461 |
一种氨基酸缓冲液及血浆游离DNA提取试剂盒 |
CN201910334438.6 |
2019-04-24 |
CN110129314A |
2019-08-16 |
杨芳梅; 张惠贤; 卢德景; 徐红梅 |
本发明公开了一种氨基酸缓冲液及血浆游离DNA提取试剂盒,试剂盒包括如下试剂:裂解液,蛋白酶K工作液,氨基酸吸附缓冲液,洗涤液,TE洗脱液;氨基酸吸附缓冲液包括:80-200mM氨基酸,0.1-0.3M离液盐,5%-15%PEG,0.5-1.2M氯化钠,40-100mM Tris-HCl,20-50mM EDTA,pH 2.1-2.4;本发明通过将氨基酸与低浓度的离液盐结合,控制缓冲液的pH值,提高提取效率;使用PEG降低DNA剪切力损伤,保证DNA的完整性;从而使得血浆游离DNA的提取无抑制剂残留、提取质量高、操作简便、成本低廉。 |
462 |
一种eIF2α的突变体、突变体细胞及制备方法和应用 |
CN202410237067.0 |
2024-03-01 |
CN118290560A |
2024-07-05 |
曾福星; 杜子朔; 杜梦谭 |
本发明提出了一种eIF2α的突变体、突变体细胞及制备方法和应用,以包含SEQ ID NO.1所示的eIF2α的氨基酸序列的质粒为模板,利用引物对进行PCR扩增,得到所述eIF2α的突变体(S52A);再获取所述的瞬时表达eIF2α(S52A)的细胞,离心,根据细胞的鲜重,加入缓冲液重悬,在冰浴环境中破碎细胞,离心,使细胞破碎物沉淀,即得到真核细胞裂解上清液;使蛋白不被磷酸酶磷酸化从而活性不被抑制;优化了现有制备真核细胞裂解上清液的方法;构建一种体外翻译体系,使用瞬时表达eIF2α(S52A)的细胞裂解上清液以提高翻译的活性。 |
463 |
一种α-淀粉酶Amy16及其基因和应用 |
CN201410833881.5 |
2014-12-29 |
CN104560914A |
2015-04-29 |
曾润颖; 周桂兰; 金敏 |
一种α-淀粉酶Amy16及其基因和应用,涉及淀粉酶。所述α-淀粉酶Amy16分离自太平洋火色杆菌H2;α-淀粉酶Amy16的制备:1)克隆α-淀粉酶基因amy16,将α-淀粉酶基因amy16插入表达载体,构建携带α-淀粉酶基因amy16的重组表达载体;将α-淀粉酶基因amy16的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取转化后大肠杆菌BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中裂解,将裂解后的悬液离心,收集上清液;将所得上清液纯化,即得所述α-淀粉酶Amy16。所述α-淀粉酶Amy16可在制备淀粉降解剂中应用。 |
464 |
一种醛脱氢酶及其制备方法 |
CN201310026030.5 |
2013-01-23 |
CN103114056B |
2015-04-22 |
曾润颖; 刘洋; 丁志新 |
一种醛脱氢酶及其制备方法,涉及一种醛脱氢酶。所述醛脱氢酶Fwaldh的生产菌株为太平洋火色杆菌H2。克隆所述醛脱氢酶基因fwaldh;将所述醛脱氢酶基因fwaldh插入表达载体,构建携带所述醛脱氢酶基因fwaldh的重组表达载体;将所述重组表达载体转化到E.coli BL21中;选取转化后E.coli BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的E.coli BL21细胞,重悬所述E.coli BL21细胞于裂解缓冲液中进行裂解;将裂解后的悬液进行离心,收集上清液;将上清液与Ni-NTA Agarose混匀,按照纯化试剂盒说明书进行纯化,得所述醛脱氢酶Fwaldh。 |
465 |
