试验组2 试验组3 599.40±263.92a 975.16±103.10a 878.57±148.19a 899.81±135.74a 33.58±2.88a 52.79±2.85a 48.98±13.31a 40.19±3.59a
试验结果表明，日粮中添加80和320IU·只-1·天-1的维生素E 能够增加附睾的重量，曲细精管的密度。当添加80IU·只-1·天-1的 维生素时，对曲细精管以及附睾直径、生精细胞数量的影响均好于其 他组。添加320IU·只-1·天-1的维生素E时，对输精管的重量，附睾 壁的厚度的影响好于其他组。添加880IU·只-1·天-1的维生素E时， 与添加量为80和320IU·只-1·天-1试验组相比，各指标有所下降， 但比对照组好。
因此，综合看来，日粮中添加80-800IU·只-1·天-1的维生素E 可以较好的促进公羔性器官发育，促进精子发育。
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