专利汇可以提供一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,该方法为:将新城疫LaSota株稀释后接种于鸡胚中孵育,收集得到鸡新城 疫苗 鸡胚尿囊液,加甲 醛 溶液灭活处理得到灭活的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液,将 大豆分离蛋白 溶于无菌 水 中,加入海藻酸钠、丙三醇、秋葵多糖和灭活的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液,然后滴加氯化 钙 溶液,用无菌生理盐水洗涤,经预冻、 冷冻干燥 后,得到提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂。本发明中大豆分离蛋白主要起到保护新城疫LaSota株核酸的功能,灭活新城疫LaSota株可以避免活疫苗毒 力 返强、免疫麻痹的 风 险,以及毒株转强的风险,通过秋葵多糖有效包被,有效过胃,使蛋鸡血清中非特异性免疫性显著提高。,下面是一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,该方法为:
S1、将秋葵中加入水a,加热至70℃,保温3h,进行第一次浸提,浸提后用滤布过滤,得到滤液a,向过滤后的秋葵残渣中加入水b再次加热至70℃,保温3h,进行第二次浸提,用滤布过滤,得到滤液b,将滤液a和滤液b混合后,得到总滤液,向总滤液中加入质量分数为95%的乙醇溶液,然后在温度为4℃的条件下静置12h后,在温度为4℃、转速为8000rpm的条件下离心10min~20min,将沉淀物在温度为-20℃的条件下冷冻干燥2h,得到秋葵多糖;
S2、将菌株含量≥4×108.0EID50/0.1mL的新城疫La Sota株稀释10倍后,接种于9~10日龄鸡胚中,每胚的接种量为0.1mL,接种后用蜡烛密封针孔,然后在温度为37℃的条件下孵育48h后,收集得到鸡新城疫苗鸡胚尿囊液;
S3、向S1中得到的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液中加入质量分数为38%~40%的甲醛溶液,至甲醛的质量分数为0.1%时止,在温度为4℃的条件下灭活处理72h,灭活期间振摇3次~4次,得到灭活的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液;
S4、将大豆分离蛋白加入至无菌水中,搅拌溶解后,在温度为60℃的条件下改性30min后,自然冷却至室温,然后加入海藻酸钠和丙三醇,搅拌混合10min后,再加入S1中得到的秋葵多糖和S3中得到的灭活的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液,搅拌混合5min,得到混合液a,向所述混合液a中滴加质量分数为1%的氯化钙溶液固定化30min,然后用无菌生理盐水洗涤3次后,在温度为-20℃的条件下预冻8h~12h,然后在温度为-50℃的条件下冷冻干燥10h,得到提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂。
2.根据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S1中所述秋葵和水a的质量比以及过滤后的秋葵残渣和水b的质量比均为1:10。
3.根据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S1中所述总滤液和质量分数为95%的乙醇溶液的体积比为1:3。
4.根据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S4中所述混合液a中大豆分离蛋白、无菌水、海藻酸钠、丙三醇、秋葵多糖和灭活的鸡新城疫苗鸡胚尿囊液的用量比为4g:100mL:1g:6g:10mL:10mg。
5.根据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S4中所述混合液a和质量分数为1%的氯化钙溶液的体积比为1:1。
6.据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S4中搅拌的速率为150r/min。
7.据权利要求1所述的一种提高蛋鸡非特异性免疫的添加剂的制备方法,其特征在于,S4中滴加的速率为5滴/min~8滴/min。
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