一种可降解孔雀石绿的过氧化物酶及其制备方法 |
CN201410690568.0 |
2014-11-26 |
CN104403969A |
2015-03-11 |
赵晶; 曲武; 王德祥 |
一种可降解孔雀石绿的过氧化物酶及其制备方法,涉及过氧化物酶。嗜中温黏着杆菌HMG1,编号为CGMCC No.9835。克隆过氧化物酶基因peroxidase;将过氧化物酶基因插入表达载体,构建携带氧化物酶基因的重组表达载体;将重组表达载体转化到E.coli BL21中;选取转化后E.coli BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的E.coli BL21细胞,重悬E.coli BL21细胞于裂解缓冲液中进行裂解;将裂解后的悬液进行离心,收集上清液;将上清液与预先与NiSO4结合的R10-Flammable混匀,用浓度梯度咪唑进行洗脱,即得。 |
466 |
一种醛脱氢酶及其制备方法 |
CN201310026030.5 |
2013-01-23 |
CN103114056A |
2013-05-22 |
曾润颖; 刘洋; 丁志新 |
一种醛脱氢酶及其制备方法,涉及一种醛脱氢酶。所述醛脱氢酶Fwaldh的生产菌株为太平洋火色杆菌H2。克隆所述醛脱氢酶基因fwaldh;将所述醛脱氢酶基因fwaldh插入表达载体,构建携带所述醛脱氢酶基因fwaldh的重组表达载体;将所述重组表达载体转化到E.coli BL21中;选取转化后E.coli BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的E.coli BL21细胞,重悬所述E.coli BL21细胞于裂解缓冲液中进行裂解;将裂解后的悬液进行离心,收集上清液;将上清液与Ni-NTA Agarose混匀,按照纯化试剂盒说明书进行纯化,得所述醛脱氢酶Fwaldh。 |
467 |
一种微生物核酸的提取纯化方法及试剂盒 |
CN202010324278.X |
2020-04-22 |
CN113528502A |
2021-10-22 |
崔论 |
本发明涉及核酸提取和纯化技术领域,尤其涉及微生物核酸的提取纯化方法及试剂盒,微生物核酸的提取纯化方法包括提取所需关键试剂的配置及提取纯化操作,试剂盒包括均质管、核酸纯化吸附柱、LA缓冲液、LB缓冲液、蛋白酶K、洗涤缓冲液WB1、洗涤缓冲液WB2及TE缓冲液。本发明提供的方法不需要使用酚氯仿等危化品,且只需要使用一种通用的分离柱及裂解液就可以实现不同核酸物质的提取和核酸产物的纯化。 |
468 |
一种高效率废塑料处理装置 |
CN201921146580.X |
2019-07-19 |
CN210340784U |
2020-04-17 |
王中慧; 卢欢亮 |
本实用新型是一种高效率废塑料处理装置,包括依次连接的预熔融罐、裂解釜、催化塔、冷凝塔,所述冷凝塔通过气体管道依次与净化器、缓冲罐、燃烧炉连接,所述冷凝塔通过液体管道与储油罐连接,所述缓冲罐通过液体管道与储油罐连接,所述燃烧炉与裂解釜通过气体管道连接,所述燃烧炉与鼓风机入口连接,所述鼓风机出口同时与所述裂解釜和所述催化塔连接。本实用新型依次设置有高温预熔融、高压高温裂解、催化裂解,塑料的分解效果大幅提高,而且分解获得的裂解气能够循环使用,不仅降低了能耗,而且清洁环保,有助于体系的持续稳定运行。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利 |
469 |
一种基于微流控芯片的单细胞内涵物的分析方法 |
CN02144772.1 |
2002-12-13 |
CN100497653C |
2009-06-10 |
盖宏伟; 刘晓君; 戴忠鹏; 马银法; 林炳承 |
一种基于微流控芯片的单细胞内涵物的分析方法,其特征在于;整个过程在一芯片平台上进行:首先将细胞池和细胞废液池分别加电压和接地,在电动力的驱动下,细胞由细胞池流向细胞废液池,在显微镜观察下,当单个细胞到达检测通道的入口时,将细胞池和细胞废液池电极悬浮;与此同时将运行缓冲液池、细胞裂解液池加高电压,废液池接地;在该种电压模式下,保障细胞、细胞裂解液、筛分剂、运行缓冲液并行进入检测通道,完成单细胞的裂解,分离;在检测通道的两端对内涵物进行检测。本发明既可以单独分析单个细胞内的核酸、蛋白质、氨基酸、糖及其它物质,也可以并行分析上述物质,同时该方法具有相当的通量,克服了毛细管电泳技术耗时长的问题。 |
470 |
一种基于微流控芯片的单细胞内涵物的分析方法 |
CN02144772.1 |
2002-12-13 |
CN1508261A |
2004-06-30 |
盖宏伟; 刘晓君; 戴忠鹏; 马银法; 林炳承 |
一种基于微流控芯片的单细胞内涵物的分析方法,其特征在于:整个过程在一芯片平台上进行:首先将细胞池和细胞废液池分别加电压和接地,在电动力的驱动下,细胞由细胞池流向细胞废液池,在显微镜观察下,当单个细胞到达检测通道的出口时,将细胞池和细胞废液池电极悬浮;与此同时将运行缓冲液池、细胞裂解液池加高电压,废液池接地:在该种电压模式下,保障细胞、细胞裂解液、筛分剂、运行缓冲液并行进入分离通道,完成单细胞的裂解,分离;在通道的两端对内涵物进行检测。本发明既可以单独分析单个细胞内的核酸、蛋白质、氨基酸、糖及其它物质,也可以并行分析上述物质,同时该方法具有相当的通量,克服了毛细管电泳技术耗时长的问题。 |
471 |
一种精子质量评估的试剂盒及其使用方法 |
CN201610147268.7 |
2016-03-16 |
CN105717307A |
2016-06-29 |
马芳; 潘倩; 徐晨 |
本发明提供了一种精子质量评估的试剂盒及其使用方法。所述的试剂盒包括不含酶活抑制剂的细胞裂解液、检测缓冲液1、蛋白酶抑制剂cocktail、试剂A液、试剂B液、牛血清白蛋白、荧光试剂、唾液酸酶标准原液和检测缓冲液2;所述的检测缓冲液1为磷酸缓冲液或者BWW培养液;所述的试剂A液为:1%BCA二钠盐,2%无水碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠,0.95%碳酸氢钠,混合调pH值至11.2?11.3;所述的试剂B液为:4%硫酸铜;所述的检测缓冲液2为含0.05 mmol/l 乙酸钠和0.25μg/μl牛血清白蛋白的磷酸缓冲液。通过精子中唾液酸酶活性的检测,为临床原因不明的男性不育患者提供诊断依据及临床咨询。 |
472 |
一种酶制剂产生的硫酸铵废液回收处理系统 |
CN202410536166.9 |
2024-04-30 |
CN118255379A |
2024-06-28 |
刘艺萍; 马潋; 刘阳; 蔡应婷; 张慧梅; 林羽 |
本发明公开了一种酶制剂产生的硫酸铵废液回收处理系统,包括硫酸铵废液罐,硫酸铵废液罐与蒸发器相连,蒸发器与反应釜相连,反应釜的顶端设置有氨气收集管,氨气收集管与液体补集器相连,液体补集器连接氨气缓冲罐,氨气缓冲罐通过氨气阀与硫酸铵反应器相连,硫酸铵反应器为两段设计,第一反应塔与减压蒸发釜相连,减压蒸发釜的出液管与养晶槽以及盐析工序相连,反应釜与压滤机相连,压滤机与蒸发器进口相连,压滤机的固体进入烘干系统烘干,然后通过进料系统进入高温无氧裂解炉,高温无氧裂解炉的裂解气出口与燃烧炉相连。能实现酶制剂硫酸铵废液的回收处理,同时副产硫酸铵和硫酸钙,设备投入小。真正实现废液零排放和资源化再利用。 |
473 |
一种提高病毒核酸检测灵敏度的样本保存液及其制备方法 |
CN202110730255.3 |
2021-06-29 |
CN113462750B |
2024-08-27 |
张锋; 吴金荣 |
本申请涉及医学分子检测领域,更具体地说,它涉及一种提高病毒核酸检测灵敏度的样本保存液及其制备方法,其中样本保存液包括如下浓度范围成分的缓冲溶液:胍盐裂解剂:3~6 M;金属离子络合剂:0.1~1 mM;外源非特异RNA:10~200 ng/L;二硫键还原剂:5~50 mM;缓冲溶液的浓度为6~10 mM,该保存液的pH值为7.0~8.0。该样本保存液的制备方法如下:称取胍盐裂解剂和金属离子络合剂,溶解于水中,再依次加入二硫键还原剂、非离子表面活性剂,再加入缓冲对离子配置成缓冲溶液,并调节pH值为7.0~8.0,随后加入酵母RNA并定容,混合均匀后得到样本保存液。在本申请中,通过添加酵母RNA,可以提高样本对RNAase的耐受性,进而提高样本的保存效果。 |
474 |
一种提高病毒核酸检测灵敏度的样本保存液及其制备方法 |
CN202110730255.3 |
2021-06-29 |
CN113462750A |
2021-10-01 |
张锋; 吴金荣 |
本申请涉及医学分子检测领域,更具体地说,它涉及一种提高病毒核酸检测灵敏度的样本保存液及其制备方法,其中样本保存液包括如下浓度范围成分的缓冲溶液:胍盐裂解剂:3~6 M;金属离子络合剂:0.1~1 mM;外源非特异RNA:10~200 ng/L;二硫键还原剂:5~50 mM;缓冲溶液的浓度为6~10 mM,该保存液的pH值为7.0~8.0。该样本保存液的制备方法如下:称取胍盐裂解剂和金属离子络合剂,溶解于水中,再依次加入二硫键还原剂、非离子表面活性剂,再加入缓冲对离子配置成缓冲溶液,并调节pH值为7.0~8.0,随后加入酵母RNA并定容,混合均匀后得到样本保存液。在本申请中,通过添加酵母RNA,可以提高样本对RNAase的耐受性,进而提高样本的保存效果。 |
475 |
牙鲆红细胞外膜蛋白的制备方法 |
CN200910010092.0 |
2009-01-13 |
CN101463071A |
2009-06-24 |
张振冬; 王淑芬; 邹亚男; 张伟 |
牙鲆红细胞外膜蛋白的制备方法。从牙鲆的尾静脉取血,采用阿氏抗凝剂与牙鲆外周血混合;将其用PBS缓冲液稀释并与分离液混合,于4℃条件离心,将底层的红细胞沉淀用PBS缓冲液4℃离心洗涤以去除上清液。加入低渗缓冲液,置于4℃下使红细胞充分溶胀破膜。4℃条件下离心收集牙鲆红细胞膜沉淀。加入低渗缓冲液,用漩涡混合器将红细胞膜沉淀打散,4℃条件下离心洗涤红细胞膜沉淀。加入膜蛋白裂解液,搅拌以充分裂解牙鲆红细胞膜,4℃下离心,上清即为牙鲆红细胞膜蛋白提取液。分装后于-80℃冰箱中保存。本发明的方法与现有技术相比更为简单,效率更好,既保证了膜蛋白制备的高效性,又保持了膜蛋白的生物活性。 |
476 |
一种精子质量评估的试剂盒及其使用方法 |
CN201610147268.7 |
2016-03-16 |
CN105717307B |
2017-07-04 |
马芳; 潘倩; 徐晨 |
本发明提供了一种精子质量评估的试剂盒及其使用方法。所述的试剂盒包括不含酶活抑制剂的细胞裂解液、检测缓冲液1、蛋白酶抑制剂cocktail、试剂A液、试剂B液、牛血清白蛋白、荧光试剂、唾液酸酶标准原液和检测缓冲液2;所述的检测缓冲液1为磷酸缓冲液或者BWW培养液;所述的试剂A液为:1%BCA二钠盐,2%无水碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠,0.95%碳酸氢钠,混合调pH值至11.2‑11.3;所述的试剂B液为:4%硫酸铜;所述的检测缓冲液2为含0.05mmol/l乙酸钠和0.25μg/μl牛血清白蛋白的磷酸缓冲液。通过精子中唾液酸酶活性的检测,为临床原因不明的男性不育患者提供诊断依据及临床咨询。 |
477 |
一种用于基因组提取的常温保存的裂解结合液及试剂盒 |
CN202110375814.3 |
2021-04-08 |
CN112813062B |
2022-09-30 |
潘超; 杨小岚; 宋建军 |
本发明公开了一种用于基因组提取的常温保存的裂解结合液及试剂盒。所述裂解结合液在钠离子含量大于或等于140mM小于等于300mM的pH值在7至9的缓冲液中含有2.5mol/L至3.5mol/L离液剂、5mM至20mM的金属螯合剂、1%至3%的非离子表面活性剂、质量分数在5%至10%的聚乙二醇,以及1至5mg/mL的聚丙烯酰胺。所述试剂盒包括所述的裂解结合液。本发明在裂解结合液的配方中,通过增加少量聚丙烯酰胺,提高其疏水性,帮助DNA析出,从而显著降低胍盐和聚乙二醇的使用量,在高盐配方下整体稳定,常温下流动性较好,取用方便,4℃长期保存(一年以上)未见析出结晶,性质稳定可靠。 |
478 |
快速提取线粒体DNA的方法及其应用与相关试剂盒 |
CN201610246606.2 |
2016-04-20 |
CN105779440A |
2016-07-20 |
艾南平; 魏彦刚 |
本发明涉及快速提取线粒体DNA的方法及其应用与相关试剂盒,所述方法包括:将组织样品或去除红细胞后的血液样品进行分散;在分散后的细胞样品中加入裂解缓冲液,裂解缓冲液为包含Tris?HCl及TritonX?100的水溶液,Tris?HCl的摩尔浓度为19~21mM,其pH为8.7~8.9;TritonX?100的体积浓度为0.09~0.11%;或为包含Tris?HCl及SDS的水溶液,该Tris?HCl的摩尔浓度为19~21mM,其pH为8.7~8.9;SDS的质量浓度为0.09%~0.11%;分离上清液,提取得到样品的线粒体DNA。采用本发明所述方法可短时间内获得可作为扩增模板的线粒体DNA。 |
479 |
一种磁珠法水体病毒核酸富集提取试剂盒及其制备方法 |
CN202311267910.1 |
2023-09-28 |
CN117384897A |
2024-01-12 |
许锦涛; 黄庚锐; 谭杰峰 |
本发明公开了一种磁珠法水体病毒提取试剂盒及其制备方法,磁珠法水体病毒提取试剂盒的主要成分为:微孔滤膜、蛋白酶K液、磁珠液、裂解液、结合液、洗涤液1、洗涤液2和洗脱液,所述裂解液由离液盐、非离子表面活性剂、缓冲盐、阴离子表面活性剂及离子螯合剂组成,所述结合液由醇类组成,所述洗涤液1由离液盐、非离子表面活性剂、缓冲盐及醇类组成,所述洗涤液2由缓冲盐及醇类组成。本发明通过为方便实验人员进行各种水样样本取样提取检测工作,研制出一款核酸回收率高、操作简易的污水病毒核酸提取试剂,同时满足自动化提取仪提取,对于前处理操作不需要加入絮凝剂聚乙二醇与无机絮凝剂铝盐,易于储存和运输。 |
480 |
一种提取植物DNA的方法 |
CN202310226741.0 |
2023-03-10 |
CN116042606A |
2023-05-02 |
梁婷婷; 董亚晨 |
本发明公开了一种提取植物DNA的方法。所述方法包括:将研磨后的植物组织样品与裂解缓冲液混合,加热孵育,离心获取上清液,将所述上清液与沉淀液混合低温处理,再次离心获取最终上清液,进行分离纯化处理,得到DNA,所述裂解缓冲液含有:醋酸盐、乙二胺四乙酸二钠、十二烷基硫酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和氯化钠。本发明的方法提取获得的DNA满足三代测序平台对DNA质量的要求,该方法提取的DNA可以获得较多大片段、纯度和核酸总量都较高,此方法具有成本低、步骤简单、安全高效等优点,适合大规模的推广和应用。 |